一种中药组合物及其制备方法和质量控制方法

专利名称：一种中药组合物及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物，尤其是一种用于治疗风湿性关节炎及类风湿性关节炎的中药组合物，属中药领域；同时还涉及该药物的制备方法和质量控制方法。
背景技术：
风湿性关节炎为风湿热最常见的一种临床表现，与A组溶血性链球菌感染引起的变态反应有关。该病发病较急，受累关节以大关节为主，开始侵及下肢关节者占85％，膝和踝关节最为常见，其次为肩、肘和腕、手和足的小关节少见。关节病变呈多发性和游走性，关节局部炎症明显，表现有红、肿、热、痛、压痛及活动受限。在关节炎急性期患者可伴发热、咽痛，心慌、血沉增快及C-反应蛋白增高等表现。风湿性关节炎病人在急性疼痛期间，由于长期卧床，或者服用激素时间过长等，可致患者机体免疫功能低下，出现一些并发症，包括肺炎、泌尿系统感染、柯兴氏综合症、口腔溃疡等，并且对于流行性传染病，也比正常人更易受到传染。对于此病起因，学术界尚无定论，在治疗上也没有完全有效的办法，目前以化学药治疗为主，效果不甚理想。
类风湿性关节炎是一种以关节和关节周围组织的非感染性炎症为主的全身性自身免疫性疾病，其病理特点为关节滑膜的慢性炎症，细胞浸润，滑膜翳形成，软骨及骨组织的侵袭，导致关节结构的破坏。最终关节畸形、功能障碍或丧失，甚至残废，丧失生活能力。本病致残率高，已成为世界公认的难治性疾病之一，现代医学对其尚无特效疗法。
近年来，中医药在治疗风湿性和类风湿性关节炎的研究中取得了一定进展，本发明人结合自己多年临床经验，创制了本方，并经过现代制药工艺制成中成药，经过临床验证，祛风除湿，舒筋通络止痛效果显著。
本发明目的旨在克服现有治疗手段和治疗药物的不足，提供一种有效治炎症的中药组合物；本发明目的还在于提供该中药组合物的制备方法和质量控制方法。

发明内容
本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明所述的药物是由下列组份的原料药制成的土茯苓150～250份，桃仁10～20份，玉竹10～20份，五味子10～20份，黄柏10～20份，防风10～20份，羌活10～20份，防己10～20份，威灵仙10～20份，蚕砂10～20份，绵萆10～20份，穿山龙10～20份，桂枝10～20份，当归10～30份，红花5～15份，人参10～20份，青风藤10～20份，独活10～20份。
经优选后的原料药比例为土茯苓180～220份，桃仁12～18份，玉竹12～18份，五味子12～18份，黄柏12～18份，防风12～18份，羌活12～18份，防己12～18份，威灵仙12～18份，蚕砂12～18份，绵萆12～18份，穿山龙12～18份，桂枝12～18份，当归15～25份，红花8～12份，人参12～18份，青风藤12～18份，独活12～18份。
经实验进一步优选后，确实最优配比为土茯苓200份，桃仁15份，玉竹15份，五味子15份，黄柏15份，防风15份，羌活15份，防己15份，威灵仙15份，蚕砂15份，绵萆15份，穿山龙15份，桂枝15份，当归20份，红花10份，人参15份，青风藤15份，独活15份。
为了方便临床使用，发明人针对该原料药做了进一步研究，以制定其提取制备工艺，将其制成临床或药学所需的各种剂型，如颗粒剂、片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂等。研究过程如下1、人参药材粉碎工艺考察(1)粉碎粒度考察取人参药材100g，各取三份，分别粉碎过80目筛、100目筛、120目筛，考察各粉末的性状及得粉率。结果见下表。
人参药材粉碎粒度考察

根据上述试验结果，人参粉碎过100目筛时，粉末状态较好，粒度小，易于成型，粉碎得率较高，故本品确定将人参粉碎成100目细粉。
(2)灭菌方法的考察人参为粉碎后直接入药，为保证成品的微生物限度符合规定，需对其进行灭菌处理。经过试验，钴60灭菌及蒸汽灭菌都有满意的效果。
2、挥发油提取工艺优选发明人认为防风、羌活、独活、当归中的主要药用成分在于挥发油，因而发明人对挥发油的提取参数做了详细研究，重点在于提取时间。
试验方法取防风100g、羌活100g、独活100g、当归134，共取三份，分别加5倍量水，浸渍1小时后，分别蒸馏提取4小时、5小时、6小时，分取溜出液，以石油醚提取三次，每次10ml，合并石油醚液，以无水硫酸钠滤过，并以石油醚10ml洗涤，合并石油醚液，自然挥干，称定挥发油的重量，结果见下表。
提取挥发油工艺试验

试验结果表明，蒸馏4小时的挥发油量较少，提取率较低，蒸馏5小时及6小时挥发油的提取效果相当，提取率均较高。为节省时间，本品提取挥发油时选择蒸馏提取5小时。
3、水提取工艺考察试验方法取土茯苓200g、桃仁15g、玉竹15g、五味子15g、黄柏15g、防己15g、威灵仙15g、蚕砂15g、绵萆15g、穿山龙15g、桂枝15g、红花10g、青风藤15g，各取三份，分别加8倍量、10倍量、12倍量水提取3次，依次为3、2、1小时，滤过，合并滤液，备用。
指标性成分的选择 选择黄柏中的盐酸小檗碱作为测定指标，进行工艺优选，测定方法为照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25∶75比例的乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相，检测波长265nm，流速1.0ml/min，柱温25℃，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。
对照品溶液精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加流动相使溶解，制成每1ml含5μg的溶液，即得。
