用细胞因子混合物对Ⅱ类人类白细胞抗原在肿瘤细胞表面上的表达进行调节的方法

专利名称：：用细胞因子混合物对Ⅱ类人类白细胞抗原在肿瘤细胞表面上的表达进行调节的方法
技术领域：
：本发明是关于一种方法，该方法通过用无血清且无促分裂原(mitogen)的混合物来改变肿瘤浸润单核细胞的组成、提高CD4VCD8+比值、提高肿瘤间质/上皮比值，并调节II类人类白细胞抗原(HumanLeucocyteAntigen,HLA)在肿瘤细胞表面上的表达，所述无血清且无促分裂原的混合物具有选自由IL-1(3、TNF-ouIFN-y、GM-CSF和白介素-2(IL-2)所组成的组中的特定细胞因子比例，IL-1(3、TNF-ouIFN-y、GM-CSF和白介素分别具有特定的比例。由细胞因子比例组成的无血清且无促分裂原的混合物包括白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧。
背景技术：
：免疫逃逸机制在肿瘤免疫中具有重要影响。通过抗原调节(antigenicmodulation)、抗原掩蔽(antigenmasking)以及产生封闭因子(blockingfactor)和遗传因子或者通过存在或缺少肿瘤产物或生长因子，免疫原性肿瘤(neoplasm)表现出逃避免疫系统效应器的保护。免疫逃逸的决定因素之一为II类HLA在肿瘤细胞上的表达。II类HLA分子在抗原呈递和被CD4+T淋巴细胞识别的过程中起到重要作用。它们的表达反映了存在或者缺乏宿主免疫活性细胞消除肿瘤所必需的重要辅助因子。在人自身免疫疾病以及特定癌症的大多数靶组织上和激活的表达IL-2受体的T淋巴细胞中，发现了II类HLA的表达。自身免疫疾病和特定类型癌症的局部位置导致II类HLA过度表达的观察结果暗示，组织抗原呈递能力通过持续地使自体-抗原-反应性T淋巴细胞再活化而对自身免疫疾病长存或癌症进展的机制做出重要贡献。自身免疫状态例如格雷夫斯甲状腺炎(Graves'thyroiditis)似乎使自体-抗原-反应性T淋巴细胞再活化，其中，干扰素-Y(interferon-gamma，IFN-y)诱导II类在甲状腺细胞上的表达(FILdmanetal，"Molecularmechanismsinvolvedinhumanautoimmunediseases:relevanceofchronicantigenpresentationClassIIexpressionandcytokineproduction",7mmwwo/Swpp/，2:66-73(1989))。所述甲状腺细胞然后表达II类抗原，并将它们的自体抗原呈递至克隆自格雷夫斯氏病患者甲状腺组织的T细胞。在癌中，当肿瘤生长因子和肿瘤破坏因子之间的平衡有利于肿瘤时，发生免疫逃逸。可以促成免疫逃逸的因子包括肿瘤动力学、抗原调节、抗原掩蔽和封闭因子。例如，抗原调节通过移除免疫系统效应细胞将识别的靶抗原而有利于逃逸。公知的是，在免疫治疗过程中，当给予异基因抗体时，这会发生。由于特定分子结合于肿瘤细胞表面，并掩蔽所述肿瘤抗原，从而防止攻击性淋巴细胞的吸附，因此也可以产生从效应细胞逃逸的肿瘤。除抗原外的其它肿瘤产物也能引起免疫应答破坏。所述产物包括前列腺素以及其它破坏炎症应答、趋化性和补体级联反应(complementcascade)的体液因素。肿瘤从免疫控制下逃逸的能力取决于免疫系统作用和促进逃逸的多种因素之间的平衡。关于主要组织相容性座位(locus)，值得注意的是，在I类HLA抗原以及诸如HLA-DR、CD44禾卩ICAM-1(细胞间粘附分子-l)的其它分子的表达中的分子变化会影响肿瘤进展(tumorprogression)。有趣的是，特定细胞表面抗原的存在或缺乏与特定类型癌症的预后不良相关。例如，几个小组已经报道了I类HLA抗原在肿瘤细胞表面上的缺失与膀胱癌更多攻击性行为有关(KleinBetal.，"HLAclassI.antigenexpressioninsolidtumors",ZsrJMe必"'32:1238-1243(1996);NouriAMetal,"InductionofMHCantigensbytumorcelllinesinresponsetointerferons",EurJCancer28(A):1110-1115(1992);Nourietal，"Defectiveexpressionofadhesionmoleculesonhumanbladdertumourandhumantumourcelllines",t/ra//"f56:6-12(1996);NouriAetal，"SelectiveandnonsILectivelossofimmunoregulatorymolecules(HLA-A,B,CantigensandLFA-3)intransitionalcellcarcinoma",5r/Cawcer62:603-606(1990))。来自于其他研究的数据表明，在靶(肿瘤)细胞上缺乏I类MHC抗原或共激分子的表达、FasL的表达、或者信号缺陷(signalingdefects)也可以使对口腔鳞状细胞上皮癌的免疫应答受损(Cruzetal,"LackofMHCclassIsurfaceexpressiononneoplasticcellsandpooractivationofthesecretorypathwayofcytotoxiccellsinoralsquamouscellcarcinomas",&/Ca"cer81:881-889(1999);Langetal,"ImpairmentofT-cellactivationinheadandneckcancerinsituandinvitro",爿ra^//eadiVecA:5Wg125:82-88(1999);Hoffmannetal.，"SpontaneousapoptosisofcirculatingTlymphocytesinpatientswithheadandneckcanceranditsclinicalimportance",C7/"Cawcer8:2553-2562(2002);Kussetal，"EffectorCD8+CD45RO-CD27-Tcellshavesignalingdefectsinpatientswithsquamouscellcarcinomaoftheheadandneck",5〃C薩er88:223-230(2003))。主要组织相容性复合物(MajorHistocompatibilityComplex,MHC)II类分子似乎还影响肿瘤进展。MHC基因产物可以被分成两类。I类产物发现于所有有核细胞上，而II类产物发现于免疫系统细胞上。HLA-DR，一种II类MHC分子，与抗原信号的加工有关，并在来自头和颈的鳞状上皮癌细胞的表面上表达。主要组织相容性复合物(MHC)II类分子可以在产生免疫信号中以及调节所述免疫激活抗原的量中起作用。当正常细胞变成癌细胞时，细胞表面的抗原也会变化。所述新的抗原或改变的抗原停下来，从而损害宿主身体，包括细胞毒性T细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞在内的免疫防卫者。相反，肿瘤细胞可以通过表达特定分子而避免监视。另一种可能的免疫逃逸的机制为细胞应变力缺乏，不能表达共激信号。CD4+T细胞的全激活表现出要求两种信号。当通过T细胞受体(T-cellreceptor,TCR)收到第一信号时，共激信号的缺失导致细胞应变力缺乏。当恶性细胞呈递II类MHC抗原时可能出现这种情况，从而在缺乏必要的共激信号的情况下导致细胞应变力缺乏，结果导致通过CD4+T细胞的增殖无应答性。通常，T细胞激活中的事件序列在抗原呈递细胞(antigenpresentingcells,APCs)和抗原特异性T细胞之间具有三个不同的细胞-细胞相互作用阶段，以诱导抗原特异性免疫应答。第一，当APCs和T细胞通过细胞表面配体和黏着受体既在循环组织又在淋巴组织中随机相互作用时，发生吸附。第二，如果APCs在MHC环境中能制备、转运并呈递足够量的特异性肽抗原，将发生识别。然后抗原-MHC(或在人HLA中)复合体将被T细胞通过T细胞受体(TCR)识别。衍生自细胞内蛋白质的内源性肽通常由I类MHC呈递(在人HLA-A、B或C中)，而衍生自循环蛋白的外源性产生的肽抗原通常由II类MHC呈递(在人HLA-DR、DP或DQ中)。第三，T细胞已经通过将提供T细胞的TCR与另外提高激活的信号结合而被激活之后，发生共同刺激。由激活的T淋巴细胞产生的白介素-2刺激T-细胞、B-细胞和NK-细胞增殖并诱导淋巴因子产生。由辅助T-细胞分泌白介素-2来应答II类MHC相关抗原表现出提供了激活直接对抗肿瘤细胞的细胞毒性T细胞和NK-细胞的主要刺激。例如，与IL-2—起孵育的淋巴样细胞能溶解肿瘤细胞。这些激活的细胞公知为淋巴因子激活的杀伤细胞。在许多I期临床试验中，白介素-2被系统给药。已报道在患有再发不能实施手术的头部和颈部鳞状上皮细胞癌的患者中的白介素-2的先导性临床试验(DeStefanietal，"Treatmentoforalcavityandoropharynxsquamouscellcarcinomawithperilymphaticinterleukin-2:clinicalandpathologiccorrelations",J/附m朋oAer19:125-133(1966))。被评价的五例中，在四名患者中肿瘤部分或完全消退，但是先前已经接受过功能性或根本性颈淋巴清扫术的患者中没有应答。已经建立理论，这是由于引流淋巴结的切除和任意局部淋巴应答的丧失。许多病理学的状态诸如感染、癌、自身免疫紊乱等的特征在于特定分子的不适当表达，其中这些分子用作特殊病理或异常状态的"标记"。该证据支持作为免疫抑制疾病的头颈癌的特征，其中免疫反应性在肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltratinglymphocytes,TIL)中，然后在近侧淋巴结淋巴细胞(lymphnodelymphocytes,LNL)、远侦(JLNL以及外周血液淋巴细胞(peripheralbloodlymphocytes，PBL)中被最大程度地抑制。外周血液淋巴细胞计数与细胞免疫性相关，并似乎对患有头颈癌的患者具有预后关联。细胞介导的免疫系统最复杂的测定是那些监测淋巴细胞反应性的测定。所述测试为体外测定，并将患者的淋巴细胞暴露于多种刺激物。所述刺激物可以包括普通的回忆抗原、特异性肿瘤抗原、或者导致T淋巴细胞总数降低的非特异性刺激物，并因此患有头颈癌的患者中的T-细胞和B-细胞水平完全下降。此外，绝对T细胞计数随进行性疾病下降。头颈癌患者中的淋巴细胞刺激也出现了下降。瘤内的004+/008+比值也似乎影响头颈癌。发现于T辅助细胞上的CD4+分子识别并结合发现于树状突细胞、单核细胞、巨噬细胞和B-细胞上的II类HLA标记，并为T辅助细胞传递信号以分泌更多的淋巴因子例如IL-2。发现于杀伤性T细胞上的CD8+分子识别并结合I类HLA标记，并为杀伤性T细胞传递信号以分泌在外源细胞的膜上穿孔并直接导致其裂解和死亡的蛋白诸如穿孔素。对口腔鳞状上皮细胞癌成功的免疫应答要求逆转瘤内细胞固有的低CD4+ZCD8+比值。值得注意的是，实体瘤中CD8+细胞对CD4+细胞的超优势度在口腔鳞状上皮细胞癌中并不特异。类似地，已经报道在基底细胞癌、颈癌以及乳癌中的低CD4VCD8+比值(Rohrbachetal，"Immunologyandgrowthcharacteristicsofocularbasalcellcarcinoma",Gra^/^y爿rc/zC7/"239:35-40(2001);Santinetal，"Tumor-infiltratinglymphocytescontainhighernumbersoftype1cytokineexpressorsandDR+Tcellscomparedwithlymphocytesfromtumordraininglymphnodesandperipheralbloodinpatientswithcanceroftheuterinecervix",(7j"eco/6"co/81:424-432(2001》Murtaetal,"Lymphocytesubpopulationsinpatientswithadvancedbreastcancersubmittedtoneoadjuvantchemotherapy",r訓on'86:403-407(2000))。另一方面，高百分比的CD4+T-细胞或高CD4VCD8+比值与黑素瘤、B-细胞非何杰金氏淋巴瘤、肾细胞瘤以及宫颈癌(cervicalcarcinoma)的免疫疗法的较好预后或应答相关(Hakanssonetal,"Tumour-infiltratinglymphocytesinmalignantmelanomaandresponsetointerferonalphatreatment",份JCa膨r74:670-676(1996);Anselletal,"CD4+T画cellimmuneresponsetolargeB-cellnon-Hodgkin'slymphomapredictspatientoutcome",/C7z>7Owco/19:720-726(2001);Igarashietal,"Effectoftumor-infiltratinglymphocytesubsetsonprognosisandsusceptibilitytointerferontherapyinpatientswithrenalcellcarcinoma",C/ra/69:51-56,(2002);Sheuetal，"ReversedCD4/CD8ratiosoftumor-infiltratinglymphocytesarecorrelatedwiththeprogressionofhumancervicalcarcinoma",Ca"cer86:15371543,(1999))。