用于测定唾液体积的体外诊断剂的制作方法

专利名称：用于测定唾液体积的体外诊断剂的制作方法
专利说明用于测定唾液体积的体外诊断剂 本发明涉及从口腔中收集唾液以检测分析物的方法；用于获得唾液的唾液收集溶液；用于生物液体的容器，该容器由底部部分和盖部分组成，分别具有外侧和内侧，其中，在盖部分中设置一个空洞作为凹槽，在其中设置传送装置，该传送装置由在盖部分的外侧上的用于穿透收集器的装置和在盖部分的内侧上的具有两个端部的突出物构成；用于容纳生物液体例如血液的可关闭的收集器，其具有朝向生物样品的内侧；用于模仿生理学唾液的组成的唾液模拟溶液；用于定量唾液体积(Speichelvolumen)的校准溶液；用于获得唾液的测试试剂盒；以及它们的用途。
为了测定和分析临床化学参数，在人体医学和兽医学上主要使用血液。但也存在着能再反映受检者状况的其他体液。它们在可达性(Zugnglichkeit)方面有所差异。
血液作为研究材料具有以下缺点底物复杂，可用性(Verfügbarkeit)有限，为了获得样品需要专业人员并因而是耗时的，以及患者要遭受疼痛和应激。
唾液只由三个大的和许多较小的唾液腺产生，主要在口腔中释放。在获得样品时必须区分开只由腺体形成并且一般从相应的排泄管排出的腺唾液和来自口腔的混合唾液。对于科学研究(涉及确定的腺体类型的生理学和病理学以及转运现象)首先需要腺唾液，而混合唾液主要可用于能够推断出血液组分的诊断性例行研究。
唾液是一种容易并且无应激地即可获得的用于一系列分析物测定的样品材料。唾液研究尤其为许多疾病的诊断和治疗控制提供了有价值的帮助。着眼点在于蛋白质、激素、代谢物、电解质和各种各样的药物。
使用唾液为临床化学诊断带来一系列优点。对于受检者而言，不用血液而使用唾液时，会产生很多各种各样的优点。
较小的受检者载荷意味着，可以几乎无应激地取样。因此唾液诊断特别是对于所有这样的研究都是有意义的，即在所述研究中下丘脑-垂体-肾上腺轴线起作用。众所周知，反复的静脉穿刺会掩盖很多动力学功能测试的响应。
此外，唾液诊断对于与常规取样有关的所有研究都是有吸引力的，例如获悉生物节律、排卵监控和治疗性监控。
此外，与取血样相比，受检者的人为性贫血、感染和血栓形成的风险更小。
使用唾液在取样时还有成本较小的优点，因为在人员这方面来说，由于无需使用受过训练的医生或护理人员，因此总体而言产生比较低的成本。唾液甚至可以由受检者自己来获得，然后发送到合适的专业实验室。
在诊断方面，使用唾液还带来一些优点，例如反映出与不与蛋白质结合的血浆级分，反映出细胞的浓度比例，没有由于脂质而产生的体积排斥效应，和在一些药物情况下，唾液浓度与药理学效应有着更好的相关性。
虽然在清醒状态一直产生唾液，在24小时期间产生约1000ml，并且唾液可以经口开(Mundffnung)而容易地排出，但在实际中，特别是对于老年患者而言，在获得唾液时也会出现问题。
现有技术已经公开了用于获得唾液的多种方法或装置。
最简单情况下，通过咀嚼运动刺激唾液流出。不过，在有些条件下，这种刺激还不够，例如对于透析患者，老年受检者而言，特别是在早晨于睡醒后。
另一种方法是用Salivette收集唾液，其中通过在棉花团上咀嚼来获得唾液。为了获得唾液，将吸足唾液的棉花团塞入Salivetten-悬置容器中并进行离心。保留下来的、水样澄清的唾液用于分析。如果在获得唾液时使用固体载体，例如棉花，那么要检验待检测的物质是否被所用的材料吸附。这特别是对于检测药物而言有重大意义。
也可以通过机械刺激例如咀嚼运动来刺激唾液流出。在此情况下，给服具有标准化尺寸的树胶或石蜡，其中，受检者必须经一定时间，以例如70次咀嚼运动/分钟的速度来咀嚼它们，其中，咀嚼运动的节奏可以通过节拍器进行监视，并且在1～2分钟后收集在口腔中积聚的唾液。
为了获得混合唾液，还可以使用吐的方法。在该方法中，在口腔中收集的唾液简单地被吐出。该过程可以以确定的时间间隔重复多次。
一种可选择的获得唾液的方法是从口腔中吸出，其中，通过抽吸器，经过预先确定的时间将在口腔中收集的唾液吸出。
此外，在口腔中汇集的唾液易于通过向外滴而被收集在样品容器中。
不过，所有以上所述获得唾液的方法的共同缺点在于，对于患者或对于唾液流量较少的人而言，只能收集到很少量的唾液，这种获得是不可重复的，体积几乎不能进行定量，因此在诊断中使用是成问题的。
本发明的目的是提供各个组成部分或一种可重复性地提取和定量唾液以用于进一步分析目的的方法。
本发明目的分别独立地通过以下内容来实现从口腔中收集唾液以检测分析物的方法，所述方法包括以下步骤(a)清洁口腔，(b)用唾液收集溶液刺激唾液分泌，(c)从口腔中除去唾液-唾液收集溶液混合物，并收集在容器中，(d)将唾液-唾液收集溶液混合物转移入可关闭的收集器中；唾液收集溶液，其由具有刺激味觉性质的试剂(Mittel)、指示物和/或因子(Agens)和水组成；一种容器，其中在将该容器装配好的状态下，传送装置的突出物的接近底部部分的端部与底部部分的距离最大为3mm；一种可关闭的收集器，其中包含溶液，该溶液含有用于稳定化或保存的试药(Reagens)和用于使生物液体或其组分去溶剂化的试药；唾液模拟溶液，其中含有钠、钾或钙化合物，人血清白蛋白，尿素和水；由唾液收集溶液和/或唾液模拟溶液和叠氮化钠、苯甲酸钾和/或Thimerosal组成的校准溶液；由唾液收集溶液和容器组成的测试试剂盒；以及它们的用途。在此证实有利的是，通过可标准化的方法和可标准化的组成部分提高了对于获得的唾液所进行的分析的可重复性和可信度。由于在分析步骤之一或在所使用的组成部分之一中取消了固相载体，因而证实有利的是，不会吸附待检测的物质。由于良好的重复性质，本发明还可以用于其中需要多种唾液样品的过程控制。受检者与受检者之间的可变性也较小。
通过具有刺激味觉的性质的唾液收集溶液，提高了唾液分泌，因此提供更大的样品量用于分析，并且保持多次唾液接收的波动较低。
证实有利的是，唾液-唾液收集溶液混合物经过整合在容器中或上的传送装置而转移入可关闭的收集器中，其中，样品和实施分析的人员之间不需要进行接触，因此感染风险显著降低。
通过经在容器中的过滤装置从唾液-唾液收集溶液混合物中除去个别组分，可及早去除既会影响分析物也会妨碍分析本身的颗粒。
通过使用含有具有保存和还原性质的溶液的可关闭的收集器，一方面改善了唾液-唾液收集溶液混合物的稳定性，和另一方面改善了会对接下来的分析产生负面影响的各种各样的蛋白质，特别是糖蛋白的去除(例如通过离心)。
有利地，使用校准溶液，从而既能够对唾液体积进行定量，也能够对由此确定的分析物进行定量。
通过比较唾液-唾液收集溶液混合物的指示物和/或因子的浓度和/或消光度(Extinktion)与在提取前在唾液中存在的指示物和/或因子的浓度和/或消光度，可以有利地防止分析结果被干扰性成分所歪曲，所述成分是受检者在获得唾液前短时间内例如通过摄取食物等而服用的。
将在抽成真空的收集器中存在的唾液-唾液收集溶液混合物进行离心，任选事先进行混合，从而可以使干扰性组分迁移入颗粒状沉淀(Pellet)，并将澄清的上清液用于分析，以便获得可重复的结果。
证实有利的是，将唾液-唾液收集溶液混合物用于分析，从而能够分析易于获得的样品材料。
可以在标准化的实验室测量设备上进行分析，因而无需昂贵的仪器，也不需要受过特别训练的人员来操作仪器。
具有刺激味觉性质的试剂选自无机和/或有机食用酸和/或其盐或者它们的混合物，包括磷酸、乳酸、柠檬酸、抗坏血酸，因此受检者不会由于可能无意地吞咽下唾液收集溶液而遭受危险。
具有味觉性质的试剂也可以是活性物质，例如毛果芸香碱，因此可以使用市场上已存在的药剂，其相容性已得到千百次测试和评价。
具有刺激味觉性质的试剂的浓度选自下限为0.0005％，特别是0.01％，优选1％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围，其中，通过所选的浓度来最佳地刺激唾液流出，但不会对受检者造成危害。
