专利名称：一种治疗老年痴呆的中药注射用微球及其制备方法
技术领域：
本发明属于医药领域，具体涉及一种老年痴呆的中药缓释注射用微球及其制备方法。
背景技术：
痴呆是常见的老年病，也是当今医药界公认的难治病，据世界卫生组织报道，65岁以上的老年人中，有10％的人智能发生障碍，而其中60％的人发生痴呆，而且随着年龄的增高，其痴呆发病率呈大幅度上升的趋势。老年期所发生的痴呆，根据症状发展的快慢可分慢性和急性两大类慢性痴呆约占老年期痴呆的80％左右，又称为老年慢性脑症候群。它包括老年性痴呆、血管性痴呆和两者同时存在的混合性痴呆。另外还有一些少见的痴呆，如亚急性海绵状脑病，帕金森氏病等。急性痴呆又称为老年急性脑症候群，约占全部痴呆的20％左右。这类痴呆多继发于全身代谢紊乱、疾病和药物中毒及外伤等。引起痴呆的病因有许多，其中最主要原因有两种——阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆(VD)。血管性痴呆主要是由脑血管病所致的痴呆。
临床上，发明人发现由川芎、白芍、丹参、苍术等组成的处方具有很好地治疗治疗痴呆病，慢性痴呆、血管性痴呆病，老年痴呆，阿尔茨海默病，慢性脑功能不全综合征，学习和记忆能力障碍，脑血栓、脑动脉硬化、脑创伤、脑卒中、脑炎引起的意识障碍等疾病的效果。但由于普通的制剂，使得其中的活性成分面临着一系列的问题，如临床给药次数频繁，使用不方便，患者的顺应性(compliance)差等。
发明内容
本发明目的在于提供了一种全新的缓释、高生物利用度的注射用中药微球。
本发明的另一目的在于提供了这种注射用微球的制备方法。
本发明所述的药物组合物的组方为(以重量百分含量计)黄芪8.5-25.5份、丹参8.5-25.5份、川芎5-15份、苍术5-15份、石菖蒲5-15份、黄连1.5-7.5份、冰片0.01-0.8份；优选为(以重量百分含量计)黄芪12-20份、丹参12-20份、川芎7-12份、苍术7-12份、石菖蒲7-12份、黄连2-5份、冰片0.03-0.08份；最佳为(以重量百分含量计)黄芪16.7份、丹参16.7份、川芎10份、苍术10份、石菖蒲10份、黄连3.3份、冰片0.0667份。
上述药物处方配比为所使用生药的重量配比，如果将其制成制剂需要对所述药材进一步加工与适当辅料制成缓释微球。
其中可以选择将黄芪、丹参、川芎和黄连等药材的单独或混合提取加工制成提取物其中的提取方法选自(但并不限于此)水提醇沉法、超临界萃取法等。
为了便于理解，现将川芎、丹参、黄连三味药材的提取方法举例描述如下，但并不限于此。
黄芪醇提取法取黄芪药材，粉碎，加醇回流，收集回流液，回收醇，浓缩得黄芪提取物。
黄芪微波提取法取黄芪粉碎后，放入烧瓶，并将此烧瓶放入微波反应器中，乙醇回流提取，调整微波功率进行提取，收集提取液，得黄芪提取物。
川芎乙醇加树脂法取川芎饮片，粉碎，乙醇于索氏回流提取装置中回流提取，抽滤，抽滤液减压浓缩至干，再加适量水，加热使溶解，滤过，滤液加到已处理好的大孔树脂柱上，先用水洗脱，再用乙醇洗脱，回收乙醇后，继续浓缩得川芎提取物。
川芎乙醇提取法取川芎药材，适当粉碎，加乙醇提取若干次，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩得川芎提取物。
丹参水提法取丹参药材，20目筛粉碎，加水提取2次，第一次加9～10倍量的水浸泡，加热提取1.5小时，第二次加5～7倍量水，加热提取1小时，合并提取液，适当浓缩，加95％乙醇，使含醇量到达50％～70％，浓缩回收乙醇，得丹参提取物。
丹参醇提取法取丹参药材，20目筛粉碎，7～9倍量70％乙醇加热回流提取2次，每次1小时，合并提取液，浓缩得丹参提取物。
