药学活性尿苷酯的制作方法

专利名称：药学活性尿苷酯的制作方法
技术领域：
本发明是申请日为2002年4月29日的中国专利申请02809160.4的分案申请。原申请的发明名称为“药学活性尿苷酯”。
说明本发明涉及新的尿苷酯，它们作为抗多种疾病的药学活性试剂的用途，用于制备该尿苷酯的方法和含有至少一种尿苷酯作为活性成分的药物组合物。本发明还涉及一种包含游离脂肪酸和/或脂肪酸酯和尿苷、脱氧尿苷尿苷酸和/或脱氧尿苷酸的药物组合，还涉及这种药物组合的用途。
背景技术：
脂肪酸羧酸以多种分子形式存在。首先必须认识到如果脂质中发现的主要脂肪酸为单羧酸，则这些脂肪酸中的某些为二羧酸，并构成前述脂肪酸的重要代谢产物。
为了准确地描述脂肪酸分子的结构，必须给出碳链的长度(碳原子数)、双键的数目和这些双键的确切位置。这将确定脂肪酸分子的生物活性。
大部分的脂肪酸为直链化合物，并在大部分情况下具有偶数个碳原子。链长度范围为2-80个碳原子，但常见为12-24个碳原子。链长度为2-4个碳原子的脂肪酸称为短链脂肪酸，链长度为6-10个碳原子的脂肪酸称为中等链脂肪酸，而链长度为12-24个碳原子的脂肪酸称为长链脂肪酸。它们的物理和生物性能与此三类划分有关。
还可以根据它们的结构将脂肪酸细分为清楚定义的种类a)饱和脂肪酸b)单烯脂肪酸c)多烯脂肪酸-亚甲基间隔
-多亚甲基间隔-共轭-分离d)单和多支化的脂肪酸e)含有脂肪酸的环环丙烷酸呋喃酸环氧酸硫辛酸f)炔属脂肪酸g)羟基脂肪酸h)含硫脂肪酸i)二羧酸j)脂肪酸酰胺k)酮脂肪酸。
最简单的脂肪酸称为饱和脂肪酸。它们不具有不饱和键并不可能由于氢化或卤化而改变。当存在双键时，脂肪酸是该不饱和脂肪酸；如果只存在一个双键则它们是单一不饱和脂肪酸(MUFA)；如果它们具有两个或更多个通常被单一亚甲基分隔的双键(亚甲基间隔的不饱和)，则它们是多不饱和脂肪酸(PUFA)。
为了描述这些不饱和脂肪酸，提供两种方法化学家的方法根据羧基计算碳原子，其重点在于与此基团最为接近的双键。例如18:2 Δ9，12-十八碳二烯酸或顺-9，顺-12-十八碳二烯酸，俗名亚油酸。双键通常具有Z(顺式)构型，但它也可以具有E(反式)构型。
生物化学家和生理学家的方法
根据确定代谢家族的甲基计算双键，记为n-x(n为总碳原子数，x为最后的双键的位置)。其它双键根据第一个双键加上3来推算(这是最常见的结构，非共轭脂肪，但有时加上2，这些双键是共轭的)。
因此，亚油酸(参见

图1)或顺-9，顺-12-十八碳二烯酸还以速记命名法命名18:2(n-6)。此化合物的具有18个碳原子、2个双键和6个来自与末端甲基连接的最后双键的碳原子。在旧文献中它称为18:2ω6。18-6＝12，12-3＝9因而为D9，12。
饱和脂肪酸通常具有直链和偶数个碳数(n＝4-30)。它们具有通式CH3(CH2)nCOOH。表1总结了某些饱和酸和它们的对应的俗名。
表1最常见的饱和脂肪酸
单烯脂肪酸是广泛存在于生物界的单一不饱和的正脂肪酸，其中它们大部分作为其顺式异构体出现。它们具有通式结构CH3(CH2)xCH＝CH(CH2)yCOOH。它们可以具有在不同的位置的独特的双键，但最常见的是n-9系列，作为来自橄榄油(顺-9-十八碳烯酸)和几乎所有种子油的油酸。某些重要的单烯酸如以下所列表2单烯脂肪酸
油酸可能是最常见的脂肪酸(占橄榄油的60-70％)。存在几种油酸的位置异构体，其中除反式异构体之外的(n-12)或(n-7)位的顺式双键是已知的其中在反刍动物的瘤胃和脂质中发现反油酸(t9-十八碳烯酸)和t-异油酸(t11-十八碳烯酸)。
不常见的反式脂肪酸，t3-十六碳烯酸(反-16:1n-13)存在于来自高等植物和绿藻的真核生物光合膜中。
多烯脂肪酸也称为多不饱和脂肪酸(PUFA)。这些脂肪酸具有2个或更多个顺式双键，最常见的是它们彼此被单一亚甲基分离(亚甲基-间隔的多烯)。
亚油酸是这组的一种典型的成员。某些其它多不饱和脂肪酸中的一个双键经历了移动，它们不再被亚甲基间隔，并已知为共轭脂肪酸。某些不常见的脂肪酸不具有在两个双键之间存在亚甲基的规则结构，而是多亚甲基间隔的多烯。已在某类植物、海生无脊椎动物和昆虫中发现它们。已从原始的海生动物如海绵动物的磷脂中分离出溴化的长链脂肪酸。
最重要的多烯脂肪酸可以分成具有常规结构特征的2类CH3(CH2)xC＝CH-，其中对于(n-6)种类x＝4，而对于(n-3)种类x＝1。二十碳五烯酸是一种在5、8、11、14和17位具有双键的(n-3)种类的常见多烯。表3总结了最常见的多烯脂肪酸。
表3最常见的多烯脂肪酸如以下列出
最常见的多烯酸为十八碳三烯酸(已知7种)。油硬脂酸(9c11t13t)在tong油中发现，并具有工业重要性，十八碳三烯酸(8t10t12c)在金盏花中发现，而梓树酸(9c11t13c)在梓树中发现。
最近，新的具有不同链长度和不同饱和度的多烯脂肪酸描述为16:5、18:4、20:5、20:6，意外地为22:7。所有这些种类都具有4个共轭的全顺式双键，以18:4形式存在，其位置在6、8、10和12，在4、7、9、11、13、16和19位具有双键的新的共轭的二十二碳七烯酸(docosaheptadecanoic acid)其名称为stellaheptaenoicacid。
在植物王国中发现的不饱和多甲基间隔的脂肪酸中，在不同的来源中存在具有顺-5-烯键的脂肪酸。具有此结构的三种最常见的脂肪酸为taxoleic酸(all-顺-5，9-18:2)、在针叶树、香料(Teucrium)和妥尔油中发现的皮诺敛酸(全部-顺-5，9，12-18:3)和sciadonic酸(全-顺-5，11，14-20:3)。这些脂肪酸在种子油中存在的水平为大约1％-25％。还描述了类似的具有4个双键的种类。
某些类异戊二烯脂肪酸是已知的。在这组中，最有用的是视黄酸(参见图1)，它是由视黄醇衍生的，并具有重要的细胞调节功能。
单和多支化的脂肪酸，优选单甲基支化的脂肪酸发现于动物和微生物脂质，如分枝杆菌。关于烃，它们一般具有异或反异结构。例如，14-甲基十五烷酸(异棕榈酸)属于异-种类，而13-甲基十五烷酸对应于反异-种类。关于支化的脂肪酸的其它实例为降植烷酸和植烷酸，如图1所示。
某些脂肪酸包含在其链上的环丙烷环(存在于细菌脂质)或环丙烯环(存在于某些种子油)或者在其链末端的环丙烯环(种子油)。在环丙烷酸中，主要在革兰氏阴性菌中发现乳杆酸(11，12-亚甲基十八烷酸)。最近表明另一种环丙烷脂肪酸(9，10-亚甲基十六烷酸)存在于心和肝线粒体的磷脂中。
环丙烯酸发现于Malvales种子油和Baobab、Kapok和Mowrah种子油。在环戊烯基酸中，在来自大风子(Hydnocarpus)的种子的大风子油中发现大风子油酸，它在民间医药中用于治疗麻疯病。
环氧酸存在于多种种子油中。天然种类的为所有C18化合物，它是饱和或不饱和的。例如在向日葵种子(菊花)中发现9，10-环氧硬脂酸和9，10-环氧十八碳-12-烯酸(coronaric酸)。
硫辛酸(参见图1)最初被认为是一种细菌生长因子，但它不仅发现存在于酵母，还存在于牛肝，它最初从牛肝中分离成纯形式。硫辛酸还称为硫辛酸(thioctic acid)或1，2-二硫戊环-3-戊酸。这种酸在吸收之后在各种组织中被NADH或NADPH酶促还原为二氢硫辛酸(或6，8-二噻烷辛酸)。
硫辛酸首先表现为细菌的必需物，证明它是一种甘氨酸裂解系统和脱氢酶复合物中的辅酶。现在，考虑硫辛酸为一种有效的抗氧化剂，因为它的还原形式通过调节NADH/NAD比率而形成氧化还原电子对(redox couple)。因此，硫辛酸已成为特定的有用的治疗剂。它可以清除羟基和过氧基，还螯合过渡金属。还认为硫辛酸可能在所有抗氧化剂中是最有效的，它可以提供有效的抗多种心脏病的保护，目前它用于缓解糖尿病并发症。
炔属脂肪酸，还称为乙炔酸(ethynoic acid)，包括含有叁键和最终一个或两个双键的脂肪酸。例如，在来自Picramnia sow，一种危地马拉本土植物的tariri种子中发现塔里酸(6-十八碳炔酸)。表4还显示了炔属脂肪酸的实例。
表4炔属脂肪酸
在羟基脂肪酸中，羟基可以出现在碳链的不同位置，所述碳链可以是饱和的或单烯。某些多羟基脂肪酸是已知的，它最常见通过脂肪氧合酶活性产生。2-羟基酸(或α-羟基酸)发现于植物(12-24个碳原子的链)和动物羊毛蜡、皮肤脂质和专门的组织，主要在脑中。2-羟基二十四酸(脑酮酸)和2-羟基-15-二十四碳烯酸(羟基神经酸)是脑苷脂类的神经酰胺部分的组分，而3-羟基酸(或β-羟基酸)存在于某些细菌脂质中。其它实例为蓖麻油酸(12-羟基-9-十八碳烯酸)，它表征蓖麻子油和lesquerolic酸，蓖麻油酸(14-羟基-11-二十烯酸)的C20同系物。
虽然二羧酸不以可评价量的动物或植物脂质的组分出现，但它们一般是脂肪酸的重要代谢产物，因为它们通过氧化产生。它们具有通式HOOC-(CH2)n-COOH。短链二羧酸的非常重要之处是一般代谢和至多n＝3，它们不可能被认为是脂质，因为它们的水溶解度是重要的。这些中间产物中最简单的是草酸(n＝O)，其它为丙二酸(n＝1)、琥珀酸(n＝2)和戊二酸(n＝3)。在天然产物中发现或通过合成得到的这组的其它脂质成员具有4-21的“n”值。它们的实例为己二酸(n＝4)、庚二酸(n＝5)、辛二酸(n＝6)、壬二酸(n＝7)、癸二酸(n＝8)、十三烷二酸(n＝11)和十六碳二酸(n＝14)。
核糖和脱氧核糖核糖和脱氧核糖是戊糖。核糖还称为呋喃核糖，因为它的结构与呋喃有关。核糖和脱氧核糖之间仅有的结构差别是在杂环的2’C位缺少羟基。图2表示核糖和脱氧核糖的结构。
核苷和核苷酸在这些化合物中，嘌呤或嘧啶碱基与糖共价结合。如果该碱基与核糖结合，则结果为核糖核苷(碱基+糖＝核苷)，如果该碱基与脱氧核糖结合，则该核苷为脱氧核糖核苷。在脱氧核糖中，2’C的OH-基被氢取代，因而变为脱氧。
碱基和糖之间的结合包括糖的1’COH-基团和嘌呤的N9或在N-β-糖苷键的嘧啶的N1。包含脱氧核糖的核苷具有相同类型的核苷键。
图2表示三种嘌呤碱基尿嘧啶、胞嘧啶和胸腺嘧啶。
表5命名
为了区别糖环的编号和碱基的编号，糖编号加上撇号，如3’5’。因此，5’指糖环的5’C。
这些是核苷的磷酸酯，且它们是相当强的酸。通常将磷酸酯化成糖基(碱基+糖+磷酸酯＝核苷酸)。磷酸可以位于糖残基的2’、3’或5’C。但是，天然核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸具有在5’C位的磷酸。
磷酸可以经进一步的磷酸化产生二磷酸酯和三磷酸酯，如ADP和ATP。关于每一个核苷酸一磷酸酯，还存在核苷酸二磷酸酯和核苷酸三磷酸酯。DNA或RNA中不存在二和三核苷酸，仅存在一磷酸酯核苷酸。二和三磷酸酯核苷酸天然存在，并在许多生物化学代谢方面起非常重要的作用。
本发明的目的是提供新的化合物和新的药物组合物，它们可以用于预防和/或治疗包括以下的多种疾病和病症I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、逆转录病毒感染(HIV，AIDS)，本发明同时提供该治疗方法和该方法中所用的药物组合物。
