一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法

文档序号:1073168阅读:712来源:国知局
专利名称:一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法
技术领域
本发明涉及植物有效部位提取技术领域,具体涉及一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法。
背景技术
中药粉防己在中国应用已有上千年的历史,粉坊己(又称汉防己)是防己科千金藤属植物(Stephania tetrandra S.Moore)的干燥根切片,其根种主要有效成分为汉防己碱(汉防己甲素,tetrandrine)和汉防己诺林碱(汉防己乙素,fangehinoline)、汉防己丙素,此外还含有黄酮甙、酚类、有机酸、挥发油等。研究表明汉防己碱、汉防己诺林碱具有镇痛、消炎、降压、抗肿瘤、松弛横纹肌等作用,近年来研究发现汉防己碱还具有抗心律失常的作用。目前从粉防己根中提取汉防己甲素和汉防己乙素(fangehinoline)的方法多采用下面的工艺醇提取后用碱调PH10,再用氯仿萃取、浓缩,浓缩膏经柱层析分离,乙醇、丙酮结晶,现有工艺存在的问题是1、工艺复杂工艺步骤多、操作难度大,而且采用同一条工艺路线不能同时得到两种成份;2、生产成本高工艺中溶剂种类多、要经柱层析、生产周期长,因此生产成本较高。

发明内容
本发明要克服现有技术存在的工艺复杂和生产成本高的问题。
为克服现有技术存在的问题,本发明的技术方案是一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,依次包括下述步骤(1)备料将合格原料粉碎或切片;(2)提取原料中加入原料重的6~10%的生石灰,然后用极性有机溶剂热回流提取提取,回收溶剂,浓缩液放置结晶,过滤后得沉淀;(3)结晶沉淀用丙酮热回流溶解,丙酮溶解液浓缩到适量放置结晶;(4)粗品制备结晶用冷苯溶解,得不溶物和苯溶解液,不溶物为汉防己乙素粗品,苯溶解液的浓缩膏为汉防己甲素粗品。
上述步骤还包括(5)纯化①不溶物用丙酮结晶得汉防己乙素;②苯溶解液的浓缩膏用丙酮结晶得汉防己甲素。
上述方案的优选方案是上述步骤(1)中粉碎料可通过16mm筛,不宜过细;切片时厚度小于1cm。
上述步骤(2)中极性有机溶剂的加入量为原料的3~5倍量,回流提取1.5~2h/次,提取数次;合并提取液,减压蒸馏浓缩至提取液体积的4~6%,溶剂回收重复利用,浓缩液在室温下放置12~15小时后过滤得沉淀,过滤液弃掉,沉淀烘干得粗品。
上述步骤(3)中将所得的烘干得粗品用粗品重3~4倍量的丙酮加热搅拌溶解数次,1~1.5小时/次,过滤得溶解液,合并溶解液,常压蒸馏浓缩至溶解液的15~18%,放置到室温结晶12~15小时,过滤得结晶,结晶烘干得结晶粗品;过滤液浓缩回收丙酮。
上述步骤(5)中①将汉防己乙素粗品烘干,用丙酮热回流溶解、过滤,溶解液室温下放置结晶12~15小时,过滤,得到汉防己乙素;②将汉防己甲素粗品烘干,用丙酮热回流溶解、过滤,溶解液室温下放置结晶12~15小时,过滤,得到汉防己甲素。
上述步骤(2)中,提取用水混溶的有机溶剂是指65~85%的甲醇、乙醇以及这两种溶剂的任意组合。
上述步骤(4)中的冷苯是指温度在10~15℃时的苯。
与现有技术相比,本发明的优点是1、本发明步骤简单本发明公艺流程简单,不需要柱层析,生产流程短,操作简单、可在同一工艺路线下同时得到两种产物;2、产品纯度高汉防己甲素的提取率可达97%;汉防己乙素的提取率可达98%。
3、生产成本低所得结晶过滤母液套用到第一次结晶,可提高回收率,减少丙酮消耗,有效降低成本;各步骤所用的回收溶剂可反复利用,从而降低生产成本,本发明适合工业化生产。
4、产物无毒性从此原料中所得的产品中不含有致肾毒性的马兜灵酸。
具体实施例方式以下实施例进一步对本发明进行详述,是有助于理解本发明内容。
实施例1一种汉防己甲素和汉防己乙素的提取分离方法,依次包括下述步骤(1)粉碎取600kg原料粉碎通过16mm筛,得粉碎料595kg。原料含量为粉防己甲素0.95%,粉防己乙素0.495%。
(2)提取取粉碎料500kg,投入提取罐中,并将40kg石灰粉逐渐随原料加入,然后加入2000kg浓度为70%的甲醇,热回流提取3次,1.5h/次,合并提取液5520kg,提取液减压蒸馏浓缩至260kg,放置室温,12小时后过滤得沉淀40kg,沉淀烘干得粗品18kg。