通过提供CDS+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的辅助作用，通过激活抗原呈递细胞并维持免疫记忆，或者在某些情况下通过细胞因子分泌或直接的细胞溶解而起到效应子作用，CD4T-细胞在发起和保持抗肿瘤免疫性方面也起到了中心作用(Goedegebuureetal,"TheroleofCD4+tumor-infiltratinglymphocytesinhumansolidtumors",Tawwwwo/^s114:119-131(1995》，Hungetal,"ThecentralroleofCD4+Tcellsintheantitumorimmuneresponse",/五xp188:2357-2368(1998);Gaoetal，"Antigen-specificCD4+T-cellhelpisrequiredtoactivateamemoryCD8+Tcelltoafollyfunctionaltumorkillercell",C。騰rh62:6438-6441(2002))。对于头颈癌中的局部免疫反应性，Berlinger等人评价了来自84名患有头颈癌的患者的淋巴结形态学图像，并且将他们的发现与存活率相互关联，其中，其淋巴结显示有效免疫学应答的患者具有较长的存活时间(Berlingeretal，"ImmunobiologyOtolaryngology3rded.",Philadelphia:HarcourtBraceJovanovich,Inc;741-45(1991))。另一方面，其淋巴结具有衰竭或非激活(unstimulatedpattern)图像的患者没有存活5年。结果清楚地显示了局部免疫反应性和头部及颈部恶性肿瘤存活率之间的关系。该发现可归因于暴露于特定细胞因子的肿瘤细胞表达特定的表面抗原。大多数对患有头部及颈部恶性肿瘤的患者的全身性免疫研究已经获得了免疫功能降低的证据。还不知道这些变化是否是由于易罹患性状况，或者是否是恶性肿瘤自身功能。虽然免疫治疗已被认为是癌症治疗相对特异性的途径，其中免疫效应器机制的激活作用用于消灭癌细胞，但是，有几种可行的免疫策略来达到这些目的。策略之一是使用细胞因子增加抗癌免疫效应器机制(Timaretal,"MolecularpathologyoftumormetastasisIII.Targetarrayandcombinatorialtherapies",尸aAo/Owco/iw9:49-72(2003);WhitesideTL，"Immunobiologicalandimmunotherapyofheadandneckcancer",CwrO"co/i印3:46-55(2001))。另一种可行的免疫策略使用细胞因子增加抗癌免疫效应器机制，在外科切除口腔鳞状上皮细胞癌(OSCC)之前，引入局部IL-2治疗作为新的辅助免疫生物疗法。在包括头颈癌在内的不同的肿瘤类型中，一些治疗性介入(intervention)使用重组人IL-2(rhBL-2)，而另外一些使用天然白细胞衍生的IL-2制齐i)(Barreraetal，"Combinationimmunotherapyofsquamouscellcarcinomaoftheheadandneck",Ac/z(9o/ar戸goZ//eaiiVecA5W"g126:345-351(2000);Cortesinaetal."Interleukin-2injectedaroundtumor-draininglymphnodesinheadandneckcancer",//ea<iTVecA:13:125-131(1991);DeStefanietal."Treatmentoforalcavityandoropharynxsquamouscellcarcinomawithperilymphaticinterleukin-2:clinicalandpathologiccorrelations",//www"<9//2er19:125-133(1996);Rivoltinietal，"Invivointerleukin2-inducedactivationoflymphokine-activatedkillercellsandtumorcytotoxicT-cellsincervicallymphnodesofpatientswithheadandnecktumors",C""ce尸50:5551-5557(1990))。然而，数据显示rWL-2局部给药的高度变化的应答率(6-65%)(Vlocketal，"Phaselbtrialoftheeffectofperitumoralandintranodalinjectionsofinterleukin-2inpatientswithadvancedsquamouscellcarcinomaoftheheadandneck:aneasterncooperativeoncologygrouptrial",/TmmMwof/zer15:134-139(1994))。将rhlL-2局部给药至OSCC患者的特定m期(phase)试验的结果是，无病存活率得到显著提高并且增加了总存活数(DeStefanietal,"Improvedsurvivalwithperilymphaticinterleukin-2inpatientswithresectablesquamouscellcarcinomaoftheoralcavityandoropharynx",Cancer95:90-97(2002))。得自经rhlL-2治疗的头颈癌患者的肿瘤组织的组织学检查显示，T-细胞亚型中的富集与病灶性坏死和临时的嗜酸细胞性浸润并行(Whitesideetal,"Evidenceforlocalandsystemicactivationofimmunecellsbyperitumoralinjectionsofinterleukin2inpatientswithadvancedsquamouscellcarcinomaoftheheadandneck",C露eries53:5654-5662(1993);DeStefanietal."Treatmentoforalcavityandoropharynxsquamouscellcarcinomawithperilymphaticinterleukin-2:clinicalandpathologiccorrelations",J"/m附imo^2er19:125-133(1996);Valenteetal""InfiltratingleukocytepopulationsandT-lymphocytesubsetsinheadandnecksquamouscellcarcinomafrompatientsreceivingperilymphaticinjectionsofrecombinantinteiieukin2"，McfP函o/3:702-708(1990))。其他II期临床试验用包括天然IL-2在内的自然生成的细胞因子混合物，显示出30%至50%的应答率(Barreraetal,"Combinationimmunotherapyofsquamouscellcarcinomaoftheheadandneck",爿rc/zOto/ar，go///ead126:345-351(2000);Haddenetal，"AtrialofIRX-2inpatientswithsquamouscellcarcinomasoftheheadandneck",/mmzmop/^maco/8:1073-1081,(2003);Menesesetal,"Histologicfindingsinpatientswithheadandnecksquamouscellcarcinomareceivingperilymphaticnaturalcytokinemixture(IRX-2)priortosurgery",Jrc/尸W/zo/丄a6Mec122:447-454(1998);Verasteguietal,"Anaturalcytokinemixture(IRX-2)andinterferencewithimmunesuppressioninduceimmunemobilizationandregressionofheadandneckcancer",//mmimop/za簡aco/79:619-627(1997》。组织病理学分析表明，所述自然细胞因子混合物(包括IL-2)根据剂量主要诱导肿瘤组织的T淋巴细胞浸润并引起肿瘤破裂。其它用较低剂量LI(白细胞介素，注射剂，LI，也被公知为Multikine⑧)的II期试验表现出肿瘤细胞巢的相似的应答率和诱导的CD3+/CD25+T淋巴细胞浸润，以及癌细胞进入细胞周期(Timaretal,"TheeffectofLeukocyteInterleukin，Injection(Multikine)treatmentontheperitumoralandintratumoralsubpopulationofmononuclearcellsandontumorepithelia:apossiblenewapproachtoaugmentingsensitivitytoradiationtherapyandchemotherapyinoralcancer画amulticenterphaseI/IIclinicaltrial",Z^y"gascope113:2206-2217(2003))。局部给药天然细胞因子混合物(包括IL-2)是另一条可行的治疗OSCC的途径。因此，存在测定并调节肿瘤的细胞浸润中的关系的需求，特别是当它们涉及用包括或诱导想要的免疫活性作用的天然衍生无血清和无促分裂原的混合物，使肿瘤浸润单核细胞、提高CD4十/CD8+比值、提高肿瘤间质/上皮比值，以及调整II类HLA在肿瘤细胞表面上的表达时。在OSCC传统治疗(外科手术、然后放射治疗)之前，还有必要结合所述方法以及合适的剂量进行新的免疫辅助治疗，以得到所述治疗的安全并有效的给药。
发明内容本发明是基于一种方法，该方法通过用无血清且无促分裂原的白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧来改变肿瘤浸润单核细胞的组成，提高CD4+ZCD8+比值、提高肿瘤间质/上皮比值，并调节II类HLA在肿瘤细胞表面上的表达，所述无血清且无促分裂原的白细胞介素注射剂(LI)混合物或MuMkine⑧包括特定比例的细胞因子IL-ip与IL-2、TNF-a与IL-2、IFN-y与IL画2，以及GM-CSF与IL画2。在本发明的实施方式中，所述用于改变肿瘤浸润单核细胞的组成、提高CD4VCD8+比值、提高肿瘤间质/上皮比值、并调节II类HLA在肿瘤细胞表面上的表达的方法涉及无血清且无促分裂原的细胞因子混合物，该无血清且无促分裂原的细胞因子混合物在约20IU至12000IU范围内一周给药三次，持续两周，其中IU代表在世界卫生组织(WorldHealthOrganization)的关于人IL-2的第一国际标准86/504中给出的白介素-2的国际单位。在另一实施方式中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物在约20IU至12000IU范围内一周给药五次，持续三周，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中给出的白介素-2的国际单位。所述方法的特殊施用包括瘤周(peritumorally)给药日总剂量的白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧，每周五(5)次，持续三(3)周。日总剂量以IL-2计可以为200、400、800、1200、1600、2400、3200、4800、8000、9600和12000IU/mL，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中给出的白介素-2的国际单位。在又一实施方式中，所述特殊应用包括瘤周给药半日总剂量的白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧，并淋巴管周(perilymphatically)给药另一半日总剂量，每周五(5)次，持续三(3)周。日总剂量以IL-2计可以为200、400、800、1200、1600、2400、3200、4800、8000、9600禾卩l2000IU/mL，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中给出的白介素-2的国际单位。半日总剂量为瘤周剂量，其中瘤周剂量注射到肿瘤块周围的至少四个不同位点。因此，如果800IU/mL为日总剂量，400IU被瘤周注射到肿瘤块的周围四个不同位点，其中瘤周剂量的四分之一(1/4)被注射到四个位点中每个位点，由此每个位点接受大约以IL-2计的100IU/mL。LI被皮内注射给药在可视/可触肿瘤块的周缘边界处。然而可以理解的是本发明将不限于四个位点，其中本发明可以考虑四个、或者多于或少于四个的位点。示范性的以IL-2计的总剂量800IU的剩余一半400IU，随后被淋巴管周同侧给药至同样就诊的肿瘤位点。淋巴管周注射给药至下颌区后面，在颈静脉淋巴链的与已注射肿瘤块同侧的区域。本发明的又一个实施方式包括具有如下特定比值的细胞因子与白介素-2(IL-2)的白细胞介素注射剂(LI):IL-ip与IL-2的比值范围为0.4-1.5，并优选为0.7±0.1(IL-l卩/IL-2);TNF-a与IL-2的比值范围为3.2-11.3，并优选为9.5士1.8(TNF-oc/IL-2);IFN-y与IL-2比值范围为1.5-10.9，并优选为6.0±1.1(IFN-y/IL-2);以及GM-CSF与IL-2的比值范围为2.2-4.8，并优选为4.0士0.5(GM-CSF/IL-2)。在具体应用中，所述无血清和无促分裂原的细胞因子制剂或药物组合物还具有不同的细胞因子及其它生物活性小分子，其中各个所述生物活性小分子与IL-2的比值如下IL-3与IL-2的比值范围为0.38-0.68，并优选为0.53士0.15;IL-6与IL画2的比值范围为37.2-53.8，并优选为46士5.9;IL-8与IL-2的比值范围为261-561.5，并优选至411±10.6;IL-la与IL-2的比值范围为0.56-0.94，并优选至0.75土0.19;IL-10与IL-2的比值范围为2.82-3.22，并优选为3.0士0.18;IL-16与IL-2的比值范围为1.16-2.84，并优选为1.84士0.68;G-CSF与IL-2的比值范围为2.16-3.78，并优选为2.97±0.81;TNF-(3与IL-2的比值范围为1.17-2.43，并优选为1.8士0,63;MIP-la与IL-2的比值范围为15.7-37.16，并优选为22.7士7.0;MIP-lp与IL-2的比值范围为17.1-28.5，并优选为22.8士5.7;RANTES与IL-2的比值范围为2.3-2.7，并优选为2.5士0.13;EGF与IL-2的比值范围为0.267-0.283，并优选为0.275士0.008;PGE2与IL-2的比值范围为3.63-5.42，并优选为4.5士0.87;和TxB2与IL-2的比值范围为23.47-25.13，并优选为24.3±0.83。