专利名称：用于改善毛发生长的包含可溶于非极性溶剂的斑蝥提取物作为活性成分的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种刺激毛发生长的组合物，其包含作为活性成分的斑蝥的非极性溶剂提取级分。
背景技术：
已知脱发，即毛发损失的原因包括遗传因素、雄性激素睾酮分泌过多、皮脂分泌过多、毛囊中的血流减少、应激、饮食、空气污染、毛发条件等。迄今，开发的毛发损失预防剂的代表药物是非那司提(美国专利5,547,957)。它是2，5α-还原酶的特异性抑制剂，2，5α-还原酶为使雄性激素睾酮(androgenic testosterone)代谢成二氢睾酮(DHT)的酶，二氢睾酮为雄激素性脱发的主要原因。该化合物已由Merck Co.U.S.A.以商品名“PROPECIA”商品化，并已获得美国FDA批准。然而，为了保持毛发损失治疗的效果，必须连续服用该片剂。而且，孕妇不能施用PROPECIA，因为有可能吸收。同时，在PROPECIA的临床研究中，已报道当男性长期使用其时，会经历一些性的副作用，例如对性的渴望变少、勃起功能障碍或精液量减少。
最初，米诺地尔为引入用于治疗高血压的直接血管扩张剂。在发现米诺地尔具有毛发生长的副作用后，其局部用溶液剂已作为毛发损失治疗剂商品化(韩国专利10-2003-0020446，美国专利4,596,812；4,139,619)。已知米诺地尔在生长新的毛发中的功效归于复杂的药物机理。米诺地尔为美国FDA批准的用于刺激毛发生长的唯一局部用药物，但是具有例如皮肤刺激、痒、发红、毛发损失的加重等副作用。同样，为了保持其毛发生长效应，该药物必须连续使用。
斑蝥(cantharis)为亮绿色软体斑蝥(blister beetle)——一种芫菁科的甲虫，其包括Epicauta gorhami Marseue、Lytta vesicaforia Latreille、Mylabris cichorii Linne和Mylabris phalerata Pallas等。术语斑蝥也被应用到有毒的粉末状甲虫制剂，所述制剂用作利尿药、对抗刺激剂和催欲剂，包含斑蝥素及少量脂质和芳香剂。因为在口服给药后斑蝥诱导非常高的毒性，因此，它通常仅局部施用用于有限的用途。它被用于皮肤血瘀斑或渗血(Herbology，pp 646-647，Young Lim Publishing Company，Korea出版于1991年)。
韩国专利Laid-Open公布2003-0070780公开了一种草药组合物，其包含包括斑蝥在内的几种草药，并公开了基于其的抗炎硬膏剂。韩国专利Laid-Open公布1995-0007864公开了一种泡沫溶液和一种治疗方法，所述泡沫溶液是通过共同研磨斑蝥与三种草药，用醇提取它们并过滤醇溶液来制备的，所述治疗方法为其中将所述泡沫溶液用于穴位以形成水疱，然后从所述水疱中除去有毒渗出物。
在日本专利Laid-Open公布2561116中介绍了一种由14种草药组分制成的生发油。斑蝥被包含于该生发油中。然而，其可诱导副作用例如皮肤刺激，甚至形成痂，因为当施用到皮肤上时，斑蝥也具有严重的毒性。
为完成本发明，本发明人对毛发生长进行了深入细致和彻底的研究，用不同溶剂中的斑蝥提取级分筛选药理学活性和皮肤毒性后，结果发现，斑蝥在己烷和非极性有机溶剂中的提取级分对毛发生长具有极好的刺激活性，而对皮肤具有低刺激。
发明内容
技术问题因此，本发明的一个目的是提供一种基于斑蝥的可溶于非极性溶剂的提取级分的组合物，其具有极好的毛发生长刺激活性和对皮肤低的副作用。
技术方案根据本发明的一个方面，(提供了)用于刺激毛发生长的组合物，其包含作为有效成份的斑蝥的可溶于非极性溶剂的提取级分。在本发明中有用的斑蝥选自Epicauta gorhami Marseue、Lytta vesicaforia Latreille、Mylabris cichorii Linne、Mylabris phalerata Pallas等及其组合。
