内脏脂肪蓄积抑制剂的制作方法

专利名称：：内脏脂肪蓄积抑制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及包含具有4-曱基-7-烯胆甾烷醇骨架的化合物作为有效成分的内脏脂肪蓄积抑制剂，并且涉及包含其的食品或饮料。特别地，本发明涉及能够减少蓄积在腹腔中的脂肪量并且防止或改善被认为是代谢综合症的主要因素的内脏脂肪型肥胖的内脏脂肪蓄积抑制剂，并且涉及包含该内脏脂肪蓄积抑制剂的生理功能性食品或饮料，例如特定保健用食品。
背景技术：
：近年来，生活方式西方化涉及的肥胖迅速增加已经成为严重的问题。肥胖是指其中由于卡路里过度摄取并且由锻炼不足等造成卡路里消耗减少而因此蓄积了过多能量的状态，并且是指"蓄积了过量的身体脂肪组织(体脂肪)的状态"。肥胖被指出为所谓的与生活方式有关的疾病例如糖尿病、高血压和高血脂等发病的基础。肥胖表现出过量身体脂肪蓄积的状态和体重增加的现象。据报导当迅速降低体重以改善肥胖时，在能量消耗中起作用的肌肉的数量也与脂肪一起减少，并且在老年人的情况中可能出现一些症状例如血压紊乱和髋关节损伤(非专利文献1)。另外，对于在不减少体重的情况下进行脂肪量减少的情况，据报导锻炼疗法预期会发挥改善肌肉组织的作用(非专利文献2)。如上所述，近年来已经注意到通过抑制身体脂肪的蓄积而不是通过减少体重而改善肥胖的方法。脂肪组织被归类为蓄积在皮肤里面的皮下脂肪和蓄积在腹腔中的内脏器官周围的内脏脂肪，其统称为"体脂肪"。已知肥胖被分为两种类型涉及皮下脂肪蓄积的皮下脂肪型肥胖和涉及内脏脂肪蓄积的内脏脂肪型肥胖。内脏脂肪蓄积特别对肥胖中的并发症(例如代谢异常以及心血管疾病)的发病率及其严重性有很大影响。传统上，已知一个人患多种与生活方式有关的疾病的组合(即"多危险因素综合症")的病态显著增加了动脉石更化疾病发病的风险，并且已经提出一些概念(例如综合症X和代谢综合症)作为动脉硬化疾病的风险因素。为了评价综合风险并且防止那些多危险因素综合症中动脉硬_化疾病的发病，进行了国际统一的代谢综合症及其诊断标准的定义(非专利文献3)。在2005年4月于日本提出的用于代谢综合症的诊断标准中，采用对应于100cm2或更大的内脏脂肪面积的腰部尺寸作为基本项目来代替被通常用于表示肥胖程度的身体质量指数(BMI)或体脂肪率。因此，已经认识到内脏脂肪蓄积与代谢综合症有绝大关系。锻炼、饮食和行为疗法被推荐作为减少身体脂肪的措施。然而，在那些疗法难以进行或持续的情况中，可以进行药物疗法或外科手术。目前，作为食欲抑制药的氯苯咪吲哚被用作肥胖治疗药物，并且主要指定用于BMI为35或更大的的高度肥胖的人。然而，氯苯咪W咮不仅会产生副作用(例如头痛和口干)，而且还存在大量问题当肾脏、肝脏或胰腺中存在严重的机能失调时氯苯咪吲哚有禁忌；并且由于其依赖性等而不能长时间用药。已知植物甾醇例如P-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇通过抑制胆甾醇的吸收而具有降低血胆甾醇的作用，并且公开了包含甘油二酯和植物甾醇作为有效成分的脂质代谢促进剂(专利文献1)。另外，公开了包含胆甾烯酮化合物作为有效成分的抗肥胖药和脂质代谢促进剂，该胆甾烯酮化合物是通过使用植物甾醇例如p-谷甾醇和菜油甾醇或4-胆甾烯-3-酮作为原料而合成的(专利文献25)。作为属于百合科,荟属的典型植物，已知的有翠叶芦荟(AloebarbadenisisMiller)和木立芦荟(AloearborescenMillervar,natalensisBerger)，并且已经报导了这些植物的各种作用。具体地，公开了，荟提取物对肥胖具有防止或改善作用(专利文献6)。另外，分别公开了包含0.25%翠叶,荟粉末的具有减少体重作用的添加剂(专利文献7)和包含翠叶声荟的用于控制体重的精油组合物(专利文献8)。另外，报导了根据木立,荟的浓度，将木立芦荟全叶给大鼠服用会使其体重显著减少(非专利文献4或5)。[专利文献l]日本特开2005_15425公报[专利文献2]日本特开平0孓165587号公报[专利文献3]日本特开平11-193296号公报[专利文献4]日本特开加Ol-240544号公报[专利文献习日本特开平s170651号公报[专利文献6]日本特开2000-319190号公报[专利文献7]新西兰专利第330439号公报[专利文献8]美国专利第6280751号公报[非专利文献1]JournalofAppliedPhysiology,第95巻，第1728-1736页，2003年[非专利文献2]JournalofAppliedPhysiology,第99巻，第1220-1225页，2005年[非专利文献3]Adiposcience,第2巻，第11-15页，2005年[非专利文献4]MedicalandBiology,125(5)，第189-194页[非专利文献5]BulletinoftheFujitaMedicalSociety,22(2)，第153-157页