IL-12是仅以痕量存在的，其中痕量定义为100pg/mL或者更少。在另一实施方式中，提供了用于调节II类HLA在肿瘤细胞表面上的表达的方法，该方法包括将无血清且无促分裂原的细胞因子混合物给药至需要的患者，所述混合物包括特定比值的细胞因子，所述细胞因子选自由IL-ip、TNF-a、IFN-y、GM-CSF、白细胞介素-2(IL-2)所组成的组中，其中，所述IL-ip、TNF-a、IFN-y、GM-CSF与IL-2的特定比值为IL-1(3与IL-2的比值范围为0.4-1.5;TNF-a与IL-2的比值范围为3.2-11.3;IFN-y与IL-2的比值范围为1.5-10.9;以及GM-CSF与IL-2的比值范围为2.2-4.8。在另一实施方式中，提供了用于提高CD4VCD8+的比值的方法，该方法包括将无血清且无促分裂原的细胞因子混合物给药至需要的患者，所述混合物包括特定比值的细胞因子，所述细胞因子选自由IL-1(3、TNF-a、IFN-y、GM-CSF、白细胞介素-2(IL-2)所组成的组中，其中，所述IL-ip、TNF-a、IFN-y、GM-CSF与IL-2的特定比值为IL-ip与IL-2的比值范围为0.4-1.5;TNF-a与IL-2的比值范围为3.2-11.3;IFN-y与IL-2的比值范围为1.5-10.9;以及GM-CSF与IL-2的比值范围为2.2-4.8。在另一实施方式中，提供了用于改变肿瘤浸润单核细胞的组成的方法，该方法包括将无血清且无促分裂原的细胞因子混合物给药至需要的患者，所述混合物包括特定比值的细胞因子，所述细胞因子选自由IL-ip、TNF-a、IFN-y、GM-CSF、白细胞介素-2(IL-2)所组成的组中，其中，所述IL-l卩、TNF-a、IFN，、GM-CSF与IL-2的特定比值为IL-ip与IL-2的比值范围为0.4-1.5;TNF-a与IL-2的比值范围为3.2-11.3;IFN-y与IL-2的比值范围为1.5-10.9;以及GM-CSF与IL-2的比值范围为2.2-4.8。在进一步的实施方式中，提供了用于提高肿瘤间质/上皮比值的方法，该方法包括将无血清且无促分裂原的细胞因子混合物给药至需要的患者，所述混合物包括特定比值的细胞因子，所述细胞因子选自由IL-ip、TNF-cuIFN-Y、GM-CSF、白细胞介素-2(IL-2)所组成的组中，其中，所述IL-1(3、TNF-a、IFN-y、GM-CSF与IL-2的特定比值为IL-1(3与IL-2的比值范围为0.4-1.5;TNF-a与IL-2的比值范围为3.2-11.3;IFN-y与IL-2的比值范围为1.5-10.9;以及GM-CSF与IL-2的比值范围为2.2-4.8。本发明的其他目的和优点在下列说明书中得到阐明。附图及表格构成公开的一部分，与说明书一起图解并解释本发明的原理。本领域技术人员将理解，通过参考附图和以下详细的描述，本发明的其他方面将变得很明白。参考附图，通过以下描述和具体实施方式，本发明将得到更详细的解释图1为经过白细胞介素(LI)注射剂预处理的口腔鳞状上皮细胞癌(OSCC)中肿瘤的免疫组织化学CD4+染色，其中的条(bar)=100|im;图2为OSCC间质对照样品中T-细胞的免疫组织化学CD8+染色，其中的条(bar)=100)im;图3为显示CD4+和CD8+的T-细胞在间质中的密度变化的图表，其中，CTR=对照、未处理的(n=20)，Non-resp吒I-处理的无应答者a(n=ll)，Resp二LI-处理的应答者b(『6)，以及数据为平均值土标准偏差，*=p<0.05;图4为显示CD4+和CD8+的T-细胞在上皮内的密度变化的图表，其中，CTR=对照、未处理的(n=20)，Non-resp《I-处理的无应答者a(n=ll)，Resp二LI-处理的应答者b(『6)，以及数据为平均值土标准偏差，*=p<0.05;图5为显示004+/0)8+比值的图表，其中，0111=对照、未处理的(11=20)，Non-resp《I-处理的无应答者a(n=ll)，Resp=0-处理的应答者b(n=6)，以及数据为平均值士标准偏差，*=p<0.05;图6为显示OSCC细胞CD25/IL-2R+在间质和上皮内的密度的图表，其中，CTR二对照、未处理的(n=20)，Non-resp《I-处理的无应答者a(n=ll)，Resp二LI-处理的应答者b(『6)，以及数据为平均值土标准偏差，*=p<0.05;图7为显示OSCC细胞内OX40+细胞在间质和上皮内的密度的图表，其中，CTR4寸照、未处理的(n=20)，Non-resp二LI-处理的无应答者a(n=ll)，Resp二LI-处理的应答者b(『6)，以及数据为平均值土标准偏差，*=p<0.05;图8为显示OSCC内CD45R0+细胞在间质和上皮内的密度的图表，其中，CTR4寸照、未处理的组(n=20)，Non-resp《I-处理的无应答者a(n=ll)，Resp二LI-处理的应答者b(n=6)。数据为平均值士标准偏差；在LI处理过的组中所观察到的变化在统计学上不显著；图9为显示由CDla免疫反应检测的OSCC样品内树突状细胞密度的图表，其中肿瘤区Rl-表面区域，R2,中瘤中心，113=肿瘤-间质界面；其中，CTI^对照、未处理的组(n=20)，Non-resp二LI-处理的无应答者a(n=ll)，Resp二LI-处理的应答者b(『6)，以及数据为平均值土标准偏差，*=p<0.05;图10为显示由CD68免疫反应检测的OSCC样品内巨噬细胞在间质和上皮中的密度的图表，其中，CTR^对照、未处理的组(11=20)，Non-resp=LI-处理的无应答者a(n=ll)，Resp二LI-处理的应答者b(n=6)，以及数据为平均值士标准偏差，*=p<0.05;图11为免疫组织化学染色，用髓过氧物酶免疫组织化学(红色)，表明对照样品上皮内中性粒细胞的定位，其中的条(bar)=100^im;图12为免疫组织化学染色，用髓过氧物酶免疫组织化学(红色)，表明LI处理过的样品上皮内中性粒细胞的定位，其中的条(bar)=100pm;图13为显示OSCC样品中中性粒细胞密度的图表，其中，CTR^对照、未处理的组(n=20)，Non-resp二LI-处理的无应答者a(n=ll)，Resp:LI-处理的应答者b(『6)，以及数据为平均值士标准偏差，*=p<0.05;图14为OSCC对照样品H&E染色的石蜡切片的彩色显微照片，显示出OSCC对照样品没有任何坏死事件，其中所述的条(bar)=500pm;图15为OSCC、LI处理过的样品的H&E染色的石蜡切片彩色显微照片，显示出诱导的显微上皮细胞的坏死，其中所述的条(bar)=50(Vm;图16为未处理的对照OSCC中胶原间质的彩色显微照片，显示出瘤周纤维胶原边缘；所述的条(bar)=200pm，所述肿瘤间质在蓝色区域内表明；图17为LI处理过的OSCC的OSCC中胶原间质的彩色显微照片，显示出癌细胞巢之间胶原纤维的积累；所述的条(bar)=200pm，所述肿瘤间质在蓝色区域内表明；图18为以间质的面积百分比显示OSCC胶原间质的形态测定法的图表，其中，CTR=对照、未处理的组(n=20)，Non-resp二LI-处理的无应答者a(n=ll)，Resp-LI-处理的应答者b(n=6)。数据为平均值土标准偏差，*=p<0.05。aLI-处理过的无应答者在可触及肿瘤的最长极以及在垂直于最长方向的最宽点通过体格检査测定的，与基线肿瘤体积(面积)减少相比，LI-处理过的晚期口腔鳞状上皮细胞癌患者对治疗的身体应答<30%。bLI-处理过的应答者二LI-处理过的晚期口腔鳞状上皮细胞癌患者按照上述a测量的肿瘤体积(面积)下降>50%。具体实施方式本发明是关于一种方法，该方法通过用无血清且无促分裂原的细胞因子混合物来改变肿瘤浸润单核细胞的组成、提高004+化08+的比值、提高肿瘤间质/上皮的比值，并调节II类人类白细胞抗原在肿瘤细胞表面上的表达。所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物包括具有特定比例的IL-lp与IL-2、TNF-a与IL-2、IFN-y与IL-2、以及GM-CSF与IL-2。这样的新型细胞因子组合物之一为白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧，它们的免疫调节能力已经得到证实。癌症患者中免疫抑制的临床显著性意外地影响了肿瘤浸润单核细胞的组成、CD4+ZCD8+的比值、肿瘤间质/上皮的比值以及II类HLA在肿瘤细胞表面上的表达。特别是最初用LI治疗头颈癌的患者中，瘤周给药200、400、800、1200、1600、2400、3200、4800、8000、9600以及12000IU/mL剂量的白细胞介素注射剂(LI)，每周三次(3)，持续两周，或者每周五次(5)，持续三(3)周，改变了肿瘤浸润单核细胞的组成、提高了CD4+ZCD8+的比值、提高了肿瘤间质/上皮的比值，并调节了II类人类白细胞抗原在肿瘤细胞表面上的表达。在癌症治疗过程中，瘤周剂量可以通过注射以IL-2计100IU/mL至肿瘤块周围四个不同位点来完成其中400IU/mL瘤周注射的示例性800IU/mL总剂量，四个位点中的每一位点被注射四分之一(1/4)的瘤周剂量。然后将剩余的总剂量的一半同侧淋巴管周给药至同样就诊的肿瘤位点。淋巴管周注射给药至下颌区后面的一个位点，在颈静脉淋巴链的与已注射肿瘤块同侧的区域。定义IL-2——白介素2(IL-2):由CD4+辅助T淋巴细胞合成的15.5kD糖蛋白(正式公知为T细胞生长因子)。IL-2具有自分泌功能，作用于产生IL-2的CD4+T淋巴细胞，并作用于其他免疫系统细胞(包括B-淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、NK[自然杀伤]细胞及其它)。IL-1(3——白介素1(3(IL-1(3):由激活的单核巨噬细胞合成的17kD细胞因子，在循环中发现三种游离形态，并介导炎症应答。它作用于CD4+T淋巴细胞以帮助它们增殖，并作为生长和分化因子作用于B-淋巴细胞。它还可以诱导单核吞噬细胞合成IL-6。TNF-a-肿瘤坏死因子a(TNF-(x):157个氨基酸残基的蛋白，通过刺激单核细胞、巨噬细胞、B淋巴细胞、T淋巴细胞、自然杀伤细胞而合成，在循环中发现为微调形式(trimmericform)。TNF介导直接的抗肿瘤活动，引起肿瘤细胞裂解，有助于淋巴细胞复原，诱导血管生成和促进纤维增殖。IFN-y——干扰素y(IFN-y):由激活的T淋巴细胞和NK细胞合成的21-24kD糖蛋白同型二聚体，是单核细胞强大的激活剂，增强单核细胞破坏细胞内微生物和肿瘤细胞的能力。它具有直接的抗病毒和抗增殖活性，并因此引起许多细胞类型表达II类主要组织相容性复合体(MHC)细胞表面分子复合体，以及增强I类MHC的表达。GM-CSF——粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF):127个氨基酸残基的蛋白质，在循环中作为单体被发现，由巨噬细胞、T淋巴细胞、成纤维细胞和上皮细胞产生。它是造血细胞的生长因子，并刺激骨髓单核细胞系的生长和分化。IL-3——白介素-3(IL-3):由激活的CD4+T辅助淋巴细胞合成的20kD淋巴因子，担当集落刺激因子，促进一些造血细胞的增殖，并促进T淋巴细胞的增殖和分化。IL-6——白介素-6(IL-6):由激活的T淋巴细胞、单核吞噬细胞、内皮细胞以及成纤维细胞产生的26kD细胞因子。它作用于许多细胞，但具有特定作用能够使激活的B-淋巴细胞分化成抗体分泌浆细胞，诱导肝细胞形成急性期蛋白质(在炎症应答时)以及纤维蛋白素原。IL-8——白介素-8(IL-8):由巨噬细胞和上皮细胞产生的8kD蛋白质，是一种强有力的用于中性粒细胞和T淋巴细胞的趋化因子，并有利于使中性粒细胞粘连于内皮细胞。IL-la——白介素la(IL-la):从33kD前体分子之中裂解下来的17kD的细胞因子(类似于IL-1(3)，由激活的单核吞噬细胞产生，在循环中很少发现其游离形式，充当膜相关物质。其加速IL-1(3介导的炎症反应。IL-10——白介素-10(IL-10):由CD4+和CD8+T淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、激活的B淋巴细胞以及角质化细胞产生的18kD多肽。它抑制巨噬细胞呈递抗原的能力，特别是抑制向I型THl-型细胞呈递抗原，并抑制巨噬细胞分泌IL-6和TNF的能力。IL-16——白介素-16(IL-16):由CD8+T淋巴细胞、嗜酸性细胞、肥大细胞和呼吸器官上皮细胞产生的14kD四聚体蛋白。它具有强有力的对CD4+T淋巴细胞和单核细胞的化学诱导性质。G-CSF——粒细胞集落刺激因子(G-CSF):由巨噬细胞、上皮细胞、成纤维细胞和基质细胞产生的22-25kD同型二聚体糖蛋白。它增加骨髓中粒细胞的祖细胞，并持续增加血液中的中性粒细胞。它还提高中性粒细胞的提高过氧化物产物的能力，所述过氧化物产物被认为在破坏受微生物感染的细胞和肿瘤细胞中起重要作用。TNF-(3——肿瘤坏死因子卩(TNF-|3):由活化的淋巴细胞产生的25kD蛋白质。它能杀死培养物中的肿瘤细胞，并剌激成纤维细胞增殖。另外它模拟TNF-a的大多数其他活动。MIP-la——巨噬细胞炎症蛋白-la(MIP-kx):由巨噬细胞和其他细胞产生的66个氨基酸的单一亚基蛋白质。它是单核细胞、T淋巴细胞和嗜酸性细胞的化学引诱物。RANTES——由T淋巴细胞产生的8kD蛋白，是单核细胞、T淋巴细胞和嗜酸性细胞的化学引诱物，并且促进炎症。EGF——表皮生长因子(EGF):53个氨基酸残基多肽的三硫酸盐。EGF是酪氨酸激酶家族的成员，并且具有包括刺激有丝分裂反应和辅助创伤愈合在内的多重功能。PGE2——前列腺素E2(PGE2):PGE2属于通过环氧合酶酶促反应得自花生四烯酸的生物活性脂类家族。它由激活的单核细胞释放，并阻断T淋巴细胞和巨噬细胞的II类MHC表达。