吩噻嗪衍生物用于预防和/或治疗听力减退的用途的制作方法

专利名称：吩噻嗪衍生物用于预防和/或治疗听力减退的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有钙激活中性蛋白酶抑制活性和捕捉活性氧类别(ROS)活性的吩噻嗪衍生物用于制备预防和/或治疗听力减退的药物的用途。本发明也涉及包含至少一种这样的化合物的产品以及含有该化合物的药物组合物。
在听力减退的许多原因中，可特别提及如脑膜炎或耳炎的疾病、遗传性原因、损伤、肿瘤、药物、药物如某些抗生素、抗癌药、非甾体抗炎剂、利尿剂、溃疡药或抗惊厥剂的施用、长期暴露于芳香族有机溶剂如甲苯或二甲苯、年老和暴露于噪音。老年性耳聋(与年龄有关的耳聋)、长期暴露于噪音以及药物的施用是听力减退的主要原因。
目前众所周知的是氨基糖苷类的某些抗生素，如用于治疗严重感染的庆大霉素和妥布霉素可导致耳蜗性耳聋。氨基糖苷类(氨基糖苷如阿米卡星、地贝卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星、大观霉素、妥布霉素)的毒性最初通过高频率处的听力损害表现出来，并且最初不被患者意识到。患者仅仅逐渐地受到这种损伤的困扰。不幸的是它经常是不可逆的。
我们周围的噪音降低了我们的听力。当向内耳传送声音的听毛细胞被损伤并不再命令听神经向脑发送电脉冲时，由噪音造成的听力减退就出现了。
音量的大小和暴露的持续时间是影响听力减退的两个主要因素。虽然人与人之间对暴露于噪音的反应有所不同，但仍报道了具有确定性的一些事实。研究已经表明，长期暴露于85分贝(dB)或更高，经过一段时间将导致永久性的听力减退。
欧洲和北美的统计表明，8％至10％的人口患有耳蜗性病理(耳聋、耳鸣)。考虑到迪斯科舞厅、高科技舞曲音乐会(techno concert)和随身听产生的声音水平，正在产生一整代的耳聋和耳鸣受害者。所以，当前与年龄相关的始于60岁左右的问题(老年性耳聋)，可以发生得更早，即在35-40岁左右。
听觉病理的问题是，它们中的绝大部分是由于听毛细胞和内耳(或耳蜗)的神经细胞的损失造成的。这些细胞，除了基本上在子宫内的发育期外，在它们的最后分化阶段之后并不具有自我更新的能力。
与不同的耳蜗病理有关的耳的敏感性和神经方面功能的逐渐减退，即使在当前仍然超越了任何治疗的范围。
所以，本发明的主题是对应于以非对映异构体形式或这些形式的任何组合形式存在的式(I)的杂环衍生物用于制备预防和/或治疗听力减退的药物的用途， 其中R代表氢原子、(C1-C6)烷基、芳基烷基或-C(O)R’基，其中R’代表杂环烷基、(C1-C6)烷基、芳基或芳烷基；烷基、芳基或杂环烷基任选被选自(C1-C6)烷基、羟基、(C1-C6)烷氧基、硝基、氰基、卤素或-NR1R2的一个或多个相同或不同的取代基所取代；R1和R2独立地代表氢原子或(C1-C6)烷基，或R1和R2与它们所连接的氮原子形成任选被取代的杂环。
在本申请中，“创伤”表示由外部物质引起的涉及组织和器官的一组局部的损伤。在听觉创伤的情况下，该外部物质主要是噪音。
(C1-C6)烷基表示包含1至6个碳原子的直链或支链的烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基、戊基、新戊基、异戊基、己基、异己基。(C1-C6)烷氧基对应于上述的烷基基团如甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基，但也包括直链的、仲或叔丁氧基。烷基羰基可对应于上述的烷基基团如甲基羰基、乙基羰基、丙基羰基。卤素表示氟、氯、溴或碘原子。
