专利名称：含有总红花黄色素的红花提取物的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种红花提取物的制备方法，具体地说，是含有总红花黄色素的红花提取物及其制备方法，以及含有该提取物的药物组合物及其应用。
背景技术：
中药红花为菊科植物Carthamus tinctorius L.的干燥花，是传统的活血化瘀药，具有活血化瘀、通经止痛的功效，临床上利用红花或含红花的方剂治疗冠心病、心绞痛等诸多血液循环障碍疾病有很好疗效，同时，总红花黄色素因具有很好的着色能力很强的稳定性，作为食用色素而广泛应用。70年代以来，对中药红花的化学成分研究非常深入，并已明确其有效成分为水溶性总红花黄色素，其主要有效单体成分为羟基红花黄素A等。有关总红花黄色素的生产制备方法有很多报道，早期常用的方法主要是水提醇沉，提取液干燥后得提取物[周瑜芳等，红花有效成分的提取，新疆工学院学报，1997，18(4)270-272]；近年多用水或稀醇浸提或加热提取，提取液由聚酰胺或大孔吸附树脂进行纯化，干燥后得提取物[参见CN 1101424C；CN 1085674C]。上述两专利采用极性溶剂浸提，提取液简单处理后用吸附剂吸附有效成分的方法进行分离纯化，干燥后得到提取物，该方法在一定程度上提高了红花提取物的质量，但由此方法制得的提取物有效成分的组成以及杂质的量均不明确，造成由其开发而成的制剂稳定性和安全性较差，尤其是不适合用于注射剂，随着中药注射剂在临床上的广泛应用，由中药注射剂引起的不良反应报道很多[莫斌斌等，中药注射剂不良反应的文献统计分析，中南药学，2003，1(3)184-185]，大多数是由于沿用传统的提取工艺而精制程度不足所造成的，因此其用药安全性是业内忧虑并关注的问题。如何开发出一种成熟的制备工艺，使红花提取物的有效成分及其含量明确、纯度高、杂质少，并同时可以去除聚合大分子和热原，提高含有总红花黄色素的红花提取物的制剂稳定性，使之直接用于注射剂，进而保证红花制剂尤其是注射剂的安全性，成为业内人士致力解决的问题。
发明内容
本发明人通过大量的试验研究，得到了红花提取物的有效成分，即一种含有总红花黄色素(也可称为红花黄色素)的提取物，该提取物是红花粗提物经过精制而制得，其中总红花黄色素的含量很高，解决了现有技术有效成分低的缺陷，达到了明确红花有效成分的组成的目的，并提高了其含量，从而提高了生物利用度，增加了治疗效果。
本发明的目的在于提供上述含有总红花黄色素的红花提取物的制备方法，该方法包括提取精制过程，尤其是采用HPD600型或HP-20型大孔吸附树脂以及陶瓷膜超滤的技术，使得红花提取物中有效成分含量高、杂质少，更有利于提供其在制剂上的应用。
本发明的目的还在于提供一种红花提取物，其由常规提取分离以及陶瓷膜超滤精制而成，该提取物成分明确，更适合直接用于红花提取物的注射剂。
本发明提供了一种红花提取物的制备方法，其中包括中药材红花用至少2倍水温浸提取得提取液；浓缩，然后将浓缩液上大孔吸附树脂分离，依次以水和低浓度醇(浓度约为20-50％)洗脱，收集醇洗脱部分，回收洗脱液至醇含量20％以下；通过陶瓷膜超滤，超滤液干燥。
本发明方法中红花药材采用温提的好处在于，红花中含有的一些有效成分在冷浸(冷水浸泡提取的方法)时提取不完全，而加热回流提取的情况下有可能因氧化或者分解而使有效成分被破坏，初提的筛选实验也证明，温提的效果优于冷浸和热提。2-14倍水温提得到的提取液借助经过筛选优选的适合红花提取物的HPD600型或HP-20型大孔吸附树脂以及超滤膜(陶瓷膜)分离技术，不仅提高了有效成分的产率和含量，同时也有效地去除了红花提取物中的聚合大分子和热原，使其可以安全有效地应用于注射剂型中。
