专利名称：通过在树脂上分级分离可得到的葡萄籽提取物的制作方法
通过在树脂上分级分离可得到的葡萄并予提取物本发明涉及通过在树脂上分级分离可得到的葡萄籽的提取物并涉及用 于制备该提取物的方法。本发明的方法提供来自葡萄籽内的具有可变含量的儿茶素和表儿茶酸 (单体)的提取物。根据本发明可得到的产物具有抗氧化剂作用并且主要用 作化妆品、补充剂食品补充剂(尤其作为心血管保护补充剂)和营养药。技术背景从葡萄籽的加工物中得到的总提取物含有多种代谢物，尤其是儿茶素单体和表儿茶酸单体、相关的原花青素(proanthocyanidole)寡聚体和多聚 体(矢车菊苷配基)以及多聚体和高分子量鞣质。EP 275224公开了用于制备葡萄(K/泡viVi^m)类黄酮的磷脂复合物的 的方法。WO 2005/36988公开了用于提取葡萄籽的方法，即在加工提取物后， 立即将种皮与种子分离。得到的提取物以低含量的单体多酚为特征。EP 348781公开了通过用醚或酯或酯与芳香烃的混合物提取葡萄籽和/ 或通过过滤而得到的富含原矢车菊酚(procyanidol)寡聚体的级分。EP 1035859公开了葡萄提取物的磷脂复合物用于治疗及预防动脉粥 样硬化的用途。已知的方法具有一些缺点，如使用有毒溶剂或需要特定的植物或复杂 方法。因而需要这样的常规方法，其中以简单方式实施该方法并提供其活性 成分含量可以随意进行调节的提取物。述套管足够的软以便从其内推出的管进入到中耳室内。然后，将插入 件取出并且使用细长的耳钳将管正确放置。引入管的方法:引入所述管的方法包括下述步骤1. 在耳膜内期望的位置切一小切口；2. 提供带有套管的管。将处于其套管内的管以长臂向前的方式安 装在导引器的顶端，管臂处于套管的另一端。3. 将耳管处于其上的导引器的端部放置在耳内，以便套管的端部 通过所述的穿孔稍微插入到耳膜内；用耳钳抓住管和导引件并将管的 顶喊插入到穿孔中。4. 通过滑动设置于把手上的导引件的旋钮推动耳管穿过耳膜，并且5. 将导引器从耳内取出。因为套管连接到导引器的顶端，其与导 引器一块从耳中取出。当使用杆插入件时，步骤为 在耳膜内期望的位置切一小切口，以便提供容易的插入； 将杆和处于套管腔内的所述管插入并将其推入到中耳腔； 然后将杆取出，将管留在切口内； 用细长耳钳将所述管调整到合适的位置。 当使用导引件时，步骤为1. 在耳膜内期望的位置切一小切口，以便提供容易的插入；2. 外科医生用手从其尾部将导引件握住，管在顶部处于半环形端 部内。将携带管的另一端放在穿孔附近；3. 将导引件的尾部固定保持在耳扩张器上以防止其任何的进一步 前进；4. 将管仅仅由细长耳钳推动并插入到所述穿孔中，直到所述臂弹 性张开到其正确位置；5. 将管保持在位，然后将导引件从耳中取出；6. 然后管被放置在其位置上。步骤(a)用丙酮或d-C3醇或溶剂的混合物或其水溶液(只要含水量不 超过90。/。(v/v))提取葡萄籽加以实施。优选40。/。v/v水-乙醇溶液。提取温度可以是从0°C至溶剂的沸腾温度并且优选地是70。C。如此实施允许从提取物内除去水不溶物、尤其高分子量鞣质的步骤 (b)，即冷却来自步骤(a)的提取物并且过滤或离心去掉不溶物。步骤(c)是任选的步骤，可以实施该步骤以除去在来自步骤(b)的提取物 内仍存在的任何鞣质。这些代谢物可以通过使用聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)加 以除去。优选地，本发明的方法还包括步骤(c)。步骤(d)允许使提取物分级分离，除去大部分无用的次级代谢物(糖等)， 同时保留矢车菊苷配基。该步骤即是通过在聚合树脂上吸附的色镨分离。 用于此目的的合适树脂的实例是苯乙烯-DVB树脂如AmberliteHP2(f或 Rohm and Haas XAD1180 ,或丙烯酸树脂如Rohm and Haas XAD7HP 。将从葡萄籽中得到的总提取物浓缩至5%至50% w/w 、优选10% w/w 的干残渣，并JL故置在1°C至25°C、优选在4。