芳基表示包含至少一个芳环的碳环或杂环系统，当组成系统的环的至少一个包含杂原子(O、N或S)时，该系统被称之为杂环。可提及的碳环芳基的实例有苯基或萘基。可提及的杂环芳基(或杂芳基)的实例有噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、异噻唑基、噻唑基、异唑基、唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、苯并噻吩基、苯并呋喃基和吲哚基。
术语杂环(或杂环烷基)，优选代表单或二环饱和或不饱和杂环，包含1至5个选自O、S和N的杂原子。氮原子可任选被选自烷基、芳基、芳烷基和烷基羰基的基团所取代。作为饱和杂环的实例，可提及四氢呋喃、四氢吡喃、氧杂环丁烷、氧杂环庚烷、四氢噻吩、四氢噻喃、硫杂环丁烷(thietane)、吡咯烷、哌啶、氮杂环丁烷、1，3-二烷、1，3-二氧戊环、1，3-二硫戊环、1，3-二噻烷、1，3-氧硫杂环戊烷(1，3-oxathiolane)、1，3-唑烷、1，3-咪唑烷或1，3-噻唑烷。作为不饱和杂环的实例，可提及二氢噻吩、二氢呋喃、二氢吡咯、二氢咪唑、二氢吡唑、二氢吡啶、二氢吲哚。
芳基烷基(或芳烷基)指这样的基团，其中芳基和烷基分别如上所定义，如苄基、苯乙基或萘基甲基。
在式-NR1R2的基团的情况下，其中R1和R2与它们所连接的氮原子形成可任选被取代的杂环，该杂环优选是饱和的并包含4至7元环并包含已经存在的氮原子在内的1至3个杂原子，额外的杂原子独立地选自O、N和S原子。所述的杂环可以是如氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉或硫代吗啉环。所述的杂环可被选自羟基、烷基、芳基、芳烷基或烷氧基基团或卤原子的一个或多个相同或不同的取代基取代。
更特别地，本发明的主题是如上所定义的用途，其特征在于R代表-C(O)R’并优选R’代表烷基基团。
非常优选地，化合物(I)的特征在于R代表-C(O)-CH3。后者化合物在下文被称为化合物(1)。
更特别地，本发明的主题是如上所定义的用途，其特征在于R代表氢。
同样非常优选地，如上所定义的化合物(I)具有下式的结构 更特别地为下式之一 同样非常优选地，如上所定义的化合物(I)具有下式的结构 且更特别地
如上所定义的该化合物为具有抗氧化和抗钙激活中性蛋白酶作用的保护剂，被描述于申请WO 01/32654中。
所以，本发明的主题也是如上所定义的式(I)化合物的用途，用于涉及听力减退的起因的预治疗或后治疗。
本发明的主题也是如上所定义的式(I)化合物的用途，用于制备在另一种药物施用后预防和/或治疗听力减退的药物。优选地，另一种药物为抗生素如庆大霉素，抗癌药如顺铂，非甾体抗炎剂如水杨酸衍生物或布洛芬，利尿剂如呋塞米，抗溃疡药如西咪替丁或奥美拉唑，抗惊厥剂如卡马西平或丙戊酸。非常优选地，其他的药物为抗生素，且更特别地为庆大霉素。
本发明的主题也是如上所定义的式(I)化合物的用途，用于制备在老年性耳聋后预防和/或治疗听力减退的药物。
本发明的主题也是如上所定义的式(I)化合物的用途，用于制备在听觉创伤后预防和/或治疗听力减退的药物。
根据本发明的化合物可单独使用或与至少一种具有药学活性的其他物质，优选可预防和/或治疗听力减退或预防和/或治疗与听力减退有关的任何病理的物质组合使用。
该化合物可与抗氧剂、钙激活中性蛋白酶抑制剂如抑蛋白酶醛肽或Neurodur、外周血管扩张剂如EGb 761、NMDA受体的激动剂或拮抗剂、c-Jun N末端激酶的肽抑制剂如D-JNK-1组合。
本发明的主题也是如上所定义的用途，其特征在于它与至少一种具有药学活性的其他物质组合，所述其他物质优选为选自下列的物质抗氧剂、钙激活中性蛋白酶抑制剂、外周血管扩张剂、NMDA受体的激动剂或拮抗剂、c-Jun N末端激酶的肽抑制剂。
