专利名称：治疗冠心病的脉平药物制剂及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
本发明是一种治疗冠心病的脉平药物制剂及其制备方法和质量控制方法，属于中药的技术领域。
背景技术：
冠心病由于其发病率高，死亡率高，严重危害着人类的身体健康，从而被称作是“人类的第一杀手”，冠心病的发病随年龄的增长而增高，程度也随年龄的增长而加重。脉平制剂为活血化瘀类药物，用于瘀血闭阻的胸痹、心痛病，症见胸闷，胸痛，心悸，舌暗或有瘀斑等，以及冠心病、心绞痛见上述症状者。但是上市产品只有片剂，在制备片剂的过程中需要经过压缩才能成型，崩解较慢，在人体内的溶出度较低；而冠心病心绞痛属于急重症，这个问题在很大程度上影响了产品的质量，导致产品的疗效有待提高。更重要的是，要使该制剂达到满意疗效，并能规范生产管理，以及对其做进一步研究与更新发展，首先该制剂要有稳定可控的质量。而现有脉平制剂的质量控制方法较为粗略，难以达到现代药物质量稳定可控的要求。因此，需要研究脉平制剂质量控制的新方法。鉴于这些情况，为了提高药物的生物利用度，需要寻找一种治疗效果理想、质量稳定、剂型合理的有效治疗药物制剂来丰富剂型品种、满足市场需要。并且为了更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，需要深入研究控制该药物制剂质量的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗冠心病的脉平药物制剂及其制备方法和质量控制方法，本发明制备的胶囊，口服给药后，相对于片剂崩解快，崩解时限易控制，囊壳破裂后，药物迅速分散，故药物释放溶出快，显效迅速，生物利用度高；可掩盖不适的苦味，利于服用；不透光胶囊与较好的包装材料可使药物不受湿气和空气中氧、光线的影响，从而提高药物的稳定性；能简化生产工艺，降低成本；外观整洁美观，运输、储存、携带方便。本发明制备的微丸受食物输送节律的影响很小，药物吸收均匀而有规则，表面积增大可以提高药物与胃肠道的接触面积，使药物吸收完全，提高生物利用度，同时外形美观、流动性好、释药稳定、局部刺激性小，不易吸湿；本发明提供的软胶囊，起效快，生物利用度高。本发明提供的一种脉平制剂新的质量控制方法，向相关的生产、检验机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等；以便更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全有效。
本发明是这样构成的治疗冠心病的脉平药物制剂按照重量组分计算，它主要由银杏叶提取物12.5g、维生素C 12.5g、芦丁5g、何首乌1000g、当归500g或用相应重量份它们的提取物制作而成的注射液、粉针、冻干粉针、凝胶剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂或膜剂。
治疗冠心病的脉平药物制剂的制备方法取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁，然后分别制成胶囊剂、微丸剂或软胶囊剂。
所述制剂中的胶囊剂这样制备取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁及淀粉，混匀，装入胶囊，分装时应控制相对湿度在60％以下，即得。
所述制剂中的微丸剂这样制备取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度50℃时为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁，混匀，真空干燥，然后加入与药物比例为1∶1.5的MCC作为赋形剂，以95％乙醇为润湿剂，2％HPMC粘合，用离心造粒法制粒，主机转速为150r/min，粘合剂加入速度为15.0mL/min，然后干燥、灭菌，即得。
所述制剂中的软胶囊剂这样制备取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度50℃时为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁，混匀，真空干燥，按药物量∶基质量＝1∶1.2加入大豆油，混匀；胶皮的配方为明胶∶甘油∶水∶二氧化钛＝100g∶44g∶100g∶2g，配料化胶条件为称量配料，投入化胶罐中，冷浸30分钟后逐渐升温至65±5℃，搅拌5小时并同时抽真空除气泡，待胶料均匀后放料，滤过后装入胶囊机之胶料桶中；调试压丸机，明胶盒温控65℃，喷体温控40℃，滚模转速2.0，胶皮厚度0.6mm，室内温度18～25℃，相对湿度＜40％，压丸；干燥采用滚动定型干燥与托盘干燥两步结合，滚动定型干燥2小时，干燥温度22℃，干燥相对湿度应低于40％，干燥时间在24～48小时，即得。
治疗冠心病的脉平药物制剂的质量控制方法该方法包括以下全部或部分内容(1)银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、维生素C、芦丁、何首乌药材、大黄素、大黄素甲醚、当归药材、阿魏酸中全部或部分成分的鉴别测试方法；(2)总黄酮醇苷、萜类内酯、维生素C、芦丁、阿魏酸、总黄酮中全部或部分成分的含量测试方法。
所述制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a.制剂中银杏叶提取物的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加正丁醇或丙酮提取，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇或甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取银杏叶提取物适量，加乙醇或甲醇使溶解，作为对照提取物溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯或甲酸乙酯-丁酮或丙酮-甲醇或乙醇-水＝5～50∶3～30∶1～10∶1～10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.3～30％的三氯化铝溶液，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b.制剂中银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇提取，作为供试品溶液；或将甲醇提取液蒸干，残渣加稀酸使溶解，用乙酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液蒸干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；取银杏叶提取物，同法制成对照提取物溶液；或另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品中的一种或几种制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液中的一种与对照溶液中的一种或几种，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以甲苯或苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-丙酮或丁酮-甲醇或乙醇＝10～50∶5～25∶5～25∶0.6～3为展开剂，展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏后在140～160℃加热，放冷，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物或对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；c.制剂中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或几种的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，残渣加稀酸溶液使溶解，用乙酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液蒸干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品中的一种或几种，制成对照品溶液；采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水＝0.2～5∶15～55∶84～95为流动相；用蒸发光散射检测器检测；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；d.制剂中维生素C的化学鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加新煮沸过的冷开水适量与稀酸溶液适量，提取，滤过，取续滤液加入活性炭，加热至沸，滤过，滤液作为供试品溶液；供试品溶液中滴加数滴二氯靛粉钠试液，试液颜色消失；或供试液中加入硝酸银试液数滴，生成黑色沉淀；e.制剂中芦丁的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液作为供试品溶液。另取芦丁对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸-水＝8～40∶1～5∶1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；f.制剂中芦丁的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇处理，提取液作为供试品溶液；另取芦丁对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或盐酸＝8～65∶58～80∶0.05～5为流动相，检测波长为为190～410nm中的一个或几个；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；g.制剂中何首乌药材的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液作为供试品溶液；取何首乌对照药材，同法制备对照药材溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯-乙醇＝1～5∶1展开约5cm，取出，晾干，再以苯-乙醇＝2～10∶1展开约10cm，取出，晾干，置紫外光灯下检视，或喷以磷钼酸溶液，稍加热，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；h.制剂中大黄素、大黄素甲醚中一种或两种的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加一定酸性溶液超声提取，再加入三氯甲烷或二氯甲烷提取，合并三氯甲烷或二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇或乙醇使溶解，作为供试品溶液；再取大黄素对照品或大黄素甲醚对照品的一种或两种，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照品溶液中一种或两种，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以30～60℃的石油醚或60～90℃的石油醚或乙醚-甲酸乙酯或乙酸乙酯-甲酸或乙酸＝15～150∶3～30∶1～10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸汽中显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；i.制剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇处理，提取液作为供试品溶液。以大黄素对照品、大黄素甲醚对照品制备对照品溶液。照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水-磷酸或醋酸或盐酸溶液＝55～95∶33～60∶0.01～5为流动相；检测波长为为190～410nm中的一个或几个；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；j.制剂中当归药材、阿魏酸的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加碱性溶液超声处理，提取液用酸性溶液调节PH值2～3，再用乙醚或乙酸乙酯或三氯甲烷提取酸液，提取液挥干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；取当归药材，同法制成对照药材溶液；或取阿魏酸对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液或对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸＝4～20∶1～5∶0.1～1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材或对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；k.制剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇处理，提取液作为供试品溶液；以阿魏酸对照品配制对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈或甲醇-水-磷酸或醋酸或盐酸溶液＝6～50∶60～95∶0.07～5为流动相，检测波长为为190～410nm中的一个或几个；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
具体的说制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a.制剂中银杏叶提取物的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加正丁醇在水浴中温浸提取，提取液蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取银杏叶提取物，同法制备对照提取物溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水＝5∶3∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝溶液，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b.制剂中银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种几种的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液蒸干，残渣加稀盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取银杏叶提取物，同法制成对照提取物溶液；另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇＝10∶5∶5∶0.6为展开剂，展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏15分钟，在140～160℃加热30分钟，放冷，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；c.制剂中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或几种的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液蒸干，残渣加稀盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品中的一种或几种，分别制成对照品溶液。照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水＝1∶15∶84为流动相；用蒸发光散射检测器检测；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；d.制剂中维生素C的鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加新煮沸过的冷开水适量与稀醋酸溶液适量，提取，滤过，取续滤液加入活性炭，加热至沸，滤过，滤液作为供试品溶液；供试品溶液中滴加数滴二氯靛粉钠试液，试液颜色消失；供试液中加入硝酸银试液数滴，生成黑色沉淀；e.