治疗肝纤维化的抗madcam抗体和抗纤维化半胱天冬蛋白酶抑制剂的新组合的制作方法

专利名称：治疗肝纤维化的抗madcam抗体和抗纤维化半胱天冬蛋白酶抑制剂的新组合的制作方法
技术领域：
本发明涉及抗-MAdCAM抗体与抗纤维化药剂的新组合，该抗纤 维化药剂是例如蛋白酶抑制剂，优选半胱天冬蛋白酶(caspase)抑制 剂。本发明还涉及包括本发明的组合的药物组合物，以及该组合在治 疗肝纤维化中的应用。
背景技术：
慢性肝病每年造成超过140万例死亡(WHO, World Health Report 2004)，在美国是前十名疾病相关的死亡原因之一 (CDC， National Center for Health Statistics, 2004)。肝纤维化是持续性肝炎的后果，如果 不加控制的话，对于患者的患病率和死亡率都具有严重的长期后果。肝纤维化是肝脏受损时发生的过程之一 。这种损伤的原因可以是， 例如，病毒活性(例如慢性乙肝或丙肝)或其他肝感染(例如寄生物、 细菌)；化学品(例如药品、轻闲性(recreational)药物、过量饮酒、 接触污染物)；免疫过程(例如自身免疫肝炎)；代谢异常(例如脂质、 糖原或金属存储异常)；或癌生长(原发或继发肝癌)。纤维化是肝损 伤的病征，也是可能经由进行性肝硬化而导致肝衰竭的因素。有着严重的尚未满足的医疗需求。本发明涉及抗-粘膜地址素细胞 粘附分子(MAdCAM)抗体与抗纤维化药剂的组合，抗纤维化药剂优 选蛋白酶抑制剂，更优选半胱天冬蛋白酶抑制剂，其有益于肝纤维化 的治疗。粘膜地址素细胞粘附分子(MAdCAM)是细胞粘附受体的免疫球 蛋白超家族的一员。它是当需要时通过与淋巴细胞表面上的整联蛋白 分子相互作用而将淋巴细胞募集(recruitment)至组织的粘附分子中的一种。己经显示，抑制MAdCAM与其整联蛋白结合配偶体014(37结合的 抗体，例如抗-MAdCAM抗体(例如MECA-367; US 5,403,919， US5,538,724)或抗-"4卩7抗体(例如Act-l; US 6,551,593)，可以抑制淋 巴细胞外渗至发炎的肠内，因此可以有益于炎性肠病(IBD)的治疗。发明内容本发明的一个方面是抗-MAdCAM抗体或其抗原结合部分与抗纤 维化药剂的组合。优选地，抗纤维化药剂是蛋白酶抑制剂，更优选半 胱天冬蛋白酶抑制剂，进一步优选半胱天冬蛋白酶抑制剂是式I的化合 物式I的化合物<formula>formula see original document page 10</formula>其中A、 B、 Rl和R2如下文中所定义。 优选地，式I的化合物选自pS)-S-[N-(N'-P-氟-^碘苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(T,:3'乂6，-四氟苯氧基>4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氯苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-溴苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氟苯基)草氨酰)缬氨酸基腐基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N—(N'-G-惠基傳氨酰)缬氨酸基]氨基-5-P'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'—(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(38)-3-[^(>^-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，6-二氟苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-甲氧基苯基)草氨酰两氨酸萄氨基-5-(2'，3',5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基甲基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁(3S)-3-[N-(N'-(2-苄基苯基)草氨酰)缬氨酸萄氨基斗氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸。 再更优选地，化合物为(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸蜀氨基-5 (2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸。在本发明的一个方面，组合中的抗-MAdCAM抗体或其抗原结合部分是特异性结合MAdCAM的抗体或其抗原结合部分。优选地，抗体或部分是人单克隆抗体或其抗原结合部分。优选地，抗体或部分具备如下性质中的至少一种(a) 与人细胞结合(b) 对MAdCAM的选择性相对于VCAM或纤连蛋白为至少100(c) 与人MAdCAM以3xl0-"M或更低的Kd结合；或(d) 抑制a4(37表达细胞与人MAdCAM的结合；(e) 抑制淋巴细胞向胃肠淋巴组织中的募集。优选地，抗体或其抗原结合部分抑制人MAdCAM与a4(37的结合， 并具有以下性质中的至少--种(a) 与结合MAdCAM的参比抗体交叉竞争；(b) 与结合MAdCAM的参比抗体竞争；(c) 与参比抗体结合相同的MAdCAM表位；(d) 以与参比抗体基本相同的Kd与MAdCAM结合；(e) 以与参比抗体基本相同的脱离速率(off rate)与MAdCAM结合；其中参比抗体选自单克隆抗体1.7.2、单克隆抗体1.8.2、单克隆抗体 6.14.2、单克隆抗体6.22.2、单克隆抗体6.34.2、单克隆抗体6.67.1、单 克隆抗体6.73.2、单克隆抗体6.77.1、单克隆抗体7.16.6、单克隆抗体 7.20.5、单克隆抗体7.26.4、单克隆抗体9.8.2、单克隆抗体6.22.2-mod、 单克隆抗体6.34.2-mod、单克隆抗体6.67.1-mod、单克隆抗体6.77.1-mod 和单克隆抗体7.26.4-mod。在本发明的另一个方面，抗-MAdCAM抗体的重链可变区、轻链 可变区或二者在氨基酸序列上与选自下列的单克隆抗体的相应区的同 源性至少为90%:单克隆抗体1.7.2、单克隆抗体1.8.2、单克隆抗体 6.14.2、单克隆抗体6.22.2、单克隆抗体6.34.2、单克隆抗体6.67.1、单 克隆抗体6.73.2、单克隆抗体6.77.1、单克隆抗体7.16.6、单克隆抗体 7.20.5、单克隆抗体7.26.4、单克隆抗体9.8.2、单克隆抗体6.22.2-mod、 单克隆抗体6.34.2-mod、单克隆抗体6.67.1-mod、单克隆抗体6.77.1-mod 和单克隆抗体7.26.4-mod。优选地，抗体选自(a) 包括SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列、且 没有信号序列的抗体；(b) 包括SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 8所示的氨基酸序列、且 没有信号序列的抗体；(c) 包括SEQ ID NO: 10和SEQ ID NO: 12所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(d) 包括SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 16所示的氨基酸序列、且没有信号序列的抗体；(e) 包括SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 20所示的氨基酸序列、且没有信号序列的抗体；(f) 包括SEQ ID NO: 22和SEQ ID NO: 24所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(g) 包括SEQ ID NO: 26和SEQ ID NO: 28所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(h) 包括SEQ ID NO: 30和SEQ ID NO: 32所示的氨基酸序列、且没有信号序列的抗体；(i)包括SEQ ID NO: 34和SEQ ID NO: 36所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(j)包括SEQ ID NO: 38和SEQ ID NO: 40所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(k)包括SEQ ID NO: 42和SEQ ID NO: 44所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(1)包括SEQ ID NO: 46和SEQ ID NO: 48所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(m)包括SEQ ID NO: 52和SEQ ID NO: 54所示的氨基酸序列、且没有信号序列的抗体；(n)包括SEQ ID NO: 56和SEQ ID NO: 58所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；(o)包括SEQ ID NO: 60和SEQ ID NO: 62所示的氨基酸序列、且没有信号序列的抗体；(p)包括SEQ ID NO: 64和SEQ ID NO: 66所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体；和(q)包括SEQ ID NO: 42和SEQ ID NO: 68所示的氨基酸序列、 且没有信号序列的抗体。在本发明的一个方面，重链C-端的赖氨酸可以从组合的抗 -MAdC AM抗体中切割。在本发明的另一个方面，单克隆抗体或其抗原结合部分选自以下 抗体(a) 重链包括选自下列的参比抗体的重链CDR1、 CDR2和CDR3 氨基酸序歹U: 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod禾口 7.26.4-mod(b) 轻链包括选自下列的参比抗体的轻链CDR1、 CDR2和CDR3 氨基酸序列:1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod禾卩7.26.4-mod(C)抗体包括(a)的重链和(b)的轻链；以及(d)在(c)的抗体中，重链和轻链CDR氨基酸序列选自相同的参比抗体。在本发明的另一方面，单克隆抗体或其抗原结合部分包括(a) 重链，其包括选自以下的抗体的重链可变区氨基酸序列1.7.2 (SEQIDNO:2); 1.8.2 (SEQ ID NO: 6); 6.14.2 (SEQ ID NO: 10); 6.22.2 (SEQ ID NO: 14); 6.34.2 (SEQ ID NO: 18); 6,67.1 (SEQ ID NO: 22); 6.73.2 (SEQ ID NO: 26); 6.77.1 (SEQ ID NO: 30); 7.16.6 (SEQ ID NO: 34); 7.20.5 (SEQ ID NO: 38); 7.26.4 (SEQ ID NO: 42);和9.8.2 (SEQ ID NO: 46); 6.22.2-mod (SEQ ID NO: 52); 6.34.2-mod (SEQ ID NO: 56); 6.67.1-mod (SEQ ID NO: 60); 6.77.1-mod (SEQ ID NO: 64);和 7.26.4-mod (SEQ ID NO: 42);(b) 轻链，其包括选自以下的抗体的轻链可变区氨基酸序列1.7.2(SEQ ID NO: 4); 1.8.2 (SEQ ID NO: 8); 6.14.2 (SEQ ID NO: 12); 6.22.2 (SEQ ID NO: 16); 6.34.2 (SEQ ID NO: 20); 6.67.1 (SEQ ID NO: 24); 6.73.2 (SEQ ID NO: 28); 6.77.1 (SEQ ID NO: 32); 7.16.6 (SEQ ID NO: 36); 7.20.5 (SEQ ID NO: 40); 7.26.4 (SEQ ID NO: 44);禾卩9.8.2 (SEQ ID NO: 48); 6.22.2-mod (SEQ ID NO: 54); 6.34.2-mod (SEQ ID NO: 58); 6.67.1-mod (SEQ ID NO: 62); 6.77.1-mod (SEQ ID NO: 66);和 7.26.4-mod (SEQ ID NO: 68);或(c) (a)的重链和(b)的轻链。 本发明的又一个方面是抗-014(37整联蛋白抗体或其抗原结合部分与本文定义的半胱天冬蛋白酶抑制剂的组合。优选地，抗体抑制 MAdCAM与o437整联蛋白的相互作用。更优选地，抗体是人化Act-l， 也称作MLN02 (WO 01/078779)。本发明的另一个方面是本文所述的任意组合的医药用途，优选用 于治疗肝纤维化，其包括但不限于，治疗丙肝导致的肝损坏、酒精肝 疾病、非酒精性脂肪肝(NASH)。本发明的另一个方面是使用本文所述的抗-MAdCAM抗体和本文 所述的抗纤维化药剂治疗肝纤维化的方法，包括但不限于，治疗丙肝 导致的肝损坏、酒精肝疾病、非酒精性脂肪肝(NASH)。本发明的另一个方面是包括本文所述的任意组合以及药物可接受 的载体或赋形剂的药物组合物。本发明的另一个方面是包括用于同时、单独或依次使用的本文所述的抗-MAdCAM抗体和本文所述的抗纤维化药剂的药物产品。本发明的进一个方面是包括本文所述的抗-MAdCAM抗体和本文 所述的抗纤维化药剂的试剂盒。
具体实施方式