发明内容专利文献1没有描述单独服用植物甾醇的作用，并且根本没有描述或暗示植物甾醇对内脏脂肪的作用。另外，公开了在专利文献2中公开的3-酮甾类化合物、在专利文献3中公开的胆甾烯酮化合物和在专利文献4中公开的24-烷基-胆甾烯-3-酮化合物(例如24-曱基胆甾-5-烯-3-酮)具有减少体重、体脂肪量和血脂量的作用。然而，并没有描述或暗示在不影响口服量和体重减少的情况下抑制内脏脂肪蓄积的作用。专利文献5中公开的4-胆甾烯-3-酮明显不同于本发明的有效成分。具体而言，描述于专利文献5中的4-胆甾烯-3-酮的作用在于当正常大鼠摄取卡路里时，该化合物减少过量的腹腔内脂肪的同时，还不必要地减少了在正常范围内的脂肪成分。因此，4-胆甾烯-3-酮的作用明显不同于本发明的作用，即，本发明仅仅有效地抑制了在肥胖状态的情况中或者在摄取过量卡路里的情况中蓄积在内脏器官周围的所需要的量以上的脂肪组分。另外，公开了专利文献6的用于防止和改善肥胖的药物抑制了伴有体重增加的肥胖发展，并且因此有效地保持标准体重而不需要过度的饮食限制。然而，没有描述对体脂肪的作用，并且没有描述在不减少体重的情况下减少内脏脂肪量的抑制内脏脂肪蓄积的作用。另外，专利文献6中所述的有效成分是声荟提取物。然而，完全没有特别指出对伴有体重增加的肥胖发展的抑制相关的组分。因此，难以预见存在在不减少体重的情况下仅仅减少内脏脂肪的抑制内脏脂肪蓄积的作用，即不能从专利文献6的描述中预期的作用。因此，就能够选择性地减少与代谢综合症发病强烈相关的内脏脂肪或者能够防止和抑制其蓄积的药物而言，需要进一步开发每天可以伴随着尽可能少的痛苦而安全地服用并且可以有效地减少内脏脂肪的功能材料。鉴于前述情况，本发明的发明人已经对可以防止或改善被认为是代谢综合症的主要起因的内脏脂肪型肥胖的内脏脂肪蓄积抑制剂作了深入的研究。结果，本发明的发明人发现具有有效地减少蓄积在腹腔中的脂肪作用的具有4-甲基-7-烯胆甾烷醇(lophenol)骨架的化合物。另夕卜，发现该化合物具有在不减少体重的情况下保持标准体重的作用，并且因此可用于抑制肥胖的发展而不需要过度的饮食限制。本发明的一个目的是提供一种包含具有4-甲基-7-烯胆甾烷醇骨架的化合物作为有效成分的内脏脂肪蓄积抑制剂。另外，本发明的另一个目的是提供一种包含该内脏脂肪蓄积抑制剂的生理功能食品或饮料，例如特定保健用食品。用以解决前述问题的本申请的第一方面发明是一种内脏脂肪蓄积抑制剂，其包含以下通式(1)表示的化合物作为有效成分。(在该式中，Rl表示具有516个碳原子的直链或支链烷基、或具有1或2个双键的烯基、或具有羟基和/或羰基的取代烷基或烯基，R2和R3各自独立地表示氢原子、具有1~3个碳原子的烷基或取代烷基，并且R4与构成环的碳原子形成CK)，或者表示-OH或-OCOCH3。)另外，以下l)4)是优选实施方案。1)在前述化合物中，R2和R3中的一个是氢原子，另一个是甲基，并且R4是羟基。2)在前述1)中，Rl由下式中的任意一个表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>3)2)中所述的化合物选自4-曱基胆甾-7-烯-3-醇、4-甲基麦角甾-7-烯-3-醇和4-曱基豆甾-7-烯-3-醇。4)1)-3)中所述的化合物的含量为至少0.001干质量％。用以解决前述问题的本申请的第二方面发明是一种内脏脂肪蓄积抑制剂，其包含含有以下通式(1)表示的化合物的百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或者它们的级分，并且其中前述百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或它们的级分包含下述组合物作为有效成分，所述组合物含有至少0.001千质量％的以下通式(1)表示的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(在该式中，Rl表示具有5~16个碳原子的直链或支链烷基、或具有1或2个双键的烯基、或者具有鞋基和/或羰基的取代烷基或烯基，R2和R3各自独立地表示氢原子、具有13个碳原子的烷基或取代烷基，并且R4与构成环的碳原子形成C=0或者表示-OH或-OCOCH3。)另外，以下5)-7)是优选实施方案。5)在前述化合物中，R2和R3中的一个是氢原子，另一个是甲基，并且R4是羟基。6)在前述5)中，Rl由下式中的任意一个表示-CH2-CH2-CH(_CH2_CH3)-CH(CH3)2-CH2_CH2-CH-C(CH3)2-CH广CH二C(CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2_C(=CH_CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CHg中的任一种)-CH2-CH2-CH(Rc)-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CHs中的任一种)。7)6)中所述的化合物选自4-曱基胆甾-7_烯-3-醇、4-甲基麦角甾-7_烯_3_醇和4-甲基豆甾-7-烯-3_醇。用以解决前述问题的本申请的第三方面发明是包含第一方面发明或第二方面发明的内脏脂肪蓄积抑制剂的食品或饮料。另外，以下8)是优选实施方案。8)该食品或饮料包含0.0001质量％或更多的前述通式(1)所示的化合物。用以解决前述问题的本申请第四方面发明是前述通式(1)表示的化合物、或者含有至少0.001干质量％该化合物的百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或者它们的级分在制备内脏脂肪蓄积抑制剂中的用途。