这个目的通过独立权利要求的公开而解决。本发明的其它优越特征、方面和细节根据本申请的独立权利要求、说明书、实施例和图是显而易见的。
发明描述本发明涉及具有通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐 其中R代表R″-COO；R’代表氢或羟基；R″代表具有8-30个碳原子的烷基链、具有8-30个碳原子的单支化或多支化烷基链、具有8-30个碳原子的单烯烷基链、具有8-30个碳原子的单烯支化的烷基链、具有8-30个碳原子的多烯烷基链、具有8-30个碳原子的多烯支化的烷基链、包含碳环或杂环的具有8-30个碳原子的支化或非支化的烷基链、具有8-30个碳原子的单炔(monoinoic)烷基链、具有8-30个碳原子的单炔(monoinoic)支化烷基链、具有8-30个碳原子的多炔(polyinoic)烷基链、具有8-30个碳原子的多炔(polyinoic)支化烷基链、包含至少一个双键或一个叁键的具有8-30个碳原子的烷基链、包含至少一个双键或一个叁键的具有8-30个碳原子的支化烷基链、包含羟基或硫醇基的支化或非支化和/或饱和或不饱和的具有8-30个碳原子的烷基链。
通式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐表现出抗多种疾病和病症的优良活性，因而用作药学活性试剂。
根据式(I)的化合物可从羟基保护的核苷或脱氧核苷为原料合成。作为位于3和4位的两种核苷羟基的保护基，通常优选使用乙缩醛和缩酮。作为位于3位的脱氧核苷羟基的保护基，优选使用仲醇的酸敏感性OH-保护基。这些OH-保护的核苷或脱氧核苷用作原料，并与羧酸、羧酸卤化物、羧酸氰化物、羧酸叠氮化物和/或羧酸酐反应。在这种情况下，需要使用非活化羧酸，试剂如二环己基碳二亚胺(DCC)以支持酯形成。
在这种情况下，使用羧酸氯化物、溴化物、氰化物或叠氮化物，可以将碱基，优选有机碱基如吡啶、二甲基氨基吡啶(DMAP)、三乙基胺、咪唑等加到反应混合物。
通常在此方法中使用等摩尔的(脱氧)核苷和羧酸或羧酸衍生物(羧酸卤化物，-氰化物、-叠氮化物、-酐)，但也可以使用大大过量的一种反应物。优选的溶剂包括极性非质子溶剂，如二氯甲烷、氯仿、DMF或醚(THF、二烷、二乙醚、TBDME等)。
在此方法的最后步骤，优选在平稳的酸性条件下，任选在80-100℃的高温下除去OH保护基。溶剂如乙酸或水和乙酸或醇如甲醇或乙醇的混合物得到良好的结果。可以使用催化量的多种有机酸如苯磺酸、柠檬酸、甲磺酸、草酸等进行缩酮和乙缩醛裂解。
而且，在避光的条件下完成所有的步骤的结果是有利的。根据本技术中已知的标准方法完成产物的纯化。
本发明的化合物是碱性的，并与有机或无机酸形成药学上可接受的盐。用于这种酸加成盐形成的适宜的酸的实例为本技术领域中已知的氢氯酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、草酸、丙二酸、水杨酸、对氨基水杨酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、磺酸、磷酸、高氯酸、硝酸、甲酸、丙酸、葡糖酸、乳酸、酒石酸、羟基马来酸、丙酮酸、苯乙酸、苯甲酸、对氨基苯甲酸、对羟基苯甲酸、甲磺酸、乙磺酸、亚硝酸、羟基乙磺酸、乙烯磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、磺胺酸、樟脑磺酸、china酸、扁桃酸、邻甲基扁桃酸、氢-苯磺酸、苦味酸、己二酸、d-邻甲苯基酒石酸、丙醇二酸、α-甲苯酸、(邻、间、对)-甲苯酸、萘胺磺酸和其它矿物酸或羧酸。以常规的方式通过游离碱形式与足量的目标酸接触制备盐。
游离碱形式可以通过用适宜的稀碱水溶液如稀氢氧化钠液、碳酸钾、氨水和碳酸氢钠水溶液处理盐而再生。游离碱形式不同于它们的盐形式之处在于某些特理性能，如在极性溶剂中的溶解度，但对于本发明的目的来说盐等同于它们对应的游离碱。
本发明的通式(I)的化合物由于其尿嘧啶部分还表现出酸性性能，除此之外根据用于酯形成的试剂，例如在使用二羧酸进行酯形成时，存在其它的酸性基团且本发明的化合物能够与有机或无机碱都形成盐。因此，例如，如果在分子中存在羧酸取代基，则可以用无机和有机碱，如NaOH、KOH、NH4OH、四烷基氢氧化铵等形成盐。
因此，本发明的化合物的适宜的药学上可接受的盐包括用有机或无机碱形成的加成盐。源自这些碱的成盐离子可以是金属离子，例如铝、碱金属离子如钠或钾、碱土金属离子如钙或镁或者胺盐离子，其中大量的碱已知用于此目的。实例包括碱或碱土氢氧化物、碱或碱土烷氧化物、碱或碱土碳酸盐或碳酸氢盐，和/或有机碱如氨水、伯、仲和叔胺如乙醇胺、葡糖胺、N-甲基和N，N-二甲基葡糖胺、芳基烷基胺如二苄基胺和N，N-二苄基乙二胺、低级烷基胺如甲基胺、叔丁基胺、普鲁卡因、低级烷基哌啶如N-乙基哌啶、环烷基胺如环己烷基、二环己基胺、吗啉、1-金刚烷基胺、苄星青霉素，或者源自氨基酸如精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸的盐，或者来自中性或酸性氨基酸的酰胺。生理学上可接受的盐如钠或钾盐和氨基酸也可以如以下药用，并且是优选的。
本发明的化合物和/或它们的药学上可接受的盐用于预防和/或治疗I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛、哮喘和逆转录病毒感染(HIV，AIDS)，包括机会感染。
而且，通式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐可以用于制备用作兴奋药和/或用于预防和/或治疗以下疾病的药物制剂I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛和逆转录病毒感染(HIV，AIDS)、包括机会感染。
而且，本发明的化合物用作兴奋药或兴奋剂。本文所用的术语“兴奋药”或“兴奋剂”指暂时增加身体功能的速率的药学活性化合物。兴奋药的主要药理学作用是刺激身体的中枢神经系统和外周系统。某些兴奋剂仅影响特定的器官如心脏、肺、脑或神经系统。兴奋剂包含的物质如阿米庚酸、阿米苯唑、苯丙胺、bromantan、咖啡因、carphedon、可卡因、麻黄素、芬坎法明、mesocarb、戊四唑(pentylentetrazol)、哌苯甲醇、沙丁胺醇、沙美特罗、特布他林和相关的物质。影响中枢神经系统的兴奋剂包括methcathione、替苯丙胺、MDMA、苯丙胺、甲基苯丙胺、芬乙茶碱、哌甲酯、芬美曲嗪、安非拉酮、mesocarb、匹莫林、芬特明等。
苯丙胺类型兴奋剂可以用于治疗注意力不集中症、发作性睡眠症和肥胖。除了兴奋剂的使用以外，这些对神经起显著作用的兴奋药的主要治疗应用为焦虑、抑郁、癫痫症、精神病和睡眠异常。
本文所用的术语“刺激机体”指根据本发明式(I)的化合物对特定的器官，尤其是对中枢神经系统的作用，从而导致类似于通过使用上述现有技术中的兴奋剂而获得的治疗作用。因此，本发明的化合物可以用于治疗注意力不集中症、发作性睡眠、肥胖、焦虑、抑郁、癫痫症、精神病预防和疲劳逆转、哮喘和睡眠异常，并可以代替常用的兴奋剂。
本发明通式(I)的尿苷和脱氧尿苷化合物包含由在核糖或脱氧核糖的5’C位的对应的脂肪酸衍生的羧酸酯。该脂肪酸的烷基链包含8-30个碳原子。优选这些烷基链具有8或10至24个碳原子，更优选具有14-22个碳原子，进一步更优选具有8-22个碳原子，最优选具有18、20或22个碳原子。
因此，优选这些化合物其中，R″代表具有8-24个碳原子的烷基链、具有8-24个碳原子的单支化或多支化烷基链、具有8-24个碳原子的单烯烷基链、具有8-24个碳原子的单烯支化烷基链、具有8-24个碳原子的多烯烷基链、具有8-24个碳原子的多烯支化烷基链、包含碳环或杂环的具有8-24个碳原子的支化或非支化烷基链、具有8-24个碳原子的单炔(monoinoic)烷基链、具有8-24个碳原子的单炔(monoinoic)支化烷基链、具有8-24个碳原子的多炔(polyinoic)烷基链、具有8-24个碳原子的多炔支化烷基链、具有8-24个碳原子的包含羟基或硫醇基的支化或非支化和/或饱和或不饱和烷基链和更优选其中R″代表具有10-24个碳原子的单烯烷基链、具有10-24个碳原子的单烯支化烷基链、具有10-24个碳原子的多烯烷基链、具有10-24个碳原子的多烯支化烷基链、包含碳环或杂环的具有8-20个碳原子的支化或非支化烷基链、具有10-24个碳原子的单烯烷基链、具有10-24个碳原子的单烯支化烷基链、具有10-24个碳原子的多烯烷基链、具有10-24个碳原子的多烯支化烷基链的化合物。
还优选具有偶数个碳原子的碳链。
可以用于形成羧酸酯的适宜的脂肪酸公开在说明书的脂肪酸部分，特别是在本申请的表1、2、3和4中。
如表1所列的长链羧酸、表2总结的可以用于合成的支化或多支化羧酸如异棕榈酸、降植烷酸或植烷酸和单烯酸是本发明的通式(I)的化合物。优选使用如表4所示的炔属酸和含羟基的酸如脑酮酸、羟基神经酸、蓖麻油酸和lesquerolic酸。更优选不饱和羧酸。最常见的不饱和羧酸的实例如说明书的表3给出。其它实施例为油硬脂酸、梓树酸、十八碳三烯酸、二十二碳十七烷酸、taxoleic酸、皮诺敛酸、sciadonic酸和视黄酸。
还优选包含碳环或杂环的羧酸。含有环的羧酸的实例为11，12-亚甲基十八烷酸，9，10-亚甲基十六烷酸，还已知为硫辛酸或它的还原形式的coronaric酸、还已知为6，8-二噻烷辛酸的二氢硫辛酸。
在不饱和和含环羧酸中，更优选亚油酸、γ-亚麻酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸、α-亚麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17-二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、油硬脂酸、梓树酸、十八碳三烯酸、二十二碳十七烷酸、taxoleic酸、皮诺敛酸、sciadonic酸和视黄酸。
最优选以下羧酸γ-亚麻酸、α-亚麻酸、EPA、DHA、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸和(R)-硫辛酸。