丹参有效部位的提取取丹参药材，20目筛粉碎，水或乙醇提取，浓缩，加乙醇沉淀，回收乙醇后加水溶解，上大孔树脂色谱柱进行分离，水洗脱除去杂质后，乙醇洗脱至有效成分完全为止，回收乙醇，得干燥的丹参提取物。
黄连醇提取法取黄连中药材，切碎，放入圆底烧瓶中，加入乙醇，回流提取，回收乙醇，继续浓缩得到黄连提取物。
优选提取方法为黄芪与丹参加水回流提取；川芎、苍术、石菖蒲加水提取挥发油，药渣再用水提取再与前述黄芪、丹参提取所得的提取液混合，浓缩后醇沉两次，回收乙醇，得提取物；黄连单独提取；冰片粉碎。
具体为(1)黄芪、丹参加6-14倍量水，回流提取1-4次，每次0.5-3小时，提取液滤过，备用；川芎、苍术、石菖蒲加6-14倍量水用挥发油提取器提取挥发油4-12小时，挥发油备用，滤出水提液，药渣再加6-14倍量水提取0.5-3小时，合并水提液，滤过与黄芪丹参提取液合并减压浓缩至1ml约等于0.5-3g生药，放凉，加入86-99％乙醇，使醇浓度为70-85％，静置过夜后，滤过，回收乙醇至1ml约等于1-5g生药，加入86-99％乙醇，使醇浓度为70-85％，静置过夜后，滤过，回收乙醇，在40-80℃条件下浓缩出膏，至相对密度1.10～1.45；(2)黄连加4-12倍量50-95％乙醇回流提取1-4次，每次1-4小时，合并提取液，滤过，回收乙醇至1ml约为0.1-0.5g生药，加入浓盐酸调PH1～2，0-8℃冷藏过夜，滤过，滤饼用蒸馏水多次洗涤，60-90℃烘干，粉碎，过80目筛，冰片粉碎，过80目筛。
优选的提取方法为(1)黄芪、丹参加8-12倍量水，回流提取1-3次，每次1-2小时，提取液滤过，备用；川芎、苍术、石菖蒲加8-12倍量水用挥发油提取器提取挥发油6-10小时，挥发油备用，滤出水提液，药渣再加8-12倍量水提取1-2小时，合并水提液，滤过与黄芪丹参提取液合并减压浓缩至1ml约等于0.8-1.5g生药，放凉，加入90-96％乙醇，使醇浓度为75-83％，静置过夜后，滤过，回收乙醇至1ml约等于2-4g生药，加入90-96％乙醇，使醇浓度为75-83％，静置过夜后，滤过，回收乙醇，在55-65℃条件下浓缩出膏，至相对密度1.20～l.35；(2)黄连加6-10倍量70-80％乙醇回流提取两次，每次1-3小时，合并提取液，滤过，回收乙醇至1ml约为0.2-0.4g生药，加入浓盐酸调PH1～2，3-6℃冷藏过夜，滤过，滤饼用蒸馏水多次洗涤，75-85℃烘干，粉碎，过80目筛，冰片粉碎，过80目筛。
最佳的提取方法为(1)黄芪、丹参加10倍量水，回流提取2次，每次1.5小时，提取液滤过，备用；川芎、苍术、石菖蒲加10倍量水用挥发油提取器提取挥发油8小时，挥发油备用，滤出水提液，药渣再加10倍量水提取1.5小时，合并水提液，滤过与黄芪丹参提取液合并减压浓缩至1ml约等于1g生药，放凉，加入95％乙醇，使醇浓度为60％，静置过夜后，滤过，回收乙醇至1ml约等于3g生药，加入95％乙醇，使醇浓度为80％，静置过夜后，滤过，回收乙醇，浓缩出膏，在60℃条件下至相对密度1.25～1.33；(2)黄连加8倍量75％乙醇回流提取两次，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇至1ml约为0.3g生药，加入浓盐酸调PH1～2，5℃冷藏过夜，滤过，滤饼用蒸馏水多次洗涤，80℃烘干，粉碎，过80目筛，冰片粉碎，过80目筛。