制剂中芦丁的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液。再取芦丁对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水＝8∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝试液，置365nm紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；f.制剂中芦丁的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液；以芦丁对照品的甲醇溶液为对照；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸＝37∶58∶5为流动相；检测波长为359nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；g.制剂中何首乌药材的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液。再取何首乌对照药材，同法制备对照药材溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和何首乌药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以苯-乙醇＝2∶1展开约5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇＝4∶1展开约10cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点；再喷以磷钼酸溶液，稍加热，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点；h.制剂中大黄素、大黄素甲醚的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加8％盐酸溶液超声提取，再加三氯甲烷加热回流，冷却，离心，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取2次，合并三氯甲烷液，室温挥干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；再取大黄素、大黄素甲醚对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，大黄素对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸＝15∶3∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸汽中显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；i.制剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别方法、取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液；以大黄素对照品、大黄素甲醚对照品的甲醇溶液为对照；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验；色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸＝67∶33∶0.25为流动相；检测波长为288nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
j.制剂中当归药材、阿魏酸的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加1％碳酸氢钠溶液超声提取，提取液用稀盐酸调节PH值2～3，再用乙醚提取酸液，提取液挥干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取当归药材，同法制成对照药材溶液；取阿魏酸对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取以上溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸＝4∶1∶0.1展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；k.制剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液；以阿魏酸对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验；色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸溶液＝17∶83∶0.07为流动相；检测波长为316nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
制剂的含量测定方法包括以下全部或部分内容a.制剂中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇适量，超声处理，取出，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液加入酸性溶液，回流，放冷，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；分别以槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水-磷酸或盐酸或醋酸溶液＝50～90∶50～90∶0.02～5为流动相，检测波长为190～410nm中的一个或几个；以外标一点法或标准曲线法，按照总黄酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量]*2.51计算，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含总黄酮苷不得低于16mg；b.制剂中萜类内酯含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，残渣加稀酸溶液使溶解，用乙酸乙酯或氯仿提取，反复洗涤，合并乙酸乙酯或氯仿液，蒸干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，正丙醇-四氢呋喃-水＝0.1～5∶10～55∶50～95为流动相，用蒸发光散射检测器或紫外检测器或示差折光检测器检测；以外标两点法对数方程计算，总萜类内酯的含量以白果内酯-C15H18O8、银杏内酯A-C20H24O9、银杏内酯B-C20H24O10、银杏内酯C-C20H24O11的总量计，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含萜类内酯不得低于4.0mg；
c.制剂中维生素C含量的滴定法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加新煮沸过的冷开水适量与稀酸溶液适量，提取，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，加入淀粉指示剂适量，用碘滴定液滴定至溶液显蓝色并30秒钟内不褪；每1ml的0.1mol/L碘滴定液相当于维生素C-C6H8O68.806mg；待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含维生素C-C6H8O6不得低于68mg；d.制剂中芦丁含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液适当稀适，用微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液；以芦丁对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或甲酸＝7～57∶38～90∶0～5为流动相，检测波长为190～410nm中的一个或几个；以外标一点法或标准曲线法计算，待测平脉制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含芦丁C27H30O16不得低于27mg；e.制剂中阿魏酸含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液；以阿魏酸对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈或甲醇-水-磷酸或盐酸或冰醋酸＝7～50∶50～90∶0.02～5为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；柱温20～50℃；以外标一点法或标准曲线法计算，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含阿魏酸C10H10O4不得低于0.8mg；f.制剂中总黄酮含量的分光光度法测定用芦丁对照品配制对照品溶液，并稀释成5或6个有梯度差别的浓度，取这些不同浓度的溶液各等份，以亚硝酸溶液-硝酸铝溶液-氢氧化钠溶液显色，作为标准溶液；或以三氯化铝溶液-醋酸铝溶液-乙醇溶液显色，作为标准溶液；以相应的溶液为空白；照中国药典公开的分光光度法试验，在300～600nm某一波长处测试标准溶液的吸收度，以吸收度为纵坐标、芦丁浓度为横坐标，绘制标准曲线；取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇或甲醇溶液或乙醇溶液提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液，量取供试品溶液，照芦丁对照品溶液显色方法显色，测试吸光度；用标准曲线法或外标一点或二点法计算，即得；待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂含总黄酮以芦丁C27H30O16计不得低于35mg。
具体的制剂的含量测定方法包括以下全部或部分内容a.制剂中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇适量，超声处理，取出，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液加入25％的盐酸溶液，回流30分钟，放冷，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；分别以槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品的甲醇溶液为对照；采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸＝50∶50∶0.2为流动相；检测波长为360nm；以外标一点法进行计算，总黄酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量]*2.51，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含总黄酮苷不得低于32mg。
b.制剂中萜类内酯含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加2％盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取数次，提取液用5％的醋酸钠溶液洗涤，洗涤液再用乙酸乙酯洗涤，乙酸乙酯提取液与洗涤液合并，水洗两次，合并水洗液，再用乙酸乙酯洗涤，合并乙酸乙酯溶液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液；采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水＝1∶15∶84为流动相；用蒸发光散射检测器检测；以外标两点法对数方程计算，总萜类内酯的含量以白果内酯C15H18O8、银杏内酯A C20H24O9、银杏内酯B C20H24O10、银杏内酯C C20H24O11的总量计，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含萜类内酯不得低于8mg；c.制剂中维生素C含量的滴定法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加新煮沸过的冷开水适量与稀醋酸适量，提取，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，加入淀粉指示剂适量，用0.1mol/L碘滴定液滴定至终点，溶液显蓝色并30秒钟内不褪；每1ml碘滴定液0.1mol/L相当于维生素C C6H8O68.806mg，待测脉平制剂含量限度应为日用剂量含维生素C C6H0O6不得低于135mg；d.制剂中芦丁含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液适当稀适，用微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液，以芦丁对照品的甲醇溶液为对照，采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸＝32∶67∶1为流动相；检测波长为359nm；以外标一点法进行计算，待测平脉制剂含量限度应为日用剂量含芦丁C27H30O16不得低于54mg；e.制剂中阿魏酸含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加70％甲醇加热回流30分钟，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液，以阿魏酸对照品的甲醇溶液为对照，采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸＝17∶83∶0.07为流动相；检测波长为316nm；柱温35℃；以外标一点法进行计算，待测脉平制剂含量限度应为一日用剂量含阿魏酸C10H10O4不得低于1.6mg；f.制剂中总黄酮含量的分光光度法测定精密称取芦丁对照品，用加50％甲醇配制成每1ml含0.2mg的溶液；精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，置10ml的量瓶中，加50％甲醇至5ml，分别加入5％的亚硝酸钠溶液0.3ml，混匀，放置6分钟，再加入10％的硝酸铝溶液0.3ml，混匀，放置6分钟，各加入氢氧化钠试液4ml，再加50％甲醇至刻度，混匀；以相应的溶液为空白；照中国药典公开的分光光度法，在510nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线；取待测脉平颗粒剂适量，置锥形瓶中，加50％甲醇超声20分钟，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。量取供试品溶液，自标准曲线法“加50％甲醇至5ml，”做起，测试吸光度，从标准曲线上读出相当于芦丁的重量，计算，即得；本品一日用剂量含总黄酮以芦丁C27H30O16计不得低于70mg。
与现有技术相比，本发明提供的产品用于瘀血闭阻的胸痹、心痛病，症见胸闷，胸痛，心悸，舌暗或有瘀斑等，对于冠心病、心绞痛等疾病具有显著的治疗效果；本发明制备的胶囊，通过颗粒包薄膜衣，增重小，抗湿性能力强，采用了高分子材料，取消了糖粉，更有利于老年人和糖尿病患者的服用，确保药物的疗效和安全性，生物利用度高；本发明制备的微丸受食物输送节律的影响很小，药物吸收均匀而有规则，表面积增大可以提高药物与胃肠道的接触面积，使药物吸收完全，提高生物利用度，同时外形美观、流动性好、释药稳定、局部刺激性小，不易吸湿，本发发明制备的软胶囊，生物利用度高，有效成分起效快；克服现有技术、产品存在的问题；达到了发明的目的。