供试品溶液取提取液的1/1000量，水浴蒸干，残渣加少量甲醇溶解，定量加在中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加流动相溶解并定量转移至10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，以微孔滤膜滤过，即得。
测定法精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
试验结果按以上工艺方法提取，并以上法测定盐酸小檗碱的含量，计算折合成总提取液中的含量，结果见下表。
水提取工艺考察试验

根据以上试验结果，加水8倍量的提取效果较差，而加水10倍量及12倍量的提取效果均较高，提取率相当。为节约能源，本品确定加10倍量水煎煮3次，依次为3、2、1小时。
4、浓缩工艺考察根据生产实际情况，浓缩时采用常压浓缩与减压浓缩两种方法，但由于常压浓缩的温度较高，回收的时间较长，容易造成有效成分的损失；而采用减压浓缩则可尽量减少以上因素所造成的损失，故本制剂选择减压浓缩。经过试验，在真空度达到-0.08MPa左右的情况下，温度达到65～70℃时，回收速度较快，效果较好。故本品确定采用减压浓缩，温度65～70℃，真空度-0.08MPa，浓缩至60℃时相对密度为1.30～1.35的稠膏。
5、干燥工艺的优选以上浓缩液，加入相应量的人参细粉，进行干燥工艺的研究。在工业中常用的干燥工艺有常压干燥与减压干燥。本工艺对不同的干燥方法所得的干燥物性状、干燥时间进行了比较，优选较优的干燥方法。试验结果见下表。
干燥方法的优选

以上试验结果表明，常压干燥的干燥物较坚硬，色泽深；而减压干燥的效果较好，干燥物均较疏松，容易粉碎；当减压干燥条件温度为65～70℃，真空度为-0.08MPa左右时，所得干燥物疏松，色泽浅，故本品确定干燥条件为采用减压干燥，控制真空度达到-0.08MPa，温度65～70℃。
发明人最终优选了片剂的制备方法取防风、羌活、独活、当归提取挥发油，蒸馏液另备用；人参粉碎，过100目筛，备用；土茯苓等13味分别加10倍量水煎煮3次，依次为3、2、1小时，滤过，合并滤液及蒸馏液，减压浓缩至60℃时相对密度为1.30～1.35的稠膏；在稠膏加入人参细粉，混匀，减压干燥，干浸膏粉碎，过100目筛，加入挥发油搅拌均匀，并加淀粉适量调节至合适的分散度，混匀，以70％乙醇制粒，低温干燥，压成片剂。
在研究工艺过程中，以及在制得产品后，发明人还制定了产品的质量控制方法，以确保该药物组合的品质。该质量控制方法包括含量测定和定性鉴别两部分，分别叙述如下。
(1)含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25∶75的乙腈-0.1％磷酸为流动相，检测波长265nm，流速1.0ml/min，柱温25℃，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000；对照品溶液精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加流动相使溶解，制成每1ml含5μg的溶液，即得；供试品溶液取本发明药物组合物制剂5～15g，研细，称取1g，精密称定，精密加甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，待冷至室温，称定重量，以甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液10ml，定量加在中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加流动相溶解并定量转移至25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，以微孔滤膜滤过，即得；测定法精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
(2)定性鉴别1)取本发明制剂3～10g，研细，加甲醇回流提取1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加0.05mol/L氢氧化钠溶液使溶解，置分液漏斗中，以氯仿提取二次，弃去氯仿液，水液加水饱和正丁醇提取二次，合并正丁醇液，以正丁醇饱和水洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；也可以再取人参皂甙Re、Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种或三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水混合液在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，至少显四个相同颜色的斑点；或在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；2)取本发明制剂3～10g，研细，加甲醇超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加浓氨水调节pH9～10，以氯仿提取三次，合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；也可以再取盐酸小蘖碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液，对照药材溶液和/或对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6∶3∶1.5∶1.5∶0.5的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液的混合液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；3)取青藤碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及“鉴别2)”项下的供试品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶4∶2∶1的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-水的混合液在10℃以下放置后的上层溶液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内展开，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。