本发明所述注射用微球直径为1～250μm，由微球总重量0.2％～50％(w/w)的活性成分及其衍生物和微球总重量50～99.8％(w/w)的分子量在5000～1000000道尔顿的可生物降解的高分子药用辅料组成。其中所述的可生物降解的高分子药用辅料选自于聚丙交酯、乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羟基丁酸酯、聚乳酸-聚羟乙酸、聚乳酸。乙醇酸、聚邻酯、聚内酯、聚酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物、聚乙醇酸、聚丙烯葡聚糖、羟基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸。聚乙二醇其中的一种；优选聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乳酸。聚羟乙酸、聚乳酸。乙醇酸、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物，最佳为聚丙交酯、乙交酯，分子量为12000～15000道尔顿；丙交酯-乙交酯的聚合比例为40∶60-60∶40。
本发明所述的微球可以采用微球的常规制备方法制得，如采用乳化分散法、喷雾干燥法和溶剂挥发法，优选喷雾干燥法。当用乳化分散法制备本发明的微球时，用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸以及由它们所组成的混合酸把石杉碱甲或其衍生物和可生物降解的药用辅料溶解配制成有机相，其中药用辅料在有机溶剂中的重量体积百分数为1～30％，有机相采用的乳化剂为HBL＝4.5～6.0的非离子型乳化剂，用量为有机相的0.01-12％；另外用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠水溶液配制连续水相，其中它们在水相中的重量百分数为0.01～10.0％，水相中的乳化剂为HLB＝14.0～15.5的非离子型乳化剂，用量为水相的0.01～12％；有机相与水相的体积比为1∶4～100；将有机相通过细管慢慢注入到连续相中，充分乳化后，过筛分离所形成的微球，干燥即得。当采用溶剂挥发法时，是在分散相通过细管慢慢注入到连续相中充分乳化后，减压挥发溶剂，离心分离得到所形成的微球，干燥即得。
当采用喷雾干燥法制备微球时，是用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸以及由它们所组成的混合酸把中药提取物和可生物降解的药用辅料充分溶解配制成有机溶液；过滤，喷雾干燥制成微球。
本发明所述的微球是将制好的微球无菌粉末先在无菌的0.9％的生理盐水溶剂中混悬，均匀后肌注来给药的。
祖国医学中对丸剂有“丸者缓也，舒缓而治之……”的记载(李杲，1180-1251)。可见我国古代医药家早已认识到并应用了药剂学方法，来达到平稳持久疗效的目的。
传统剂型，大多数的释药过程均按一级动力学进行，其药物的血药浓度有可能低于最低有效血药浓度和在治疗浓度内维持时间短的缺点。为达到治疗目的和降低副作用常采取多次服药方式，这样使得患者服药的依从性下降。缓释制剂正是克服了传统制剂的不足，提供了平稳、持久的血药浓度。
本发明中药微球采用了西药缓释制剂的设计原理在辅料选择、质量评价等方面取得了成果，为中药缓释制剂的研究借鉴。
以下通过体外释放试验说明微球的有益效果实验样品根据本发明实施例1、2、3所述的方法制备的微球。
实验试剂一定PH值的缓冲溶液(4.0、5.5)。
实验仪器恒温振荡器、离心机。
实验条件温度37±10℃；转速30rp/分钟。
实验方法精密称取实验样品约10mg置于容积为15ml的具盖塑料离心管中，加5ml释放介质(PH＝4.0和5.5磷酸缓冲溶液)置于恒温振荡器中，保持一定的温度和转速按时取样。
取样方法3600转条件下离心50min，精取3ml溶液，再补加3ml的释放介质，取出液用HPLC检测。具体检测指标为丹参素，检测波长281nm。
取样时间点(天)0、1、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20。
试验结果控释微球体外释放试验结果表1。
表1、微球中丹参素体外释放结果
