专利名称：吴茱萸提取物及其制备方法、药物组合物和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种吴茱萸提取物及其制备方法、药物组合物和用途，属于药物 技术领域。
背景技术：
吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Evodia rutaecarpa(Juss.)Benth.或石虎Evodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang或疏毛吴茱萸Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huangd的干燥近成熟果实，根据民间用药经验，其干燥近成熟果实可药用，具有散寒止痛、降逆止呕、助阳止泻等功能。吴茱萸既可单用，也可入复方。在苗族民间，吴茱萸与黄连配伍，具有清泻肝火、降逆止呕的功能，用于治疗肝火犯胃之胁肋疼痛，嘈杂吞酸，呕吐口苦，舌红苔黄，脉弦数之证。
目前，吴茱萸的提取一般采用的是常规的水提醇沉法或醇提法，但对于吴茱萸提取物的药理学研究尚未见报道。申请人经过广泛深入的研究发现，通过将吴茱萸用有机溶剂、含水有机溶剂或水在一定条件下提取得到的吴茱萸提取物对小鼠具有显著的止呕、止泻、抗实验性胃溃疡作用；镇痛和抑制体温上升作用；降血压、抗血栓形成作用；抗肿瘤作用。并显示出良好的治疗消化系统疾病，中枢神经系统疾病，心血管系统疾病和肿瘤疾病的作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种吴茱萸提取物及其制备方法、药物组合物和用途。本发明吴茱萸提取物具有显著的止呕、止泻、抗实验性胃溃疡作用；镇痛和抑制体温上升作用；降血压、抗血栓形成作用；抗肿瘤作用。特别是对呕吐、腹泻、胃溃疡、疼痛、体温异常、高血压、血栓、肿瘤等疾病具有良好的治疗作用。
本发明是这样实现的吴茱萸提取物的制备方法为将新鲜采集的吴茱萸近成熟果实晾干粉碎，得到吴茱萸粗粉，然后用有机溶剂、含水有机溶剂或水加热回流或渗滤提取2～4次，提取液浓缩干燥后得到吴茱萸提取物。
所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或汽油。
具体的说，吴茱萸水提取物的制备方法为取吴茱萸适量，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至60℃测相对密度为1.30，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置过夜，取上清液减压浓缩至相对密度为1.25的稠膏，75℃减压干燥，即得。
吴茱萸醇提取物的制备方法为取吴茱萸适量，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得。
按上述吴茱萸提取物制备方法提取得到的吴茱萸提取物。
由上述吴茱萸提取物组成的药物组合物包括作为活性成分的吴茱萸提取物和一种或多种药用载体或赋形剂。
本发明吴茱萸提取物用于制备治疗消化系统疾病的药物。
所述的消化系统疾病为呕吐、腹泻或胃溃疡。
本发明吴茱萸提取物用于制备治疗中枢神经系统疾病的药物。
所述的中枢神经系统疾病为疼痛、体温异常。
本发明吴茱萸提取物用于制备治疗心血管系统疾病的药物。
所述的心血管系统疾病为高血压、血栓。
本发明吴茱萸提取物用于制备治疗肿瘤疾病的药物。
本发明吴茱萸提取物可单独或以药物组合物形式使用，因此还涉及含有作为活性成份的有效剂量的吴茱萸提取物以及常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1-90％重量的吴茱萸提取物。药物组合物可根据本领域已知的方法制备。如果需要，可将吴茱萸提取物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式。