用以解决前述问题的本申请第五方面发明是抑制内脏脂肪蓄积的方法，其包括对要抑制内脏脂肪蓄积的患者施与前述通式(1)表示的化合物、或者含有至少0.001干质量％该化合物的百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或它们的级分。在本发明的前述用途和方法中，前述通式(1)表示的化合物的优选实施方案与本申请第二方面发明的那些相同。本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂和包含其的食品或饮料可以安全地服用或摄取，并且具有有效地抑制内脏脂肪蓄积的作用。另外，本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂的有效成分可以被安全地摄取并且可以由容易获得的百合科植物例如翠叶,荟(AloebarbadensisMiller)容易地制备。具体实施方式接下来，详细描述本发明的优选实施方案。然而，本发明并不限于以下优选的实施方案，在本发明的范围内可以自由地进行改进。注意本文中使用的百分比表示质量百分比，除非另外说明。在本发明中，抑制内脏脂肪蓄积的作用是指减少蓄积在腹腔中的脂肪量的作用。因此，可以通过测量腹腔中的脂肪量(例如肠系膜脂肪的重量)来评价抑制内脏脂肪蓄积的作用。用作本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂(下文中也称为"本发明的药物")的有效成分的化合物是具有前述通式(1)表示的结构的化合物，并且该化合物的任何衍生物等也作为有效成分包括在内，只要它们是具有抑制内脏脂肪蓄积作用的化合物(下文中也称为"本发明的化合物，，)。最优选的是，用作本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂的有效成分的本发明的化合物的纯度为100%。然而，该纯度可以适当设定在该化合物发挥抑制内脏脂肪蓄积作用的范围内。另外，用作本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂的有效成分的组合物(下文中也称为"本发明的组合物")是包含至少0.001干质量％,优选O.Ol干质量％或更多，更优选0.1干质量％或更多的前述化合物的百合科植物的提取物或其级分。本发明的化合物含量的上限为，但不特别限于并且优选为例如10干质量％、50干质量％、70千质量％,或90干质量％。本发明中使用的"干质量"是指在通过由"干燥损耗试验"定义的千燥方法将化合物干燥后测量的质量，该试验描述于JapanesePharmacopoeia,第14版，(2001年3月30日，日本厚生劳动省，告示第lll号)中的一般试验法。例如，可以这样的方式确定本发明化合物的质量量取约lg本发明的化合物并且在105。C下干燥4小时；通过在保干器中静置将所得物冷却；用天平称量化合物的质量。在前述通式(1)中，Rl表示具有516个碳原子的直链或支链烷基或具有1或2个双键的烯基。注意前述的烷基和烯基可以分别是具有羟基和/或羰基的取代烷基和烯基。R2和R3各自独立地表示氢原子、具有1~3个碳原子的烷基或取代烷基，并且R4与构成环的碳原子形成C=0或者表示-OH或-OCOCH3。作为前述具有1~3个碳原子的烷基，优选甲基、乙基等，并且特别优选曱基。前述Rl优选是由下式表示的基团中的任意一种。(i)-CH2-CH2_CH(_CH2_CH3)-CH(CH3)2(ii>-CH2-CH2-CH=C(CH3)2(iii)-CH2-CH=C(CH3)-CH(CH3)2(iv)-CH2-CH2-C(-CH-CH3)-CH(CH3)2(v)-CH2-Cti2_CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CHg中的任一种)(vi)-CH2-CH2-CH(Rc)-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CH3中的任一种)。进一步地，优选R2或R3中一个是氢原子，另一个是曱基。进一步地，优选R4是羟基。作为前述化合物的最优选化合物是由下式表示的那些4-曱基胆甾_7_婦_3-醇(式(2))、4-甲基麦角甾-7-烯-3-醇(式(3))和4-曱基豆甾-7-烯-3-醇(式(4))。即，4-曱基胆甾-7-烯-3-醇是前述通式(1)表示的化合物其中R2和R3中的一个是氢原子、另一个是甲基，R4是鞋基，Rl是前述式(vi)表示的基团(Rc表示-H,Rd表示-CH3)。进一步地，4-曱基麦角甾-7-烯-3-醇是前述通式(1)表示的化合物其中R2和R3中的一个是氢原子、另一个是曱基，R4是羟基，Rl是前述式(vi)表示的基团(Rc和Rd均表示-CH3)。进一步地，4-甲基豆甾-7_烯-3-醇是这样的前述通式(l)表示的化合物其中R2和R3中的一个是氢原子、另一个是甲基，R4是羟基，Rl是前述式(i)表示的基团。本发明的药物、食品或饮料可以包含一种、两种或多种任意类型的前述化合物。已知在植物中包含4-曱基-7-烯胆甾烷醇，并且本发明的化合物可以根据用于制备4-曱基-7-烯胆甾烷醇的已知方法(山田晃弘，"生物化学实验法"，第24巻，脂肪脂质代谢实验法，第H4页，学会出版中心，1989)而制备。