因此，优选以下本发明的化合物其中R″代表十二烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、顺-9-十四烯基、顺-9-十六烯基、顺-6-十八烯基、顺-9-十八烯基、顺-11十八烯基、顺-9-二十烯基、顺-11-二十烯基、顺-13-二十二烯基、顺-15-二十四烯基、9，12-十八碳烯基、6，9，12-十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，11，14-二十碳四烯基、7，10，13，16-二十二碳四烯基、4，7，10，13，16二十二碳五烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17-二十碳五烯基、7，10，13，16，19二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2二硫戊环-3-戊基、6，8-二噻烷辛基、二十二碳十七烷基、油硬脂酰基、十八碳三烯基、catalpyl、taxoleyl、pinolenyl、sciadonyl、视黄基、14-甲基十五烷基、姥鲛烷基、植烷基、11，12-亚甲基十八烷基、9，10亚甲基十六烷基、9，10-环氧硬脂酰基、9，10-环氧十八碳-12-烯基、6-十八炔基、t11-十八碳烯-9-炔基、9-十八炔基、6-十八碳烯-9-炔基、t10-十七碳烯-8-炔基、9-十八碳烯-12-炔基、t7、t11-十八碳二烯-9-炔基、t8，t10-十八碳二烯-12-炔基、5，8，11，14-二十碳四炔基、2-羟基二十四烷基、2-羟基-15-二十四烯基、12-羟基-9-十八烯基和14-羟基-11二十烯基。
更优选这些本发明的化合物其中R″代表9，12-十八碳烯基、6，9，12-十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，11，14二十碳四烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17-二十碳五烯基、7，10，13，16，19二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2-二硫戊环-3-戊基和6，8-二噻烷辛基。
最优选以下通式(I)的化合物化合物1(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-6，9，12-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物2(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-9，12，15-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物3(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十碳(lcosa)-5，8，11，14，17-五烯酸5’-(2，4二氧代3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物4(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸5’-(2，4二氧代3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物5(2’R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊环-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物S5(2’R，3S，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊环-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物R5(2’R，3R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊环-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物5’(2’R，3’S，4’R，5’R)-6，8-二巯基-辛酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，和这些化合物的药学上可接受的盐。
本发明通式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐的给药剂量所对应的有效浓度范围为1-10000mg，优选范围为1-5000mg，更优选的范围为10-1000mg，最优选的范围为100-800mg。
本发明的另一个优选的实施方案涉及至少一种通式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐与其它治疗药物、试剂或化合物的组合。该其它治疗化合物选自包括以下的组维生素和抗逆转录病毒药物。适宜的维生素为维生素A、B1、B2、B6、B12、C、E、及其药学上可接受的盐。
本发明的另一方面涉及一种用于预防和/或治疗哺乳动物，包括人的以下疾病的方法I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛和逆转录病毒感染(HIV，AIDS)，包括机会感染，所述方法包括给该哺乳动物施用一定量的至少一种通式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐，以有效地治疗该疾病。本发明还公开了一种用于刺激哺乳动物，特别是人的机体，特别是特定器官和/或中枢神经系统的方法，所述方法包括步骤给该哺乳动物施用一定量的至少一种本发明的化合物和/或其盐，以有效地刺激该哺乳动物的身体功能。
优选将如下的本发明的尿苷或脱氧尿苷化合物用于该方法其中R″代表十二烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、顺-9-十四烯基、顺-9-十六烯基、顺-6十八烯基、顺-9-十八烯基、顺-11-十八烯基、顺-9-二十烯基、顺-11二十烯基、顺-13-二十二烯基、顺-15-二十四烯基、9，12-十八碳烯基、6，9，12十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，11，14-二十碳四烯基、7，lO，13，16二十二碳四烯基、4，7，lO，13，16-二十二碳五烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17二十碳五烯基、7，10，13，16，19-二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2-二硫戊环-3-戊基、6，8-二噻烷辛基、二十二碳十七烷基、油硬脂酰基、十八碳三烯基、catalpyl、taxoleyl、pinolenyl、sciadonyl、视黄基、14-甲基十五烷基、姥鲛烷基、植烷基、11，12-亚甲基十八烷基、9，10-亚甲基十六烷基、9，lO-环氧硬脂酰基、9，10-环氧十八碳-12一烯基、6-十八炔基、t11-十八碳烯-9-炔基、9-十八炔基、6-十八碳烯-9-炔基、tlO-十七碳烯-8-炔基、9-十八碳烯-12-炔基、t7、t11-十八碳二烯-9-炔基、t8，t10-十八碳二烯-12-炔基、5，8，11，14-二十碳四炔基、2-羟基二十四烷基、2-羟基-15-二十四烯基、12-羟基-9-十八烯基和14-羟基-11-二十烯基。
更优选这些化合物其中R″代表9，12-十八碳烯基、6，9，12-十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，ll，14二十碳四烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17-二十碳五烯基、7，10，13，16，19二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2二硫戊环-3-戊基和6，8-二噻烷辛基。
该方法中最优选的化合物为以下化合物化合物1(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-6，9，12-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物2(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-9，12，15-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物3(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十碳-5，8，11，14，17-五烯酸5’-(2，4二氧代3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物4(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物5 (2’R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊环-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物S5(2’R，3S，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊环-3-基-戊酸5’-(2，4二氧代3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物R5(2’R，3R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊环-3-基-戊酸5’-(2，4二氧代3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物5’(2’R，3’S，4’R，5’R)-6，8-二巯基-辛酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’基甲酯，和这些化合物的药学上可接受的盐。
在该发明的方法中，通式(I)的化合物的给药剂量所对应的有效浓度范围为1-10000mg，优选范围为1-5000mg，更优选范围为10-1000mg，最优选范围为100-800mg。
而且，施用至少一种本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐与其它治疗药物、试剂或化合物的组合也是有利的。该其它治疗化合物选自包括以下的组维生素和抗逆转录病毒药物。适宜的维生素为维生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其药学上可接受的盐。
本发明其它方面涉及包含至少一种通式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐作为活性成分和药学上可接受的载体、赋形剂、助剂和/或稀释剂的药物组合物。该药物组合物还可以包含附加的药学活性化合物，所述化合物选自包括以下的组维生素和抗逆转录病毒药物。尤其是还可以加入维生素如维生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其药学上可接受的盐。