式(I)的化合物以及如上所定义的优选的化合物(1)，可以所包含的50至500μM的剂量局部施用。在局部的耳蜗内治疗的情况下，它可以以50到200μM的剂量施用。在局部的耳蜗外治疗的情况下，它可以以200到500μM的剂量施用。任选地与它们组合的在药理学上已知的物质，可用通常推荐的剂量进行施用。
如上所定义的化合物，以及任选与它们组合的具有药学活性的物质，可通过标准的施用途径，例如口服、腹膜内、皮下或静脉内施用。它们可以同时或分别通过相同或不同的施用途径施用。优选地，如上所定义的化合物(I)通过在内耳治疗中的常用技术局部施用，例如微导管、经鼓室注射的注射器或配备有Silverstein微纱布条型纱布条的导管。
本发明的主题也是包含非对映异构体形式或这些形式的任意组合的如上所定义的式(I)杂环衍生物以及至少一种具有治疗活性的物质的产品，作为组合产品同时、分别或跨越一段时间使用，以预防和/或治疗听力减退。优选地，本发明的主题是如上所定义的产品，在施用药物之后，或在老年性耳聋之后，或在听觉创伤之后，用于预防和/或治疗听力减退。
最后，本发明的主题是作为药物的如上所定义的产品。
在药物施用后听力减退的情况下，药物优选是抗生素，且优选庆大霉素。
任选被组合的具有药物活性的物质，通过在本治疗领域通常设想用于这些物质的施用途径进行施用。
在通过听觉创伤造成的听力减退的情况下，如上所定义的化合物(I)的施用，可发生在听觉创伤之前数天，优选在创伤之前2至3天，以及在创伤之后24小时。优选地，在创伤后7天内施用。同样优选地，在创伤后2小时内施用。
所以本发明的主题是如上所述的用途，其特征在于非对映异构体形式或这些形式的任意组合的化合物(1)，在创伤后7小时内施用，优选在创伤后1小时内施用。
在实验部分给出显示在听觉创伤后化合物(1)在功能恢复方面的治疗有效性。
给出下列实施例以说明上述的方法，不应被理解成限制本发明的范围。
实验部分
药理学研究1)用庆大霉素治疗诱导的耳毒性作为共同治疗施用的化合物1对于由庆大霉素诱导的听毛细胞损失的保护作用的证实庆大霉素和其他的氨基糖苷类药物已经在人类中显示可造成听毛细胞的损伤和听力减退。斑马鱼在它们身体的表面表露感觉器官，被称为神经丘。在这些鱼中，神经丘听毛细胞可用DASPEI染色，并且这种染色反映出听毛细胞的数量。这些听毛细胞在结构和功能上类似于人耳的内听毛细胞。
在斑马鱼中，由庆大霉素诱导对内听毛细胞的损伤。为了测试化合物(1)对由庆大霉素造成的听毛细胞的损伤的保护的效果，化合物(1)作为共同治疗药与庆大霉素一起施用。然后染色并定量内耳听毛细胞。
研究在5日龄的鱼中进行，在存在或不存在化合物(1)的情况下用1μg/ml的庆大霉素培养24小时。平行地用单一载体(1％DMSO；阳性对照)进行对照。用庆大霉素处理的鱼为阴性对照。
进行DASPEI(碘化2，4-二甲基-氨基苯乙烯基-N-乙基吡啶)染色，以便在体内显示(n＝5个/组)听毛细胞。使用形态测量分析以对听毛细胞的染色信号进行定量。阳性对照的DASPEI染色信号被定义为100％。
结果表示于

图1(用DASPEI染色的听毛细胞百分数。阳性对照(斑马鱼-1％DMSO)；阴性对照(斑马鱼-1％DMSO-庆大霉素1μg/ml)和本产品的作用(斑马鱼-1％DMSO-庆大霉素-化合物1)。实验以每组5只动物进行)。
图1的结果表明-阴性对照的染色信号代表31.5±4.2％的对照信号，或者用庆大霉素处理后68.5±4.9％的听毛细胞损失。
-用庆大霉素和化合物1处理的动物的染色信号代表65.2±4.4％的对照信号，或用庆大霉素处理的受损听毛细胞的48.7±2.63％非常显著的保护。