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，下述该实施例仅用于说明本发明而对本发明没有限制。
实施例1取下列药材黄芪16.7g，丹参16.7g，川芎10g，苍术10g，石菖蒲10g，黄连3.3g，冰片0.0667g；取黄芪、丹参加10倍量水，回流提取2次，每次1.5小时，提取液滤过，备用；川芎、苍术、石菖蒲加10倍量水用挥发油提取器提取挥发油8小时，挥发油备用，滤出水提液，药渣再加10倍量水提取1.5小时，合并水提液，滤过与黄芪丹参提取液合并减压浓缩至1ml约等于1g生药，放凉，加入95％乙醇，使醇浓度为60％，静置过夜后，滤过，回收乙醇至1ml约等于3g生药，加入95％乙醇，使醇浓度为70％，静置过夜后，滤过，回收乙醇，浓缩出膏，在60℃条件下浓缩至相对密度1.25～1.33；黄连加10倍量75％乙醇回流提取两次，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇至1ml约为0.3g生药，加入浓盐酸调PH1～2，5℃冷藏过夜，滤过，滤饼用蒸馏水多次洗涤，80℃烘干，粉碎，过80目筛，冰片粉碎，过80目筛；微球的制备将上述100mg提取物、200mg聚丙交酯-乙交酯溶于3ml二氯甲烷中，用针筒在激烈搅拌下将其滴至装有300ml内含3.5Ghlb＝14乳化剂的10％PVA的三颈瓶中，充分乳化1小时后，在30℃0.03MPa的压力下，挥发溶剂1.5小时，离心分离，用蒸馏水洗反应物三次，在30℃真空烘箱内烘干，用环氧乙烷在30℃灭菌48小时，确保残留环氧乙烷含量在5ppm以下，灌装。
实施例2取下列药材，黄芪16.7g，丹参16.7g，川芎10g，苍术10g，石菖蒲10g，黄连3.3g，冰片0.0667g；黄芪、丹参加10倍量水，回流提取2次，每次1.5小时，提取液滤过，备用；川芎、苍术、石菖蒲加10倍量水用挥发油提取器提取挥发油8小时，挥发油备用，滤出水提液，药渣再加10倍量水提取1.5小时，合并水提液，滤过与黄芪丹参提取液合并减压浓缩至1ml约等于1g生药，放凉，加入95％乙醇，使醇浓度为60％，静置过夜后，滤过，回收乙醇至1ml约等于3g生药，加入95％乙醇，使醇浓度为70％，静置过夜后，滤过，回收乙醇，浓缩出膏，在60℃条件下浓缩至相对密度1.25～1.33；黄连加10倍量75％乙醇回流提取两次，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇至1ml约为0.3g生药，加入浓盐酸调PH1～2，5℃冷藏过夜，滤过，滤饼用蒸馏水多次洗涤，80℃烘干，粉碎，过80目筛，冰片粉碎，过80目筛；将川芎、苍术、石菖蒲混合挥发油加入黄连提取物，水浴加热使溶解，加入黄芪等混合浸膏，及冰片细粉，在80～85℃化料均匀，制成本发明的活性成分；微球的制备将上述100mg提取物、200mg聚丙交酯-乙交酯溶于3ml二氯甲烷中，用针筒在激烈搅拌下将其滴至装有300ml内含3.5Ghlb＝14乳化剂的10％PVA的三颈瓶中，充分乳化1小时后，在30℃0.03MPa的压力下，挥发溶剂1.5小时，离心分离，用蒸馏水洗反应物三次，在30℃真空烘箱内烘干，用环氧乙烷在30℃灭菌48小时，确保残留环氧乙烷含量在5ppm以下，灌装。