上述方法其中的温浸提取温度为40-90℃，优选50-80℃，最优选65-75℃；其中分离的步骤包括先用1-2个柱床体积水洗，所述柱的径高比为1∶6-1∶10，以除去多糖等水溶性杂质弃去水液，再用低浓度(20％-50％，优选30％)醇洗脱3-5个柱床体积，收集洗脱液回收至醇浓度低于20％；所述的陶瓷膜的截留分子量优选为1万，若综合考虑收率等因素，也可以是6000-5万，优选为1-3万，以便于提高纯度和收率，以及更有效地去除所述红花提取物中的聚合大分子和热原。
用于中药提取精制领域的膜超滤的种类有很多，例如聚砜有机膜、聚酰胺膜、醋酸纤维膜、陶瓷膜、四氟乙烯膜等，理论上只要是限定了相同的截留分子量范围的超滤膜，其超滤的效果应该是相同的。但在对红花提取物精制超滤的实际操作过程中，申请人发现，对于制备含有总红花黄色素的注射用制剂而言，陶瓷膜的超滤效果是最好的，其中该膜的稳定性、耐酸碱性、通透性等指标性能好，对于过滤总红花黄色素含量高的这种粘稠性强的中药提取物，相应的损失大为减少、可操作性强，明显优于其他膜超滤所能达到的效果，对于相同量药材和相同截留分子量处理的对比实验结果如下 本发明也对吸附树脂的种类型号进行了筛选，具体筛选方法为取HPD600、HPD100、Dianion HP-20及860021型等不同类型的树脂，首先进行预处理，取1L吸附树脂装柱，待用；将红花提取液(测得其中羟基红花黄素A含量为7.628mg/ml)上柱，TLC检查是否饱和，先用水洗，再用不同浓度的乙醇洗脱，分别收集过柱残液、水洗液、乙醇洗脱液，测定其中羟基红花黄素A含量，并计算有关的特性参数，结果见表7。
表7 不同型号树脂吸附纯化特性参数 由表7结果可知，以羟基红花黄素A为指标成分，红花提取液在不同树脂上具有不同的吸附、洗脱效果，其中HPD100型树脂比上柱量较小；HPD600、HP-20、860021型号树脂的比上柱量及比吸附量均较大，但是860021用30％乙醇洗脱时的比洗脱量小，即样品损失严重。HP-20和HPD 600型树脂的比上柱量较大且比洗脱量都比较大，吸附洗脱性能很好。因此相对于提取物比较粘稠的红花提取物，优选采用HP-20和HPD 600型树脂进行分离精制，更优选HPD 600型树脂。
通过试验确定上柱条件为 径高比1∶6-1∶10，优选1∶8 吸附温度室温(＜35℃) 药液浓度相当于80-130g生药/升，优选110g/L。
上述提取精制后的提取液经检测可以经过干燥即可得到本发明方法所制得的固态提取物，干燥方式可以是任何常规干燥法，优选喷雾干燥。
本发明的制备方法与现有技术公开的制备方法相比，由于分离精制步骤采用的具体方案不同，得到的提取物其中含有的有效成分表现出明显的差异，如专利01131268.8和03157479.3中制备得到的提取物中采用了多次柱层析精制，羟基红花黄素A的含量都大于70，其他黄色素类化合物均被作为杂质除去，而本发明的研究结果表明，羟基红花黄素A的含量过高，疗效和活性反而不及总红花黄色素这个指标的含量高更好，因此按本发明方法制备的提取物具有更好的临床应用价值。
本发明的创新之处在于通过应用特定的大孔吸附树脂和陶瓷膜分离技术，提高了红花提取物中总红花黄色素的含量，同时使得含有该提取物的制剂(尤其是注射剂型)稳定性大大提高，有效地去除了植物提取物中的聚合大分子和热原，可以直接制备成注射剂，而且制剂安全性得到了有效的保证。
本发明还提供了一种红花提取物，其是以上述制备方法制得，经检测，该提取物中总红花黄色素的含量至少为60％，优选含量为80％以上(以羟基红花黄素A计)，其中羟基红花黄素A的含量至少为15％，优选20％以上。