TxB2——促凝血素B2(TxB2):TxB2是通过前列腺素异构化以及内过氧化酶PGH2经过凝血噁浣合成酶得自多不饱和脂肪酸的生物活性化合物成员。TxB2在血栓栓塞性疾病和过敏反应起生理学作用。CD25+细胞——CD25是单链糖蛋白，通常是指白介素-2-受体(IL-2R)的(x链或Tac抗原，分子量为55kDa，存在于激活的T-细胞和B-细胞以及激活的巨噬细胞上。它起到IL-2受体的作用。与IL-2R的p-链一起，CD25抗原形成IL-2的高亲和力受体复合物。HLA-DR+淋巴细胞——包含人白细胞抗原(HLA)-DR抗原的淋巴细胞，通过发现于人类中主要组织相容性座位的染色体6上淋巴细胞基因座中的固着序列(glues叫uence)测定出的一组多态糖蛋白。IU(国际单位)--种通过与比重或强度的国际标准进行比较来测量生物制剂效能的单位，例如世界卫生组织关于人IL-2的第一国际标准86/504。国际单位是报道生物活性单位的唯一公认且标准化的方法，并且得自国际合作者的努力研究。U(生物活性的测量单位)——许多命名为"单位"的速记法，每个实验室导出一种作为参照，因进行工作的实验室而更独特。每一"单位"在实验室之间不同，不像国际单位(IU)是得到全球公认的标准。USP-美国药典专题文章(U.S.PharmacopeiaMonograph)。尸——"p<0.01":数理统计学术语，表明在预设的条件下发生一个事件的概率水平。ANOVA(变量分析)——单因素分析，如统计学和数学课本中所述，例如，"HandbookofStatisticalMethodsforEngineersandScientists",HarrisonM.Wadsworth,Jr.,Ed.，McGrawHill1990禾口"StatisticalOperationsAnalysisofHealthResearchData",RobertP.HirschandRichardK.Riegelman,Eds.BlackwellScienceInc.,1996。卡方(5C2)分布——考虑独立标准正常随机变量的平方和所产生的样本变量分析。其中独立标准正常随机变量的平方加在一起得出自由度为n的卡方(x2)分布。白细胞介素注射剂(LI)在制备过程中，通过分级梯度离心从人类供体的"血沉棕黄层(buffycoat)"分离出单核细胞，并在培养基中用PHA培养该单核细胞以提高IL-2和得自供体白细胞的其它细胞因子的产量和分泌，如US5,093,479、US4,390,623、US4,388,309、US4,406,830、US4,661,447、US4,681,844禾口US4,464,355中所公开的，所有上述专利在此一并引入作为参考。随后，无菌收获培养物上清液，使之澄清，并经受商业化病毒排除过程。然后将所述上清液通过超滤法和微量过滤法进一步浓縮大约10倍。此时，加入USP注射用人血清白蛋白，然后将浓縮物缓冲至生理学pH，并复元至每指示物要求的靶IL-2浓度(例如400IU/mL)。接着所述浓縮物经受第二次微过滤(0.22微米的额定过滤器)，无菌分装至无菌血清型管形瓶(vial)并用其IL-2含量标记。通过将放射标记的脱氧胸腺嘧啶苷掺入到细胞毒性T淋巴细胞系(CTLL-2)，测量产物效能。最终可注射剂通过ELISA进一步测试五种标记物细胞因子的存在IL-2、IL-ip、GM-CSF、IFN-y和TNF-a。提供的白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧冷冻在硼硅玻璃血清管形瓶中，每瓶含有2.2mL的药，在标记要求下以IL-2计(400IU/mL)用于瘤周、瘤内、淋巴管周或皮下给药。白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧经受同一性、无菌、细菌内毒素、pH以及总蛋白浓度的质量控制测试。对每一瓶进行微粒污染和外观检查。制剂的总蛋白含量为3mg/L，其中，提供的原料无菌且无热原。白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧具有特定有效期，当所述药品在-20'C下储存时，自制备之日起24个月。在LI中有三个细胞因子"家族"，它们一起对LI的独特生物学活性非常重要。它们可以直接包括细胞毒素/细胞生长抑制和杀病毒毒素/抑制病毒生长的细胞因子诸如TNF-a和IFN-y，淋巴组织增生的细胞因子诸如IL-1和IL-2，以及趋化性细胞因子诸如IL-6、IL-8和MIP-kx。然而，应当明确注意的是，本发明的上述理论或者其他在本专利中表述的理论都不能限制权利要求的范围。构成LI的不同细胞因子和小生物分子都得自凝集素(PHA)对人外周血单核细胞的体外刺激，所述人外周血单核细胞包括T细胞、B细胞和巨噬细胞。在菲科帕克(Ficoll-Paque)上梯度离心从供体全血中分离白细胞(包括T细胞、B细胞和巨噬细胞)，并经过一系列洗涤(在生理学缓冲液介质中)以利于淋巴细胞的分离，以及从分离的供体全血的白细胞成分中去除红细胞、细胞碎片和其他不需要的细胞成分。白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧使用特征方案测试，并且不含有下列细胞因子和其他生物活性小分子IL-4、IL-7和IL-15、TfR、sICAM、PDGF-AB、IFN-a、EPO、LTC4、TGF-(32、碱性FGF、血管生成因子、sE-选择蛋白、SCF和LIF。LI只含有痕量(刚刚在检测的检出水平之上)的IL-12禾口LTB4。白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧还可以与一种或几种药物可接受载体或辅剂一起在预防上或在治疗上用作免疫调节组合物的成分。当供给在预防上使用时，在任何感染或疾病的证据之前提供所述免疫调节组合物。而LI很可能以纯的或者基本上纯的形式给药，药物组合物、配方(formulation)或制剂(preparation)也可以得到应用。本发明的既用于临床试验又用于人类使用的配方含有如上所述的LI以及一种或几种药物上可接受的载体，并选择性地含有其他治疗成分，特别是治疗免疫佐剂。所述载体必须为"可接受"，其意义是与配方中其他成分相容，并且对其受体无害。大体上，通过如下步骤制备所述配方一致并细致地使活性成分与液体载体或者细裂固体载体或者它们两者进行结合，然后如果必要，将产物制成想要的配方。这里所用的术语"药物上可接受的载体"是指任何载体、稀释剂、赋形剂、悬浮剂、润滑剂、辅剂、媒介物(vehicle)、传递系统、乳化剂、崩解剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂或甜味剂。所述配方可以方便地为单位剂量的形式，还可以通过公知的药物领域中的任何方法制备。适合于静脉内给药、肌内给药、皮下给药或腹膜内给药、鼻给药等的配方适宜包括活性成分的无菌水溶液，其中优选与受体的血等渗的溶液。本发明的化合物还可以口服给药、肠胃外给药、通过吸入喷雾给药、局部给药、经直肠给药、口腔给药、阴道给药或者通过植入性药盒给药，在剂量配方中含有常规无毒药物上可接受的载体、辅剂和媒介物。这里所用的术语肠胃外给药(parenteral)包括皮下、静脉内、肌内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内，以及颅内注射或者注入技术。所述配方可以通过将固体活性成分溶解于含有生理学相溶性物质的水中而方便地制备，所述生理学相溶性物质比如氯化钠(例如0.1-2.0M)、甘氨酸等，所述水具有与生理条件相容的缓冲的pH以产生水性溶液并使溶液无菌。这些可以存在于单剂或多剂容器中，例如密封的安瓿瓶或管状瓶。本发明的化合物还能够以无菌可注射制剂的形式给药，例如，作为无菌可注射水悬浮液或者油悬浮液。所述悬浮液可以根据本领域公知的方法使用合适的分散或湿润剂以及悬浮剂而制得。所述无菌可注射制剂还可以为无菌可注射溶液或悬浮液，在无毒肠胃外可接受稀释剂或溶剂中，例如作为在1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒介物中，可以使用的溶剂为水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)以及等渗氯化钠溶液。此外，无菌不挥发油经常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，任何温和不挥发油都可以使用，包括合成的单或双甘油酯。诸如油酸的脂肪酸及其甘油酯衍生物，包括橄榄油和蓖麻油，特别是以它们的聚氧乙烯化的形式，可以用于可注射制剂。这些油溶液或者悬浮液还可以含有长链醇稀释剂或分散剂。本发明的化合物还可以局部给药，特别是当说明状态的治疗涉及容易通过局部施用接近的区域或器官时，包括眼、皮肤的紊乱或者更低等的消化道。对于每一种上述区域，容易制备合适的局部配方。为了局部施用于眼或眼的用途，所述化合物可以配制成在等渗、调节pH的无菌盐水中微粒化的悬浮液，或者优选作为在等渗、调节pH的无菌盐水中的溶液，可以有或没有防腐剂诸如苯扎氯铵。Multikine⑧的眼的应用还可以制成软膏例如凡士林。为了局部施用于皮肤，所述化合物可以配制成含有悬浮或溶解在一种混合物中的化合物的合适的软膏，其中所述混合物含有以下物质中的一种或几种矿物油、液体石蜡、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。可选地，所述化合物可以配制成含有活性化合物的合适的洗液或乳膏，所述活性化合物悬浮或溶解在以下一种或几种物质的混合物中矿物油、脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六烷基酯蜡、十六十八醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。可以与载体材料结合产生单剂型的活性成分的量随待治疗宿主和特定给药方式而变化。一些因素包括被使用的特定化合物的活性，患者的年龄、体重、一般健康状况、性别以及饮食；给药时间、排出率、药物合用，以及被治疗的特殊疾病的严重度和给药形式。药学方法还可以用于控制活性作用的持续时间。可以通过将聚合物使用至复合物或吸收肽而得到控释制剂。受控给药通过选择合适的大分子(例如，聚酯、聚氨基酸、聚乙烯、吡咯烷酮、乙烯-醋酸乙烯酯、羧甲基纤维素、硫酸鱼精蛋白)、大分子的浓度以及掺入方法来实现，以控制释放。例如，白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧可以被掺入疏水聚合物基质中，用于在一定天数内控制释放。这样的控释薄膜为本领域公知。特别优选经皮给药系统。其他用于此目的的常用聚合物实例可以用于本发明，包括可以外部或内部使用的非降解乙烯-醋酸乙烯酯共聚物和可降解乳酸-乙醇酸共聚物。特定水凝胶例如聚(羟乙基甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇)也可以使用，但是比其他聚合物释放系统的释放循环短，例如上面所述的。可选地，除了向所述药物中掺入聚合物颗粒外，还可以将所述材料装入制成的微胶囊中，例如，分别通过凝胶技术或通过界面聚合作用，比如羟基甲基纤维素或明胶微胶囊以及聚甲基丙烯酸甲酯微胶囊，或者在胶体药物给药系统中，例如脂质体、白蛋白微球体、微乳剂、纳米粒和纳米微囊或者在粗乳液中。为了有效治疗中枢神经系统靶，白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧应当在周围给药时也容易穿过血脑屏障。不能穿过血脑屏障的化合物可以通过心室内途径或者其他合适的适于脑给药的给药系统而有效给药。白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧还可以以试剂盒的形式单独提供，或者如上所述的药物组合物的形式提供。LI的给药可以通过常规方法进行。例如，LI能用在适当的稀释剂中例如生理盐水或者水，或者完全佐剂或不完全佐剂。LI可以通过任何适合于免疫系统激活的途径给药，例如静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻、口腔、直肠、阴道等。如上面所记载的，白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧可以用于预防或治疗目的。当供给在预防上使用时，在任何归因于疾病的证据或归因于疾病的任何症状之前提供LI。当供给在治疗上使用时，LI在疾病或者疾病的任何症状发作时(或发作后)提供。LI的治疗给药起到减轻疾病和提高常规治疗效果的作用。白细胞介素注射剂(LI)或MuWkine⑧的作用方式和特征白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧为天然来源天然产生的人细胞因子的生物活性的、毒性最小的、免疫调节混合物，所述细胞因子在上述条件下产生。LI能用作抗癌和抗病毒治疗或者作为新辅助方法用于癌症、传染病以及其他应答免疫调节的疾病状态的广谱应用。动物研究证明"混合的白介素"在体外具有免疫调节和免疫刺激活性(Haddenetat,"MixedInterleukinsandThymosinFractionVSynergisticallyInduceTLymphocyteDevelopmentinHydrocortisone-TreatedAgedMice",Ce〃./wmmo/.144:228-236(1992))。并非限制于任何一种理论，其假设局部/区域注射"混合的白介素"克服局部免疫抑制。随后，发生对肿瘤抗原的耐受性中断，允许产生有效的局部抗肿瘤免疫应答。如Golumbek等在"TreatmentofEstablishedRenalCancerbyTumorCellsEngineeredtoSecreteInterleukin-4"，Science254:713-716(1991)中所报道的，还已公知在肿瘤区域局部滴注白介素或者将白介素基因实际转染至肿瘤中显著增加抗肿瘤免疫应答，从而导致肿瘤退化。一种假设是LI作用方式涉及在LI中存在的不同细胞因子的组合活性诱导级联事件。第一，在LI中存在的肿瘤坏死因子例如TNF-a攻击肿瘤，以释放肿瘤抗原。第二，抗原呈递细胞(例如树状突细胞)将新释放的肿瘤抗原转运至淋巴结。第三，在瘤周给药和淋巴管周给药的LI中存在的淋巴组织增生细胞因子，例如IL-1、IL-2在淋巴结中诱导标记的最初肿瘤特异性T细胞多克隆扩增。