经发明人证明，以上质量控制方法可以应用于本发明技术方案能够制成的各种剂型。
要发明药物组合物对于风湿性和类风湿性关节炎有着明显的治疗效果，下面以临床实验的结果来说明本发明的有益效果(实验中所用“舒痹片”是按本发明最优处方和工艺制成的片剂)一、舒痹片对于风湿性关节炎的治疗作用1、资料与方法1.1一般资料 共观察40例，男26例，女14例，年龄18～50岁，平均27.58±4.25岁，病程2个月～5年，平均1.2±0.5年。
1.2诊断标准 诊断依据美国心脏病学会1992年最新修订Jones标准。中医辨证及诊断标准参照《中药新药治疗痹病的临床研究指导原则》。
1.3治疗方法服用舒痹片，每次3片，每日3次，饭后服用，疗程3个月。
1.4观察指标 主要症状、体征(关节疼痛、关节功能障碍、关节肿胀、双手握力、15米距离行走时间)，其分级标准参照中华人民共和国卫生部《治疗风湿病药物研究指导原则新药临床研究指导原则(1993)》，指数计算方法为0级记0分，1级计1分，2级计2分，3级记3分，4级计4分，其指数为所有关节计分之和。理化指标(ESR、ASQ、IgG、IgM)。
1.5疗效判定标准 参照《中药新药治疗痹病的临床研究指导原则》，临床治愈症状全部消失，功能活动正常，主要理化指标正常。显效全部症状消失或主要症状消除，关节功能恢复，能参加正常工作和劳动，理化指标基本正常。有效主要症状基本消除，主要关节功能基本恢复，生活不能自理转为能够自理，或者失去工作和劳动能力转为工作和劳动能力有所恢复，主要理化指标改善。无效和治疗前相比较，各方面均无进步。
1.6统计学处理 所有计量资料均以均数±标准差表示，计数资料X2检验，P＜0.01具有统计学意义。
2结果2.1主要症状、体征变化 见表12.2血生化指标改善 见表2。
表1风湿性关节炎病人治疗前后症状、体征变化比较

表2 血指标的改善

2.3疗效判定 临床治愈15例(37.5％)，显效19例(47.5％)，有效6例(15％)，无效0例，总有效率100％。
二、舒痹片对于类风湿性关节炎的治疗作用1一般资料共观察60名病例，其中男33例，女27例；年龄18～60岁，病程2个月～10年不等。全部患者的临床表现、影像学、实验室检查等均符合美国ARA，1987年6月第五届ARR会议修订的诊断标准。
2治疗方法服用舒痹片，每次4片，每日3次，饭后服用，疗程3个月。
3结果3.1疗效判定标准显效受累关节肿痛消失，关节功能基本恢复正常，ESR恢复正常。有效受累关节肿痛明显好转，关节功能部分改善，RF滴度降低，ESR变慢，但未达到正常值。无效症状和体征基本无改变。
3.2治疗结果服用六个月后进行疗效评价显效35例，占58.3％；有效21例，占35％；无效4例，占6.7％。总有效率为93.3％。
以下通过实施例来详细说明本发明的技术方案实施例1处方土茯苓200g 桃仁15g玉竹15g五味子15g黄柏15g防风15g羌活15g 防己15g威灵仙15g蚕砂15g 绵萆15g 穿山龙15g桂枝15g 当归20g花10g人参15g 青风藤15g 独活15g制法以上十八味，防风、羌活、独活、当归提取挥发油备用，人参粉碎成细粉备用，土茯苓等13味与提取挥发油后的防风等四味加15倍量水煎煮3次(3、2、1小时)，分次滤过，合并滤液，浓缩至稠膏状，加入人参细粉、挥发油搅拌均匀，再加入糊精300g制成颗粒剂。
服用方法每次5g，一日三次。
实施例2处方土茯苓500g 桃仁 40g玉竹20g五味子40g 黄柏 20g防风30g羌活 20g 防己 40g威灵仙 40g蚕砂 30g 绵萆20g穿山龙 40g桂枝 25g 当归 60g红花20g人参 40g 青风藤20g独活40g制法1.以上十八味，防风、羌活、独活、当归提取挥发油，蒸馏液另备用；2.人参粉碎，过100目筛，备用；3.土茯苓等13味分别加10倍量水煎煮3次，依次为3、2、1小时，滤过，合并滤液及蒸馏液，减压浓缩(65～70℃，-0.08MPa)至相对密度为1.30～1.35(60℃)的稠膏；4.将3中的稠膏加入人参细粉，混匀，减压干燥(65～70℃，-0.08MPa)，干浸膏粉碎，过100目筛，加入挥发油搅拌均匀，并加淀粉至总量300g，混匀，以70％乙醇制粒，低温干燥，压成1000片，即得。
服用方法每次3～4片，一日三次。
实施例3处方土茯苓 300g 桃仁 20g玉竹 40g五味子 20g黄柏 40g防风 40g羌活40g防己 20g威灵仙20g蚕砂20g绵萆40g穿山龙20g桂枝20g当归 20g红花 40g人参20g青风藤40g独活 20g制法以上十八味，防风、羌活、独活、当归提取挥发油，蒸馏液另备用；人参粉碎成细粉备用；土茯苓等13味分别加10倍量水煎煮3次，依次为3、2、1小时，滤过，合并滤液及蒸馏液，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35(60℃)的稠膏，加入人参细粉混匀，减压干燥，干浸膏粉碎，加入挥发油搅拌均匀，制成颗粒，填装胶囊1000粒，即得。
性状本品为胶囊剂，内容物为褐色或黑褐色的颗粒；味微苦。