还证实有利的是，含有染料作为指示物，因此可以简便地可视地检测唾液-唾液收集溶液混合物。所述染料是水溶性的，因此可以简便地并因而低成本地制备唾液收集溶液。
所述染料优选引起黄色着色，并且选自酒石黄、姜黄素、藏红(Safran)、喹啉黄(Chinolingelb)、日落黄FCF、橙黄S(GelborangeS)、虫红、洋红酸、洋红、胡萝卜素或者它们的混合物，因此所获得的唾液-唾液收集溶液混合物可以用在实验室或医生诊所(Arztpraxen)中已存在的设备进行测量。
所述染料也可以选自核黄素、核黄素-5′-磷酸、叶绿素和叶绿酸、叶绿素和叶绿酸的含铜络合物、焦糖、简单的焦糖、亚硫酸盐碱液(Sulfitlaugen)-焦糖、氨-焦糖、亚硫酸铵-焦糖、植物炭，辣椒色素、辣椒黄素、辣椒玉红素、甜菜红、甜菜苷、花色素、氧化铁和氢氧化铁、偶氮玉红、二蓝光酸性红(Carmoisin)、丽春红4R、胭脂虫红A、Allurarot AC、专利蓝V、靛蓝、靛卡红、亮蓝FCF、绿S、亮黑BN、黑PN、棕HT、蕃茄红素、β-阿朴-8′-胡萝卜素醛(C 30)，β-阿朴-8′-胡萝卜素酸(C 30)-乙酯、叶黄素、由美拉德化合物构成的物质和/或它们的混合物，因此可以实现许多各种着色，因而能够进行颜色编码(Farbcodierung)。
染料的浓度选自下限为0.0001％，特别是0.005％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围，因此可以保持在制备唾液收集溶液时染料的成本很低。
当使用在医药产品和/或体外诊断剂或者药用物质意义上的因子时，证实有利的是，使用其安全性已经在临床研究中被评价或者为此提供关于生理学和病理学状况的信息的物质。
有利地，掺入可以用常规使用的实验室测量设备进行测定的因子，从而可以在任何通常实验室中进行分析。
添加选自以下的至少一种代表物作为因子胆红素，醋氨酚，酸性磷酸酶，白蛋白，肌酸酐，醇，碱性磷酸酶，丙氨酸转氨酶，氨，淀粉酶，天冬氨酸转氨酶，胆红素，非缀合和缀合的，尿素，钙，碳酸氢盐，胆碱酯酶，LDL或HDL胆固醇，溶菌酶，淀粉酶，肌酸激酶，肌酸激酶-MB，氯化物，卡马西平，肌酸酐，C-反应性蛋白，直接胆红素，地高辛，二氧化碳，铁，γ-谷氨酰转移酶，葡萄糖，磁性HDL-胆固醇试药，钾，乳酸盐，乳酸脱氢酶，锂，脂酶，无机化合物，例如微量元素，矿物质，如镁、钠，新生的胆红素，苯巴比妥，磷，苯妥英，扑米酮，脑脊液蛋白(Liquorprotein)，水杨酸盐，总胆红素，茶碱，总铁结合容量的试药，总蛋白质，甘油三酯，尿蛋白，尿酸，β-微球蛋白，皮质类固醇激素或性激素结合性球蛋白，硫氰酸盐，运铁蛋白，各种脂质，脂蛋白，蛋白质，碳水化合物，特别是水溶性碳水化合物，维生素，特别是水溶性维生素，例如B族、C族和F族维生素，无机化合物，例如微量元素，矿物质，激素，例如醛固酮，雄甾烯二酮，皮质醇，二氢表雄甾酮，或其硫酸酯，雌二醇，雌三醇，黄体酮，睾酮，或者它们的混合物，对此，使用食品法所允许的药剂来制备唾液收集溶液，因此其作用已经被列为安全的那一类。
所述因子的浓度选自下限为0.0000000001％，特别是0.00005％，优选0.001％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围，由此使用了生理学上安全的浓度。
在一个进一步变化形式中，可以使用芳香物质和/或增味剂，因此可以改善唾液收集溶液的味道，从而还可以额外地刺激唾液流出，并增加分泌出的唾液的体积。
所述芳香物质选自糖类和/或糖交换物(Zuckeraustauschstoffe)，例如蔗糖、麦芽糖、果糖，和/或甜味剂，例如糖精、天冬甜素，和/或它们的混合物，从而一方面非糖尿病的人不必放弃其所习惯的味道，另一方面即使糖尿病人也可以放心地用该唾液收集溶液进行漱口，而不必在吞咽时担心胰岛素休克。
所述芳香物质和/或增味剂是天然和/或合成来源的，选自水果，如苹果，覆盆子，樱桃，草莓，柠檬，甜柠檬，橙，甘草，药草，奎宁，咖啡因，茶素(Teein)或它们的混合物，从而使用了这样的物质，人类已经习惯于所述物质，与之相关的是令人愉快的感觉或味道经历。
所述芳香物质和/或增味剂的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为10％，特别是5％，优选1％的范围，因此可以实现最佳的味道调整，因此提高唾液收集溶液的可接受性。
pH值选自下限为3，优选3.5，特别是4，和上限为6，优选5，特别是4.5的范围，因此最佳地刺激唾液分泌，此外还降低pH值，即接近血浆pH值，从而表现出较小的波动。
朝向底部部分的端部的距离选自下限为0.1mm，特别是0.5mm，优选1mm，和上限为3mm，特别是2mm，优选1.5mm的范围，因此还可以传送十分小的体积，从而即使用少量唾液-唾液收集溶液混合物也可进行高价值的分析。
在所述容器的一种进一步变化形式中的规划是，在传送装置之前或之中安装过滤装置，从而除去妨碍分析的颗粒。
过滤装置由选自以下的材料形成玻璃棉、棉花、滤纸、泡沫橡胶、再生的纤维素、三乙酸纤维素、尼龙、硝化纤维素、聚二氟乙烯(PVDF)、PVP、聚醚磺酸酯(Polyethersulfonat)，它们对于生物样品具有很好的过滤性质。
在可选的实施方案中，可以安装膜形式的过滤装置，从而可以将其直接整合在传送装置中，而不需要额外的或只是最小的空间来对其进行安装。
有利地，过滤装置的孔径选自下限为1μm，特别是10μm，优选20μm，和上限为100μm，特别是60μm，优选50μm的范围，从而一方面去除了唾液-唾液收集溶液混合物的大部分污染性颗粒，另一方面保证没有阻塞危险的通过性。
用于稳定化或保存的试药可以是苯甲酸钾、山梨酸钾、叠氮化钠和/或Thimerosal，从而可以较长时间保存该唾液-唾液收集溶液混合物，而不会因细菌或酶作用而对分析物的耐久性造成危害。
苯甲酸钾或山梨酸钾的浓度选自下限为0.05％，特别是0.1％，优选1％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围，叠氮化钠或Thimerosal的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为1％，特别是0.5％，优选0.2％的范围，从而实现对于所希望的效果即稳定化或保存的最好的作用。
用于去溶剂化的试药是硫酸铵、氯化钠、氯化钾和/或氯化钙，从而例如可以改变蛋白质，特别是糖蛋白和蛋白聚糖的表面性质，并且这些蛋白质可以通过离心而去除，而不会妨碍接下来的分析。
用于去溶剂化的试药的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围，从而虽然出现效果降低，但并没有改变分析物，其中所述分析可被歪曲。
所述溶液的体积选自下限为5μl，特别是20μl，优选30μl，和上限为500μl，特别是100μl，优选50μl的范围，在此情况下可以实现9.5ml收集器的内侧的最佳涂覆。
在一种进一步变化形式中，用所述溶液对收集器的内侧进行喷洒，并任选进行干燥，因此保证不改变总体积，从而可以准确无误地对唾液量进行定量。
将收集器抽成真空也被证实是有利的，因为以此方式唾液-唾液收集溶液混合物自动地从容器转移到收集器中，因而不会对进行样品获取或分析的人员造成危害。
唾液模拟溶液的钠、钾或钙化合物的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为20％，特别是10％，优选5％的范围，人血清白蛋白的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是2.5％，优选1％的范围，以及尿素的浓度选自下限为0.0005％，特别是0.001％，优选0.01％，和上限为2％，特别是1％，优选0.5％的范围，从而模仿了唾液的生理学浓度，以此方式可以与天然的唾液相比较。