本发明的吴茱萸提取物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。给药剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、检剂、膏剂、贴剂、注射剂、冻干粉针剂等。可以是普通制剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片、多层片。为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氮化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、高岭土、滑石粉等；粘合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。为了将给药单元制成检剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。为了将给药单元制成胶囊，将有效成分吴茱萸提取物与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶囊或软胶囊中。也可将有效成分吴茱萸提取物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域常用的所有稀释剂，例如水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。
本发明吴茱萸提取物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重及个体反应，所用的具体化合物，给药途径及给药次数等。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药。
为了验证本发明制备方法的合理性，申请人对吴茱萸的提取工艺进行了试验研究和筛选，具体如下 一、吴茱萸水提取工艺的研究 影响煎煮的主要因素有药材粉碎粒度、煎煮次数、加水量及煎煮时间等，申请人经过研究发现通过以下方法优选出的提取工艺可以认为是吴茱萸的最佳水提取工艺，所得的提取物疗效最好。
取吴茱萸药材适量，按下表1试验，以出膏率及吴茱萸的药理活性评分作为评价指标进行提取工艺的优选，结果见表2、表3 表1吴茱萸提取工艺研究的因素水平表
表2吴茱萸提取工艺优选结果表 表3正交试验方差分析表 注F0.05(2，2)＝19.00 研究结果表明各因素对吴茱萸水提取工艺影响大小的顺序为C＞B＞A＞D，其中B、C两个因素有显著性差异，B2＞B3＞B1，C2＞C3＞C1，因此，提取次数选2次，加水量选10倍；A、D两个因素没有显著性差异，但考虑到生产实际，选择粗粉，以方便过滤提取液，煎煮时间第一次定为2小时，第二次定为1.5小时。
因此，吴茱萸水提取物的最佳提取工艺为取吴茱萸适量，粉碎成粗粉，加10倍量的水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液。
吴茱萸药材经水提浓缩后，除杂相当关键，申请人采用不同浓度的乙醇进行醇沉以除去杂质，方法如下 取吴茱萸粗粉，按优选的水提煎煮条件煎煮提取，减压浓缩(60-75℃，-0.08Mpa)至相对相密度1.30(60℃)，摇匀，量取一定量浓缩液，加乙醇，使乙醇含量为60％、70％、80％，醇沉24小时，取上清液减压回收乙醇，挥干，减压干燥(65-80℃，-0.08Mpa)，称醇提物重量；醇沉物减压干燥(65-80℃，-0.08Mpa)，称杂质重量。测定醇提物的药理活性，试验结果见表4。
表4除杂工艺研究结果表 研究结果表明醇沉浓度为70％时，除去的杂质最多，同时药理活性最高，因此，选用70％的乙醇浓度作为去除杂质的浓度。
浓缩工艺的研究申请人考察了减压浓缩和常压浓缩两种方法，经过优选发现，减压浓缩和常压浓缩两种方法比较，减压浓缩较常压浓缩快，节约时间，且药理活性比常压浓缩高，因此，选择减压浓缩作为本提取物制备的浓缩方法。