由于本发明的提取物中所含有的有效成分总红花黄色素为混合物，其所含有的经检测已经明确的有效化合物成分包括羟基红花黄素A、羟基红花黄素B、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷等，至今没有文献公开报道中药红花在治疗心脑血管疾病方面有效成分的合理组成是什么，优选治疗量是多少，这样势必导致出现量效关系不容易把握、疗效不稳定等缺陷性特点，其临床实验效果也不是很理想，尤其对于中药注射剂型来说，组成成分确切、含量准确更易于把握制剂质量。申请人发现，本发明的制备方法得到的提取物中确切的疗效化合物是(但不仅仅是)治疗有效量的羟基红花黄素A，甚至于除了羟基红花黄素A之外的其他成分(例如山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷)也对治疗起到推进作用，于是本发明进行了大量的实验检测，结果证实，红花提取物中总红花黄色素的含量至少为60％，而且其中羟基红花黄素A的含量至少为15％，山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量至少为0.8％的红花提取物其治疗效果是最佳的，明显优于以对比文献的方法制备的红花提取物。
上述总红花黄色素的含量测定方法为紫外吸光光度法，操作步骤为 精密称取羟基红花黄素A对照品适量，加水制成对照品溶液。测定时取按上述方法制备的提取物适量，精密称定，加水溶解作为供试品溶液，照分光光度法(中国药典2000版一部附录VA分光光度法)，以水为空白。在332nm波长处测定对照品与样品吸收度，按外标法计算出供试品溶液中相当于羟基红花黄素A的量，即得。
羟基红花黄素A的含量测定采用高效液相色谱法测定，具体操作步骤 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A0.05mol/L的磷酸二氢钠溶液(磷酸调节pH值为4.0)。流动相B乙腈。流速为1.0ml/min，检测波长为403nm。羟基红花黄素A与其它杂质峰的分离度应符合规定，理论塔板数按羟基红花黄素A峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取对照品羟基红花黄素A适量，加水溶解稀释至适当浓度作为对照品溶液。
供试品溶液的制备取提取物适量，以水溶解稀释至适当浓度既得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定，按外标法以峰面积计算，即得。
山奈酚-3-O-芸香糖苷含量测定采用高效液相色谱法测定，操作步骤为 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A0.05mol/L的磷酸。流动相B乙腈。流速为1.0ml/min，检测波长为365nm。山奈酚-3-O-芸香糖苷与其它杂质峰的分离度应符合规定，理论塔板数按山奈酚-3-O-芸香糖苷峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取对照品山奈酚-3-O-芸香糖苷适量，加水溶解稀释至适当浓度作为对照品溶液。
供试品溶液的制备取提取物适量，以水溶解稀释至适当浓度既得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明还提供了一种药物组合物，其含有临床治疗有效量的红花(红花黄色素)提取物和常规药物辅料，该药物临床推荐有效剂量为60-240mg/日。
上述药物组合物包括口服剂型和注射剂型，优选注射剂，包括大输液、冻干粉针和小水针。在上述药物中，作为与有效成分配合使用的辅助成分，根据不同的具体注射剂，建议选用甘露醇、葡萄糖、右旋糖苷或氯化钠中的至少一种。例如，对于冻干粉针剂，可采用常规的冷冻干燥法，以水为溶媒，取提取物加入适量支架剂冻干而成，建议选用甘露醇、葡萄糖、右旋糖苷中的至少一种作为辅助的支架剂，与所说的提取物共同组成；其中优选甘露醇作为支架剂。对于可供直接使用的等渗输液制剂形式的药物，则可以选用甘露醇、葡萄糖、氯化钠中的至少一种作为辅助成分；其中优以采用氯化钠作为辅助成分为优选。对于制备小针剂注射液和大输液制剂时，可加入抗氧剂，抗氧剂可以是乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠盐、抗坏血酸、抗坏血酸钠、硫代硫酸钠和焦亚硫酸钠中的一种或几种。