在一种进一步变化形式中，乳铁蛋白的浓度选自下限为0.000001％，特别是0.00001％，优选0.0001％，和上限为0.1％，特别是0.01％，优选0.005％的范围，因此含有在天然的唾液中可以检测的其他成分，由此提高可重复性。
此外，明胶的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围，因此同样模仿了唾液的天然组成。
唾液模拟溶液的pH值选自下限为5，优选5.5，特别是6，和上限为7.5，优选7，特别是6.5的范围，可以实现定量过程的优化。
在校准溶液中，以近似反比的比例含有唾液收集溶液和唾液模拟溶液，从而可以进行定量。
可以分别以梯度含有唾液收集溶液和唾液模拟溶液的体积，从而能够进行定量。
叠氮化钠、苯甲酸钾、山梨酸钾和/或Thimerosal的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围，在此情况下可以延长溶液的耐久性。
有利地，测试试剂盒包含唾液收集溶液和容器，从而受检者在没有医务专业人员的情况下也可获得唾液样品。
通过测试试剂盒中的可关闭的收集器，可以将样品发送出去。
测试试剂盒中的唾液模拟溶液和/或至少一种校准溶液使得能够对唾液体积进行定量。
在测试试剂盒的一种进一步变化形式中，包括至少一个微量滴定板、比色皿(Küvette)和/或使用说明书，从而一方面可以使用标准化的实验室测量设备来进行评价，另一方面即使是未受训练的人员也可以实施定量。
附图为

图1容器的横截面； 图2用经分光光度计测定的标准直线对唾液体积进行定量而得到的结果。
首先需要说明的是，在不同地描述的实施方案中，为相同的部件设定相同的参考标记或相同的构件名称，其中，包含在整个说明书中的公开内容根据意义可以应用于具有相同参考标记或相同构件名称的相同部件上。此外，在本说明书中所选用的位置说明，例如上、下、侧等基于直接描述以及所示的图，当位置改变时，根据意义可以应用于新的位置。此外，来自所示和所述的不同实施例的单个特征或特征组合还可以描绘独立的、有创造性的或根据本发明的解决方案。
本发明描述了收集并定量唾液或体积的方法。此外还描述了为此所需的各个组成部分。
以下描述了唾液收集系统的各个组成部分，在此需指出的是，即使每个组成部分本身也已是一项发明。
唾液收集溶液由至少一种味觉刺激物、一种指示物和/或因子和水组成。所述味觉刺激物用于刺激唾液分泌。所述味觉刺激物由无机和/或有机食用酸和/或其盐或者它们的混合物形成。作为有机食用酸，例如可以使用抗坏血酸、乳酸等。优选使用柠檬酸。代替所述有机和/或无机食用酸例如磷酸，或者除了它们之外，还可以使用活性物质，例如毛果芸香碱，以用于刺激唾液分泌。除已经提及的无机和有机食用酸外，还可以使用它们的盐，例如钠盐或钾盐。
具有刺激味觉性质的试剂的浓度可以选自下限为0.0005％，特别是0.01％，优选1％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围。
此外，该唾液收集溶液还包含指示物和/或因子，其中所述指示物优选由染料形成。在指南94/36/EG的意义上的采用各有效措辞的所有染料都是可考虑的。在一个优选的实施方案中，使用水溶性的并且引起黄色着色的染料。作为引起黄色着色的染料，提供了酒石黄、姜黄素、藏红、喹啉黄、日落黄FCF、橙黄S、虫红、洋红酸、洋红、胡萝卜素或者它们的混合物。
不言而喻还可以使用引起唾液收集溶液呈现其他颜色的染料，例如核黄素、核黄素-5′-磷酸、叶绿素和叶绿酸、叶绿素和叶绿酸的含铜络合物、焦糖、简单的焦糖、亚硫酸盐碱液-焦糖、氨-焦糖、亚硫酸铵-焦糖、植物炭，辣椒色素、辣椒黄素、辣椒玉红素、甜菜红、甜菜苷、花色素、氧化铁和氢氧化铁、偶氮玉红、二蓝光酸性红、丽春红4R、胭脂虫红A、Allurarot AC、专利蓝V、靛蓝、靛卡红、亮蓝FCF、绿S、亮黑BN、黑PN、棕HT、蕃茄红素、β-阿朴-8′-胡萝卜素醛(C 30)，β-阿朴-8′-胡萝卜素酸(C 30)-乙酯、叶黄素、由美拉德化合物构成的物质和/或它们的混合物。
所述染料的浓度选自下限为0.0001％，特别是0.005％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围，从而确保引起唾液收集溶液呈现出可以例如通过光度法检测的颜色。
与在唾液收集溶液中所使用的染料的浓度相独立地，还额外地在预先确定的波长下测定唾液收集溶液的消光度。
代替指示物或者另外，还可以向唾液收集溶液中混入因子。
对于用作因子，可以考虑在医药产品(根据指南93/42/EWG，采用各有效措辞)、体外诊断剂(根据指南98/79/EG，采用各有效措辞)和/或药用物质意义上的物质，特别是其安全性已经在临床研究进行评价的那些。作为因子，还可以使用根据指南95/2/EG没有被定义为染料或甜味剂，但可以作为食品使用的那些物质。
作为因子，提供了胆红素，醋氨酚，酸性磷酸酶，白蛋白，肌酸酐，醇，碱性磷酸酶，丙氨酸转氨酶，氨，淀粉酶，天冬氨酸转氨酶，胆红素，非缀合和缀合的，尿素，钙，碳酸氢盐，胆碱酯酶，LDL或HDL胆固醇，溶菌酶，淀粉酶，肌酸激酶，肌酸激酶-MB，氯化物，卡马西平，肌酸酐，C-反应性蛋白，直接胆红素，地高辛，二氧化碳，铁，γ-谷氨酰转移酶，葡萄糖，磁性HDL-胆固醇试药，钾，乳酸盐，乳酸脱氢酶，锂，脂酶，无机化合物，例如微量元素，矿物质，如镁、钠，新生的胆红素，苯巴比妥，磷，苯妥英，扑米酮，脑脊液蛋白，水杨酸盐，总胆红素，茶碱，总铁结合容量的试药，总蛋白质，甘油三酯，尿蛋白，尿酸，β-微球蛋白，皮质类固醇激素或性激素结合性球蛋白，硫氰酸盐，运铁蛋白，各种脂质，脂蛋白，蛋白质，碳水化合物，特别是水溶性碳水化合物，维生素，特别是水溶性维生素，例如B族、C族和F族维生素，无机化合物，例如微量元素，矿物质，激素，例如醛固酮，雄甾烯二酮，皮质醇，二氢表雄甾酮，或其硫酸酯，雌二醇，雌三醇，黄体酮，睾酮，或者它们的混合物。
所述因子的浓度选自下限为0.0000000001％，特别是0.00005％，优选0.001％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围。
在一种进一步变化形式中，还可以向该唾液收集溶液中添加芳香物质和/或增味剂，其例如增强柠檬酸味道或使该唾液收集溶液变甜，例如，这例如可以用糖类或糖交换物，如蔗糖、麦芽糖、果糖，和/或甜味剂，如糖精、天冬甜素，和/或它们的混合物来实现。作为甜味剂，可以使用在指南94/35/EG意义上的采用各有效措辞的所有物质。
为了改善唾液收集溶液的味道，还可以添加天然以及合成来源的芳香物质和/或增味剂，它们模拟了苹果，覆盆子，樱桃，草莓，柠檬，甜柠檬，橙，甘草，药草，奎宁，咖啡因，茶素或它们的混合物的味道。
所述芳香物质和/或增味剂的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为10％，特别是5％，优选1％的范围。
唾液收集溶液的pH值选自下限为3，优选3.5，特别是4，和上限为6，优选5，特别是4.5的范围。
为避免污染，用现有技术已知的方法对唾液收集溶液进行消毒，例如通过无菌过滤或者高压灭菌和任选随后分成等份。将唾液收集溶液装入防碎的容器中，并密封。有利地，还避光保存唾液收集溶液。
