专利名称：：包括阿拉伯胶的肾上腺类皮质激素效果增强剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种肾上腺类皮质激素的效果增强剂，尤其涉及包括来自阿拉伯胶树种的茎和/或树枝的水溶性胶的增强剂，其增强所述肾上腺类皮质激素对肾炎的保护作用而不会增大肾上腺类皮质激素不希望的副作用。
背景技术：
：肾上腺皮质激素在肾上腺中生物合成并从该腺分泌。该激素分为两个类别，即盐皮质激素如具有电解质代谢活性的醛固酮和脱氧皮质酮和糖皮质激素如具有肝糖原活性或糖皮质激素活性的可的松和氢化可的松。因为后一类别具有多种的药理学活性，如抗过敏活性、消炎活性和免疫抑制活性，已经合成了多种糖皮质激素。深入的化学调查结果显示，已经开发出了若干有效的抗炎性糖皮质激素，例如泼尼松龙、地塞米松和倍他米松。这些合成药物在世界范围内临床用作消炎剂。在本说明书中，肾上腺类皮质激素意味着天然的和/或合成的临床使用的肾上腺类皮质激素。长期使用肾上腺类皮质激素和大剂量服用肾上腺类皮质激素将产生若干不合意的问题，例如葡糖代谢、盐代谢和蛋白质代谢紊乱。作为肾上腺皮质激素不合意的副作用，有报道的是感染增加、肾上腺病症、糖尿病、胃溃疡、精神病、抑郁症、骨质疏松症、关节疼痛、满月脸、水肺、高血压、白内障、青光眼、以及伤口愈合的延迟(OsakaHospitalPharmacistAssociationEd.，"IyakuhinYouran"5thEd.Yakuji-jihou國sha，Tokyo)。肾炎是肾中若干组织例如肾小球、肾小管和间质组织的炎性病症。这些炎性病症是所述肾上腺类皮质激素的靶标。另一方面，肾炎综合征是肾炎的一种，其特征在于大量含尿蛋白质的排出。肾炎综合征也是所述肾上腺类皮质激素的靶标(TakahisaT.，KobayashiN"EbiharaA.Ed.,"Zusetu;RinshouyakuritoKihonchiryouyaku，，，MedicalViewCo.ltd.)。已知的一种水溶性树胶是从阿拉伯胶树(豆科)的茎和/或树枝或更多有待确定的刺槐种属(Acaciaspecies)(豆科)获得的树胶状渗出物。阿拉伯胶树最初来自于非洲的塞内加尔和埃塞俄比亚之间的干旱区域，且现在广泛地分布于印度。其生长成大约6m高的小树，并具有灰色的光滑树皮和之字形状的树枝。其特征在于附着于每片树叶的三根刺，其中中间的刺是弯曲的，并具有奶油色的花。阿拉伯胶(GA)是天然收集的树脂，为无色或淡黄色透明球状结块。有时其具有乳状的不透明外观。工业使用的多数可商业获得的GA是从该树种收集的球形树胶状渗出物。其它从塞伊耳阿拉伯胶树(Acaciaseyal)收集的树胶状渗出物也可商业获得。从阿拉伯胶树种的茎和/或树枝获得的所述树胶状渗出物从公元前时期起就已经被用作糊剂。其被称作阿拉伯胶，因为所述树胶状渗出物产于非洲并且通过阿拉伯向其它外国出口。GA是无色或淡黄色的，作为透明球状结块/片获得，并且有时具有乳状的不透明外观。在其表面具有很多裂缝，且容易破裂；当破裂时，新的表面是玻璃状的并常常具有光泽。GA无嗅无味并且粘稠。GA的主要组分是阿拉伯酸(79-81%)，其作为Ca、Mg和/或K盐存在。GA的酸性水解产生L-阿拉伯糖、D-半乳糖、L-鼠李糖和D-葡糖醛酸。此外，存在痕量的水解酶和氧化酶，连同少量的矿物质和蛋白质。过去，GA已经被用作粘合剂以固定颜料，并且现在仍然被用作粘合剂用于透明和不透明的水性涂料。除了水性涂料之外，GA还广泛地用作糖食业中的乳化剂，例如糖果或软饮料，以及作为在医药中制造糖衣片剂或糖浆时的添加剂。GA是一种公知的材料，且包含大约35%GA的粘合剂也用作向水性颜料提供透明性和/或向由该水性颜料绘制的图画提供光泽的介质，也用作制备水性颜料时的粘合剂。GA的3%溶液可用作毛笔被冲洗掉时的粘合剂。从远古的埃及地区，GA就已经被用作民间医药以治疗牙周疾病和牙槽脓溢(治疗牙龈出血，除去牙龈中的溃疡或促进牙齿的生长)、肺部病症和肝部病症。