用于提取斑蝥的非极性溶剂选自己烷、丙酮、氯仿、二氯甲烷和乙酸乙酯，优选己烷。
优选地，基于100重量份的组合物，用非极性溶剂提取的斑蝥提取物的含量为0.001至10重量份。
在提取前，使用常规方法干燥斑蝥。根据典型的方法在有机溶剂中提取干燥的斑蝥或其粉末。
包含在本发明的组合物中的斑蝥的可溶于非极性溶剂的提取级分可通过下述方法制备(1)细碎地切割或研磨干燥的斑蝥，(2)用约2至30重量份的水、具有一至四个碳原子的低级醇或其组合提取其一次或数次，使用冷沉淀、超声粉碎或回流冷却，然后过滤、真空浓缩或干燥该提取物以得到粗提物，并(3)将所述粗提物在水中的悬浮液加入到约1至20体积的非极性溶剂中，将其分级分离(fractioning)一次至五次，在真空压力下浓缩各级分。任选地，还可进行典型的分级分离过程。
当评价对毛发生长和皮肤的效应时，发现在该方法中制备的斑蝥的可溶于非极性溶剂的提取级分具有极好的毛发生长刺激活性，而皮肤刺激极小。
特别地，斑蝥的可溶于己烷的提取级分显示出最优的毛发生长刺激效应。用像己烷的有机溶剂例如丙酮、氯仿、二氯甲烷和乙酸乙酯提取的提取级分也高度刺激毛发生长和诱导较小的皮肤刺激。
正如根据本发明用于刺激毛发生长的组合物组分可使用斑蝥的可溶于非极性溶剂的提取级分及其他成分制备。那些是当将其局部施用于头皮上时可改善毛发生长的毛发生长刺激剂或成分，或具有不同于上述成分的功能的任何其他有效成分。
根据本发明用于刺激毛发生长的组合物可被配制用作医药或非医药供应品或化妆品。
优选地，根据本发明用于刺激毛发生长的组合物可被配制成局部用的剂型，其包括医药或非医药供应品和化妆品，所述医药或非医药供应品例如液体、洗剂、乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、气雾剂等，所述化妆品例如洗发剂、洗发香波和冲洗剂、生发油、发乳、发油、喷雾剂等。
为了制备根据本发明的用于刺激毛发生长的组合物，有效组分可与在供外用的医药或非医药供应品或化妆品中使用的常规添加剂一起配制。详细地，可使用溶剂例如水、有机溶剂、混合溶剂、多种溶液、增溶剂、表面活性剂、渗透促进剂、增湿剂、增稠剂、pH调节剂、防腐剂、稳定剂、缓冲剂、着色剂、香料等。
优选地，根据本发明的刺激毛发生长的组合物直接涂敷或喷雾在头皮上。
本发明组合物的剂量可根据个体的情况例如年龄、毛发损失阶段等以及处方而改变。通常，可将适宜量的组合物施用在头皮上，每天一次或数次，持续一周至数月。
实施本发明的最佳方式根据下述实施例可更好地理解本发明，提出所述实施例是为了阐述，而不应解释为限制本发明。
实施例用于刺激毛发生长的组合物1)斑蝥的可溶于己烷的提取级分的制备过滤在2升甲醇中冷沉淀300g斑蝥48小时得到的溶液，减压浓缩。重复该过程三次。得到约30g斑蝥粗提物。用300的己烷将在300纯水中的斑蝥粗提物悬浮液分级分离三次，在减压下浓缩可溶于己烷的级分。得到约13g的斑蝥的可溶于己烷的油状提取级分。
2)供外用的刺激毛发生长的组合物的制备将在实施例1)中制备的斑蝥的可溶于己烷的提取级分溶解在40％乙醇和Lauroglycol FCC(Gateffosse，France)(9∶1)的混合物中以得到供外用的3％的组合物。如下评价其药理学活性和皮肤刺激。将纯水用作对照。将含有5％米诺地尔的Minoxyl溶液(Hyundai Pharm.Ind.Co.，Korea)用作参照1，将实施例1)的粗斑蝥提取物在纯水中的1％的溶液作为参照2。
2-1)毛发生长使用C57BL/6小鼠测定在实施例2中制备的组合物的毛发生长活性。
在购买4周龄小鼠并使其适应无菌动物实验室2周后，除去小鼠背部的毛发，使小鼠稳定一天。每个试验组使用8只小鼠。