使用体积选自下限为0.5ml，优选1ml，特别是2ml，和上限为10ml，优选7ml，特别是5ml的范围的唾液收集溶液来冲洗口腔。证实特别有利的是，用体积为4ml的唾液收集溶液来冲洗口腔。不言而喻，用唾液收集溶液冲洗口腔可以重复多次。在用唾液收集溶液冲洗口腔之前，口腔粘膜例如通过用水漱口而进行清洁。还证实有利的是，在用唾液收集溶液冲洗口腔之前约30～60分钟时间内不摄入食物，也不摄入液体，以避免可能歪曲分析。为了还能够排除这样的偏差，可以测定在接收唾液之前在受检者口腔中存在的指示物或因子的浓度，并且在进一步分析中例如通过借助于校正系数来考虑它们。
唾液收集溶液在口腔中停留的时间选自下限为20秒，优选30秒，特别是45秒，和上限为10分钟，优选4分钟，特别是3分钟的范围。证实特别有利的是，唾液收集溶液在口腔中保留1～2分钟。
现在，如此获得的由唾液和唾液收集溶液组成的混合物或其一等分试样可以直接用于分析，或者离心，并用现有技术已知的用仪器的、湿法化学的(nass-chemisch)或免疫学的分析方法来测定上清液。
优选地，在容器1中收集唾液-唾液收集溶液混合物，并进一步进行处理，随后才定量体积或进行分析。
以下列出了唾液收集溶液组成的多个实例，在此需注意的是，根据本发明的唾液收集溶液并不限于以下实例。
分别代替柠檬酸二氢钠或单柠檬酸三碱价柠檬酸钠，还可以使用它们的钾化合物或钙化合物。
在一个可选择的实施方案中，通过测定唾液收集溶液的光密度(消光度)来确定所加入的染料的量。例如力求消光度的目标值为2，通过加入相应量的所希望的染料例如酒石黄来达到该目标值。唾液收集溶液的光密度的目标值选自下限为1.0，优选1.2，特别是1.5，和上限为2.8，优选2.6，特别是2.4的范围。
唾液收集溶液中酒石黄的浓度选自下限为1mg/l，优选10mg/l，特别是50mg/l，和上限为500mg/l，特别是250mg/l，优选100mg/l的范围。证实特别有利的是，酒石黄的浓度为50mg/l。
为了测定光密度(OD)(同义词为“消光度”)，可以使用选自下限为380nm，优选400nm，特别是420nm，和上限为800nm，680nm，特别是560nm的范围的波长。优选地，在波长450nm下测定含有酒石黄的唾液收集溶液的光密度。
如已经在上述实施例中所指出的那样，在唾液收集溶液的可选择的实施方案中，不用染料或除染料之外还添加因子，例如葡萄糖。在唾液收集溶液中葡萄糖的浓度选自下限为1g/l，优选2g/l，特别是3g/l，和上限为12g/l，优选10g/l，特别是8g/l的范围。证实特别有利的是，唾液收集溶液的葡萄糖浓度为4g/l。
因此，根据在唾液收集溶液组成中所使用的指示物和/或因子，它们不但可以落入医药产品或药物范畴内，而且可以落入食品范畴内。
以下借助于在图1中所示的标记详细解释容器1的发明。
图1中的容器1由底部部分2和盖部分3构成，分别具有内侧4和外侧5，其中底部部分2是近似圆柱形的杯状物。
底部部分2优选由塑料，特别是聚丙烯形成。不言而喻，底部部分2还可以由其它材料，如聚苯乙烯、聚乙烯形成。
盖部分3同样由塑料，优选由聚乙烯构成，并且可以有颜色，或者由有色塑料制成。
此外，在盖部分3中有一个空洞6，其是凹槽，其中设置了传送装置7，该传送装置由在盖部分3的外侧5上的用于穿透收集器的装置8和在盖部分3的内侧4上的具有两个端部即上端部10和下端部11的近似管状的突出物9构成。穿透装置8，例如针，安装在传送装置7朝向盖部分3的外侧5的那一侧上。在朝向容器1的内侧4的那一侧上，形成近似管状的突出物9，其为圆柱状的管。在优选同样由塑料形成(特别是由聚丙烯形成)的管状突出物9和穿透装置8之间存在螺纹或插塞式连接，以便可以固定在盖部分3的空洞6中。上述由底部部分和盖部分构成的容器1可从现有技术中获知，例如由FirmaGreiner Bio-One，Vacuette-Urinbecher所公开。
在容器1的根据本发明的实施方案中，管状突出物9的下端11和底部部分2的内侧4的底部之间的距离12选自下限为0.1mm，特别是0.5mm，优选1mm，和上限为3mm，特别是2mm，优选1.5mm的范围。经证实，距离12为1mm是特别有利的。管状突出物9的下端11和容器1的底部部分2的底部之间较小的距离12尤其可用于将即使是小体积或残留体积的生物液体，例如尿、唾液-唾液收集溶液混合物等经管状突出物9从容器1中除去。由于在分析唾液时还部分的检测传染性分析物，因此在使用本发明的容器1时还有利的是，样品可以直接转移入新的容器中，而不必由人从容器1中除去。
在容器1的一种进一步变化形式中，设计安装一个过滤装置13。该过滤装置13安装在整合的传送装置7的范围内，例如可以位于穿透装置8和传送装置7的管状突出物9之间。在一个可选择的实施方案中，过滤装置13与管状突出物9串接，或者安装在管状突出物9的走向上。通过过滤装置13，将唾液-唾液收集溶液混合物的粒状组分过滤掉。
过滤装置13可以由不同材料组成，例如玻璃棉、棉花、滤纸、泡沫橡胶、再生的纤维素、三乙酸纤维素、尼龙、硝化纤维素、聚二氟乙烯(PVDF)、PVP、聚醚磺酸酯。在一个优选的实施方案中，过滤装置13由三乙酸纤维素形成。
在过滤装置13的一种进一步变化形式中，其以膜形式安装在传送装置7的范围内，特别是在穿透装置8和管状突出物9之间。
过滤装置13的孔径选自下限为1μm，特别是10μm，优选20μm，和上限为100μm，特别是60μm，优选50μm的范围。经证实，孔径为30μm～40μm是特别有利的。
经过所述穿透装置，可以将唾液-唾液收集溶液混合物转移入经更新的容器中。现有技术已知的抽成真空的收集器适合于此。抽成真空的收集器例如为市场上的Firma Greiner Bio-One的名称为Vacuette或Firma Becton Dickinson的名称为Vacutainer的那些。通过使用抽成真空的容器，唾液-唾液收集溶液混合物自动从容器1转移入收集器中。
根据本发明的收集器含有一种由试药组成的溶液，所述试药不但赋予溶液保存和稳定性质，例如通过苯甲酸钾、叠氮化钠和/或Thimerosal，此外能够使其去溶剂化，例如通过硫酸铵、氯化钠和/或氯化钙。在此引起水合物壳(Hydrathülle)发生还原，因此改变了蛋白质，特别是糖蛋白或蛋白聚糖的表面性质。从而可以在离心步骤期间将干扰性的蛋白质去除掉，而将会在随后的分析中进行测定的其他物质则保留在上清液中。
苯甲酸钾的浓度选自下限为0.05％，特别是0.1％，优选1％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围，叠氮化钠或Thimerosal的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为1％，特别是0.5％，优选0.2％的范围，用于去溶剂化的试药的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围。
以下举出了存在于收集器中的溶液的可能组成，其中该列举对本发明不应是限制性的。
优选地，用包含上述成分选项的溶液喷洒抽成真空的收集器的内侧，以便一方面实现均匀涂覆收集器的内侧，另一方面不改变其中含有的试药的体积以及因而不改变所述试药的浓度。
在一个优选的实施方案中，为了喷洒抽成真空的收集器的内侧，使用由包含浓度为0.5g/l的Natriumacit和浓度为1.5g/l的硫酸铵的溶液所形成的混合物。
为了喷洒容纳能力近似10ml的抽成真空的收集器的内侧，所采用的溶液体积选自下限为5μl，优选10μl，特别是20μl，和上限为100μl，优选80μl，特别是50μl的范围。经证实，体积为30μl是特别有利的。不言而喻，如果使用具有更小或更大容纳体积的收集器，则同样相应地减小或增大溶液的量。
在一种进一步变化形式中，还可以对用溶液进行喷洒的收集器的内侧进行干燥。
可选择地，所述溶液还以干燥过的状态装入收集器中，以便从而不影响其中所含有的液体的体积。