通式(I)的化合物和本发明的药物组合物还可以它们的药学活性盐的形式施用，任选使用基本上无毒的药学上可接受的载体、赋形剂、助剂或稀释剂。本发明的药物在常规固体或液体载体或稀释剂和常规的药学制备助剂中，以已知的适宜的剂量水平制备。优选的制剂和配方是适于口用的给药形式。例如，这些给药形式包括丸剂、片剂、薄膜片剂、包衣片、胶囊、粉末和沉积物。除了口用之外的给药形式也是可能的。含有该化合物的本发明的尿苷和脱氧尿苷化合物或药物制剂和配方可以通过适宜的方法给药，所述方法包括但不限于注射(静脉内、腹膜内、肌内、皮下)；通过上皮或粘膜与皮肤衬料(口粘膜、直肠和阴道上皮衬料，鼻咽粘膜、肠粘膜)吸收；通过口，直肠，透皮，局部，真皮内，胃内，皮内，阴道内，血管内，鼻内，颊内，经皮舌下或吸入给药，或者任何其它药学技术中可获得的方法在所公开的方法中，包含至少一种本发明的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的本发明的药物组合物一般以含有根据以下目标给药形式适宜地选择的适宜的载体材料的混合物给药片剂、胶囊(固体填充、半固体填充或液体填充)、用于组合的粉末、口凝胶、酏剂、可分散颗粒剂、糖浆、悬浮剂等，并遵循常规药学实践。例如，关于片剂或胶囊形式的口服给药，可以将活性成分与任何口服无毒的药学上可接受的惰性载体，如乳糖、淀粉、蔗糖、纤维素、硬脂酸镁、磷酸钙、硫酸钙、滑石、甘露糖醇、乙醇(液体形式)等组合。而且，在需要的时候，还可以在混合物中加入适宜的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂。粉末和片剂可以包含大约5％至大约95％的本发明组合物。
适宜的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖、玉米增甜剂、天然和合成树胶如阿拉伯胶、藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇和蜡。在这些润滑剂中，可以提及的是在这些剂型中使用硼酸、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、瓜尔胶等。如果需要还可以包括甜味剂和调味剂和防腐剂。以下更详细地讨论上述的某些术语，即崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂等。
此外，本发明的组合物可以制成持续释放形式，以提供任何一种或多种组分或活性成分的速率控制的释放，以最优化治疗效果。用于持续释放的适宜的剂型包括含有不同崩解速率的层的分层片剂或者浸渍有活性化合物的控释聚合物基质，并成形为含有这种浸渍或包囊的多孔性聚合物基质的片剂或胶囊。
液体形式的制剂包括溶液、悬浮液和乳液。例如可以提及水或水-丙二醇溶液，用于肠胃外注射或加入甜味剂和乳浊剂作为口服溶液、悬浮液和乳液。液体形式制剂还可以包括鼻内给药溶液。
适于吸入和鼻内给药的气雾剂可以包括溶液和粉末形式的固体，它可以与药学上可接受的载体如惰性压缩气体如氮组合。除了口服之外，吸入是用于应用本发明的化合物的一种优选的形式。
关于制备栓剂，首先将低熔点蜡如脂肪酸甘油酯如可可油的混合物熔化，并通过搅拌或类似的混合将活性成分均匀分散于其中。然后将熔化的均匀的混合物倾入适宜尺寸的模子，使其冷却，从而固化。
本发明的还包括欲在使用前立即转化为用于口服或肠胃外给药的液体剂型的固体剂型。这些液体形式包括溶液、悬浮液和乳液。
本发明的尿苷和脱氧尿苷化合物还可以是可经皮递送的。经皮组合物可以采用乳膏、洗液、气雾剂和/或乳液的形式，并可以包括在基质经皮贴片中或本领域中常规地用于此目的的储藏类型中。
术语胶囊指一种由甲基纤维素、聚乙烯醇或变性明胶或淀粉制成的特定的容器或外壳，用于保持或包含含有活性成分的组合物。硬壳胶囊一般由较高凝胶强度骨架和猪皮肤明胶的混合物制成。胶囊本身可能包含少量的染料、不透明剂、增塑剂和防腐剂。
片剂意指含有活性成分和适宜的稀释剂的压制或模制固体剂型。片剂可以通过压制混合物或通过湿制粒、干制粒得到的颗粒或者本领域技术人员已知的压制法而制备。
口服凝胶指分散或溶解在亲水半固体基质中的活性成分。
用于组合的粉末指含有活性成分和适宜的稀释剂的粉末混合物，它可以悬浮在水或汁中。
适宜的稀释剂是通常构成组合物或剂型的主要部分的物质。适宜的稀释剂包括糖如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨醇、源自小麦、玉米和马铃薯的淀粉和纤维素如微晶纤维素。组合物中稀释剂的数量范围为全部组合物的大约5wt％至大约95wt％，优选大约25wt％至大约75wt％，更优选为大约30wt％至大约60wt％，最优选为大约40-50wt％。
术语“崩解剂”指加到组合物中以帮助分裂(崩解)并释放药物的物质。适宜的崩解剂包括淀粉、“冷水溶解的”改性淀粉如羧甲基淀粉钠、天然和合成树胶如槐豆、梧桐胶、瓜尔豆、黄芪胶和琼脂、微晶纤维素和交联微晶纤维素如微晶纤维素钠、藻酸盐如藻酸和藻酸钠、粘土如膨润土和泡腾混合物。组合物中崩解剂的数量范围可以为组合物的大约1至大约40wt％，优选组合物的2至大约30wt％，更优选组合物的大约3至20wt％，最优选大约5至大约10wt％。
粘合剂表征这样的物质它们将粉末粘或“粘合”在一起并通过形成颗粒而使它们内聚，从而用作配方中的“粘合剂”。粘合剂加大已可以在稀释剂或填充剂中获得的粘合强度。适宜的粘合剂包括源自蔗糖、源自小麦、玉米和马铃薯的糖、淀粉；天然树胶如阿拉伯胶、明胶和黄芪胶；海藻的衍生物如海藻酸、海藻酸钠和海藻酸铵钙；纤维素材料如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠和羧丙基甲基纤维素；聚乙烯吡咯烷酮；和无机物如硅酸镁铝。组合物中粘合剂的数量范围为组合物的大约1-30wt％，优选为组合物的大约2wt％至大约20wt％，更优选为组合物的大约3％至大约10％，进一步更优选为大约3wt％至大约6wt％。
润滑剂指加到该剂型中以使片剂、颗粒等在被压制以后能够通过减少摩擦或磨损而从模子或冲模中释放。适宜的润滑剂包括金属硬脂酸盐如硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸钾；硬脂酸；嵩熔点蜡和水溶性润滑剂如氯化钠、苯甲酸钠、乙酸钠、油酸钠、聚乙二醇和d’1-亮氨酸。通过在压制前的最后步骤入润滑剂，因为它们必须存在于颗粒表面、颗粒之间和片剂受压部分。组合中润滑剂的数量范围可以为组合物的大约0.05至大约15wt％，优选为组合物的0.2至大约5wt％，更优选为大约0.3至大约3％，最优选为组合物的大约0.3至大约1.5wt％。
助流剂是防止结块和改善的流动特征，从而使流动平滑和均匀的物质。适宜的助流剂包二氧化硅和滑石。组合物中助流剂的数量范围可以为组合物的大约0.01-10wt％，优选为全部组合物的0.1％至大约7wt％，更优选为大约0.2-5wt％，最优选为大约0.5至大约2wt％。
着色剂是将组合物或剂型着色的赋形剂。这些赋形剂可包括食物等级染和吸附在适宜的吸附剂如粘土或二氧化铝上的食物等级染料。着色剂的数量范围可以为组合物的大约0.01-0wt％，优选大约0.05-6wt％，更选为组合物的大约0.1至大约4wt％，最优选为大约0.1至大约1wt％。
用于制备和施用发明的化合物的技术见于″Remington’sPharmaceutical Sciences″Mack Publishing Co.，Easton PA。包含至少一种本发明的化合物和/或其药学上可接受的盐的适宜的组合物可以是在适宜液体药物载体中的化合物的溶液或者任何其它制剂如片剂、丸剂、薄膜片剂、包衣片、糖衣丸、胶囊、散剂沉积物、凝胶、糖浆、浆、悬浮液、乳液等等。
可以通过用于测定LD50(50％群体致死的剂量)和ED50(对50％群体有疗效的剂量)的细胞培养物或实验动物的标准药学、药理学和毒理学方法来确定本发明化合物的毒性和疗效。毒性和疗效之间的剂量比是治疗指数，它可以表示为LD50和ED50之间比率。本发明的化合物剂量优选在包括具有少量或无毒性的ED50的循环浓度范围之内。给药组合物的实际数量将取决于治疗的受试者、受试者的体重、疾病的严重程度、给药方式和处方医师的判断。
本发明的另一方面还涉及包含至少一种选自包括以下的组的脂肪酸和/或脂肪酸烷基酯的药物组合亚油酸、γ-亚麻酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16-二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16二十二碳五烯酸、α-亚麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、油硬脂酸、十八碳三烯酸、梓树酸、二十二碳七烯酸、taxoleic酸、皮诺敛酸(pinolenic acid)、sciadonic酸、视黄酸、异棕榈酸、降植烷酸、植烷酸、11，12-亚甲基十八烷酸、9，10-亚甲基十六烷酸、coronaric酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、塔里酸、santalbic酸、硬脂炔酸、6，9-十八碳炔酸、三聚氰酸、还阳参油酸、heisteric酸、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸、ETYA、脑酮酸、羟基神经酸、蓖麻油酸、lesquerolic酸、十三烷二酸、十六碳二酸、和/或其药学上可接受的盐和/或亚油酸C1-C7烷基酯、γ-亚麻酸C1-C7烷基酯、二高-γ-亚麻酸C1-C7烷基酯、花生四烯酸C1-C7烷基酯、7，10，13，16-二十二碳四烯酸C1-C7烷基酯、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸C1-C7烷基酯、α-亚麻酸C1-C7烷基酯、十八碳四烯酸C1-C7烷基酯、8，11，14，17二十碳四烯酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯、DPA C1-C7烷基酯、DHA C1-C7烷基酯、Mead酸C1-C7烷基酯、油硬脂酸C1-C7烷基酯、十八碳三烯酸C1-C7烷基酯、梓树酸C1-C7烷基酯、二十二碳七烯酸C1-C7烷基酯、taxoleic酸C1-C7烷基酯、皮诺敛酸C1-C7烷基酯、sciadonic酸C1-C7烷基酯、视黄酸C1-C7烷基酯、异棕榈酸C1-C7烷基酯、降植烷酸C1-C7烷基酯、植烷酸C1-C7烷基酯、11，12-亚甲基十八烷酸C1-C7烷基酯、9，10-亚甲基十六烷酸C1-C7烷基酯、coronaric酸C1-C7烷基酯、(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、塔里酸C1-C7烷基酯、santalbic酸C1-C7烷基酯、硬脂炔酸C1-C7烷基酯、6，9-十八碳炔酸C1-C7烷基酯、三聚氰酸C1-C7烷基酯、还阳参油酸C1-C7烷基酯、heisteric酸C1-C7烷基酯、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸C1-C7烷基酯、ETYAC1-C7烷基酯、脑酮酸C1-C7烷基酯、羟基神经酸C1-C7烷基酯、蓖麻油酸C1-C7烷基酯、lesquerolic酸C1-C7烷基酯、十三烷二酸C1-C7烷基酯、十六碳二酸C1-C7烷基酯、以及至少一种选自下列的核苷和/或核苷酸化合物尿苷、脱氧尿苷、尿苷一磷酸、脱氧尿苷一磷酸和/或其药学上可接受的盐。