目前，GA被用作有香味的乳化剂以保持果汁和水洪淋成分的均匀性，是用于保持糖果形状的食品添加剂以及用于压成片剂的药物或预防液体配方中各成分发生歧化反应的稳定剂。尽管已经报道了阿拉伯胶降低人体中血液胆固醇和甘油三酯水平(RossAH,EastwoodMA,BrydonWG,AndersonJR，AndersonDM,Am.J.Clin.Nutr"37,368-75，1983)，提高肠内菌群的含量(PhillipsGO,FoodAddit.Contain.，15，251-264，1998)并对朴热息痛引发的肝细胞毒性具有保护效果(Gamalel-dinAM，MostafaAM,Al國ShabanahOA，Al國BekairiAM，NagiMN,PharmacologicalResearch,48,631-635，2003)，阿拉伯胶作为肾上腺类皮质激素在肾炎中的效果增强剂的功效和阿拉伯胶作为肾上腺类皮质激素副作用降低剂的功效还没有报道过。当下，对肾炎没有理想的治疗。若干肾上腺类皮质激素被用于治疗肾炎，但是这些激素伴随着很多副作用。本发明提供了一种新型试剂，其降低所述副作用，并提高肾上腺类皮质激素的功效而不会增加所述副作用。
发明内容本发明人研究了来自阿拉伯胶树种(豆科)茎和/或树枝的树胶状渗出物，并发现所述树胶状渗出物提高了肾上腺类皮质激素的功效而不会增加副作用，并且所述树胶状渗出物减少了肾上腺类皮质激素的副作用。也就是说，本发明涉及一种肾上腺类皮质激素的效果增强剂，其通过使肾上腺类皮质激素与所述来自阿拉伯胶树种茎和/或树枝的树胶状渗出物相结合而得。在本说明书中，"肾上腺类皮质激素"意味着天然的和/或合成的临床用于类固醇治疗的肾上腺类皮质激素。肾上腺类皮质激素的实例包括但不限于例如可的松、氬化可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、曲安西龙、地塞米松、帕拉米松、倍他米松、氟米龙、氟米松、氟氢可的松、倍氯米松、氯倍他索、二氟可龙、氯倍他松、二氟拉松、阿氯米松、曲安奈德、氟轻松、氟氢缩松、醋酸氟轻松、哈西奈德、安西奈德、氟尼缩松和布地奈德。作为本发明中的水溶性树胶，来自阿拉伯胶树种(豆科)(如塞内加尔阿拉伯胶树和塞伊耳阿拉伯胶树)茎和/或树枝的树胶状渗出物可以其原有形式使用。从方便获得和方便配制的角度来说，所述树胶的干燥粉末和/或所述树胶的提取物是优选的。优选的提取溶剂是水。含水提取物原样使用或者浓缩、稀释和/或提纯后使用。所述干燥粉末和/或提取物可通过柱色谱的方式提纯。本发明的所述增强剂可以以水中或热水中溶液的形式、或者含水饮用试剂的形式口服给药。所述增强剂的每日剂量取决于例如患者的性别、年龄和体重、以及肾上腺类皮质激素的剂量。所述增强剂的每日剂量通常为l-100g，优选10-50g，更优选10-20g。如果作为饮品给药，则必要的话可以向该饮用配方中加入适当量的甜味剂(如糖、蜜、甘油或阿司帕坦)、辛香料(如大蒜或姜)、香料(如果味香料)、抗氧化剂(如乙二胺二钠盐或硫代硫酸钠)、氨基酸(如亮氨酸、蛋氨酸、赖氨酸或牛磺酸)以及维生素(如维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E或烟酰胺)。天然果汁如橙汁或葡萄汁和/或生药如人参和鹿萆的提取物也可加入到饮品配方中用于口服给药。作为本发明增强剂的目标的肾炎是肾炎综合征如狼疮肾炎或脂质肾炎，其典型地由肾上腺类皮质激素进行治疗。肾上腺类皮质激素包括但不限于泼尼松龙、地塞米松、倍他米松和曱基泼尼松龙。根据本发明，必须给药于宿主的类固醇量可以减少，并且与类固醇治疗有关的副作用成功地被降至最低。本发明的有利效茱通过使用大鼠中庆大霉素诱发的肾炎得到了证实。1.实验1)原料将阿拉伯胶溶于水中并过滤。滤出液在大约120TC下喷雾干燥以提供在该实验中使用的GA。将GA溶于自来水以制备7.5%GA溶液(7.5g/100mL，7.5%GA)。