本发明的化合物例如可以通过以下方式获得使用例如用有机溶剂提取或用热水提取并且将得到的提取物纯化的方法从包含该化合物的植物中提取该化合物。在本发明中，尽管可以将本发明的化合物纯化，但也可以使用组合物、例如植物提取物或它们的级分，只要其包含有效量的该化合物即可。本发明化合物的属4百合科、的植物，^部分或粉^产物中，用有机溶剂或热水将包含该化合物的级分提取并浓缩。前述属于百合科的植物的例子包括属于声荟或葱属的植物。芦荟属植物的例子包括翠叶芦荟(AloebarbadensisMiller)、开普芦荟(Aloeferox固ler)、非洲,荟(AloeafricanaMiller)、木立，荟(AloearborescenMillervar,natalensisBerger)、穗花,荟(AloespicataBaker)等。在本发明的化合物或者包含其的组合物的制备中，尽管可以使用前述植物的整体，但优选使用其叶肉(透明凝胶部分)。优选通过使用均化器等使该植物或其部分破碎并且由此液化，并且本发明的化合物或包含其的组合物是通过使用有机溶剂或热水从破碎品中提取的。有机溶剂的例子包括醇例如甲醇、乙醇和丁醇；酯例如乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯和乙酸丁酯；酮例如丙酮和曱基异丁酮；醚例如乙醚和石油醚；烃例如己烷、环己烷、甲苯和苯；卣代烃例如四氯化碳、二氯曱烷和氯仿；杂环化合物例如吡啶；二醇例如乙二醇；多元醇例如聚乙二醇；腈溶剂例如乙腈，这些溶剂的混合物等。另外，这些溶剂可以是无水或含水的。在这些溶剂当中，特别优选使用乙酸乙酯/丁醇混合物(3:1)和氯仿/曱醇混合物(2:1)。作为提取方法，可以使用常规用于提取植物成分的方法。常规使用的例如将1~300质量份有机溶剂与1质量份新鲜植物或干燥植物在低于溶剂沸点的温度下一边搅拌或振荡一边加热回流的方法，或者通过在室温下超声提取的方法。通过采用合适的方法例如过滤或离心分离从提取液中分离不溶物质，可以获得粗提取物。可以通过各种色谱法例如正相或反相硅胶柱色谱法将粗提取物纯化。当在正相硅胶柱色谱法中使用梯度的氯仿/甲醇混合物作为洗脱溶剂时，本发明的化合物是用氯仿:曱醇=约25:1的混合比洗脱的。另外，当在反相硅胶柱色谱法中将己烷/乙酸乙酯混合物(4:1)用作洗脱溶剂时，本发明的化合物洗脱在早期阶段的洗脱流分中。得到的流分可以进一步通过HPLC等纯化。物、酶等的生物或酶方法制备。可以通过例如质谱(MS)、核磁共振(NMR)谱等证实如上所述化合物。本发明的化合物具有抑制内脏脂肪蓄积的作用，因此可以防止内脏脂肪型肥胖。因此，本发明的化合物可以用作内脏脂肪蓄积抑制剂、食品或者饮料的有效成分。此外，由于翠叶,荟的叶皮包含具有緩泻作用的,荟苷和，荟大黄素，因此这些组分被认为是不利于用于不希望具有緩泻作用的药物或食品或者饮料中。因此，优选包含本发明的化合物的组合物不包含前述组分。另外，可以将翠叶,荟的叶肉或其粉碎品用作内脏脂肪蓄积抑制剂的有效成分。本发明的化合物具有抑制内脏脂肪蓄积的作用，因此可以防止内脏脂肪型肥胖。因此，本发明的化合物本身可用作本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂和包含该药物的食品或饮料的有效成分。另外，包含本发明化合"提取物等，，)也可以用作所述药物或食品或饮料的有效成分。在该情况中，包含在所述药物中的前述提取物等优选包含至少0.001干质量％、更优选0.01~1干质量％、特别优选0.05~1干质量％的本发明化合物。另外，包含在所述食品或饮料中的前述提取物等优选包含至少0.0001干质量％、更优选0.001~1干质量％、特别优选0.005~1干质量％的本发明化合物。前述提取物等可以包含两种或多种本发明的化合物。另外，前述提取物等可以是溶液，或者也可通过常规方式冻千或喷雾干燥，作为粉末储存或使用。作为本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂，可以将包含本发明的化合物或包含其的组合物直接，或将本发明的化合物或者包含本发明化合物的组合物与药物可接受的载体组合口服或非口服地施与哺乳动物(包括人)。在本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂中，本发明的化合物可以是药物可接受的盐。药物可接受的盐的例子包括金属盐(无机盐)和有机盐，例如在"Remington'sPharmaceuticalSciences"，第17版，第1418页，1985中列出的那些。其具体例子包括但不限于，无机酸盐例如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐和氬溴酸盐；和有机酸盐例如苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、甲^黄酸盐、对曱苯石黄酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)、水杨酸盐和石更脂酸盐。此外，该盐可以是与金属例如钠、钾、钙、镁和铝的盐或者与氨基酸例如赖氨酸的盐。此外，溶剂化物例如前述化合物或其药物可接受的盐的水合物也落入本发明的范围内。对本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂的剂型没有特别限制，并且可以根据治疗目的而适宜地选择。