服用方法每次4粒，每日二次。
鉴别(1)取本品内容物4g，研细，加甲醇25ml，回流提取1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml使溶解，置分液漏斗中，以氯仿提取二次，每次20ml，弃去氯仿液，水液加水饱和正丁醇提取二次，每次15ml，合并正丁醇液，以正丁醇饱和水30ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参皂甙Re、Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘数分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，至少显四个相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。
(2)取本品内容物6g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，加浓氨水调节pH9～10，以氯仿提取三次，每次15ml，合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小蘖碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液4μl，对照药材溶液、对照品溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。
(3)取青藤碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及″鉴别(2)″项下的供试品溶液各5μl，分别点子同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-水(2∶4∶2∶1)10℃以下放置的上层溶液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内展开，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。
含量测定照高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸(25∶75)为流动相，检测波长265nm，流速1.0ml/min，柱温25℃，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。
对照品溶液精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加流动相使溶解，制成每1ml含5μg的溶液，即得。
供试品溶液取装量差异项下的本品内容物，研细，称取1g，精密称定，精密加甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，待冷至室温，称定重量，以甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液10ml，定量加在中性氧化铝柱(120～200目，3g，内径1～1.5cm)上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加流动相溶解并定量转移至25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，以微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
测定法精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒含黄柏以盐酸小檗碱(C20H18ClNO4·HCl)计，不得少于0.12mg。
权利要求
1.一种药物组合物，其特征在于它是由如下重量比例的原料药制成的土茯苓150～250份，桃仁10～20份，玉竹10～20份，五味子10～20份，黄柏10～20份，防风10～20份，羌活10～20份，防己10～20份，威灵仙10～20份，蚕砂10～20份，绵萆10～20份，穿山龙10～20份，桂枝10～20份，当归10～30份，红花5～15份，人参10～20份，青风藤10～20份，独活10～20份。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于各原料药的优选重量配比为土茯苓180～220份，桃仁12～18份，玉竹12～18份，五味子12～18份，黄柏12～18份，防风12～18份，羌活12～18份，防己12～18份，威灵仙12～18份，蚕砂12～18份，绵萆12～18份，穿山龙12～18份，桂枝12～18份，当归15～25份，红花8～12份，人参12～18份，青风藤12～18份，独活12～18份。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于各原料药的最佳重量配比为土茯苓200份，桃仁15份，玉竹15份，五味子15份，黄柏15份，防风15份，羌活15份，防己15份，威灵仙15份，蚕砂15份，绵萆15份，穿山龙15份，桂枝15份，当归20份，红花10份，人参15份，青风藤15份，独活15份。
4.根据权利要求1、2或3中所述的药物组合物，其特征在于该组合物可制成临床上或药学上可接受的各种剂型，包括颗粒剂、片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂等。
5.根据权利要求4所述药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包含如下工艺过程防风、羌活、独活、当归提取挥发油备用，人参粉碎成细粉备用，土茯苓等13味与提取挥发油后的防风等四味加水煎煮3次，分次滤过，合并滤液，浓缩至稠膏状，加入人参细粉和挥发油搅拌均匀，得药粉；再加入适宜辅料，制成所需剂型，即得。
