专利名称：作为β－分泌酶抑制剂的二苯基咪唑并嘧啶胺和二苯基咪唑并咪唑胺的制作方法
技术领域：
无
背景技术：
主要与老化相关的脑部进行性退化疾病阿兹海默氏病(Alzheimer′s disease(AD))是一种严重的健康问题。AD在临床上的特征为记忆、认知力、推理、判断和定向能力的丧失。随着疾病的发展，运动、感知和语言能力也受到影响，直至出现多种认知功能的全部损伤。这些认知力的丧失是逐渐发生的，但通常在4-12年内导致严重损伤且最终导致死亡。罹患AD的患者在脑部和脑血管中显示出特有的β淀粉样沉积物(β淀粉样血管病)以及神经原纤维缠结(neurofibrillary tangle)。淀粉样斑块和血管淀粉样血管病也表现罹患21三体症(Trisomy 21)(唐氏综合症(Down′s Syndrome))、遗传性脑出血伴Dutch型淀粉样变性病(HCHWA-D)和其他神经退化性病症的患者的脑部的特征。神经原纤维缠结也出现于其他诱发痴呆的病症中。
人们认为称作β淀粉样蛋白的蛋白家族是引起阿兹海默氏病的病理和随后认知力减退的原因。淀粉样前体蛋白(APP)的蛋白水解加工产生淀粉样β(A-β)肽；详细说来，A-β是通过由β分泌酶裂解APP的N末端且由一种或一种以上γ分泌酶裂解其C末端而产生。天冬氨酰蛋白酶或β分泌酶(BACE)的活性直接与自APP产生A-β肽相关(Sinha等人，Nature，1999.402，537-540)。越来越多的研究表明抑制β分泌酶将抑制A-β肽的产生。β分泌酶的抑制和随后A-β肽的减少可导致脑中β淀粉样沉积物和脑血管中β淀粉样蛋白含量的降低，且有效治疗由此引起的疾病或病症。
因此，本发明的目的是提供作为β分泌酶抑制剂且可用作治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的治疗剂的化合物。
本发明的另一目的是提供可用于治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的治疗方法和医药组合物。
本发明的特征在于，所提供的化合物也可用于进一步研究和阐明β分泌酶。
本发明的这些和其他目的和特征将由于下文陈述的详细描述而变得更加明显。
发明内容
本发明提供一种式I的咪唑并嘧啶或咪唑并咪唑胺 其中X为N、NO或CR19；Y为N、NO或CR11；Z为N、NO或CR20，其限制条件为X、Y或Z中不超过两者可为N或NO；R1和R2各自独立地为H、CN或视情况经取代的C1-C4烷基；R3和R4各自独立地为H或视情况经取代的C1-C4烷基，或R3和R4可合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的3元至7元环，或R3可与其所连接的原子和相邻碳原子合起来形成一双键；R5和R6各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR13、NR14R15，或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基，或当连接至相邻碳原子时，R5和R6可与其所连接的原子合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的视情况经取代的5元至7元环；R7、R8、R9、R10、R11、R19和R20各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR16、NR17R18，或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基；m为0或1；n为0、1、2或3； 为单键或双键，其限制条件为当m为0时，则 必须为单键；R12、R13和R16各自独立地为H或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基或芳基；且R14、R15、R17和R18各自独立地为H或C1-C4烷基；或其互变异构体、其立体异构体或其医药学上可接受的盐。
本发明也提供可用于治疗、预防或改善患者以增加的β淀粉样沉积物或增加的β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的治疗方法和医药组合物。
无
具体实施例方式
阿兹海默氏病(AD)是一种主要的脑部退化性疾病，其在临床上表现为记忆力、认知、推理、判断和情绪稳定性的进行性丧失，且逐渐导致极重度心智衰退和死亡。引起AD的确切原因尚未明晰，但越来越多的证据表明淀粉样β肽(A-β)在疾病的发病机理中起到重要作用(D.B.Schenk、R.E.Rydel等人，Journal of Medicinal Chemistry，1995.21，4141和P.J.Selkoe.Physiology Review.2001.81.741)。罹患AD的患者显示出特有的神经病理性标记，诸如在尸体解剖时在脑中检测到神经炎斑(且在β淀粉样血管病中为脑血管中的沉积物)以及神经原纤维缠结。A-β为AD脑中神经炎斑的主要组份。此外，β-淀粉样沉积物和血管β淀粉样血管病也表现罹患唐氏综合症、遗传性脑出血伴Dutch型淀粉样变性病和其他神经退化性病症和诱发痴呆的病症的个体的特征。淀粉样前体蛋白(APP)的过度表达、APP裂解成A-β的改变或自患者脑部清除A-β的减少可增加脑中可溶或原纤维(fibrullar)形式的A-β的含量。APPβ位点裂解酶BACE1(也称为memapsin-2或Asp-2)已在1999年经识别(R.Vassar、B.D.Bennett，等人，Nature，1999.402，537)。BACE1是具有β分泌酶的所有已知功能特性和特征的膜结合天冬氨酸蛋白酶。与BACE1相似，已发现名为BACE2的第二种同源天冬氨酰蛋白酶在活体外具有β分泌酶活性。迫切地寻求BACE1或β分泌酶的与底物无关的低分子量、非肽抑制剂作为对β分泌酶研究的辅助且作为潜在治疗剂。
意外的是，现已发现式I的二苯基咪唑并嘧啶胺或二苯基咪唑并咪唑胺化合物经证实抑制β分泌酶且选择性抑制BACE1。所述嘧啶胺或咪唑胺化合物可有利地用作治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的有效治疗剂。因此，本发明提供一种式I的咪唑并嘧啶或咪唑并咪唑胺化合物
其中X为N、NO或CR19；Y为N、NO或CR11；Z为N、NO或CR20，其限制条件为X、Y或Z中不超过两者可为N或NO；R1和R2各自独立地为H、CN或视情况经取代的C1-C4烷基；R3和R4各自独立地为H或视情况经取代的C1-C4烷基，或R3和R4可合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的3元至7元环，或R3可与其所连接的原子和相邻碳原子合起来形成双键；R5和R6各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR13、NR14R15，或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基，或当连接至相邻碳原子时，R5和R6可与其所连接的原子合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的视情况经取代的5元至7元环；R7、R8、R9、R10、R11、R19和R20各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR16、NR17R18，或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基；m为0或1；n为0、1、2或3； 为单键或双键，其限制条件为当m为0时，则 必须为单键；R12、R13和R16各自独立地为H或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基或芳基；且R14、R15、R17和R18各自独立地为H或C1-C4烷基；或其互变异构体、其立体异构体或其医药学上可接受的盐。
X为N、NO或CR19；优选N或CR19，更优选N。Y为N、NO或CR11；优选CR11。Z为N、NO或CR20，优选CR20。符号m为0或1，优选1。R7、R8、R9、R10、R11、R19和R20各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR16、NR17R18，或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基；优选H或卤素。 为单键或双键，优选双键。含有X、Y和Z的环取代苯基，优选在其3位上进行取代。连接至苯基的含有X、Y和Z的环的环成员优选为连接至Y和Z的碳原子。
R1和R2各自独立地为H、-CN或视情况经取代的C1-C4烷基，优选H或视情况经取代的C1-C4烷基，更优选H、C1-C4烷基或经卤素取代的经取代C1-C4烷基，有利地为H。
R3和R4各自独立地为H或视情况经取代的C1-C4烷基，或R3和R4可合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的3元至7元环，或R3可与其所连接的原子和相邻碳原子合起来形成双键。R3和R4优选各自独立地为H或C1-C4烷基，或当与其所连接的碳原子合起来时形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的3元至7元环(有利地为3元至5元环)。所述环更优选为碳环或含有一个选自O、N或S(有利地为O)的杂原子。有利地，R3和R4各自独立地为H，或当与其所连接的碳原子合起来时形成上述环。符号n为0、1、2或3，优选0、1或2，有利地为1。
R5和R6优选各自独立地为H、卤素、CN、OR13，或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基或C3-C8环烷基，或当连接至相邻碳原子时，R5和R6可与所述相邻碳原子合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的视情况经取代的5元至7元环，所述环优选含有两个氧原子作为杂原子。R5和R6更优选各自独立地为H、卤素、CN、OR13或C1-C6烷基、C1-C6卤烷基或C3-C8环烷基，或当连接至相邻碳原子时，R5和R6可与所述相邻碳原子合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的5元至7元环，所述环视情况经1、2或3个卤素原子取代。有利地，R5和R6的至少一者为OR13，或当R5和R6合起来时表示视情况经一个或一个以上卤素原子取代的二价基团，即亚甲基二氧基或亚乙基二氧基。R13为H或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基或芳基，优选经0、1、2或3个独立地选自下列基团的取代基取代的C1-C6烷基卤素原子、硝基、氰基、硫代氰氧基、氰氧基、羟基、烷基、卤烷基、烷氧基、卤烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、甲酰基、烷氧羰基、羧基、烷氧羰基、烷酰基、烷酰氧基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、氨甲酰基、烷基酰胺基、苯基、苯氧基、苯甲基、苯甲氧基、杂环基和环烷基。
如本说明书和权利要求所使用的术语卤素指示F、Cl、Br或I，且术语环杂烷基指示含有一或两个选自N、O或S的可相同或不同的杂原子且视情况含有一个双键的五元至七元环烷基环系统。如本文所述的术语中所包括的例示性环杂烷基环系统为下述环，其中X1为NR、O或S且R为H或下文所述的可选取代基 类似地，如本说明书和权利要求中所使用的术语杂芳基指示含有1、2或3个选自N、O或S的可相同或不同的杂原子的五元至十元芳环系统。所述杂芳基环系统包括吡咯基、唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并异噁唑基或其类似基团。术语芳基指示碳环芳环系统，诸如苯基、萘基、蒽基或其类似基团。术语芳基(C1-C4)烷基指示如上文所定义的连接至可为直链或支链的C1-C4烷基的芳基。所述芳基(C1-C4)烷基包括苯甲基、苯乙基、萘基甲基或其类似基团。如本文所使用的术语卤烷基指示具有1至2n+1个可相同或不同的卤素原子的CnH2n+1基团，且如本文所使用的术语卤烷氧基指示具有1至2n+1个可相同或不同的卤素原子的OCnH2n+1基团。术语卤烷基优选指示CF3且术语卤烷氧基优0选指示OCF3。
在本说明书和权利要求中，当指示术语C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、环杂烷基、芳基、芳基(C1-C4)烷基或杂芳基视情况经取代且其中指示通过将R5和R6与R5和R6连接的原子合起来所形成的5元至7元环视情况经取代时，视情况存在的取代基可为通常用于研发医药化合物或改质所述化合物以影响其结构/活性、持续性、吸收、稳定性或其他有益特性的一种或一种以上取代基。所述取代基的特定实例包括卤素原子、硝基、氰基、硫代氰氧基、氰氧基、羟基、烷基、卤烷基、烷氧基、卤烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、甲酰基、烷氧羰基、羧基、烷酰基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、氨甲酰基、烷基酰胺基、苯基、苯氧基、苯甲基、苯甲氧基、杂环基或环烷基，优选卤素原子或低碳烷基或低碳烷氧基。通常可存在0至3个取代基。当任一前述取代基表示或含有烷基取代基时，其可为直链或支链，且可含有多达12个、优选多达6个、更优选多达4个碳原子。
医药学上可接受的盐可为任何由式I的化合物与医药学上可接受的酸(例如磷酸、硫酸、氢氯酸、氢溴酸、柠檬酸、顺丁烯二酸、丙二酸、扁桃酸、琥珀酸、反丁烯二酸、乙酸、乳酸、硝酸、磺酸、对甲苯磺酸、甲烷磺酸或其类似酸)所形成的酸加成盐。
本发明的化合物包括酯、氨基甲酸酯或其他常规前药形式，其一般为本发明化合物的官能性衍生物且其易于在活体内转化成本发明的活性部分。因此，本发明的方法包括用式I的化合物或未特别揭示但投药后在活体内转化成式I化合物的化合物治疗上文所述的各种病况。也包括定义为将这些化合物引入生物系统中后所产生的活性物质的本发明化合物的代谢物。
本发明的化合物可以一种或一种以上互变异构体的形式存在。所属领域的技术人员将认识到式I的化合物也可以如下所示的互变异构体It存在。
互变异构体通常以彼此之间的平衡存在。当这些互变异构体在环境和生理学条件下互相转化时，其提供相同有用的生物作用。本发明包括所述互变异构体的混合物以及式I和式It的个别互变异构体。
本发明的化合物可含有一个或一个以上的不对称碳原子或一个或一个以上的不对称(手性)中心，且因此可产生光学异构体和非对映异构体。因此，本发明包括所述光学异构体和非对映异构体，以及外消旋和已解析的对映异构纯立体异构体，以及R和S立体异构体的其他混合物。所属领域的技术人员将了解，当相对于另一种(其他)立体异构富含体一种立体异构体时或当一种立体异构体与另一种(其他)立体异构体分离时，其可更具活性或可显示出有益作用。此外，所属领域技术人员了解如何分离、富集或选择性制备所述立体异构体。因此，本发明包含式I的化合物、其立体异构体、其互变异构体及其医药学上可接受的盐。本发明的化合物可以立体异构体的混合物、个别立体异构体或光学活性或对映异构纯的形式存在。