其具体例子包括片剂、丸剂、散剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、胶嚢、糖浆、栓剂、注射剂、软膏、贴剂、滴眼剂、滴鼻剂等。对于制剂而言，可以使用在用于抑制内脏脂肪蓄积的常用预防剂中通常作为药物载体使用的添加剂，例如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味剂、稀释剂、表面活性剂和注射剂用溶剂等。此外，只要本发明的效果不会变差，可以将本发明的化合物或包含其的提取物等与具有抑制内脏脂肪蓄积作用的其它药物并用。尽管本发明化合物或包含其的提取物等在本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂中的含量没有特别限制并且可以合适地选择，但本发明化合物的量例如可以为至少0.001质量％，优选0.01-1质量％,特别优选0.05-1质量％。本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂具有抑制内脏脂肪蓄积的作用，并且因此可以防止内脏脂肪型肥胖。内脏脂肪型肥胖通常是指内脏脂肪面积为100cm2或更大的状态，并且根据用于代谢综合症的诊断标准，内脏脂肪型肥胖是指日本男性具有SScm或更大的腰围或日本女性具有90cm或更大的腰围的情况(InternalMedicine,第94巻，第188-203页，2005)。另外，本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂优选用于治疗与健康人相比具有更大量的蓄积内脏脂肪的患者。另外，本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂可以改善或防止由内脏脂肪蓄积造成的疾病、并发症等，例如脂质代谢异常和心血管疾病，并且还可以降低这些疾病、并发症等的风险。由内脏脂肪蓄积造成的各种疾病的例子包括肥胖(特别是内脏脂肪型肥胖)、高血脂、糖尿病、高血压和动脉石更化。由这些疾病造成的并发症的例子包括由糖尿病造成的糖尿病性一见网膜病、肾病、神经病和糖尿病性坏疽；由高血压造成的脑卒中、肾硬化和肾衰竭；和由动脉硬化疾病造成的脑卒中、脑梗塞、心绞痛、心肌梗塞等心血管病，以及肾病如尿毒症、肾石更化和肾衰竭。另外，本发明的发明人发现通过降低血红蛋白Alc水平，本发明的化合物具有改善高血糖的作用(WO2005/094838)。优选的是使用本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂的疾病并不伴随着高于健康人血红蛋白Alc水平的状态。另外，本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂可用于防止代谢综合症的发病。如上所述的抑制或减少内脏脂肪蓄积的药物的作用用于防止代谢综合症和代谢综合症相关的动脉硬化疾病以及象征着其风险因素的与生活方式有关的疾病，例如糖尿病、高血压和高血脂，以及与这些疾病有关的并发症的发病非常有效。此外，本发明中使用的"代谢综合症"是指容易发生动脉硬化，有被看作是多危险因素综合症的病态风险因素例如高胰岛素血症、异常葡萄糖耐量或高血糖、异常脂质代谢、高血脂(高甘油三酯血症和低-HDL-胆甾醇血症)、高血压、肥胖和内脏脂肪蓄积的症状并发的状态。本发明的药物的服用时间没有特另'J限制并且可以根据用于治疗目标疾病的方法而适宜地选择。此外，优选根据剂型、患者的年龄、性别和其他条件、患者症状严重性等来确定给药途径。根据用法、患者的年龄、性别、疾病的严重性、患者的其他条件等来选择本发明药物的剂量。作为有效成分的本发明化合物的量通常从优选0.001-S0mg/kg/天、更优选O.Ol-lmg/kg/天的范围内选择。此外，当使用包含本发明化合物的提取物等时，对于试验剂量，提取物等的干重量从优选0.1-1000mg/kg/天，更优选l-100mg/kg/天的范围内选择。在任何情况中，该剂量可以在一天内一次或分成几次施与。可以将本发明的化合物或包含其的组合物加入食品或饮料(^t料或食品)中以制得具有抑制内脏脂肪蓄积作用的食品或饮料。对食品或饮料的形式和性能没有特别限制，只要有效成分的作用不会变差，并且食品或々欠料可以由口摄取即可，并且其可以通过除加入前述有效成分之外，使用通常用于食品或饮料的原料以常规方式制备。对包含在本发明的食品或饮料中的本发明化合物或者包含其的提取物等的含量没有特别限制并且可以适宜地选择。例如，以本发明化合物的量计，本发明化合物或包含其的提取物等以至少0.0001质量％、优选0.001-1质量％、特别优选0.005-1质量％的量包含在食品或饮料中。本发明的食品或饮料可用于利用减少内脏脂肪作用的各种用途。例如，其可以用作适用于开始担心其腰部尺寸的人的食品或饮料、适用于开始担心血脂的人的食品或饮料、和用于降低或消除代谢综合症的危险因素的食品或饮料等。对于本发明的食品或饮料，所使用的"抑制内脏脂肪蓄积"是指改善或防止了由内脏脂肪蓄积引起的对健康的各种负面影响。在本发明中，"改善内脏脂肪型肥胖"、"防止内脏脂肪型肥胖"、"减少内脏脂肪，，、"防止内脏脂肪蓄积"等也可以被例举为与前述术语"抑制内脏脂肪蓄积"具有相同的含义。