将7.5%GA溶液用于饮品水中口服给药。从SigmaChemicalCo.购得硫酸庆大霉素(GM)并以其盐水溶液4吏用。泼尼松龙(PRD)从SigmaChemicalCo.购得。2)动物由SLC(JapanSLC，Hamamatsu)提供重200陽220g(每组n=8-9)的雄性威斯塔菌林大鼠。将它们保存在空调房间中并从7a.m.至7.p.m.提供光照。房间温度(大约231C)和湿度(大约60%)自动控制。在处理前使其保持1个星期。实验室食物(LaboMRStock,NihonNosanKogyoK.K"Yokohama)和饮用水可自由获得。3)GM-肾炎i秀导通过连续8天每日上午10:00在腹膜内注射GM(80mg/kg，i.p.)在大鼠中诱发肾炎。注射了盐水(lmL/kg，i.p.)的动物用作标准对照。GA(7.5%GA)通过饮用水在连续8天中给药。将大鼠随机排列为如下8组，每组8-9只大鼠第l组(标准)接受盐水(lmL/kg，i.p.)的每日腹膜内注射8天，自来水作为饮用水。第2组(7.5%GA):经由饮用水每日接受盐水(lmL/kg，i.p.)和7.5%GA8天。第3组(GM):将自来水作为饮用水而每日接受GM(80mg/kg，i.p.)8天。第4组(GM+7.5。/。GA):经由饮用水每日接受GM(80mg/kg，i.p.)和7.5。/oGA8天。第5组(GM+PRD/水)将自来水作为饮用水而每日在GM(80mg/kg，i.p.)给药之前1小时接受每日PRD/水(2mg/kg，p.o.)8天。第6组(GM+PRD/水+7.5。/。GA):经由饮用水而每日在GM(80mg/kg，i.p.)给药之前1小时接受每日PRD/水(2mg/kg，p.o.)和7.5%GA8天。4)测定器官湿重在最后一天，从大鼠分离各器官(肾上腺、胸腺、脾、肾和肝)，并测定每一器官湿重(mg)/体重(100g)的比率。尿和血的收集通过将每一动物保存在单独的代谢笼中24小时而在第8天上午10:00获得24小时尿样。在尿液收集前对大鼠禁食1天。然后将收集的尿液在1600Xg下离心IO分钟，并将上清液用于蛋白质测定。在尿液收集之后，立即从腹部静脉取得血液样品。将血液在1600Xg下离心10分钟以提供血清用于确定血液脲氮(BUN)、血清肌酸肝和肌酸酐清除率。尿液蛋白质、BUN、血清肌酸酐和肌酸酐清除率的测定通过Kingsbury等人的方法测定尿液蛋白质排泄(TheJournalofLaboratoryandClinicalMedicine,11，981-989，1926)并表示为亳克/天。简言之，将3%的磺基水杨酸加入稀释的尿样中，并在室温下放置10分钟。然后，由400nm处的吸光度确定尿液蛋白质的浓度，并从24小时尿液的体积计算尿液蛋白质排泄(mg/天)。将商供试剂盒(WakoPureChemicalIndustries,Ltd.)用于测定血清中的BUN、肌酸酐和肌酸酐清除率，使用如下测定试剂盒脲氮B和肌酸酐。统计分析将实验数据通过Bonferroni/Duim方法的方式来测试统计的显著性差异(多重范围测试)。2.结果1)大鼠中GA对MG谦发的肾炎的效果给出了标准大鼠(第1组)、7.5%GA处理的大鼠(第2组)、GM处理的大鼠(第3组)和GM加7.S。/。GA处理的大鼠(第4组)的血液参数(BUN和血清肌酸酐水平和肌酸酐清除率)(表1)和尿液参数(尿体积和尿蛋白质)(表2)。表1:GM诱发肾炎的大鼠中GA对BUN、血清肌酸酐水平和肌酸酐清除率的效果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>每一数值在第8天测定并代表了8-9只大鼠的平均值土S.E.笫l组的显著性差异，#;p<0.05，雜；p〈0.01。第3组的显著性差异，*;p<0.05。表2:GM诱发肾炎的大鼠中GA对尿体积和尿蛋白质的效果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>每一数值在第8天测定并代表了8-9只大鼠的平均值土S.E.