专利名称：联合疗法的制作方法
技术领域：
本发明涉及抗癌化合物的组合，其包括a)血管内皮生长因子-2 (VEGFR-2) 抑制剂，和b)表皮生长因子受体(EGFR)抗体，以及任选地至少一种药学可 接受载体，用于同时、分开或顺序使用。
背景技术：
VEGFR-2受体是酪氨酸蛋白激酶受体，其可促使血管生成，血管生成是 肿瘤生长和转移的关键过程。血管生成是一种复杂、受高度调节的过程。近年 来，已鉴别了大量在肿瘤发生过程中激活和维护血管生成的生长因子及细胞因 子。涉及血管生成的有三种VEGF受体，然而，VEGF-2是这三种受体中特别 A度确认参与血管生成的，因为它与多个步骤有关，包括内皮细胞增殖、存活、 转移、分化和血管渗透。
EGFR抗体可选自从鼠类抗体225 (参见Mendelsohn等在美国专利 No.4,943,533中的描述)中衍生出来的嵌合的、人源化的、完全来自人的和单 链的抗体。EGFR抗体可以是例如西妥昔单抗，其由ImClone公司和Bnstol-Myers Squibb公司注册为ErbituxTM。 EGFR抗体还可选自Jakobovits等的美国专利 No.6,235,883、 Bendi等的美国专利No.5,558，864和Mateo de Acosta del Rio等的 美国专利No.5,891,996中描述的抗体。
发明概要
本发明涉及抗癌化合物的组合，其包括a)VEGFR-2抑制剂，和b)EGFR
抗体，以及任选地至少一种药学可接受载体，用于同时、分开或顿序使用。
特别的是，发现VEGFR-2抑制剂化合物当与表皮生长因子受体抗体基本
上同时给予时，具有比加和抗肿瘤活性更好的抗肿瘤作用。
更特别的是，发现VEGFR-2抑制剂化合物当与西妥昔抗体这一表皮生长
因子受体抗体基本上同时给予时，在小鼠预观赎型中具有比加和抗肿瘤活性更
好的抗肿瘤作用。 附图简述
图l:在联合西妥昔单抗时的化合物I的抗肿瘤活性。 发明详述
发现某些VEGFR-2抑制剂化合物当与EGFR抗体同时或顺序给药时，在 小鼠预测模型中具有抗肿瘤活性。本发明还涉及使用该治疗性的化合物组合治 疗癌症和其他增生疾病的方法。
--种具有下列结构式的特定的VEGFR-2抑制剂化合物(在下文中称为化 合物I)<formula>formula see original document page 6</formula>
或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯或同分异构体，被用于本发明的组合和方 法中。该化合物和可具有相似性质的其他VEGFR-2抑制剂化合物以及它们的 制备方法在美国专利No.6，869,952中已被公开，其公开内容通过引用并入本文。 化合物I的晶型已在2005年9月27日申请的美国临时申请No.60/721,021中公 开并要求保护，其公开内容通过引用并入本文。
EGFR抗体可选自从鼠类抗体225 (参见Mendelsohn等在美国专利 No.4,943,533中的描述)中衍生出来的嵌合的、人源化的、完全来自人的和单 链的抗体。EGFR抗体可以是例如西妥昔单抗，其由ImClone公司和Bnstol-Myers Sqmbb公司注册为ErbituxTM。 EGFR抗体还可选自Jakobovits等的美国专利 No.6,235,883 、 Bendi等的美国专利No.5,558，864和Mateo de Acosta del Rio等的 美国专利No.5,891，996中描述的抗体。
当齢口服的紫杉烷类时，EGFR单克隆抗体Erbitux (西妥昔单抗)被
发现可提供治疗上协同的体内治疗抗肿瘤活性。
增生疾病，例如实体肿瘤疾病的本质都是多因素的。在某些环境下，具有 不同作用机理的药物可联用。然而，仅仅考虑不同作用模式的药物的任意组合 并不是必然会产生具有有利效果的组合。事实上，在同一类别中的药物在联用 时可能并一 卩都具有相同的效果。
我们意外发现，化合物I加上EGFR单克隆抗体西妥昔单抗的组合在小鼠
预测模型中具有抗肿瘤活性。当两种物质联用时对肿瘤生长的延迟效果要优于 判虫每种药物单独治疗之和。
已确立的测试模型，特别是那些本文描述的模型可以显示，本发明的组合 产生了被斜虫的联用成分所观察到的效果更好的活性。本发明组合物的药理活 性可进一步地在临床研究以及本文描述的方法中得到证实。
在本发明的一个实施方式中，按每周或其他临床可用的进度方案，以针对