另外，本发明的食品或饮料可用于改善或防止由内脏脂肪蓄积造成的疾病，例如以高血脂为代表的异常脂质代谢、心血管疾病等。本发明的食品或饮料也可用于防止内脏脂肪型肥胖、代谢综合症等的发病。另外，本发明的食品或饮料可以治疗或预防由内脏脂肪蓄积造成的各种疾病、并发症等，并且可以减小如上面对于本发明药物所提及的那些疾病、并发症等的风险。本发明的食品或饮料优选作为附有该食品或饮料用于抑制内脏脂肪蓄积的标识的食品或饮料而销售，例如"被标识为'用于抑制内脏脂肪蓄积，的包含具有抑制内脏脂肪蓄积作用的化合物的食品或饮料"，或"被标识为'用于抑制内脏脂肪蓄积，的包含植物提取物的食品或饮料"等。另外，由于本发明的化合物或者包含其的组合物等具有抑制内脏脂肪蓄积的作用，因此该食品或饮料用于抑制内脏脂肪蓄积的标识也可以具有改善内脏脂肪型肥胖的意思。因此，本发明的食品或饮料也可被标识为"用于改善内脏脂肪型肥胖"。换句话说，前述的食品或饮料用于抑制内脏脂肪蓄积的标识可以被"用于改善内脏脂肪型肥胖"的标识代替。用于如上所述的这些标识的用语并不限于用语"用于抑制内脏脂肪蓄积"或"用于改善内脏脂肪型肥胖"，并且无需指出其他用语也包括在本发明的范围内，只要这些用语表明抑制内脏脂肪蓄积，或者防止或改善内脏脂肪型肥胖的效果即可。作为这类用语，也可以是使消费者认识到抑制内脏脂肪蓄积或改善内脏脂肪型肥胖作用的各种基于用途的标识。标识的例子包括"适用于开始担心腰部尺寸的人"、"适用于有成为内脏脂肪型肥胖趋势的人"和"可用于减少或消除代谢综合症的风险因素(风险)"。前述术语"标识"包括使消费者知晓前述用途的所有行为，并且提醒或类推前述用途的任何标识都落入本发明的"标识"的范围内，与标识的目的、内容、客观物体、介质等无关。然而，优选使用使消费者能够直接认识到前述用途的表述进行标识。具体例子包括将前述用途标识在与本发明的食品或饮料相关的商品或商品包装上的行为，用于转让或交付或进口这类用前述用途标识的商品或商品包装的目的的转让、交付、展示的行为，展示或散发与用前述用途标识的商品相关的广告、价格表或商业文件，或者通过电磁方法(互联网等)提供包括用前述用途标识的内容等的信息的行为。另一方面，该标识优选为被行政机构等批准的标识(例如以基于批准的形式进行标识，其基于由行政机构规定的各种制度而得到许可)，并且特别优选在销售点的广告材料例如包装、容器、目录、小册子和POP、其他文本等上的标识。标识的例子进一步包括作为健康食品、功能食品、肠营养食品、特殊用途食品、具有营养功能说明的食品、准药物等的标识以及被健康、劳动和福利部门批准的标识，例如基于特定保健用食品体系和类似体系而批准的标识。后者的例子包括作为特定保健用食品的标识、作为具有限制的健康说明的特定保健用食品的标识、影响人体结构和功能的标识、减少疾病风险说明的标识，并且更详细地，典型例子包括在健康增进法实施规则(日本厚生劳动省令第86号，2003年4月30日)中规定的作为用于特定保健用食品的标识(尤其是保健用途标识)和类似的标识。将参照以下实施例更具体地解释本发明。然而，本发明的范围不限于以下实施例。首先，制备例描述了本发明的化合物或组合物可由属于百合科的植物制备。通过使用均化器将100kg的翠叶,荟叶肉(透明凝胶部分)液化，添加100L乙酸乙酯/丁醇混合物(3:1)并搅拌。将混合物静置过夜，然后将乙酸乙酯/丁醇混合物和水层分离，回收乙酸乙酯/丁醇混合物。通过在减压下将该乙酸乙酯/丁醇混合物浓缩而获得的乙酸乙酯/丁醇混合物提取物重13.5g。将13g该提取物溶于lmL氯仿/甲醇混合物(1:1)中得到的溶液装在装有400gSilicaGel60(Merck公司)的柱上，将组分吸附到柱上，然后通过梯度方法用氯仿/曱醇混合物洗脱组分，其中甲醇浓度逐步增加(氯仿:甲醇的混合比=100:1、25:1、10:1、5:1和1:1),并且对上述混合物的每一混合比，将洗脱液分离。通过正相和反相薄层色谱(Merck公司，SilicaGel60F254和RP-18F2543)证实，在这些流分当中，在用氯仿:曱醇=25:1的混合物洗脱的流分中存在本发明的化合物。含有本发明化合物的该粗纯化物质(粗纯化物1)重3g。另外，以上述操作由用氯仿:曱醇=10:1和1:1的混合物洗脱的流分中得到的粗纯化物的产量分别为1.17和2.27g。去除这些流分的溶剂，然后将各提取物溶于lmL氯仿/甲醇混合物(1:1)中，装在装有100gSilicaGel60的柱上，将组分吸附在柱上，并且然后用1100mL己烷/乙酸乙酯混合物(4:1)洗脱这些组分。洗脱的流分以300mL(流分A)、300mL(流分B)和500mL(流分C)的顺序依次分开收集。在从流分A、B和C中除去溶剂之后得到的产量分别为0.6g、1.35g和0.15g。通过正相和反相薄层色谱证实本发明的化合物浓缩在流分A(粗纯化物2)中。借助于氯仿/己烷混合物(85:15)使用C0SM0SILC18(NacalaiTesque,Inc.)通过HPLC将该粗纯化物2进一步分离，得到1.3mg化合物3(4-甲基胆甾_7-烯-3-醇)、12mg化合物4(4-曱基麦角甾々-烯-3-醇)和lmg化合物5(4-甲基豆甾-7-烯-3-醇)。这些化合物的结构通过MS和NMR确认。实施例1在实施例1中，使用作为肥胖糖尿病动物模型的ZDF(ZuckerDiabeticFatty)大鼠来研究具有4-甲基-7-烯胆甾烷醇骨架的化合物对内脏脂肪蓄积的抑制作用。