优选尿苷、脱氧尿苷、尿苷一磷酸或脱氧尿苷一磷酸与以下物质的组合亚油酸、γ-亚麻酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16-二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16二十二碳五烯酸、α-亚麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、油硬脂酸、梓树酸、十八碳三烯酸、二十二碳十七烷酸、taxoleic酸、皮诺敛酸、sciadonic酸、视黄酸和/或其药学上可接受的盐、和/或亚油酸C1-C7烷基酯、γ-亚麻酸C1-C7烷基酯、二高-γ-亚麻酸C1-C7烷基酯、花生四烯酸C1-C7烷基酯、7，10，13，16-二十二碳四烯酸C1-C7烷基酯、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸C1-C7烷基酯、α-亚麻酸C1-C7烷基酯、十八碳四烯酸C1-C7烷基酯、8，11，14，17-二十碳四烯酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯、DPAC1-C7烷基酯、DHA1 C1-C7烷基酯、Mead酸C1-C7烷基酯、(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、油硬脂酸C1-C7烷基酯、梓树酸C1-C7烷基酯、十八碳三烯酸C1-C7烷基酯、二十二碳十七烷酸C1-C7烷基酯、taxoleic酸C1-C7烷基酯、皮诺敛酸C1-C7烷基酯、sciadonic酸C1-C7烷基酯和/或视黄酸C1-C7烷基酯。
更优选包含尿苷、脱氧尿苷、尿苷一磷酸或脱氧尿苷一磷酸和以下物质的药物组合γ-亚麻酸，α-亚麻酸、EPA、DHA、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)6，8-二噻烷辛酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、和/或(R)-硫辛酸、和/或其药学上可接受的盐、和/或y-亚麻酸C1-C7烷基酯、a-亚麻酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯、DHAC1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、和/或(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯。
最优选以下物质的药物组合(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、和/或(S)6，8-二噻烷辛酸、和/或(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、和/或(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯与尿苷、脱氧尿苷、尿苷酸或脱氧尿苷酸和/或其药学上可接受的盐。
用于形成上述脂肪酸的C1-C7烷基酯的适宜的醇为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、仲丁醇、叔丁醇、异丁醇、戊醇、异戊醇、环戊醇、己醇、环己醇、庚醇。
该药物组合还可以包含如以上详述的适宜的药学上接受的载体、赋形剂、助剂和稀释剂。
本发明的另一方面涉及该药物组合用于预防和/或治疗以下疾病的用途I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛和逆转录病毒感染(HIV，AIDS)、包括机会感染。而且，包含至少一种通式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐的药物组合可以用作兴奋药，特别用于治疗注意力不集症、发作性睡眠症、肥胖、焦虑、抑郁、癫痫、精神病和睡眠异常，并用于刺激特定的身体功能，尤其是中枢神经系统功能。
该药物组合还可以用制备用于预防和/或治疗以下疾病的药剂或制剂I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛和逆转录病毒感染(HIV，AIDS)、包括机会感染。包含该药物组合物的该药剂还可以作兴奋剂，以治疗注意力不集症、发作性睡眠、肥胖、焦虑、抑郁、癫痫、精神病和睡眠异常，并用于刺激特定的身体功能，尤其是中枢神经系统功能。
该药剂或制剂可以制成适于静脉内、腹膜内、肌内、皮下、口、直肠、上皮、肠、透皮、局部、真皮内、胃内、胶膜内、阴道内、血管内、鼻内、颊内、经皮、舌下或任何其它应用的形式。而且，该药剂还可以包含至少一种如以上详述的基本无毒的药学上接受的载体、赋形剂、助剂或稀释剂。
本发明的药物组合的给药剂量所对应的有效浓度范围为1-15000mg，优选1-8000mg，更优选1-5000mg，进一步更优选范围为10-2000mg，最优选的范围为100-1000mg。
本发明的另一个有利的方面涉及还包含另一种治疗剂或化合物的药物组合，其中该其它的治疗化合物选自包括以下的组维生素和抗逆转录病毒药物。适宜的维生素为维生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其药学上可接受的盐。
本发明还第一次公开了用于预防和/或治疗哺乳动物，包括人的以下疾病的方法I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛和逆转录病毒感染(HIV，AIDS)，包括机会感染，所述方法包括给该哺乳动物施用一定量的该药物组合的，以有效地治疗该疾病或功能异常。除此之外，本发明还公开了一种用于刺激哺乳动物的机体和特定身体功能的方法，所述方法包给该哺乳动物施用一定量的该药物组合物，以有效地刺激机体和该特定的身体功能。
在本发明的方法中，给药的药物组合的剂量所对应的有效浓度范围为1-30000mg，优选范围为10-20000mg，更优选范围为50-15000mg，进一步更优选范围为100-10000mg，最优选的范围为1000-6000mg。
图的说明图1显示一组选择的脂肪酸；图2显示核糖、脱氧核糖和核苷尿嘧啶、胞嘧啶和胸腺嘧啶，通式(I)的化合物的碱基；图3公开了六种高度活性的通式(I)的化合物的结构化合物1(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-6，9，12-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物2(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-9，12，15-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物3(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十碳(lcosa)-5，8，11，14，17-五烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物4(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，化合物5(2’R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊环-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯，和化合物5’(2’R，3’S，4’R，5’R)-6，8-二巯基-辛酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羟基-四氢呋喃-2’-基甲酯。
图4显示化合物5’对大鼠纹状体中多巴胺浓度的作用。通过施用较低浓度的化合物5’使有害的丙二酸盐引起的大鼠纹状体中的多巴胺消耗几乎得到补偿；图5a表明化合物5’能够显著地增加大鼠黑质中的5-HT浓度；图5b表明化合物5’能够显著地增加大鼠黑质中的5-HIAA水平。
实施例实施例1一般酯化方法将1mol当量的脂肪酸溶于极性非质子溶剂。优选的溶剂为二氯甲烷、氯仿或醚如THF。一次性加入优选溶于反应溶剂中的0.1-2.0mol当量、优选0.5-1.2mol当量的二环己基碳化二亚胺(DCC)。
在数分钟之后，将1.0mol当量的受保护的核苷或脱氧核苷加到溶液中，并在数分钟之后加入催化或半催化量的二甲基氨基吡啶(DMAP)。将反应混合物在无光的条件下搅拌10-20小时。根据本技术领域中已知的标准方法完成所得产物的纯化。
实施例2一般缩酮裂解方法在酸性条件下完成缩酮裂解。例如，使用溶于有机溶剂的苄基磺酸或其它有机酸。用乙酸，最优选用80％乙酸获得最佳结果。反应一般在高温下进行，优选在80-100℃下进行数小时，优选进行2-6小时，这取决于反应物的稳定性。在中和之后，根据本领域技术人员已知的标准方法完成通式(I)的化合物的纯化。
实施例3化合物3合成
步骤1酯化在氮气氛下将2.00g(6.61mmol)EPA溶于10ml二氯甲烷。加入溶于20ml氯甲烷的1.38g(1.16mmol)DCC，并在5分钟之后入根据实施例5的步骤1得到的缩酮保护的尿苷。再过5分钟后，将25mg DMAP加到此溶液。在室温下在暗处搅拌反应物。将所得的溶液用30ml MTBE(甲基叔丁醚)稀释、过滤并浓缩。通过柱色谱法，使用己烷∶异丙醇(5∶1)作为洗脱剂纯化棕色和油状残余物。得到无色油。
产率3.42g(6.01mmol，91％th.)步骤2缩酮裂解将3.10g(5.45mmol)得自步骤1的缩酮保护的化合物3溶于40ml80％乙酸，并在至高大约95℃下加热4.5小时。减压下除去乙酸，并将残余溶于50ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO3溶液洗涤，用盐水洗涤两次，用Na2SO4干燥并浓缩。得到褐色固体，用柱色谱法将其纯化，使用二氯甲烷∶甲醇(10∶1)作为洗脱剂。得到浅黄色和高粘性油。
产率1.52g(2.88mmol，53％th.)