干燥工艺申请人研究发现，干燥温度对提取物的药理活性有一定的影响，本提取物在75℃减压干燥的药理活性最好，因此，选择75℃减压干燥作为本提取物的干燥方法。
二、吴茱萸醇提取工艺的研究 影响提取的主要因素有提取次数、溶媒用量、溶媒浓度及提取时间等，申请人经过研究发现通过以下方法优选出的提取工艺可以认为是吴茱萸的最佳醇提取工艺，所得的提取物疗效最好。
取吴茱萸药材适量，粉碎成细粉，按表5进行试验，结果见表6、表7 表5吴茱萸醇提取工艺研究的因素水平表
表6吴茱萸醇提取工艺优选结果表 表7正交试验方差分析表 注F0.05(2，2)＝19.00 研究结果表明各因素对吴茱萸醇提取工艺影响大小顺序为C＞B＞A＞D，通过直观分析，选择C2、B2、A2、D2作为最佳提取工艺，即吴茱萸适量，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得吴茱萸醇提取物。
为了确保本发明的效果，申请人对所述吴茱萸提取物进行了生物活性实验，具体如下 观察指标吴茱萸提取物对家鸽的止呕作用，对小鼠的止泻作用，对大鼠抗实验性胃溃疡作用，对小鼠抑制醋酸所致的疼痛作用，对大鼠降血压作用。
该生物活性实验所采用的吴茱萸提取物均为用乙醇作为提取溶剂得到的提取物。
1.吴茱萸提取物对家鸽的止呕作用 方法与结果家鸽40只，随机分为5组，每组8只空白对照组(给予同容积辅料)、阳性药组(抑眩宁0.5g/kg)、吴茱萸提取物高、中、低3个剂量组(3g/kg、6g/kg、12g/kg)。ig给药，连续7d实验前动物禁食不禁水12h。末次给药后1h，给予4％的硫酸铜溶液1ml/kg，记录动物呕吐潜伏期和1h内呕吐次数。结果见表8 表8吴茱萸提取物硫酸铜致家鸽呕吐的影响(X±s) 结果表明吴茱萸提取物高、中剂量组对硫酸铜致家鸽呕吐潜伏期明显增加，呕吐次数明显减少，说明该提取物具有良好的止呕作用。
2.吴茱萸提取物对小鼠的止泻作用 方法与结果NIH小鼠雌雄兼用，随机分3组，吴茱萸提取物组预先给药3天(0.2ml/10g)，每日一次，末次给药前禁食12h，末次给药0.5h后，小鼠灌服100％番泻叶水煎剂0.4ml/只，然后将小鼠放在垫纸的铁丝网上，上罩有大漏斗，每隔2h换垫纸，分别计算0～2h，2h～4h，4h～6h三个时间段内腹泻次数以及6h内腹泻累积次数，结果见表9。
表9吴茱萸提取物对番泻叶所致小鼠腹泻的影响(X±s) 结果表明吴茱萸提取物对番泻叶所致小鼠腹泻具有良好的止泻作用。
3.吴茱萸提取物对大鼠抗实验性胃溃疡作用 方法与结果大白鼠实验前适应性饲养1周，禁食给水24h，乙醚浅麻，无菌操作，常规皮肤消毒，剑突下腹正中切口2-2.5cm，分离肌层，剖腹轻轻拉出胃，于幽门窦上方无血管处浆膜下注射20％醋酸50μl，将胃送回，分层缝合，局部皮肤乙醇消毒。取造模大白鼠，于造模(术后)第2天分组灌胃给药。试验设高、中、低3个剂量组，分别为吴茱萸提取物溶液0.30、0.15、0.075(ml/kg)，灌胃容积为0.2ml/kg·BW，1次/d，3d称重1次，按体重计算给药。给药12d后禁食24h，断头处死，剖腹，结扎幽门，由食道注入1％福尔马林10ml，结扎食道端，取胃放入1％甲醛烧杯中，20min后将胃平展于玻璃板上，用滤纸吸干溃疡内及周围水分，用微量注射器滴注墨汁法测量溃疡体积，以溃疡与黏膜水平面所需的墨汁量作为溃疡体积。结果见表10 表10吴茱萸提取物对大鼠抗实验性胃溃疡的影响(n＝10，x±s) 结果表明吴茱萸提取物对大鼠实验性胃溃疡具有明显的保护作用。
4.吴茱萸提取物对醋酸所致小鼠疼痛的影响 方法与结果昆明种小白鼠40只，体重18-22g，♀♂各半，将小白鼠腹部的毛剪掉，随机分为2组，每组20只。给药组灌服吴茱萸提取物0.3g/10g，对照组灌服等量生理盐水。给药后30min，各鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/只。观察并记录注射醋酸溶液后15-30min内出现扭体反应的次数及时间。计算吴茱萸提取物的镇痛百分率。结果见表11。