经高压液相(HPLC)检测得提取液中含有粉防己甲素5.24kg,粉防己乙素2.73kg,计算得提取率为92%;烘干粗品中含有粉防己甲素4.88kg,粉防己乙素2.38kg,计算得沉淀有效成分回收率分别为93%和87%。
(3)结晶沉淀烘干得粗品18kg,加入54kg丙酮,热回流搅拌溶解,共溶解3次,1小时/次,板框压滤,每次用30kg丙酮洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共220kg丙酮溶解液,常压蒸馏浓缩至36kg,静置降温到室温,放置15小时后离心过滤、烘干得结晶6.5kg。
经高压液相(HPLC)检测得粉防己甲素63.7%,粉防己乙素29.2%。计算得沉淀有效成分回收率分别为84.8%和82.8%。
(4)粗品制备烘干得结晶6.5kg加入20kg苯,在10~15℃条件下搅拌溶解,共溶解2次,1小时/次,板框压滤,每次用5kg苯洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共45kg苯溶解液和4kg苯不溶物。苯溶解液常压蒸馏浓缩得浓缩膏5kg,为粉防己甲素粗品,苯不溶物为粉防己乙素粗品。
粉防己乙素粗品烘干得2.1kg,经高压液相(HPLC)检测得粉防己甲素2.1%,粉防己乙素92%粉防己甲素粗品烘干得4.4kg,经高压液相(HPLC)检测得粉防己甲素93%,粉防己甲素1.7%。
(5)纯化①将汉防己乙素粗品烘干得2.1kg,用6.4kg丙酮热回流溶解1.5小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶24小时,过滤结晶烘干得1.75kg结晶产品,即为汉防己乙素。粉防己乙素收率为0.29%,含量为98%。
②将汉防己甲素粗品烘干得4.4kg,用13.2kg丙酮热回流溶解1.5小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶24小时,过滤结晶烘干得3.7g结晶产品,即为汉防己甲素。粉防己甲素收率为0.62%,含量为97%。
实施例2(1)粉碎取600kg原料粉碎通过16mm筛,得粉碎料590kg。原料含量为粉防己甲素0.95%,粉防己乙素0.495%。
(2)提取取粉碎料500kg,投入提取罐中,并将40kg石灰粉逐渐随原料加入,然后加入2000kg浓度为70%的乙醇,热回流提取3次,1.5h/次,合并提取液5650kg,提取液减压蒸馏浓缩至265kg,放置室温,12小时后过滤得沉淀44kg,沉淀烘干得粗品20kg。
经高压液相(HPLC)检测得提取液中含有粉防己甲素5.42kg,粉防己乙素2.97kg,计算得提取率为95%;烘干粗品中含有粉防己甲素4.93kg,粉防己乙素2.60kg,计算得沉淀有效成分回收率分别为91%和87.5%。
(3)结晶沉淀烘干得粗品20kg,加入60kg丙酮,热回流搅拌溶解,共溶解3次,1小时/次,板框压滤,每次用30kg丙酮洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共240kg丙酮溶解液,常压蒸馏浓缩至40kg,静置降温到室温,放置12小时后离心过滤、烘干得结晶6.7kg。
经高压液相(HPLC)检测得粉防己甲素64.1%,粉防己乙素31.1%。计算得沉淀有效成分回收率分别为87.1%和80%。
(4)粗品制备烘干得结晶6.7kg加入20kg苯,在10~15℃条件下搅拌溶解,共溶解2次,1小时/次,板框压滤,每次用5kg苯洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共45kg苯溶解液和4.7kg苯不溶物,苯溶解液常压蒸馏浓缩得到5kg浓缩膏,为粉防己甲素粗品,苯不溶物为粉防己乙素粗品。
分别真空烘干不溶物和浓缩膏烘干物。经高压液相(HPLC)检测得不溶物中粉防己甲素2.2%,粉防己乙素93%浓缩膏烘干物中粉防己甲素94%,粉防己乙素1.6%。
(5)纯化①将汉防己乙素粗品烘干得2.2kg,用6.6kg丙酮热回流溶解1.5小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶24小时,过滤结晶烘干得1.81kg结晶产品,即为汉防己乙素。粉防己乙素收率为0.31%,含量为98.1%。
②将汉防己甲素粗品烘干得4.5kg,用13.5kg丙酮热回流溶解1.5小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶24小时,过滤结晶烘干得3.75g结晶产品,即为汉防己甲素。粉防己甲素收率为0.625%,含量为97.1%。