(1)样品的制备将在制备例1中制备的化合物3(4-甲基胆甾-7-烯-3-醇)、化合物4(4-曱基麦角甾-7-烯-3-醇)和化合物5(4-甲基豆甾；烯-3-醇)分别用作试验样品1、2和3。将各试验样品溶于DMSO中，并且用蒸馏水将各试验样品中的各化合物的浓度调节至10pg/ml,由此制备试验样品1-1、2-1和3-1。制备具有lpg/ml的化合物浓度的试验样品1-2、2-2和3-2。另外，将DMSO的最终浓度调节至0.2。/。。另外，制备不含试验样品的溶液作为阴性样品。(2)试验方法预先用高脂肪食物(ResearchDietInc.)喂养6周大的雄性ZDF大鼠(从CharlesRiverLaboratories,Inc.,US购得)1个月，然后将这些大鼠分成分别为6只大鼠的组。使用探针每天一次分别将阴性样品、试验样品l-l、1-2、2-1、2-2、3-1和3-2的溶液以每400g大鼠体重lml、连续44天经口施与各组的大鼠。在给药开始第45天，测定肠系膜脂肪重量作为内脏脂肪。(3)试验结果表1示出了在给药开始第45天的肠系膜脂肪重量。施与阴性样品的大鼠组具有6.83±1.10g的肠系膜脂肪重量，施与化合物浓度为lOpg/ml的试验样品1-1、2-1和3-1的组分别具有4.48±1.34g、3.78±0.26g和3.36±1.67g的肠系脂肪重量，这些重量为施与阴性样品的组的65.0%、54.9%和48.7%。因此，证实试验样品l-l、2-1和3-1具有显著的抑制内脏脂肪蓄积作用。另一方面，分别施与化合物浓度为lpg/ml的试验样品l-2、2-2和3-2使内脏脂肪有减少的趋势，但没有观察到显著的作用。此外，从病理观点出发没有观察到副作用。另外，表l中的p值表示Tukey-Kramer检验的显著性概率。[表l]<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>在该表中，"*"表示在统计上有抑制内脏脂肪蓄积的显著作用。实施例2在实施例2中，研究具有4-甲基-7-烯胆甾烷醇骨架的化合物对大鼠食物摄取量(摄食量)和体重增加(体重增加量)的影响。(1)样品的制备将用于实施例1中的试验样品1-1、2-1和3-1用作试验样品。另夕卜，制备不含试验样品的溶液作为阴性样品。(2)试验方法预先用高脂肪食物(ResearchDietInc.)喂养6周大的雄性ZDF大鼠(从CharlesRiverLaboratories,Inc.,US购得)1个月，测量这些大鼠的体重，然后将这些大鼠分成分别为6只大鼠的组。使用探针每天一次将试验样品1-1、2-1、3-1以及阴性样品的溶液以每400g大鼠体重lml、连续44天经口施与各组的大鼠。在给药开始后第42天测量大鼠的体重，并且将第42天时的体重与在给药开始前测量的那些之间的差值作为体重增加量。另外，从开始的那天起大约一周一次地测量每天摄取的食物量，并且将重量平均值作为每天的食物摄取量。(3)试验结果表2示出了每只大鼠每天的食物摄取量和在42天期间的体重增加量。观察到与施与阴性样品的组相比，分别施与试验样品1-1、2-1和3-1的组没有表现出食物摄取量的显著增加或减少。另外，分别施与试验样品1-1、2-1和3-1的组的体重增加量(体重增加)几乎与施与阴性样品的组相同。因此，发现具有4-曱基-7-烯胆甾烷醇骨架的化合物不会影响大鼠的食物摄取量和体重增量。[表2]样品摄食量体重增加(g)(g)试验样品l--121.7±2.0137.7±10.8试验样品2-.121.7±2.2128.7±14.5试验样品3-.121.4±1.3152.7±28.1阴性样品22.5±1.2140.7±18.8产业实用性根据本发明，可以提供能够在不减少体重的情况下保持标准体重并且有效用于抑制肥胖发展而没有过度饮食限制等的内脏脂肪蓄积抑制剂，和包含该内脏脂肪蓄积抑制剂的生理功能食品或饮料(例如特定保健用食品)。因此，可以改善或防止由内脏脂肪蓄积造成的疾病、并发症等(例如异常脂质代谢和心血管疾病)，并且还可以减少这些疾病、并发症等的风险。另外，本发明还具有防止代谢综合症和被认为是代谢综合症的风险因素的与生活方式有关的疾病(例如糖尿病、高血压和高血脂)发病的作用。权利要求1.内脏脂肪蓄积抑制剂，其包含以下通式(1)表示的化合物作为有效成分(在式中，R1表示具有5～16个碳原子的直链或支链烷基、或具有1或2个双键的烯基、或者具有羟基和/或羰基的取代的烷基或烯基，R2和R3各自独立地表示氢原子、具有1～3个碳原子的烷基或取代烷基，并且R4与构成环的碳原子形成C＝O或者表示-OH或-OCOCH3)。2.权利要求1所述的内脏脂肪蓄积抑制剂，其中，R2和R3中的一个是氢原子，另一个是甲基，并且R4是羟基。3.权利要求2所述的内脏脂肪蓄积抑制剂，其中R1由下式中的任^f可一个表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CH3中的任一种)。4.权利要求3所述的内脏脂肪蓄积抑制剂，其中该化合物选自4-曱基胆甾-7-烯-3-醇、4-甲基麦角甾-7-烯-3-醇和4-曱基豆甾-7-烯-3-醇。5.权利要求1~4中任一项所述的内脏脂肪蓄积抑制剂，其包含至少0.001干质量％的前述化合物。6.