本申请人在研究中发现，由于本方含有当归等多糖含量高的药材，浸膏原粉吸湿性很强，常规方法制成胶囊剂、微丸、软胶囊分别会出现内容物粘结、吸潮等现象，影响了产品的稳定性和质量。特别是制备胶囊时，浸膏极易吸潮，流动性很差，根本无法装入胶囊，即使勉强装入，也易结快，药品质量的稳定性难以得到保证，为此，本申请人采用适当的辅料和工艺条件，使得指的产品性能良好。本产品微丸具有较大的吸湿性，为了增加微丸制剂的抗湿性，提高产品本身的质量，本发明微丸通过对赋形剂的筛选，来提高微丸的抗湿性，通过实验筛选后确定加入与药物比例为1∶1.5的MCC作为赋形剂，以95％乙醇为润湿剂，2％HPMC粘合，用离心造粒法制粒，主机转速为150r/min，粘合剂加入速度为15.0mL/min，制得的微丸性能良好。而软胶囊在胃肠道中崩解快，囊壳破裂后，药物迅速分散，故药物释放溶出快，显效迅速，生物利用度高；半透光软胶囊与较好的包装材料可保护药物不受湿气和空气中氧、光线的作用，从而提高抗湿性；所以胶囊本身的稳定性及成型工艺直接影响产品的稳定性，是十分关键的技术。并且，本发明质量控制方法对以银杏叶提取物、维生素C、芦丁、何首乌、当归制成的中药制剂产品的质量控制更为有效，方法精密度、稳定性均较理想，能更全面、更严格的控制以银杏叶提取物、维生素C、芦丁、何首乌、当归制成的中药制剂产品的质量。
本发明中，银杏叶提取物可以是市售的，或者按照中华人民共和国2005版药典中“银杏叶提取物”的制备方法或申请号为的“CN200510056634.X”专利申请中银杏叶提取物的制备方法进行制备获取；芦丁可以是市售的如国药准字H15020035、国药准字H37020490；维生素C可以是市售的如国药准字H32020972。
申请人进行了一系列实验，以选择本发明提供的药物制剂的制备工艺、使用的辅料种类及用量、比例等；保证其科学、合理、可行；得到的制剂具有有效的治疗效果。
实验例1提取工艺研究(1)因素选择中药煎煮提取效果受到加水量、提取时间、提取次数等因素的影响。因现有技术已对提取时间、提取次数进行了考察，故在何首乌、当归煎煮考察时，选取加水量作为因素，重点考察因素的不同水平对煎煮提取效果的影响。结合生产成本、能源等方面进行综合考虑，选择因素水平。
(2)指标确定浸膏是固体制剂发挥疗效的物质基础，其收率高低直接影响制剂工艺，故选择浸膏收得率作为评价指标是合理的。
(3)试验称取何首乌、当归300g，共三份，分别加入不同体积的水加热煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算出膏率，结果见下表。
加水量考察结果表
由上表可知，加水量为5倍时，其出膏率明显低于加水量为6倍量，加水量为7倍与加水量为6倍的浸膏收得率较高，但是二者差别不大，说明加入6倍量水即可将大部分成分提取出来，因此从节约能源和出膏率的角度来考虑，选用加水量为6倍量，故最佳提取工艺为加水煎煮三次，每次1小时，加水量为6倍。并根据此条件进行验证实验。
加水量验证考察结果表
由上表可知，各组的浸膏收得率差别不大，说明筛选的条件是稳定可行的，因此确定加水量的最佳工艺为加水煎煮三次，每次加6倍量。
综上所述，何首乌、当归的最佳提取工艺为何首乌、当归加6倍水加热煎煮三次，每次1小时。
实验例2成型工艺研究2.1胶囊剂(1)吸湿性考察原工艺中维生素C、银杏叶提取物和芦丁是直接加入，我们对提取药膏与维生素C、银杏叶提取物和芦丁的混合物料进行吸湿性考察试验，结果见下表。
吸湿性试验结果
通过吸湿性试验考察，认为混合物料具有一定的吸湿性，直接装胶囊难度较大。
(2)稀释剂选择原剂型中选用淀粉作为稀释剂，考虑到提取的物料性质基本相同，因此我们也选用淀粉作为稀释剂来调整处方重量。
(3)流动性考察为保证分剂量准确，要求填充物料具良好的流动性，故以测定休止角方法考查混合物料的流动性。
固定漏斗法取3只漏斗串联，最底端距水平放置坐标纸1.5cm处，小心地将填充物料沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到最下面漏斗形成的颗粒圆锥体尖端接触到漏斗下口为止，由坐标纸测出圆锥底部的直径，计算出休止角(tgα＝H/R/2)，计算结果见下表。
填充物料的休止角α
由上表可知，混合物料休止角＜40°，即表明混合物料流动性较好，能满足分装要求。
(4)填充物料堆密度测定及空胶囊选择空胶囊规格的选择一般根据药物的晶型、细度、密度及剂量的不同，特别是堆密度来确定。采用量筒法测定混合物料堆密度，即将精密称量的混合物装入干燥的10ml量筒内，左右轻轻振摇，来回20次，记录容量，计算，结果见下表。
堆密度测定结果
结果测得填充颗粒堆密度约0.58(g/cm3)，根据空胶囊号码和近似容量的关系，选择1号空胶囊壳分装，即每粒胶囊装量为0.32g(相当于1.53g生药/粒)左右。
(5)临界相对湿度(CRH)测定为了保证生产时物料能够顺利进行填装，需要控制环境的湿度，以便使物料具有较好的流动性，使装量均匀，为此我们对混合物料进行平衡吸湿性试验，即吸湿平衡曲线测定。取混合物料约1g共六份，置称量瓶中，精密称定，将称量瓶盖打开，分别放入相对湿度为20％、33％、43％、60％、75％、92％的环境中，于25℃恒温培养箱内放置84小时，取出称量瓶，加盖后精密称定，计算吸湿百分率，以相对湿度为横坐标，吸湿百分率为纵坐标，绘制吸湿平衡曲线见附图1，试验结果见下表。
填充颗粒的吸湿百分率(％)
从上表可知，胶囊在不同相对湿度环境下，其吸水量不等，在相对湿度约为60.0％以下时，吸湿性较小，因此分装时应控制相对湿度在60％以下。
2.2微丸剂(1)赋形剂品种及用量的筛选吸湿百分率的测定将底部盛有饱和KBr溶液在20℃放置2d，使其内部RH恒定在84％，在已干燥恒重的称量瓶中放人约2g微丸，平铺于底部，厚约2mm，打开称量瓶，定时称重并计算吸湿百分率，结果见表。
不同赋形剂的吸湿百分率(％)
由上表的结果可知，对于本产品而言淀粉吸湿性大于微晶纤维素，因此，本发明微丸选择微晶纤维素为赋形剂，但是不同剂量赋形剂的加入，对微丸的质量也会产生一定的影响。为此，本申请人对微晶纤维素的使用量进行了比较和筛选，测定MCC不同使用量微丸的休止角和松密度，具体数据见表。
MCC不同使用量对微丸休止角和松密度的影响
根据表6的数据可知，随着MCC含量的增加，所得微丸的休止角减少，松密度增加，但是从成本方面考虑，选择软材与MCC比例为1∶1.5。
(2)主机转盘转速的影响将微丸中间品与MCC按1∶1的比例混合均匀，取500g置离心造粒机中，以3％HPMC水溶液为粘合剂，加入量为90mL，主机转速分别为100，200，300r/min，结果见表。
主机转速对微丸粒度分布及收率的影响
由实验结果可知，当主机转盘转速为100r/min时，大部分粉末依附于底盘而达不到均匀润湿，制粒的结果是较大的聚集块、微丸与中间品并存，粒径600～400μm微丸的收率较低；当主机转速增加至150r/min时，由于粉末润湿较为均匀，颗粒与档板的撞击冲力变大，较大的颗粒会进一步破碎，因而使粒径大于900μm的颗粒和小于400μm的粉末随之减少；当主机转速从150r/min增至200r/min时，粒径变化不再明显，说明此时粒子破碎与集聚基本达到平衡，所以对于本产品而言，主机转速应为150r/min。
2.3软胶囊剂软胶囊在胃肠道中崩解快，囊壳破裂后，药物迅速分散，故药物释放溶出快，显效迅速，生物利用度高；半透光软胶囊与较好的包装材料可保护药物不受湿气和空气中氧、光线的作用，从而提高穿心莲内酯等不稳定成分的稳定性；所以胶囊的稳定性及成型工艺是十分关键的技术。
(1)分散介质(或称基质)选择在填充物料与基质能混合均匀，并能通畅输料及压丸的前提下，尽量减少基质用量。通过多次试验，确定药物量(g)∶基质量(g)＝1∶1.2为宜，实验结果见表。
基质用量考察
(2)胶囊壳配方筛选按下表配料比例配料，放入500ml抽滤瓶中，65℃水浴溶化，自动搅拌化胶，同时抽真空，真空度0.095Mpa左右，经5小时后保温放置1小时，过滤胶液，取一部分胶液测定粘度及其它性能，一部分胶液在铁板上均匀铺成一薄层(先在下面抹一层液体石蜡)，放置于次日观察胶皮性能再作评价，将各指标的考察结果由好至差依次用“+++，“++”，“+”，“-”表示，结果见表。
胶皮配料筛选结果
经以上筛选，综合评价，明胶100g∶甘油44∶水100，最适合本产品。
(3)遮光剂选择透明胶囊壳易致不稳定，故需加入一定量的遮光剂。经考察选择二氧化钛(钛白粉)作遮光剂可达到有效的遮光效果，且质量稳定，不与胶浆及填充物料发生化学变化。其用量经考察以明胶∶甘油∶水∶二氧化钛＝100g∶44g∶100g∶2g为宜，且对胶皮质量影响不大，结果见表。
遮光剂用量选择
胶囊配方中加入遮光剂后质量更为稳定。
实验例3溶出度实验纯化水为溶媒，37±0.5℃100转/分。取脉平片、本发明胶囊、本发明软胶囊、本发明微丸，置溶出杯中分别于5min、10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min时取6ml杯中溶液，立即置离心管中以4千转/分离心5min，取上清液5ml，加水稀释至10ml，微孔滤膜滤过，用高效液相法测定盐酸小檗碱的含量，计算释放累积百分率。
由实验结果可知，片剂在制备的过程中需要经过压缩才能成型，崩解较慢，在人体内的溶出度较低，本发明制剂更有利于人体的吸收利用。
实验例4药效学实验
(1)对血瘀症大鼠血小板活化的作用选用wistar大鼠32只，雌雄不拘，体重280±20g。随机分为4组，每组8只，即正常组正常喂养；模型组生理盐水2ml/kg体重灌胃；脉平片组、本发明胶囊组、本发明软胶囊组、本发明微丸组分别按4.0g/kg体重灌胃给予相应药物。除正常组外，其余3组同时腹腔内注射地塞米松0.25mg/kg体重制备血瘀模型。以上处理共8d。观察指标第9天取材，动物麻醉后，剖开腹腔，剥离出腹主动脉取血2ml装入加有抗凝剂的塑料试管，于4℃3000rpm离心10min，分离血浆，测定血小板膜糖蛋白-140(GMP-140)含量，单位以ng/ml表示。具体结果见下表。
各组大鼠血浆GMP-140的变化
上表结果说明，模型组GMP-140水平较高，与正常组比较有显著差异。而加用脉平片、本发明胶囊、本发明软胶囊、本发明微丸，血浆GMP-140水平较模型组有显著降低，而GMP-140是血小板活化释放的特异分子标志物之一，可反映体内血小板的活化程度及血栓形成倾向。其中，本发明产品的药效并优于脉平片，提示说明本发明产品能够抑制血小板活化，用于血瘀冠心病心绞痛的治疗。
(2)对应急性心肌缺血大鼠血流变的影响取大鼠48只，随机分为正常对照组、模型组、脉平片组、本发明胶囊组、本发明软胶囊组、本发明微丸组，每组8只。各药物组按1ml/100g体重，分别灌胃相应药物，正常对照组及模型组给等容量生理盐水灌胃，每日1次，连续5天。第6天除正常对照组外，其它5组每只大鼠背部皮下注射0.1％肾上腺素0.1ml/100g体重，共2次，间隔2h。于第1次注射1h后将大鼠放入0℃冰水中浸泡5min。第6天灌胃给药1h后以20％乌拉坦1g/kg体重腹腔注射麻醉，自腹主动脉取血4ml，做血液流变学检查，结果见下表。
从上表可以看出，用药组与模型组比较血浆粘滞度、红细胞聚集指数、卡松粘度等均有显著性差异，趋向于正常值，且本发明产品的效果优于脉平片。
实验例5质量控制方法的考察(1)胶囊中银杏叶提取物的薄层鉴别本实验的目的是为了突出银杏叶提取物的特征，为排除制剂中与银杏提取物所含成分类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳方法与条件以正丁醇为样品提取溶剂；以硅胶G薄层板为固定相，醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水(5∶3∶1∶1)为展开剂；以3％的三氯化铝溶液显色；在此条件下，样品与银杏叶提取物对照品均分离清晰，阴性无干扰。
胶囊中银杏叶提取物的薄层鉴别
(2)胶囊中银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的薄层鉴别本实验的目的是为了突出银杏叶提取物中内酯类成分的特征，为排除制剂中与银杏提取物所含内酯类成分类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳方法与条件样品内容物加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加稀盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，残渣加甲醇溶解制备供试品溶液；以硅胶G薄层板为固定相，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(10∶5∶5∶0.6)为展开剂；用醋酐蒸气熏后在140～160℃加热显色；置紫外灯(365nm)下检视；在此条件下，样品、银杏叶提取物对照品、银杏内酯类对照品均分离清晰，阴性无干扰。
实验中几种展开系统的展开效果比较见下表胶囊中银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的薄层鉴别
(3)颗粒剂中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或两种或三种或四种的高效液相鉴别本实验的目的是为了突出银杏叶提取物中内酯类成分的特征，为排除制剂中与银杏提取物所含内酯类成分类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳方法与条件样品加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加稀盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，残渣加甲醇溶解制备供试品溶液；色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水(1∶15∶84)为流动相；用蒸发光散射检测器检测的最佳实验条件与参数。在此条件下，样品、银杏叶提取物对照品、银杏内酯类对照品均分离清晰，阴性无干扰。
实验中几种展开系统的展开效果比较见下表颗粒剂中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或两种或三种或四种的高效液相鉴别
(4)片剂中维生素C的鉴别化学鉴别本实验的目的是为了突出片剂中的维生素C的化学性质，经试验确定鉴别方法为取待测脉平片剂内容物适量，加新煮沸过的冷开水适量与稀醋酸适量，提取，滤过，取续滤液加入活性炭，加热至沸，滤过，滤液作为供试品溶液；一份供试品溶液中滴加数滴二氯靛粉钠试液，试液颜色消失；另一份供试液中加入硝酸银试液数滴，生成黑色沉淀。
(5)颗粒剂中芦丁的薄层鉴别本实验的目的是为了突出芦丁的特征，为排除制剂中与银杏提取物所含成分类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳方法与条件以甲醇为脉平颗粒样品的提取溶剂；以硅胶G薄层板为固定相，乙酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)为展开剂；三氯化铝试液显色，置紫外灯(365nm)下检视的最佳实验条件与参数。在此条件下，样品与芦丁对照品均分离清晰，阴性无干扰。
实验中几种展开系统的展开效果比较见下表颗粒剂中芦丁的薄层鉴别
(6)片剂中芦丁的高效液相鉴别方法本实验的目的是为了突出芦丁的特征，为排除制剂中与芦丁类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳实验条件与参数取待测脉平片剂内容物适量，加甲醇超声处理，提取液作为供试品溶液。以芦丁对照品的甲醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(37∶58∶5)为流动相；检测波长为359nm。在此条件下，样品、芦丁对照品均分离清晰，阴性无干扰。实验中几种洗脱系统的洗脱效果比较见下表片剂中芦丁的高效液相鉴别方法
(7)脉平胶囊中何首乌药材的薄层鉴别本实验的目的是为了突出何首乌药材的特征，为排除制剂中与何首乌药材所含成分类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳实验条件与参数以甲醇为脉平胶囊样品的提取溶剂；以硅胶G薄层板为固定相，先以苯-乙醇(2∶1)为展开剂，再以苯-乙醇(4∶1)为展开剂二次展开，置紫外光灯(365)下检视。在此条件下，样品与何首乌药材均分离清晰，阴性无干扰。
实验中几种展开系统的展开效果比较见下表脉平胶囊中何首乌药材的薄层鉴别
(8)脉平颗粒剂中大黄素、大黄素甲醚的薄层鉴别本实验的目的是为了突出何首乌中大黄素或大黄素甲醚的特征斑点，为排除制剂中与大黄素或大黄素甲醚类似成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳实验条件与参数以8％盐酸溶液为脉平颗粒剂样品提取溶剂，超声处理，再加三氯甲烷提取盐酸溶液，最后加甲醇制备供试品溶液；以硅胶G薄层板为固定相，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶3∶1)的上层溶液为展开剂；氨蒸汽显色检视。在此条件下，样品与大黄素或大黄素甲醚均分离清晰，阴性无干扰。
实验中几种展开系统的展开效果比较见下表脉平颗粒剂中大黄素、大黄素甲醚的薄层鉴别