本发明还提供了上述含有红花提取物的药物组合物在制备治疗心脑血管疾病的药物中的应用。
本发明红花黄色素提取物药效试验结果如下 (一)红花黄色素静脉给药抗心肌缺氧作用的研究 1.对小鼠关闭气管心电消失时间的影响 将60只受试小鼠随机分成6组，每组10只雌雄各半，将受试小鼠用乌拉坦(1.2g/kg)腹腔注射麻醉、固定、颈前部手术暴露并游离气管，用MS·302多媒体化生物信号记录分析系统经针型电极与小鼠四肢相连，采集标II导联心电图，尾静脉穿刺注射给药第1组对照组注射生理盐水。第2、3、4组为红花黄色素高中低剂量组，给药剂量分别为120mg/kg，60mg/kg，30mg/kg，第5组为红花黄色素灌胃给药组，剂量为60mg/kg，于关闭气管前30分钟灌胃给药。各组给药容积均为0.2ml/10g，给药速度为0.02ml/s于试验前用0.9％NaCl配制成所需浓度。注射给药后当即用小动脉夹关闭气管，记录每组每只小鼠关闭气管至心电消失时间，试验资料显著性测定用成对资料的t-test处理，试验结果如表1所示，在所选择剂量范围内红花黄色素静脉注射给药明显延长心电消失时间与对照组比较有非常显著差异；红花黄色素60mg/kg组灌胃给药对受试小鼠心电有延长趋势，与对照组间无显著差异。
表1红花黄色素静脉注射对小鼠关闭气管心电图消失时间的影响 各组与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01 2.对小鼠耐缺氧的影响 含有碱石灰(北票矿务局氢氧化钙厂，991001)，用凡士林将瓶口密封瓶内，调节CY-2型测氧仪，将其与密闭容器相连、记录容器内氧含量(％)变化及记录小鼠的死亡时间(min)。试验资料显著性测定用成对资料的t-test处理，试验结果如表2所示，在所选择剂量范围内，红花黄色素静脉注射给药明显降低氧耗量和延长小鼠存活时间，与对照组比较有显著和非常显著差异。红花黄色素60mg/kg剂量组以灌胃给药，对受试小鼠氧耗量降低和存活时间延长有一定作用，但与对照组间无显著差异。
表2红花黄色素静脉注射对小白鼠耗氧量(％)存活时间(min)的影响
各给药组与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01 (二)红花黄色素抗血小板聚集和血栓形成的作用 1.对ADP诱导血小板聚作用的影响 将60只雄性Wister大鼠随机分成6组，对照组静脉注射0.9％NaCl红花黄色素静脉注射组，剂量分别为80mg/kg、40mg/kg、20mg/kg，红花黄色素灌胃给药组剂量为40mg/kg，各组药组于给药前用0.9％氯化钠配制所需浓度药液，静脉注射给药容积为5ml/kg，注射速度为2.0ml/min。灌胃给药容积为20ml/kg，每天给药1次连续给药7天，于末次给药后1小时经眶后静脉丛采血用0.38％枸橼酸钠抗凝(1∶9)，将抗凝血离心600rpm，10min制备富血板血浆(PRP)及将佘下血浆用3000rpm15分钟制备贫血小板血浆(PPP)。
将PAM-3型双通道血小板聚集仪予热30min。待机器温度计指针指向37℃时，用微量移液管向清洁比色杯内移入200μlPPP，搅拌予热5min，调PPP电位器，使记录仪指针指向20，取出比色杯，再取200μl同一血样PRP，倒入比浊杯内，予热，达37℃。调PRP电位器，使记录仪指针指向80，此时向PRP内加入20μl新配制的ADP工作液(2.2μM)，观察记录仪指针的变化，描记血小板聚集曲线，并根据血小板聚集率(％)，换算出血小板聚集抑制率，进行比较显著性测定，试验结果表明，在所选择剂量提前给药7天对ADP诱导血小板聚集率有明显抑制作用，各给药组与对照组间有显著或非常显著差异。详参表3。
表3 红花黄色素静注对ADP诱导大鼠血小板聚集性的影响(