本发明的立体异构体包括其中式I为式IA的化合物和其中式I为式IB的化合物。
本发明的优选化合物为那些R1和R2为H的式I的化合物。本发明的另一组优选化合物为那些m和n为1的式I的化合物。也优选那些X为N的式I的化合物。本发明的又一组优选化合物为那些含氮5元或6元杂芳环以连接苯环3位的方式连接至苯环的式I的化合物；所述优选组的式I化合物在本说明书和权利要求中称为式Ia。式Ia的化合物如下所示。
本发明的更优选化合物为那些含氮杂芳基环为6元环且以连接所述杂芳基环3位的方式连接至苯环的式Ia的化合物，所述更优选组的式I化合物在本说明书和权利要求中称为式Ib。式Ib如下所示。
本发明的另一组更优选化合物为那些R1和R2为H的式Ib的化合物。本发明的又一组更优选化合物为那些Y为CR11且R1和R2为H的式Ib的化合物。
式I的优选化合物的实例包括8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；7-(3-嘧啶-5-基苯基)-7-[4-(三氟甲氧基)苯基]-7H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-胺；8-[4-氟-3-(4-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(5-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(5-氯吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8S)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8R)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8R)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8S)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(4-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；
8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(4-甲氧基苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-(4-甲氧基苯基)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-(4-氟-3-嘧啶-5-基苯基)-8-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[4-氟-3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-(4-氟-3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[4-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[4-氟-3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；其互变异构体、其立体异构体或其医药学上可接受的盐。
有利地，本发明提供一种制备式I的化合物的方法，其包含使其中Hal为Cl或Br的式II的化合物与其中W为B(OH)2、Sn(Bu)3或Sn(CH3)3的式III的化合物在钯催化剂和无机碱存在下视情况在溶剂存在下反应。所述方法显示于流程图I中，其中Hal和W如上文所定义。
流程图I 适用于本发明的方法中的钯催化剂包括Pd(O)或Pd(II)催化剂，诸如二氯双(三-邻甲苯基膦)钯(II)、Pd(OCOCH3)2/三-邻甲苯基膦、肆(三苯基膦)钯(O)、三(二亚苯甲基丙酮)二钯(O)三苯基膦或其类似物。
适用于本发明的方法中的无机碱包括钠或钾的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，优选Na2CO3或K2CO3。
适用于本发明的方法中的溶剂包括极性或非极性有机溶剂，诸如甲苯、二乙氧基乙基醚、二噁烷、乙二醇二甲醚，或能够溶解式II或式III的化合物的任何非反应性有机溶剂。
式II的化合物可使用常规合成方法和(若需要)标准分离或离析技术来制备。举例而言，其中R1和R2为H的式II的化合物(IIa)可通过以下步骤制备使式IV的酮与式V的苯基溴化镁在催化剂(诸如CuI)存在下反应以得到式VI的1，1，1-三取代甲醇化合物；使所述式VI的甲醇继续与亚硫酰氯和氨反应以得到相应的式VII的甲胺；且使所述式VII的胺与溴化氰在乙腈存在下反应以得到所需式IIa产物。反应显示于流程图II中，其中Hal为Cl或Br。
流程图II 式IV的酮可使用常规技术制备，例如通过使式VIII的苯甲酰基卤化物与式IX的咪唑或四氢嘧啶在碱(诸如NaOH)存在下反应来制备，或通过用氧化剂(MnO2)氧化式X的适当甲醇化合物来制备。所述反应显示于流程图III中。
流程图III 式X的化合物可通过以下步骤制备使式XI的苯甲醛与NaHSO3和NaCN反应以得到相应的式XII的氰基甲醇；使所述式XII的化合物与乙醇和HCl反应以得到式XIII的亚胺酯；且使所述式XIII的化合物与式XIV的二胺反应以得到所需的式X的甲醇衍生物。反应展示于流程图IV中，其中Hal为Cl或Br。
流程图IV
可使用上文流程图I中所述的程序将式IIa的化合物转化成相应的式I的化合物，其中R1和R2为H。
可使用标准烷基化技术制备其中R1和R2不为H的式I的化合物，诸如使其中R1和R2为H的式I的化合物与烷基卤化物R1-Hal反应得到其中R2为H的式I的化合物(Id)，且视情况使所述式Id的化合物与第二烷基卤化物R2-Hal反应得到所需的其中R1和R2不为H的式I的化合物。
有利地，本发明的化合物可用于治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症，所述疾病或病症包括阿兹海默氏病、唐氏综合症、遗传性脑出血伴Dutch型淀粉样变性病或其他神经退化性病症或诱发痴呆的病症。因此，本发明提供一种用于治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的方法，所述方法包含向所述患者提供治疗有效量的如上文所述的式I的化合物。所述化合物可通过经口或非经肠投药或以已知将治疗剂有效投与有此需要的患者的任何常用方式提供。
如本文关于提供本发明所包括的化合物或物质所使用的术语“提供”指示直接投与所述化合物或物质或投与在体内形成等量所述化合物或物质的前药、衍生物或类似物。
为治疗特定CNS病症所提供的治疗有效量可根据治疗的特定病况、患者的体格、年龄和反应模式、病症的严重程度、主治医生的判断及其类似因素而变化。一般说来，每日经口投药的有效量可为约0.01至1,000mg/kg，优选为约0.5至500mg/kg，且非经肠投药有效量可为约0.1至100mg/kg，优选为约0.5至50mg/kg。
在实际实践中，本发明的化合物是通过投与纯的或与一种或一种以上常规医药载剂或赋形剂组合的固体或液体形式的化合物或其前体来提供。因此，本发明提供一种医药组合物，其包含医药学上可接受的载剂和有效量的如上文所述的式I的化合物。
适用于本发明的组合物中的固体载剂包括也可充当调味剂、润滑剂、增溶剂、悬浮剂、填充剂、助流剂、压缩助剂、粘合剂、片剂崩解剂或胶囊密封材料的一种或一种以上物质。在粉剂中，载剂可为磨碎的固体，其存在于与磨碎的式I的化合物的混合物中。在片剂中，式I化合物可与具有所需压缩特性的载剂以适当比例混合并压实成所需的形状和尺寸。所述粉剂和片剂可含有高达99重量％式I的化合物。适用于本发明的组合物中的固体载剂包括磷酸钙、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、糊精、淀粉、明胶、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、低熔点蜡和离子交换树脂。
适于制备溶液、悬浮液、乳液、糖浆和酒剂的任何医药学上可接受的液体载剂都可用于本发明的组合物中。式I的化合物可溶解或悬浮于医药学上可接受的液体载剂(诸如水、有机溶剂或医药学上可接受的油或脂肪，或其混合物)中。所述液体组合物可含有其他适当的医药添加剂，诸如增溶剂、乳化剂、缓冲液、防腐剂、甜味剂、调味剂、悬浮剂、增稠剂、着色剂、粘度调节剂、稳定剂、渗透调节剂或其类似物。适于经口和非经肠投药的液体载剂的实例包括水(尤其含有如上所述的添加剂，例如纤维素衍生物，优选羧甲基纤维素钠溶液)、醇(包括一元醇和多元醇，例如甘油)或其衍生物，或油(例如经分馏的椰子油和花生油)。就非经肠投药而言，载剂也可为油状酯，例如油酸乙酯或十四烷酸异丙酯。
本发明的组合物的无菌溶液或悬浮液适于肌内、腹膜内或皮下注射。无菌溶液也可经静脉内投与。适于经口投与的本发明的组合物可为液体或固体组合物的形式。
另外，可能需要使用持续传递装置以避免患者每日服药的必要性。“持续传递”的定义为延缓活性剂(亦即本发明的化合物)的释放直至放置于传递环境中后接着在一稍后的时间持续释放药剂。所属领域的技术人员了解适当的持续传递装置。适当的持续传递装置的实例包括(例如)水凝胶(例如参见美国专利第5,266,325号、第4,959,217号和第5,292,515号)、渗透泵(诸如Alza(美国专利第4,295,987号和第5,273,752号)或Merck(欧洲专利第314,206号)所述)、疏水膜材料(诸如甲基丙烯酸乙二酯(EMA)和乙烯乙酸乙二酯(EVA))、生物可再吸收聚合物系统(例如参见国际专利公开案第WO98/44964号(Bioxid和Cellomeda)、美国专利第5,756,127号和第5,854,388号)；也已描述其他生物可再吸收植入装置是由(例如)聚酯、聚酐或乳酸/乙醇酸共聚物(例如参见美国专利第5,817,343号(Alkermes Inc.))构成。为用于所述持续传递装置中，可如本文所述调配本发明的化合物。
另一方面，本发明提供一种用于传递产品的医药试剂盒。所述试剂盒适当地含有具有调配用于所需传递路径的化合物的包装或容器。举例而言，如果试剂盒是设计用于通过吸入投药，则其可含有悬浮液，所述悬浮液含有调配用于通过吸入由气雾剂或喷雾传递的预定剂量的本发明化合物。试剂盒适当地含有关于给药的说明和有关活性剂的插页。试剂盒可视情况另外含有有关监测用于进行包括(例如)试剂、孔板、容器、标记或标签及其类似物的此类检定的产品和材料的循环量的说明。所述试剂盒易于以适于治疗所需的适应症的方式包装。举例而言，试剂盒也可含有有关使用喷雾泵或其他传递装置的说明。
考虑到所需的适应症和传递路径，所述试剂盒的其他适当组件将为所属领域技术人员显而易见。可每日、每周或每月重复剂量持续一段预定或如处方所示的时间长度。
为更清晰了解且更清晰说明本发明，下文将描述本发明的特定实例。以下实例仅为说明且不应将其理解为以任何方式限制本发明的范畴和基本原理。实际上，除本文所示和所述者外，本发明的各种修改也会因下文所述的实例和上文描述而对所属领域技术人员变得显而易见。所述修改也意欲处于随附权利要求的范畴内。
除非另外说明，否则所有份数为重量份。术语NMR指示核磁共振。术语THF和DMF分别指示四氢呋喃和二甲基甲酰胺。
实例12-(3-溴苯甲酰基)-1H-咪唑的制备 用3-溴苯甲酰氯(17.5g，79.9mmol)处理处于0℃的咪唑(2.66g，39.1mmol)和三乙胺(Et3N)(8.03g，79.4mmol)在吡啶中的溶液，搅拌5min，将其温至室温历时45min，用氢氧化钠水溶液(7.5N，20mL，150mmol)加以处理，回流温度下加热2h，将其冷却至室温，用水稀释，用冰浴进一步冷却1h并过滤。用水洗涤滤饼，并在真空中于50℃下干燥整夜以提供呈浅茶色固体状的标题化合物4.89g(产率50％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.58(br s，1H)，8.73(t，J＝1.8Hz，1H)，8.61(dt，J＝7.8，1.2Hz，1H)，7.75-7.72(m，1H)，7.42-7.38(m，2H)，7.32(s，1H)；ESI MS m/z 250[C10H7BrN2O+H]+。
实例21-(3-溴苯基)-1-(咪唑-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)-苯基]-甲醇的制备
用1-溴-4-(三氟甲氧基)苯(6.32g，26.2mmol)在THF中的溶液逐滴处理处于50℃的镁(0.644g，87.7mmol)在THF(13mL)中的混合物，历时5min时期，在50℃下再搅拌1.5h，将其冷却至室温，用碘化铜(I)(0.041g，0.215mmol)和2-(3-溴苯甲酰基)-1H-咪唑(2.60g，10.4mmol)在THF中的溶液加以处理，65℃下加热整夜，将其冷却至室温并用1∶1∶1的乙酸乙酯、水和饱和氯化铵水溶液的混合物稀释。分离相，并用乙酸乙酯萃取水相。用硫酸钠干燥已合并的有机萃取液，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，85∶15至75∶25的己烷/乙酸乙酯作为洗脱液)纯化所得残余物得到呈黄色固体状的标题化合物3.47g(产率81％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.98(br s，1H)，7.55(t，J＝1.6Hz，1H)，7.45(dt，J＝8.1，1.9Hz，1H)，7.37-7.34(m，2H)，7.24-7.20(m，2H)，7.18(d，J＝8.1Hz，2H)，7.07(brs，1H)，6.98(brs，1H)，4.30(brs，1H)；ESIMS m/z 412[C17H12BrF3N2O2+H]+。
实例31-(3-溴苯基)-1-(咪唑-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)苯基]甲胺的制备 80℃下，加热1-(3-溴苯基)-1-(咪唑-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)-苯基]甲醇(1.89g，4.57mmol)和亚硫酰氯(2.13g，17.9mmol)在苯中的混合物3h，将其冷却至室温，并在真空中浓缩至干。使此橙色固体残余物分散于异丙醇中，在冰浴温度下用氨气鼓泡直至溶液饱和。在密封管中，在35℃下加热此氨饱和溶液整夜，将其冷却至室温，浓缩并使其在氯仿(50mL)与1 N HCl(50mL)之间分溶。分离相，并用额外的1 N HCl洗涤有机相。将合并的HCl洗涤液冷却至0℃，通过加入固体氢氧化钠将其碱化至pH＞10，并用氯仿萃取。用硫酸钠干燥已合并的氯仿萃取液，过滤并浓缩得到呈浅黄色固体状的标题化合物1.68g(产率89％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CDCI3)δ9.12(br s，1H)，7.51(t，J＝1.2Hz，1H)，7.44-7.41(m，1H)，7.35-7.31(m，2H)，7.22-7.19(m，2H)，7.18-7.15(m，2H)，7.15(t，J＝1.5Hz，1H)，6.97(t，J＝1.7Hz，1H)，2.48(brs，2H)；ESIMS m/z 412[C17H13BrF3N3O+H]+。