2)听觉创伤后的听力减退这涉及到在由听觉创伤造成的听力减退之后，在豚鼠中化合物(1)的保护作用研究，该保护作用在治疗前和治疗后在一个方面涉及对内耳听毛细胞的保护，在另一方面涉及听力的功能恢复。通过局部途径“耳蜗内和耳蜗外”施用化合物(1)以模拟在人的外科临床药物中的用途。
用该新保护剂获得的功能保护可用功能试验定量，该功能试验是动物听力图的读数。该听力图通过记录听神经的潜在复合作用的活性而产生。在听觉创伤之前和之后记录听力图。通过扫描电子显微镜的分析通过研究沿着耳蜗螺旋的细胞损失以及化合物(1)的保护作用完成该功能数据。
所有实验都在豚鼠中进行；根据类似的方案进行每一个实验。
实验期的一般方案如下-将动物用肌内注射的2％Rompun(3mg/kg)+Zoletil(40mg/kg)的混合物进行麻醉。该麻醉具有迅速消散的优点，并可通过规则地注射(每2个小时)初始剂量的三分之一而维持数小时。
-根据图2的电极和微型泵的放置。
通过背侧的途径接近耳蜗。在将头皮剃掉毛并清洁后，在耳廓后切一2cm的切口。覆盖鼓室泡的腮腺和肌肉被斜放。在干燥和清洁后，在它的上壁刺穿骨头，露出在下面的面神经。然后在手术显微镜(WILD M650)的控制下将有效电极(直径0.13mm的铂导线，用特氟隆包裹)导入泡内并与蜗窗的膜接触放置。在记录测量的听阈值后，在蜗窗下面的鼓阶的底转手工钻一直径为0.2mm的小孔。
使用第二台显微操纵器，将通过导管与微泵相连的玻璃移液管(顶端的直径为0.1mm)插入到耳蜗中。包括记录电极和灌注移液管在内的鼓室泡用牙科树脂进行封闭。
将微泵滑动到动物皮肤的下面，用聚维酮碘对肌肉和皮肤平面进行擦拭，用可吸收的缝线进行缝合并覆盖抗生素溶液(Rifocin 5P100)。
在头顶上切开约1.5cm的第二个切口以在动物颅骨上固定连接器(Connectral，ref.8/45-05.050.000)。在刮去骨膜后，仔细地干燥该区域，敷上硝酸银，然后用cyanolite膜覆盖。
将(有效和参比)电极滑动到皮下与连接器结合。然后将连接器用牙科树脂固定在颅骨上。
刺激技术使用两个Hewlett Packard合成器(HP 3314 A和HP8904 A)产生声音刺激，并通过距离耳朵10cm的扬声器(JBL 075)在自由声场中传递。使用1/2英寸麦克风(4134型，Bruel和Kjaer)和可直接以分贝SPL(dB SPL，参考2.10-5Pa)读出声音水平的测量放大器(2606型)，在人工耳中进行声系统的校准。为了显示声信号，测量放大器的输出与示波器相连。动物被暴露在6kHz、120dB SPL下30分钟。
记录技术使用前置放大器和GRASS P511 K型差分放大器，对通过经由固定于动物头部的连接器植入耳蜗的电极记录的耳蜗反应进行放大(增加1000倍)和过滤(32Hz-3200Hz)。直接的迹线显示在示波器上(Tektronix 513型)。对该信号进行平均(256个合格值)以降低背景噪音，并储存在66兆赫的486PC中(Hewlett-Packard-Vectra 05/65)。定义阈值标准为产生可测量的反应(＞2μV)必需的dB SPL值。与耳蜗(蜗窗)接触放置的两个电极可记录耳蜗的反应并产生每一只耳朵的听力图。在听觉创伤后每天记录20分钟的测量的听阈值，为期一个月。
在听觉创伤后钙激活中性蛋白酶活化的参与对钙激活中性蛋白酶的特异底物胞衬蛋白的切割进行定量，以确定在听觉创伤后钙激活中性蛋白酶的活化。钙激活中性蛋白酶切割240KD的胞衬蛋白以形成150KD的降解产物。用对150KD片断特异的多克隆抗体以及可鉴定听毛细胞的抗钙结合蛋白抗体进行双重标记。在共焦显微镜下显示荧光。
在听觉创伤后听毛细胞死亡的分子机理为了确定细胞死亡的本质，使用TUNEL方法对耳蜗细胞的DNA片断化进行了定量。