对于正从事该领域工作的技术人员而言，显然还可以使用其他试药，所述试药同样可以通过修饰表面性质而有利于离心掉细胞组分，特别是糖蛋白，并且用其可以实现保存或稳定化。
此类根据本发明的抽成真空的收集器优选用于从容器1中转移唾液-唾液收集溶液混合物。
含有唾液-唾液收集溶液混合物的抽成真空的收集器在离心之前进行颠倒、摇动和/或涡旋振荡，从而实现唾液-唾液收集溶液混合物与在抽成真空的收集器的内侧存在的试药进行彻底混合。在抽成真空的收集器中，唾液-唾液收集溶液混合物以大约1,800g离心约10分钟。这样选择离心，即使得粒状组分在离心过程中迁移入颗粒状沉淀中。对上清液进行进一步分析。从上清液中可以测定出许多不同的分析物。
抽成真空的收集器的上清液在离心后一方面可以立即仍在收集器中采用光度法进行测量，或者另一方面该上清液可以转移入新的容器例如比色皿或微量滴定板中。
现在，如此获得的上清液可以用于后续的进一步分析中，例如在临床化学中，或用于侧流免疫测定法(Lateral Flow Immunoassays)。
为了定量测定唾液体积，使用根据本发明的唾液模拟溶液。唾液模拟溶液是一种含蛋白质的溶液，其还被同意义地称为合成或人工唾液。该溶液至少由钠、钾或钙化合物，人血清白蛋白，尿素和水组成。
钠、钾或钙化合物的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为20％，特别是10％，优选5％的范围，人血清白蛋白的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是2.5％，优选1％的范围，以及尿素的浓度选自下限为0.0005％，特别是0.001％，优选0.01％，和上限为2％，特别是1％，优选0.5％的范围。
在一种进一步变化形式中，唾液模拟溶液含有乳铁蛋白和/或明胶，以便能够尽可能准确地模仿天然唾液。为了溶解明胶，可以加热该唾液模拟溶液，例如加热到40℃。
乳铁蛋白的浓度选自下限为0.000001％，特别是0.00001％，优选0.0001％，和上限为0.1％，特别是0.01％，优选0.005％的范围，明胶的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围。
唾液模拟溶液的pH值为下限为5，优选5.5，特别是6，和上限为7.5，优选7，特别是6.5的值。
用现有技术已知的方法对该溶液进行消毒，例如无菌过滤，并分成等份。
唾液模拟溶液的可能组成可以从以下实施例中获知，在此需说明的是，该对于根据本发明的唾液模拟溶液的列举并不是限定性的。
在本发明的一种进一步变化形式中，可以使用唾液模拟溶液来制备至少一种校准溶液。
校准溶液至少由唾液收集溶液和/或唾液模拟溶液和叠氮化钠、苯甲酸钾、山梨酸钾和/或Thimerosal组成。
优选地，校准溶液由系列稀释的唾液模拟溶液或唾液收集溶液组成，其中这两种溶液以近似反比的比例存在。该稀释系列可以以x(n+1)的浓度梯度提供，其中x是各使用的溶液的ml数，n是整的自然数。
在一个可能的实施方案中，所述稀释系列包括五种不同浓度的唾液模拟溶液或唾液收集溶液。
叠氮化钠、苯甲酸钾、山梨酸钾和/或Thimerosal的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围。
对于正从事该领域工作的技术人员而言，显然可以使用多于或少于五种的校准溶液，或者在稀释系列的情况下，可以改变唾液模拟溶液与唾液收集溶液的比例，以便可以定量测定唾液体积。
以下示例性地列出一些组成以解释说明所述的校准溶液，但这些也不是对本发明的限定。
所获得的唾液体积的准确数据很重要，因为由此可以计算出，在最初取出的生物样品中存在多少量的以后测定的分析物。
通过使用不同的指示物，特别是染料或者因子，还可以相应地不同地组合使用校准溶液。例如，除了含有染料的唾液收集溶液外，还可以使用含有葡萄糖的唾液收集溶液作为校准溶液。
代替所述的唾液模拟溶液，还可以使用蒸馏水来制备校准溶液或其稀释系列。但是为了达到唾液体积的更好的可量化性，优选唾液模拟溶液。
为了避免污污，用现有技术已知的方法对校准溶液进行消毒。
在一种进一步变化形式中，将至少几种上述成分组合成测试试剂盒。该测试试剂盒至少包括唾液收集溶液和用于容纳唾液-唾液收集溶液混合物的容器1。该测试试剂盒可补充有可关闭的收集器、唾液模拟溶液、校准溶液和/或对照溶液。任选地，还可以在测试试剂盒中添加在标准化的实验室测量设备中进行评价的微量滴定板或比色皿，和/或使用说明书。
在测试试剂盒中包含的空白对照溶液含有水或唾液模拟溶液。该空白对照溶液必须产生0的消光度。阳性对照由含有染料或唾液收集溶液的水或者唾液模拟溶液形成。阳性对照必须产生大于0的消光度。
图2显示了校准溶液1～5的分光光度计的标准直线，其中分别将1ml的校准溶液1～5滴在1cm比色皿中，并在波长450nm下在标准分光光度计中进行测量。X-轴上是每毫升样品中唾液体积的百分数，其相应于染料单位/ml唾液-唾液收集溶液混合物，在Y-轴上记录了在波长450nm下的消光度。
通过与校准溶液1～5相对比地比较测量来自抽成真空的收集器的唾液-唾液收集溶液混合物在波长450nm下的光密度，就可以测定每ml样品的唾液的体积。
因此，在进一步使用来自抽成真空的收集器的上清液中的唾液的情况下，在测定特别是定量测定分析物时，可以考虑最初获得的唾液的量。
不言而喻，本发明不仅可以用于人类医学中，而且显然地，以微小的改变，例如通过在唾液模拟溶液中使用相应于动物类型的白蛋白，还可以用于兽医学中。
收集唾液的方法和测试试剂盒或构成其的组成部分也可以用于家庭护理领域中。
实施例1 在受检者用2ml具有表中所示组成的唾液收集溶液进行漱口之前，用蒸馏水冲洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物残渣或其他干扰性成分。
唾液收集溶液 在每次用2ml唾液收集溶液进行四次历时一分钟的漱口后，将全部的唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管状突出物9与容器1的底部部分2的底部的距离为2mm。此外，在容器1中在管状突出物9的范围内安装一个由玻璃棉制成的过滤装置13。过滤装置13的孔径为50μm。
将该唾液-唾液收集溶液混合物转移到抽成真空的收集器中，该收集器用在下表中列出的溶液进行涂覆。
含有试药的溶液 将其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器进行涡旋振荡，并于4℃以2,000g离心30分钟。丢弃颗粒状沉淀，并在平板光度计中在波长480nm下测定上清液的光密度，其中将250μl的唾液-唾液收集溶液混合物分别滴在微量滴定板的孔中。
为了能够进行定量，同样在波长480nm下平行地测量具有下表所示组成的校准溶液1～3的光密度。
校准溶液 用于制备校准溶液的唾液收集溶液具有在实施例1中所示的组成，并且唾液模拟溶液具有在下表中所示的组成。
唾液模拟溶液 对于进行光度法测定，作为阳性对照，使用浓度为10U/ml的溶液1，相应于浓度为10％，即0.1ml唾液/ml样品，和浓度为90U/ml的溶液2，相应于浓度为90％，即0.9ml唾液/ml样品。测定的唾液体积为10ml。
实施例2 受检者用6ml具有表中所示组成的唾液收集溶液进行漱口。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口5分钟后，将唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管状突出物9与容器1的底部部分2的底部的距离为0.9mm。此外，在容器1中在管状突出物9的范围内，在穿透装置8和管状突出物9之间安装一个硝化纤维素膜形式的过滤装置13。过滤装置13的孔径为10μm。