第四，LI通过趋化性因子从局部淋巴结中召集CD4+T-细胞，恢复瘤内CD4+/CD8+细胞平衡有利于CD4+T-细胞，进一步正调节抗肿瘤免疫应答，从而导致肿瘤细胞坏死。第五，LI通过也存在于LI中的GM-CSF从循环中召集中性白细胞,，其扩大对肿瘤细胞巢的破坏。第六，LI-衍生的细胞因子或肿瘤浸润细胞新形成的细胞因子产物都诱导大块局部纤维化。非常出乎意料的是，白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧在外科手术治疗前的给药导致在细胞周期阶段的肿瘤细胞数量增加，肿瘤更快速生长和更快速复发肿瘤的风险并没有增加，否则本领域将能预测。LI表现出独特的诱导肿瘤细胞进入细胞周期的能力，可能是由于该试验药中存在的不同细胞因子的协同效应，以及这些细胞因子在宿主免疫系统和肿瘤细胞中的不同作用(Timaretal，"TheeffectofLeukocyteInterleukin,Injectionontheperi-andintratumoralsubpopulationofmononuclearcellsandontumorepithelia-Apossiblenewapproachtoaugmentingsensitivitytoradiationandchemotherapyinoralcancer.Amulti-centerPhaseI/IIclinicaltrial",7Tze丄ary"gosco/e(2003))。关于在外科手术前用白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧治疗的患者复发率的数据表明，在用LI治疗后的24个月没有癌症复发。值得注意的是，一小群8名连续治疗的患者中在接下来的24个月内没有一例复发患者。完全相反，文献教导相似患者在治疗后的18-24个月的复发率在约50%。特别地，白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧治疗不会诱导存在于肿瘤中的淋巴样细胞的活性增殖。相应地，在LI治疗之后，当Ki-67+癌细胞的频率增加时，间质Ki-67+细胞减少。因此，LI治疗诱导周期性肿瘤数目增加，导致剩余肿瘤对经过一段时间再继续的放射治疗和/或化学治疗的易感性提高。虽然用两种天然和重组细胞因子进行的其他研究已经显示在肿瘤治疗的功效，但是这些研究未能教导诱导进入细胞周期或者将LI与化疗、免疫疗法和放疗疗法协同结合的新方法(Timaretal.,"TheeffectofLeukocyteInterleukin,Injectionontheperi-andintratumoralsubpopulationofmononuclearcellsandontumorepithelia-Apossiblenewapproachtoaugmentingsensitivitytoradiationandchemotherapyinoralcancer.Amulti-centerPhaseI/IIclinicaltrial",77e丄ar戸goscope(2003))。例如，研究天然人类和重组IL-2和其他细胞因子的用途以及在局部区域的治疗证明在多种位点的免疫增进和抗癌活性。特别地，IL-2证明在胸膜腔、肝和膀胱中的活性，而IFN-a证明在卵巢中的活性，IFN-P证明在脑中的活性(Yasumotoetal.,"Inductionoflymphokine-activatedkillercellsbyintrapleuralinstillationsofrecombinantinterleukin-2inpatientswith,malignantpleurisyduetolungcancer",Ca"cer47:2184-7(1987);Mavilgitetal,"Splenicversushepaticarteryinfusionofinterleukin-2inpatientswithlivermetastases",/C7/"(9wco/8:319-24(1990);Pizzaetal,"Tumorregressionafterintralesionalinjectionofinterleukin-2(EL-2)inbladdercancer.Preliminaryreport",/"Zj"Ca"cer34:359-67(1984);Bereketal,"Intraperitonealrecombinanta-interferonfor"salvage"immunotherapyinstageIIIepithelialovariancancer:agynecologiconcologygroupstudy",Ca"cer45:4447-53(1985);禾口Fetteletal.,"Intratumoradministrationofbeta-interferoninrecurrentmalignantgliomas-AphaseIclinicalandlaboratorystudy",Ca"cer65:78-83(1990))。甚至进一步IFN-Y已经显示出在皮肤中的活性，而TNF-a显示出在生殖器中的活性，而多种细胞因子的混合物在头颈中显示活性(Edwardsetal.,"Theeffectofintralesionalinterferongammaonbasalcellcarcinomas",/」ca<ii)e，ato/22:496-500(1990);Irieetal.，"Acaseofvulvacancerrespondingtotherecombinanthumantumornecrosisfactor(PT-950)localinjectiontherapy",iVbi/m^o34:946-50(1988);禾口Pulleyetal""Intravenous,intralesionalandendolymphaticadministrationoflymphokinesinhumancancer",丄，//z5:S157-63(1986))。并且，在外科手术前的10天在颈淋巴管周或者颈淋巴管周和在下颏下给药重组IL-2的研究表现出可变的坏死和淋巴细胞性浸润(Valenteetal.，"InfiltrationleukocytepolulationsandT-lymphocytesubsetsinheadandnecksquamouscellcarcinomasfrompatientsreceivingperilymphaticinjectionsofrecombinantinterleukin-2",^Moc/PaAo/3:702-8(1990);DeStefanietal，"Treatmentoforalcavityandoropharynxsquamouscellcarcinomawithperilymphaticinterleukin-2:clinicalandpathologiccorrelations",7Vw附Mwc^/zer19:125-33(1996))。此外，已切除的肿瘤显微检査表明与IL-2临床观察有关的淋巴细胞浸润增力口(Saitoetal,"Immunohistologyoftumortissueinlocaladministrationofrecombinantinterleukin-2inheadandneckcancer",A^Ga跃a/Ka/Zzo92:1271-6(1989))。虽然如此，上述研究中没有一个表现出切除肿瘤的任何总体积变化，尽管在20名头颈癌患者中推定高剂量重组IL-2(800,000U，持续四周[U-单位])存在两禾中减轻(Saitoetal,"ClinicalevaluationoflocaladministrationofrIL-2inheadandneckcancer",A7)(7aMm.ATa/Zzo,921271-6(1989))。再者，上述研究已经受限于患者数目小并受阻于缺乏病理学比较对照组。虽然最近由DeStefani等人进行的202名OSCC患者的随机法多中心III期研究表明，在外科手术前，将低剂量(5000U/天[11=单位])重组人IL-2淋巴管周给药至同侧横向(ipsylateral)颈部淋巴结链，持续10天，结果导致无瘤生存率显著(p<0.01)增长，接着导致更长的总存活期(p<0.03)，但是DeStefani等人没有评价该治疗方案对细胞周期的作用以及其在改善方文疗和化疗方面的影响。参见DeStefani等"ImprovedSurvivalWithPerilymphaticInterleukin2inPatientsWithResectableSquamousCellCarcinomaoftheOralCavityandOropharynx",C纖er95:90-97(2002)。再者，尽管教导5000U/天，本发明和DeStefani等也无法进行关于DeStefani等教导的"高"和"低"剂量的给药生物学比较，因为药物效能用未定义的U(单位)测定。相反，本发明以IU(国际单位)验证并完成了全部USP分析方法用于测定MuMkine⑧生物活性的验证程序。药物安全性、先导性效能和组合物白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧己经在超过200个癌症、HIV和HIV/HPV(人乳头状瘤病毒)感染的、没有与LI给药相关的严重有害事件的患者中得到测试，其制备在美国专利申请10/611,914中得到描述，其内容在lt匕并入作为参考(Harrisetal.,"Immunologicapproachestothetreatmentofprostatecancer",(9"co/,Aug;26(4):439-7(1999);Timaretal,"TheeffectofLeukocyteInterleukin,Injectionontheperi-andintratumoralsubpopulationofmononuclearcellsandontumorepithelia-Apossiblenewapproachtoaugmentingsensitivitytoradiationandchemotherapyinoralcancer.Amulti-centerPhaseI/IIclinicaltrial",7Tze丄a^y/7gosco/e2003;Brownetal""APhaseIOpen-LabelStudyofLeukocyteInterleukin,InjectioninHIV-Iinfectedindividuals:preliminaryevidenceforimproveddelayed-typehypersensitivityresponsestorecallantigens",^4""v/ra/77zerap_y5(supplement)18,2000;Tayloretal,"ImmunotherapywithLeukocyteInterleukin,Injectionforhumanpapillomavirus(HPV)inducedcervicaldysplasiainHIVpatients",AnnualMeetingoftheInternationalSocietyforInterferonandCytokineResearch,Cleveland,OH，October2001;Tayloretal""ImmunotherapywithLeukocyteInterleukin,Injectionforhumanpapillomavirus(HPV)inducedcervicaldysplasiainHIVpatients",33rdSGOConference,Miami,FL，March(2002))。白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧在动物毒性研究中也表现出安全性，比如对小鼠、大鼠、豚鼠(guineapig)和狗的研究。再者，LI经测试并已证明了在头颈癌和宫颈发育异常中的先导性效能。用白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧治疗遭受头颈癌痛苦的患者的临床研究患者四H"^—名患者接受白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧治疗，其中包括二十一名患者(平均年龄59.4岁，分布范围40-87)患有先前未治疗过的头颈癌。选择标准为>18岁；能够并且愿意提供书面通知同意；组织学上确认为口腔鳞状上皮细胞癌(位置口底部7名、舌8名、唇1名、口咽1名、颊1名以及齿龈1名)；没有已知的远缘(内脏的)转移性疾病；预期寿命长于6个月。怀孕或已经对LI给药位点化疗、十二指肠溃疡或胃溃疡或者哮喘的患者都被排除。21名LI治疗患者中的19名得到评价。两名登记受治疗的患者随后分别被证实患有悬雍垂未分化癌和口腔底部腺癌。除了组织病理学/免疫组织化学分析外，对这两名患者给予了全过程的治疗包括白细胞介素注射剂(LI)给药。专程从匈牙利布达佩斯国家肿瘤学会的病理样本贮藏库，选择本研究的病理检査部分病历对照，并且与得自LI治疗组的样本在肿瘤大小和位置、肿瘤时期、患者性别和年龄方面相匹配。对照组包括20名患者(平均年龄:57.5岁，分布范围44-77)，全部经生物活组织检査确定口腔鳞状上皮细胞癌(位置口腔底部3名，舌12名；唇5名)。患者检査在加入试验前患者经历综合评价。他们的医疗史也得到回顾。一旦登记，进行全面体格检查、血液血化学诊断检査、胸心脏放射显影(cardiomdiogmphy)和心电图。为了显现并测量口腔肿瘤，物理测定法禾口核磁共振成像(MRI)并用。以可触及肿瘤的最大直径处的最长尺寸和与该最长尺寸呈直角测量口腔癌症表面面积(PE测量法)。对于MRI，施用Tl-、T2-加权的自旋回波脂肪饱和(fastspinecho，FSE)、翻转复原FSE(IRFSE)，具有钆的脂肪饱和Tl加权序列的冠状面、轴和矢状面扫描。口腔癌在最高直径的区域进行测定。OSCC的MRI分析在每一例LI治疗的之前和之后用标准方法进行。在应答者组，LI治疗减小肿瘤尺寸以及T2和IRFSE信号强度，对比度增强水平，损伤边缘变得不明显。在无应答者组，MR形态学显示出肿瘤在LI治疗后没有显著改变。通过病例进展的病理学/形态测定法显示肿瘤大小增加。