实例47-(3-(溴苯基)-7-[4-(三氟甲氧基)苯基]-7H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-基胺的制备 在密封管中，在100℃下加热1-(3-溴苯基)-1-(咪唑-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)-苯基]甲胺(1.67g，4.05mmol)和溴化氰(1.75g，16.5mmol)在乙腈中的混合物整夜，将其冷却至室温并浓缩。通过快速色谱法(硅石，96∶4∶0.5的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵，随后85∶15至50∶50的己烷/乙酸乙酯作为洗脱液)纯化所得残余物两次得到呈黄色固体状的标题化合物0.671g(产率38％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CDCI3)δ7.61(t，J＝1.6Hz，1H)，7.53-7.48(m，2H)，7.46-7.41(m，3H)，7.27-7.22(m，4H)；ESI MSm/z 437[C18H12BrF3N4O+H]+。
实例57-[(3-(嘧啶-5-基)苯基)-7-[4-(三氟甲氧基)苯基]-7H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-基胺的制备 在100℃下，加热7-(3-(溴苯基)-7-[4-(三氟甲氧基)苯基]-7H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-基胺(0.201g，0.460mmol)、5-嘧啶硼酸(0.073g，0.587mmol)、双(三苯基膦基)氯化钯(II)(0.016g，0.0232mmol)、三苯基膦(0.012g，0.047mmol)和碳酸钾(0.189g，1.37mmol)在5∶1的二噁烷/水中的混合物3.5h，将其冷却至室温并浓缩。通过快速色谱法(硅石，96∶4∶0.5的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵作为洗脱液)纯化所得残余物得到呈灰白色固体状的标题化合物0.037g(产率19％)，熔点120℃-130℃，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CD3OD)9.12(s，1H)，9.02(s，2H)，7.81(s，1H)，7.67-7.62(m，2H)，7.56-7.51(m，3H)，7.47(d，J＝1.1Hz，1H)，7.27(d，J＝1.5Hz，1H)，7.23(d，J＝8.3Hz，2H)；IR(ATR)3143，1672，1505，1443，1414，1253，1216，1159，791，723cm″1；ESI MS m/z 437[C22H15F3N6O+H]+。
实例61-(3-溴-4-氟苯基)-1-氰基甲醇的制备 用3-溴-4-氟苯甲醛(45.8g，225mmol)处理处于50℃的亚硫酸氢钠(28.3g，271mmol)水溶液，在50℃下搅拌2h，用冰浴冷却，用乙醚稀释，用氰化钠(12.2g，248mmol)水溶液逐滴加以处理历时30min时期，并在室温下搅拌整夜。分离反应混合物，且用乙醚萃取水相。使萃取液与有机相组合，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩至干，得到呈澄清油状的标题化合物47.6g(产率92％)，通过NMR分析加以识别。1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.75(m，1H)，7.47(m，1H)，7.23(m，1H)，5.54(m，1H)，3.19(m 1H)。
实例72-(3-溴-4-氟苯基)-2-羟基乙烷亚氨酸乙酯盐酸盐的制备 用冰浴冷却1-(3-溴-4-氟苯基)-1-氰基甲醇(47.5g，206mmol)和乙醇(10.9g，237mmol)在乙醚中的溶液，并用HCl(258mL的1.0M于乙醚中的溶液，258mmol)逐滴处理历时40min时期，在冰浴温度下搅拌2h，在0℃下存储6天，温至室温，用己烷稀释并过滤。干燥滤饼得到呈白色固体状的标题化合物39.8g(产率62％)，通过NMR和质谱分析加以识别。标题化合物为E和Z型异构体的混合物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.78(m，1H)，7.49(m，1H)，7.28(m，1H)，5.54和5.17(2m，1H)，4.45和4.15(2m，2H)，1.38和1.20(2t，3H)；ESI MS m/z 261[C10H11BrFNO2+H]4。
实例81-(3溴-4-氟苯基)-1-(2-四氢嘧啶基)甲醇的制备 在密封管中，在120℃下加热2-(3-溴-4-氟苯基)-2-羟基乙烷亚氨酸乙酯盐酸盐(39.8g，127mmol)和1，3-二氨基丙烷(9.43g，127mmol)在乙醇中的混合物整夜，将其冷却至室温，浓缩以移除溶剂，用水稀释，用力搅拌1h并过滤。用冰浴冷却滤液，用1 N NaOH使其呈强碱性，在冰浴中冷却1h并过滤。干燥滤饼得到呈白色固体状的标题化合物23.4g(产率64％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.59(m，1H)，7.30(m，1H)，7.10(t，J＝8.4Hz，1H)，4.79(s，1H)，3.35(m，4H)，1.76(m，2H)；ESI MS m/z287[C11H12BrFN2O+H]+。
实例92-(3-溴-4-氟苯甲酰基)-2.3，4，5-四氢嘧啶的制备 在室温下，搅拌1-(3-溴-4-氟苯基)-1-(2-四氢嘧啶基)甲醇(23.4 g，81.5mmol)和二氧化锰(70.8g，815mmol)在二氯甲烷中的混合物3天，并通过硅藻土过滤。用氯仿洗涤滤饼。合并滤液，并浓缩至干以得到呈黄绿色固体状的标题化合物18.9g(产率81％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CDCI3)δ8.51(m，1H)，8.23(m，1H)，7.15(t，J＝8.4Hz，1H)，6.10(br s，1H)，3.65(br s，2H)，3.41(br s，2H)，1.83(m，2H)；ESI MSm/z284[C11H10BrFN2O+H]+。
实例101-(3-溴-4-氟苯基)-1-(四氢嘧啶-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)苯基]甲醇的制备 用1-溴-4-(三氟甲氧基)苯(21.1g，87.7mmol)在THF中的溶液逐滴处理处于50℃的镁(2.13g，87.7mmol)在THF中的混合物历时20min时期，在50℃下再搅拌1.5h，将其冷却至室温，用碘化铜(I)(0.13g，0.70mmol)和2-(3-溴-4-氟苯甲酰基)-2，3，4，5-四氢嘧啶(10.0g，14.9mmol)在THF中的溶液加以处理，在65℃下加热整夜，将其冷却至室温并用乙酸乙酯和饱和氯化铵水溶液稀释。分离相。用水和盐水连续洗涤有机相，用硫酸钠干燥，并浓缩以得到18.5g褐色油状物。通过快速色谱法(硅石，90∶10∶0.5的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵作为洗脱液)纯化所述油状物得到呈黄色油状的标题化合物10.0g(产率64％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.60(dd，J＝6.4，2.3Hz，1H)，7.41(dd，J＝6.9，2.0Hz，2H)，7.28-7.20(m，3H)，7.10(t，J-8.3Hz，1H)，3.50(m，6H)，1.96(m，2H)；ESI MS m/z447[C18H15BrF4N2O2+H]+。
实例111-(3-溴-4-氧苯基)-1-(四氧嘧啶-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)苯基]甲胺的制备 在110℃下，加热1-(3-溴-4-氟苯基)-1-(四氢嘧啶-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)苯基]甲醇(4.60g，10.3mmol)和亚硫酰氯(12.2g，103mmol)在甲苯中的混合物整夜，将其冷却至室温，并浓缩至干得到茶色固体状残余物。将残余物分散于异丙醇中，并用氨气鼓泡通过所述残余物直至混合物中氨饱和。在密封管中，在45℃下加热饱和混合物整夜，将其冷却至室温并浓缩。使所得残余物在氯仿与1 N NaOH之间分溶。分离水相，并用氯仿萃取。使萃取液与有机相组合，用碳酸钾干燥并浓缩得到呈深色油状的标题化合物0.89g(＞100％，纯度约为80％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.65(m，1H)，7.41-7.303(m，36H)，3.41(brs，4H)，2.32(brs，2H)，1.77(m，2H)；ESI MS m/z446[C18H16BrF4N3O+H]+。
实例128-(3-溴-4-氟苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备 在室温下，搅拌1-(3-溴-4-氟苯基)-1-(四氢嘧啶-2-基)-1-[4-(三氟甲氧基)苯基]甲胺(0.85g，纯度约为80％，约1.52mmol)和溴化氰(0.81g，7.62mmol)在乙腈中的混合物45min，在密封管中于100℃下加热整夜，将其冷却至室温并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵作为洗脱液)纯化所得残余物得到呈茶色固体状的标题化合物0.26g(产率36％)，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(300MHz，CDC！3)δ7.74(dd，J＝6.7，2.3Hz，1H)，7.49(dd，J＝6.7，2.1Hz，2H)，7.38(m，1H)，7.13(d，J＝8.1Hz，2H)，7.03(t，J＝8.5Hz，1H)，3.58(m，4H)，1.86(m，2H)；ESI MS m/z 471[C19H15BrF4N4O]+。
实例138-{[(4-氟-3-嘧啶-5-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基}胺的制备
在100℃下，加热8-(3-溴-4-氟苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺(0.26g，0.552mmol)、5-嘧啶硼酸(0.082g，0.662mmol)、肆(三苯基膦基)钯(0)(0.032g，0.0276mmol)和碳酸钾(0.23g，1.65mmol)在5∶1的二噁烷/水中的混合物1h，用额外肆(三苯基膦基)钯(0)(0.032g，0.0276mmol)处理，在100℃下加热3.5h，将其冷却至室温并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵作为洗脱液)纯化所得残余物得到呈灰白色固体状的标题化合物0.079g(产率30％)，熔点105℃-115℃，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ9.14(s，1H)，8.97(s，2H)，7.55(m，2H)，7.43(dd，J＝6.8，2.1Hz，2H)，7.21-7.31(m，3H)，3.69(m，2H)，3.50(m，2H)，1.87(m，2H)；ESI MS m/z 471[C23H18F4N6O+H]+。
实例14{8-[4-氟-3-(5-氟嘧啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基}胺的制备 使8-(3-溴-4-氟苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺(0.075g，0.159mmol)、3-氟-5-(三丁基锡烷基)吡啶(0.092g，0.239mmol)和二氯双(三苯基膦)钯(II)(0.006g，0.008mmol)在DMF中的混合物脱气，在密封管中于150℃下加热1.5h，将其冷却至室温并用乙酸乙酯(50mL)和5％LiCl水溶液稀释。分离反应混合物。用5％LiCl水溶液洗涤有机相，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵作为洗脱液)纯化所得残余物得到呈白色固体状的标题产物0.043g(产率56％)，熔点94-105℃，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.56(d，J≈1.3Hz，1H)，8.47(d，J＝2.6Hz，1H)，7.83(d，J＝9.7Hz，1H)，7.54-7.44(m，4H)，7.41-7.21(m，3H)，3.69(m，2H)，3.50(m，2H)，1.87(m，2H)；ESI MSm/z488[C24H18F5N5O+H]+。
实例15-28二苯基咪唑并嘧啶基胺衍生物的制备
使用与上述实例5、13和14中所述程序基本相同的程序且使用适当氮杂环试剂(其中W为B(OH)2或Sn(正丁基)3)，获得表I中的化合物，并通过NMR和质谱分析加以识别。
表I
实例298-(3-嘧啶-5-基-苯基)-8-(4-三氟甲氧基-苯基)-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基-氰胺的制备
在氮气气氛下，搅拌乙二醇二甲醚、三(二亚苯甲基丙酮)-二钯(O)(0.014g，16.0μmol)、三苯基膦(0.008g，32.0μmol)的混合物5min，用2(0.153g，0.320mmol)、嘧啶-5-硼酸(0.047g，0.380mmol)、碳酸钠(0.101g，0.96mmol)和水(2mL)加以处理，在85℃下加热1h，将其冷却至室温并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97.5∶2.5∶0.5的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵作为洗脱液)纯化所得残余物得到呈白色固体状的标题化合物0.130g(产率85％)，熔点227-231℃，通过NMR和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ9.13(s，1H)，9.02(s，2H)，7.77(d，J＝7.5Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.62{66，J＝7.9，7.6Hz，1H)7.57(d，J＝8.0Hz，1H)，7.50(d，J-8.9Hz，2H)，7.33(d，J＝8.3Hz，2H)，3.70(m，2H)，3.58(m，2H)，1.89(m，2H)；IR(ATR)3106，2187，1622，1500，1412，1256，1218，1159cm″1；ESI MS m/z 478[C24H18F3N7O+H]+。