将该唾液-唾液收集溶液混合物转移到抽成真空的收集器中，该收集器用在下表中列出的溶液进行涂覆。
含有试药的溶液 将其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器进行摇动，并在室温下以1,500g离心1小时。丢弃颗粒状沉淀，并在光度计中在波长400nm下测定上清液的光密度。
为了能够进行定量，同样在波长400nm下平行地测量具有下表所示组成的校准溶液1～11的光密度。
校准溶液 用于制备校准溶液的唾液收集溶液具有在实施例2中所示的组成，并且唾液模拟溶液具有在下表中所示的组成。
唾液模拟溶液 对于进行光度法测定，作为阳性对照，使用浓度为50U/ml的溶液，相应于每ml样品的唾液浓度为50％，即0.5ml唾液/ml样品。在该示例性实验中取出的唾液体积为2ml。
实施例3 在受检者用5ml具有表中所示组成的唾液收集溶液进行漱口之前，用蒸馏水冲洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物残渣或其他干扰性成分。
唾液收集溶液 在用该唾液收集溶液漱口三分钟后，将唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管状突出物9与容器1的底部部分2的底部的距离为3mm。
将该唾液-唾液收集溶液混合物转移到抽成真空的收集器中，该收集器用在下表中列出的溶液进行涂覆。
含有试药的溶液 将其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器进行颠倒，并在室温下以2,500g离心3分钟。丢弃颗粒状沉淀，并在分光光度计中在波长380nm下测定上清液的光密度。
为了能够进行定量，同样在波长450nm下平行地测量具有下表所示组成的校准溶液1～5的光密度。
校准溶液 用于制备校准溶液的唾液收集溶液具有在实施例3中所示的组成，并且唾液模拟溶液具有在下表中所示的组成。
唾液模拟溶液 对于进行酶促光度法测定，作为阳性对照，使用校准溶液2和4。测定的唾液体积为6ml。
实施例4 在受检者用3ml具有表中所示组成的唾液收集溶液进行漱口之前，用蒸馏水冲洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物残渣或其他干扰性成分。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口一分钟后，将唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管状突出物9与容器1的底部部分2的底部的距离为1mm。此外，在容器1中在管状突出物9的范围内安装一个由三乙酸纤维素制成的过滤装置13。过滤装置13的孔径为30μm。
将该唾液-唾液收集溶液混合物转移到抽成真空的收集器中，该收集器用在下表中列出的溶液进行涂覆。
含有试药的溶液 将其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器进行颠倒，并在室温下以1,800g离心10分钟。丢弃颗粒状沉淀，并在分光光度计中在波长450nm下测定上清液的消光度。
为了能够进行定量，同样在波长450nm下平行地测量具有下表所示组成的校准溶液1～5的消光度。
校准溶液 用于制备校准溶液的唾液收集溶液具有在实施例4中所示的组成，并且唾液模拟溶液具有在下表中所示的组成。
唾液模拟溶液 对于进行光度法测定，使用两个对照。对照1的浓度为20U/ml(％)，对照2的浓度为60U/ml(％)，其中1U/ml(％)相应于在唾液-唾液收集溶液中有0.01ml唾液。取出的唾液体积为3ml。
实施例5 在受检者每次用1.5ml具有表中所示组成的唾液收集溶液漱口至少4次之前，用蒸馏水冲洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物残渣或其他干扰性成分。
唾液收集溶液 在每次用唾液收集溶液漱口一分钟后，将唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管状突出物9与容器1的底部部分2的底部的距离为2mm。此外，在容器1中在管状突出物9的范围内安装一个由棉花制成的过滤装置13。过滤装置13的孔径为70μm。
将该唾液-唾液收集溶液混合物转移到抽成真空的收集器中，该收集器用在下表中列出的溶液进行涂覆。
含有试药的溶液 将其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器进行颠倒，并在4℃下以1,500g离心20分钟。丢弃颗粒状沉淀，并在分光光度计中在波长420nm下测定上清液的光密度。
为了能够进行定量，同样在波长420nm下平行地测量具有下表所示组成的校准溶液1～5的光密度。
校准溶液 用于制备校准溶液的唾液收集溶液具有在实施例5中所示的组成，并且唾液模拟溶液具有在下表中所示的组成。
唾液模拟溶液 对于进行光度法测定，作为阴性对照，使用具有上表所示组成的唾液模拟溶液，和作为阳性对照，使用校准溶液1。所获得的唾液体积为7ml。
实施例6 在受检者用2ml具有表中所示组成的唾液收集溶液进行漱口之前，用蒸馏水冲洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物残渣或其他干扰性成分。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口一分钟后，将唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管状突出物9与容器1的底部部分2的底部的距离为2mm。此外，在容器1中在管状突出物9的范围内安装一个由硝化纤维素制成的过滤装置13。过滤装置13的孔径为40μm。
将该唾液-唾液收集溶液混合物转移到抽成真空的收集器中，该收集器用在下表中列出的溶液进行涂覆。
含有试药的溶液 将其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器进行颠倒，并在室温下以1,600g离心8分钟。丢弃颗粒状沉淀，并通过Elisa采用免疫学测定在上清液中的睾酮。此外，在用唾液收集溶液冲洗口腔之前测定唾液中的睾酮的浓度，以便考虑生理存在的睾酮。这可以证实，在开始本发明的方法之前，在唾液中没有睾酮。
为了能够进行定量，同样通过Elisa平行地测量具有下表所示组成的校准溶液1～5的睾酮浓度。
校准溶液 用于制备校准溶液的唾液收集溶液具有在实施例6中所示的组成，并且唾液模拟溶液具有在下表中所示的组成。
唾液模拟溶液 对于免疫学检测，使用两个对照。对照1的浓度为20ng/ml，对照2的浓度为60ng/ml。取出的唾液体积为3ml。
实施例7 在受检者用3ml具有表中所示组成的唾液收集溶液进行漱口之前，用蒸馏水冲洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物残渣或其他干扰性成分。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口一分钟后，将唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管状突出物9与容器1的底部部分2的底部的距离为1mm。此外，在容器1中在管状突出物9的范围内安装一个由三乙酸纤维素制成的过滤装置13。过滤装置13的孔径为80μm。
将该唾液-唾液收集溶液混合物转移到抽成真空的收集器中，该收集器用在下表中列出的溶液进行涂覆。