(9)片剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别本实验的目的是为了突出何首乌中大黄素、大黄素甲醚的特征，为排除制剂中与大黄素、大黄素甲醚类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳实验条件与参数取待测脉平片剂内容物适量，加甲醇超声处理，提取液作为供试品溶液。以大黄素、大黄素甲醚对照品分别制备对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(67∶33∶0.025)为流动相；检测波长为288nm。在此条件下，样品、大黄素、大黄素甲醚对照品均分离清晰，阴性无干扰。
实验中几种洗脱系统的洗脱效果比较见下表片剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别
(10)脉平颗粒剂中当归药材、阿魏酸的薄层鉴别本实验的目的是为了突出当归药材、阿魏酸的特征斑点，为排除制剂中当归药材所含成分类似成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳条件与参数取待测脉颗粒适量，加1％碳酸氢钠溶液超声提取，提取液用稀盐酸调节PH值2～3，再用乙醚提取酸液，提取液挥干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取当归药材，同法制成对照药材溶液；取阿魏酸对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取以上溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.1)展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。此条件下，样品与当归药材或阿魏酸均分离清晰，阴性无干扰。
取待测脉平制剂内容物适量，加碱性溶液超声处理，提取液用酸性溶液调节PH值2～3，再用乙醚或乙酸乙酯或三氯甲烷提取酸液，提取液挥干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；取当归药材，同法制成对照药材溶液；或取阿魏酸对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液或对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸(4～20∶1～5∶0.1～1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材或对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；实验中几种展开系统的展开效果比较见下表脉平颗粒剂中当归药材、阿魏酸的薄层鉴别
(11)颗粒剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别本实验的目的是为了突出当归中阿魏酸的特征，为排除制剂中与阿魏酸类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳实验条件与参数取待测脉平颗粒剂内容物适量，加甲醇超声处理，提取液作为供试品溶液。以阿魏酸对照品分别制备对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸溶液(17∶83∶0.07)为流动相；检测波长为316nm。在此条件下，样品、阿魏酸对照品均分离清晰，阴性无干扰。
实验中几种洗脱系统的洗脱效果比较见下表颗粒剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别
(12)胶囊中总黄酮醇苷的含量测定试验以槲皮素、山柰素、异鼠李素为对照品，用Alltech P426高效液相色谱仪，确立了脉平胶囊中总黄酮醇苷的含量测定的最佳方法色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(50∶50∶0.2)为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含30、30、10μg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品10粒，取内容物，混匀，从中取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇20ml，超声处理(功率250W，频率33KHz)20分钟，取出，放至室温，加甲醇补足重量，滤过，取续滤液10ml，加入甲醇10ml、25％盐酸5ml量，水浴加热回流30分钟，冷却，甲醇定容，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，分别计算槲皮素、山柰素、异鼠李素含量，按下式换算成总黄酮醇苷的含量。
总黄酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量)*2.51本品按干燥品计算，一日用脉平胶囊中含总黄酮醇苷不得低于32mg。
该方法分别通过了以下1～10项方法学考察试验1检测波长的选择槲皮素、山柰素、异鼠李素的对照品溶液，分别在200～400nm波长范围内扫描。结果表明，三者均在360nm处有最大吸收，因此选择360nm作为测定脉平制剂中芦丁含量的检测波长。
2系统适应性试验根据以上仪器条件，得到槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品与样品色谱图。
理论塔板数以槲皮素计不低于2000。
3阴性干扰排除试验为考察其它药材和辅料是否干扰总黄酮醇苷的测定，除银杏叶提取物外，按处方比例称取其它药材和辅料同法制成阴性对照品溶液并测定。结果表明，阴性样品对总黄酮醇苷的含量测定无干扰。
4线性关系的考察精密量取槲皮素、山柰素、异鼠李素不同浓度的溶液，注入液相色谱仪，依上述方法测定。以对照品进样量(ng)为横坐标，峰面积为纵坐标做图，绘制标准曲线。见下表。
槲皮素、山柰素、异鼠李素线性关系
结果表明，槲皮素在112.84ng～564.2ng范围之内线性关系良好，回归方程Y＝3.2104X-30.686，相关系数γ＝0.9997；山柰素在124.73ng～623.65ng范围之内线性关系良好，回归方程Y＝3.5571X-9.9099，相关系数γ＝0.9999；异鼠李素在60.24ng～301.2ng范围之内线性关系良好，回归方程Y＝3.2076X-11.437，相关系数γ＝0.9998。
5样品提取时间的选择平行精密取样品内容物共4份，每份约1g，加甲醇适量分别超声处理(功率250W，频率33KHz)10、20、30、40分钟，提取液照中国药典公开的高效液相色谱法测定。结果见下表。提取时间的选择
结果表明，超声处理20min即可提取完全，因此提取时间定为20分钟。
6精密度试验分别精密吸取槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，每种对照品重复测定5次，峰面积测试结果见下表精密度试验
结果表明，仪器对槲皮素、山柰素、异鼠李素的测试精密度均良好。
7稳定性试验7.1对照品稳定性试验分别精密吸取同一槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、4、8、16、24小时进样测定，峰面积测定结果见下表。
对照品溶液稳定性试验结果
结果表明，槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品溶液均在24小时内稳定性良好。
7.2供试品溶液稳定性试验精密吸取同一供试品(030901批)溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、4、8、16、24小时进样测定总黄酮醇苷，测定结果见下表。
供试品溶液稳定性试验结果
结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。
8重复性试验取本品(030901批)内容物，混匀，从中取约1g(共5份)，精密称定，按最佳方法测试。结果见下表。
重复性试验
结果表明，重复性良好。
9加样回收试验取本品(030901批，总黄酮醇苷含量47.6mg/一日剂量，槲皮素含量22.3mg/一日剂量、山柰素含量15.1mg/一日剂量、异鼠李素含量10.2mg/一日剂量)内容物，平行精密取样共18份，6份分别精密加入槲皮素对照品，6份分别精密加入山柰素对照品，，6份分别精密加入异鼠李素对照品，依法测定。测定结果见下表。
总黄酮醇苷加样回收率试验
结果表明，总黄酮醇苷回收率良好。
10样品含量测定按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作，测定十批样品，结果见下表。
十批样品含量测定结果
结论根据10批样品含量测定结果，暂定本品按干燥品计算，一日剂量含总黄酮醇苷不得低于32mg。
(13)脉平片中萜类内酯的含量测定试验以白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C为对照品，用Alltech P426高效液相色谱仪，确立了脉平胶囊中萜类内酯的含量测定的最佳方法色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水(1∶15∶84)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低于2500。
对照品溶液的制备精密称取白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C对照品适量，加甲醇制成每1ml各含1mg、1mg、1mg、0.5mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，研细，混匀，从中取相当于萜类内酯20mg粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇50ml，超声处理(功率250W，频率33KHz)20分钟，取出，放至室温，加甲醇补足重量，滤过，取续滤液20ml，蒸干，残渣加水10ml溶散，加2％盐酸2滴，用乙酸乙酯提取4次(15ml、10ml、10ml、10ml)，合并提取液，用5％的醋酸钠溶液20ml洗涤，醋酸钠洗涤液再用乙酸乙酯10ml洗涤。乙酸乙酯提取液与洗涤液合并，水洗两次，每次20ml，合并水洗液，再用乙酸乙酯10ml洗涤，合并乙酸乙酯溶液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中定容，作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算四种内酯的量。萜类内酯以白果内酯(C15H18O8)、银杏内酯A(C20H24O9)、银杏内酯B(C20H24O10)、银杏内酯C(C20H24O11)的总量计。
本品按干燥品计算，一日用脉平片中含萜类内酯不得低于8mg。
该方法分别通过了以下1～10项方法学考察试验1检测方法的选择经比较紫外检测(UV)、蒸发光散射检测(ELSD)、示差折光检测(RID)等检测方法，其中以ELSD分离度、稳定性、精密度最为理想，方法可行。
2系统适应性试验根据以上仪器条件，得白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C对照品与样品色谱图。理论塔板数以白果内酯计不低于2500。
3阴性干扰排除试验为考察其它药材和辅料是否干扰萜类内酯的测定，除银杏叶提取物外，按处方比例称取其它药材和辅料同法制成阴性对照品溶液并测定。结果表明，阴性样品对萜类内酯的含量测定无干扰。
4线性关系的考察精密量取白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C不同浓度的溶液，注入液相色谱仪，依法测定。以对照品进样量(μg)的常用对数值为横坐标，峰面积的常用对数值为纵坐标做图，绘制标准曲线。结果见下表。
白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C线性关系
结果表明，四种对照品均在表中所示范围之内线性关系良好。
5样品提取时间的选择平行精密取样品内容物共4份，每份约取相当于萜类内酯20mg，加甲醇适量分别超声处理(功率250W，频率33KHz)10、20、30、40分钟，提取液照中国药典公开的高效液相色谱法测定。结果见下表。
提取时间的选择
结果表明，超声处理20min即可提取完全，因此提取时间定为20分钟。
6精密度试验分别精密吸取白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，每种对照品重复测定5次，峰面积测试结果见下表精密度试验
结果表明，仪器对白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的测试精密度均良好。
7稳定性试验7.1对照品稳定性试验分别精密吸取同一白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、4、8、16、24小时进样测定，峰面积测定结果见下表。
对照品溶液稳定性试验结果
结果表明，白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C对照品溶液均在24小时内稳定性良好。
7.2供试品溶液稳定性试验精密吸取同一供试品(0301201批)溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、4、8、16、24小时进样测定萜类内酯，测定结果见下表。
供试品溶液稳定性试验结果
结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。
8重复性试验取本品(0301205批)内容物5份，精密称定，按最佳方法测试，结果见下表。
重复性试验
结果表明，重复性良好。
9加样回收试验取本品(03012011批，萜类内酯含量10.5mg/一日剂量，白果内酯含量4.1mg/一日剂量、银杏内酯A含量2.1mg/一日剂量、银杏内酯B含量1.2mg/一日剂量，银杏内酯C含量3.1mg/一日剂量)内容物，平行精密取样共20份，5份分别精密加入银杏内酯对照品，5份分别精密加入银杏内酯A对照品，5份分别精密加入银杏内酯B对照品，5份分别精密加入银杏内酯C对照品，依法测定。测定结果见下表。
萜类内酯加样回收率试验
结果表明，萜类内酯回收率良好。
10样品含量测定按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作，测定三批样品，结果见下表。
十批样品含量测定结果
结论根据10批样品含量测定结果，暂定本品按干燥品计算，一日剂量含萜类内酯不得低于8mg。
(14)胶囊中维生素C含量的滴定法测定本试验用滴定法建立了胶囊中维生素C的含量测定方法取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加新煮沸过的冷开水适量与稀醋酸适量，提取，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，加入淀粉指示剂适量，用碘滴定液滴定至终点(溶液显蓝色并30秒钟内不褪)。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于维生素C(C6H8O6)8.806mg。经测定十批样品，得维生素C含量以日用剂量计为135mg。
(15)颗粒中芦丁的含量测定方法试验以芦丁为对照品，用Alltech P426高效液相色谱仪，确立了脉平胶囊中芦丁的含量测定的最佳方法色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(37∶58∶5)为流动相；检测波长为359nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品10粒，取内容物，混匀，从中取约0.4g，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)30分钟，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，每粒含芦丁(C27H30O16)不得低于5.0mg。
该方法分别通过了以下1～10项方法学考察试验1检测波长的选择芦丁对照品溶液，在200～400nm波长范围内扫描。结果表明，芦丁在359nm处有最大吸收，因此选择359nm作为测定脉平制剂中芦丁含量的检测波长。
2系统适应性试验根据以上仪器条件，得到芦丁对照品、样品色谱图，其理论塔板数以芦丁计不低于2000。
3阴性干扰排除试验为考察其它药材和辅料是否干扰芦丁的测定，除芦丁外，按处方比例称取其它药材和辅料同法制成阴性对照品溶液并测定。结果表明，阴性样品对芦丁的含量测定无干扰。
4线性关系的考察精密量取芦丁对照品不同浓度的溶液，注入液相色谱仪，提取液照中国药典公开的高效液相色谱法测定。以芦丁的进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标做图，绘制标准曲线。见下表。