在听觉创伤后听毛细胞完整性的确定使用抗细胞色素C抗体通过免疫细胞化学确定耳蜗细胞的完整性。在健康细胞中，细胞色素C定位于线粒体。在听觉创伤后，细胞色素扩散并分布于胞浆。
1期作为预治疗施用的化合物(1)对听力减退和由创伤造成的沿着耳蜗螺旋的细胞损失的保护作用的证明方案-1期化合物(1)的预先施用放置在皮肤之下的渗透微型泵递送化合物(1)。
在微型泵植入两天后，经由导管(耳蜗内灌注)动物在耳蜗内进行听觉创伤。
为了确定剂量反应，本实验在7只动物中进行，然后在30只动物中进行。
经由在创伤前2天永久性植入耳蜗的渗透微型泵(1μl/h的流速，200μl的体积，扩散持续时间7天)，将化合物(1)直接应用于耳蜗内(耳蜗内灌注)。该技术可确定化合物(1)在100μM的剂量时对由创伤造成的沿着耳蜗螺旋的细胞损失的保护作用以及听力的功能性恢复作用。产品的剂量效应可确定保存50％听力的有效剂量。
1期结果100μM浓度的化合物(1)。
通过听力图测量功能实验。在听觉创伤后的听力减退和用化合物1保护。
120dB持续30分钟的创伤五天后，听力图的读数可证明化合物(1)的有效性；当以100μM的浓度在创伤前2天灌注时，该产品可恢复100％的听力(图3)。
形态学研究在听觉创伤后沿着耳蜗螺旋的细胞的组织学。化合物(1)的保护作用。
在电生理学评价(听力图)结束时，在听觉创伤后30天，对动物的耳蜗进行取样，并制备样品用于电子显微镜检查。
用扫描显微镜通过对睫状丛(ciliary tuft)进行计数以确定细胞的损失。通过进行科尔蒂(Corti)器表面的高放大观察以寻找定性数据。
在120dB持续30分钟的创伤后，内听毛细胞以及外听毛细胞的三排中的一些被损坏。这些细胞的组织学可证明化合物(1)的有效性。当在创伤前2天以100μM进行灌注时，该产品使得100％的内听毛细胞和大部分的外听毛细胞得到保护(图4组织学数据；照片A听觉创伤；照片B化合物(1)+听觉创伤；I＝内听毛细胞；O＝外听毛细胞)。
在听觉创伤后钙激活中性蛋白酶的活化的参与。用化合物1抑制。
钙激活中性蛋白酶的活化是通过该酶的特异底物胞衬蛋白降解成150KD片断的定量而确定的。
在对照的耳蜗细胞中从未检测到胞衬蛋白的切割。
在听觉创伤之后，由于钙激活中性蛋白酶的活化，来源于胞衬蛋白切割的150KD免疫标记物在外耳蜗细胞上由于用抗FBDP抗体(“胞衬蛋白分解产物”，绿色荧光；图5A在听觉创伤后48小时)标记而是可见的。在听觉创伤后钙激活中性蛋白酶活性的活化与耳蜗细胞的损失有关，该损失通过不存在抗钙结合蛋白抗体来显示，所述抗体可鉴定完整的听毛细胞。
局部应用100μM的化合物(1)——一种钙激活中性蛋白酶活化抑制剂抗氧剂，可预防暴露于听觉创伤的耳蜗细胞中钙激活中性蛋白酶对胞衬蛋白的切割。不存在绿荧光标记，所以钙激活中性蛋白酶的特异底物的无降解与耳蜗细胞的保护有关(用抗钙结合蛋白抗体标记；图5B)。
在听觉创伤后听毛细胞死亡的分子机理。化合物1的保护。
为了确定由听觉创伤造成的耳蜗细胞死亡的本质，在遭受听觉创伤的动物中进行DNA的片段化(通过TUNEL方法定量)。用该参数测试化合物1的作用，以确定它通过凋亡引起的细胞死亡这一机理参与。
在没有暴露于噪音的对照动物中获得的耳蜗中没有观察到任何“TUNEL阳性”细胞。
暴露于听觉创伤的耳蜗在科尔蒂器区域有TUNEL阳性细胞核(图6A在听觉创伤后48小时)。显著的核定位于科尔蒂器的较上区域。所以这些显著的核属于听毛细胞而不是支持细胞。许多显著的核在听觉创伤后一个小时是可见的，并且这一标记在听觉创伤4天后仍是可见的。所以，在听觉创伤后声毛细胞的细胞死亡经由与DNA的片段化有关的凋亡机理产生。