含有试药的溶液 将其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器进行颠倒，并在室温下以1,500g离心15分钟。丢弃颗粒状沉淀，并将上清液输送至HPLC，并通过安装在仪器中的软件来测定浓度。
为了能够进行定量，同样在HPLC中测量具有下表所示组成的校准溶液1～5。
校准溶液 用于制备校准溶液的唾液收集溶液具有在实施例7中所示的组成，并且唾液模拟溶液具有在下表中所示的组成。
唾液模拟溶液 对于HPLC测定，同样根据仪器的规定来测定阳性对照。
实施例显示了收集唾液的方法、唾液收集溶液、容器、可关闭的收集器、唾液模拟溶液、校准溶液和测试试剂盒的可能的实施方案，在此需要注意的是，本发明并不限于这些具体说明的实施方案本身，而是还可以是各实施方案彼此间的各种组合，这种变化可能性由于教导了通过目标发明来进行技术操作，因此位于正从事该技术领域的工作的技术人员的能力范围之内。因此，保护范围同时还包括所有可想到的实施方案，其通过组合所示的和所描述的实施方案的各个细节而是可以实施的。
按规定，最后要指出的是，为了更好地理解容器的构造，这些组件或者说容器的组件部分地以不按比例的和/或放大的和/或缩小的方式表示。
该独立的创造性解决方案所基于的目的可以由说明书看出。
参考标记清单 1容器 2底部部分 3盖部分 4内侧 5外侧 6空洞 7传送装置 8穿透装置 9突出物 10 端部 11 端部 12 距离 13 过滤装置
权利要求
1.从口腔中收集唾液以检测分析物的方法，所述方法包括以下步骤(a)清洁口腔，(b)用唾液收集溶液刺激唾液分泌，(c)从口腔中除去唾液-唾液收集溶液混合物，并收集在容器(1)中，(d)将唾液-唾液收集溶液混合物转移入可关闭的收集器中。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于，通过具有刺激味觉的性质的唾液收集溶液，提高了唾液分泌。
3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于，唾液-唾液收集溶液混合物经过整合在容器(1)中或上的传送装置(7)而转移入可关闭的收集器中。
4.根据权利要求1～3之一的方法，其特征在于，通过在容器(1)中的过滤装置(13)从唾液-唾液收集溶液混合物中除去个别组分。
5.根据权利要求1～4之一的方法，其特征在于，使用含有具有保存和还原性质的溶液的可关闭的收集器。
6.根据权利要求1～5之一的方法，其特征在于，定量测定唾液的量。
7.根据权利要求1～6之一的方法，其特征在于，使用至少一种校准溶液对唾液进行定量。
8.根据权利要求1～7之一的方法，其特征在于，为了定量测定，比较唾液-唾液收集溶液混合物的指示物和/或因子的浓度和/或消光度与在提取前在唾液中存在的指示物和/或因子的浓度和/或消光度。
9.根据权利要求1～8之一的方法，其特征在于，将存在于真空的收集器中的唾液-唾液收集溶液混合物进行离心，并任选事先进行混合。
10.根据权利要求1～9之一的方法，其特征在于，使用唾液-唾液收集溶液混合物进行分析。
11.根据权利要求10的方法，其特征在于，所述分析在标准化的实验室测量设备中进行。
12.用于获得唾液的唾液收集溶液，其特征在于，添加具有刺激味觉性质的试剂、指示物和/或因子和水。
13.根据权利要求12的唾液收集溶液，其特征在于，所述具有刺激味觉性质的试剂选自无机和/或有机食用酸和/或其盐或者它们的混合物。
14.根据权利要求13的唾液收集溶液，其特征在于，所述食用酸选自磷酸、乳酸、柠檬酸、抗坏血酸。
15.根据权利要求12的唾液收集溶液，其特征在于，所述具有味觉性质的试剂是活性物质，例如毛果芸香碱。
16.根据权利要求12～15之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述具有刺激味觉性质的试剂的浓度选自下限为0.0005％，特别是0.01％，优选1％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围。
17.根据权利要求12～16之一的唾液收集溶液，其特征在于，含有染料作为指示物。
18.根据权利要求17的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料是水溶性的。
19.根据权利要求17或18的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料引起黄色着色，并且选自酒石黄、姜黄素、藏红、喹啉黄、日落黄FCF、橙黄S、虫红、洋红酸、洋红、胡萝卜素或者它们的混合物。
20.根据权利要求17～19之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料选自核黄素、核黄素-5′-磷酸、叶绿素和叶绿酸、叶绿素和叶绿酸的含铜络合物、焦糖、简单的焦糖、亚硫酸盐碱液-焦糖、氨-焦糖、亚硫酸铵-焦糖、植物炭，辣椒色素、辣椒黄素、辣椒玉红素、甜菜红、甜菜苷、花色素、氧化铁和氢氧化铁、偶氮玉红、二蓝光酸性红、丽春红4R、胭脂虫红A、Allurarot AC、专利蓝V、靛蓝、靛卡红、亮蓝FCF、绿S、亮黑BN、黑PN、棕HT、蕃茄红素、β-阿朴-8′-胡萝卜素醛(C 30)，β-阿朴-8′-胡萝卜素酸(C 30)-乙酯、叶黄素、由美拉德化合物构成的物质和/或它们的混合物。
21.根据权利要求17～20之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料的浓度选自下限为0.0001％，特别是0.005％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围。
22.根据权利要求12～16之一的唾液收集溶液，其特征在于，添加在医药产品、体外诊断剂和/或药物意义上的因子。
23.根据权利要求12～16之一的唾液收集溶液，其特征在于，掺入可以用常规使用的实验室测量设备进行测定的因子。
24.根据权利要求23的唾液收集溶液，其特征在于，添加选自以下的至少一种代表物作为因子胆红素，醋氨酚，酸性磷酸酶，白蛋白，肌酸酐，醇，碱性磷酸酶，丙氨酸转氨酶，氨，淀粉酶，天冬氨酸转氨酶，胆红素，非缀合和缀合的，尿素，钙，碳酸氢盐，胆碱酯酶，LDL或HDL胆固醇，溶菌酶，淀粉酶，肌酸激酶，肌酸激酶-MB，氯化物，卡马西平，肌酸酐，C-反应性蛋白，直接胆红素，地高辛，二氧化碳，铁，γ-谷氨酰转移酶，葡萄糖，磁性HDL-胆固醇试药，钾，乳酸盐，乳酸脱氢酶，锂，脂酶，无机化合物，例如微量元素，矿物质，如镁、钠，新生的胆红素，苯巴比妥，磷，苯妥英，扑米酮，脑脊液蛋白，水杨酸盐，总胆红素，茶碱，总铁结合容量的试药，总蛋白质，甘油三酯，尿蛋白，尿酸，β-微球蛋白，皮质类固醇激素或性激素结合性球蛋白，硫氰酸盐，运铁蛋白，各种脂质，脂蛋白，蛋白质，碳水化合物，特别是水溶性碳水化合物，维生素，特别是水溶性维生素，例如B族、C族和F族维生素，无机化合物，例如微量元素，矿物质，激素，例如醛固酮，雄甾烯二酮，皮质醇，二氢表雄甾酮，或其硫酸酯，雌二醇，雌三醇，黄体酮，睾酮，或者它们的混合物。
25.根据权利要求23或24的唾液收集溶液，其特征在于，所述因子的浓度选自下限为0.0000000001％，特别是0.00005％，优选0.001％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围。
26.根据权利要求12～25之一的唾液收集溶液，其特征在于，添加芳香物质和/或增味剂。
27.根据权利要求26的唾液收集溶液，其特征在于，所述芳香物质选自糖类或糖交换物，例如蔗糖、麦芽糖、果糖，和/或甜味剂，例如糖精、天冬甜素，和/或它们的混合物。