本发明的组合的抗纤维化药剂优选是蛋白酶抑制剂，更优选半胱 天冬蛋白酶抑制剂，进一步优选式I的化合物、或其药物可接受的盐<formula>formula see original document page 15</formula>其中，A是式Ha-i的天然或非天然氨基酸<formula>formula see original document page 15</formula>B是氢原子、氘原子、垸基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、2-苯并噁唑基、取代2-噁唑基、(CH2)n-环烷基、(CH2)n-苯基、(CH2V(取代苯基)、(CH2)n-(l或2-萘基)、(CH丄-(取代1或2-萘基)、 (CH2V(杂芳基)、(CH2)n-(取代杂芳基)、卤代甲基、C02R12、 CONR"R'4、 CH2ZR15、 CH20CO(芳基)、CH20CO(杂芳基)或CH20PO(R16)1117，其中 Z是氧或硫原子，或者B是式IIIa-c的基团Ri为垸基、环烷基、(环烷基)垸基、苯基，取代苯基、苯基烷基、 取代苯基垸基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)垸基、取代(1或2萘基) 垸基、杂芳基、取代杂芳基、(杂芳基)烷基、取代(杂芳基)垸基、R'a(Rlb)N 或R"0;并且R"是氢、低级垸基、环烷基、(环烷基)垸基、苯基、取代苯基、苯 基垸基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)烷基、或取代 (1或2萘基)烷基；并且其中Rh和R"独立地为氢、烷基、环烷基、(环垸基)垸基、苯基、取代 苯基、苯基烷基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)垸基、 取代(l或2萘基)垸基、杂芳基、取代杂芳基、(杂芳基)烷基、或取代(杂 芳基)烷基，其条件是R"和R'b不都为氢；R'e为烷基、环垸基、(环烷基)垸基、苯基、取代苯基、苯基烷基、取代苯基垸基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)烷基、取代(1或2萘基) 烷基、杂芳基、取代杂芳基、(杂芳基)烷基、或取代(杂芳基)烷基；R3为C,-6烷基、环烷基、苯基、取代苯基、(CH2)nNH2、 (CH2)NHCOR9、 (CH2)nN(C=NH)NH2 、 (CH2)mC02R2 、 (CH2)mOR10 、(CH2)mSR"、 (CH2)n环垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l 或2-萘基)或(CH2)n(杂芳基)，其中杂芳基包括吡啶基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、四唑基和n引哚基；R^为氢或甲基，或者RS与Rh—起为-(CH2)d-，其中d是2-6的整数；W为苯基、取代苯基、(CH2)m苯基、(CH2)m(取代苯基)、环垸基或苯并稠合环烷基；R5为氢、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、(CH2)n环烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；w为氢、氟、氧代、低级烷基、环垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、OR10、 SR^NHCOR9;W为氢、氧代(§卩=0)、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或 2-萘基)；RS为低级烷基、环垸基、(CH2)n环烷基、(CH2)n苯基、,2彦代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、或COR9;R9为氢、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环 烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、OR12或 NR13R14;R"为氢、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CHA环烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n( 1或2-萘基)；R"为低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n( 1或2-萘基)；R'2为低级烷基、环烷基、(CH2)n环烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n^代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；R"为氢、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、(CH2)n环垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)。( 1或2-萘基);R"为氢或低级烷基；或者11|3和R"—起形成5-7元碳环或杂环，例如吗啉或N-取代哌嗪； R"为苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、杂芳基、(CH^苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、或(CH2)n(杂芳基)；R"或R卩独立地为低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、 苯基烷基、取代苯基烷基、或(环烷基)烷基；R's和R^独立地为氢、垸基、苯基、取代苯基、(CHA苯基、(CH2)n(取 代苯基)，或者R'8和R"—起为-(CHK:H)2-;R^为氢、烷基、苯基、取代苯基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、R21、 R^和R"独立地为氢或烷基； X为CEb、 (CH2)2、 (CH2)3或S;Y1为0或NR";丫2为CH2、 0或NR";a为0或l，且b为l或2，其条件是当a为l时，b是l; c为l或2，其条件是当c为l时，a为0，且b为l; m为1或2;并且 n为1、 2、 3或4。如本文所使用的，术语"垸基"是指直链或支链C,至do碳链， 例如甲基、乙基、叔丁基、异丙基、正辛基和类似物。术语"低级烷 基"是指直链或支链C,至C6碳链，例如甲基、乙基、异丙基和类似物。术语"环烷基"是指完全饱和的或部分不饱和的单-、二-、或三环。 这种环的例子包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、金刚 烷基、环辛基、顺式或反式十氢化萘、二环[2.2.1]庚-2-烯、环己-l-烯 基、环戊-l-烯基、1，4-环辛二烯基和类似物。术语"(环烷基)烷基"是指被一个上述环垸基环取代的以上定义的 烷基。这种基团的例子包括(环己基)甲基、3-(环丙基)-正丙基、5-(环戊 基)己基、6-金刚垸基)己基和类似物。术语"取代苯基"是指被一个或更多个选自以下的取代基取代的 苯基卤素、羟基、保护的羟基、氰基、硝基、三氟甲基、烷基、烷 氧基、酰基、酰氧基、羧基、保护的羧基、羧甲基、保护的羧甲基、 羟甲基、保护的羟甲基、氨基、保护的氨基、(单取代)氨基、保护的(单 取代)氨基、(二取代)氨基、氨甲酰、保护的氨甲酰、N-(低级垸基)氨甲 酰、N-((低级烷基)磺酰基)氨基、N-(苯基磺酰基)氨基，或者被取代或 未取代的苯基取代的苯基，使得在后一种情况下，形成联苯基或萘基， 或者其中取代苯基环上两个相邻的烷基取代基一起形成环垸基，以形 成，例如，四氢萘基或茚满基。术语"取代苯基"的例子包括单-、二-、三-、四或五(卤代)苯基，例如2-、 3-或4-氯苯基、2,6-二氯苯基、2，5-二氯苯基、3,4-二氯苯基、 2、 3-或4-溴苯基、3，4-二溴苯基、3-氯-4-氟苯基、2-、 3-或4-氟苯基、 2,4,6-三氟苯基、2,3，5,6-四氟苯基、2，3,4，5-四氟苯基、2,3,4,5,6-五氟苯 基和类似物；单或二(羟基)苯基，例如2-、 3-或4-羟基苯基、2,4-二羟 基苯基、其保护的羟基衍生物和类似物；硝基苯基，例如2-、 3-或4-硝基苯基；氰基苯基，例如2-、 3-或4-氰基苯基；单或二(垸基)苯基， 例如2-、 3-或4-乙基苯基、2-、 3-或4-(正丙基)苯基和类似物；单或二 (烷氧基)苯基，例如2,6-二甲氧基苯基、2-、 3-或4-(异丙氧基)苯基、2- 、 3-或4-(叔丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基和类似物；2-、 3-或4-(保护的羟基甲基)苯基或3，4-二(羟基甲基)苯基；单-或二(氨基甲 基)苯基或(保护的氨基甲基)苯基，例如2-、 3-或4-(氨基甲基)苯基或 2,4-(保护的氨基甲基)苯基；或单-或二(N-(甲基磺酰基氨基))苯基，例 如2-、 3-或4-(N-(甲基磺酰基氨基))苯基。术语"取代苯基"还表示其 屮取代基不同的二取代苯基，例如3-甲基-4-羟基苯基、3-羟基-4-硝基 苯基、2-羟基-4-氯苯基和类似物。术语"苯基烷基"是指与上述垸基之一相连的上述苯基之一，术 语"取代苯基垸基"是指苯基或烷基或二者被一个或多个以上定义的 取代基所取代。这种基团的例子包括2-苯基-l-氯乙基、2-(4'-甲氧基苯 基)乙基、4-(2'6'-二羟基苯基)正己基、2-(5'氰基-3'-甲氧基苯基)正戊基、3- (2'6'-二甲基苯基)正丙基、4-氯-3-氨基苄基、6-(4'-甲氧基苯基)-3-羧基 (正己基),5-(4'-氨基甲基苯基)-3-(氨基甲基)正戊基、5-苯基-3-氧代-正戊 -l-基、(4-羟基萘-2-基)甲基和类似物。术语"取代萘基"是指被一个或多个以上的取代基所取代的萘基， 术语"(1或2萘基)烷基"是指与上述烷基中的一个连接的萘基(l或 2)。术语"卤代"和"卤素"是指氟、氯、溴或碘基团。这些术语也 可以用于描述一个或更多个卤素，其可以相同或不同。在本发明中优 选的卤素是氯和氟。术语"芳基"是指芳香性五元或六元碳环。优选六元环。 术语"杂芳基"是指任选取代的芳香性五元或六元杂环，其具有 l-4个杂原子，例如氧、硫和/或氮原子，特别是单独的或连同硫或氧环原子的氮。以下环体系丝术语“杂芳基”(取代或未取代)所指的杂环基的表性例子噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、异噁唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗉基、哒嗪基、噁嗪基、三嗪基、噻二嗪基、四唑并、1，5-[b]哒嗪基和嘌呤基，以及苯并稠合衍生物，例如苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基和茚满基。上述任选取代的杂芳基环的取代基为1至3个卤素、三卤代甲基、氨基、保护的氨基、氨基盐、单-取代氨基、二-取代氨基、羧基、保护 的羧基、羧酸盐、羟基、保护的羟基、羟基的盐、低级烷氧基、低级 烷基硫代、低级烷基、取代低级烷基、环烷基、取代环烷基、(环烷基) 烷基、取代(环烷基)烷基、苯基、取代苯基、苯基垸基和取代苯基烷基。 杂芳基的取代基如上文所定义，或者如下所述。结合上述杂芳基 环取代基使用时，"三卤代甲基"可以是三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基或三碘甲基；"低级垸氧基"是指C,至Q垸氧基，类似地，"低级垸 基硫代"是指C,至C4烷基硫代基。术语"取代低级烷基"是指被羟基、 保护的羟基、氨基、保护的氨基、氰基、卤素、三氟甲基、单-取代氨 基、二-取代氨基、低级烷氧基、低级烷基硫代、羧基、保护的羧基、 或羧基、氨基和/或羟基盐取代1至3次的上文定义的低级烷基。结合杂芳基环的取代基使用时，术语"取代(环烷基)垸基"和"取 代环烷基"如上文所述被"取代烷基"基团所列的相同基团所取代。 术语"(单取代)氨基"是指被1个选自以下的取代基所取代的氨基苯基、取代苯基、烷基、取代垸基、C,至C7酰基、C2至C7烯基、C2至 C7取代烯基、C2至CV炔基、C7至C,6烷基芳基、C7至C,6取代烷基芳基和杂芳基。(单取代)氨基可以额外地具有氨基-保护基，其被术语"保 护的(单取代)氨基"所包括。术语"(二取代)氨基"是指被两个选自以下的取代基取代的氨基苯基、取代苯基、烷基、取代垸基、d至C7 酰基、C2至C7烯基、C2至C7炔基、C7至C,6取代烷基芳基和杂芳基。两个取代基可以相同或不同。术语"杂芳基(烷基)"表示上文定义的烷 基，其在任意位置被上文定义的杂芳基所取代。而且，上述任选取代的五元或六元杂环以及上述环烷基环，可以任选地稠合到芳香性五元或六元环体系上，例如稠合在吡啶或三唑体 系上，优选稠合在苯环上。本文所用的术语"羧基保护基"是指羧酸基团的酯衍生物中的一 种，其常常用于在化合物上的其他官能团进行反应时对羧酸基团进行 阻挡或保护。这种羧酸保护基的例子包括叔丁基、4-硝基苄基、4-甲氧基节基、3，4-二甲氧基节基、2，4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、 2，4,6-三甲基节基、五甲基苄基、3,4-亚甲基二氧苄基、二苯甲基、4，4'-二甲氧基三苯甲基、4,4',4"-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙基、三甲基甲 硅烷基、叔丁基二甲基甲硅垸基、苯甲酰甲基、2,2,2-三氯乙基、p-(三 甲基甲硅烷基)乙基、(3-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰基 乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、l-(三甲基甲硅烷基 甲基)-丙烯基和类似部分。所使用的羧基保护基的种类并不重要，只要 衍生的羧酸对后续反应条件稳定，并且可以在合适的时刻不破坏分子 其余部分而脱除。术语"羟基保护基"是指很容易切除的与羟基结合的基团，例如 四氢吡喃基、2-甲氧基丙-2-基、l-乙氧基乙-l-基、甲氧基甲基、P-甲氧 基乙氧基甲基、甲基硫代甲基、叔丁基、叔戊基、三苯甲基、4-甲氧基 」三苯甲基、4,4'-二甲氧基三苯甲基、4，4',4"-三甲氧基三苯甲基、苄基、 烯丙基、三甲基甲硅垸基、(叔丁基)二甲基甲硅烷基、2，2，2-三氯乙氧 基羰基和类似物。本文所用的术语"氨基保护基"是指氨基的取代基，其常常用于 在分子的其他官能团进行反应时对氨基官能团进行阻挡或保护。术语 "保护的(单取代)氨基"是指在单取代氨基氮原子上有氨基保护基。这 种氨基保护基的例子列举于WO 00/01666。术语"天然和非天然氨基酸"是指天然氨基酸，以及其他的肽化 学领域技术人员在合成天然肽的合成类似物时常常使用的非蛋白源a-氨基酸，包括D型和L型。天然氨基酸为甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、 亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、 色氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、组氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、 谷氨酰胺、？