6.如权利要求5所述药物组合物的制备方法，其特征在于片剂的制备方法如下取防风、羌活、独活、当归提取挥发油，蒸馏液另备用；人参粉碎，过100目筛，备用；土茯苓等13味分别加10倍量水煎煮3次，依次为3、2、1小时，滤过，合并滤液及蒸馏液，减压浓缩至60℃时相对密度为1.30～1.35的稠膏；在稠膏加入人参细粉，混匀，减压干燥，干浸膏粉碎，过100目筛，加入挥发油搅拌均匀，并加淀粉适量调节至合适的分散度，混匀，以70％乙醇制粒，低温干燥，压成片剂。
7.根据权利要求4所述药物组合物的质量控制方法，包括含量测定和定性鉴别两部分，其特征在于其中的含量测定方法如下色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25∶75的乙腈-0.1％磷酸为流动相，检测波长265nm，流速1.0ml/min，柱温25℃，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000；对照品溶液 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加流动相使溶解，制成每1ml含5μg的溶液，即得；供试品溶液 取本发明药物组合物制剂5～15g，研细，称取1g，精密称定，精密加甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，待冷至室温，称定重量，以甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液10ml，定量加在中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加流动相溶解并定量转移至25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，以微孔滤膜滤过，即得；测定法 精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
8.根据权利要求7所述药物组合物的质量控制方法，其特征在于其中的定性鉴别方法可以是如下的一种或几种1)取本发明制剂3～10g，研细，加甲醇回流提取1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加0.05mol/L氢氧化钠溶液使溶解，置分液漏斗中，以氯仿提取二次，弃去氯仿液，水液加水饱和正丁醇提取二次，合并正丁醇液，以正丁醇饱和水洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；也可以再取人参皂甙Re、Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种或三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水混合液在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，至少显四个相同颜色的斑点；或在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；2)取本发明制剂3～10g，研细，加甲醇超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加浓氨水调节pH9～10，以氯仿提取三次，合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；也可以再取盐酸小蘖碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液，对照药材溶液和/或对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6∶3∶1.5∶1.5∶0.5的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液的混合液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；3)取青藤碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及“鉴别2)”项下的供试品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶4∶2∶1的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-水的混合液在10℃以下放置后的上层溶液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内展开，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。
9.根据权利要求1、2或3所述药物组合物在制备用于治疗风湿性关节炎及类风湿性关节炎的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种中药组合物，该组合物是由土茯苓、桃仁、玉竹、五味子、黄柏、防风、羌活、防己、威灵仙、蚕砂、绵萆薢、穿山龙、桂枝、当归、红花、人参、青风藤、独活等原料药按一定工艺制备而成，可以是片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂等的任何一种。同时，本发明还公开了该药物组合物的制备方法和质量控制方法。
文档编号A61K35/56GK1923263SQ20051020050
公开日2007年3月7日 申请日期2005年8月31日 优先权日2005年8月31日
发明者吴逸芳 申请人:吴逸芳