局部应用100μM的化合物(1)——一种钙激活中性蛋白酶活化抑制剂和抗氧剂，可预防声毛细胞核的标记(TUNEL方法，图6B化合物(1)-在听觉创伤后48小时)。化合物(1)抑制由听觉创伤造成的通过凋亡进行的细胞死亡。
在听觉创伤后听毛细胞完整性的损失。用化合物(1)保护。
为了确定在听觉创伤后听毛细胞完整性的损失，在遭受听觉创伤的动物中进行细胞色素C的扩散，该扩散是通过免疫细胞化学使用抗细胞色素C抗体进行的。
对细胞色素C从线粒体区室至胞浆区室的释放中试验化合物(1)，以确定该化合物(1)对听觉创伤后在听毛细胞的完整性损失的作用。
在未暴露于噪音的对照动物中获得的耳蜗中，细胞色素C定位于线粒体。
暴露于听觉创伤的耳蜗显示了在胞浆中扩散和分布的细胞色素C的标记(图7A)。
局部应用100μM的化合物(1)——一种钙激活中性蛋白酶活化抑制剂和抗氧剂，可预防暴露于听觉创伤的听毛细胞中细胞色素C从线粒体向胞浆的扩散，所以维持了细胞的完整性(图7B)。
化合物(1)的剂量反应曲线。
通过变动剂量以定义恢复听力损失的50％的有效剂量(ED50)，来评价化合物(1)的保护作用。每组5只动物的八个组包括仅接受人工外淋巴的那些动物以及接受1、3、10、33、100μM化合物(1)的那些动物，即，使用了30只动物。
在120dB的创伤持续30分钟后五天，听力图的读数可确定化合物(1)允许恢复创伤后听力损失的50％的有效剂量(ED50＝3.61μM)(图8)。
2期通过处理后耳蜗外灌注施用的化合物(1)对沿着耳蜗螺旋的细胞损失和听力减退的保护作用的证实。在创伤后，化合物(1)使得恢复50％听力所需时间的确定。
化合物(1)的后施用初步的研究已经表明在暴露后进行的耳蜗切开术加重了声音的创伤作用。从这一方面来说，创伤后被植入的动物不能恢复得象没有植入的动物一样好。为了消除与耳蜗切开术有关的创伤，我们已经开发了将化合物直接应用于蜗窗(耳蜗外)的非创伤性方法。
将渗透微泵植入皮下，在动物遭受听觉创伤后30分钟或1、3、6、12或24小时，渗透微泵通过导管将化合物(1)递送入耳蜗(耳蜗外灌注)。
在30只动物中进行本实验。
经由渗透微泵(流速1μl/h，200μl体积，扩散持续时间7天)，化合物(1)在创伤前48小时或创伤后1、3、6、12或24小时应用于中耳(耳蜗外灌注)。该微泵被永久性地植入中耳并将产品直接扩散到蜗窗上。
这些实验可确定化合物(1)的药物假期(DH)，即在创伤后可给予化合物(1)同时化合物(1)显示保护作用的最长时间。也确定在创伤后损失听力的50％恢复的有效时间(ET50)。该技术也允许确定在听觉创伤后一个月在300μM的剂量下化合物(1)对创伤造成的沿着螺旋耳蜗的细胞损失的保护作用。
2期结果在300μM浓度时的化合物(1)。
功能实验听力图。
在创伤后一个小时，化合物(1)维持了90％的听力。在创伤后给予化合物(1)与此同时维持听力的50％的时间被确定为在6至7小时之间。在120db持续30分钟的听觉创伤后化合物(1)的治疗窗是24小时。这意味着在本模型中在听觉创伤后第一个24小时化合物(1)是有活性的(参阅图9在听觉创伤后10天进行的听力图测定)。
形态学研究在听觉创伤后一个月沿着耳蜗螺旋的细胞的组织学。
在听觉创伤后六小时开始的300μM化合物(1)的耳蜗外灌注在听觉创伤后的一个月仍然保护了大部分听毛细胞。事实上，在由听觉创伤损伤的区域，只有32％的内听毛细胞和18％的外听毛细胞不存在了，与此形成对比的是，在由听觉创伤损伤的区域，暴露于噪音但没有用化合物(1)进行治疗的对侧面有86％的内听毛细胞和62％的外听毛细胞不存在了。
权利要求