羧基谷氨酸、精氨酸、鸟氨酸和赖氨酸。非天然a-氨基 酸的例子包括羟基赖氨酸、瓜氨酸、犬尿氨酸、(4-氨基苯基)丙氨酸、3-(2'-萘基)丙氨酸、3-(l'-萘基)丙氨酸、甲硫氨酸砜、(叔丁基)丙氨酸、(叔丁基)甘氨酸、4-羟基苯基-甘氨酸、氨基丙氨酸、苯基甘氨酸、乙烯 基丙氨酸、炔丙基-甘氨酸、1，2，4-三唑并-3-丙氨酸、甲状腺原氨酸、6-羟基色氨酸、5-羟基色氨酸、3-羟基犬尿氨酸、3-氨基酪氨酸、三氟甲 基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、(2-(4-吡啶基)乙基)半胱氨酸、3,4-二甲氧 基-苯丙氨酸、3-(2'-噻唑基)丙氨酸、鹅膏蕈氨酸、l-氨基-l-环戊垸-甲 酸、l-氨基-l-环己烷甲酸、使君子氨酸、3-(三氟甲基苯基)丙氨酸、(环 己基)甘氨酸、硫代组氨酸、3-甲氧基酪氨酸、正亮氨酸、正缬氨酸、 别异亮氨酸、高精氨酸、硫代脯氨酸、脱水脯氨酸、羟基脯氨酸、高 脯氨酸(homoproline)、 二氢吲哚-2-甲酸、1，2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酸、 1，2,3,4-四氢喹啉-2-甲酸、a-氨基-正丁酸、环己基丙氨酸、2-氨基-3-苯 基丁酸、苯基部分在邻、间或对位被一个或两个如下基团取代的苯丙 氨酸(C,至C4烷基、(Ci至C4)烷氧基、卤素或硝基，或者被亚甲基 二氧基取代一次；b-2-和3-噻吩基丙氨酸；(3-2-和3-呋喃基丙氨酸；|3-2-、 3—和4-吡啶基丙氨酸、(3-(苯并噻吩基-2-和3-基)丙氨酸；卩-(l-和2-萘基) 丙氨酸；丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸的O-烷基化衍生物；S-烷基化的半 胱氨酸、S-烷基化的高半胱氨酸、酪氨酸的O-硫酸酯、O-磷酸酯和O-羧酸酯、3-(磺基)酪氨酸、3-(羧基)酪氨酸、3-(二氧磷基)酪氨酸、酪氨 酸的4-甲磺酸酯、酪氨酸的4-甲膦酸酯、3,5-二碘酪氨酸、3-硝基酪氨 酸、s-烷基赖氨酸和5-烷基鸟氨酸。任何这些cc-氨基酸都可以在(x-位 被甲基取代，在a-氨基侧链的芳族残基的任意位置被卤素取代，或者 在侧链残基的O、 N或S原子上被合适的保护基取代。合适的保护基 如上文讨论。根据溶剂的选择和其他技术人员已知的条件，这些化合物可以采 取缩酮或縮醛形式，本发明组合中这些形式的使用也包括在本发明之 内。这些化合物可以如WO 00/01666或US 6,544,951中所述而制备， 在此将其全文并入作为参考。优选的亚组是US 6,544,951中列举者。 优选的式I的化合物选自(3S)-3-[N-(N'-(2-苄基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(苄基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯氧基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基甲基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(38)-3-^-^-(4-氯-1-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-蒽基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(苯乙基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)—3-[N-(N'-(4-正庚基苯基傳氨酰)缬氨酸蜀氨基-5-(2',3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5,6,7,8-四氢-1-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基 -5-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-金刚烷基傳氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-氟苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-甲氧基苯基)草氨酰)缬氨酸萄氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(N"-N'"-联苯基氨基)草氨酰)缬氨酸基]氨基 -5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-吡啶基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-吡嗪基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3',5'，6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l,2，3，4-四氢-1-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基 -5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(3，4，5-三甲氧基苄基)草氨酰)缬氨酸基]氨基 -5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N4二苯甲基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'—四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(3-苯氧基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-吡啶基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,3,5,6-四氟-4-吡啶基)草氨酰)缬氨酸基]氨基 -5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-碘苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，6-二氟苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,5- 二 -叔丁基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基 -5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5二氢化茚基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-甲基)草氨酰]缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(正庚基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3'，5'，6'-四氟苯氨基氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(叔辛基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(环己基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5-苯基-3-吡唑基)草氨酰)缬氨酸基 -5-(2',3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，3，4，5-四氟苯基)草氨酰)缬氨酸基 -5-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，3，4，6-四氟苯基)草氨酰)缬氨酸基 -5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,3,5,6-四氟苯基)草氨酰)缬氨酸基 -5-(2'，3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2,3,4,5,6-五氟苯基)草氨酰)缬氨酸基 -5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯并咪唑基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-( 1 -萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',6'- 二氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，4',6'-三氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(甲基苯基膦酰氧 基)-4-氧代戊酸；(3RS)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-氟-4-氧代戊酸； (3S)-3-[N-(N'-(苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(5,6,7,8-四氢-l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基 -5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-节基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基甲基)草氨酰)丙氨酸萄氨基-5-(2',3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(3-苯氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基廣基-5-(2',3',5'力'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-S-P'，^S',四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(二苯甲基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟 苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'-氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'-氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰氧 基)-4-氧代戊酸；。S)-HN-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-PW,三氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(38)-3-[^1-(^-(1-萘基)草氨酰)(叔丁基)甘氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)(叔丁基)正亮氨酸基]氨基 -5-(2',3，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(^-(1-萘基)草氨酰)(叔丁基)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-(甲基苯基膦酰氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-氟-4-氧代戊酸； (3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸基]氨基-5-(二苯基膦酰氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-(lH-四唑-5-基)苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧 代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-金刚垸基)苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(苯基)草氨酰)缬氨酸基腐基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(苄基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(苯乙基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-苯氧基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)缬氨酸萄氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-萘基)草氨酰)缬氨酸蜀氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(4-氯-1-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(5,6，7,8-四氢-l-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代 戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l，2,3,4-四氢-l-萘基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代 丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基甲基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)亮氨酸萄氨基-4-氧代丁酸；特别优选的化合物选自(38)-3-[化(>^'-(2-氟-4-碘苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氯苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-溴苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氟苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4_氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基傳氨酰)缬氨酸基腐基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-蒽基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2，,3，,5，，6，-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2，6-二氟苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5'，6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3',5'，6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-甲氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基甲基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苄基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'-(2-苯基苯基傳氨酰)缬氨酸基腐基-4-氧代丁酸。 