n＝10) 与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01 2.对血小板依赖性血板形成的影响 将36只家兔(雄性体重2.0-3.0kg)随机分6组，每组6只，对照组，红花黄色素静脉注射3个剂量组，给药剂量分别为44mg/kg、22mg/kg、11mg/kg；红花黄色素灌胃组，剂量为22mg/kg，阳性对照药复方丹参注射液组，剂量为1500mg/kg。对照组静脉注射0.9％NaCl，各给药组均于给药前用0.9％NaCl配制所需浓度药液，静脉注射容积为2ml/kg。灌胃给药容积为5ml/kg。每天给药1次连续给药7天，于末次给药后用戊巴比妥钠以30mg/kg耳缘静脉注射麻醉。
受试动物背位固定，颈前备皮、手术，游离颈总动脉，用小细针将1号手术丝线穿入一侧颈总动脉内约3cm，在动脉内保存2小时后，剪出颈总动脉，取出血栓，去除丝线后称湿重，以血栓湿重为观察指标，进行组间比较，显著性测定，试验结果表明，在所选择剂量范围内提前给药7天对家兔颈总动脉血栓形成有明显抑制作用，各给药组与对照组比较有显著或非常显著差异，详参表4。
表4 红花黄色素静脉给药对家兔颈总动脉血栓形成的影响(
mg) 与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01 本发明的药理实验中涉及的提取物按照实施例1的方法制得。
具体实施例方式 以下实施例是为了更详细地说明本发明，并非对本发明构成限制。
实施例1 水浸提制备含有总红花黄色素的红花提取物 取红花药材2000g，加10倍的水(药材重量)，于70℃搅拌提取2次，每次1小时，滤过，合并二次提取液，冷却至室温后。按照上柱样品量与树脂量(1∶10/W∶V)的比例，过HP-20大孔吸附树脂柱色谱，柱的径高比为1∶7，用水以1-2ml/cm2/min的流速洗脱1个柱床体积弃去，继以25％乙醇1-2ml/cm2/min的流速4个柱床体积，30％乙醇洗脱部分即为总红花黄色素部分，70℃减压回收溶剂，至比重约为1.05的浓溶液，将上述溶液过截留分子量8000的陶瓷膜进行超滤，收集滤液后干燥既得提取物总红花黄色素，可以直接用于制备注射液。
经检测，该提取物中总红花黄色素含量为85％，羟基红花黄素A含量为25％，山奈酚-3-O-芸香糖苷含量0.7％。
实施例2 水浸提制备含有总红花黄色素的红花提取物 取红花药材2000g，加8倍的水(药材重量)，于75℃搅拌提取2次，每次1小时，滤过，合并二次提取液，冷却至室温后。按照上柱样品量与树脂量(1∶8/W∶V)的比例，加入HPD 600大孔吸附树脂柱色谱，柱的径高比为1∶8，用水以1.5-2.5ml/cm2/min的流速洗脱1个柱床体积弃去，继以40％乙醇1-2ml/cm2/min的流速4个柱床体积，40％乙醇洗脱部分即为总红花黄色素部分，70℃减压回收溶剂，至比重约为1.02的浓溶液，将上述溶液过截留分子量10000的陶瓷膜进行超滤，收集滤液后干燥即得提取物总红花黄色素。
经检测，该提取物中总红花黄色素含量为81％，羟基红花黄素A含量为23％，山奈酚-3-O-芸香糖苷含量0.65％。
实施例3 稀醇提取制备含有总红花黄色素的红花提取物 取红花药材2000g，加10倍的30％乙醇(药材重量)，回流提取2次，每次1小时，滤过，合并二次提取液，回收提取液至无醇，按照上柱样品量与树脂量(1∶10/W∶V)的比例，加入HP-20大孔吸附树脂柱色谱，柱的径高比为1∶10，用水以1-2ml/cm2/min的流速洗脱1个柱床体积弃去，继以30％乙醇1-2ml/cm2/min的流速4个柱床体积，35％乙醇洗脱部分即为红花黄色素部分，70℃减压回收溶剂，至比重约为1.05的浓溶液，将上述溶液过截留分子量10000的有机膜进行超滤，收集滤液后干燥得提取物红花黄色素。
经检测，该提取物中总红花黄色素含量为88％，羟基红花黄素A含量为27％，山奈酚-3-O-芸香糖苷含量0.72％。