1.以非对映异构体形式或这些形式的任意组合形式存在的对应于式(I)的杂环衍生物用于制备预防和/或治疗听力减退的药物的用途， 其中R代表氢原子、(C1-C6)烷基、芳基烷基或-C(O)R’基，其中R’代表杂环烷基、(C1-C6)烷基、芳基或芳烷基；烷基、芳基或杂环烷基任选被选自(C1-C6)烷基、羟基、(C1-C6)烷氧基、硝基、氰基、卤素或-NR1R2的一个或多个相同或不同的取代基所取代；R1和R2独立地代表氢原子或(C1-C6)烷基，或R1和R2与它们所连接的氮原子形成任选被取代的杂环。
2.根据权利要求1的用途，其特征在于R代表-C(O)R’。
3.根据权利要求2的用途，其特征在于R’代表烷基。
4.根据权利要求3的用途，其特征在于R代表-C(O)-CH3。
5.根据权利要求1的用途，其特征在于R代表氢。
6.根据前面权利要求之一的用途，其特征在于化合物(I)具有下式的结构
7.根据权利要求6的用途，其特征在于化合物(I)具有下式的结构
8.根据权利要求6的用途，其特征在于化合物(I)具有下式的结构
9.根据权利要求1至5的一项的用途，其特征在于化合物(I)具有下式的结构
10.根据权利要求8的用途，其特征在于化合物(I)具有下式的结构
11.根据权利要求8的用途，其特征在于化合物(I)具有下式的结构
12.根据前述权利要求之一的用途，其特征在于衍生物(I)以预先治疗施用。
13.根据权利要求1至11的一项的用途，其特征在于衍生物(I)以后治疗施用。
14.根据前述权利要求之一的用途，用于制备在药物施用后预防和/或治疗听力减退的药物。
15.根据权利要求14的用途，在选自抗生素、抗癌药、非甾体抗炎剂、利尿剂、抗溃疡药、抗惊厥剂的其他药物施用后施用。
16.根据权利要求15的用途，在抗生素施用后施用。
17.根据权利要求16的用途，其特征在于抗生素是庆大霉素。
18.根据权利要求1至13的一项的用途，用于制备在老年性耳聋后预防和/或治疗听力减退的药物。
19.根据权利要求1至13的一项的用途，用于制备在听觉创伤后预防和/或治疗听力减退的药物。
20.根据权利要求19的用途，其特征在于化合物(I)在听觉创伤后7小时内施用，优选在听觉创伤后1小时内施用。
21.根据前述权利要求的一项的用途，其特征在于化合物(I)与至少一种具有药学活性的其他物质组合。
22.根据前述权利要求的一项的用途，其特征在于化合物(I)与至少一种具有药学活性的其他物质组合使用，该物质能够预防和/或治疗听力减退或预防和/或治疗与听力减退有关的任何病理。
23.根据权利要求21至22的一项的用途，其特征在于具有药学活性的其他物质选自抗氧化剂、钙激活中性蛋白酶抑制剂、外周血管扩张剂、NMDA受体的激动剂或拮抗剂、c-Jun N末端激酶的肽抑制剂。
24.包含权利要求1至11中的一项所定义的式(I)杂环衍生物和至少一种具有治疗活性的物质的产品，其作为组合产品同时、分别或跨越一段时间用以预防和/或治疗听力减退。
25.根据权利要求24的产品，其用于预防和/或治疗在药物施用后的听力减退。
26.根据权利要求25的产品，其用于预防和/或治疗在抗生素，优选庆大霉素施用后的听力减退。
27.根据权利要求24的产品，其用于预防和/或治疗在老年性耳聋后的听力减退。
28.根据权利要求24的产品，其用于预防和/或治疗在听觉创伤后的听力减退。
29.权利要求24至28中的一项所定义的产品，其用作药物。
全文摘要
本发明涉及式(I)的吩噻嗪衍生物用于制备预防和/或治疗听力减退的药物的用途，其中R代表氢原子、烷基、芳基烷基或－C(O)R’。
文档编号A61P27/16GK1933840SQ200580009139
公开日2007年3月21日 申请日期2005年3月25日 优先权日2004年3月29日
发明者B·彼格诺尔, J-L·普尔, S·欧文, P-E·卡波黑尔德拉瑟尼赫, 王静 申请人:科学研究和应用咨询公司