患者在每一随后就诊中得到采访，使用限定问巻询问生活质量(疼痛水平、舌可动性程度等)。治疗医生在每次就诊时评价毒性。治疗方案白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧的给药可以用以下任一剂量进行200、400、800、1200、1600、2400、3200、4800、8000、9600禾fU2000IU。制剂中所用的疫苗制品的精确剂量取决于给药途径，以及病人的性质，应当依照执业医生的诊断和每个病人的状况根据标准临床技术来确定。有效量是指足以在宿主内产生有用应答的量，疫苗制品给药至该量。病理学国家肿瘤学会(匈牙利布达佩斯)进行性肿瘤部的中心病理学实验室进行了病理学评价。单个病理方案支配该研究，描述了外科手术离体标本的固定、目测检査、宏观检查和显微检查、组织学和免疫组织化学过程，如Timaretal,"TheeffectofLeukocyteInterleukin,Injection(Multikine)treatmentontheperitumoralandintratumoralsubpopulationofmononuclearcellsandontumorepithelia:apossiblenewapproachtoaugmentingsensitivitytoradiationtherapyandchemotherapyinoralcancer-amulticenterphaseI/IIclinicaltrial",丄ar戸goscope113:2206-2217(2003)所提供。口腔损伤的诊断基于可疑损伤的切除活组织检查，选择分类为T2-3N0-2M0的癌用于LI治疗方案的免疫疗法(Haddenetal，"Interleukinsandcontrasuppressioninduceimmuneregressionofheadandneckcancer",爿rc/zOto/ao/wgo/Z/eadA^c/t^/^120:395-403(1994))。在LI治疗末期，外科手术前，如上所述评价临床应答，患者预定进行癌症切除。离体组织置于预先标记的盛有福尔马林的容器中，在石蜡中包埋组织之前固定过夜，制备薄切片用于H&E染色和免疫组织化学。对得自H&E染色的切片进行组织学和AJCC(AmericanJointCommissionforCancer,美国癌期划分联合委员会)分级。对3个不同肿瘤局部进行组织病理学的分析表面(Rl)、中心(R2)和肿瘤间质界面(R3)。还用H&E载玻片评价坏死肿瘤细胞的出现。在OSCC肿瘤中，通过两种方法测定上皮组分对间质的百分比根据Mallory(三色染色法)进行结缔组织染色，通过利用ImagePro分析软件(MediaCybernetics,SilverSpring,MD)测量载玻片以得到癌细胞巢的面积(肿瘤上皮细胞)。分别地，包含切除组织的载玻片用泛-细胞角蛋白抗体(DAKO，Glostrup,Denmark;A1A3+CK19)进行细胞角蛋白免疫组织化学标记，所述泛-细胞角蛋白抗体标记癌细胞。单核细胞浸润的特征在石蜡包埋的肿瘤样品切片上进行脱石蜡和微波抗原修复后，通过使用免疫组织化学检测存在于与肿瘤细胞巢非常接近的区域的单核细胞。使用抗下列标记物的抗体髓过氧化酶、II类HLA(HLA-DP、DQ、DR)、CD8、CD20、CD34、CD45R0、CD68(全部来自DAKO);CD4、CD25、CD56(NovocastraLaboratoriesLtd.,NewcastleuponTyne，英国)；CDla(Immunotech,马赛，法国)；以及CD134(PharMingen,圣地亚哥，加拿大)。所有病例的阴性对照载玻片用同种型匹配的未免疫Igs制备。免疫组织化学(IHC)的标记用DAKOLSAB-2试剂盒完成，利用生物素化的抗小鼠/抗兔IgG连接子以及抗生蛋白链菌素-HRP(Streptavidin-HRP)，以显现特异性结合的抗体。所用色原体为AEC(红)标记。切片用苏木精复染细胞核。肿瘤样品的评价对来自白细胞介素注射剂(LI)治疗组和对照组(非LI-治疗)的肿瘤样品评价组织学的变化和浸润的细胞T和B淋巴细胞、NK细胞、树状突细胞、巨噬细胞和中性白细胞、造血干细胞、以及T-细胞激活和记忆细胞标记。40倍放大用于选择区域，400倍放大用于鉴定并定量测定浸润细胞。基于"热点(hotspot)"技术测定单核细胞的密度，其意味着，在最高肿瘤-浸润单核细胞密度区域，测量在每一研究的肿瘤区域密度。该方法最小化了组织中细胞浸润的极端不均匀性(extremeheterogeneity)的问题。每一患者肿瘤切片的组织学评价由3名病理学家独立进行，并且如果出现不一致的情况，达成一致的决定。形态测定的测量同样由3名病理学家进行，完成测量而无需临床背景和每一病例的治疗结果。统计学分析用ANOVA单一因素分析和f测试分析病理学数据，并以"P"值小于0.05考虑统计学显著性。以下是能用于本发明的不同剂量的非限定性实施例，其中实施例1涉及研究的剂量。然而应当理解的是，本发明将不以任何方式仅限于提供的剂量，在需要时其他有效的剂量可以用于治疗需要的患者。实施例1以IL-2计日剂量800IU的一半进行瘤周注射。另一半(400IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，每周给药5次，达到以IL-2计12000IU的累积剂量。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。单纯静脉内(团块)注入给予环磷酰胺，在第一次LI给药三天前注射，300mg/m2。在环磷酰胺给药3天后开始自我口服给药(和食品一起)吲哚美辛(25mg)，每日三次，日总剂量75mg，直至外科手术前24小时。在环磷酰胺给药3天后开始自我给药硫酸锌(50mg，以元素锌计)和多种维生素补充物，每日一次，直至外科手术前24小时。环磷酰胺提供的注射USP(Bristol-Myers-Squibb，英国)环磷酰胺为无菌粉末，相对于每100mg环磷酰胺，无菌粉末含有45mg氯化钠、75mg甘露醇或大约82毫克碳酸氢钠，静脉输注前重新组成。吲哚美辛提供的吲哚美辛USP(Sanoft-Synthelabo，法国)为25mg片剂，用于与食物一起自我口服给药。硫酸锌和多种维生素由诊所提供硫酸锌(以元素锌计50mg，R.P.SchererCorporation,Clearwater,佛罗里达，美国)和OTC多种维生素给每名病人自我给药。实施例2以IL-2计日剂量1200IU的一半进行瘤周注射。另一半(600IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，根据想要的累积剂量，每周给药5次或者更少。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。其余治疗方案与实施例1相同。实施例3以IL-2计日剂量1600IU的一半进行瘤周注射。另一半(800IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，根据想要的累积剂量每周给药5次或者更少。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。其余治疗方案与实施例1相同。实施例4以IL-2计日剂量2400IU的一半进行瘤周注射。另一半(1200IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，根据想要的累积剂量每周给药5次或者更少。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。其余治疗方案与实施例1相同。实施例5以IL-2计日剂量3200IU的一半进行瘤周注射。另一半(1600IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，根据想要的累积剂量每周给药5次进行或者更少。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。其余治疗方案与实施例1相同。45实施例6以IL-2计日剂量4800IU的一半进行瘤周注射。另一半(2400IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，根据想要的累积剂量每周给药5次或者更少。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。其余治疗方案与实施例1相同。实施例7以IL-2计日剂量9600IU的一半进行瘤周注射。另一半(4800IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，根据想要的累积剂量每周给药5次或者更少。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。其余治疗方案与实施例1相同。实施例8以IL-2计日剂量12000IU的一半进行瘤周注射。另一半(6000IU)在同一次就诊时随后淋巴管周注射。两种注射都经过三周的时间，根据想要的累积剂量每周给药5次或者更少。在可视/可触及肿瘤块的周围边缘皮内给药LI。淋巴管周的注射在下颌区后面区域进行，该区域在颈淋巴链的与被注射的肿瘤块同侧的区域。其余治疗方案与实施例l相同。临床病例应答对于实施例1以800IU/mL的日剂量注射每周给药5次经过三周时间达到累积剂量12000IU/mL，没有与白细胞介素注射剂(LI)相关的系统或局部毒性或严重有害事件。在外科手术中、术后或创伤愈合没有与LI相关的并发症报道。评价了鳞状上皮细胞癌患者组织学相匹配的原发性肿瘤样本19(LI治疗)和对照的样本20(非LI-治疗)。在LI-治疗组的条件下，外科切除原发性肿瘤在14至54天之间进行，在LI治疗的末期之后-外科手术的中值时间为22天。所有LI-治疗组和对照组的患者的组织学诊断结果、角质化(Brodes评分(Brodesscores))以及恶性肿瘤国际临床病期分类(TNM)时期如下表1所示。两组关于角质化或TNM时期在组织学上没有差别。表1OSCC患者的病理学数据<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>*=病理上未检测到肿瘤组织，CPC-扁平细胞癌，BI^Brodes分级，MF-多病灶，OSCO口腔鳞状上皮细胞癌，pTNM-病理确定的TNM等级。对于LI治疗组内表明为表1中的5号和14号的两名患者，在外科手术切除的"肿瘤"块中没有检测到癌组织。通过组织学作为LI治疗方案的结果，所述患者被认为是表现出100%的肿瘤减少的完全应答者。在显示为表1中7号和18号的另两名经LI治疗的患者中，应用显像技术证实肿瘤体积縮小〉50%，被认为是部分(大部分)应答。对于表明为表1中4号、6号、9号和12号的其他四名患者，体积縮小证实为>30%，被认为是轻微应答。具有>40%的肿瘤体积增加的进行性疾病只有1例(第17号)发生，而在剩余的病例中检测到稳定的疾病(10/19)。因此在LI治疗组中的应答率为21%，全部应答率为42%(8/19)。LI治疗在OSCC上的效果的完全药理分析得以在LI治疗无应答亚组(稳定疾病和进行性疾病，n=ll)进行以及单独地在LI治疗应答亚组(n=6)进行，排除2个其中不能检测到肿瘤组织的完全应答者。肿瘤浸润淋巴细胞CD20+B-细胞只存在于OSCC的间质中，日剂量800IU/mL注射给药，每周五次，持续三周，使累积剂量达实施例1的12,000IU/mL。在得自以下LI预处理的肿瘤样本中，不考虑所存在的肿瘤面积，OSCC中的B-细胞无显著性减少。临床应答没有影响OSCC中B-细胞的图像。如图1-4所示，在对照组中，浸润肿瘤和间质的CD8+细胞的数目超过CD4+细胞。结果，004+/008+比值远小于1，约为0.5，如图5中具体所示。在LI治疗组，如图4所示观察到在肿瘤间质中，CD4+T细胞密度上升和CD8+T细胞密度下降。在图4中还显示了在上皮内CD4+和CD8+细胞中出现类似的趋势。值得注意地是，只有在对LI治疗的应答者的条件下，所述变化是显著的(p<0.05)。因此结果如图5所示，与对照组相比，LI治疗过的肿瘤在细胞浸润中其CD4+ZCD8+比值高出2-8倍。由CD4VCD8+比值可以看出，虽然在对LI治疗亚组应答者中已经检测到最高CD4+和最低CD8+细胞内浸润密度，但是，与无应答者(对LI治疗)在肿瘤的肿瘤间质区段的不同在统计学上仍然是显著的(p<0.05)。如图6和图7所示，基于CD25和OX40(CD134)分子的表达，评价激活的T-细胞数目，揭示了在OSCC浸润中表达这些标记物的细胞相对低的平均密度，特别是在OX40的情况下，对照组和LI治疗组的频率方面并无显著性差异。然而，使用可供的冷冻标本和免疫荧光，CD25+/CD4+T细胞更常见于LI治疗组中，IO位患者中的IO位具有14-61。/。的CD4+细胞，但只是偶尔在9名患者中的1名病人中检测到。如图8所示，CD45R0+记忆细胞的密度在对照组和LI治疗组的情况下在肿瘤间质和上皮内之间高度相似。CD45R0+淋巴样细胞的密度为T细胞(CD4++CD8+)的50-60%，这表明，高比例肿瘤浸润T淋巴细胞的是记忆细胞。OSCC的间质或肿瘤上皮瘤巢中并未发现CD34+造血干细胞和CD56+NK细胞，不考虑肿瘤面积或所调査的患者人群(对照或LI治疗)。CDla+树状突细胞几乎独占地位于肿瘤上皮瘤巢。如图9所示，与对照样品(非LI-治疗)相比，在LI应答者亚组中，LI治疗对在OSCC三个区域内分布的树状突细胞有不同效果，表现为在肿瘤中心(R2)其中没有观察到变化，而测量到了表面(Rl)处CDla+树状突细胞的下降(p<0.05)，以及存在于肿瘤间质界面(R3)处的CDla+树状突细胞的增加(p<0.05)。炎症细胞中性白细胞既存在于肿瘤间质中又存在于肿瘤上皮瘤巢，与巨噬细胞在肿瘤中的分布相似，而嗜酸性细胞仅发现于肿瘤间质，日剂量800IU/mL注射给药，每周五次，持续三周，使累积剂量达实施例1的12,000IU/mL。被切除的肿瘤样本中的中性白细胞与巨噬细胞浸润分别通过用髓过氧化酶和CD68标记物染色测定。巨噬细胞密度的分析揭示了仅在LI应答组间质中存在的CD68+巨噬细胞的下行性调节。该趋势甚至在LI治疗组中上皮内更加显著(LI应答者亚组p0.002以及LI无应答者pO.Ol)(图10)。另一方面，如图11至图13所示，LI治疗情况显示更多的中性白细胞向癌细胞巢中迁移。