实施例3取下列药材，黄芪25.5g，丹参25.5g，川芎15g，苍术15g，石菖蒲15g，黄连7.5g，冰片0.8g；取黄芪、丹参加14倍量水，回流提取2次，每次3小时，提取液滤过，备用；川芎、苍术、石菖蒲加12倍量水用挥发油提取器提取挥发油12小时，挥发油备用，滤出水提液，药渣再加12倍量水提取3小时，合并水提液，滤过与黄芪丹参提取液合并减压浓缩至1ml约等于1.5g生药，放凉，加入98％乙醇，使醇浓度为60％，静置过夜后，滤过，回收乙醇至1ml约等于4g生药，加入95％乙醇，使醇浓度为70％，静置过夜后，滤过，回收乙醇，浓缩出膏，在60℃条件下浓缩至相对密度1.10～1.45；黄连加12倍量95％乙醇回流提取两次，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇至1ml约为0.5g生药，加入浓盐酸调PH1～2，8℃冷藏过夜，滤过，滤饼用蒸馏水多次洗涤，70℃烘干，粉碎，过80目筛，冰片粉碎，过80目筛；将川芎、苍术、石菖蒲混合挥发油加入黄连提取物，水浴加热使溶解，加入黄芪等混合浸膏，及冰片细粉，在60～90℃化料均匀，制成本发明的活性成分；微球的制备称取上述得到的提取物100mg，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50)，2.0g于小烧杯中，加二氯甲烷31.5ml，电磁搅拌至充分溶解，用微孔滤膜过滤，采用喷雾干燥法制备微球，测得粒径5～80gm，灭菌，分装。
实施例4取下列药材，黄芪8.5g，丹参8.5g，川芎5g，苍术5g，石菖蒲5g，黄连2g，冰片0.01g；取黄芪、丹参加8倍量水，回流提取2次，每次2小时，提取液滤过，备用；川芎、苍术、石菖蒲加8倍量水用挥发油提取器提取挥发油4小时，挥发油备用，滤出水提液，药渣再加10倍量水提取2小时，合并水提液，滤过与黄芪丹参提取液合并减压浓缩至1ml约等于0.5g生药，放凉，加入90％乙醇，使醇浓度为60％，静置过夜后，滤过，回收乙醇至1ml约等于3g生药，加入95％乙醇，使醇浓度为80％，静置过夜后，滤过，回收乙醇，浓缩出膏，在60℃条件下浓缩至相对密度1.25～1.33；黄连加8倍量90％乙醇回流提取两次，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇至1ml约为0.2g生药，加入浓盐酸调PH1～2，0℃冷藏过夜，滤过，滤饼用蒸馏水多次洗涤，80℃烘干，粉碎，过80目筛，冰片粉碎，过80目筛；取川芎、苍术、石菖蒲混合挥发油加入黄连提取物，水浴加热使溶解，加入黄芪等混合浸膏，及冰片细粉，在80～85℃化料均匀，制成本发明的活性成分；微球的制备称取取上述的提取物共100mg(比例为1∶1)，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝60∶40)，4.0g于小烧杯中，加二氯甲烷41ml，电磁搅拌至充分溶解，采用喷雾干燥法制备微球，测得粒径1～50μm，平均粒径13.26μm，灭菌，分装。
权利要求
1.一种含有当归缓释微球，包括0.2～50％的由中药材的提取物为活性成分和微球重量的50～99.8％的分子量范围在5,000～1,000,000之间的可生物降解的药用高分子辅料组成，其中药材的组成按重量配比为黄芪8.5-25.5份、丹参8.5-25.5份、川芎5-15份、苍术5-15份、石菖蒲5-15份、黄连1.5-7.5份、冰片0.01-0.8份。
2.权利要求1所述的微球，其中所述的药用高分子辅料选自于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羟基丁酸酯、聚乳酸-聚羟乙酸、聚乳酸.乙醇酸、聚邻酯、聚内酯、聚酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物、聚乙醇酸、聚丙烯葡聚糖、羟基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸.聚乙二醇其中的一种或其中的两种或两种以上混合。