最优选地，化合物为(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰)丙氨酸基:氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸。抗-MAdCAM抗体或其抗原结合部分优选WO2005/067620中公开的抗体，在此将其全文并入作为参考。具体地，所有本文涉及的SEQ IDNo都与WO2005/067620中实际公开的序列有关。优选地，本发明中使用的抗-M AdC AM抗体特异性结合M AdC AM 。再更优选地，至少所述抗体的CDR序列是人CDR序列、或人抗体的抗原结合部分。优选地，抗体是人抗体，更优选抗体充当MAdCAM拮抗剂。本发明的另一方面是所述抗-MAdCAM抗体的重和/或氢链或其可 变区或其他抗原结合部分、或编码前述任意者的核酸分子，以及药物可接受载体的组合应用。本发明的该方面包括任意前述抗体的片段的应用，所述片段包括但不限于Fab片段、F(ab')2片段、单链Fv (scFv)片断。优选地，抗-MAdCAM抗体是选自1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的人抑制性抗 -MAdCAM抗体，如WO2005/067620中所公开。优选地，抗-MAdCAM 抗体包括轻链，所述轻链包括选自如WO2005/067620中公开的SEQ ID NO:4、 8、 12、 16、 20、 24、 28、 32、 36、 40、 44、 48、 54、 58、 62、 66或68的氨基酸序列(具有或没有信号序列)、或任一个所述氨基酸 序列的可变区、或一个或多个来自这些氨基酸序列的CDR。抗 -MAdCAM抗体优选包括重链，所述重链包括选自如WO2005/067620 中所公开的SEQIDNO: 2、 6、 10、 14、 18、 22、 26、 30、 34、 38、 42、 46、 52、 56、 60或64的氨基酸序列(具有或没有信号序列)、或可变 区的氨基酸序列、或一个或多个来自这些氨基酸序列的CDR。抗 -MAdCAM抗体优选为包括上述序列任一个的从CDR1开始至CDR3 结束的氨基酸序列的人抗-MAdCAM抗体。本发明中使用的抗 -MAdCAM抗体也可以是包括一个或多个任何上述序列的FR区的抗 -MAdCAM抗体。本发明的组合中使用的抗-MAdCAM抗体也可以包括如下抗 -MAdCAM抗体，其包括其中已经进行一处或多处修饰的上述氨基酸 序列之一。例如，抗体中化学反应性的半胱氨酸被另一残基取代，例 如但不限于，丙氨酸或丝氨酸。取代可以在非规范(non-canonical)半 胱氨酸处或规范半胱氨酸处。取代可以在抗体的可变区域的CDR或框 架区中或恒定区域中进行。也可以进行氨基酸取代，以消除抗体中可能的蛋白水解位点。这 种位点可以在抗体的可变区域的CDR或框架区中或者在恒定区中中发 生。半胱氨酸残疾的取代和蛋白水解位点的消除可以降低抗体产品的 异质性。精氨酸-甘氨酸对，形成可能的脱酰胺位点，其可以通过改变 残基中的一个或两个来消除。可以进行氨基酸取代，以在本发明使用 的抗体的可变区中加入或消除可能的糖基化位点。本发明中使用的抗-MAdCAM抗体重链区的C-端赖氨酸可以被切 除。抗-MAdCAM抗体的重链和轻链可以任选地包括信号序列。WO2005/067620中详细描述了本发明的组合中使用的12种优选的 抑制性人抗-MAdCAM单克隆抗体1.7.2、 1.8,2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4禾卩9.8.2。 叛-M^C赢贫沐麟應舒类抗体可以是IgG、 IgM、 IgE、 IgA或IgD分子。优选抗体是IgG 类，并且是IgG,、 IgG2、 IgG3或IgG4子类。更优选地，抗-MAdCAM 抗体是子类IgG2或IgG4。更优选地，抗-MAdCAM抗体是与 WO2005/067620中描述的抗体1.7.2、 1.8.2、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod (其为 IgG2)或者6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1或9.8.2 (其 为IgG》相同的类别和子类。抗-MAdCAM抗体的类别和子类可以通过本领域任何已知方法来 确定。通常，抗体的类别和子类可以使用对特定类别和子类的抗体有 特异性的抗体确定。这些抗体是市售的。ELISA、蛋白质免疫印迹法以 及其他技术均可以确定类别和子类。另外可选地，类别和子类可以通 过如下方法确定对抗体的重链和/或轻链恒定区域的全部或部分进行 测序，将其氨基酸序列与各种类别和子类的免疫球蛋白的已知氨基酸 序列进行比较，确定抗体的类别和子类为表现出最高序列同源性的类 别。激/^ 7分f游透摔没本发明的组合中使用的抗-MAdCAM抗体表现出物种和分子的选 择性。抗-MAdCAM抗体可以结合人、猕猴或犬MAdCAM。本发明的 组合中使用的其他抗-MAdCAM抗体不结合新世纪猴(New World monkey)物种，例如狨猴。可以使用本领域公知的方法确定抗 -MAdCAM抗体的物种选择性。例如，可以使用蛋白质免疫印迹法、 FACS、 ELISA或免疫组织化学确定物种选择性。在优选的实施方式中， 可以使用免疫组织化学确定物种选择性。本发明的组合中使用的抗-MAdCAM抗体特异性地结合 MAdCAM，其对MAdCAM的选择性相对于VCAM、纤连蛋白或任何其他抗原为至少10倍，优选至少20、 30、 40、 50、 60、 70、 80或90 倍，最优选至少100倍。优选地，抗-MAdCAM抗体对VCAM、纤连 蛋白或任何MAdCAM之外的其他抗原表现不出任何可察觉的结合力。 可以使用本领域公知的方法遵照说明书的教导测定抗-MAdCAM抗体 对MAdCAM的选择性。例如，可以使用蛋白质免疫印迹法、FACS、 ELISA或免疫组织化学来测定选择性。 界M4t/C赢拔沐对M4dC4M游祭》薪〃力本发明的组合中使用的抗-MAdCAM抗体优选以很高的亲和力与 MAdCAM特异性结合。如通过表面等离子共振，例如BIAcore测量， 本发明的组合中使用的一种抗-MAdCAM抗体以3 x 10—8 M或更低的 Kd与MAdCAM特异性结合。优选地，抗体以1 x 10—8或更低或1 x 10—9 M或更低的Kd与MAdCAM特异性结合。更优选地，抗体以1 x 10—1QM 或更低的Kd与MAdCAM特异性结合。组合中使用的抗体以2.66 x 10—1QM或更低、2.35 x 10—或更低、或9 x 10—12M或更低的Kd与 MAdCAM特异性结合。优选地，抗体以1 x 10—"M或更低的Kd与 MAdCAM特异性结合。优选地，抗体以与选自以下的抗体基本相同的 Kd与MAdCAM特异性结合:1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod。与参比抗体的"Kd基本相同" 的抗体在相同的实验中与参比抗体的Kd相比，其Kd为士100pM，优选 士50pM，更优选士20pM，再更优选土10pM、 土5pM或士2pM。优选 地，抗体以与包括选自以下WO2005/067620中所公开的抗体的一个或 多个可变区域或一个或多个CDR的抗体基本相同的Kd与MAdCAM特 异性结合1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod 。优选地，抗体以与包括选自以下 WO2005/067620中所公开的氨基酸序列之一或其可变区域的抗体基本 相同的Kd与MAdCAM结合SEQIDNO:2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68 (具有或没有信号序列)。 优选地，抗体以与以下抗体基本相同的Kd与MAdCAM结合所述抗体包括一个或多个来自包括选自以下WO2005/067620中所公开的氨基 酸序列的抗体的CDR: SEQIDNO:2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68。抗-MAdCAM抗体与MAdCAM的结合亲和力可以通过本领域任 何已知方法测定。在一个实施方式中，结合亲和力可以通过竞争 ELISA、 RIA或表面等离子共振(例如BIAcore)来测量。在更优选的 实施方式中，结合亲和力通过表面等离子共振测量。在进一步优选的 实施方式中，结合亲和力和解离速率使用BIAcore测量。测定结合亲 和力的例子可以参见WO2005/067620。贫-My^C4M贫沐游 ,銜本发明的组合中使用的抗-MAdCAM抗体在体外或体内的半衰期 为至少1天。优选地，抗体或其部分的半衰期为至少3天。更优选地， 抗体或其部分的半衰期为4天或更长。再更优选地，抗体或其部分的 半衰期为8天或更长。本发明中使用的抗体或其抗原结合部分也可以 进行衍牛化或修饰，使其半衰期更长，如下文所讨论。在另一优选实 施方式中，抗体可以含有点突变，以增加血清半衰期，例如WO 00/09560 屮所描述。抗体半衰期可以通过任何本领域普通技术人员已知的方式测量。 例如，抗体半衰期可以通过蛋白质免疫印记法、ELISA或RIA在合适 的时间内进行测量。抗体半衰期可以在任何合适的动物体内测量，例 如灵长类，如猕猴或人。M4t/C4M表位凝贫-M4c/C4M叛沐^^游緣定本发明还提供了人抗-MAdCAM抗体与抗纤维化药剂的组合，该 抗体结合与本文提供的人抗-MAdCAM抗体相同的抗原或表位。而且， 本发明提供了人抗-MAdCAM抗体与抗纤维化药剂的组合，该抗体与 人抗-MAdCAM抗体竞争或交叉竞争。优选地，人抗-MAdCAM抗体 为1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod。优选地，人抗-MAdCAM抗体包括来自选自以下抗体的 一个或多个可变区域或一个或多个CDR: 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2，d、 6.34.2，d、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod。优选地，人抗 -MAdCAM抗体包括选自以下WO2005/067620中所述的氨基酸序列之 一或其可变区域SEQIDNO:2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68 (具有或没有信号序列)。优选地，人 抗-MAdCAM抗体包括一个或多个来自以下抗体的CDR，所述抗体包 括选自如下WO2005/067620中所述的氨基酸序列之一SEQ ID NO: 2、 4、 6、 8、 10、 12、 14、 16、 18、 20、 22、 24、 26、 28、 30、 32、 34、 36、 38、 40、 42、 44、 46、 48、 52、 54、 56、 58、 62、 64、 66或68。 可以使用多种本领域已知的方法确定抗-MAdCAM抗体是否结合 与其他抗-MAdCAM抗体相同的抗原。例如，可以使用已知的抗 -MAdCAM抗体来捕获抗原，将抗原从抗-MAdCAM抗体中洗脱，然 后测定检验抗体是否与洗脱出的抗原结合。可以通过如下方法确定抗 体是否与抗-MAdCAM抗体竞争在饱和条件下使抗-MAdCAM抗体 与MAdCAM结合，然后测量检验抗体与MAdCAM结合的能力。如果 检验抗体能够同时与MAdCAM和抗-MAdCAM抗体结合，则检验抗体 与抗-MAdCAM抗体的不同表位结合。但是，如果检验抗体不能同时 与MAdCAM结合，则检验抗体与人抗-MAdCAM抗体竞争。该实验可 以使用ELISA或表面等离子共振或优选的BIAcore进行。为了检验抗 -MAdCAM抗体是否与其他抗-MAdCAM抗体交叉竞争，可以双向使 用上述的竞争方法，即确定已知抗体是否阻断检验抗体以及相反的情 况。轻淑疆縫娜鄉本发明还提供了抗-MAdCAM抗体与抗纤维化药剂的组合，该抗 体包括人k基因编码的轻链可变区。优选地，轻链可变区由人VicA2、 A3、 A26、 B3、 012或018基因族编码。优选地，轻链包括从幼体 (germline)人VkA2、 A3、 A26、 B3、 012或018序列不超过11个、 不超过6个、或不超过3个氨基酸置换。优选地，氨基酸置换是保守 置换。优选地，相对于幼体氨基酸序列，抗-MAdCAM抗体的VL含有与任意一个或多个抗体1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.73.2、 6.77.1 、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的VL相同的突变。本发明包括抗-MAdCAM抗体与抗纤维化药剂的组合，该抗体采用与所示例的抗体相同的人Vk 和人Jic基因。抗体可以包括与一个或多个所示例的抗体相同的一个或 多个从幼体的突变，或者抗体可以在一个或多个与所示例的抗体相同 的位置处包括不同的置换。例如，抗-MAdCAM抗体的VL可以含有一 个或多个与抗体7.16.6中存在者相同的氨基酸置换，以及另一个与抗 体7.26.4相同的氨基酸置换。