内脏脂肪蓄积抑制剂，其包含含有以下通式(1)表示的化合物的百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或它们的级分，其中前述百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或它们的级分包含作为有效成分的含有至少0.001干质量％以下通式(1)表示的化合物的组合物(在式中，Rl表示具有5~16个碳原子的直链或支链烷基、或具有1或2个双键的烯基、或者具有羟基和/或羰基的取代的烷基或烯基，R2和R3各自独立地表示氬原子、具有1~3个碳原子的烷基或取代烷基，并且R4与构成环的碳原子形成C=0或者表示-OH或-OCOCH3)。7.权利要求6所述的内脏脂肪蓄积抑制剂，其中R2和R3中的一个是氢原子，另一个是甲基，并且R4是羟基。8.权利要求7所述的内脏脂肪蓄积抑制剂，其中R1由下式中的任何一个表示-CH2-CH2-CH(_CH2-CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH=C(CH3)2-CH2-CH=C(CH3)-CH(CH3)2—CH2-CH2-C(=CH_CH3)_CH(CH3)2-CH2-CH2-CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CHs中的任一种)-CH2-CH2-CH(Rc)-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CH3中的任一种)。9.权利要求8所述的内脏脂肪蓄积抑制剂，其中前述化合物选自4-甲基胆甾-7-烯-3-醇、4-甲基麦角甾-7-烯-3-醇和4-甲基豆甾-7-烯-3-醇。10.食品或饮料，其包含权利要求1~9中任一项所述的内脏脂肪蓄积抑制剂。11.权利要求10所述的食品或饮料，其包含至少0.0001质量％的前述通式(1)表示的化合物。12.以下通式(1)表示的化合物或者含有至少0.001干质量％该化合物的百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或它们的级分在制备内脏脂肪蓄积抑制剂中的用途(在式中，Rl表示具有5~16个碳原子的直链或支链烷基、或具有1或2个双键的烯基、或者具有羟基和/或羰基的取代的烷基或烯基，R2和R3各自独立地表示氬原子、具有1~3个碳原子的烷基或取代烷基，R4与构成环的碳原子形成C=0或者表示-OH或-OCOCH3)。13.权利要求12所述的用途，其中R2和R3中的一个是氢原子，另一个是曱基，R4是羟基。14.权利要求13所述的用途，其中Rl由下式中的任何一个表示-CH2_CH2-CH(-CH2-CH3)-CH(CH3)2_CH2-CH2_CH=C(CH3)2_CH2-CH=C(CH3)-CH(CH3〉2-CH2-CH2-C(=CH-CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CH3中的任一种)-CH2-CH2-CH(Rc)-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CHs中的任一种)。15.权利要求14所述的用途，其中该化合物选自4-曱基胆甾-7-烯-3-醇、4-甲基麦角甾-7-烯-3-醇和4-曱基豆甾-7-烯-3_醇。16.抑制内脏脂肪蓄积的方法，其包括向要抑制内脏脂肪蓄积的患者施与以下通式(1)表示的化合物或者含有至少0.001干质量％该化合物的百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或它们的级分(在式中，Rl表示具有5~16个碳原子的直链或支链烷基、或具有1或2个双键的烯基、或者具有羟基和/或羰基的取代的烷基或烯基，R2和R3各自独立地表示氢原子、具有1~3个碳原子的烷基或取代烷基，R4与构成环的碳原子形成C=0或者表示-OH或-OCOCH3)。17.权利要求16所述的方法，其中R2和R3中的一个是氢原子，另一个是曱基，R4是羟基。18.权利要求17所述的方法，其中Rl由下式中的任何一个表示-CH2-CH2-CH(-CH2-CH3〉-CH(CH3)2-CH2-CH2_CH=C(CH3)2-CH2-CH=C(CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-C(=CH-CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CH3中的任一种)-CH2-CH2-CH(Rc〉-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CH3中的任一种)。19.权利要求18所述的方法，其中该化合物选自4-曱基胆甾-7-烯-3-醇、4-曱基麦角甾-7-烯-3-醇和4-曱基豆甾-7-烯-3-醇。全文摘要为了减少蓄积在腹腔中的脂肪量并且防止或改善被认为是代谢综合症的主要因素的内脏脂肪型肥胖，本发明提供包含具有4-甲基-7-烯胆甾烷醇骨架的化合物或者包含该化合物作为有效成分的百合科植物的有机溶剂提取物或热水提取物或它们的级分的药物、食品或者饮料。文档编号A61K31/575GK101212976SQ20068002365公开日2008年7月2日申请日期2006年9月21日优先权日2005年9月22日发明者三泽江里子,田中美顺申请人:森永乳业株式会社