所涉及的特定EGFR抗体所典型使用的剂量水平，向每一患者给予EGFR抗体 例如西妥昔单抗。以西妥昔单抗为例，可能包括按每周给药的初始剂量400mg/m2 和其后剂量250mg/m2，或一种被调节为所述组合最优化应用的相似剂量水平 的方案。VEGFR-2抑制剂化合^)~化合物I，可以任意的临床可用进度方案 给药，所述临床可用进度方案包括但不限于每日、 一周两次、 一周、或每隔一 周。特别地是，对于每日给药，化合物I的典型剂量可为2到1000mg/m2，该 齐糧在临床医师认为合适时被调整以便适应任何发展中的患者需要。
以下^t可在本说明书中使用的术语的定义。除非另有说明，这里对一词 组或词语的初始定义适用于整个说明书中判虫使用的或作为其他词组一部分的 所述词组或词语。
本发明的VEGFR-2抑制剂化合物可能形成盐，这些盐也在本发明的范围 之内。尽管也可使用其他的盐，但优选药学可接受的盐(即无毒的、生理学可 接受的)，例如用在分离或者纯化本发明化合物。
本发明的VEGFR-2抑制剂化合物可与碱金属例如钠、钾和锂，碱土金属 例如钙和镁，有机碱例如二环己胺、三丁胺、吡啶以及氨基酸例如精氨酸、赖 氨酸等形成盐。这些盐可以本领域技术人员所公知的方式生成。
本发明的VEGFR-2抑制剂化合物可与各种有机酸和无机酸形成盐。这些 盐包括与氯化氢、溴化氢、甲烷磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、马来酸、苯磺酸、甲苯磺酸形成的盐和其它种类(如硝酸盐、磷酸盐、硼酸盐、酒石酸 盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、7K杨酸盐等)。这些盐可 以本领域技术人员所公知的方式生成。
此外，还可以制成两性离子("内盐")。
已考虑了本发明化合物的所有立体异构体，其可以是混合形式，也可以是 纯的或基本上纯的形式。本发明化合物的定义包括所有可能的立体异构体和及 它们的混合物。特另U优选的是外消旋形式和经分离的具裕旨定活性的光学异构 体。外消旋形式可3IM物理方法拆分，例如分级结晶法、非对映异构衍生物的
分离或结晶，或手性柱色谱分离。单个光学异构体可M31常规方法从外消旋物
中获得，例如与具有光学活性的酸生成盐后进行结晶。
本发明的组合可用于治疗各种癌症，包括(但不限于)如下
-癌，包括膀胱癌、乳房癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌(包括小细胞肺
癌)、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰脏癌、胃癌、子宫颈癌、甲状腺癌、前列
腺癌和皮肤癌(包括鳞状细胞癌)；
-淋巴谱系(lymphoid lineage)造血肿瘤，包括白血病，急性淋巴细胞性 白血病，急性成淋巴细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金氏 淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；
-骨髓谱系(myeloid lineage)造血肿瘤，包括急性的和慢性的髓性白血病、 骨lt增生异常综合征和早幼粒细胞白血病；
-间充质细胞源肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；
-中枢和外周神经系统肿瘤，包括星形细胞瘤、成祌经细胞瘤、神经胶质 瘤和神经$肖瘤；和
-其它肿瘤，包括黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、 keratoctanthoma、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
实施例 材料和方法
化合物。化合物I由Bristol-Myers Sqmbb(BMS)化学家们合成。西妥昔单 抗(也称为Erbitux⑧)由Imclone Systems公司馈赠。将抗^#解在磷酸盐缓冲 盐7jC，以便对小鼠腹腔注射。基于治疗期间每组小鼠的平均体重，对小鼠给予
100mg/kg体重量的化合物I。每只小鼠的西妥昔单抗给药量为0.25ml。
动物。无胸腺小鼠(裸鼠)，5-6周大小，购于Harlan Sprague Dawley (Indianapolis, IN)，于肿瘤繁殖和药物疗效试验前，隔离约两周。小鼠用不限
量的水和食物喂养。所有涉及这些动物的研究都依据NIH (BethescK MD)和
Bristol-Myers Squibb (BMS)动物看护及鹏指南进行。
肿瘤。人L2987肺癌通过系列皮下传代在裸鼠中维持。所有的疗效试验