第1组的显著性差异，##;p<0.01。第3组的显著性差异，**;p<0.01。如三种血液参数(表1)和两种尿液参数(表2)所显示的，在标准大鼠(第l组)和7.5。/。GA处理的大鼠(第2组)的数据之间没有差异。在第3组中，BUN和血清肌酸酐显著升高，并且肌酸酐清除率显著降低(表1)。尿体积和尿蛋白质显著增加(表2)。这些参数变化显示了大鼠中GM诱发的肾炎，以及GA显著地抑制了BUN的增加，并显示了血清肌酸酐的增加和肌酸酐清除率的降低的抑制趋势(表1中笫4组)。GA还显著地抑制了尿体积的增加并显示出对尿蛋白质减少的抑制趋势(表2中第4组)。在最后一天从大鼠分离出器官(肾上腺、胸腺、脾、肾和肝)。每一器官湿重(mg)/体重(lOOg)比率的测定结果显示于表3中。表3:GM诱发肾炎的大鼠中GA对若干器官重量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>每一数值在第8天测定并代表了8-9只大鼠的平均值土S.E.第1组的显著性差异，##;p<0.01。如表3中所示，与标准(第1组)和7.5%GA处理的大鼠(第2组)相比，GM处理的(第3组)和GM加？.S。/。GA处理的大鼠(第4组)中的肾重量比率稍有增加。GA对于肾重量比率的增加没有抑制效果。其它器官重量没有显示出任何差异。2)GA和PRD的结合对大鼠中GM诱发的肾炎的效果在第5组(GM+PRD/水)和6组(GM+PRD/水+7.5"/cGA)将GM(80mg/kg，i.p.)给药于大鼠之前1小时，将PRD(2mg/kg，p.o.)以自来水中(PRQ/水)悬浮液(0.2mL/100g重量大鼠)的形式口服给药。第5组接受自来水作为饮用水。第6组接受7.5。/。GA作为饮用水。最后一天的三种血清参数提供于表4中。表4:阿拉伯胶(GA)和泼尼松龙(PRD)的结合对MG诱发肾炎的大鼠中BUN、血清肌酸酐和肌酸酐清除率的效果组处理BUN(mg/dL)血清肌酸酐(mg/dL)肌酸酐清除率(mL/min)1标准17.3±0.90.43±0.081.72±0.863GM78.0±11,92.36±0.410.19±0.10GM+PRD/水44.8±7.6**1.42±0.32*0.46±0.176GM+PRD/水+7.5%GA25.1±4.2**,S0.70±0.14**，s1.14db0.57每一数值在第8天测定并代表了8-9只大鼠的平均值土S.E.第3组的显著性差异，*;p<0.05，**;p<0.01。笫5组的显著性差异，§;p<0.05。如表4中第3组所示，GM显著地增加了BUN水平。所有PRD处理的(2mg/kg，p.o.)组(第5和6组)显示出在GM诱发肾炎的大鼠中对BUN水平增加的显著保护效果。相对于PRD/水处理的组(第5组)来说，表4中PRD/水中PRD和GA的结合加上7.5%GA处理的组(第6组)显著地提高了PRD对BUN的保护效果。保护效果的显著提高也可在血清肌酸Sf中发现。对于肌酸酐清除率，发现了PRD引起的促进恢复的趋势，并且因此，PRD和GA的结合以协同的方式提高了PRD对于GM诱发的肾炎的保护效果。在最后一天对尿体积和尿蛋白质的测定结果显示于表5中。表5:阿拉伯胶(GA)和泼尼松龙(PRD)的结合对GM诱发肾炎的大鼠中尿体积和尿蛋白质的效果组处理尿体积尿蛋白质(mL/24hr)(mg/24hr)1标准28.9±4.53.0±0.43GM43.1±4.326.7=b3.35GM+PRD/水42.3±4.018,0±3.1*6GM+PRD/水13.3士1.7**，ss16.5±3.1**+7.5%GA每一数值在第8天测定并代表了8刁只大鼠的平均值土S.E.第3组的显著性差异，*;p<0.05，**;p<0.01。第5组的显著性差异，§§;p<0.01。GM同时增加了尿体积和尿蛋白质，且PRD显著地抑制了尿蛋白质的增加。