化合物3MS(m/z(％))528(2，37)M+；113(100)1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ＝0.98(t，3H)，1.69-1.76(m，2H)，2.05-2.16(m，4H)，2.35-2.39(m，2H)，2.79-2.87(m，8H)，4.12-4.14(m，1H)，4.25-4.32(m，2H)，4.35-4.44(m，2H)，5.28-5.46(m，10H)，5.75(d，1H)，5.82(d，1H)，7.62(d，1H)，10.15(s，1H)13C-NMR(100.6MHz；CDCl3)δ＝14.24，20.54，24.67，24.82，25.55，25.63，26.45，32.12，33.45，63.20，70.22，75.01，82.23，91.27，102.48，127.03，127.89，128.05，128.34，128.57，128.61，128.72，128.76，129.24，132.05，139.71，151.18，163.63，173.92已根据上述方法合成化合物1和2，其中用γ-亚麻酸或α-亚麻酸代替EPA。
步骤1的产率超过90％，而步骤2的产率为大约50％。
实施例4化合物4的合成
步骤1酯化在氮气氛下将2.20g(6.70mmol)DHA溶于20ml二氯甲烷。加溶于20ml二氯甲烷的1.40g(6.78mmol)DCC，并在5分钟后加入1.90g(6.69mmol)得自根据实施例5的步骤1的缩酮保护的尿苷。再过5分钟后，将40mg DMAP加到此溶液。在无光的条件下完成反应。用20ml MTBE稀释所得的溶液，过滤，用10ml MTBE洗涤并浓缩。用柱色谱法纯化残余，使用己烷∶乙酸乙酯(2∶1)作为洗脱剂。得一种无色油。
产率3.15g(5.30mmol，79％th.)步骤2缩酮裂解将3.10g(5.21mmol)得自步骤1的缩酮保护的化合物4溶于125ml 80％乙酸，并加热至大约95℃。用TLC或HPLC法检测反应物。95℃下2小时后，大约90％的原料转化成化合物4。减压下除去乙酸，并将残余物溶于20ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO3溶液洗涤，用盐水洗涤两次，用Na2SO4干燥并浓缩。得到一种褐色油，通过柱色谱法将其纯化，使用二氯甲烷∶异丙醇(10∶1)作为洗脱剂。得到一种浅黄色和高粘性油。
产率1.20g(2.17mmol，42％th.)化合物4MS(m/z(％))555(2，37)M+；113(100)1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ＝0.98(t，3H)，2.05-2.12(m，2H)，2.40-2.45(m，4H)，2.80-2.89(m，1H)，3.52(d，1H)，4.13-4.16(m，1H)，4.25-4.32(m，2H)，4.36-4.44(m，2H)，5.15(d，1H)，5.29-5.47(m，12H)，5.75(d，1H)，5.82(d，1H)，7.62(d，1H)，10.10(s，1H)13C-NMR(100.6MHz；CDCl3)δ＝14.24，20.55，22.12，22.62，25.32，25.55，25.61，25.65，34.00，63.24，70.23，75.04，82.26，91.13，102.47，127.03，127.40，127.88，128.05，128.07，128.33，128.49，128.60，129.86，132.05，139.67，151.19，163.56，172.61实施例5化合物5的合成 步骤1缩酮化在氮气氛下将27.7g尿苷溶于250ml无水丙酮和11.8g 2，2-二甲氧基丙烷。加入0.3ml浓硫酸后，室温下将反应混合物搅拌大约20小时。在此期间形成大量的细沉淀。过滤后用在80ml二氯甲烷中的2ml三乙胺处理残余溶，然后进行充分洗涤。
产率21.9g(77.0mmol，68％th)熔点159-160℃还可通过以下方法增加产率将丙酮的体积减少大约三分之一，加入庚烷作为抗溶剂(anti-solvent)，并在过滤前将混合物冷却至0-5℃。可以获得80-85％的产率范围。
由于成本的原因，已证明可以用水含量为0.1％(w/w)的大量丙酮代替无水丙酮同时不影响产率。
步骤2酯化在氮气氛下将4.00g DL-α-硫辛酸溶于50ml二氯甲烷，并加入溶于70ml二氯甲烷中的4.00g DCC(二环己基碳化二亚胺)。5分钟后，将得自步骤1的5.51g缩酮加到溶液，并经另外5分钟后加入150mg DMAP(二甲基氨基吡啶)。室温下将溶液搅拌过夜，用100mlMTBE(甲基叔丁基醚)稀释并过滤。真空下除去溶剂，并用硅胶柱色谱法纯化残余的油，使用己烷∶乙酸乙酯(1∶2)作为洗脱剂。到一种黄色粘油。
产率8.06g(17.1mmol，88％th)步骤2反应还可以在乙酸乙酯中完成，它的优点在于反应产物可以不经纯化而直接经历步骤3的反应条件。将反应物于室温搅拌过夜，然后用含水的10％柠檬酸洗液将微过量的DCC水解成DCU(二环己基脲)，并用NaHCO3水溶液洗涤而容易地除去过量的DL-α-硫辛酸。在过滤处理过程中除去DCU。产率根据规模和溶剂而在50和90％之间。
除了DCC/DMP之外，还已试验新戊酰氯/DMAP作为有效的偶联剂。可以使用溶剂如甲苯或醚如THF或二烷代替二氯甲烷。可以使用N，N’-羰基二咪唑或氯甲酸异丁酯代替DCC。
步骤3脱保护在300ml乙酸中在大约95℃的温度下将11.7g得自步骤2的缩酮保护的化合物5搅拌5.5小时。然后在真空下除去乙酸，并将残余物再溶于150ml乙酸乙酯。每次用70ml饱和NaHCO3将该溶液洗涤两次，然后每次用100ml饱和NaCl溶液洗涤两次。用Na2SO4干燥溶液，并使溶剂几乎被完全除去(应该避免浓缩至干)。将灰色残余物再溶于150ml乙酸乙酯，并任选用超声波处理2-3分钟，同时形成黄色沉淀。过滤分离沉淀(化合物5)，用乙酸乙酯洗涤并干燥。除了乙酸乙酯之外，还已试验n-BuOH、甲苯、1-戊醇、乙腈或这些溶剂的混合物作为可选择的沉淀溶剂。
产率7.42g(17.2mmol，69％th)化合物5熔点95-97℃纯度＞98％(HPLC)MS(m/z(％))432(7.9)M+，113(100)1H-NMR(400MHz，d4-甲醇)δ＝1.41-1.50(m，2H)，1.57-1.72(m，4H)，1.82-1.90(m，1H)，2.37-2.47(m，3H)，3.04-3.18(m，2H)，3.51-3.57(m，1H)，4.06-4.19(m，3H)，4.29-4.37(m，2H)，5.71(d，1H)，5.80(d，1H)，7.66(d，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，d4-甲醇)δ＝25.7，29.7，34.7，35.7，39.3，41.3，57.5，64.6，71.2，75.2，82.9，91.8，102.9，142.3，152.2，166.0，174.8实施例6化合物S-5的合成根据实施例5所列的反应方法合成化合物S-5。使用对映异构物纯的S-α-硫辛酸代替DL-α-硫辛酸。
化合物S-5
熔点109-110℃1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30-1.40(m，2H)，1.47-1.56(m，3H)，1.59-1.68(m，1H)，1.77-1.87(m，1H)，2.30-2.40(m，3H)，3.04-3.18(m，2H)，3.53-3.60(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.02-4.06(m，1H)，4.13-4.23(m，2H)，5.21(d，1H)，5.40(d，1H)，5.62(d，1H)，5.71(d，1H)，7.57(d，1H)。
实施例7化合物R-5的合成根据如实施例5所列的反应方法合成化合物R-5。使用对映异构纯R-α-硫辛酸代替DL-α-硫辛酸。
化合物R-5熔点88-89℃1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30-1.40(m，2H)，1.47-1.56(m，3H)，1.59-1.68(m，1H)，1.79-1.86(m，1H)，2.30-2.41(m，3H)，3.04-3.17(m，2H)，3.53-3.60(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.02-4.06(m，1H)，4.13-4.24(m，2H)，5.21(d，1H)，5.40(d，1H)，5.62(d，1H)，5.71(d，1H)，7.58(d，1H)，11.27(s，1H)。
实施例8化合物5’的合成 在惰性下将2.28g(5.27mmol)化合物5溶于40ml甲醇。将溶液冷却至0℃，并在15分钟内分小部分加入2.50g(66.1mmol)硼氢化钠。在NaBH4加入期间，黄色溶液变成无色。在完成硼氢化钠的加入之后，将溶液搅拌45分钟，用50ml水稀释，并用浓HCl酸化至pH＝1。加入50ml氯仿并分离有机层，用10ml盐水洗涤二次，用Na2SO4干燥并浓缩。纯化后得到化合物5’，为无色油。
产率1.63g(3.75mmol，71％th.)化合物5MS(m/z(％))401(18.0)M+-H2S；113(100)1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30-1.79(m，7H)，1.32-1.43(m，2H)，1.85-1.94(m，1H)，2.33-2.40(m，2H)，2.61-2.76(m，2H)，2.88-2.96(m，1H)，4.15(s，br.，1H)，4.26(s，br.，2H)，4.32-4.42(m，2H)，5.75(d，1H)，5.83(d，1H)，7.58(d，1H)，10.32(s，br.，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，d6-DMSO)δ＝25.7，29.7，34.7，35.7，39.3，41.3，57.5，64.6，71.2，75.2，82.9，91.8，102.9，142.3，152.2，166.0，174.8实施例9糖尿病和多神经病用于测定本发明合物对治疗糖尿病和/或多神经病的效果的模型括用体外海马切片检测由于葡萄糖浓度升高引起的锥体细胞的过敏性。可通过使用通式(I)的化合物剂量依赖地对抗该过敏性。