结果表明吴茱萸提取物对醋酸所致小白鼠扭体反应有明显的抑制作用。
表11吴茱萸提取物对醋酸所致小白鼠扭体反应的影响(x±s) 5.吴茱萸提取物降血压作用的动物实验研究 方法与结果 ①自发性高血压大鼠(SHR) 50只SHR，雌雄兼用，体重220g±20g，按性别分笼饲养，每笼5只，自由饮水，喂以21％高蛋白块料，每日添加块料1次，换新鲜自来水2次。按体重和血压随机分组，即空白对照组(给予生理盐水)，吴茱萸提取物高剂量组(60mg/kg)、中剂量组(20mg/kg)、低剂量组(10mg/kg)，牛黄降压丸高剂量组(用药量为0.4mL/kg)每组10只，各组动物均以灌胃给药。
②对SHR降压作用的实验 单次给药的降压实验测压前将大鼠放入37℃±1℃的电热恒温箱内加温，10min后用CRB2型大鼠电脑血压心率仪间接测定大鼠尾动脉收缩压(SBP)。正式实验前每天测压训练1次，约2周，待大鼠适应环境、血压稳定后，实验时取5组。测定给药前及给药后2、4、6、24h的SBP，比较动物自身给药前后SBP均数差异的显著性。多次给药的降压实验每日灌药1次。疗程各组连续给药14d，每日测定SBP(方法同前)。比较各给药组与对照组SBP均数差异的显著性。结果见表12 表12各组SHR连续给药14d的降压效果比较(x±s) 注(1)收缩压下降1.33kPa者为有效；(2)与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。
结果表明吴茱萸提取物有不同程度的降血压作用。
结论通过以上实验结果表明，吴茱萸提取物具有显著的止呕、止泻、抗实验性胃溃疡作用；镇痛和抑制体温上升作用；降血压、抗血栓形成作用；抗肿瘤作用。特别是对呕吐、腹泻、胃溃疡、疼痛、体温异常、高血压、血栓、肿瘤等疾病具有良好的治疗作用。
具体实施例方式 本发明的实施例1吴茱萸水提取物的制备 取吴茱萸近成熟果实干品10kg，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至60℃测相对密度为1.30，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置过夜，取上清液减压浓缩至相对密度为1.25的稠膏，75℃减压干燥，即得吴茱萸水提取物260g。
本发明的实施例2吴茱萸乙醇提取物的制备 取吴茱萸近成熟果实干品10kg，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得吴茱萸乙醇提取物380g。
本发明的实施例3吴茱萸石油醚提取物的制备 将吴茱萸近成熟果实干品10kg粉碎后，用石油醚加热回流提取，每次用石油醚40L，提取3次，合并提取液，减压蒸发至干，得到石油醚提取物360g。
本发明的实施例4吴茱萸乙酸乙酯水溶液提取物的制备 将吴茱萸近成熟果实干品10kg粉碎后，用乙酸乙酯水溶液加热回流提取，每次用乙酸乙酯水溶液60L，提取2次，合并提取液，减压蒸发至干，得到乙酸乙酯水溶液提取物230g。
本发明的实施例5吴茱萸三氯甲烷提取物的制备 将吴茱萸近成熟果实干品10kg粉碎后，用三氯甲烷渗滤提取，每次用三氯甲烷30L，提取4次，合并提取液，减压蒸发至干，得到三氯甲烷提取物200g。
本发明的实施例6含吴茱萸提取物的药物组合物1 按下述配比称取原料桂枝9g、白芍12g、黄芪12g、贝壳10g、黄连9g、吴茱萸提取物9g、川楝子9g、延胡索9g、海螵蛸15g、贝母10g、白及10g、三七10g。以上药物混匀粉碎成细粉，过200目筛，经浓缩加工后装入胶囊，每粒0.3g。本制剂口服，每次4粒，每日3次，餐前半小时服用，用于治疗呕吐、腹泻、胃溃疡等消化系统疾病。
本发明的实施例7含吴茱萸提取物的药物组合物2 称取丹参500g，加60％的乙醇低温(50-60℃)回流2次，每次4小时，合并提取液，减压回收乙醇，低温干燥，得浸膏备用；上述丹参药渣加10量水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，浓缩，干燥，浸膏与上述浸膏及吴茱萸提取物100g混合，粉碎，湿法制颗粒，干燥，制成颗粒剂。本制剂口服，每次10g，一日3次，用于治疗中枢神经系统疾病如疼痛、体温异常等。