都基于皮下植入裸鼠体内的肿瘤。当肿瘤在100-200mm3充分确立时，开始治疗。
抗肿瘤实验
化合物I与Erbitux联合给药，并与制iit行给药的每一药物相比较。每 种化合物以其最佳的临床前进度方案及齐糧水平謝，合药。这包括化合物I每 日100mg/Kg以及Erbitux每三天每只小鼠lmg的方案，总共给5次剂量。
当将化合物I和西妥昔单抗对小鼠给药时，它们基本上同时给药，没有试 图采用任何特别的顺序。
结果
如
图1所示，当与用介质治疗的对照组中肿瘤大小为500mm3相比时，单 独给药Erbitux将肿瘤生长延迟6天，而化合物I将肿瘤生长到该同一 目标大小 延迟10天。当lt^两种物质时，己观察到达到该同一目标大小可被延迟20天， 其效果优于每种药物单独使用的疗效之和。基于这个结果，这些药物的联合治 疗是可行的，并且导致对肿瘤生长的延迟增强。可计划进一步的研究以确定该 组合在用低于每种化合物的最佳齐嗄的剂量使用时是否具有协同作用。
虽然在过去的十年间取得进步，但患有NSCLC和其他肿瘤的患者需要更 有效的治疗介入。本发明的临床前数据证明了当VEGFR-2抑制剂化合物I和 EGFR抗体西妥昔单抗联用时产生的一定的附加的肿瘤延迟作用，，提示一种 应在适宜适应症中被临床评估的方法。
权利要求
1、一种抗癌化合物的药物组合，其包括a)VEGFR-2抑制剂，和b)表皮生长因子受体抗体，其中每种情形下活性成分以游离形式或药学可接受的盐、溶剂化物或酯形式存在。
2、 根据权利要求1所述的组合，其中VEGFR-2抑制剂是下式化合物<formula>see original document page 2</formula>或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯或同分异构体。
3、 根据权利要求1所述的组合，其中表皮生长因子受体抗体是嵌合的、 人源化的、完全来自人的或单链的抗体。
4、 根据权利要求3所述的组合，其中表皮生长因子受体抗体是西妥昔单抗。
5、 根据权利要求1所述的组合，其中VEGFR-2抑制剂是下式化合物<formula>see original document page 2</formula>或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯或同分异构体；并且表皮生长因子受体抗体是西妥昔单抗。
6、 根据权利要求5所述的组合，其中VEGFR-2抑制剂以每1到14天给 药约2到1000mg/m2的剂量给药1次或1次以上。
7、 根据丰又利要求5所述的组合，其中西妥昔单抗以每1到14天给药4到 400mg/m2的剂1#脉注射1次或1次以上。
8、 根据权利要求5所述的组合，其中所述两化合物基本上同时给药。
9、 一种治疗癌症的方法，其包括纟^a) VEGFR-2抑制剂，禾口b) 表皮生长因子受体抗体，其中每种情形下活性成分以游离形式或药学可接受的盐、溶剂化物或酯形式存在。
10、 根据权利要求9所述的方法，其中VEGFR-2抑制剂是下式化合物<formula>see original document page 3</formula>或其药学可接受的盐、,U化物、酯或同分异构体。
11、 根据权利要求9所述的方法，其中表皮生长因子受体抗体是嵌合的、 人源化的、完全来自人的或单链的抗体。
12、 根据权利要求11所述的方法，其中表皮生长因子受体抗体是西妥昔单抗。
13、 根据权利要求9所述的方法，其中VEGFR-2抑制剂是下式化合物<formula>see original document page 3</formula>或其药学可接受的盐、溶剂化物、酯或同分异构体。
14、 根据禾又利要求9所述的方法，其中所述两化合物基本上同时给药。
15、 根据权利要求9所述的方法，其中所治疗的癌症选自结肠直肠癌、乳 腺癌、胃癌、卵巢癌、非小细胞肺癌和头部与颈部的癌症。
全文摘要
本发明涉及抗癌化合物的治疗组合，其包括a)VEGFR-2抑制剂，和b)与表皮生长因子受体(EGFR)结合并阻断表皮生长因子(EGF)启动导致肿瘤生长抑制的受体活性的能力的物质，以及任选地至少一种药学可接受载体，用于同时、分开或顺序使用。
文档编号A61K31/53GK101175495SQ200680016419
公开日2008年5月7日 申请日期2006年5月12日 优先权日2005年5月13日
发明者J·法诺利 申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司