实例30(8R)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(A)和(8S)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(B)的制备
将8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺的外消旋混合物(0.740g，1.57mmol)放置于Chiralpak AD 5×50cm管柱(以90∶10∶0.1的庚烷/乙醇/二乙胺作为洗脱液)中。收集第二个洗脱峰(tR＝26min)并将其浓缩成浅黄色油状物。将油状残余物再溶解于极少量二氯甲烷中，用己烷湿磨并过滤。真空干燥滤饼24h得到呈灰白色固体状的标题产物A0.299g，熔点126-131℃；[α]25D-11.6°(于MeOH中c＝0.5)；通过NMR、红外和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.16(dd，J＝4.8，1.1Hz，1H)，8.03-7.98(m，1H)，7.58(s，1H)，7.55-7.52(m，1H)，7.49-7.45(m，3H)，7.44-7.41(m，1H)，7.40-7.37(m，1H)，7.23(d，J＝8.2Hz，2H)，3.70(t，J＝6.0Hz，2H)，3.49(t，J＝5.4Hz，2H)，1.90-1.85(m，2H)；IR(ATR)3062，2954，1654，1602，1504，1434，1251，1216，1159，791cm-1；ESI MS m/z470[C24H19F4N5O+H]+；收集第一个洗脱峰(tR＝19min)并将其浓缩成浅黄色油状物。将油状残余物再溶解于极少量二氯甲烷中，用己烷湿磨并过滤。真空干燥滤饼24h得到呈灰白色固体状的标题产物B 0.315g，熔点124-128℃；[α]25D+12.6°(于MeOH中c＝0.5)；通过NMR、红外和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.16(dd，J＝4.8，1.1Hz，1H)，8.03-7.98(m，1H)，7.58(s，1H)，7.55-7.52(m，1H)，7.49-7.45(m，3H)，7.44-7.41(m，1H)，7.40-7.37(m，1H)，7.23(d，J＝8.2Hz，2H)，3.70(t，J＝6.0Hz，2H)，3.49(t，J＝5.4Hz，2H)，1.90-1.85(m，2H)；IR(ATR)3064，2947，1653，1602，1504，1434，1251，1216，1158，791cm-1；ESI MS m/z 470[C24H19F4N5O+H]。
实例31(8R)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(A)和(8S)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(B)的制备 将8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺的外消旋混合物(2.0g，1.57mmol)放置于Chiralpak AD 5×50cm管柱(以90∶10∶0.1的庚烷/乙醇/二乙胺作为洗脱液)中。收集第一个洗脱峰(tR＝34min)并浓缩以得到浅黄色油状物。将所述油状物再溶解于极少量二氯甲烷中，用己烷湿磨并过滤。真空干燥滤饼24h得到呈灰白色固体状的标题化合物A 0.815g，熔点178-186℃；[α]25D-14.7°(于MeOH中c＝0.50)；通过NMR、红外和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ9.12(s，1H)，9.02(s，2H)，7.70-7.67(m，2H)，7.57-7.51(m，2H)，7.48-7.44(m，2H)，7.26(d，J＝8.7Hz，2H)，3.73(t，J＝6.3Hz，2H)，3.55-3.52(m，2H)，1.92-1.88(m，2H)；IR(ATR)3040，2956，2859，1655，1504，1413，1253，1160，786cm-1；ESI MS m/z453[C23H19F3N5O+H]+；收集第二个洗脱峰(tR＝46min)并浓缩以得到浅黄色油状物。将油状残余物再溶解于极少量二氯甲烷中，且随后用己烷湿磨并过滤。真空干燥滤饼24h得到呈灰白色固体状的标题化合物B 0.798g，熔点180-186℃；[α]25D+9.7°(于MeOH中c＝0.51)；通过NMR、红外和质谱分析加以识别。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ9.13(s，1H)，9.02(s，2H)，7.73-7.69(m，2H)，7.58-7.51(m，2H)，7.49-7.46(m，2H)，7.29-7.26(m，2H)，3.76(t，J＝6.3Hz，2H)，3.57-3.55(m，2H)，1.93-1.90(m，2H)；IR(ATR)3040，2955，1655，1553，1505，1413，1253，1201，1162，786cm-1；ESI MS m/z 453[C23H19F3N5O+H]+。
实例32(8S)-8-[3-(5-氯吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺[A]和(8R)-8-[3-(5-氯吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺[B]的制备 使用Chiralpak AD 5×50cm管柱(90∶10∶0.1的庚烷/乙醇/二乙胺)将8-[3-(5-氯吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺的外消旋混合物(1.73g)分离成其对映异构体，得到呈灰白色固体状的标题S型异构体(A)，熔点104-116℃；[α]25D-8.6°(于MeOH中c＝0.51％)；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.69(d，J＝1.9Hz，1H)，8.53(d，J＝2.2Hz，1H)，8.11(t，J＝2.1Hz，1H)，7.69-7.67(m，1H)，7.65(t，J＝1.7Hz，1H)，7.54(t，J＝7.6Hz，1H)，7.51-7.45(m，3H)，7.29(d，J＝8.3Hz，2H)，3.77(t，J＝5.9Hz，2H)，3.58-3.55(m，2H)，1.97-1.92(m，2H)；ESI MS m/z 486[C24H19CIF3N5O+H]+；和呈灰白色固体状的标题R型异构体(B)，熔点114-118℃；[α]25D+13.3°(于MeOH中c＝0.53％)；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.69(d，J＝1.9Hz，1H)，8.54(d，J＝2.3Hz，1H)，8.11(t，J＝2.1Hz，1H)，7.70-7.67(m，1H)，7.65(t，J＝1.6Hz，1H)，7.55(t，J＝7.7Hz，1H)，7.52-7.46(m，3H)，7.29(d，J＝8.2Hz，2H)，3.77(t，J＝6.0Hz，2H)，3.59-3.56(m，2H)，1.95-1.90(m，2H)；ESI MS m/z 486[C24H19CIF3N5O+H]+。
实例33(8S)-8-[3-(4-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺[A]和(8R)-8-[3-(4-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺[B]的制备 使用Chiralpak AD 5×50cm管柱(93∶7∶0.1的庚烷/乙醇/二乙胺)将8-[3-(4-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺的外消旋混合物(1.89g)分离成其对映异构体，得到呈灰白色固体状的标题S型异构体(A)(0.755g)，熔点171℃；[α]25D+10.6°(于MeOH中c＝0.5％)；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.63(d，J＝10.0Hz，1H)，8.52(dd，J＝7.3，5.7Hz，1H)，7.57-7.52(m，2H)，7，51-7.45(m，4H)，7.32(dd，J＝10.3，5.7Hz，1H)，7.24(d，J＝8.1Hz，2H)，3.71(t，J＝5.9Hz，2H)，3.50(t，J＝5.5Hz，2H)，1.90-1.85(m，2H)；ESI MS m/z 470[C24H19F4N5O+H]+；和呈灰白色固体状的标题R型异构体(B)(0.675g)，熔点115-116℃；[α]25D-10.9°(于MeOH中c＝0.5％)；1H NMR(500MHz，CD3OD)D 8.63(d，J＝10.1Hz，1H)，8.53(dd，J＝7.3，5.7Hz，1H)，7.57-7.54(m，2H)，7.53-7.45(m，4H)，7.32(dd，J＝10.3，5.7Hz，1H)，7.26(d，J＝8.2Hz，2H)，3.73(t，J＝6.0Hz，2H)，3.52(t，J＝5.7Hz，2H)，1.90(五重峰，J＝6.3Hz，2H；ESI MS m/z470[C24H19F4N5O+H]+。
实例348-[3-(2-氟-1-氧基-吡啶-3-基)-苯基]-8-(4-三氟甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备
步骤a)化合物2的制备在室温下，搅拌1(0.580g，1.24mmol)、二碳酸二-叔丁酯(0.670g，3.10mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.151g，1.24mmol)在四氢呋喃(15mL)中的混合物1h。随后，用二氯甲烷(75mL)稀释所述混合物，用1M柠檬酸(25mL)、水(25mL)和盐水(25mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到呈无色油状的2(0.74 g，89％)1H NMR(500MHz，CDCI3)δ8.17(d，J＝7.1Hz，1H)，7.84(m，1H)，7.73(s，1H)，7.60-7.55(m，3H)，7.51-7.47(m，1H)，7.42(t，J＝7.8Hz，1H)，7.26-7.22(m，1H)，7.17(d，J＝8.1Hz，2H)，3.66-3.61(m，2H)，3.50(t，J＝6.0Hz，2H)，1.88-1.83(m，2H)，1.33(s，18H)；ESI MS m/z670[C34H35F4N5O5+H]+。
步骤b)化合物3的制备在0℃下，将三氟乙酸酐(0.365g，1.74mmol)逐滴加入经搅拌的尿素-过氧化氢复合物(0.169g，1.80mmol)在二氯甲烷(15mL)中的悬浮液中。搅拌混合物5min，且随后逐滴加入2(0.200g，0.29mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液。将反应温至室温，且随后在40℃下加热45min。此后，将反应冷却至室温，用二氯甲烷(50mL)稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液(2×20mL)和盐水(20mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97.5∶2.5至95∶5的二氯甲烷/甲醇)纯化得到呈无色油状的3(0.086g，41％)1H NMR(300MHz，CDCi3)δ8.25(dt，J＝6.3，1.5Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.68-7.62(m，1H)，7.57(d，J＝6.9Hz，2H)，7.49-7.43(m，2H)，7.40-7.33(m，1H)，7.20-7.13(m，3H)，3.64(t，J＝5.4Hz，2H)，3.50(t，J＝5.8Hz，2H)，1.90-1.81(m，2H)，1.45(s，18H)；ESI MS m/z 686[C34H35F4N5O6+H]+。
步骤c)8-[3-(2-氟-1-氧基-吡啶-3-基)-苯基]-8-(4-三氟甲氧基-苯基)-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备在室温下，搅拌3(0.08g，0.11mmol)和4 M HCl/二噁烷(5mL)的混合物20h。蒸发溶剂并用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)和二氯甲烷(20mL)稀释残余物。分离层，并用盐水(10mL)洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化粗产物。合并适当的馏分，浓缩，随后用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)中和，并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。用盐水(10mL)洗涤已合并的有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。由乙腈/水(8mL，1∶1)冷冻干燥残余物得到呈白色固体状的标题产物0.018g(产率32％)，1H NMR(300MHz，CDCI3)δ8.24(dt，J＝6.3，1.6Hz，1H)，7.74(s，1H)，7.62-7.53(m，3H)，7.48-7.32(m，3H)，7.20-7.12(m，3H)，3.66(t，J＝5.9Hz，2H)，3.60(t，J＝5.5Hz，2H)，1.88(t，J＝5.7Hz，2H)；ESI MS m/z 486[C24H19F4N5O2+H]+。
实例357-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-7-(4-三氟甲氧基-苯基)-2，7-二氧-3H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-基胺的制备