通过这种方式，人们可以混合并匹配不 同的抗体结合特性，以改变，例如，抗体对MAdCAM的亲和力或其 从抗原解离的速率。突变可以在与发现于任何一个或多个以下抗体的 VL中的相同的位置进行1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、6.67.1- mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod，但是保守氨基酸置换不使用相 同的氨基酸进行。例如，如果相比于以下抗体之一的幼体1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67,1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-rnod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod， 氨基酸置换为谷氨酸，则可以保守地置换天冬氨酸。类似地，如果氨 基酸置换为丝氨酸，则可以保守地置换苏氨酸。抗-MAdCAM抗体的轻链可以包括与1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22,2-mod、6.34.2- mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的VL氨基酸序列 相同的氨基酸序列。轻链优选地包括与1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的轻链CDR区相同 的氨基酸序列。轻链可以包括具有至少一个1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的轻链CDR区的氨 基酸序列。轻链可以包括具有来自不同轻链的CDR的氨基酸序列，该 不同轻链使用相同的Vk和Jk基因。优选来自不同轻链的CDR获自 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73,2、 6.77.1、 7.16.6、7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod。优选轻链包括选自如下WO2005/067620中所述的具有 或没有信号序列的氨基酸序列SEQIDNO:4、 8、 12、 16、 20、 24、 28、 32、 36、 40、 44、 48、 54、 58、 62、 64、 66或68。优选轻链包括 由选自如下WO2005/067620中所述的核苷酸序列所编码的氨基酸序 歹lj: SEQIDNO:3、 7、 11、 15、 19、 23、 27、 31、 35、 39、 43、 47、 53、 57、 61、 65或67 (具有或没有信号序列)，或者编码其中有1-11 个氨基酸被插入、缺失或置换的氨基酸序列的核苷酸序列。优选地， 氨基酸置换是保守氨基酸置换。抗体或其部分可以包括^轻链。本发明还提供了抗-MAdCAM抗体或其部分与抗纤维化药剂的组 合，该抗体包括人VH基因序列或衍生自人VH基因的序列。重链氨 基酸序列可以源自人VH 1-18、 3-15、 3-21、 3-23、 3-30、 3-33或4-4 基因族。优选地，重链包括不多于15处、不多于6处或不多于3处的 从幼体人VH1-18、 3-15、 3-21、 3-23、 3-30、 3-33 or 4-4基因序列的氨 基酸改变。WO2005/067620中所描述的SEQ IDNO: 2、 6、 10、 14、 18、 22、 26、 30、 34、 38、 42和46提供了 12种可以用于本发明的组合的抗 -MAdCAM抗体的全长重链。优选地，相对于幼体氨基酸序列，抗-MAdCAM抗体的VH含有 与任意-一个或多个如下抗体的VH的相同突变1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2掘d、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod。与上 述讨论类似，抗体包括一处或多处与一个或多个所示例的抗体相同的 从幼体的突变。抗体还可以在一处或多处与一个或多个所示例的抗体 相同的位置包括不同的置换。例如，抗-MAdCAM抗体的VH可以含 有与抗体7.16.6中所存在者相同的氨基酸置换，以及另一处与抗体 7.26.4相同的氨基酸置换。通过这种方式，人们可以混合并匹配不同的 抗体结合特性，以改变，例如，抗体对MAdCAM的亲和力或其从抗 原解离的速率。相比较于幼体的氨基酸置换，可以在发现于任何一个 或多个以下参比抗体的VL中的来自幼体的置换的相同位置进行 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod，但是该位置被不同的残基置换，其为相比较于参比抗体 的保守置换。本发明的组合中使用的抗-MAdCAM抗体的重链优选包括与 1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod 或7.26.4-mod的VL氨基酸序列相同的氨基酸序列。更优选地，重链 包括与1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的重链CDR区相同的氨基酸序列。优选地， 重链包括来自至少一个1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2，d、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的重链CDR区的氨基酸序列， 或者重链可以包括具有来自不同重链的CDR的氨基酸序列。优选地， 来自不同重链的CDR获自1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod 。优选重链包括选自如下 WO2005/067620中所述的具有或没有信号序列的氨基酸序列SEQ ID NO: 2、 6、 10、 14、 18、 22、 26、 30、 34、 38、 42、 46、 52、 56、 60 或64。重链还可以包括由选自如下WO2005/067620中所述的核苷酸序 列所编码的氨基酸序列SEQ ID NO: 1、 5、 9、 13、 17、 21、 25、 29、 33、 37、 41、 45、 51、 55、 59或63，或者编码其中有1-15个氨基酸被 插入、缺失或置换的氨基酸序列的核苷酸序列。优选氨基酸置换是保 守氨基酸置换。制造抗体的核酸、载体、宿主细胞和重组方法制造这些抗体的核酸、载体、宿主细胞和重组方法描述于WO 2005/067620中。 衍生化和标记的抗体本发明的组合的抗体或抗体部分可以加以衍生化，或者与另一分 子(例如另一肽或蛋白)连接。通常，抗体或其部分加以衍生化，使 得MAdCAM结合不受衍生化或标记的不利影响。因此，用于本发明的组合的抗体或抗体部分意在包括本文所述的人抗-MAdCAM抗体的天然和修饰的形式。例如，本发明中使用的抗体或抗体部分可以与一 个或多个其他分子实体功能性连接(通过化学耦连、基因融合、非共 价结合或通过其他方式)，例如另一抗体(例如双特异性抗体或双功能抗体(diabody))、检测试剂、细胞毒性试剂、药物试剂和/或可以调节 抗体或抗体部分与另一分子(例如链亲和素核心区或聚组氨酸标记) 的结合的蛋白或肽。一种类型的衍生化抗体通过将两个或多个抗体(相同类型或不同 类型，例如，以产生双特异性抗体)交联产生。合适的交联剂包括具 有两个被合适的间隔基隔开的两个不同反应基团的异双官能性 (heterobifunctional)交联剂(例如m-马来酰亚胺苯甲酰-N-羟基琥珀 酰亚胺酯)或同双官能性(homobifunctional)交联剂(例如二琥珀酰 亚胺基辛二酸酯)。这些交联剂可以获自Pierce Chemical Company, Rockford, III。另一类型的衍生化抗体是标记抗体。可以用于本发明的抗体或抗 体部分衍生化的检测试剂包括荧光化合物，包括荧光素、荧光素异硫 氰酸酯、若丹明、5-二甲基胺-l-萘磺酰基氯、藻红蛋白、镧系磷 (lanthanide phosphor)和类似物。抗体还可以用可用于检测的酶来标 记，例如辣根过氧化物酶、(3-半乳糖苷酶、荧光素酶、碱性磷酸酶、葡 糖氧化酶和类似物。当抗体用可检测酶标记时，其通过添加额外的试 剂检测，酶用于产生可以鉴别的反应产物。例如，当存在试剂辣根过 氧化物酶时，加入过氧化氢和二氨基联苯胺产生可以检测的着色反应 产物。抗体也可以用生物素标记，并通过抗生物素蛋白或链亲和素结 合的间接测量而检测。抗体可以用磁性试剂例如钆标记。抗体还可以 用被二次报告基因(reporter)(例如，亮氨酸拉链对(zipper pair)序 列、二次抗体结合位点、金属结合区域、表位标记)识别的预定多肽 表位标记。在一些实施方式中，标记通过不同长度的间隔基手臂(spacer arm)连接，以减少可能的空间阻碍。抗-MAdCAM抗体也可以用放射性同位素标记的氨基酸来标记。放射性同位素标记可以用于诊断和治疗用途。例如，放射性同位素标 记可以用于通过x-射线或其他诊断技术来检测表达MAdCAM的组织。而且，放射性同位素标记可以在治疗上用作患病组织或表达MAdCAM的肿瘤的毒素。多肽标记的例子包括但不限于如下放射性同位素或放射性核素3H、 l4C、 l5N、 35S、 90Y、 "Tc、川In、 125I、 1311。抗-MAdCAM抗体也可以用化学基团衍生化，例如聚乙二醇 (PEG)、甲基或乙基、或糖基。这些基团可以用于提高抗体的生物特 性，例如增加血清半衰期或增加组织结合力。该方法学还可以应用于 任何抗原结合片断或抗-MAdCAM抗体的形式。 药物组合物和试剂盒在另一方面，本发明提供了包括抑制性人抗-MAdCAM抗体的组 合物，以及用该组合物治疗受试者的方法。在一些实施方式中，治疗 的受试者是人。在其他实施方式中，受试者是兽医受试者。在一些实 施方式中，兽医受试者是犬或非人灵长类。治疗可以包括将一种或多种抑制性抗-MAdCAM单克隆抗体或其 抗原结合片段单独给药或与药物可接受的载体结合给药。抑制性抗 -MAdCAM抗体以及包括其的组合物可以与一种或多种其他的治疗剂、 诊断剂或预防剂组合给药。如本文所使用，"药物可接受的载体"是指生理学可相容的任意和 全部的溶剂、分散介质、涂层、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收促进 或延缓剂和类似物。药物可接受的载体的一些例子有水、盐水、磷酸 盐缓冲盐水、具有氯化钠的醋酸盐缓冲液、葡萄糖、甘油、聚乙二醇、 乙醇和类似物、以及其组合。在许多情况下，其优选在组合物中包括 等渗剂，例如糖、如甘露醇、山梨糖醇的多元醇、或氯化钠。药物可 接受的物质的其他例子有表面活性剂、润湿剂和提高抗体半衰期或有 效性的微量辅助物质，例润湿剂或乳化剂、防腐剂或缓冲剂。本发明中使用的组合物可以是多种形式，例如液体、半固体和固 体剂型，例如液体溶液(例如可注射或可输注的溶液)、分散体或悬浮 体、片剂、丸剂、冻干饼、干燥粉末、脂质体和栓剂。优选的形式取 决于既定的给药方式和治疗应用。典型的优选组合物是可注射或可灌 注溶液的形式，例如类似于用于人被动免疫的那些组合物。优选的给 药方式是肠胃外(例如静脉、皮下、腹膜内、肌内、皮内)。在优选的 实施方式中，抗体通过静脉内灌注或注射给药。在另一优选的实施方式中，抗体通过肌内、皮内或皮下注射给药。如果需要，抗体可以通 过使用泵、灌肠、栓剂或留置式储器或类似方式给药。药物组合物通常必须是无菌的，而且在制造和存储条件下都很稳 定。组合物可以配置成溶液、冻干饼、干燥粉末、微乳液、分散体、 脂质体或其他适于高药物浓度的有序结构。无菌可注射的溶液可以通过将所需量的抗-MAdCAM抗体加入到具有所需要的上述所列举成分的一种或组合的合适溶剂中，然后进行灭菌来制备。在用于制备无菌 可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻 干燥，其由其之前的无菌溶液产生活性成分加任何额外所需成分的粉末。通常，分散体通过将活性化合物加入到含有基础分散介质和上述 列举的所需其他成分的无菌载体中来制备。溶液的所需特性可以，例 如，通过使用表面活性剂来保持，而在分散体的情况下，通过使用表 面活性剂、磷脂和聚合物来保持所需粒径。延长可注射组合物的吸收 口J"以通过在组合物中包括延缓吸收的药剂，例如单硬脂酸盐、聚合材 料、油和明胶而实现。本发明的组合物的抗体可以通过多种本领域已知的方法给药，尽 管对于许多治疗用途来说，优选的给药途径/方式是皮下、肌内、皮内 或静脉内灌注。如本领域技术人员所认识，给药的途径和/或方式将取 决于所需的结果。在某些实施方式中，抗体组合物可以用保护抗体免于迅速释放的 载体制备，例如受控释放制剂，包括植入物、经皮贴剂和微胶囊递送 系统。可以使用生物可降解、生物相容的聚合物，例如乙烯醋酸乙烯 酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。这些制剂的许多制 备方法是有专利的，或者是本领域技术人员公知的。参见，例如，Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems (持续禾口控帝U禾華 放的药物递送系统)(J. R. Robinson, ed.， Marcel Dekker, Inc., New York (1978》。在某些实施方式中，本发明的组合的抗-MAdCAM抗体可以口服 给药，例如，用惰性稀释剂或可吸收可食用的载体。化合物(以及所 需的其他成分)也可以包封在硬壳或软壳的明胶胶囊中、压縮成片剂、 或直接加入到受试者饮食当中。对于口服治疗给药，抗-MAdCAM抗体可以结合有赋形剂，并以可摄取片剂、口腔片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮剂、糖浆、饼状(wafer)和类似物的形式使用。为了将本发 明的化合物通过肠胃外给药以外的方式给药，可能有必要将化合物用 防止其失活的材料包衣、或者与该材料共同给药。本发明的组合物可以包括"治疗有效量"或"预防有效量"的本 发明的抗体或其抗原结合部分。"治疗有效量"是指以必要的剂量和时 间有效实现所需治疗结果的量。抗体或抗体部分的治疗有效量可以根 据多种因素变化，例如个体的疾病状态、年龄、性别和体重，以及抗 体或抗体部分在个体体内引起所需反应的能力。治疗有效量也是抗体 或抗体部分的任何毒性或有害效果被治疗上有益的效果超过的量。"预 防有效量"是指以必要的剂量和时间有效实现所需预防结果的量。通 常，由于预防剂量在疾病发生前或其早期用于受试者，预防有效量可 以少于治疗有效量。剂量服法可以加以调节，以提供最优的所需反应(例如治疗或预 防反应)。例如，可以给予单个的大药丸，可以随着时间给予数份分开 的剂量，或者可以根据治疗状况的紧急程度成比例地减少或增加剂量。 