3.权利要求1所述的微球，其中所述的药用高分子辅料选自于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乳酸.聚羟乙酸、聚乳酸-乙醇酸、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物其中的一种或其中的两种或两种以上的混合。
4.权利要求1所述的微球，其中药用高分子辅料为聚丙交酯-乙交酯。
5.权利要求1所述的微球，其中所述聚丙交酯-乙交酯其分子量在12000～15000道尔顿之间。
6.权利要求1所述的微球，其中聚丙交酯-乙交酯中丙交酯和乙交酯聚合比例在40∶60～60∶40之间。
7.权利要求1所述的微球，其中的活性成分原药材的重量百分含量为黄芪12-20份、丹参12-20份、川芎7-12份、苍术7-12份、石菖蒲7-12份、黄连2-5份、冰片0.03-0.08份。
8.权利要求1所述的微球，其中的活性成分原药材的重量百分含量为黄芪16.7份、丹参16.7份、川芎10份、苍术10份、石菖蒲10份、黄连3.3份、冰片0.0667份。
9.权利要求1所述微球的制备方法，它是采用乳化分散法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸以及由它们所组成的混合酸把药材提取物和可生物降解的药用辅料溶解，其中药用辅料在有机溶剂中的重量体积百分数为1～30％，有机相采用的乳化剂为HLB＝4.5～6.0的非离子型乳化剂，用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、用量为有机相的0.01～12％；另外聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠水溶液，配制连续水相，其中它们在水相中的重量百分数为0.01～10.0，水相中的乳化剂为HLB＝14.0～15.5的非离子型乳化剂，用量为水相的0.01～12％；将分散相通过细管慢慢注入到连续相中，乳化，然后过筛，干燥即得。
10.权利要求1所述微球的制备方法，它是采用溶剂挥发法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸以及由它们所组成的混合酸把药材提取物和可生物降解的药用辅料溶解，其中药用辅料在有机溶剂中的重量体积百分数为1～30％，有机相采用的乳化剂为HLB＝4.5～6.0的非离子型乳化剂，用量为有机相的0.01～12％；另外用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠水溶液，配制连续水相，其中它们在水相中的重量百分数为0.01～10.0，水相中的乳化剂为HLB＝14.0～15.5的非离子型乳化剂，用量为水相的0.01～12％；将分散相通过细管慢慢注入到连续相中，充分乳化，然后减压挥发溶剂，离心分离，干燥即得。
11.权利要求1所述微球的制备方法，它是采用喷雾干燥法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸以及由它们所组成的混合酸溶解0.2～50％药材提取物及其衍生物和50～99.8％的分子量在5000～1000000道尔顿的可生物降解的高分子药用辅料，搅拌充分溶解后，过滤，采用喷雾干燥法制得微球。
全文摘要
本发明公开了一种注射用微球，包括黄芪8.5－25.5份、丹参8.5－25.5份、川芎5－15份、苍术5－15份、石菖蒲5－15份、黄连1.5－7.5份、冰片0.01－0.8份为活性成分和微球重量的50～99.8％的分子量范围在5,000～1,000,000之间的可生物降解的药用高分子辅料组成，本发明还公开了其制备方法。
文档编号A61P25/00GK1872251SQ20051001369
公开日2006年12月6日 申请日期2005年6月3日 优先权日2005年6月3日
发明者郑永锋, 范立君 申请人:天津天士力制药股份有限公司