步骤a)化合物2的制备将镁(0.60g，24.7mmol)在THF(6mL)中的混合物加热至50℃，并用1-溴-4-(三氟甲氧基)-苯(5.96g，24.7mmol)在THF(18mL)中的溶液逐滴处理历时10min时期。在50℃下再搅拌1.5h后，将混合物冷却至室温，并用1(3.0g，16.5mmol)在THF(12mL)中的溶液加以处理。随后，将混合物再加热至65℃历时1h。此后，将反应混合物冷却至室温，并在-15℃下将其倾注至饱和氯化铵水溶液(20mL)和浓氢氧化铵(20mL)的溶液中，并搅拌5min。随后，使此混合物与乙醚(100mL)一起滤过硅藻土521垫。分离滤液中的有机层，用盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩以得到呈琥珀色油状的亚胺粗产物(3.90g，68％)。用冰浴冷却此亚胺粗产物(3.90g，11.3mmol)在MeOH(20mL)中的溶液，用硼氢化钠(0.86g，22.7mmol)加以处理。移除冷却浴，并在室温下搅拌混合物3h。此后，浓缩混合物并使其在1 N NaOH(100mL)与二氯甲烷(100mL)之间分溶。分离有机层，并用盐水(100mL)洗涤，用碳酸钾干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，1∶4的乙酸乙酯/己烷)纯化得到2(1.98g，两步骤34％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.56(t，J＝1.7Hz，1H)，7.40-7.15(m，7H)，5.19(s，1H)；ESIMS m/z 329[C18H15BrF4N2O2-NH2+H]+。
步骤b)化合物3的制备用冰浴冷却2(0.66g，1.91mmol)在二氯甲烷(2mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)中的混合物，用二氯硫化碳(0.24g，2.10mmol)处理并用力搅拌30min。分离有机层，用盐水(2mL)洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩得到呈黄色油状的3(0.74g，100％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.49-7.22(m，8H)，5.97(s，1H)。
步骤c)化合物4的制备在-78℃下，向叔丁氧化钾(0.070g，0.623mmol)在四氢呋喃(2mL)中的混合物中逐滴加入3(0.220g，0.567mmol)和二硫化碳(0.065g，0.850mmol)在四氢呋喃(3mL)中的溶液。在-78℃下搅拌反应0.5h，随后将其缓慢温至室温，并在室温下搅拌整夜。接着，用乙酸乙酯(50mL)和水(10mL)稀释反应。分离有机层，用盐水洗涤(10mL)，用硫酸钠干燥并浓缩，得到呈澄清油状的4(0.26g，99％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.86-7.10(m，8H)，3.70(s，br，1H)。
步骤d)化合物5的制备在70℃下，加热4(0.850g，1.83mmol)和乙二胺(0.330g，5.49mmol)在乙醇(15mL)中的溶液整夜。将反应冷却至室温，并浓缩。通过快速色谱法(硅石，1∶4的乙酸乙酯/己烷)纯化得到呈白色固体状的5(0.45g，54％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ8.50(s，1H)，7.59-7.19(m，8H)，4.46(t，J＝8.5Hz，2H)，3.87(t，J＝8.5Hz，2H)；ESI MS m/z 456[C18H13BrF3N3OS+H]+。
步骤e)化合物6的制备在室温下，搅拌5(0.200g，0.438mmol)和叔丁基过氧化氢(0.79g的70％水溶液，8.80mmol)在甲醇(20mL)和浓氢氧化铵水溶液(4mL)中的混合物整夜。随后，浓缩反应。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化得到呈白色固体状的6(0.156g，81％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.58(t，J＝1.5Hz，1H)，7.49-7.44(m，3H)，7.36(dt，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.29-7.23(m，3H)，4.41(t，J＝8.7Hz，2H)，3.75(t，J＝8.7Hz，2H)；ESI MS m/z 440[C18H14BrF3N4O+H]+。
步骤f)7-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-7-(4-三氟甲氧基-苯基)-2，7-二氢-3H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-基胺的制备使6(0.070g，0.159mmol)、三苯基膦(0.004g，0.016mmol)、双(二亚苯甲基丙酮)钯(O)(0.007g，0.008mmol)、碳酸钠(0.051g，0.478mmol)和2-氟-3-硼酸(0.040g，0.287mmol)在乙二醇二甲醚(6mL)和水(2mL)中的混合物脱气，并在80℃下加热2.5h。将混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯(100mL)和水(50mL)稀释。分离有机层，用盐水(20mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，93∶7∶0.25的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)且随后通过制备型HPLC纯化得到起始材料和产物的混合物。使所述材料(0.032g，0.073mmol)、三苯基膦(0.002g，0.007mmol)、双(二亚苯甲基丙酮)钯(O)(0.003g，0.004mmol)、碳酸钠(0.023g，0.220mmol)和2-氟-3-硼酸(0.019g，0.131mmol)在乙二醇二甲醚(6mL)和水(2mL)中的混合物脱气并在80℃下加热整夜。分离有机层，用盐水(20mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化得到呈白色固体状的标题产物0.030g(产率41％)，熔点95-100℃；1H NMR(500MHz，CD3OD)8.17(dt，J＝4.5，1.0Hz，1H)，8.02(ddd，J＝7.5，2.0，2.0Hz，1H)，7.64-7.38(m，9H)，7.26(d，J＝8.0Hz，2H)，4.43(d，J＝9.0Hz，2H)，3.78(d，J＝9.0Hz，2H)；IR(ATR)2925，1644，1601，1504，1450，1434，1400，1250，1211，1157，1010，966，791cm-1；ESI MS m/z 456[C23H17F4N5O+H]+。
实例369-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-9-(4-三氟甲氧基-苯基)-2，4，5，9-四氢-3H-咪唑并[1，5-a][1，3]二氮呼-7-基胺的制备
步骤a)化合物2的制备在70℃下加热1(0.50g，1.08mmol)和1，4-二氨基丙烷(0.28g，3.23mmol)在乙醇中的溶液18h，将其冷却至室温，并在真空中浓缩。使浓缩物在乙酸乙酯与水之间分溶。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，1∶4的乙酸乙酯/己烷)纯化所得残余物得到呈白色泡沫状的2(0.22g，42％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.47(m，2H)，7.33(d，J＝8.9Hz，2H)，7.25-7.18(m，4H)，4.15(m，2H)，3.81(m，2H)，1.99(m，4H)；ESI MS m/z 484[C2oH17BrF3N3OS+H]+。
步骤b)化合物3的制备在室温下，搅拌2(0.22g，0.454mmol)和叔丁基过氧化氢(1.17g的70％水溶液，9.08mmol)在甲醇和浓氢氧化铵水溶液(4.4mL)中的混合物整夜，用10％硫代硫酸钠水溶液(30mL)处理并浓缩以移除大部分甲醇。用二氯甲烷萃取剩余混合物水溶液。合并二氯甲烷萃取液，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化所得残余物得到呈白色泡沫状的3(0.136g，65％)1HNMR(300MHz，CDCI3)δ7.63(t，J＝1.7Hz，1H)，7.46(dd，J＝6.8，2.0Hz，2H)，7.39-7.33(m，2H)，7.19-7.12(m，3H)，3.73(m，2H)，3.57(m，2H)，1.93(m，4H)；ESI MS m/z 467[C20H18BrF3N4O+H]+。
步骤c)9-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-9-(4-三氟甲氧基苯基)-2，4，5，9-四氢-3H-咪唑并[1，5-a][1，3]二氮呼-7-基胺的制备在回流温度下，加热3(0.065g，0.139mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸(0.035g，0.250mmol)、双(三苯基膦基)氯化钯(II)(0.0049g，0.007mmol)、三苯基膦(0.0036g，0.014mmol)和碳酸钠(0.044g，0.417mmol)在3∶1 DME/水中的混合物1h，将其冷却至室温，并用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化所得残余物得到0.049g白色泡沫。由2∶1乙腈/水冷冻干燥所述材料得到呈白色固体状的标题产物0.041g(产率62％)，熔点88-97℃；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.16(d，J＝4.3Hz，1H)，8.00(m，1H)，7.59-7.37(m，7H)，7.22(d，J＝8.7Hz，2H)，3.73-3.64(m，4H)，1.96(m，4H)；ESI MS m/z 484[C25H21F4N5O+H]+。
实例371-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-1-(4-三氟甲氧基苯基)-1，4，5，6，7，8-六氢-2，3a，9-三氮-环戊环辛烯-3-基胺的制备 步骤a)化合物2的制备在70℃下加热1(0.50g，1.08mmol)和1，5-二氨基戊烷(0.33g，3.23rnmol)在乙醇中的溶液5h，随后在100℃下加热17h且最后在120℃下加热6h。将反应冷却至室温，浓缩且使浓缩物在乙酸乙酯与水之间分溶。分离有机层，洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，1∶4乙酸乙酯/己烷)纯化所得残余物得到呈白色泡沫状的2(0.153g，28％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.54(t，J＝1.7Hz，1H))，7.50-7.19(m，7H)，4.45(t，J＝6.6Hz，2H)，4.01(t，J＝6.6Hz，2H)，1.96-1.86(m，4H)，1.48-1.44(m，2H)；ESI MS m/z498。
步骤b)化合物3的制备在室温下，搅拌2(0.15g，0.301mmol)和叔丁基过氧化氢(0.77g的70％水溶液，6.02mmol)在甲醇和浓氢氧化铵水溶液(3mL)中的混合物整夜，用10％硫代硫酸钠水溶液(20mL)处理并浓缩以移除大部分甲醇。用二氯甲烷萃取剩余混合物水溶液。合并二氯甲烷萃取液，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化所得残余物得到呈白色泡沫状的3(0.073g，52％)1HNMR(300MHz，CDCI3)δ7.63(t，J＝1.8Hz，1H)，7.49(dd，J＝6.8，2.0Hz，2H)，7.49-7.37(m，2H)，7.20-7.13(m，3H)，3.96(m，4H)，1.90(m，4H)，1.56(m，2H)；ESI MS m/z482[C21H2oBrF3N40+H]+。
步骤c)1-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-1-(4-三氟甲氧基苯基)-1，4，5，6，7，8-六氢-2，3a，9-三氮-环戊环辛烯-3-基胺的制备在回流温度下，加热3(0.065g，0.135mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸(0.034g，0.243mmol)、双(三苯基膦基)氯化钯(II)(0.0047g，0.0068mmol)、三苯基膦(0.0035g，0.014mmol)和碳酸钠(0.043g，0.405mmol)在3∶1 DME/水(2.0mL)中的混合物1.5h，将其冷却至室温，并用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97∶3∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化所得残余物得到0.041g白色泡沫。由2∶1乙腈/水冷冻干燥所述材料得到呈白色固体状的标题产物0.033g(产率49％)，熔点95-99℃；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.16(m，1H)，8.00(m，1H)，7.62(d，J＝1.4 Hz，1H)，7.55-7.37(m，6H)，7.23(d，J＝8.1Hz，2H)，4.07(m，2H)，3.96-3.89(m，2H)，1.93-1.82(m，4H)，1.55(m，2H)；IR(ATR)1649，1433，1251，1214，1155cm-1；ESI MS m/z498。
实例388-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-8-(4-三氟甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备
步骤a)化合物2的制备用氢化钠(1.10g在油中的60％分散液，27.7mmol)逐份处理处于0℃的4-溴苯酚(4.00g，23.1mmol)在乙腈(100mL)中的混合物。搅拌混合物5min，随后将其温至室温且再搅拌15min。逐滴加入氯甲基甲醚(2.23g，27.7mmol)，并搅拌混合物20min。蒸发溶剂，且使残余物在乙酸乙酯与水之间分溶。分离层，并用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到呈无色油状的2(5.30g，106％)1H NMR(500MHz，CDCI3)δ7.38(d，J＝8.9Hz，2H)，6.92(d，J＝8.9Hz，2H)，5.14(s，2H)，3.46(s，3H)。
步骤b)化合物3的制备将小块碘晶体加入经搅拌的镁(0.197g，8.20mmol)在四氢呋喃中的混合物中，且随后将其加热至50℃。逐滴加入2(1.78g，8.20mmol)在四氢呋喃中的溶液，并搅拌混合物45min。将混合物冷却至室温，并缓慢加入3-溴苯甲腈(1.00g，5.49mmol)在四氢呋喃中的溶液。随后，在65℃下加热混合物16h。将反应冷却至室温，加入无水乙醇，并搅拌混合物45min。将混合物冷却至0℃并逐份加入硼氢化钠(0.415g，10.98mmol)。移除冷却浴且搅拌混合物3hr。加入饱和氯化铵(10mL)，在减压下移除大部分甲醇和THF。用二氯甲烷萃取剩余残余物水溶液。用硫酸钠干燥已合并的有机层，并浓缩。通过快速色谱法(硅石，4∶1至1∶1己烷/乙酸乙酯)纯化所得残余物得到呈无色油状的3(0.89g，50％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.55(br s，1H)，7.39-7.23(m，4H)，7.15(t，J＝7.8Hz，1H)，6.98(d，J＝8.7Hz，2H，5.15(s，2H)，5.14(s，1H)，3.46(s，3H)；ESI MS m/z305[(C15H16BrNO2-NH2)+H]+。