特别有利的是，将肠胃外组合物配制成易于给药且剂量均匀的剂量单 位剂型。本文所使用的剂量单位剂型是指适合于被治疗的哺乳动物受 试者单一剂量的物理上分散的单元；每个单元含有计算成产生所需治 疗效果的预定量活性化合物以及所需的药物载体。本发明的剂量单位 剂型的说明通过并直接取决于以下因素而规定(a)抗-MAdCAM抗 体或其部分的独特特性和要实现的特定治疗或预防效果；(b)配制用 于个体中治疗敏感度的该抗体的工艺本身的限制。本发明的抗体或抗体部分的治疗或预防有效量的示例性、非限制 性范围为0.025-50 mg/kg，更优选0.1-50 mg/kg，更优选0.1-25、 0.1-10 或0.1-3 mg/kg。在一些实施方式中，制剂含有在20 mM醋酸钠、pH 5.5、 40 mM NaCl和0.2 mg/mL聚山梨酸酯80的缓冲液中的5 mg/mL抗体。 在其他实施方式中，制剂含有10mg/ml抗体，其在用冰乙酸调节至pH 5.5的2.73 mg/ml醋酸钠三水化物、45 mg/ml甘露醇、0.02 mg/ml EDTA 二钠盐二水化物、0.2mg/ml聚山梨酸酯80中，例如用于静脉内应用。 在其它实施方式中，制剂含有50mg/ml抗体，其在用冰乙酸调节至pH5.5的2.73 mg/ml醋酸钠三水化物、45 mg/ml甘露醇、0.02 mg/ml EDTA 二钠盐二水化物、0.4 mg/ml聚山梨酸酯80中，例如用于皮下或皮内应 用。应当注意，剂量值可以随着待缓解病状的类型和严重程度而变化。 应进一步理解到，对于任何特定的受试者，应当根据个体的需要和给 予并指导组合物给药的人的专业判断，随着时间调整具体的剂量服法， 而且本文所述的剂量范围仅仅是为了举例说明，并不是要对要求保护 的组合物的范围或实施进行限定。本发明的另一方面提供了包括本发明的抗-MAdCAM抗体或抗体 部分或者包括本文所述的抗体以及抗纤维化药剂的组合物的试剂盒。 除抗体或组合物和抗纤维化药剂以外，试剂盒还可以包括其他诊断或 治疗药剂。试剂盒还可以包括在诊断或治疗方法中应用的说明书。 基斷抓本发明的组合中使用的抗体可以通过基因治疗给予对其有需要的 患者。该治疗可以是体内或先体外后体内的。在优选的实施方式中， 可以将编码重链和轻链的核酸分子给予患者。在更优选的实施方式中， 将核酸分子给药，使得它们稳定地整联成B细胞的染色体，因为这些 细胞专用于产生抗体。在优选的实施方式中，前体B细胞先体外后体 内转染或感染，并再移植到对其有需要的患者体内。在另一实施方式 中，前体B细胞或其他细胞使用已知感染所关注细胞类型的重组病毒 在体内感染。基因治疗中通常使用的载体包括脂质体、质粒和病毒载 体。示范性的病毒载体有逆转录酶病毒、腺病毒和与腺相关性的病毒。 在体内或先体外后体内感染后，通过从被治疗患者中取样，并使用本 领域公知或本文所讨论的任何免疫检验法，可以监控抗体表达的水平。在优选的实施方式中，基因疗法包括给予编码抗-MAdCAM抗体 的重链或其抗原结合部分的分离核酸分子，以及表达该核酸分子的步 骤。在另一实施方式中，基因疗法包括给予编码抗-MAdCAM抗体的 轻链或其抗原结合部分的分离核酸分子，以及该表达核酸分子的步骤。 在更优选的方法中，基因疗法包括给予编码本发明的抗-MAdCAM抗 体的重链或其抗原结合部分的分离核酸分子、编码轻链或其抗原结合 部分的核酸分子，以及表达核酸分子的步骤。基因疗法还可以包括给 予其他抗炎药剂或免疫调节药剂的步骤。通过抗-MAdCAM抗体抑制依赖cuBVMAdCAM的粘附本发明还提供了抗-MAdCAM抗体与抗纤维化药剂的组合，该抗 体结合MAdCAM，并抑制带有(X4P7-整联蛋白的细胞与MAdCAM或其 他同源配体(例如L-选择素)与MAdCAM的结合和粘附。在优选的 实施方式中，MAdCAM是人的，并且是可溶形式的，或者在细胞表面 表达。在另一优选的实施方式中，抗-MAdCAM抗体是人抗体。在另 一实施方式中，抗体或其部分以不大于50 nM的ICso值抑制014(37和 MAdCAM之间的结合。在优选的实施方式中，ICs。值不大于5nM。在 更优选的实施方式中，IC5。值小于5nM。在更优选的实施方式中，IC50 值小于0.05叱/mL、 0.04 |ig/mL或0.03 jig/mL。在另一优选的实施方式 中，IC50值小于O.5 |ig/mL、 0.4 (ig/mL或0.3 |ig/mL。 IC5。值可以通过 本领域已知的任何方法测量。典型地，IC5。值可以通过ELISA或粘附 检验测量。在优选地实施方式中，IC5o值通过使用天然表达MAdCAM 的细胞或组织、或者已经改造成表达MadCAM的细胞或组织，通过粘 附化验来测量。除非本文中另有定义，本发明使用的科学和技术术语的含义是本 领域普通技术人员通常理解的含义。而且，除非上下文另有要求，单 数术语应包括复数，复数术语应包括单数。通常，有关本文所述的细 胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学、蛋白质和 核酸化学和杂交的术语及其技术是本领域公知并通常使用的。除非另 外指出，本发明的方法和技术通常根据本领域公知的常规方法进行， 如本说明书中引用和讨论的各种通用和更具体的参考文献中所描述。 参见，例如，Sambrook等人,_Mo/ecw/ar C7om'wgvZ^6oratof_y _Maw"fl/f分f克虔.'实教皇手#入2nd ed.， Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)禾口 Ausubel等人，CWeW尸ratocoAs Mo/ecw/ar Szb/ogy f分f生激学炉游观/f方法J , Greene Publishing Associates (1992)，以及Harlow禾口 Lane, Jw"6cxi/es:爿丄a6orato^y Afawwa/fi沐.'实^^皇手U ， Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990)，在此将其并入本文作为参考。酶促反应和提纯技 术如本领域通常进行那样根据制造商的说明书，或者如本文所描行。使用标准技术进行化学合成、化学分析、药物制备、配制和递送 以及患者的治疗。术语"多肽"包括天然或人工的蛋白质、蛋白质片段和蛋白质序 列的多肽类似物。多肽可以是单体或聚合的。术语"分离蛋白质"或"分离多肽"是通过其原始或衍生源符合 如下条件的蛋白质或多肽(1)与其在天然状态下所伴随的天然结合的成分不结合；(2)不含来自相同物种的其他蛋白质；(3)由来自不 同物种的细胞表达；或(4)在天然中不存在。因此，化学合成的或者 在不同于其天然起源的细胞的细胞系统中合成的多肽，将从其天然结 合的组分中"分离"。还可以使用本领域公知的蛋白质提纯技术，通过 分离使蛋白质基本上不含天然结合的成分。当至少大约60-75%的样品表现出单一物种的多肽时，蛋白质或多 肽是"基本上纯的"、"基本上同质的"或"基本上提纯的"。多肽或蛋 白质可以是单体或多体的。基本上纯的多肽或蛋白质通常包括大约 50%、 60%、 70%、 80%或90% W/W的蛋白质样品，更通常大约95% 纯度，优选大于99%纯度。蛋白质纯度或同质度可以通过若干本领域 公知的方式指示，例如蛋白质样品的聚丙烯酰胺凝胶电泳，然后通过 用本领域公知的染色剂对凝胶进行染色，观测单个多肽带。对于某些 用途，使用HPLC或本领域公知的其他提纯方式提供更高的分离度。本文所使用的术语"多肽片段"是指具有氨基端和/或羧基端缺失、 但其余氨基酸序列与天然序列相应位置相同的多肽。在一些实施方式 中，片段长度至少为5、 6、 8或10个氨基酸。在其他实施方式中，片 段长度至少为14个氨基酸，优选至少20个氨基酸，通常至少50个氨 基酸，再更优选至少70、 80、 90、 100、 150或200个氨基酸。本文所使用的术语"多肽类似物"是指包括至少25个氨基酸的片 段的多肽，该片段基本上与氨基酸序列的一部分相同，并具备以下性 质中的至少-一个(l)在适当的结合条件下特异性结合MAdCAM， (2) 能够抑制整014(37联蛋白和/或L-选择素与MAdCAM的结合，或(3) 能够降低体内或体外的MAdCAM细胞表面表达。通常，多肽类似物 包括相对于天然序列的保守氨基酸置换(或插入或缺失)。类似物的长 度通常为至少20个氨基酸，优选至少50、 60、 70、 80、卯、100、 150或200个氨基酸或者更长，并且常常可以与全长天然多肽一样长。"免疫球蛋白"是一种四聚分子。在天然免疫球蛋白中，每个四 聚体由两个相同的多肽链对组成，每一对都具有一个"轻"链(大约25 kDa)和一个"重"链(大约50-70 kDa)。每个链的氨基端部分包 括大约100至110或更多个氨基酸的可变区，其主要负责抗原识别。 每个链的羧基端部分形成恒定区，其主要负责效应器功能。人轻链分 类为k和X轻链。重链分类成ii、 S、 Y、 a或s，并分别形成作为IgM、 IgD、 IgG、 IgA和IgE的抗体同种型。在轻链和重链内，可变区和恒定 区通过大约12或更多个氨基酸的"J"区连接，重链还包括大约10或 更多个氨基酸的"D"区。通常参见，F,^w^wto〃附w""o/ogy r基鄉 免瘦 ， Ch. 7 (Paul, W., ed.， 2nd ed. Raven Press, N.Y. (1989))(在此鉴 于所有目的将其全文并入作为参考)。每个重链/轻链对的可变区形成抗 体结合位点，使得完整的免疫球蛋白具有两个结合位点。免疫球蛋白链表现出相同的通过三个超可变区连接的相对保守的 构架区(FR)的总体结构，也称作互补性决定区或CDR。来自每一对 两个链的CDR通过构架区排列，形成表位特异性结合位点。轻链和重 链均从N-端到C-端包括以下结构域FR1、 CDR1、 FR2、 CDR2、 FR3、 CDR3和FR4。每个结构域的氨基酸的指认根据如下文献的定义进行 Kabat， Se《認"c&s1 尸rafez'm1 o//mm鹏o/og7'c"/ 7w em^ f免资学关注游蛋 ^^^^"^/J (National Institutes of Health, Bethesda， Md. (1987 and 1991)) 或Chothia & Lesk， J. Mo/. 196:901-917(1987); Chothia等人，A^wm, 342:878-883(1989)，在此将其均全文并入作为参考。"抗体"是指完整的免疫球蛋白，或者是指其与完整抗体竞争特 异性结合的抗原结合部分。在一些实施方式中，抗体是其抗原结合部 分。抗原结合部分可以通过重组DNA技术或通过完整抗体的酶促或化 学切割产生。抗原结合部分包括，特别是Fab、 Fab'、 F(ab')2、 Fv、 dAb、 和互补性决定区(CDR)片段、单链抗体(scFv)、嵌合抗体、双功能 抗体、和含有足以使特定抗原与多肽结合的免疫球蛋的至少一部分的 多肽。Fab片段是由VL、VH、CL和CHI结构域组成的单价片段；F(ab)2 片段是包括两个通过二硫桥在铰链区连接的Fab片段的二价片段；Fd 片段由VH和CHI结构域组成；Fv片段由抗体单臂的VL和VH结构域组成；dAb片段(Ward等人，A^w", 341:544-546(1989))由VH结构域组成。如本文使用的，称作例如1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.34.2、 6.67.1 、 6.77.2、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4或9.8.2的抗体是通过相同名称的杂交瘤产生的 单克隆抗体。例如，抗体1.7.2通过杂交瘤1.7.2产生。称作6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod或7.26.4-mod的抗体是序列从其 对应的亲本通过定位诱变而修饰的单克隆抗体。单链抗体(scFv)是VL和VH区经由合成连接基配对形成单价分 子的抗体，该连接基使其能够成为单个蛋白链(Bird等人，5Wewce， 242: 423-426 (1988)和Huston等人，尸rac. 7VW/.爿cad t/&4， 85:5879-5883 (1988))。双功能抗体是二价双特异性抗体，其中VH和VL区域在单 一多肽链上表达，但使用的连接基太短不能使同一链上的两个结构域 之间成对，从而迫使结构域与另一链上的互补结构域成对，产生两个 抗原结合位点(参见，例如，Holliger, P.等人，尸rac. A^/. Jcad OS/i, 90: 6444-6448 (1993)和Poljak, R. J.等人，^n^we， 2:1121-1123 (1994))。 来自本发明的抗体的一个或多个CDR可以共价或非共价地结合到分子 中，使其成为与MAdCAM特异性结合的免疫粘附素。免疫粘附素可 以作为更大的多肽链的一部分与CDR结合，可以将CDR与另一多肽 链共价连接，或者可以使CDR非共价结合。CDR使免疫粘附素与特定 的目标抗原特异性结合。抗体可以具有一个或多个结合位点。如果有一个以上的结合位点， 结合位点可以彼此相同，或者可以不同。例如，天然免疫球蛋白具有 两个相同的结合位点，单链抗体或Fab片段具有一个结合位点，而"双 特异性"或"双功能性"抗体(双功能抗体)具有两个不同的结合位 点。"分离抗体"是如下抗体(1)不结合有天然状态下伴随的天然 结合的成分，包括其他天然结合的抗体，(2)不含相同物种的其他蛋白质，(3)从不同物种的细胞表达，或(4)天然不存在。分离抗体的 例子包括已经使用MAdCAM经过亲和力提纯的抗-MAdCAM抗体、通 过杂交瘤或其他细胞系在体外产生的抗-MAdCAM抗体、和来自转基 因哺乳动物或植物的人抗-MAdCAM抗体。如本文所使用的，术语"人抗体"是指可变区和恒定区序列是人 序列的抗体。该术语包括序列衍生自人基因、但已经进行改变的抗体， 例如，以增加可能的免疫原性、增加亲和力、消除可能导致有害折叠 的半胱氨酸或糖基化位点等。该术语包括在非人细胞中重组产生的抗 体，该非人细胞能够赋予对于人细胞非典型性的糖基化作用。该术语 还包括转基因小鼠中生成的抗体，其包括一些或全部的人免疫球蛋白重链和轻链位点(loci)。一方面，本发明提供了人化抗体。在一些实施方式中，人化抗体 是从非人物种得到的抗体，其中重链和轻链的框架和恒定区的某些氨 基酸已经经过突变，以避免或消除在人体内的免疫反应。在一些实施 方式中，人化抗体可以通过将来自人抗体的恒定区与非人物种的可变 区融合而产生。如何产生人化抗体的例子可以参见美国专利第6,054,297号、第5,886,152号和第5,877,293号。在一些实施方式中， 本发明的人化抗-MAdCAM抗体包括本发明的一种或多种人抗 -MAdCAM抗体的一个或多个构架区的氨基酸序列。另一方面，本发明包括"嵌合抗体"的应用。在一些实施方式中， 嵌合抗体是指含有来自一种抗体的一个或多个区域以及来自一种或多 种其他抗体的一个或多个区域的抗体。