28.根据权利要求26或27的唾液收集溶液，其特征在于，所述芳香物质和/或增味剂是天然和/或合成来源的，选自水果，如苹果，覆盆子，樱桃，草莓，柠檬，甜柠檬，橙，甘草，药草，奎宁，咖啡因，茶素或它们的混合物。
29.根据权利要求26～28之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述芳香物质和/或增味剂的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为10％，特别是5％，优选1％的范围。
30.根据权利要求12～29之一的唾液收集溶液，其特征在于，pH值选自下限为3，优选3.5，特别是4，和上限为6，优选5，特别是4.5的范围。
31.用于生物液体的容器(1)，由底部部分(2)和盖部分(3)组成，分别具有外侧(5)和内侧(4)，其中，在盖部分(3)中设置一个空洞(6)作为凹槽，在其中设置传送装置(7)，该传送装置由在盖部分(3)的外侧(5)上的用于穿透收集器的装置(8)和在盖部分(3)的内侧(4)上的具有两个端部(10、11)的突出物(9)构成，其特征在于，在将容器(1)装配好的状态下，更靠近底部部分(2)的端部(11)与底部部分(2)的距离(12)最大为3mm。
32.根据权利要求31的容器(1)，其特征在于，底部部分(2)的距离(12)选自下限为0.1mm，特别是0.5mm，优选1mm，和上限为3mm，特别是2mm，优选1.5mm的范围。
33.根据权利要求31或32的容器(1)，其特征在于，在传送装置(7)之前或之中安装过滤装置(13)。
34.根据权利要求33的容器(1)，其特征在于，过滤装置(13)由选自以下的材料形成玻璃棉、棉花、滤纸、泡沫橡胶、再生的纤维素、三乙酸纤维素、尼龙、硝化纤维素、聚二氟乙烯(PVDF)、PVP、聚醚磺酸酯。
35.根据权利要求33或34的容器(1)，其特征在于，以膜形式安装过滤装置(13)。
36.根据权利要求33～35之一的容器(1)，其特征在于，过滤装置(13)的孔径选自下限为1μm，特别是10μm，优选20μm，和上限为100μm，特别是60μm，优选50μm的范围。
37.用于容纳生物液体例如血液的可关闭的收集器，其具有朝向生物样品的内侧，其特征在于，所述收集器包含溶液，该溶液含有用于稳定化或保存的试药和用于使生物液体或其组分去溶剂化的试药。
38.根据权利要求37的收集器，其特征在于，所述用于稳定化或保存的试药是苯甲酸钾、山梨酸钾、叠氮化钠和/或Thimerosal。
39.根据权利要求38的收集器，其特征在于，苯甲酸钾或山梨酸钾的浓度选自下限为0.05％，特别是0.1％，优选1％，和上限为10％，特别是5％，优选2％的范围。
40.根据权利要求38的收集器，其特征在于，叠氮化钠或Thimerosal的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为1％，特别是0.5％，优选0.2％的范围。
41.根据权利要求37的收集器，其特征在于，所述用于去溶剂化的试药是硫酸铵、氯化钠和/或氯化钙。
42.根据权利要求41的收集器，其特征在于，所述用于去溶剂化的试药的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围。
43.根据权利要求37～42之一的收集器，其特征在于，所述溶液的体积选自下限为5μl，特别是20μl，优选30μl，和上限为500μl，特别是100μl，优选50μl的范围。
44.根据权利要求37～43之一的收集器，其特征在于，用所述溶液对收集器的内侧进行喷洒，并任选干燥内侧。
45.根据权利要求37～44之一的收集器，其特征在于，将所述收集器抽成真空。
46.用于模仿生理学唾液的组成的唾液模拟溶液，其特征在于，含有钠、钾或钙化合物，人血清白蛋白，尿素和水。
47.根据权利要求46的唾液模拟溶液，其特征在于，钠、钾或钙化合物的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为20％，特别是10％，优选5％的范围。
48.根据权利要求46的唾液模拟溶液，其特征在于，人血清白蛋白的浓度选自下限为0.001％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是2.5％，优选1％的范围。
49.根据权利要求46的唾液模拟溶液，其特征在于，尿素的浓度选自下限为0.0005％，特别是0.001％，优选0.01％，和上限为2％，特别是1％，优选0.5％的范围。
50.根据权利要求46～49之一的唾液模拟溶液，其特征在于，含有乳铁蛋白。
51.根据权利要求50的唾液模拟溶液，其特征在于，乳铁蛋白的浓度选自下限为0.000001％，特别是0.00001％，优选0.0001％，和上限为0.1％，特别是0.01％，优选0.005％的范围。
52.根据权利要求46～51之一的唾液模拟溶液，其特征在于，含有明胶。
53.根据权利要求52的唾液模拟溶液，其特征在于，明胶的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围。
54.根据权利要求46～53之一的唾液模拟溶液，其特征在于，pH值选自下限为5，优选5.5，特别是6，和上限为7.5，优选7，特别是6.5的范围。
55.用于定量唾液体积的校准溶液，其特征在于，包含唾液收集溶液和/或唾液模拟溶液和叠氮化钠、苯甲酸钾、山梨酸钾和/或Thimerosal。
56.根据权利要求55的校准溶液，其特征在于，以近似反比的比例含有唾液收集溶液和唾液模拟溶液。
57.根据权利要求55或56的校准溶液，其特征在于，分别以梯度含有唾液收集溶液和唾液模拟溶液的体积。
58.根据权利要求55～57之一的校准溶液，其特征在于，叠氮化钠、苯甲酸钾、山梨酸钾和/或Thimerosal的浓度选自下限为0.005％，特别是0.01％，优选0.1％，和上限为5％，特别是1％，优选0.5％的范围。
59.用于获得唾液的测试试剂盒，其特征在于，包括根据权利要求12～30之一的唾液收集溶液和根据权利要求31～36之一的容器(1)。
60.根据权利要求59的测试试剂盒，其特征在于，包括至少一个根据权利要求37～45之一的可关闭的收集器。
61.根据权利要求59或60的测试试剂盒，其特征在于，包括根据权利要求46～54之一的唾液模拟溶液和/或至少一种根据权利要求55～58之一的校准溶液。
62.根据权利要求59～61之一的测试试剂盒，其特征在于，包括至少一个微量滴定板、比色皿和/或使用说明书。
63.根据权利要求12～30之一的唾液收集溶液用于刺激唾液流出并对唾液体积进行定量的用途。
64.根据权利要求31～36之一的容器(1)的用途，所述用途为用于收集生物液体，特别是唾液或唾液-唾液收集溶液混合物，并将其传送到可关闭的收集器中。
65.根据权利要求37～45之一的可关闭的收集器的用途，所述用途为用于离心和分析其中所包含的样品，特别是上清液。
66.根据权利要求46～54之一的唾液模拟溶液用于制备对照和/或校准溶液的用途。
67.根据权利要求55～58之一的校准溶液用于对唾液体积进行定量的用途。
68.根据权利要求59～62之一的测试试剂盒用于对唾液体积进行定量的用途。
全文摘要
本发明涉及从口腔中收集唾液以检测分析物的方法，所述方法包括以下步骤(a)清洁口腔，(b)用唾液收集溶液刺激唾液分泌，(c)从口腔中除去唾液－唾液收集溶液混合物，并收集在容器(1)中，(d)将唾液－唾液收集溶液混合物转移入可关闭的收集器中。
文档编号A61B10/00GK101065070SQ20058004018
公开日2007年10月31日 申请日期2005年9月28日 优先权日2004年10月6日
发明者F·科纳德 申请人:格莱恩比奥-奥内有限公司