步骤c)化合物4的制备用冰浴冷却3(0.89g，2.76mmol)在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液中的混合物，用二氯硫化碳(0.35g，3.03mmol)处理并用力搅拌40min。分离相并用二氯甲烷萃取水相。用盐水洗涤已合并的有机相，用硫酸钠干燥并浓缩以得到呈黄色油状的4(0.80g，80％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ 7.47-7.42(m，2H)，7.28-7.18(m，4H)，7.04(d，J＝8.8Hz，2H)，5.92(s，1H)，5.17(s，2H)，3.46(s，3H)。
步骤d)化合物5的制备向-78℃下叔丁氧化钾(0.27g，2.41mmol)在四氢呋喃中的混合物中逐滴加入4(0.80g，0.2.19mmol)和二硫化碳(0.25g，3.28mmol)在四氢呋喃中的溶液。在-78℃下搅拌反应0.5h。随后将其缓慢温至室温并在室温下搅拌1.5h。此后，TLC分析表明反应尚不完全，因此将混合物冷却至-78℃，并加入二硫化碳(0.06g，0.83mmol)，随后加入叔丁氧化钾(0.05g，0.44mmol)在四氢呋喃中的溶液。在-78℃下搅拌反应30min，随后将其温至室温并搅拌45min。接着，用乙酸乙酯和水和盐水稀释反应。分离有机层，且用乙酸乙酯萃取水层。用盐水洗涤已合并的有机层，用硫酸钠干燥并浓缩以得到呈红色半固体状的5(1.1g，115％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.48(t，J＝1.8Hz，1H)，7.43(d，J＝7.8Hz，1H)，7.30-7.25(m，1H)，7.20(d，J＝8.8Hz，2H)，7.14(t，J＝7.9Hz，1H)，6.94(d，J＝8.8Hz，2H)，5.11(s，2H)，3.42(s，3H)。
步骤e)化合物6的制备在70℃下，加热5(1.10g，2.18mmol)和1，3-二氨基丙烷(0.484g，6.54mmol)在乙醇中的混合物1h，将其冷却至室温，并在真空中浓缩。用乙酸乙酯稀释所得残余物，用水和盐水连续洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，4∶1至3∶1己烷/乙酸乙酯)纯化此残余物得到呈无色油状的6(0.70g，72％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.53(t，J＝1.7Hz，1H)，7.47(dt，J＝7.7，1.4Hz，1H)，7.30-7.17(m，3H)，7.06-6.97(m，3H)，5.17(s，2H)，3.89(t，J＝6.0Hz，2H)，3.50(t，J＝5.5Hz，2H)，3.47(s，3H)，1.91(t，J＝5.4Hz，2H)；ESI MS m/z446[C2oH2oBrN3O2S+H]+。
步骤f)化合物7的制备在室温下，搅拌6(0.630g，1.40mmol)和叔丁基过氧化氢(3.6g的70％水溶液，28mmol)在甲醇和浓氢氧化铵水溶液(18mL)中的混合物24h，用10％硫代硫酸钠水溶液(10mL)处理并浓缩以移除大部分甲醇。用二氯甲烷萃取剩余混合物水溶液。合并二氯甲烷萃取液，用水和盐水连续洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化此残余物得到呈灰白色固体状的7(0.400g，67％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.66(t，J＝1.8Hz，1H)，7.40-7.32(m，4H)，7.16(t，J＝7.9Hz，1H)，6.97(d，J＝8.9Hz，2H)，5.15(s，2H)，3.62-3.55(m，4H)，3.45(s，3H)，1.86(t，J＝5.5Hz，2H)；ESI MS m/z429[C2oH21BrN4O2+H]+。
步骤g)8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-8-(4-甲氧基甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备在80℃下，加热7(0.370g，0.860mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸(0.243g，1.72mmol)、双(三苯基膦基)氯化钯(II)(0.030g，0.043mmol)、三苯基膦(0.022g，0.086mmol)和碳酸钠(0.273g，2.58mmol)在3∶1 DME/水(16mL)中的混合物1h，将其冷却至室温，并用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，96∶4∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化所得残余物得到0.300g(产率78％)浅黄色固体。将0.030g此固体样本溶解于乙腈和水中并冷冻干燥得到呈灰白色固体状的标题产物0.023g，熔点95-105℃；1H NMR(300MHz，CDCI3)δ8.16(dt，J＝5.0，1.7Hz，1H)，7.88-7.80(m，1H)，7J1-7.67(m，1H)，7.53-7.44(m，2H)，7.41(d，J＝7.6Hz，1H)，7.37(d，J＝8.8Hz，2H)，7.27-7.20(m，1H)，6.97(d，J＝8.8Hz，2H)，5.15(s，2H)，3.68-3.54(m，4H)，3.45(s，3H)，1.85(t，J＝5.6Hz，2H)；ESI MS m/z446[C25H24FN5O2+H]+。
实例398-(2，3-二氢-苯并[1，4]二氧己环-6-基)-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备 使用与实例38步骤a-g中所述的程序基本相同的程序，并使用化合物1作为起始材料获得呈灰白色固体状的标题产物，熔点125-140℃，1H NMR(300MHz，CDCI3)δ8.16(m，1H)，7.87-7.80(m，1H)，7.72(d，J＝1.4Hz，1H)，7.56-7.37(m，3H)，7.25-7.21(m，1H)，6.98(d，J＝2.1Hz，1H)，6.89-6.77(m，2H)，4.22(s，4H)，3.62-3.55(m，4H)，2.95(brs，2H)，1.88-1.84(m，2H)；ESI MS m/z 444[C25H22FN5O2+H]+。
实例408-苯并[1，3]二氧杂戊烯-5-基-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氧-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备 使用与实例38步骤a-g中所述的程序基本相同的程序，并使用化合物1作为起始材料获得呈灰白色固体状的标题产物，熔点106-119℃，1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.17-8.14(m，1H)，8.04-7.98(m，1H)，7.56(d，J＝1.2Hz，1H)，7.53-7.36(m，4H)，6.87(dd，J＝8.2，1.8Hz，1H)，6.81(d，J＝1.7Hz，1H)，6.75(d，J＝8.2Hz，1H)，5.92(s，2H)，3.68(t，J＝5.9Hz，2H)，3.47(t，J＝5.4Hz，2H)，1.88-1.84(m，2H)；ESI MS m/z 430[C24H20FN5O2+H]+。
实例418-(4-二氟甲氧基苯基)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备
在室温下，搅拌8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(4-甲氧基甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺(1.10g，2.46mmol)和3N盐酸(60mL)在甲醇中的混合物16h，用氢氧化钠水溶液中和，并在真空中浓缩。用乙醇湿磨所获得的残余物，通过过滤移除固体且浓缩滤液。通过快速色谱法(硅石，90∶10二氯甲烷/甲醇)纯化浓缩物得到白色固体(0.70g，70％)。通过半制备型液相色谱进一步纯化0.040g此固体的样本，得到呈白色固体状的4-{6-氨基-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基}-苯酚(0.0073g)，熔点164-181℃，1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.15(d，J＝5.0Hz，1H)，8.03-7.97(m，1H)，7.57(brs，1H)，7.54-7.48(m，1H)，7.46-7.41(m，2H)，7.40-7.36(m，1H)，7.16(d，J＝8.7Hz，2H)，6.73(d，J＝8.7Hz，2H)，3.69(t，J＝6.0Hz，2H)，3.50-3.44(m，2H)，1.90-1.83(m，2H)；ESI MS m/z 402[C23H20FN5O+H]+。
在室温下，搅拌4-{6-氨基-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基}-苯酚(0.285g，0.710mmol)和氢氧化钾(0.396g，7.10mmol)在2-丙醇中的混合物10min，将其冷却至-45℃，用FREON 22(6.7g，77.0mmol)鼓泡并将其密封。将密封的反应混合物温至室温，逐渐温至50℃，在50℃下搅拌90min，将其冷却至室温，将其打开并通过小心地将反应混合物加入水中中止反应。用二氯甲烷稀释混合物水溶液，并分离层。用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化此残余物得到灰白色固体(0.055g，17％)。通过半制备型LC进一步纯化此固体，得到呈白色固体状的标题产物(0.033g)，熔点104-114℃；1HNMR(500MHz，CDCI3)δ8.16＜dt.J＝4.7，1.3Hz，1H)，7.85-7.80(m，1H)，7.69(d，J＝1.4Hz，1H)，7.53-7.45(m，4H)，7.40(t，J＝7.7Hz，1H)，7.25-7.21(m，1H)，7.05(d，J＝8.7Hz，2H)，6.47(t，J＝74.0Hz，1H)，3.63-3.55(m，4H)，1.91-1.84(m，2H)；ESI MS m/z 452[C24H2oF3N5O+H]+。
实例427-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2，2-二甲基-7-(4-三氟甲氧基苯基)-2，7-二氢-3H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-基胺的制备 步骤a)化合物2的制备用2-甲基丙烷-1，2-二胺(0.144g，1.62mmol)处理处于0℃的1(0.250g，0.54mmol)在乙醇中的溶液，在0℃下搅拌3h，随后在室温下搅拌45分钟，将其加热至40℃历时2h，并在真空中浓缩。使所得残余物在乙酸乙酯与水之间分溶。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，梯度100％己烷至1∶9乙酸乙酯/己烷)纯化此残余物得到呈白色固体状的2，1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.73(s，1H)，7.56(t，J＝1.8Hz，1H)，7.49(dt，J＝7.7，1.3Hz，1H)，7.43(t，J＝3.0Hz，1H)，7.40(t，J＝2.2Hz，1H)，7.34-7.21(m，4H)，3.60(s，2H)，1.44(s，3H)，1.43(s，3H)；ESI MS m/z 484[C2oH17BrF3N3OS+H]+。
步骤b)化合物3的制备在室温下，搅拌2(0.201g，0.42mmol)和叔丁基过氧化氢(0.75g的70％水溶液，8.30mmol)在甲醇和浓氢氧化铵水溶液(5mL)中的混合物整夜，用10％硫代硫酸钠水溶液(30mL)处理并浓缩以移除大部分甲醇。用二氯甲烷萃取剩余混合物水溶液。合并二氯甲烷萃取液，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97∶2.5∶0.5二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化残余物得到呈白色固体状的3(0.134g，68％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.71(t，J＝1.7Hz，1H)，7.54(d，J＝8.8Hz，2H)，7.43-7.37(m，2H)，7.19-7.13(m，3H)，3.36(s，2H)，1.42(s，6H)；ESI MS m/z 467[C2oH18BrF3N4O+H]+。
步骤c)7-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2，2-二甲基-7-(4-三氟甲氧基苯基)-2，7-二氢-3H-咪唑并[1，5-a]咪唑-5-基胺的制备在80℃下，加热3(0.134g，0.29mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸(0.081g，0.57mmol)、双(三苯基膦基)氯化钯(II)(0.010g，0.015mmol)、三苯基膦(0.008g，0.029mmol)和碳酸钠(0.092g，0.87mmol)在3∶1 DME/水(8.0mL)中的混合物5h，将其冷却至室温，并用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97∶2.5∶0.5二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化所得残余物得到0.020g灰白色固体。由2∶1乙腈/水(6mL)冷冻干燥此材料得到呈白色固体状的标题产物0.0189g(产率14％)，熔点89-97℃；1H NMR(300MHz，CDCI3)δ8.18-8.17(m，1H)，7.84-7.78(m，2H)，7.62-7.54(m，3H)，7.48-7.42(m，2H)，7.27(m，1H)，7.16(d，J＝8.2Hz，2H)，3.39(d，J＝2.2Hz，2H)，1.44(s，3H)，1.42(s，3H)；ESI MS m/z 484[C15H21F4N5O2H]+。