芦丁线性关系
回归方程Y＝1065320.02X+309.48相关系数γ＝0.9999结果表明，芦丁在0.06528μg～0.58752μg范围之内线性关系良好。
5样品提取时间的选择平行精密取样品内容物共4份，每份约0.4g，加甲醇适量分别超声处理(功率250W，频率33KHz)10、20、30、40分钟，提取液照中国药典公开的高效液相色谱法测定。结果见下表。
提取时间的选择
结果表明，超声处理30min即可提取完全，因此提取时间定为30分钟。
6精密度试验精密吸取芦丁对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复测定5次，结果见下表精密度试验
结果表明，仪器精密度良好。
7稳定性试验7.1对照品稳定性试验精精密吸取同一芦丁对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、6、10、24小时进样测定，测定结果见下表。
对照品溶液稳定性试验结果
结果表明，对照品溶液在24小时内稳定性良好。
7.2供试品溶液稳定性试验精密吸取同一供试品(030901批)溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、6、10、24小时进样测定，测定结果见下表。
供试品溶液稳定性试验结果
结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。
8重复性试验取本品(030901批)内容物，混匀，从中取约0.4g(共5份)，精密称定，按正文供试品溶液制备和测定项下进行操作。结果见下表。
重复性试验
结果表明，重复性良好。
9加样回收率试验取本品(030901批，芦丁含量1.6062％)内容物，平行精密取样共6份，分别精密加入芦丁对照品，依法测定。测定结果见下表。
芦丁加样回收率试验
芦丁平均回收率＝97.43％，RSD＝0.80％；结果表明，芦丁回收率良好。
10样品含量测定按确立的最佳方法操作，测定十批样品，结果见下表。
十批样品含量测定结果
结论根据10批样品含量测定结果暂定，本品按干燥品计算，每粒含芦丁(C27H30O16)不得低于5.0mg。
(16)颗粒剂中阿魏酸的含量测定试验以阿魏酸为对照品，用Alltech P426高效液相色谱仪，确立了脉平胶囊中阿魏酸的含量测定的最佳方法色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸(17∶83∶0.07)为流动相；检测波长为316nm。柱温℃。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加70％甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品约1g，精密称定，置25ml量瓶中，加70％甲醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)30分钟，取出，放至室温，加70％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，一日用剂量含阿魏酸(C10H10O4)不得低于1.6mg。
该方法分别通过了以下1～10项方法学考察试验1检测波长的选择阿魏酸对照品溶液，在200～400nm波长范围内扫描。结果表明，阿魏酸在316nm处有最大吸收，因此选择316nm作为测定脉平制剂中芦丁含量的检测波长。
2系统适应性试验根据以上仪器条件，得到阿魏酸对照品、样品色谱图，其理论塔板数以阿魏酸计不低于5000。
3阴性干扰排除试验为考察其它药材和辅料是否干扰阿魏酸的测定，除阿魏酸外，按处方比例称取其它药材和辅料同法制成阴性对照品溶液并测定。结果表明，阴性样品对阿魏酸的含量测定无干扰。
4线性关系的考察精密量取阿魏酸对照品不同浓度的溶液，注入液相色谱仪，提取液照中国药典公开的高效液相色谱法测定。以阿魏酸的进样量(ng)为横坐标，峰面积为纵坐标做图，绘制标准曲线。见下表。
阿魏酸线性关系
回归方程Y＝1196.1X-1770.01相关系数γ＝0.9999结果表明，阿魏酸在16.67ng～150.03ng范围之内线性关系良好。
5样品提取时间的选择平行精密取样品内容物共4份，每份约0.5g，加甲醇适量分别超声处理(功率250W，频率33KHz)10、20、30、40分钟，提取液照中国药典公开的高效液相色谱法测定。结果见下表。
提取时间的选择
结果表明，超声处理30min即可提取完全，因此提取时间定为30分钟。
6精密度试验精密吸取阿魏酸对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复测定5次，结果见下表精密度试验
结果表明，仪器精密度良好。
7稳定性试验7.1对照品稳定性试验精精密吸取同一阿魏酸对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、4、8、16、24小时进样测定，测定结果见下表。
对照品溶液稳定性试验结果
结果表明，对照品溶液在24小时内稳定性良好。
7.2供试品溶液稳定性试验精密吸取同一供试品(040501批)溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、4、8、16、24小时进样测定，测定结果见下表。
供试品溶液稳定性试验结果
结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。
8重复性试验取本品(040505批)内容物，混匀，从中取约0.5g(共5份)，精密称定，按正文供试品溶液制备和测定项下进行操作。结果见下表。
重复性试验
结果表明，重复性良好。
9加样回收率试验取本品(040505批，阿魏酸含量2.65mg/一日剂量)内容物，平行精密取样共5份，分别精密加入阿魏酸对照品，依法测定。测定结果见下表。
阿魏酸加样回收率试验
结果表明，阿魏酸回收率良好。
10样品含量测定按最佳方法操作，测定三批样品，结果见下表。
三批样品含量测定结果
结论根据10批样品含量测定结果暂定，本品按干燥品计算，一日用剂量含阿魏酸(C10H10O4)不得低于1.6mg。
(17)颗粒剂中总黄酮的含量测定试验以芦丁为对照品，采用分光光度法，考察了颗粒中总黄酮的含量测定方法。
经试验，确立了最佳方法对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品，用加50％甲醇配制成每1ml含0.2mg的溶液。
标准曲的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，置10ml的量瓶中，加50％甲醇至5ml，分别加入5％的亚硝酸钠溶液0.3ml，混匀，放置6分钟，再加入10％的硝酸铝溶液0.3ml，混匀，放置6分钟，各加入氢氧化钠试液4ml，再加50％甲醇至刻度，混匀。以相应的溶液为空白。照中国药典公开的分光光度法，在510nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法取待测脉平颗粒剂适量，置锥形瓶中，加50％甲醇超声20分钟，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。量取供试品溶液，自标准曲线法“加50％甲醇至5ml，”做起，测试吸光度，从标准曲线上读出相当于芦丁的重量，计算，即得。
本品一日用剂量含总黄酮以芦丁(C27H30O16)计不得低于70mg。
该条件分别通过了以下方法考察试验线性关系考察试验，结果表明芦丁在4～2000mg/ml范围内与吸光度相关性良好，γ＝0.999；精密度试验，重复测定5次，结果RSD＝1.04％；供试品溶液的制备，3份样品分别加50％甲醇适量，分别超声处理(功率250W，频率33KHz)10、20、30分钟，依法测定，结果表明，超声处理20分钟即可提取完全，因此提取时间定为20分钟；稳定性试验，结果表明，对照品溶液与样品溶液均在24小时内稳定；重复性试验，平行测试5份样品，结果RSD＝1.65％；结果平均回收率＝97.56％，RSD＝1.59％；加样回收试验，5份样品平行加入芦丁对照品，结果平均回收率＝97.9％，RSD＝1.84％；样品含量测定，按以上条件与供试品溶液制备方法，测定三批样品，结果总黄酮平均含量以日用剂量计为91mg。
附图1是本发明的平衡吸湿曲线图。
具体的实施方式本发明的实施例1银杏叶提取物12.5g、维生素C12.5g、芦丁5g、何首乌1000g、当归500g取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏提取物、维生素C、芦丁及淀粉，混匀，装入胶囊，分装时应控制相对湿度在60％以下，本产品口服、一次4粒，一日3次。
本发明的实施例2银杏叶提取物12.5g、维生素C12.5g、芦丁5g、何首乌1000g、当归500g取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏提取物、维生素C、芦丁，混匀，真空干燥，然后加入与药物比例为1∶1.5的MCC作为赋形剂，以95％乙醇为润湿剂，2％HPMC粘合，用离心造粒法制粒，主机转速为150r/min，粘合剂加入速度为15.0mL/min。然后干燥、灭菌，即得微丸剂。
本发明的实施例3银杏叶提取物12.5g、维生素C12.5g、芦丁5g、何首乌1000g、当归500g取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏提取物、维生素C、芦丁，混匀，真空干燥，按药物量∶基质量＝1∶1.2加入大豆油，混匀；胶皮的配方为明胶∶甘油∶水∶二氧化钛＝100g∶44g∶100g∶2g，配料化胶条件为称量配料，投入化胶罐中，冷浸30分钟后逐渐升温至65±5℃，搅拌5小时并同时抽真空除气泡，待胶料均匀后放料，滤过后装入胶囊机之胶料桶中；调试压丸机，明胶盒温控65℃，喷体温控40℃，滚模转速2.0，胶皮厚度0.6mm，室内温度18～25℃，相对湿度＜40％，压丸；干燥采用滚动定型干燥与托盘干燥两步结合，滚动定型干燥2小时，干燥温度22℃，干燥相对湿度应低于40％，干燥时间在24～48小时，即得软胶囊剂。
本发明的实施例4银杏叶提取物12.5g、维生素C12.5g、芦丁5g、何首乌1000g、当归500g
取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏提取物、维生素C、芦丁、蒸馏水，即得口服液。
本发明的实施例5胶囊中银杏叶提取物的薄层鉴别取待测胶囊内容物适量，加丙酮15ml，超声提取10分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取银杏叶提取物0.2g，同法制成对照提取物溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液3μl，对照提取物溶液3μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以甲酸乙酯-丙酮-甲醇-水(6∶4∶1.5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明的实施例6颗粒中银杏叶提取物的薄层鉴别取待测颗粒适量，加正丁醇20ml，在水浴中温浸15分钟并时时振摇，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取银杏叶提取物0.2g，同法制成对照提取物溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品与对照提取物溶液各2μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮乙醇-水(15∶3∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明的实施例7片剂中银杏叶提取物与白果内酯的薄层鉴别取待测脉平片剂内容物适量，加甲醇回流提取，提取液蒸干，残渣加稀醋酸使溶解，用三氯甲烷提取，提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。取银杏叶提取物制成对照提取物溶液。另取白果内酯对照品制成对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取以上溶液各10μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-丁酮-甲醇(13∶5∶6∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏15分钟，在140～160℃加热30分钟，放冷，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照提取物与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明的实施例8胶囊中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的薄层鉴别取待测脉平胶囊内容物适量，加95％乙醇超声提取，提取液作为供试品溶液。取银杏叶提取物制成对照提取物溶液。另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取以上溶液各3μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-乙醇(15∶10∶6∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏15分钟，在140～160℃加热30分钟，放冷，置紫外灯(254或365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照提取物与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明的实施例9胶囊中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的高效液相色谱鉴别取待测脉平胶囊内容物适量，加乙醇超声提取，提取液蒸干，残渣加稀磷酸使溶解，用三氯甲烷提取，提取液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水(0.5∶17.5∶82)为流动相；用蒸发光散射检测器检测；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例10颗粒中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的高效液相色谱鉴别取待测脉平胶囊内容物适量，加甲醇温浸振摇提取，提取液蒸干，残渣加稀盐酸使溶解，用二氯甲烷提取，提取液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水(3∶20∶77)为流动相；用蒸发光散射检测器检测；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例11片剂中维生素C的化学鉴别取待测脉平制剂内容物适量，加新煮沸过的冷开水适量稀磷酸适量，提取，滤过，取续滤液加入活性炭，加热至沸，滤过，滤液作为供试品溶液。一份供试品溶液中滴加数滴二氯靛粉钠试液，试液颜色消失；另一份供试液中加入硝酸银试液数滴，生成黑色沉淀。