在优选的实施方式中， 一个或 多个CDR来自本发明的人抗-MAdCAM抗体。在更优选的实施方式中， 所有CDR都来自本发明的人抗-MAdCAM抗体。在另一优选的实施方 式中，来自一种以上的本发明的人抗-MAdCAM抗体的CDR在嵌合抗 体中混合并匹配。例如，嵌合抗体可以包括来自第一人抗-MAdCAM 抗体轻链的CDR1，可以与来自第二人抗-MAdCAM抗体轻链的CDR2 和CDR3结合，并且重链CDR可以来自第三抗-MAdCAM抗体。而且， 构架区可以来自相同抗-MAdCAM抗体之一，来自一种或更多种不同 抗体，例如人抗体，或者来自人化抗体。"中和抗体"、"抑制性抗体"或拮抗剂抗体是以至少20%抑制014(37 或表达a4p7的细胞或任何其他同源配体或表达同源配体的细胞与 MAdCAM结合的抗体。在优选的实施方式中，抗体以至少40%、更优 选60%、再更优选80%、 85%、 90%、 95%或100%降低/抑制014(37整联 蛋白或表达01437的细胞与MAdCAM的结合。结合降低可以通过本领域普通技术人员己知的任何方式测量，例如，在体外竞争结合检验中测量。测量表达014(37的细胞与MAdCAM的结合降低的例子描述于实施例1 。抗体的片段或类似物可以由本领域普通技术人员遵照本说明书的 教导很容易地制备。优选的片段或类似物的氨基-和羧基-端在功能结构 域的边缘附近。结构和功能区域可以通过将核苷酸和/或氨基酸序列数 据与公众或私有的序列数据库进行比较而鉴别。优选地，使用计算机 比较方法来鉴别序列基序或发生在已知结构和/或功能的其他蛋白中的 预测的蛋白质构象结构域。折叠成已知三位结构的蛋白质序列的鉴别方法是己知的(Bowie等人，Science, 253:164 (1991))。术语"k。ff"是指抗体从抗体/抗原复合物中解离的脱离速率常数。 术语"Kd"是指特定抗体-抗原相互作用的解离常数。当解离常数 Sl^iM、优选^100nM、最优选^10nM时，称抗体与抗原结合。.术语"表位"包括任何能够特异性结合免疫球蛋白或T-细胞受体 或通过其他方式与分子相互作用的蛋白质决定子(diterminant)。表位 决定子通常由分子的化学活性表面基团例如氨基酸或糖侧链组成，并 且通常具有特定的三维结构特征，以及特定的电荷特征。表位可以是 "线性"或"构象"的。在线性表位中，蛋白质与作用分子(例如抗 体)之间所有的相互作用位点沿蛋白质的一级氨基酸序列线性发生。 在构象表位中，相互作用位点在蛋白质上跨过彼此隔开的氨基酸残基 发生。如本文所使用，20个传统氨基酸及其縮写遵照传统用法。参见 /w麵wo/ogy -爿/Sy^/ze^ f免疫学一^(2nd Edition, E.S. Golub and D.R. Gren, Eds" Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991))，在此将其 并入作为参考。20个传统氨基酸的立体异构体(例如D-氨基酸)、非 天然氨基酸(例如a,a-二取代氨基酸、N-烷基氨基酸、乳酸)、和其他 非传统氨基酸也可以合适地用作本发明多肽的组分。非传统氨基酸的 例子包括4-羟基脯氨酸、Y-羧基谷胺酸、s-N,N,N-三甲基赖氨酸、￡-N-乙酰基赖氨酸、O-磷酸丝氨酸、N-乙酰基丝氨酸、N-甲酰基甲硫氨酸、 3-甲基组氨酸、5-羟基赖氨酸、s-N-甲基精氨酸、和其他类似的氨基酸 和亚氨基酸(例如4-羟基脯氨酸)。在本文所使用的多肽符号中，根据标准用法和常规，左手方向是氨基端方向，右手方向是羧基端方向。本文所称的术语"聚核苷酸"是指长度至少为io个碱基的核苷酸(核糖核苷酸或脱氧核该酸或任一类型核苷酸的修饰形式)的聚合形 式。该术语包括单链和双链形式的DNA。本文所使用的术语"分离聚核苷酸"是指遗传、cDNA或合成来源 或其一些组合的聚核苷酸，通过"分离聚核苷酸"的原始形态，其(1) 与其在天然状态下发现的"分离聚核苷酸"中的全部或部分的聚核苷 酸不结合，(2)与天然不连接的聚核苷酸可操作地连接，或(3)在天 然中不作为较大序列的一部分存在。本文所称的术语"寡核苷酸"包括通过天然、非天然寡核苷酸链 连接在一起的天然或修饰的核苷酸。寡核苷酸是通常包括长度200个 碱基或更少的聚核苷酸亚型(subset)。优选地，寡核苷酸长度为10-60 个碱基，更优选长度为12、 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19或20-40个 碱基。寡核苷酸通常是单链的，例如，用于探针；尽管寡核苷酸也可 以是双链的，例如用于基因突变体的构建。本发明的寡核苷酸可以是 正义或反义寡核苷酸。本文所称的术语"天然核苷酸"包括脱氧核糖核苷酸和核糖核苷 酸。本文所称的术语"修饰核苷酸"包括具有修饰或取代糖基等的核 昔酸。本文所称的术语"寡核苷酸连接基"包括如下寡核苷酸连接基， 例如，存t逐石粦酸、酉旨、二硫代石粦酸酉旨、phosphoroselenoate 、phosphorodiselenoate、 phosphoroanilothioate、 phoshoraniladate、氨基磷酸酯等。参见，例如LaPlanche等人，7Vwc/. ^c/A L 14:9081 (1986);Stec等人， /爿w. C/2ew. 5bc. 106:6077(1984); Stein等人，M/c/.i 仏16:3209(1988); Zon等人，^w"-Ca"cw Z>wg r^"i^^"激设^^6:539(1991); Zon等人,Wgo冊c/ec^/tfes a d爿憩/ogww爿Prac"ca/4^raac/ r^^",麼,类叙激；实^方法入pp. 87-108 (F. Eckstein, Ed., Oxford University Press, Oxford England(1991)); Stec等人，美国专利第 5,151,510号；Uhlmann和Peyman, C7ze冊'ca/WeWev^, 90:543(1990)，将其公开内容并入本文作为参考。如果需要，寡核苷酸可以包括用于检 测的标记。"可操作连接"的序列包括与所关注的基因相邻的表达控制序列以及在反式(in trans)或在远处作用以控制所关注的基因的表达控制 序列。本文所使用的术语"表达控制序列"是指影响其所连接的编码 序列的表达和加工所必需的聚核苷酸序列。表达控制序列包括合适的 转录起始、终止、启动子和增强子序列；有效的RNA加工信号，例如 接合(splicing)和聚腺苷酰作用信号；使细胞质mRNA稳定的序列； 增强翻译效率的序列(即Kozak共有序列)；增强蛋白质稳定性的序列； 和当需要时，增强蛋白质分泌的序列。这些控制序列的性质取决于宿 主生物体而不同；在原核生物中，这些控制序列通常包括启动子、核 糖体结合位点和转录终止序列；在真核生物中，这些控制序列通常包 括启动子和转录终止序列。术语"控制序列"意在最少包括其存在对 表达和加工必不可少的所有组分，并且还可以包括其存在有利的、额 外的成分，例如前导序列和融合配偶序列。本文所使用的术语"载体"意指能够转运与其连接的其他核酸的 核酸分子。 一种类型的载体是"质粒"，这是指其中可连接有额外的 DNA片段的圆形双链DNA环。另一种类型的载体是病毒载体，其中 额外的DNA片段可以连接到病毒基因组中。某些载体能够在其进入的 宿主细胞内自我复制(例如，具有复制的细菌源的细菌载体和附加型 哺乳动物载体)。其他载体(例如非附加型哺乳动物载体)可以在引入 宿主细胞时整合到宿主细胞的基因组中，从而与宿主基因组一起被复 制。而且，某些载体能够引导与其可操作连接的基因的表达。这些载 体被本文称作"重组表达载体"(或简称"表达载体")。通常，重组 DNA技术中使用的表达载体常常是质粒的形式。在本说明书中，"质 粒"和"载体"可以互换使用，因为质粒是最常使用的载体形式。但 是，本发明意在包括其他形式的表达载体，例如病毒载体(例如复制 缺陷逆转录病毒、腺病毒和腺相关的病毒)，其发挥同等功能。本文所使用的术语"重组宿主细胞"(或简称"宿主细胞")是指 其中已经引入重组表达载体的细胞。应当理解，该术语不仅指特定的 受试者细胞，而且指该细胞的子代。因为随后一代中可能由于突变或 环境影响而发生某些修饰，实际上，这些子代可以与亲本细胞不同， 但仍包括在本文所用的术语"宿主细胞"的范围之内。术语"选择性杂交"在本文中是指可检测地且特异性地结合。根据本发明的聚核苷酸、寡核苷酸及其片段在杂交和洗涤条件下选择性 地与核酸链杂交，该条件使与非特异性核酸分子的可检测结合的可感 知量最小化。"高度严格性"或"高度严格的"条件可以用于实现选择 性杂交条件，这是本领域公知的，并在本文中加以讨论。"高度严格性" 或"高度严格的"条件的例子是将聚核苷酸与另一聚核苷酸一起孵育 的方法，其中一种核苷酸可以附于固体表面(例如膜)上，孵育在42。C的杂交温度下，在6XSSPE或SSC、 50%甲酰胺、5X Denhardt's试 剂、0.5% SDS、 100 (ig/ml变性的片断的鲑精DNA的杂交缓冲液中进 行12-16小时，然后在55。C下使用IX SSC、 0.5% SDS的洗涤缓冲液 洗涤两次。另外参见，Sambrook等人，出处同上，pp. 9.50-9.55。关于核苷酸序列的术语"百分比序列同源性"是指当以最大的对 应性排列时两个序列中相同的残基。序列同源性对比的长度可以是在 至少大约9个核苷酸的一段序列上，通常至少大约18个核苷酸，更通 常至少大约24个核苷酸，典型地至少大约28个核苷酸，更典型地至 少大约32个核苷酸，优选至少大约36、 48或更多个核苷酸。本领域 中已知有若干不同的测量核苷酸序列同源性的算法。例如，聚核苷酸 序列可以使用FASTA、 Gap或Bestfit进行对比，其均为Wisconsin Package Version 10.3， Accelrys， San Diego, CA. FASTA中的程序，包括， 例如，程序FASTA2和FASTA3，提供了查询和搜索序列之间重叠最好 的区域的排比和百分比序列同源性(Pearson, Af"/zoA ￡"z_ymo/.， 183: 63-98 (1990); iW謂，她AoA组脂.，132: 185-219 (2000); Pearson, A^ /wA 266: 227-258 (1996);尸e"^o"' 乂 Mo/. 5/o/.， 276: 71-84(1998);在此将其并入本文作为参考)。除非另外指出，使用具体程序 或算法的缺省参数。例如，核苷酸序列之间的百分比序列同源性可以 使用具有缺省参数(字长为6，记分矩阵(scoring matrix)使用NOPAM 因子)的FASTA确定，或者使用具有缺省参数的Gap确定，上述程序 在Wisconsin Package Version 10.3中提供，将其并入本文作为参考。除非另外指出，核苷酸序列的参比包括其互补体。因此，具有特 定序列的核酸分子的参比应当理解成包括具有其互补序列的其互补 链。在分子生物学领域中，研究者可互换地使用术语"百分比序列同一性"、"百分比序列相似性"和"百分比序列同源性"。在本申请中， 这些术语仅相对于核苷酸序列而言含义相同。当涉及核酸或其片断时，术语"基本上相似"或"基本上序列相 似"表示，当以合适的核苷酸插入或缺失与另一核酸(或其互补链) 最优地排比时，通过任何公知的序列同源性算法，例如上文讨论的FASTA、 BLAST或Gap测量，核苷酸序列同源性至少为核苷酸碱基的 大约85%，优选至少大约90%，更优选至少大约95%、 96%、 97%、 98%或99%。应用于多肽时，术语"基本同一"是指当通过例如使用缺省空位 权重(gap weight)的GAP或BESTFIT程序进行最优排比时，两个多 肽序列共享至少75%或80%的序列同源性，优选至少90%或95%的序 列同源性，再更优选至少98%或99%的序列同源性。优选地，不相同 的残基位置通过保守氨基酸置换而不同。"保守氨基酸置换"是氨基酸 残基被侧链(R基团)化学性质(例如电荷或疏水性)相似的另一氨 基酸残基取代的置换。通常，保守氨基酸置换基本上不改变蛋白质的 功能特性。在两个或更多个氨基酸序列通过保守置换而彼此不同的情 况下，百分比序列同源性或相似程度可以向上调节，以对置换的保守 性质进行校正。进行这种调节的方式是本领域技术人员公知的。参见， 例如，Pearson, Methods Mol. Biol" 24: 307-31 (1994)，将其并入本文作为参考。侧链化学性质相似的氨基酸分组的例子包括1)脂肪族侧链 甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；2)脂肪族-羟基侧链 丝氨酸和苏氨酸；3)含酰胺的侧链天冬酰胺和谷胺酰胺；4)芳族 侧链苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；5)碱性侧链赖氨酸、精氨酸和 组氨酸；和6)含硫侧链半胱氨酸和甲硫氨酸。优选的保守氨基酸置 换组为缬氨酸-亮氨酸-异亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、赖氨酸-精氨酸、 丙氨酸-缬氨酸、谷氨酸-天冬氨酸、和天冬酰胺-谷胺酰胺。另外可选地，保守取代是任何在Gonnet等人，Sc/e"ce, 256: 1443-45 (1992)公开的PAM250对数-可能性矩阵中具有正值的变化，将上述文 献并入本文作为参考。"中等保守"取代是任何在PAM250对数-可能 性矩阵中具有非负值的变化。多肽的序列相似度通常使用序列分析软件进行。蛋白质分析软件使用指认给不同置换、缺失或其他修饰(包括保守氨基酸置换)的相 似度度量而对类似序列进行匹配。例如，GCG含有例如"G叩"和"Bestfit"的程序，其可以以缺省参数用于确定密切相关的多肽(例如 来自不同生物物种的同源多肽)之间或野生型蛋白及其突变型蛋白之 间的序列同源性或序列同一性。参见，例如，Wisconsin package Version 10.3。多肽序列还可以使用FASTA使用缺省或推荐参数进行比较，这 是Wisconsin package Version 10.3. FASTA中的程序(例如FASTA2和 FASTA3)，提供了查询和搜索序列之间最佳重叠区域的排比和百分比 序列同源性(Pearson (1990); Pearson (2000))。将本发明的序列与含有 大量来自不同生物体的序列的数据库进行比较时，另一种优选的算法 是计算机程序BLAST,特别是blastp或tblastn，使用缺省参数。参见， 例如，Altschul等人, / M /.脂.215: 403-410 (1990); Altschul等人, M/c/e/c/ic^s 25:3389-402 (1997);将其并入本文作为参考。进行同源性比较的多肽序列的长度通常为至少大约16个氨基酸残 基，通常至少大约20个残基，更通常至少大约24个残基，典型地至 少大约28个残基，优选大于大约35个残基。当对含有来自大量不同 生物体的序列的数据库进行搜索时，优选对氨基酸序列进行比较。如本文所使用，术语"标记"或"标记的"是指抗体中结合有另 一分子。在一个实施方式中，标记是可检测的标记物，例如结合有放 射性同位素标记的氨基酸，或多肽连接有可以通过标记的抗生物素蛋 白检测的生物素基部分(例如，含有荧光标记物或酶活性的可以通过 光学或比色方法检测的抗生物素蛋白链菌素)。在另一实施方式中，标 记或标记物可以是治疗性的，例如，药物缀合物或毒素。标记多肽和 糖蛋白的各种方法是本领域已知的，都可以使用。多肽标记的例子包 括，但不限于以下放射性同位素或放射性核素(例如&、 14C、 15N、 35S、 9QY、 "Tc、 mIn、 l25l、 131I)、荧光标记(例如FITC、若丹明、镧 系磷)、酶标记(例如辣根过氧化物酶、卩-半乳糖苷酶、荧光素酶、碱 性磷酸酶)、化学发光标记物、生物素基、被二次报告基因识别的预定 多肽表位(例如，亮氨酸拉链对序列、二次抗体结合位点、金属结合 结构域、表位标记)、磁性试剂例如钆螯合物、毒素例如百日咳毒素、 紫杉醇(taxol)、细胞松弛素B、短杆菌肽D、溴乙锭、吐根碱、丝裂霉素、足叶乙甙(etoposide)、鬼臼噻吩甙(tenoposide)、长春新碱、 长春碱、秋水仙碱、阿霉素、柔红霉素、二羟炭疽菌素二酮、米托蒽 醌、光神霉素、放线菌素D、 l-去氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁 卡因、利多卡因、普萘洛尔和嘌呤霉素及其类似物或同系物。在一些 实施方式中，标记通过不同长度的连接基手臂连接，以降低可能的空 间位阻。