本发明的实施例8含吴茱萸提取物的药物组合物3 按下述配比称取原料吴茱萸30g、刺蒺藜20g、夏枯草15g、茺蔚子15g，水煎取汁200ml，以1∶10的比例兑入温水中，每日早、晚两次泡脚，各30min。对轻中度原发性高血压患者、血栓患者具有良好的疗效。
本发明的实施例9含吴茱萸提取物的药物组合物4 按下述配比称取原料吴茱萸6g、沉香片7g、干姜8g、炙甘草3g、法吴茱萸15g、茯苓15g，桂枝、炙鸡内金、炒白术、党参、川朴、枳实各10g，炙蜈蚣8条，加水煎煮，按传统方法制备成汤液。每日1剂，用于治疗食道癌，症见形瘦而委黄，呕吐痰涎，胃气上逆等。
本发明的实施例10吴茱萸提取物单方制剂 称取吴茱萸提取物180g、植物油141.12g、蜂蜡2.88g混匀，用胶体研磨机研磨均匀，用压制法罐装成软胶囊，制成1000粒，每粒0.36g。本制剂口服，一次2-4粒，一日3次。用于治疗胃寒呕吐、呃逆、虚寒泻泄症等。
权利要求
1.吴茱萸提取物的制备方法，其特征在于将新鲜采集的吴茱萸近成熟果实晾干粉碎，得到吴茱萸粗粉，然后用有机溶剂、含水有机溶剂或水加热回流或渗滤提取2～4次，提取液浓缩干燥后得到吴茱萸提取物。
2.按照权利要求1所述吴茱萸提取物的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或汽油。
3.按照权利要求1或2所述吴茱萸提取物的制备方法，其特征在于取吴茱萸适量，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至60℃测相对密度为1.30，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置过夜，取上清液减压浓缩至相对密度为1.25的稠膏，75℃减压干燥，即得吴茱萸水提取物。
4.按照权利要求1或2所述吴茱萸提取物的制备方法，其特征在于取吴茱萸适量，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得吴茱萸醇提取物。
5.如权利要求1所述吴茱萸提取物制备方法提取得到的吴茱萸提取物。
6.如权利要求5所述的吴茱萸提取物组成的药物组合物，其特征在于包括作为活性成分的吴茱萸提取物和一种或多种药用载体或赋形剂。
7.如权利要求5所述的吴茱萸提取物用于制备治疗消化系统疾病的药物。
8.按照权利要求7所述吴茱萸提取物的用途，其特征在于所述的消化系统疾病为呕吐、腹泻或胃溃疡。
9.如权利要求5所述的吴茱萸提取物用于制备治疗中枢神经系统疾病的药物。
10.按照权利要求9所述吴茱萸提取物的用途，其特征在于所述的中枢神经系统疾病为疼痛、体温异常。
11.如权利要求5所述的吴茱萸提取物用于制备治疗心血管系统疾病的药物。
12.按照权利要求11所述吴茱萸提取物的用途，其特征在于所述的心血管系统疾病为高血压、血栓。
13.如权利要求5所述的吴茱萸提取物用于制备治疗肿瘤疾病的药物。
全文摘要
本发明提供了一种吴茱萸提取物及其制备方法、药物组合物和用途。吴茱萸提取物是将新鲜采集的吴茱萸近成熟果实晾干粉碎，得到吴茱萸粗粉，然后用有机溶剂、含水有机溶剂或水加热回流或渗滤提取2～4次，提取液浓缩干燥后得到的。本发明吴茱萸提取物具有显著的止呕、止泻、抗实验性胃溃疡作用；镇痛和抑制体温上升作用；降血压、抗血栓形成作用；抗肿瘤作用。特别是对消化系统疾病如呕吐、腹泻、胃溃疡；中枢神经系统疾病如疼痛、体温异常；心血管系统疾病如高血压、血栓；肿瘤疾病具有治疗作用。
文档编号A61P29/00GK1931271SQ20061020092
公开日2007年3月21日 申请日期2006年9月27日 优先权日2006年9月27日
发明者周欣, 陈华国, 雷培海, 刘海, 周伟 申请人:贵州师范大学