本发明的实施例12片剂中芦丁的薄层色谱鉴别方法取待测脉平片剂内容物适量，加乙醇超声提取，提取液作为供试品溶液。再取芦丁对照品，制备对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以甲酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝试液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例13片剂中芦丁的薄层色谱鉴别方法取待测脉平片剂内容物适量，加甲醇温浸提取，提取液作为供试品溶液。再取芦丁对照品，制备对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲酸乙酯-甲酸-水(20∶3∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝试液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例14胶囊剂中芦丁的高效液相色谱鉴别取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声处理，提取液作为供试品溶液。以芦丁对照品的甲醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(15∶84.5∶0.05)为流动相；检测波长为272nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例15颗粒剂中芦丁的高效液相色谱鉴别取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加乙醇超声处理，提取液作为供试品溶液。以芦丁对照品的乙醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-醋酸(41∶64∶5)为流动相；检测波长为361nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例16片剂中何首乌药材的薄层色谱鉴别取待测脉平制剂内容物适量，加乙醇温浸提取，提取液作为供试品溶液。再取何首乌对照药材，制备对照药材溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和何首乌药材溶液各30μl，分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以苯-乙醇(5∶1)展开约5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇(10∶1)展开约10cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点。再喷以磷钼酸溶液，稍加热，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点。
本发明的实施例17胶囊剂中何首乌药材的薄层色谱鉴别取待测脉平制剂内容物适量，加乙醇超声提取，提取液作为供试品溶液。再取何首乌对照药材，制备对照药材溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和何首乌药材溶液各30μl，分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以苯-乙醇(2∶1)展开约5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇(4∶1)展开约10cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点。再喷以磷钼酸溶液，稍加热，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点。
本发明的实施例18胶囊中大黄素、大黄素甲醚的薄层鉴别取待测制剂内容物适量，加8％盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，立即冷却，离心，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，室温挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取大黄素、大黄素甲醚对照品，加乙醇分别制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶6∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸汽中显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例19片剂中大黄素、大黄素甲醚的薄层鉴别取待测片剂内容物适量，加5％磷酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加二氯甲烷10ml，加热回流1小时，立即冷却，离心，分取二氯甲烷层，酸液再用二氯甲烷提取2次，每次10ml，合并二氯甲烷液，室温挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取大黄素、大黄素甲醚对照品，加甲醇分别制成每1ml各含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各30μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙醚-甲酸乙酯-乙酸(30∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸汽中显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例20颗粒剂中大黄素、大黄素甲醚的薄层鉴别取待测颗粒剂内容物适量，加6％盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，立即冷却，离心，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取2次，每次10ml，合并二氯甲烷液，室温挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取大黄素、大黄素甲醚对照品，加乙醇分别制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各1μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙醚-乙酸乙酯-乙酸(16∶10∶3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸汽中显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例21颗粒剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别取待测脉平颗粒适量，置锥形瓶中，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液。以大黄素对照品、大黄素甲醚对照品的甲醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-醋酸溶液(40∶55∶5)为流动相；检测波长为220nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例22片剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别取待测脉平片剂适量，置锥形瓶中，加乙醇超声提取，提取液作为供试品溶液。以大黄素对照品、大黄素甲醚对照品的乙醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-盐酸溶液(81∶17.9∶0.1)为流动相；检测波长为265nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例23胶囊剂中当归药材、阿魏酸的薄层色谱鉴别取待测脉平制剂内容物适量，加1％醋酸钠溶液超声处理，提取液用磷酸调节PH值2～3，再用乙酸乙酯提取酸液，提取液挥干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。取当归药材，同法制成对照药材溶液。再取阿魏酸对照品，制备对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取以上溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-甲酸乙酯-甲酸(10∶10∶1)展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例24片剂中当归药材、阿魏酸的薄层色谱鉴别取待测脉平片剂内容物适量，加1％碳酸氢钾溶液超声处理，提取液用盐酸调节PH值2～3，再用氯仿提取酸液，提取液挥干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。取当归药材，同法制成对照药材溶液。再取阿魏酸对照品，制备对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取以上溶液各30μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-乙酸(4∶5∶0.1)展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例25片剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别取待测脉平片剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声处理，提取液作为供试品溶液。以阿魏酸对照品制备对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-醋酸(45∶50∶5)为流动相；检测波长为280nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例26颗粒剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别取待测脉平颗粒剂内容物适量，置锥形瓶中，加乙醇温浸处理，提取液作为供试品溶液。以阿魏酸对照品制备对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用二八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸溶液(10∶90∶0.2)为流动相；检测波长为320nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
本发明的实施例27颗粒剂中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱法测定取待测脉平颗粒内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加乙醇适量，超声处理，取出，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液加入25％的盐酸溶液，回流30分钟，放冷，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。分别以槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品的甲醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-醋酸(50∶50∶2)为流动相；检测波长为280nm；以外标一点法进行计算，总黄酮苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量)*2.51，待测脉平制剂含量限度应为日用剂量含总黄酮苷不得低于32mg。
本发明的实施例28片剂中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱法测定取待测脉平片剂，除去包衣，研细混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇适量，超声处理，取出，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液加入15％的硫酸溶液，回流30分钟，放冷，用甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。分别以槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品的甲醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸(12∶88∶0.5)为流动相；检测波长为365nm；以外标一点法进行计算，总黄酮苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量)*2.51，测得脉平制剂含量日用剂量含总黄酮醇苷高于32mg。
本发明的实施例29胶囊中萜类内酯含量的高效液相色谱法测定取待测脉平胶囊内容物适量，加甲醇回流提取30分钟，提取液蒸干，残渣加稀醋酸使溶解，用乙酸乙酯提取4次，提取液用3％的碳酸氢钠溶液洗涤，洗涤液再用乙酸乙酯洗涤，乙酸乙酯提取液与洗涤液合并，水洗两次，合并水洗液，再用乙酸乙酯洗涤，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水(0.5∶22∶78)为流动相；用蒸发光散射检测器检测；用外标两点法对数方程分别计算四种内酯的量。总萜类内酯的含量以白果内酯(C15H18O8)、银杏内酯A(C20H24O9)、银杏内酯B(C20H24O10)、银杏内酯C(C20H24O11)的总量计，测得脉平制剂含量日用剂量含萜类内酯高于8mg。
本发明的实施例30颗粒中萜类内酯含量的高效液相色谱法测定取待测脉平胶囊内容物适量，加乙醇超声提取，提取液蒸干，残渣加0.2％磷酸使溶解，用氯仿提取4次，提取液用5％的醋酸钠溶液洗涤，洗涤液再用氯仿洗涤，氯仿提取液与洗涤液合并，水洗两次，合并水洗液，再用氯仿洗涤，合并氯仿液，蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水(3∶25∶72)为流动相；用蒸发光散射检测器检测；用外标两点法对数方程分别计算四种内酯的量。总萜类内酯的含量以白果内酯(C15H18O8)、银杏内酯A(C20H24O9)、银杏内酯B(C20H24O10)、银杏内酯C(C20H24O11)的总量计，测得脉平制剂含量日用剂量含萜类内酯高于8mg。
本发明的实施例31片剂中维生素C含量的滴定法测定取待测脉平片剂，除去包衣，研细混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加新煮沸过的冷开水适量与稀盐酸适量，提取，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，加入淀粉指示剂适量，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定至终点(溶液显蓝色并30秒钟内不褪)。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于维生素C(C6H8O6)8.806mg。测得脉平片剂含量一日用剂量含维生素C(C6H8O6)高于135mg。
本发明的实施例32片剂中芦丁含量的高效液相色谱法测定取待测脉平片剂，除去包衣，研细混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加乙醇超声提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液适当稀适，用微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。以芦丁对照品的乙醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(10∶89∶0.1)为流动相；检测波长为365nm；以外标一点法进行计算，测得平脉片剂含量一日用剂量含芦丁(C27H30O16)高于54mg。
本发明的实施例33颗粒中芦丁含量的高效液相色谱法测定取待测脉平颗粒，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇回流提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液适当稀适，用微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。以芦丁对照品的甲醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-冰醋酸(35∶64∶1)为流动相；检测波长为288nm；以外标一点法进行计算，测得脉平脉颗粒含量一日用剂量含芦丁(C27H30O16)高于54mg。
本发明的实施例34片剂中阿魏酸含量的高效液相色谱法测定取待测脉平片剂，除去包衣，研细混匀，置锥形瓶中，加70％甲醇超声提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。以阿魏酸对照品的70％溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(8∶92∶0.02)为流动相；检测波长为288nm；柱温30℃；以外标一点法进行计算，测得脉平制剂含量一日用剂量含阿魏酸(C10H10O4)高于1.6mg。