PRD处理的组(第5组)没有显示出任何尿体积增加的效果。在PRD/水+7.5。/。GA处理的组(第6组)中，尿体积和尿蛋白质的增加得到了显著的抑制，并且因此，PRD和GA的结合以协同的方式增强了PRD对于GM诱发的肾炎的保护效果。器官重量测定的结果显示于表6中。表6:阿拉伯胶(GA)和泼尼松龙(PRD)的结合对GM诱发肾炎的大鼠中若干器官重量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>每一数值在第8天测定并代表了8-9只大鼠的平均值土S.E.第3组的显著性差异，*;p<0.05，**;p<0.01。第5组的显著性差异，§;p<0.05。在GM处理的大鼠(第3组)中，胸腺的重量显示出相对于标准组(第1组)来说降低的趋势。在PRD处理的大鼠中，胸腺的重量进一步降低(第5组)。PRD引起很多副作用，其中胸腺的减少是公知的一种。PRD和GA的结合显示出胸腺重量的少量恢复但是其并不显著(第6组)。这意味着PRD对于胸腺减少的副作用没有由于PRD和GA的结合得到增强。实施例饮用试剂的制备将水溶性树胶(10g)溶解于热水(40*C，30mL)中，同时搅拌。在将溶液冷却至251C之后，在搅拌下加入维生素Bl(10mg)、维生素B6(10mg)、咖啡因(50mg)、糖(5g)、蜜(5g)、柠檬酸(400mg)、柠檬酸钠(50mg)和苯甲酸钠(35mg)。通过加入乳酸和0.1N的氢氧化钠将所得溶液的pH调节至6.0。然后，通过加入水将所得溶液的总体积调节至50mL。在该实施例中使用的水溶性树胶如下制备将得自苏丹的塞内加尔阿拉伯胶树的阿拉伯胶粉碎并溶于水中。然后，过滤所得溶液并喷雾干燥滤出液以提供所述水溶性树胶。工业应用本发明通过增加肾上腺类皮质激素疗法的效用，提供了肾炎治疗的有效治疗方法，因为本发明增强了肾上腺类皮质激素的效果而没有增加肾上腺类皮质激素不合意的副作用。权利要求1.肾上腺类皮质激素的效果增强剂，包括从阿拉伯胶树种的茎和/或树枝获得的水溶性树胶。2.权利要求1的肾上腺类皮质激素的效果增强剂，其中所述肾上腺类皮质激素用于肾炎的治疗。3.权利要求1-2的肾上腺类皮质激素的效果增强剂，其中所述水溶性树胶是阿拉伯胶。4.权利要求1-3的肾上腺类皮质激素的效果增强剂，其中所述阿拉伯胶树种为塞内加尔阿拉伯胶树。5.包含肾上腺类皮质激素和水溶性树胶的产品，其可从阿拉伯胶树种的茎和/或树枝获得，作为结合的制剂在类固醇治疗中同时、分别或顺序使用。6.权利要求5的产品，其中的治疗是肾炎的治疗。7.权利要求5或6的产品，其中所述树胶为阿拉伯胶。8.权利要求5-7任一项所述的产品，其中所述阿拉伯胶树种为塞内加尔阿拉伯胶树。9.可从阿拉伯胶树种的茎和/或树枝获得的水溶性树胶的用途，用于制备一种药物，该药物用于进行类固醇治疗的患者。10.权利要求9的用途，其中的治疗是肾炎的治疗。11.权利要求9或10的用途，其中所述树胶为阿拉伯胶。12.权利要求9-11任一项所述的用途，其中所述阿拉伯胶树种为塞内加尔阿拉伯胶树。13.对类固醇治疗有响应的病症的治疗方法，其包括对需要的患者除了类固醇之外还给药可从阿拉伯胶树种的茎和/或树枝获得的水溶性树胶。14.权利要求13的方法，其中的治疗是肾炎的治疗。15.权利要求13的方法，其中所述树胶为阿拉伯胶。16.权利要求13的方法，其中所述阿拉伯胶树种为塞内加尔阿拉伯胶树。全文摘要本发明提供了一种肾上腺类皮质激素对肾炎的效果增强剂而不会提高所述肾上腺类皮质激素不合意的副作用，该增强剂包括从阿拉伯胶树种的茎和/或树枝获得的水溶性树胶，例如阿拉伯胶。肾上腺类皮质激素和所述水溶性树胶的结合提高了所述肾上腺类皮质激素对肾炎的效果而没有提高激素试剂不合意的副作用。文档编号A61K31/573GK101232889SQ20058004106公开日2008年7月30日申请日期2005年11月29日优先权日2004年11月30日发明者久保道德,松田秀秋申请人:弗里特隆有限公司