权利要求
1.一种抗-MAdCAM单克隆抗体或其抗原结合部分与抗纤维化药剂的组合。
2. 根据权利要求1所述的组合，其中所述的抗纤维化药剂是半胱 天冬蛋白酶抑制剂。
3. 根据权利要求2所述的组合，其中所述的半胱天冬蛋白酶抑制 剂是式I的化合物、或其药物可接受的盐B是氢原子、氘原子、烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、2-苯并噁唑基、取代2-噁唑基、(CH2)n-环垸基、(CH2)。-苯基、(CH2)"取代苯基)、(CH2)n-(l或2-萘基)、(CH2V(取代1或2-萘基)、(CH2)n-(杂芳基)、(CH2)n-(取代杂芳基)、卤代甲基、C02R12、 CONR"R14、 CH2ZR15、 CH20CO(芳基)、CH20CO(杂芳基)、或CH2OPO(R16)R17，其 中Z是氧或硫原子，或者B是式IIIa-c的基团R'为烷基、环烷基、(环烷基)垸基、苯基、取代苯基、苯基垸基、 取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)烷基、取代(l或2萘基) 烷基、杂芳基、取代杂芳基、(杂芳基)垸基、取代(杂芳基)烷基、Rla(Rlb)N 或R"0;并且W是氢、低级烷基、环烷基、(环垸基)烷基、苯基、取代苯基、苯 基烷基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(l或2萘基)烷基、或取代 (1或2萘基)烷基；并且其中R'a和R'b独立地为氢、烷基、环垸基、(环垸基)烷基、苯基、取代苯基、苯基烷基、取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)烷基、 取代(l或2萘基)垸基、杂芳基、取代杂芳基、(杂芳基)烷基、或取代(杂 芳基)烷基，其条件是R'a和R"不都为氢；Rk为烷基、环烷基、(环烷基)烷基、苯基、取代苯基、苯基烷基、 取代苯基烷基、萘基、取代萘基、(1或2萘基)烷基、取代(l或2萘基) 烷基、杂芳基、取代杂芳基、(杂芳基)烷基、或取代(杂芳基)烷基；R3为C,-6烷基、环垸基、苯基、取代苯基、(CH2)nNH2、 (CH2)NHCOR9、 (CH2)nN(C=NH)NH2 、 (CH2)mC02R2 、 (CH2)mOR10 、(CH2)mSR11、 (CH2)n环垸基、((^2) 苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)或(CH2;u杂芳基)，其中杂芳基包括吡啶基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、四唑基和B引哚基；R3a为氢或甲基，或者R3和R3a—起为-(CH2)d-，其中d是2-6的整数；W为苯基、取代苯基、(CH2)m苯基、(CH^(取代苯基)、环烷基或苯并稠合的环烷基；R5为氢、低级烷基、环垸基、苯基、取代苯基、(CH2)n环烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)"1或2-萘基)；W为氢、氟、氧代、低级烷基、环垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环烷基、(CH2)n苯基、(012)。(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、OR10、 SR'InHCOR9;R"为氢、氧代(即=0)、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环烷基、(CH2)n苯基、(CH2)。(取代苯基)、或(CH2M1或 2-萘基)；R8为低级烷基、环烷基、(CH2)n环垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取 代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)或COR9;R9为氢、低级烷基、环垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环 烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、011'2或 NR13R14;R"为氢、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、(CH^环烷基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；R"为低级垸基、环垸基、苯基、取代苯基、萘基、(CH2)n环烷基、(CH2),，苯基、(CH2)。(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基)；1112为低级烷基、环垸基、(CH2)n环垸基、(CH^苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH。n(1或2-萘基)；R"为氢、低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、(CH2)n环垸基、(CH2)n苯基、(CH2)n(取代苯基)、或(CH2)n(1或2-萘基);R"为氢或低级垸基；或者1113和R"—起形成5-7元碳环或杂环，例如吗啉或N-取代哌嗪；R"为苯基、取代苯基、萘基、取代萘基、杂芳基、(CH2)n苯基、 (CH2)n(取代苯基)、(CH2)n(l或2-萘基)、或(CH2)n(杂芳基)；R"或R"独立地为低级烷基、环烷基、苯基、取代苯基、萘基、 苯基烷基、取代苯基烷基、或(环烷基)烷基；r18和r19独立地为氢、烷基、苯基、取代苯基、(ch2)n苯基、(ch》n(取 代苯基)，或者r18和r19 —起为-(ch-ch)2-;R"为氢、烷基、苯基、取代苯基、(CH2)n苯基、(CH^(取代苯基);r21、 r"和r"独立地为氢或垸基； X为CH2、 (CH2)2、 (CH2)3或S;Y'为0或NR23;丫2为ch2、 o或nr23;a为0或l，且b为l或2，其条件是当a为l时，则b为l; c为l或2，其条件是当c为l时，a为0，且b为l; m为1或2;并且 n为1、 2、 3或4。
4.根据权利要求3所述的组合，其中所述式I的化合物选自以下化合物(3s)-3-[n-(n'-(2-氟4-碘苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2，，3，,6，-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-氯苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-溴苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-氟苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基—5-(2'，3'，5',6'-四氟苯 氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-三氟甲基苯基傳氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2，,3，,5，,6，-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[N-(N'-(l-蒽基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5',6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-叔丁基苯基傳氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四 氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-三氟甲基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-s-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3s)-3-[n-(n'-(2-二氟苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2',3'，5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；pS)-HN-(N'-(l-萘基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-P',3'乂6'-四氟苯氧 基)-4-氧代戊酸；(3S)-3-[N-(N'-(4-甲氧基苯基)草氨酰)丙氨酸基]氨基-5-(2'，3'，5'，6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸；(3S"-[N-(N'-(2—三氟甲基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基甲基苯基)草氨酰)缬氨酸基腐基-4-氧代丁酸；(3S)-3-[N-(N'-(2-苄基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸； (3S)-3-[N-(N'《2—苯基苯基)草氨酰)缬氨酸基]氨基-4-氧代丁酸。
5. 根据前述权利要求中任一项所述的组合，其中所述的抗 -MAdCAM抗体或其抗原结合部分是人单克隆抗体或其抗原结合部分。
6. 根据权利要求5所述的组合，其中所述的抗体或部分具备如下 性质中的至少一种(a) 与人细胞结合(b) 对MAdCAM的选择性相对于VCAM或纤连蛋白为至少100倍；(c) 与人MAdCAM以3 x 10—1QM或更低的Kd结合；或(d) 抑制(X4P7表达细胞与人MAdCAM的结合-，(e) 抑制淋巴细胞向胃肠淋巴组织中的募集。
7. 根据权利要求5或6中任一项所述的组合，其中所述的抗体或 抗原结合部分抑制人MAdCAM与014(37的结合，并且其中所述抗体或 其部分具有以下性质中的至少一种(a) 与参比抗体交叉竞争与MAdCAM的结合；(b) 与参比抗体竞争与MAdCAM的结合；(c) 与参比抗体结合相同的MAdCAM表位；(d) 以基本上与参比抗体相同的Kd与MAdCAM结合；(e)以基本上与参比抗体相同的脱离速率与MAdCAM结合； 其中所述参比抗体选自单克隆抗体1.7.2、单克隆抗体1.8.2、单克隆 抗体6.14.2、单克隆抗体6.22.2、单克隆抗体6.34.2、单克隆抗体6.67.1 、 单克隆抗体6.73.2、单克隆抗体6.77.1、单克隆抗体7.16.6、单克隆抗 体7.20.5、单克隆抗体7.26.4、单克隆抗体9.8.2、单克隆抗体6.22.2-mod、 单克隆抗体6.34.2-mod、单克隆抗体6.67.1-mod、单克隆抗体6.77.1-mod 和单克隆抗体7.26.4-mod。
8. 根据权利要求5-7中任一项所述的组合，其中所述的单克隆抗 体或其抗原结合部分选自以下抗体(a) 重链包括选自下列的参比抗体的重链CDR1、 CDR2和CDR3 宴l基酸〖,歹U: 1.7.2、 1.8.2、 6.14,2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6,73.2、 6,77.1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod和7.26.4-mod(b) 轻链包括选自下列的参比抗体的轻链CDR1、 CDR2和CDR3 氨基酸序列1.7.2、 1.8.2、 6.14.2、 6.22.2、 6.34.2、 6.67.1、 6.73.2、 6.77,1、 7.16.6、 7.20.5、 7.26.4、 9.8.2、 6.22.2-mod、 6.34.2-mod、 6.67.1-mod、 6.77.1-mod禾口 7.26.4-mod(c) 抗体包括(a)的重链和(b)的轻链；以及(d) 在(c)的抗体中，重链和轻链CDR氨基酸序列选自相同的 参比抗体。
9. 一种抗-014(37整联蛋白抗体或其抗原结合部分与权利要求2-4中 任-项所定义的半胱天冬蛋白酶抑制剂的组合。
10. 根据前述权利要求中任一项所述的组合在制造用于治疗肝纤 维化的药物中的应用。
11. 根据权利要求10所述的应用，其中所述的肝纤维化是丙肝相 关的肝纤维化、酒精肝疾病或非酒精性脂肪肝。
12. —种根据权利要求l-9中任一项所述的组合与药物可接受的载 体或赋形剂的药物组合物。
全文摘要
本发明涉及抗-MAdCAM抗体与抗纤维化药剂的新组合，该抗纤维化药剂是例如蛋白酶抑制剂，优选半胱天冬蛋白酶抑制剂。本发明还涉及包括本发明的组合的药物组合物，以及该组合在治疗肝纤维化中的应用。
文档编号A61K39/395GK101217980SQ200680025308
公开日2008年7月9日 申请日期2006年7月3日 优先权日2005年7月11日
发明者G·C·伯吉斯, R·凯丽 申请人:辉瑞有限公司