如图13所示，中性白细胞密度在LI应答者亚组的肿瘤间质中也很显著。在LI治疗组中，由中性白细胞增加的瘤内浸润只在多病灶的纤维坏死情况下观察到。发现嗜酸性细胞密度在两组OSCC中高度异质(LI治疗组和对照组)。形态测定分析显示在LI治疗的患者的肿瘤间质中的嗜酸细胞细胞群没有显著变化。然而，对这种情况更详细的分析显示，具有高嗜曙红细胞密度的肿瘤(〉50个细胞/HPF)在LI治疗组中的数目是对照组的两倍，其中LI治疗组19位患者中的9位或47%，对照组20位中的5名或25%。肿瘤坏死在外科手术得到样本中，宏观癌坏死座位只发生于对照组。然而，IL治疗组中多病灶显微坏死明显更多发，如表1和表2(如下)及图15(p<0.05)所示17名患者中的10名，与之相比对照组如表1和表2及图14(p<0.05)所示20名患者中的4名。在这方面，应答者亚组和无应答者亚组(对LI治疗)之间没有显著差异。表2OSCC病例中的坏死发生率<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>没有评价来自治疗组的两个完全恢复的病例。CTR:对照，OSCC-口腔鳞状上皮细胞癌，无应答者对CTR:p<0.05，无应答者+应答者对CTR:p<0.05(x2检验)肿瘤间质/癌症细胞巢比值白细胞介素注射剂(LI)治疗在癌细胞巢与肿瘤间质的面积百分比方面具有显著效果。切除的组织样本用Mallory三色染色法染色，其中癌细胞巢被标记成粉色。肿瘤组织中间质的比例通过图16和图17所示的形态测定法测定。如图18所示，与对照组样本相比(p<0.05)，数据表明LI治疗组肿瘤组织中胶原间质的比例显著增加，表明癌细胞巢区域减小。OSCC样本中纤维变性图像分析表明，胶原纤维积聚在癌细胞巢周围，并表现出上皮周围染色。还在癌细胞巢和肿瘤间质之间发现胶原纤维(图16和图17)。上皮周围胶原性疾病在对照组和LI治疗组肿瘤中的频率类似，而间质性纤维化具有高度显著性(p<0.001)，与对照组相比(2/20或10%)，在LI治疗组里更频繁，19名患者中的12名或63%。如表3所示，无应答者和应答者(对LI治疗)亚组在此方面没有显著差异。表3在OSCC肿瘤样本中纤维化类型的发生率<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>CTR4寸照，OSCX^口腔鳞状上皮细胞癌，无应答者对CTR:pO.Ol，应答者对CTR:p<0.05，无应答者+应答者对CTR:p<0.01(f检验)II类HLA表达OSCC的II类HLA表达通过免疫组织化学测定。在LI治疗和对照病例中，肿瘤浸润细胞都显示出非常强的HLAII表面染色。癌细胞表达是异质性的。如表4所示，在对照组中，20个病例中包括约11个HLAII阴性样本，其中剩下9个病例包含具有至少一个病灶或者强膜HLAI1表达的肿瘤。类似的图像在LI治疗组中也能观察到(8A7HLAII阳性)。然而，在LI治疗组中，HLAII阳性病例专属于无应答者组，而所有LI应答病例癌细胞均为II类HLA抗原表达阴性(p<0.05)(表4)表4II类HLA在OSCC癌细胞中的表达<table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table>表达由免疫组织化学测定。没有评价来自治疗组的两个完全恢复的病例。CTR二对照，OSCC-口腔鳞状上皮细胞癌，无应答者对应答者CTR:pO.Ol(f检验)讨论将白细胞介素注射剂(LI)给药至晚期原发OSCC患者，作为常规治疗前的首要治疗。所述常规治疗例如外科手术后放射疗法诱导浸润免疫细胞变化而不是炎症细胞。发现最低LI给药剂量能够激活向癌细胞巢中迁移的T细胞群的变化和浸润的T细胞，由增加的CD25表达予以证实。然而，如结缔组织与肿瘤上皮成分的比例中缺乏任何明显变化所示，低剂量LI，以IL-2计400IU,3天/周共2周的治疗方案不能导致肿瘤组织的大块坏死。然而，以IL-2计800IU/天、每周五天、共三周的较高剂量给药至OSCC患者作为开始常规治疗前的首要治疗，U治疗的患者证明肿瘤内浸润CD4+T-细胞显著增加(p<0.05)，伴行CD8+T-细胞减少(原位)。这种变化导致OSCC的004+/008+比值显著不同，而对照组的特征在于低的004+/0)8+比值(<1，具有CD8+T-细胞超优势度)。在LI治疗无应答者和对LI治疗应答者组中，CD4+T-细胞超优势度都具有2-8倍增加，观察到明显较高的CD4VCD8+比值。值得注意的是，与无应答者相比，LI应答者间质004+化08+比值得到显著提高(p<0.05)，表明这一现象的临床重要性。所述CD4+T-细胞比例促进激活标记物CD25。新近被激活的CD4+T-细胞的标记物OX40的表达，已经在包括头颈癌在内的几种癌症的TDL部分中检测到，在T-细胞浸润中很少见(Vettoetal.，"PresenceoftheT-cellactivationmarkerOX-40ontumorinfiltratinglymphocytesanddraininglymphnodecellsfrompatientswithmelanomaandheadandneckcancers",JiSMrg"174:258-265(1997);Ladanyietal""T-cellactivationmarkerexpressionontumor-infiltratinglymphocytesasprognosticfactorincutaneousmalignantmelanoma",Ca"cer10:521-530(2004))。Ox40表达的缺乏表明较晚阶段的T-细胞激活过程。这也许是由于在LI治疗组中从LI治疗末期到外科手术移除肿瘤之间的14-54天、中值22天的相对较长时期。另一方面，双重标记研究表明大比例的CD4+和CD8+T细胞为CD45R0+，表明它们是记忆T-细胞。与这些变化平行，上皮内的树状突细胞从OSCC表面转移到肿瘤间质界面。在先前的有关IL-2在头颈癌的输注局部疗效的报道中，观察到了相似的004+T淋巴细胞和树状突细胞选择性作用，显示出只低剂量IL-2给药显著增加CD25+细胞(Salteretal，"Thephenotypicchangesintumourinfiltratinglymphocytesandtumourcellsfollowingintra-arterialinflisionofinterleukin-2inpatientswithsquamouscellcarcinoma",J户aAo/176:167-173(1995))。白细胞介素注射剂(LI)治疗OSCC患者的特征在于显著改变的炎症细胞模式，表明主要是由中性白细胞以及较小程度上的嗜酸性细胞而不是由巨噬细胞介导急性炎症反应。黑素瘤患者中的其他研究表明，在接种产生自体肿瘤细胞的GM-CSF后，在接种位点和肿瘤位点中性白细胞的积聚占优势(Soifferetal，"Vaccinationwithirradiatedautologousmelanomacellsengineeredtosecretehumangranulocyte-macrophagecolony-stimulatingfactorgeneratespotentantitumorimmunityinpatientswithmetastaticmelanoma",/VocA^/USA95:13141-13146(1998);Soifferetal，"Vaccinationwithirradiated,autologousmelanomacellsengineeredtosecretegranulocyte-macrophagecolony-stimulatingfactorbyadenoviral-mediatedgenetransferaugmentsantitumorimmunityinpatientswithmetastaticmelanoma",/Onco/21:3343-3350(2003))。与对照相比LI治疗的患者的中性白细胞浸润增加的一种解释为LI制品含有包括GM-CSF在内的几种细胞因子。与未治疗的对照组相比，伴随宿主抗肿瘤反应的肿瘤浸润细胞组分中的复杂变化，在LI治疗的OSCC患者中检测到癌细胞巢的多病灶坏死以及结缔组织比例的增加。这些变化反映了U新辅助疗法给药增加了抗肿瘤免疫应答对OSCC的抵抗。对OSCC成功的免疫应答要求逆转固有的瘤内低CD4VCD8+比值。在实体瘤中CD8+对CD4+细胞的超优势度并非OSCC特有。类似的低CD4+/CD8+比值在基础细胞癌、颈癌和乳癌中也已报道(Rohrbachetal,"Immunologyandgrowthcharacteristicsofocularbasalcellcarcinoma",Grae/^sAc/zC7/wExpO卢/2a/脂Z239:35-40(2001);Santinetal，"Tumor-infiltratinglymphocytescontainhighernumbersoftype1cytokineexpressorsandDR+Tcellscomparedwithlymphocytesfromtumordraininglymphnodesandperipheralbloodinpatientswithcanceroftheuterinecervix",G"eco/Owco/81:424-432(2001);Murtaetal,"Lymphocytesubpopulationsinpatientswithadvancedbreastcancersubmittedtoneoadjuvantchemotherapy",r"/won'86:403-407(2000))。高百6、比的CD4+T细胞或者高CD4+ZCD8+比值与黑素瘤、非何杰金氏淋巴瘤、肾细胞癌以及宫颈癌中良好预后或者应答免疫疗法相关(Hakanssonetal，"Tumour-infiltratinglymphocytesinmalignantmelanomaandresponsetointerferonalphatreatment",5r/Ca"cer74:670-676(1996);Anselletal，"CD4+T-cellimmuneresponsetolargeB-cellnon-Hodgkin'slymphomapredictspatientoutcome",/O"co/19:720-726(2001);Igarashietal，"Effectoftumor-infiltratinglymphocytesubsetsonprognosisandsusceptibilitytointerferontherapyinpatientswithrenalcellcarcinoma",69:51-56(2002);Sheuetal,"ReversedCD4/CD8ratiosoftumor-infiltratinglymphocytesarecorrelatedwiththeprogressionofhumancervicalcarcinoma",C""cer86:15371543(1999))。这表明了由肿瘤诱导的癌症患者后天获得性免疫状态，是反映癌症患者中通常缺乏免疫应答的普通现象。再者，CD4+T淋巴细胞对起始和维持抗肿瘤免疫起到了中心作用，其通过对CD8+CTL提供帮助、刺激抗原呈递细胞、以及支持免疫记忆，或者在某些情况下，通过细胞因子分泌或直接溶解细胞来履行效应子作用(Goedegebuureetal，"TheroleofCD4+tumor-infiltratinglymphocytesinhumansolidtumors",/w扁"o/14:119-131(1995);Hungetal.,"ThecentralroleofCD4+Tcellsintheantitumorimmuneresponse",J五x/Med188:2357-2368(1998);Gaoetal,"Antigen-specificCD4+T-cellhelpisrequiredtoactivateamemoryCD8+Tcelltoaflillyfunctionaltumorkillercell",C"wcer62:6438-6441(2002))。在用白细胞介素注射剂治疗口腔癌的情况下，尚不清楚哪个是引发抗肿瘤免疫反应的特异性介导子(在LI中)。然而，在LI治疗后，上皮内粒细胞密度增加与微观坏死并行，这表明，为了产生对于形成的肿瘤的临床药理可测的破坏，非特异性抗肿瘤机制激活作用(在OSCC患者中)是同等重要的。在LI治疗的无应答者亚组与应答者亚组的肿瘤组织病理学比较，其中19个病例中的8例观察到临床组织病理学退化，表明从免疫细胞组成到炎症细胞图像的大多数被研究的免疫学参数类似。这些数据表明LI治疗组同质应答该治疗，但LI治疗的抗癌作用是不同的。对此偏差可能的解释可以是对OSCC肿瘤的免疫敏感性的个体差异性，例如不同患者体内肿瘤抗原和/或HLA组合物和/或功能免疫应答的损伤水平差异。对OSCC癌细胞的II类HLA表达的分析表明LI治疗组和对照组表达的水平高度类似(约45。/。II类HLA抗原表达阳性)。这表明，与对照组相比，LI治疗没有诱导或提高肿瘤内的HLAII分子。然而在LI治疗组内，所有HLAII阳性病例属于无应答者亚组特有，而所有LI应答病例均为阴性。虽然得自小数目的病人，这一发现可以表明II类HLA在OSCC上的表达与疾病恶化的临床结果相关，或者与对免疫疗法的应答能力减小相关。同样的发现在恶性黑素瘤中得到报道，其中II类MHC表达构成不良预后因素，可能由于在缺乏共刺激信号的条件下，表达肿瘤细胞的II类MHC诱导T细胞无反应性(Brockeretal,"HLA-DRantigenexpressioninprimarymelanomasoftheskin",JInvestDermatol82:244-247(1984);Beckeretal,"Tumorescapemechanismsfromimmunosurveillance:inductionofunresponsivenessinaspecificMHC-restrictedCD4+humanTcellclonebytheautologousMHCclass11+melanoma",InternatImmunol5:1501-1508(1993))。