实例438-(2，-2-二氟-苯并[1，3]二氧杂戊烯-5-基)-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备
步骤a)化合物3的制备在-78℃下，将1(2.00g，8.44mmol)在乙醚(16mL)中的溶液逐滴加入叔丁基锂(4.96mL的1.7M戊烷溶液，8.44mmol)在乙醚(20mL)中的混合物中，并在此温度下搅拌25min。在-78℃下，向其中加入乙醚(20mL)中的3-溴苯甲腈(0.731g，4.02mmol)，并在-78℃下再搅拌反应混合物1.5h。随后，将反应温至0℃并加入甲醇(60mL)，随后逐份加入硼氢化钠(0.319g，8.43mmol)。移除冷却浴且随后于室温下搅拌混合物2h。加入饱和氯化铵水溶液(10mL)，在减压下移除大部分甲醇和乙醚，且用二氯甲烷(200mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)稀释所获得的残余物水溶液。分离有机层，并用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，9∶1己烷/乙酸乙酯)纯化得到呈无色糖浆状的3(0.237g，18％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.54(t，J＝1.6Hz，1H)，7.38(dt，J＝7.8，1.2Hz，1H)，7.29-7.04(m，4H)，6.98(d，J＝8.2Hz，1H)，5.17(s，1H)；ESI MS m/z 327[(C14H10BrF2NO2-NH2)+H]+。
步骤b)化合物4的制备用冰浴冷却3(0.416g，1.22mmol)在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液(6mL)中的混合物，用二氯硫化碳(0.154g，1.34mmol)处理，并用力搅拌45分钟。分离有机层，用盐水(15mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩以得到呈黄色糖浆状的4(0.405g，87％)1H NMR(500MHz，CDCI3)δ7.48(dt，J＝7.7，1.6Hz，1H)，7.43(t，J＝6.3Hz，1H)，7.11-7.04(m，2H)，6.99(t，J＝0.6Hz，1H)，5.95(s，1H)；ESI MS m/z 325[(C15H8BrF2NO2S-NCS)+H]+。
步骤c)化合物5的制备向-78℃下叔丁氧化钾(0.130g，1.16mmol)在四氢呋喃中的混合物中逐滴加入4(0.405g，1.05mmol)和二硫化碳(0.120g，1.58mmol)在四氢呋喃中的溶液，历时5min时段。在-78℃下搅拌反应0.5h，随后将其缓慢温至室温并在室温下搅拌整夜。随后，浓缩反应以移除大部分四氢呋喃，且用乙酸乙酯、水和盐水稀释残余物。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，9∶1己烷/乙酸乙酯)纯化得到呈红色糖浆状的5(0.323g，67％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.59-7.56(m，1H)，7.52-7.51(m，1H)，7.35-7.30(m，3H)，7.15(dd，J＝8.5，1.9Hz，1H)，7.08(d，J＝1.5Hz，1H)。
步骤d)化合物6的制备在70℃下，加热5(0.323g，0.702mmol)和1，3-二氨基丙烷(0.156g，2.11mmol)在乙醇中的混合物1h，且随后将其冷却至室温。蒸发溶剂，并用乙酸乙酯稀释残余物，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，4∶1己烷/乙酸乙酯)纯化得到呈白色泡沫状的6(0.303g，93％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.51-7.48(m，2H)，7.25(d，J＝1.7Hz，2H)，7.08-7.04(m，3H)，3.88(t，J＝6.0Hz，2H)，3.61(t，J＝1.9Hz，2H)，1.93-1.89(m，2H)；ESI MS m/z466[C19H14BrF2N3O2S+H]+。
步骤e)化合物7的制备在室温下，搅拌6(0.303g，0.65mmol)和叔丁基过氧化氢(1.18g的70％水溶液，12.9mmol)在甲醇和浓氢氧化铵水溶液(6.0mL)中的混合物整夜。此后，加入10％硫代硫酸钠水溶液(40mL)；浓缩混合物以移除大部分甲醇，且随后用二氯甲烷萃取混合物水溶液。合并二氯甲烷萃取液，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥、过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97∶2.5∶0.5二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化得到呈白色固体状的7(0.208g，71％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.63(t，J＝1.8Hz，1H)，7.36(dd，J＝8.0，1.9Hz，2H)，7.24-7.13(m，3H)，6.95(dd，J＝7.4，1.7Hz，1H)，3.58(t，J＝5.8Hz，4H)，1.89-1.82(m，2H)；ESI MS m/z449[C19H15BrF2N4O2+H]+。
步骤f)8-(2，2-二氟-苯并[1，3]二氧杂戊烯-5-基)-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的制备在80℃下，加热7(0.208g，0.46mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸(0.131g，0.93mmol)、双(三苯基膦基)氯化钯(II)(0.016g，0.023mmol)、三苯基膦(0.012g，0.046mmol)和碳酸钠(0.146g，1.38mmol)在3∶1 DME/水中的混合物2h，随后在室温下搅拌整夜。用乙酸乙酯和水稀释混合物。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97∶2.5∶0.5二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化得到无色油状物(0.180g(84％))。通过半制备型LC进一步纯化油状物得到呈灰白色固体状的标题产物0.045g，熔点95-99℃；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.16-8.15(m，1H)，8.03-7.99(m，1H)，7.56(d，J＝1.5Hz，1H)，7.53-7.52(m，1H)，7.46(t，J＝7.8Hz，1H)，7.42-7.37(m，2H)，7.23-7.19(m，2H)，7.13(d，J＝8.3Hz，1H)，3.69(t，J＝5.9Hz，2H)，3.49(t，J＝5.8Hz，2H)，1.89-1.84(m，2H)；ESI MS m/z466[C24H18BrF3N5O2+H]+。
实例448′-[4-(二氟甲氧基)苯基]-8′-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2′，8′-二氢螺[环丙烷-1，3′-咪唑并[1，5-a]嘧啶]-6′-胺的制备
使用与实例42所述的程序基本相同的程序并使用1，1-二(氨基甲基)丙烷(2)作为反应物，获得呈茶色固体状的标题产物，熔点98-108℃；1H NMR(500MHz，CDCI3)δ8.16(m，1H)，7.83(m，1H)，7.71(m，1H)，7.47(m，4H)，7.40(t，J＝7.7Hz，1H)，7.24(m，1H)，7.05(d，J＝6.9Hz，2H)，6.49(t，J＝74Hz，1H)，3.20-3.45(m，4H)，0.57-0.67(m，4H)；ESIMS m/z 478[C26H22F3N5O+H]+。
实例45(8R)-8-(4-二氟甲氧基-苯基)-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺(A)和(8S)-8-(4-二氟甲氧基-苯基)-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺(B)的制备 使用Chiralpak AD 5×50cm管柱(90∶10∶0.1的庚烷/乙醇/二乙胺)将8-(4-二氟甲氧基-苯基)-8-[3-(2-氟-吡啶-3-基)-苯基]-2，3，4，8-四氢-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-基胺的外消旋混合物分离成其对映异构体，得到呈白色固体状的标题R型异构体(A)，熔点97-109℃；[α]25D+7.8°(0.48％，在MeOH中)；1H NMR(500MHz，CDCI3)δ8.16(dt，J＝4.8，1.5Hz，1H)，7.86-7.81(m，1H)，7.69(d，J＝1.5Hz，1H)，7.52-7.46(m，4H)，7.40(t，J＝7.7Hz，1H)，7.26-7.22(m，1H)，7.05(d，J＝8.7Hz，2H)，6.48(t，J＝74.0Hz，1H)，3.62(t，J＝6.0Hz，2H)，3.60-3.56(m，2H)，1.87(五重峰，J＝5.8Hz，2H)；ESI MS m/z 452[C24H20F3N5O+H]+，和呈白色固体状的标题S型异构体(B)，熔点97-110℃，[α]D25-3.2°(0.47％，在MeOH中)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ8.16(m，1H)，7.87-7.80(m，1H)，7.69(brs，1H)，7.51-7.38(m，5H)，7.26-7.22(m，1H)，7.05(d，J＝8.7Hz，2H)，6.48(t，J＝74.0Hz，1H)，3.65-3.57(m，4H)，1.89-1.85(m，2H)；ESI MS m/z 452[C24H2oF3N5O+H]+。
实例468-[4-(二氟甲氧基)苯基]-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2，8-二氢螺[咪唑并[1，5-a]嘧啶-3，3′-环氧丙烷]-6-胺的制备 步骤a)化合物2的制备回流下，加热1(1.0g，5.22mmol)和氢氧化钾(0.345g，85％，5.22mmol)在乙醇(2mL)中的混合物3h。将反应冷却至室温，用乙酸乙酯(10mL)稀释并通过过滤移除所形成的固体。浓缩滤液得到呈无色液体状的2(0.65g，80％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.47(s，4H)，3.95(s，4H)。
步骤b)化合物3的制备在65℃下，加热2(0.63g，4.06mmol)和叠氮化钠(0.66g，10.2mmol)在DMSO中的混合物整夜。将反应冷却至室温，用水稀释并将其萃取至二氯甲烷中。用水洗涤已合并的二氯甲烷萃取液，用硫酸钠干燥，过滤且于室温下将其浓缩至2mL的体积，并用THF稀释。随后，用THF中的三苯基膦(2.56g，9.75mmol)处理此溶液，并在室温下搅拌10min，用水(0.29g，16.2mmol)处理并在室温下搅拌整夜。随后，浓缩混合物，用二氯甲烷稀释并用10％HCl水溶液萃取。用二氯甲烷洗涤已合并的萃取液水溶液，并浓缩得到呈白色固体状的3(0.51g，66％)1H NMR(500MHz，D2O)δ4.49(s，4H)，3.42(s，4H)。
步骤c)化合物5的制备在70℃下，加热4(0.50g，1.12mmol)、3(0.50g，2.64mmol)和三乙胺(0.57g，5.60mmol)在乙醇中的混合物3h，将其冷却至室温，浓缩并使其在乙酸乙酯与水之间分溶。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，1∶4乙酸乙酯/己烷)纯化得到呈白色泡沫状的5(0.389g，70％)1H NMR(500MHz，CDCI3)δ7.61(s，1H)，7.49(dt，J＝7.5，1.5Hz，1H)，7.47-7.44(m，1H)，7.33-7.19(m，4H)，7.11(d，J＝8.8Hz，2H)，6.52(t，J＝73.4Hz，1H)，4.52-4.47(m，4H)，4.14-4.06(m，2H)，3.87-3.77(m，2H)；ESI MS m/z 494[C21H18BrF2N3O2S+H]+。
步骤c)化合物6的制备在室温下，搅拌5(0.389g，0.79mmol)和叔丁基过氧化氢(1.42g的70％水溶液，15.8mmol)在甲醇和浓氢氧化铵水溶液(5.0mL)中的混合物7h，用10％硫代硫酸钠水溶液(30mL)处理并浓缩以移除大部分甲醇。用二氯甲烷萃取所得混合物水溶液。合并二氯甲烷萃取液并用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，95∶5∶0.25二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化此残余物得到呈白色泡沫状的6(0.179g，47％)1H NMR(300MHz，CDCI3)δ7.56(t，J＝1.7Hz，1H)，7.40-7.37(m，1H)，7.38(d，J＝8.8Hz，2H)，7.29-7.26(m，1H)，7.15(t，J＝7.9Hz，1H)，7.04(d，J＝8.7Hz，2H)，6.48(t，J＝73.9Hz，1H)，4.57-4.53(m，2H)，4.46^.42(m，2H)，3.79(s，4H)；ESI MS m/z 477[C21H19BrF2N4O2+H]+。
步骤d)8-[4-(二氟甲氧基)苯基]-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2，8-二氢螺[咪唑并[1，5-a]嘧啶-3，3′-环氧丙烷]-6-胺的制备在回流温度下，加热6(0.10g，0.21mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸(0.035g，0.250mmol)、双(三苯基膦基)氯化钯(II)(0.0073g，0.11mmol)、三苯基膦(0.0055g，0.021mmol)和碳酸钠(0.066g，0.63mmol)在3∶1 DME/水中的混合物2h，将其冷却至室温并用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(硅石，97∶2.5∶0.5二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵)纯化此残余物得到黄色泡沫(0.089g，85％)。通过半制备型LC进一步纯化此泡沫，得到呈白色固体状的标题产物，熔点96-107℃；1H NMR(500MHz，CD3OD)□8.17-8.16(m，1H)，8.02-7.98(m，1H)，7.52-7.51(m，2H)，7.45(t，J＝7.9Hz，1H)，7.40-7.34(m，4H)，7.09(d，J＝8.8Hz，2H)，6.01(t，J＝74.1Hz，1H)，4.50-4.47(m，4H)，3.97-3.89(m，2H)，3.76-3.69(m，2H)；ESI MS m/z496[C26H22F3N5O2+H]+。