从毛发被除去后的第二天直至毛发产生的时间作为从过渡期至毛发生长期进行的对照组毛发生长周期，以200的剂量一天一次地将根据本发明的组合物、对照和参照施用于小鼠的除去毛发的背部。
用数字照相机对小鼠背部毛发除去区域和毛发生长区域照相。使用图像分析程序(Image-pro Express 4.5，Mediacybemetics Co.，U.S.A.)数字化照片中的区域。毛发生长比例被计算为毛发生长区域与毛发除去区域的百分比。将结果列在下文表1中。
2-2)皮肤刺激使用C57BL/6小鼠测定由实施例2中制备的组合物引起的皮肤刺激。
利用在实施例2-1)中相同的方法施用样品。在施用后第4天，如下评价皮肤刺激的程度0；无刺激，1；轻微红斑，2；红斑，3；轻微的痂，和4；痂。将结果列在下文表1中。
正如从表1的数据显而易见的是，本发明组合物的毛发生长活性是极好的。其毛发生长比例比参照1的米诺地尔的两倍还高。然而，与对照组相比，其在皮肤刺激方面没有显示出任何显著性差异。
与米诺地尔相比，参照2的斑蝥粗提物也产生极好的毛发生长比例。但是，其诱导了严重的皮肤刺激，例如痂形成，这使其不适于外用。
表1
*平均值±SD(n＝8)*与参照1有显著性差异(P＝0.05)与对照有显著性差异(P＝0.05)本发明的方案制备实施例1用于刺激毛发生长的局部溶液2的制备通过将实施例1中制备的斑蝥的可溶于己烷的提取级分溶解在40％乙醇中制备2％的外用溶液。
制备实施例2用于刺激毛发生长的局部溶液3的制备通过将实施例1)中制备的斑蝥的可溶于己烷的提取级分溶解在10％Transcutol(Gateffosse，France)中制备2％的外用溶液。
制备实施例3用于刺激毛发生长的生发油1的制备斑蝥的可溶于己烷的提取级分 1g乙醇 40樟脑 1g维生素B6 0.2g甘草酸 0.1g生育酚乙酸酯 0.1g
香料 0.2纯水 适量至100均匀混合所有的成分并在室温溶解。
制备实施例4用于刺激毛发生长的生发油2的制备斑蝥的可溶于己烷的提取物级分 1g聚乙二醇4000 50L-薄荷醇 1g甘油 2g香料 0.2聚氧乙烯氢化蓖麻油 0.5纯水 适量至100均匀混合所有的成分并在室温溶解。
工业实用性如在上文中描述的，根据本发明的用于刺激毛发生长的组合物可显示出极好的毛发生长活性，而皮肤刺激极小。
因此，本发明的组合物可在药材、非药材和化妆品领域中得到用于毛发生长的多种应用。
尽管已公开了用于阐述性目的的本发明优选的实施方案，但本领域技术人员会理解，在不背离如在所附的权利要求中公开的本发明的范围和精神下，各种修饰、增加和取代是可能的。
权利要求
1.用于刺激毛发生长的组合物，其包含作为活性成分的用非极性溶剂提取的斑蝥提取级分。
2.如权利要求1中定义的组合物，其中所述非极性溶剂选自己烷、丙酮、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯及其组合。
3.如权利要求1中定义的组合物，其中基于100重量份的所述组合物，所述用非极性溶剂提取的斑蝥提取级分的含量为0.001至10重量份。
4.如权利要求1至3之一定义的组合物，其中所述组合物是供外用的。
5.如权利要求4中定义的组合物，其中所述组合物被配制用于医药或非医药供应品或化妆品。
全文摘要
本文公开了一种刺激毛发生长的组合物，其包含作为活性成分的斑蝥的可溶于非极性溶剂的提取级分。与常规组合物相比，所述组合物显示出极好的毛发生长活性，而皮肤刺激极小。其可在不同领域中用于毛发生长，包括医药和非医药供应品以及化妆品。
文档编号A61P17/14GK101090705SQ200680001511
公开日2007年12月19日 申请日期2006年1月18日 优先权日2005年1月20日
发明者池相哲, 金成庸 申请人:广东制药株式会社