如上所述在黑素瘤、头颈癌中缺乏共激分子B7.1和B7.2的表达，II类MHC分子在头颈癌中的表达将诱导免疫而授(Langetal.,"ImpairmentofT-cellactivationinheadandneckcancerinsituandinvitro",ArchOtolaryngolHeadNeckSurg125:82-88(1999))。免疫系统的特异性靶向作用没有共存尝试调整癌症细胞靶的敏感性，可能无法产生对基于免疫治疗的整体应答率的改善。由白细胞介素注射剂(LI)或Multikine⑧诱导的免疫介导过程，可以在停止LI给药以后的很长一段时间持续，可以由LI治疗结束后14-54天肿瘤中观察到的免疫组织药理变化证明。这种新辅助疗法治疗方案对患有晚期原发OSCC患者的功效导致肿瘤块与基线肿瘤测量相比，在42%的患者中显著减少。OSCC的LI新辅助疗法免疫治疗方案为临床上可行的控制OSCC的途径。在此描述了本发明，很明显本发明能够以多种方式变化。所述变化不视为脱离本发明精神或范围，所有所述改进应当包括在所附权利要求的范围内。权利要求1、一种对II类人类白细胞抗原在肿瘤细胞表面上的表达进行调节的方法，该方法包括对需要的患者给药无血清且无促分裂原的细胞因子混合物，该无血清且无促分裂原的细胞因子混合物含有特定比值的选自由IL-1β、TNF-α、IFN-γ、GM-CSF、白介素-2IL-2所组成的组中的细胞因子，其中IL-1β、TNF-α、IFN-γ、GM-CSF与IL-2的特定比值为IL-1β与IL-2的比值范围为0.4-1.5；TNF-α与IL-2的比值范围为3.2-11.3；IFN-γ与IL-2的比值范围为1.5-10.9；GM-CSF与IL-2的比值范围为2.2-4.8。2、根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞因子的特定比值为IL-lp与IL-2的比值范围为0.6-0.8;TNF-a与IL-2的比值范围为7.7-10.9;IFN-y与IL-2的比值范围为4.9-7.1;GM-CSF与IL-2的比值范围为3.5-4.5。3、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物在约20IU至1600IU的范围内一周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。4、根据权利要求3所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物在约40IU至800IU的范围内一周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。5、根据权利要求4所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物在约35IU至75IU的范围内一周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。6、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以55IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。7、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以200IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。8、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以400IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。9、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以800IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。10、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以1200IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。11、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以1600IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。12、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以2400IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。13、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以3200IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。14、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以4800IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。15、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以8000IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所^^出的白介素-2的国际单位。16、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以9600IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。17、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以12000IU—周给药三次，持续两周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。18、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以200IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。19、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以400IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。20、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以800IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。21、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以1200IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。22、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以1600IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。23、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以2400IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。24、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以3200IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。25、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以4800IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。26、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以8000IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。27、根据权利要求l所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以9600IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。28、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物以12000IU—周给药五次，持续三周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。29、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物在约20IU至1600IU的范围内一周给药三次，持续八至二十六周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。30、根据权利要求3所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物在约20IU至1600IU范围内一周给药五次，持续八至二十六周时间，其中IU代表在世界卫生组织的关于人IL-2的第一国际标准86/504中所给出的白介素-2的国际单位。31、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有IL-3，IL-3与IL-2的比值范围为0.38-0.68，优选为0.53±0.15。32、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有IL-6，IL-6与IL-2的比值范围为37.2-53.8，优选为46±5.9。33、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有IL-8，IL-8与IL-2的比值范围为261-561.5，优选为411±10.6。34、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有IL-la，IL-la与IL-2的比值范围为0.56-0.94，优选为0.75±0.19。35、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有IL-IO，IL-10与IL-2的比值范围为2.87-3.22，优选为3.0±0.18。36、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有IL-16,IL-16与IL-2的比值范围为1.16-2.84，优选为1.84±0.68。37、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有G-CSF，G-CSF与IL-2的比值范围为2.16-3.78，优选为2.97±0.81。38、根据权利要求l所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有TNF-(3，TNF-(3与IL-2的比值范围为1.17-2.43，优选为1.8±0.63。39、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有MIP-la，MIP-la与IL-2的比值范围为15.7-37.16，优选为22.7±7.0。40、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有MIP-ip，MIP-l(3与IL-2的比值范围为17.1-28.5，优选为22.8±5.7。41、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有RANTES，RANTES与IL-2的比值范围为2.3-2.7，优选为2.5±0.13。42、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有EGF，EGF与IL-2的比值范围为0.267-0.283，优选为0.275±0.008。43、根据权利要求l所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有PGE2，PGE2与IL-2的比值范围为3.63-5.42，优选为4.5±0.87。44、根据权利要求1所述的方法，其中，所述无血清且无促分裂原的细胞因子混合物还含有TxB2，TxB2与IL-2的比值范围为23.47-25.13，优选为24.3±0.83。45、根据权利要求1所述的方法，其中，存在痕量的IL-12。46、根据权利要求45所述的方法，其中，所述痕量定义为100pg/ml或者更低。全文摘要一种方法，该方法通过用无血清且无促分裂原的混合物来改变肿瘤浸润单核细胞的组成、提高CD4⁺/CD⁸⁺比值、提高肿瘤间质/上皮比值，并调节II类人类白细胞抗原(HumanLeucocyteAntigen，HLA)在肿瘤细胞表面上的表达。所述无血清且无促分裂原的混合物具有特定的细胞因子比例，所述细胞因子选自由IL-1β、TNF-α、IFN-γ、GM-CSF和白介素-2(IL-2)所组成的组中，IL-1β、TNF-α、IFN-γ、GM-CSF分别与IL-2具有特定的比例。所述由细胞因子比例组成的无血清且无促分裂原的混合物包括白细胞介素注射剂(LI)或Multikine，还可以单独使用或与其它药物联合使用，用于癌症的治疗，由此增加癌症治疗的成功率以及癌症病人的无疾病存活率。文档编号A61K45/00GK101247831SQ200680016333公开日2008年8月20日申请日期2006年5月10日优先权日2005年5月10日发明者E·塔洛尔申请人:塞尔-赛公司