实例478′-[4-(二氟甲氧基)苯基]-8′-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2′，8′-二氢螺[环丁烷-1，3′-咪唑并[1，5-a]嘧啶]-6′-胺的制备 使用与实例44中所述的程序基本相同的程序并使用1，1-二(氨基甲基)环丁烷作为起始材料，获得呈白色固体状的标题产物，熔点220-226℃；1H NMR(500MHz，CD3OD)□8.16-8.15(m，1H)，8.01-7.97(m，1H)，7.54-7.51(m，2H)，7.44(t，J＝7.8Hz，1H)，7.40-7.37(m，4H)，7.08(d，J＝8.8Hz，2H)，6.80(t，J＝74.1Hz，1H)，3.65-3.58(m，2H)，3.46-3.39(m，2H)，2.09-2.01(m，2H)，1.92-1.87(m，4H)；ESI MS m/z 492[C27H24F3N5O+H]+。
实例48测试化合物的酶活性和测试化合物对hBACE1、MuBACE1和hBACE2的抑制作用的评估检定条件10nM人BACE1(或10nM鼠BACE1、1.5nM人BACE2)，25μM底物(WABC-6，MW 1549.6，来自AnaSpec)；最终缓冲条件50mM乙酸钠，pH4.5，0.05％CHAPS，25％PBS；温度室温；试剂信息乙酸钠Aldrich，目录号24，124-5，CHAPSResearch Organics，目录号1304C，1X PBSMediatech(Cellgro)，目录号21-031-CV；肽底物AbzSEVNLDAEFRDpaAnaSpec，肽名称WABC-6；底物储备液(AbzSEVNLDAEFRDpa)浓度的测定二甲亚砜(DMSO)中的25mM储备溶液是使用肽重量和MW制备并稀释至25μM。所述浓度是使用18172M-1cm-1的消光系数ε在354nm吸光率下测定。底物储备液是分成小份等分试样，存储于-80℃下。[底物储备液]＝ABS354nm×106/18172(nm)。
酶储备液浓度的测定在pH6的6M盐酸胍(来自Research Organics，目录号5134G-2)中，使用对于hBACE1和MuBACE1而言为64150M-1cm-1、对于hBACE2而言为62870M-1cm-1的ε，通过ABS在280nm下测定每一种酶的储备液浓度。
(每一种酶的消光系数ε280nm都是基于已知的氨基酸组成和已发表的Trp(5.69M-1cm-1)和Tyr(1.28M-1cm-1)残基的消光系数(Anal.Biochem.182，319-326)进行计算。)稀释和混合步骤总反应体积100μL1.制备缓冲液A(66.7mM乙酸钠，pH4.5，0.0667％CHAPS)中的2X抑制剂稀释液；2.制备缓冲液A(66.7mM乙酸钠，pH4.5，0.0667％CHAPS)中的4X酶稀释液；3.制备1X PBS中的100μM底物稀释液；4.将50μL 2X抑制剂和25μL 100μM底物加入96孔板(来自DYNEX Technologies，VWR#11311-046)的每一孔中，迅速将25μL 4X酶加入抑制剂和底物混合器中，起始荧光读数。
荧光读数在室温下，每40秒取得λex320nm和λem420nm时的读数历时30min，以确定底物分解速率(vi)的直线斜率。
抑制％的计算抑制％＝100×(1-vi/vo)(vi＝抑制剂存在时的底物分解速率，vo＝不存在抑制剂时的底物分解速率)IC50测定法抑制％＝[(B×IC50n)+(100×Ion)]/(IC50n+Ion)。
人重组BACE2的荧光动力学检定此检定是用于提供用于分析所测试的化合物的动力学和选择性参数。
材料和方法最终检定条件10nM人BACE1(或10nM鼠BACE1，1.5nM人BACE2)，25μM底物(WABC-6，MW 1549.6，来自AnaSpec)。最终缓冲条件50mM乙酸钠，pH4.5，0.05％CHAPS，25％PBS。温度室温。试剂信息乙酸钠Aldrich，目录号24，124-5，CHAPSResearch Organics，目录号1304C，1X PBSMediatech(Cellgro)，目录号21-031-CV；肽底物AbzSEVNLDAEFRDpaAnaSpec，肽名称WABC-6。
底物(AbzSEVNLDAEFRDpa)储备液浓度的测定使用肽重量和MW制备DMSO中的25mM储备溶液，并将其稀释至25μM。所述浓度是使用18172M-1cm-1的消光系数ε在354nm吸光率下测定。底物储备液是分成小份等分试样，存储于-80℃下。[底物储备液]＝ABS354nm×106/18172(nm)。
酶储备液浓度的测定在PH6的6M盐酸胍(来自Research Organics，目录号5134G-2)中，使用对于hBACE1和MuBACE1而言为64150M-1cm-1、对于hBACE2而言为62870M-1cm-1的ε，通过ABS于280nm下测定每一种酶的储备液浓度。(每一种酶的消光系数ε280nm都是基于已知的氨基酸组成和已发表的Trp(5.69M-1cm-1)和Tyr(1.28M-1cm-1)残基的消光系数(Anal.Biochem.182，319-326)进行计算。)稀释和混合步骤总反应体积100μL1.制备缓冲液A(66.7mM乙酸钠，pH4.5，0.0667％CHAPS)中的2X抑制剂稀释液；2.制备缓冲液A(66.7mM乙酸钠，pH4.5，0.0667％CHAPS)中的4X酶稀释液；3.将1X PBS中的100μM底物稀释液、50μL 2X抑制剂和25μL 100μM底物加入96孔板(来自DYNEX Technologies，VWR#11311-046)的每一孔中，随后迅速将25μL4X酶加入抑制剂和底物混合器中，并起始荧光读数。
荧光读数在室温下，每40秒取得λex320nm、λem420nm时的读数历时30min，以确定底物分解速率(vi)的直线斜率。
对抑制％计算的分析抑制％＝100×(1-vi/vo)(vi＝抑制剂存在时的底物分解速率，vo＝不存在抑制剂时的底物分解速率)IC50测定法抑制％＝[(B×IC50n)+(100×Ion)]/(IC50n+Ion)。
所获得的数据展示于下表II中。除非另作说明，否则IC50值表示100％抑制作用时获得的值。
表II
表II，续表
表II，续表
结果和讨论由上述表II所示的数据可看出，本发明的化合物为BACE1的有效和选择性抑制剂。
权利要求
1.一种式I化合物 其中X为N、NO或CR19；Y为N、NO或CR11；Z为N、NO或CR20，其限制条件为X、Y或Z中不超过两者可为N或NO；R1和R2各自独立地为H、CN或视情况经取代的C1-C4烷基；R3和R4各自独立地为H或视情况经取代的C1-C4烷基，或R3和R4可合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的3元至7元环，或R3可与其所连接的原子和相邻碳原子合起来形成双键；R5和R6各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR13、NR14R15或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基，或当连接至相邻碳原子时，R5和R6可与其所连接的原子合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的视情况经取代的5元至7元环；R7、R8、R9、R10、R11、R19和R20各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR16、NR17R18或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基；m为0或1；n为0、1、2或3；_为单键或双键，其限制条件为当m为0时，则_必须为单键；R12、R13和R16各自独立地为H或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基或芳基；且R14、R15、R17和R18各自独立地为H或C1-C4烷基；或其互变异构体、其立体异构体或其医药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R1和R2为H。
3.根据权利要求1和2中任一权利要求所述的化合物，其中m和n为1。
4.根据权利要求1、2和3中任一权利要求所述的化合物，其中式I具有结构Ia
5.根据权利要求4所述的化合物，其中式I具有结构Ib
6.根据权利要求5所述的化合物，其中R1和R2为H。
7.根据权利要求6所述的化合物，其中X为N。
8.根据权利要求7所述的化合物，其中n为1。
9.根据权利要求1所述的化合物，其选自由下列各物组成的群组8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；7-(3-嘧啶-5-基苯基)-7-[4-(三氟甲氧基)苯基]-7H-咪唑并[1，5-a]咪唑5-胺；8-[4-氟-3-(4-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(5-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(5-氯吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8S)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8R)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8R)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；(8S)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(4-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(4-甲氧基苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-(4-甲氧基苯基)-8-(3-嘧啶-5-基苯基)-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-(4-氟-3-嘧啶-5-基苯基)-8-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[4-氟-3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-(4-氟-3-嘧啶-5-基苯基)-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[4-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；8-[4-氟-3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-[4-(三氟甲氧基)苯基]-2，3，4，8-四氢咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；其互变异构体；其立体异构体；和其医药学上可接受的盐。
10.一种用于治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的方法，其包含向所述患者提供治疗有效量的根据权利要求1至9中任一权利要求所述的化合物。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述疾病或病症是选自由下列疾病组成的群组阿兹海默氏病(Alzheimer’s disease)、轻度认知障碍、唐氏综合症(Down’s syndrome)、遗传性脑出血伴Dutch型淀粉样变性病、脑淀粉样血管病和退化性痴呆。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述疾病为阿兹海默氏病。
13.一种医药组合物，其包含医药学上可接受的载剂和有效量的根据权利要求1至9中任一权利要求所述的化合物。
14.一种用于制备式I化合物的方法 其中X为N、NO或CR19；Y为N、NO或CR11；Z为N、NO或CR20，其限制条件为X、Y或Z中不超过两者可为N或NO；R1和R2各自独立地为H或视情况经取代的C1-C4烷基；R3和R4各自独立地为H或视情况经取代的C1-C4烷基，或R3和R4可合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的3元至7元环，或R3可与其所连接的原子和相邻碳原子合起来形成双键；R5和R6各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR13、NR14R15或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基，或当连接至相邻碳原子时，R5和R6可与其所连接的原子合起来形成视情况含有一或两个选自O、N或S的杂原子的视情况经取代的5元至7元环；R7、R8、R9、R10、R11、R19和R20各自独立地为H、卤素、NO2、CN、OR16、NR17R18或各自视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基或C3-C8环烷基；m为0或1；n为0、1、2或3；_为一单键或一双键，其限制条件为当m为0时，则_必须为一单键；R12、R13和R16各自独立地为H或各视情况经取代的C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基或芳基；且R14、R15、R17和R18各自独立地为H或C1-C4烷基；所述方法包含使式II的化合物 (其中Hal为Cl或Br且R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和n如上文关于式I所述)与式III的化合物 (其中W为B(OH)2、Sn(正丁基)3或Sn(CH3)3且X、Y、Z、R9、R10、m和_如上文关于式I所述)在钯催化剂存在下视情况于溶剂存在下反应。
15.一种根据权利要求1至9中任一权利要求所述的化合物的用途，其是用于制造用于治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的药物。
全文摘要
本发明提供一种式(I)的化合物及其用于治疗性治疗、预防或改善患者以升高的β淀粉样沉积物或β淀粉样蛋白含量表征的疾病或病症的用途。
文档编号A61P25/28GK1997646SQ200580019450
公开日2007年7月11日 申请日期2005年6月14日 优先权日2004年6月16日
发明者迈克尔·索蒂里奥斯·马拉马斯, 詹姆斯·约瑟夫·艾尔代伊, 伊万·苏万迪·古纳万, 基思·道格拉斯·巴恩斯, 马修·罗伯特·约翰逊, 惠钰 申请人:惠氏公司