大鼠的海马切片提供一种用于测定与神经组织直接接触的药物之间相互作用的有效模型。可以直接测定药学活性化合物和脑组织之间的相互作用，因为在体外海马切片内保留了三维组织结构。该化合物作用于特定的神经细胞群，海马的锥体细胞。已知锥体细胞和Schaffer侧支(其可以被电刺激)之间的突触将神经递质谷氨酸盐用于信号转导的过程。电刺激的结果，所谓的群峰，代表活化的锥体细胞的数量。其它已知的模型允许仅在至多8小时的时间范围内测定神经网络。这种模型的优点是可以在化学或电刺激细胞之后更长时间体外分析神经网络。给细胞带来高刺激水平，从而允许在病理-生理条件下对药理学活性化合物进行长期测定(W.Dimpfel等人，Antimicrobial Agents and Chemotherapy 1991，1142-1146；W.Dimpfel等人，Eur.J.Med.Res.1996，1，523-527)。
材料和方法在本发明的方法中，利用在超熔融介质中的高浓度葡萄糖提高刺激水平，以测定本发明化合物对抗效果。由于事实上α-硫辛酸已被应用于此方法(W.Dimpfel等人，Eur.J.Med.Res.1996，1，523-527)，选择化合物5’作为密切相关的化合物，以在将α-硫辛酸和尿苷与化合物5’比较时产生合理的结果。因此，将α硫辛酸和尿苷选作参考。
在本研究中使用21只成年雄性CD大鼠。在将试验动物麻醉和放血之后分离海马。通过在磷酸盐缓冲的盐水(NaCl124mM，KCl5mM，CaCl22mM，MgSO42mM，NaH2PO41.25mM，NaHCO326mM，葡萄糖10mM；对照溶液ACSF；Carl Roth，卡尔斯鲁厄，德国)中的胶水固定海马的中间部分。然后通过振动球磨机(RhemaLabortechnik)将海马切成400μM的切片。将海马切片保存至少1小时，然后在温育室中在碳合气(carbogen)下进行试验(S.J.SchiffG.G.Somjen，Brain Research1985，345，279-284)。
本实验在所谓的“含Haas Top的碱性单元”(Medical SystemCorporation，U.S.A.)中，在35℃的温度下，根据H.L.Haas和R.W.Greene的方案完成实验(Neurotransmitter and corticalfunction；ed.M.Avoli，T.A.Reader，R.W.Dykes and P.Gloor，pp.483-494，Plenum Publishing Corp.)。将海马切片放置在一片纱布上，并通过蠕动泵进行灌注。用碳合气(carbogen)冲洗试验容器(流速200ml/小时)以保持必需的氧供应。
通过刺激发生器(laboratory computer，Pro Science)和双极性同心钢电极(Rhodes Medical Systems，U.S.A.)刺激CA2-区域。使用200μs的脉冲宽度，并将安培数恒定地保持在200μA。刺激发生器释放四种间隔20秒的单一刺激信号，从而释放总共为4个海马切片的群峰。计算四个峰振幅的平均值。
结果前述关于α-硫辛酸能够对抗由葡萄糖浓度增加引起的过敏的发现是可以再现的(W.Dimpfel等人，Eur.J.Med.Res.1996，1，523-527)。而且，尿苷用作第二参考物。与大约1mV的最初值相比，群峰形式的海马锥体细胞的电响应在30mM葡萄糖存在期间增加大约160％。所有这些物质，α-硫辛酸、尿苷和化合物5’能够剂量依赖地降低升高的刺激水平。
可以理解化合物5’的活性范围在1-25μM，而对于尿苷该浓度范围延伸至大约100μM。α-硫辛酸在最高400μM的浓度下表现出接近线性的效果。因此，化合物5’的计算的IC50值为5μM，尿苷为40μM，而α-硫辛酸的IC50值大约为200μM。
化合物5’与α-硫辛酸和尿苷对葡萄糖诱导的过敏性的提高的作用的直接比较可以通过使用上述的模型来完成。海马锥体细胞过敏水平的提高可能被化合物5’最有效地治疗，而尿苷和α-硫辛酸仅表现出较弱的效果。
因此，可以强调化合物5’能够显著地降低升高的过敏性，因而通式(I)的化合物可以用作治疗糖尿病和多神经病的药学上有效的试剂。
实施例10糖尿病和多神经病根据实施例9所列的方法和模型，还测试了S-5和R-5，并将试验结果与尿苷和α-硫辛酸的结果比较。
作为对电刺激的响应，测定了活化的锥体细胞的群峰。群峰的振幅代表活化的锥体细胞的数量。与大约1mV的最初值相比，群峰形式的海马锥体细胞的电响应在30mM葡萄糖存在期间增加大约160％-170％。以μV为单位测定群峰的振幅并计算至少三个测定的振幅的平均值。
可以理解，化合物R-5的活性范围为1-15μM，而化合物S-5的活性范围为1-10μM。如上述，尿苷在1-100μM的浓度范围内表现出活性，而α-硫辛酸在最高400μM的浓度下表现出接近线性的效果。化合物S-5的IC50的计算值为4μM，R-5的IC50的计算值为8μM，尿苷的IC50的计算值为40μM，而α-硫辛酸的IC50的计算值大约为200μM。
IC50值的范围为4-8μM的化合物5’、S-5和R-5的效果与α-硫辛酸(IC50值＝200uM)和尿苷(IC50值＝40uM)对葡萄糖导致的过敏性的提高的效果的比较可以使用上述模型完成。该比较证明本发明的化合物能够以非常类似的方式降低海马锥体细胞的升高的过敏水平，而尿苷和α-硫辛酸表现出非常弱的效果。
因此，可以认为本发明的化合物能够显著地降低锥体细胞的过敏性，因而是治疗糖尿病和多神经病的药学有效试剂。
实施例11神经保护作用本实施例证明，本发明的化合物表现出神经保护效力。α-硫辛酸的神经保护作用和二氢硫辛酸的更为显著的神经保护作用是已知的(P.Wolz，J.Krieglstein，Lipoic acid in Health and Disease，NewYork，Basel，Hong Kong，Marcel Dekker Inc.，1997，pp.205-225)。因此，由于对照的原因选择二氢硫辛酸作为阳性对照。与本发明的二氢硫辛酸最类似的化合物是化合物5’。使用下述的小鼠模型以检验化合物5’与二氢硫辛酸和未处理的小鼠，即仅用载体但不用任何活性成分处理的小鼠相比的剂量依赖的神经保护作用。
材料和方法小鼠的永久性病灶大脑缺血根据Welsh等人所述的方法用雄性NMRI小鼠(12-17只动物/组)完成永久性中脑动脉闭塞(J.Neurochem.1987，846-851)。简言之，在用三溴乙醇(600mg/kg腹膜内)麻醉后，在头颅上钻小洞以暴露中脑动脉。中脑动脉的茎和两侧支被电凝法永久性地闭塞。在外科手术过程中用加热灯将体温保持在37℃±1℃。然后，将小鼠在30℃的环境温度下保持2小时，然后进行MCA闭塞。
关于组织学评价，在中脑动脉闭塞之后2天再次用三溴乙醇麻醉小鼠，并用1.5％的中性红溶液(0.5ml)进行腹膜内灌注。移出脑并将其在固定剂(4％在磷酸盐缓冲液中的福尔马林，pH7.4)中保持24小时。
在这个小鼠病灶性大脑局部缺血模型中，仅发现皮质组织梗塞，而且梗塞体积与梗塞表面相关(C.BackhauR等人，J.Pharmacol.Methods 1992，27，27-32)。根据C.BackhauR的公开，通过成像分析系统(Kontron，Eching，Germany)确定不被中性红染色的脑表面组织(以平方毫米为单位)为梗塞表面积。
在MCA闭塞前1小时在腹膜内完成化合物5’、二氢硫辛酸和仅有的载体的注射。将化合物5’和二氢硫辛酸溶于25％macrogol 400(载体)。注射体积总是0.25-0.30ml/小鼠。使用剂量为100、150和500mg/kg的化合物5’和150mg/kg的二氢硫辛酸。对照组只接受载体(0.25-0.30ml 25％macrogol 400/小鼠)。
结果结果表示为平均值±SD(标准偏差)。根据ANOVA和DUNCAN检验对化合物5’处理、二氢硫辛酸处理和载体处理的动物之间的差别进行统计学评价。
在第一系列的实验中，可以证明当给药浓度为在0.25-0.30ml的载体中的100mg时，化合物5’显著降低小鼠脑表面的梗塞面积(参见表6)。
表6化合物5’和二氢硫辛酸对NMRI小鼠的永久性MCA闭塞之后的梗塞面积的影响
这种作用并不是清楚地是剂量依赖的，因为似乎随着化合物5’剂量的增大作用减小。因此，预计20mg/kg-100mg/kg化合物5’/小鼠之间的某浓度达到最大神经保护作用。这种结果表明低剂量的本发明化合物可以用于实现脑梗塞面积的显著减小。
与对照组相比，用500mg/kg化合物5’处理的小鼠而得到的梗塞面积的平均值不再发生统计学上的减小。最低剂量的化合物5’的作用似乎是最显著的，并在较高浓度的化合物5’处观察到神经保护作用的减小。浓度为500mg/kg的化合物5’仅检测到轻微的神经保护作用，而二氢硫辛酸根本不表现出效果，并在此研究中没有减小梗塞面积。
上述的结果清楚地证明化合物5’的神经保护作用。此外，本发明描述了在低浓度下获得最大神经保护作用的有利发现。因此，已证明本发明的化合物可以用作抗局部缺血药，以用于治疗中风。而且，在应用于上述方法的小鼠中没有检测到毒性作用。
实施例12神经保护作用选择本实施例以测定本发明的化合物对Wistar大鼠的黑质和纹状体中的多巴胺、它的代谢产物3，4-二羟基苯基乙酸(DOPAC)和5-羟基色胺(5-HT或血清素)和它的代谢产物5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的浓度的影响(Charles River，Sulzbach Rosenberg)。
选择所述的两个脑区域以检查多巴胺能神经元，因为已知该神经元对可能导致帕金森氏病、阿耳茨海默氏病和亨廷顿氏舞蹈病的神经毒素敏感。下述的方法用于确定变性过程。丙二酸钠用作该方法中的神经毒性物质。