本发明的实施例35胶囊中阿魏酸含量的高效液相色谱法测定取待测脉平胶囊内容物适量，置锥形瓶中，加50％乙醇加热回流30分钟，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。以阿魏酸对照品的50％乙醇溶液为对照。采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-冰醋酸(37∶61∶2)为流动相；检测波长为320nm；柱温45℃；以外标一点法进行计算，测得脉平胶囊含量限度应为一日用剂量含阿魏酸(C10H10O4)高于1.6mg。
本发明的实施例36胶囊中总黄酮含量的分光光度法测定精密称取芦丁对照品，用加70％乙醇配制成每1ml含0.08mg的溶液；精密量取对照品溶液3ml，置10ml的量瓶中，分别加入0.1mol/L三氯化铝溶液2ml，1mol/L的醋酸钾溶液3ml，加70％乙醇定容，混匀，放置30分钟；以相应的溶液为空白；照中国药典公开的分光光度法，在420nm处测定吸收度；取待测脉平胶囊内容物适量，置锥形瓶中，加70％乙醇回流30分钟，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。量取供试品溶液3ml，按对照品溶液显色方法显色，测试吸光度，用外标一点法计算，即得。测得脉平胶囊含量限度应为一日用剂量含总黄酮以芦丁(C27H30O16)计高于70mg。
权利要求
1.一种治疗冠心病的脉平药物制剂，其特征在于按照重量组分计算，它主要由银杏叶提取物12.5g、维生素C12.5g、芦丁5g、何首乌1000g、当归500g或用相应重量份它们的提取物制作而成的注射液、粉针、冻干粉针、凝胶剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂或膜剂。
2.如权利要求1所述治疗冠心病的脉平药物制剂的制备方法，其特征在于取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁，然后分别制成胶囊剂、微丸剂或软胶囊剂。
3.按照权利要求2所述治疗冠心病的脉平药物制剂的制备方法，其特征在于所述制剂中的胶囊剂这样制备取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃时相对密度为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁及淀粉，混匀，装入胶囊，分装时应控制相对湿度在60％以下，即得。
4.按照权利要求2所述治疗冠心病的脉平药物制剂的制备方法，其特征在于所述制剂中的微丸剂这样制备取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度50℃时为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁，混匀，真空干燥，然后加入与药物比例为1∶1.5的MCC作为赋形剂，以95％乙醇为润湿剂，2％HPMC粘合，用离心造粒法制粒，主机转速为150r/min，粘合剂加入速度为15.0mL/min，然后干燥、灭菌，即得。
5.按照权利要求2所述治疗冠心病的脉平药物制剂的制备方法，其特征在于所述制剂中的软胶囊剂这样制备取何首乌、当归，加6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2倍量乙醇沉淀48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度50℃时为1.30～1.35的清膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入银杏叶提取物、维生素C、芦丁，混匀，真空干燥，按药物量∶基质量＝1∶1.2加入大豆油，混匀；胶皮的配方为明胶∶甘油∶水∶二氧化钛＝100g∶44g∶100g∶2g，配料化胶条件为称量配料，投入化胶罐中，冷浸30分钟后逐渐升温至65±5℃，搅拌5小时并同时抽真空除气泡，待胶料均匀后放料，滤过后装入胶囊机之胶料桶中；调试压丸机，明胶盒温控65℃，喷体温控40℃，滚模转速2.0，胶皮厚度0.6mm，室内温度18～25℃，相对湿度＜40％，压丸；干燥采用滚动定型干燥与托盘干燥两步结合，滚动定型干燥2小时，干燥温度22℃，干燥相对湿度应低于40％，干燥时间在24～48小时，即得。
6.如权利要求1或2所述治疗冠心病的脉平药物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下全部或部分内容(1)银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、维生素C、芦丁、何首乌药材、大黄素、大黄素甲醚、当归药材、阿魏酸中全部或部分成分的鉴别测试方法；(2)总黄酮醇苷、萜类内酯、维生素C、芦丁、阿魏酸、总黄酮中全部或部分成分的含量测试方法。
7.按照权利要求6所述治疗冠心病的脉平药物制剂的质量控制方法，其特征在于所述制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a.制剂中银杏叶提取物的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加正丁醇或丙酮提取，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇或甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取银杏叶提取物适量，加乙醇或甲醇使溶解，作为对照提取物溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯或甲酸乙酯-丁酮或丙酮-甲醇或乙醇-水＝5～50∶3～30∶1～10∶1～10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.3～30％的三氯化铝溶液，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b.制剂中银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇提取，作为供试品溶液；或将甲醇提取液蒸干，残渣加稀酸使溶解，用乙酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液蒸干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；取银杏叶提取物，同法制成对照提取物溶液；或另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品中的一种或几种制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液中的一种与对照溶液中的一种或几种，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以甲苯或苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-丙酮或丁酮-甲醇或乙醇＝10～50∶5～25∶5～25∶0.6～3为展开剂，展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏后在140～160℃加热，放冷，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物或对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；c.制剂中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或几种的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，残渣加稀酸溶液使溶解，用乙酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液蒸干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品中的一种或几种，制成对照品溶液；采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水＝0.2～5∶15～55∶84～95为流动相；用蒸发光散射检测器检测；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；d.制剂中维生素C的化学鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加新煮沸过的冷开水适量与稀酸溶液适量，提取，滤过，取续滤液加入活性炭，加热至沸，滤过，滤液作为供试品溶液；供试品溶液中滴加数滴二氯靛粉钠试液，试液颜色消失；或供试液中加入硝酸银试液数滴，生成黑色沉淀；e.制剂中芦丁的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液作为供试品溶液。另取芦丁对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸-水＝8～40∶1～5∶1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；f.制剂中芦丁的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇处理，提取液作为供试品溶液；另取芦丁对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或盐酸＝8～65∶58～80∶0.05～5为流动相，检测波长为为190～410nm中的一个或几个；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；g.制剂中何首乌药材的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液作为供试品溶液；取何首乌对照药材，同法制备对照药材溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶6F254薄层板上，以苯-乙醇＝1～5∶1展开约5cm，取出，晾干，再以苯-乙醇＝2～10∶1展开约10cm，取出，晾干，置紫外光灯下检视，或喷以磷铝酸溶液，稍加热，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；h.制剂中大黄素、大黄素甲醚中一种或两种的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加一定酸性溶液超声提取，再加入三氯甲烷或二氯甲烷提取，合并三氯甲烷或二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇或乙醇使溶解，作为供试品溶液；再取大黄素对照品或大黄素甲醚对照品的一种或两种，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照品溶液中一种或两种，分别点于同一块硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以30～60℃的石油醚或60～90℃的石油醚或乙醚-甲酸乙酯或乙酸乙酯-甲酸或乙酸＝15～150∶3～30∶1～10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸汽中显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；i.制剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇处理，提取液作为供试品溶液。以大黄素对照品、大黄素甲醚对照品制备对照品溶液。照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水-磷酸或醋酸或盐酸溶液＝55～95∶33～60∶0.01～5为流动相；检测波长为为190～410nm中的一个或几个；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；j.制剂中当归药材、阿魏酸的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加碱性溶液超声处理，提取液用酸性溶液调节PH值2～3，再用乙醚或乙酸乙酯或三氯甲烷提取酸液，提取液挥干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；取当归药材，同法制成对照药材溶液；或取阿魏酸对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液或对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸＝4～20∶1～5∶0.1～1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材或对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；k.制剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇处理，提取液作为供试品溶液；以阿魏酸对照品配制对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈或甲醇-水-磷酸或醋酸或盐酸溶液＝6～50∶60～95∶0.07～5为流动相，检测波长为为190～410nm中的一个或几个；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
8.按照权利要求7所述治疗冠心病的脉平药物制剂的质量控制方法，其特征在于所述制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a.制剂中银杏叶提取物的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加正丁醇在水浴中温浸提取，提取液蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取银杏叶提取物，同法制备对照提取物溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水＝5∶3∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝溶液，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b.制剂中银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种几种的薄层色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液蒸干，残渣加稀盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取银杏叶提取物，同法制成对照提取物溶液；另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇＝10∶5∶5∶0.6为展开剂，展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏15分钟，在140～160℃加热30分钟，放冷，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照提取物与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；c.制剂中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C中一种或几种的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液蒸干，残渣加稀盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品中的一种或几种，分别制成对照品溶液。照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水＝1∶15∶84为流动相；用蒸发光散射检测器检测；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；d.制剂中维生素C的鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加新煮沸过的冷开水适量与稀醋酸溶液适量，提取，滤过，取续滤液加入活性炭，加热至沸，滤过，滤液作为供试品溶液；供试品溶液中滴加数滴二氯靛粉钠试液，试液颜色消失；供试液中加入硝酸银试液数滴，生成黑色沉淀；e.