实施例3(1)粉碎取600kg原料粉碎通过16mm筛,得粉碎料590kg。原料含量为粉防己甲素0.95%,粉防己乙素0.495%。
(2)提取取粉碎料500kg,投入提取罐中,并将50kg石灰粉逐渐随原料加入,然后加入1500kg浓度为80%的甲醇,热回流提取3次,2h/次,合并提取液4000kg提取液,提取液减压蒸馏浓缩至270kg,放置室温,12小时后过滤得沉淀41kg,沉淀烘干得粗品18.5kg。
经高压液相(HPLC)检测得提取液中含有粉防己甲素5.30kg,粉防己乙素2.70kg,计算得提取率为92.1%;烘干粗品中含有粉防己甲素4.89kg,粉防己乙素2.40kg,计算得沉淀有效成分回收率分别为93.2%和87.4%。
(3)结晶沉淀烘干得粗品16kg,加入55kg丙酮,热回流搅拌溶解,共溶解3次,1.5小时/次,板框压滤,每次用30kg丙酮洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共200kg丙酮溶解液,常压蒸馏浓缩至36kg,静置降温到室温,放置12小时后离心过滤、烘干得结晶6.48kg。
经高压液相(HPLC)检测得粉防己甲素63.8%,粉防己乙素29.5%。计算得沉淀有效成分回收率分别为85%和83%。
(4)粗品制备烘干得结晶6.5kg加入20kg甲苯,在10~15℃条件下搅拌溶解,共溶解2次,1.5小时/次,板框压滤,每次用5kg苯洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共47kg甲苯溶解液和4.6kg苯不溶物,苯溶解液常压蒸馏浓缩得到5.5kg浓缩膏,为粉防己甲素粗品,苯不溶物为粉防己乙素粗品。
经高压液相(HPLC)检测得不溶物中粉防己甲素2.6%,粉防己乙素92.3%浓缩膏烘干物中粉防己甲素92.9%,粉防己乙素1.9%。
(5)纯化①将汉防己乙素粗品烘干得2.13kg,用6.5kg丙酮热回流溶解1.5小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶28小时,过滤结晶烘干得1.74kg结晶产品,即为汉防己乙素。粉防己乙素收率为0.29%,含量为98.1%。
②将汉防己甲素粗品烘干得4.45kg,用13.5kg丙酮热回流溶解1.5小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶28小时,过滤结晶烘干得3.73g结晶产品,即为汉防己甲素。粉防己甲素收率为0.62%,含量为97.6%。
实施例4(1)粉碎取510kg原料切片,切片时厚度小于1cm,得粉碎料500kg。原料含量为粉防己甲素0.9%,粉防己乙素0.5%。
(2)提取取粉碎料500kg,投入提取罐中,并将30kg石灰粉逐渐随原料加入,然后加入原料1900kg浓度为80%的甲醇和600kg80%乙醇,热回流提取3次,1.5h/次,合并得7000kg提取液,提取液减压蒸馏浓缩至320kg,放置室温,15小时后过滤得沉淀34kg,沉淀烘干得粗品16.2kg。
经高压液相(HPLC)检测得提取液中含有粉防己甲素4.59kg,粉防己乙素2.42kg,计算得提取率为94%;烘干粗品中含有粉防己甲素4.23kg,粉防己乙素2.1kg,计算得沉淀有效成分回收率分别为95%和90%。
(3)第一次结晶沉淀烘干得粗品16.2kg,加入55kg丙酮,热回流搅拌溶解,共溶解3次,1小时/次,板框压滤,每次用30kg丙酮洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共220kg丙酮溶解液,常压蒸馏浓缩至33kg,静置降温到室温,放置15小时后离心过滤、烘干得结晶5.61kg。
经高压液相(HPLC)检测得粉防己甲素63.8%,粉防己乙素29.5%。计算得沉淀有效成分回收率分别为86.6%和84.6%。
(4)粗品制备烘干得结晶5.61kg加入20kg甲苯,在10~15℃条件下搅拌溶解,共溶解2次,1.3小时/次,板框压滤,每次用5kg苯洗涤过滤渣,合并溶解过滤液及洗涤液,共48kg甲苯溶解液和4.0kg甲苯不溶物,苯溶解液常压蒸馏浓缩得到4.5kg浓缩膏,为粉防己甲素粗品,苯不溶物为粉防己乙素粗品。
经高压液相(HPLC)检测得不溶物中粉防己甲素2.62%,粉防己乙素92.1%浓缩膏烘干物中粉防己甲素92.7%,粉防己乙素1.92%。