材料和方法已知丙二酸钠增加试验动物的纹状体中的von多巴胺。六只Wistar大鼠的小组中的每组已被用作试验动物。因此，可以将多巴胺浓度用作指示剂，以确定神经毒素的有害作用。
将100mg化合物5’溶于5ml 50％丙烷-1，2-二醇(Merck，Da0rmstadt)。将四份5ml份化合物5’腹膜内施用于试验动物。第一部分在第一天试验的晚上施用，第二部分在第二天早上施用，第三部在第二次试验日的晚上施用，而最后部分在第三试验日的早上施用。在最后应用化合物5’之后30分钟，在麻醉大鼠之后(Ketamin80mg/kg和Xylasin6-10mg/kg)通过精密泵(流速0.5μl/分)将溶于生理氯化钠溶液的2μmol丙二酸钠注射到左纹状体。
在应用丙二酸钠后4天，分别切除纹状体和黑质的处理与未处理的部分，称重、与高氯酸一起均化，并离心。然后使等分试样的上清液经历HPLC，并通过HPLC-ELCD比色测定多巴胺、DOPAC，5-HT，5-HIAA和3-甲氧基酪胺的数量。
结果应用丙二酸钠导致多巴胺和它的代谢产物HVA和DOPAC减少。丙二酸神经毒素降低多巴胺(-44％，p＜0.001)和DOPAC(-30％，p＜0.001)的浓度。
化合物5’能够增加纹状体中的多巴胺(+18％，p＜0.05)和DOPAC(+10％，p＜0.05)的浓度。而且，可以证明将丙二酸盐与化合物5’一起应用不导致多巴胺和DOPAC浓度的显著降低。化合物5’的其它应用补偿丙二酸盐作用(+44％更多的多巴胺，与仅应用丙二酸盐相比)(参见图4)。
而且，可以表明化合物5’的给药大大增加5-HT和它的代谢产物5-HIAA的水平(参见图5a和5b)。在5-HT和5-HIAA水平降低的情况下，施用化合物5’能够显著地将5-HT和5-HIAA水平增加至正常值。因此，施用化合物5’补偿或超补偿对5-HT和5-HIAA水平的减小作用。
以上展示的结果证明化合物5’的神经保护作用。有用的发现表明化合物5’能够补偿神经毒素的有害作用，并能够增加5-HT和5-HIAA水平。因此，已证明本发明的化合物可以用作药物，以治疗帕金森氏病、阿耳茨海默氏病、亨廷顿氏舞蹈病或抑郁。
权利要求
1.包含以下组分的药物组合至少一种选自包括以下的组的脂肪酸亚油酸、γ-亚麻酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16-二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸、α-亚麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17-二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、油硬脂酸、十八碳三烯酸、梓树酸、二十二碳七烯酸、taxoleic酸、皮诺敛酸、sciadonic酸、视黄酸、异棕榈酸、降植烷酸、植烷酸、11，12-亚甲基十八烷酸、9，10-亚甲基十六烷酸、coronaric酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、塔里酸、santalbic酸、硬脂炔酸、6，9-十八碳炔酸、三聚氰酸、还阳参油酸、heisteric酸、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸、ETYA、脑酮酸、羟基神经酸、蓖麻油酸、lesquerolic酸、十三烷二酸、十六碳二酸和/或亚油酸C1-C7烷基酯、γ-亚麻酸C1-C7烷基酯、二高-γ-亚麻酸C1-C7烷基酯、花生四烯酸C1-C7烷基酯、7，10，13，16-二十二碳四烯酸C1-C7烷基酯、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸C1-C7烷基酯、α-亚麻酸C1-C7烷基酯、十八碳四烯酸C1-C7烷基酯、8，11，14，17-二十碳四烯酸C1-C7烷基酯、EPAC1-C7烷基酯、DPA C1-C7烷基酯、DHA C1-C7烷基酯、Mead酸C1-C7烷基酯、油硬脂酸C1-C7烷基酯、十八碳三烯酸C1-C7烷基酯、梓树酸C1-C7烷基酯、二十二碳七烯酸C1-C7烷基酯、taxoleic酸C1-C7烷基酯、皮诺敛酸C1-C7烷基酯、sciadonic酸C1-C7烷基酯、视黄酸C1-C7烷基酯、异棕榈酸C1-C7烷基酯、降植烷酸C1-C7烷基酯、植烷酸C1-C7烷基酯、11，12亚甲基十八烷酸C1-C7烷基酯、9，10亚甲基十六烷酸C1-C7烷基酯、coronaric酸C1-C7烷基酯、(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6、8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、塔里酸C1-C7烷基酯、santalbic酸C1-C7烷基酯、硬脂炔酸C1-C7烷基酯、6，9-十八碳炔酸C1-C7烷基酯、三聚氰酸C1-C7烷基酯、还阳参油酸C1-C7烷基酯、heisteric酸C1-C7烷基酯、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸C1-C7烷基酯、ETYA C1-C7烷基酯、脑酮酸C1-C7烷基酯、羟基神经酸C1-C7烷基酯、蓖麻油酸C1-C7烷基酯、lesquerolic酸C1-C7烷基酯、十三烷二酸C1-C7烷基酯、十六碳二酸C1-C7烷基酯，和至少一种选自包括以下的组的核苷和/或核苷酸化合物尿苷、脱氧尿苷、尿苷一磷酸、脱氧尿苷一磷酸和/或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1的药物组合，所述组合物还包含适宜的药学上可接受的载体、赋形剂、助剂和/或稀释剂。
3.根据权利要求1或2的药物组合，其中所述脂肪酸选自包括以下的组(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)硫辛酸、(R，S)-6、8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、γ-亚麻酸、α-亚麻酸、EPA、DHA和/或其药学上可接受的盐和/或(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、γ-亚麻酸C1-C7烷基酯、α-亚麻酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯和/或DHA C1-C7烷基酯。
4.根据权利要求3的药物组合，其中所述肪肪酸为(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸和/或(S)-6，8-二噻烷辛酸和/或其药学上可接受的盐和/或(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯和/或(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯。
5.根据权利要求1-4之任一项的药物组合，其中该药物组合适于通过静脉内、腹膜内、肌内、皮下、粘膜与皮肤、口、直肠、透皮、局部、真皮内、胃内、皮内、阴道内、血管内、鼻内、颊内、经皮、舌下或吸入给药。
6.根据权利要求1-5之任一项的药物组合用作兴奋药和/或用于预防和/或治疗以下疾病的用途I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛、和/或逆转录病毒感染(HIV，AIDS)，包括机会感染。
7.根据权利要求1-5之任一项的药物组合用于制备用作兴奋药和/或用于预防和/或治疗以下疾病的药剂的用途I型和II型糖尿病、炎症、癌、坏死、胃溃疡、神经变性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神经病、神经性疼痛和多神经病、外周和/或中枢神经病、外周和/或中枢神经系统退化、重金属中毒、局部缺血病和局部缺血性心脏病、肝病和肝功能异常、变态反应、心血管疾病、衣原体肺炎、抑郁、肥胖、中风、疼痛、和/或逆转录病毒感染(HIV，AIDS)、包括机会感染。
8.包含权利要求1-5之任一项的药物组合的药物组合物，其中各药学活性化合物的日给药剂量所对应的有效浓度范围为1-15000mg。
9.包含权利要求8的药物组合的药物组合物，其中各药学活性化合物的日给药剂量所对应的有效浓度范围为1-5000mg。
10.包含权利要求9的药物组合的药物组合物，其中备药学活性化合物的日给药剂量所对应的有效浓度范围为100-1000mg。
11.包含权利要求1-5之任一项的药物组合的药物组合物，其中该药物组合与其它治疗化合物联合给药。
12.包含权利要求11的药物组合的药物组合物，其中该其它治疗化合物选自包括以下的组维生素和抗逆转录病毒药物。
13.包含权利要求12的药物组合的药物组合物，其中该维生素为维生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其药学上可接受的盐。
14.包含权利要求1-5之任一项的药物组合的药物组合物，其中所述药物组合物通过静脉内、腹膜内、肌内、皮下、粘膜与皮肤、口、直肠、透皮、局部、真皮内、胃内、皮内、阴道内、血管内、鼻内、颊内、经皮、舌下或吸入给药。
全文摘要
本发明涉及新的通式(I)的尿苷酯，其中R代表羧酸残基，优选脂肪酸残基，而R’代表氢或羟基，它们作为抗各种疾病的药学活性试剂的用途，该尿苷酯的制备方法和含有至少一种尿苷酯作为活性成分的药物组合物。本发明还涉及一种包含游离脂肪酸和/或脂肪酸酯和尿苷、脱氧尿苷、尿苷一磷酸和/或脱氧尿苷一磷酸的药物组合，并涉及这种药物组合的用途。
文档编号A61P25/16GK1839873SQ200610007050
公开日2006年10月4日 申请日期2002年4月29日 优先权日2001年4月30日
发明者R·苏斯罗 申请人:特罗姆斯多弗药剂股份有限公司及两合公司