制剂中芦丁的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液。再取芦丁对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和芦丁对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水＝8∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝试液，置365nm紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；f.制剂中芦丁的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液；以芦丁对照品的甲醇溶液为对照；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸＝37∶58∶5为流动相；检测波长为359nm；供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰；g.制剂中何首乌药材的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液。再取何首乌对照药材，同法制备对照药材溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和何首乌药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以苯-乙醇＝2∶1展开约5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇＝4∶1展开约10cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点；再喷以磷钼酸溶液，稍加热，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条状斑点；h.制剂中大黄素、大黄素甲醚的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加8％盐酸溶液超声提取，再加三氯甲烷加热回流，冷却，离心，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取2次，合并三氯甲烷液，室温挥干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；再取大黄素、大黄素甲醚对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，大黄素对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸＝15∶3∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸汽中显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；i.制剂中大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液；以大黄素对照品、大黄素甲醚对照品的甲醇溶液为对照；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验；色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸＝67∶33∶0.25为流动相；检测波长为288nm.供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。j.制剂中当归药材、阿魏酸的薄层鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，加1％碳酸氢钠溶液超声提取，提取液用稀盐酸调节PH值2～3，再用乙醚提取酸液，提取液挥干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取当归药材，同法制成对照药材溶液；取阿魏酸对照品，制备对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取以上溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯一乙酸乙酯-甲酸＝4∶1∶0.1展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；k.制剂中阿魏酸的高效液相色谱鉴别方法取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇超声提取，提取液作为供试品溶液；以阿魏酸对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验；色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸溶液＝17∶83∶0.07为流动相；检测波长为316nm.供试品色谱中，具有与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。
9.按照权利要求6所述治疗冠心病的脉平药物制剂的质量控制方法，其特征在于所述制剂的含量测定方法包括以下全部或部分内容a.制剂中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇适量，超声处理，取出，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液加入酸性溶液，回流，放冷，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；分别以槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水-磷酸或盐酸或醋酸溶液＝50～90∶50～90∶0.02～5为流动相，检测波长为190～410nm中的一个或几个；以外标一点法或标准曲线法，按照总黄酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量]*2.51计算，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含总黄酮苷不得低于16mg；b.制剂中萜类内酯含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，残渣加稀酸溶液使溶解，用乙酸乙酯或氯仿提取，反复洗涤，合并乙酸乙酯或氯仿液，蒸干，残渣加甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，正丙醇-四氢呋喃-水＝0.1～5∶10～55∶50～95为流动相，用蒸发光散射检测器或紫外检测器或示差折光检测器检测；以外标两点法对数方程计算，总萜类内酯的含量以白果内酯-C15H18O8、银杏内酯A-C20H24O9、银杏内酯B-C20H24O10、银杏内酯C-C20H24O11的总量计，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含萜类内酯不得低于4.0mg；c.制剂中维生素C含量的滴定法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加新煮沸过的冷开水适量与稀酸溶液适量，提取，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，加入淀粉指示剂适量，用碘滴定液滴定至溶液显蓝色并30秒钟内不褪；每1ml的0.1mol/L碘滴定液相当于维生素C-C6H8O68.806mg；待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含维生素C-C6H8O6不得低于68mg；d.制剂中芦丁含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液适当稀适，用微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液；以芦丁对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或甲酸＝7～57∶38～90∶0～5为流动相，检测波长为190～410nm中的一个或几个；以外标一点法或标准曲线法计算，待测平脉制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含芦丁C27H30O16不得低于27mg；e.制剂中阿魏酸含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液；以阿魏酸对照品制备对照品溶液；照中国药典附录公开的高效液相色谱法试验，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈或甲醇-水-磷酸或盐酸或冰醋酸＝7～50∶50～90∶0.02～5为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；柱温20～50℃；以外标一点法或标准曲线法计算，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含阿魏酸C10H10O4不得低于0.8mg；f.制剂中总黄酮含量的分光光度法测定用芦丁对照品配制对照品溶液，并稀释成5或6个有梯度差别的浓度，取这些不同浓度的溶液各等份，以亚硝酸溶液-硝酸铝溶液-氢氧化钠溶液显色，作为标准溶液；或以三氯化铝溶液-醋酸铝溶液-乙醇溶液显色，作为标准溶液；以相应的溶液为空白；照中国药典公开的分光光度法试验，在300～600nm某一波长处测试标准溶液的吸收度，以吸收度为纵坐标、芦丁浓度为横坐标，绘制标准曲线；取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加甲醇或乙醇或甲醇溶液或乙醇溶液提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液，量取供试品溶液，照芦丁对照品溶液显色方法显色，测试吸光度；用标准曲线法或外标一点或二点法计算，即得；待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂含总黄酮以芦丁C27H30O16计不得低于35mg。
10.按照权利要求9所述治疗冠心病的脉平药物制剂的质量控制方法，其特征在于所述制剂的含量测定方法包括以下全部或部分内容a.制剂中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇适量，超声处理，取出，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液加入25％的盐酸溶液，回流30分钟，放冷，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；分别以槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品的甲醇溶液为对照；采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸＝50∶50∶0.2为流动相；检测波长为360nm以外标一点法进行计算，总黄酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量]*2.51，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含总黄酮苷不得低于32mg。b.制剂中萜类内酯含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加2％盐酸使溶解，用乙酸乙酯提取数次，提取液用5％的醋酸钠溶液洗涤，洗涤液再用乙酸乙酯洗涤，乙酸乙酯提取液与洗涤液合并，水洗两次，合并水洗液，再用乙酸乙酯洗涤，合并乙酸乙酯溶液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；另取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品分别制成对照品溶液；采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；正丙醇-四氢呋喃-水＝1∶15∶84为流动相；用蒸发光散射检测器检测；以外标两点法对数方程计算，总萜类内酯的含量以白果内酯C15H1808、银杏内酯AC20H24O9、银杏内酯B C20H24O10、银杏内酯C C20H24O11的总量计，待测脉平制剂含量限度应为一日用脉平制剂中含萜类内酯不得低于8mg；c.制剂中维生素C含量的滴定法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加新煮沸过的冷开水适量与稀醋酸适量，提取，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，加入淀粉指示剂适量，用0.1mol/L碘滴定液滴定至终点，溶液显蓝色并30秒钟内不褪；每1ml碘滴定液0.1mol/L相当于维生素C C6H8O68.806mg，待测脉平制剂含量限度应为日用剂量含维生素C C6H8O6不得低于135mg；d.制剂中芦丁含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，混匀，从中取一部分精密称定，置锥形瓶中，加甲醇提取，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液适当稀适，用微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液，以芦丁对照品的甲醇溶液为对照，采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸＝32∶67∶1为流动相；检测波长为359nm；以外标一点法进行计算，待测平脉制剂含量限度应为日用剂量含芦丁C27H30O16不得低于54mg；e.制剂中阿魏酸含量的高效液相色谱法测定取待测脉平制剂内容物适量，置锥形瓶中，加70％甲醇加热回流30分钟，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液，以阿魏酸对照品的甲醇溶液为对照，采用高效液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸＝17∶83∶0.07为流动相；检测波长为316nm；柱温35℃；以外标一点法进行计算，待测脉平制剂含量限度应为一日用剂量含阿魏酸C10H10O4不得低于1.6mg；f.制剂中总黄酮含量的分光光度法测定精密称取芦丁对照品，用加50％甲醇配制成每1ml含0.2mg的溶液；精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，置10ml的量瓶中，加50％甲醇至5ml，分别加入5％的亚硝酸钠溶液0.3ml，混匀，放置6分钟，再加入10％的硝酸铝溶液0.3ml，混匀，放置6分钟，各加入氢氧化钠试液4ml，再加50％甲醇至刻度，混匀；以相应的溶液为空白；照中国药典公开的分光光度法，在510nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线；取待测脉平颗粒剂适量，置锥形瓶中，加50％甲醇超声20分钟，放至室温，补足损失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。量取供试品溶液，自标准曲线法“加50％甲醇至5ml，”做起，测试吸光度，从标准曲线上读出相当于芦丁的重量，计算，即得；本品一日用剂量含总黄酮以芦丁C27H30O16计不得低于70mg。
全文摘要
本发明提供了一种治疗冠心病的脉平药物制剂及其制备方法和质量控制方法，按照重量组分计算，它主要由银杏叶提取物12.5g、维生素C 12.5g、芦丁5g、何首乌1000g、当归500g或用相应重量份它们的提取物制作而成。与现有技术相比，本发明制剂对于冠心病、心绞痛等疾病具有显著的治疗效果；所提供的胶囊抗湿性能力强，取消了糖粉，更有利于老年人和糖尿病患者的服用，生物利用度高；所提供的微丸吸收均匀而有规则，可以提高药物与胃肠道的接触面积，使药物吸收完全，提高生物利用度，同时外形美观、流动性好、释药稳定、局部刺激性小，不易吸湿，所提供的软胶囊，生物利用度高，有效成分起效快。
文档编号A61K9/00GK1876028SQ20061020042
公开日2006年12月13日 申请日期2006年5月8日 优先权日2005年5月12日
发明者周霞 申请人:贵阳云岩西创药物科技开发有限公司