实施例4 (总)红花黄色素冻干粉针的制备 称取310g右旋糖苷，溶于4500毫升注射用水中，再称取按本发明方法制备的红花黄色素提取物300g，溶于上述溶液中。用20％的氢氧化钠溶液调节pH至7.0±0.2。加入配制量的0.1％针用活性炭加热搅拌15分钟，抽滤，滤液补充加入注射用水至5000毫升。精滤，中间体检查，灌装，冻干，压盖，成品检查，包装。
实施例5 (总)红花黄色素冻干粉针的制备 称取300g甘露醇，溶于4500毫升注射用水中，再称取按本发明方法制备的红花黄色素提取物300g，溶于上述溶液中。用20％的氢氧化钠溶液调节pH至7.0±0.2。该溶液用截留分子量为1万的陶瓷膜超滤，分两次补水8000ml超滤。超滤液作中间体检查，灌装，冻干，压盖，成品检查，包装。
实施例6 (总)红花黄色素大输液的制备 取按上述方法制得的红花黄色素提取物320g，加入834.7g氯化钠和90L的注射用水，搅拌溶解，加0.1mol/L NaOH适量，调pH约为7.0，补充注射用水至足量，再加入液量0.15％的针用活性炭，搅拌15分钟，抽滤除碳，测定含量、pH值合格后，再精滤分装，(105℃)热压灭菌，即得。
实施例7 (总)红花黄色素小水针的制备 取按上述方法制得的红花黄色素提取物250g，加入80.0g氯化钠和10L的注射用水，搅拌溶解，加0.1mol/L NaOH适量，调pH约为7.0，加入10g抗氧剂硫代硫酸钠，补充注射用水至足量，再加入液量0.1％的针用活性炭，搅拌15分钟，抽滤除碳，测定含量、pH值合格后，再精滤分装，(105℃)热压灭菌，即得。
以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。
权利要求
1、一种含有总红花黄色素的红花提取物的制备方法，其中包括
(1)红花用至少2倍水温浸提取得提取液I；
(2)提取液浓缩得浓缩液，然后将浓缩液上大孔吸附树脂分离，依次以水和20％-50％的醇洗脱，收集醇洗脱部分，回收洗脱液至醇含量20％以下，得到洗脱液II；
(3)通过陶瓷膜超滤，得到超滤液III；
(4)超滤液III经回收至相对密度为1.05-1.20，即可。
2、权利要求1所述的制备方法，其中温浸提取温度为40-90℃。
3、权利要求1所述的制备方法，其中步骤(2)中大孔吸附树脂为HPD600型或HP-20型，其径高比为1∶6-1∶10，所述的分离包括先用1-2个柱床体积水洗，弃去水液，再用浓度20％-50％的醇洗脱3-5个柱床体积，收集醇洗脱部分的洗脱液回收至醇浓度20％以下。
4、权利要求1所述的制备方法，其中步骤(3)中所述的陶瓷膜的截留分子量为1-3万。
5、权利要求1所述的制备方法，其中步骤(2)中所述的洗脱用的醇为30％的乙醇。
6、权利要求1所述的制备方法，其中步骤(2)得到的洗脱液II的醇浓度为5％-15％。
7、一种以权利要求1所述的制备方法制得的含有总红花黄色素的红花提取物，其特征为总红花黄色素含量＞80％，羟基红花黄素A含量＞20％，山奈酚-3-O-芸香糖苷含量＞0.6％。
8、一种药物组合物，其特征在于含有治疗有效量的权利要求7所述的含有总红花黄色素的红花提取物和药学可接受的辅料。
9、权利要求8所述的组合物，其中该药物组合物为注射剂。
10、权利要求9所述的组合物，其中所述注射液含有权利要求7所述的红花提取物1-3份，甘露醇、右旋糖苷或氯化钠0.8-5份。
全文摘要
本发明涉及一种红花提取物的制备方法，包括红花用至少2倍水温浸提取得提取液I；提取液浓缩得浓缩液，然后将浓缩液上大孔吸附树脂分离，依次以水和醇洗脱，收集醇洗脱部分，回收洗脱液至醇含量25％以下，得到洗脱液II；通过陶瓷膜超滤，得到超滤液III；超滤液减压回收溶剂至稠膏，干燥即得；该提取物的特征为总红花黄色素含量＞80％，羟基红花黄素A含量＞20％，山奈酚－3－O－芸香糖苷含量＞0.6％。
文档编号A61K31/352GK1935176SQ20051010538
公开日2007年3月28日 申请日期2005年9月23日 优先权日2005年9月23日
发明者张树祥, 刘文辉 申请人:北京联合伟华药业有限公司