(5)纯化①将汉防己乙素粗品烘干得1.84kg,用6.25kg丙酮热回流溶解2小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶24小时,过滤结晶烘干得1.51kg结晶产品,即为汉防己乙素。粉防己乙素收率为0.30%,含量为98%。
②将汉防己甲素粗品烘干得3.74kg,用13kg丙酮热回流溶解2小时,溶解完后分别过滤,不溶物少量丙酮洗涤,分别合并洗涤液,溶解液放置室温,然后结晶24小时,过滤结晶烘干得3.23g结晶产品,即为汉防己甲素。粉防己甲素收率为0.63%,含量为97.8%。
权利要求
1.一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,依次包括下述步骤,(1)备料将合格原料粉碎或切片;(2)提取原料中加入原料重的6~10%的生石灰,然后用极性有机溶剂热回流提取提取,回收溶剂,浓缩液放置结晶,过滤后得沉淀;(3)结晶沉淀用丙酮热回流溶解,丙酮溶解液浓缩到适量放置结晶;(4)粗品制备结晶用冷苯溶解,得不溶物和苯溶解液,不溶物为汉防己乙素粗品,苯溶解液的浓缩膏为汉防己甲素粗品。
2.如权利要求1所述的一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,其特征在于所述步骤还包括(5)纯化,①不溶物用丙酮结晶得汉防己乙素;②苯溶解液的浓缩膏用丙酮结晶得汉防己甲素。
3.如权利要求1或2所述的一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,其特征在于所述步骤(1)中,粉碎料可通过16mm筛,不宜过细;切片时厚度小于1cm。
4.如权利要求3所述的一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,其特征在于所述步骤(2)中,极性有机溶剂的加入量为原料的3~5倍量,回流提取1.5~2h/次,提取数次;合并提取液,减压蒸馏浓缩至提取液体积的4~6%,溶剂回收重复利用,浓缩液在室温下放置12~15小时后过滤得沉淀,过滤液弃掉,沉淀烘干得粗品。
5.如权利要求4所述的一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,其特征在于所述步骤(3)中,将所得的烘干得粗品用粗品重3~4倍量的丙酮加热搅拌溶解数次,1~1.5小时/次,过滤得溶解液,合并溶解液,常压蒸馏浓缩至溶解液的15~18%,放置到室温结晶12~15小时,过滤得结晶,结晶烘干得结晶粗品;过滤液浓缩回收丙酮。
6.如权利要求5所述的一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,其特征在于所述步骤(5)中,①将汉防己乙素粗品烘干,用丙酮热回流溶解、过滤,溶解液室温下放置结晶12~15小时,过滤,得到汉防己乙素;②将汉防己甲素粗品烘干,用丙酮热回流溶解、过滤,溶解液室温下放置结晶12~15小时,过滤,得到汉防己甲素。
7.如权利要求6所述的一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,其特征在于所述步骤(2)中,提取用水混溶的有机溶剂是指65~85%的甲醇、乙醇以及这两种溶剂的任意组合。
8.如权利要求7所述的一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,其特征在于所述步骤(4)中的冷苯是指温度在10~15℃时的苯。
全文摘要
本发明涉及植物有效部位提取技术领域,具体涉及一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法。本发明要克服现有技术存在的工艺复杂和生产成本高的问题。为克服现有技术存在的问题,本发明的技术方案是一种汉防己甲素和汉防己乙素的制备方法,依次包括下述步骤(1)备料将合格原料粉碎或切片;(2)提取原料中加入原料重的6~10%的生石灰,然后用极性有机溶剂热回流提取提取,回收溶剂,浓缩液放置结晶,过滤后得沉淀;(3)结晶沉淀用丙酮热回流溶解,丙酮溶解液浓缩到适量放置结晶;(4)粗品制备结晶用冷苯溶解,得不溶物和苯溶解液,不溶物为汉防己乙素粗品,苯溶解液的浓缩膏为汉防己甲素粗品。
文档编号A61K36/185GK1903856SQ200610104459
公开日2007年1月31日 申请日期2006年8月3日 优先权日2006年8月3日
发明者胡洪来 申请人:西安皓天生物工程技术有限责任公司
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