C的温度下，不搅拌，持 续l小时至24小时，优选16小时。将得到的混悬液在4。C离心直至从水溶液中除去残余沉淀物。将澄清 水溶液在旋转蒸发器内浓缩并添加水以得到5%至50% w/w 、优选10% w/w的干残渣。在一些例子中，溶液可以是水-醇或水-丙酮，而不仅是水 溶液。这取决于所需要的成品例如当需要具有高含量的儿茶素单体和寡 聚体的产物时，优选使用水溶液，否则使用水-醇或水-丙酮溶液。因此，当将从终产物内除去低分子量级分时，待上样至柱上的溶液应 当具有5%至50% w/w的干残渣和5%至30% v/v、优选10% v/v的醇(d-C3醇)或丙酮含量。因此已制备的溶液吸附于树脂上，而移出未滞留的溶液。此后，树脂用水-醇(d-C3醇，优选乙醇)或水-丙酮溶液洗涤以除去不想要的次级代谢物。溶剂应当具有100%至70%v/v、优选90% v/v的含水 量。弃去从柱内流出的洗涤溶液。产物用具有50%至5% v/v、优选30% v/v含水量的7jC-醇溶液d-C3 醇)、优选地用乙醇(洗脱。醇溶液可以任选地由具有50%至0% v/v、优选 30% v/v的含水量的水-丙酮溶液替换。本发明更详细的在如下实施例中描述。实施例1用水-醇溶液提取葡萄籽(步骤a、在此步骤中，制备作为随后柱色镨分离的原材料使用的总提取物。 将IOOO g葡萄籽在夹层式静态渗滤器内于70。C用1.5升乙醇(40% v/v) 覆盖4小时。4小时后，回收滤液并在相同条件下再提取7次，但是每次 提取^f吏用l升溶剂，以得到大约8升总滤液。合并的滤液抽吸加热过滤并 通过旋转蒸发器在60。C在减压下浓缩。该提取物具有228g总干残渣，基 于原材料的产率是22.8% w/w。将滤液浓缩以得到具有10% w/w 干残渣 的2.28 kg完全水性的混悬液。 实施例2用水-丙酮溶液提取葡萄籽(步骤a)在此步骤中，制备作为后续柱色镨分离的原材料使用的总提取物。 将1000 g葡萄籽在夹层式静态渗滤器或在配备搅拌器的夹层反应器内 于70。C用1.5升40% v/v丙酮覆盖4小时。4小时后，回收滤液并在相 同条件下再提取7次，但是每次提取使用1升溶剂，以得到大约8升总滤 液。合并的滤液抽吸加热过滤并通过旋转蒸发器在60。C在减压下浓缩。 该提取物具有235.6g的总干残渣，基于原材料的产率是23.56% w/w。 将滤液浓缩得到具有10% w/w干残渣的2.35kg完全水性的混悬液。实施例3纯化从葡萄籽中得到的提取物(步骤b):去除水不溶物 从步骤(a)的水-醇提取(实施例l)中得到的水混悬液在4°C冷却并静止 放置16小时，随后将仍冰冷的水混悬液在3000 g离心20分钟以从澄清水 溶液中分离淀析的残留物。弃去富含高分子量产物的残留物。得到的澄清溶液具有相当于168g部分纯化提取物的干残渣，具有 3.75% w/w儿茶素HPLC含量和2.87% w/w表儿茶酸HPLC含量及 6.62% w/w单体总含量(儿茶素+表儿茶酸)的。基于原材料的重量产率是 16.8% w/w。以下所述的全部色镨柱纯化法(4种不同方法)可以适用于该溶液。为 简洁起见，仅报道实施例5(利用方法1)作为直接纯化该溶液的实例。后续 所述的全部其它方法将适用于PVPP处理的溶液。实施例4纯化从葡萄籽中得到的提取物(歩骤b):去除水不溶物从步骤(a)的水-丙酮提取(实施例2)中得到的水混悬液在4。C冷却并静 止放置16小时，随后将仍冰冷的水混悬液在3000 g离心20分钟以从澄清 水溶液中分离淀析的残留物。弃去富含高分子量产物的残留物。得到的澄清溶液具有173g部分纯化提取物干残渣，具有4.21。/。 w/w儿 茶素HPLC含量和2.70% w/w表儿茶酸HPLC含量及6.91% w/w HPLC 单体总含量(儿茶素+表儿茶酸)。基于原材料的重量产率是17.3% w/w。以下所迷的全部色语纯化方法(4种不同方法)可以适用于该溶液。为简 洁起见，仅报道实施例6 (利用方法3)作为直接纯化该溶液的实例。后续 所述的全部其它方法将适用于PVPP处理的溶液。实施例5纯化从葡萄籽中得到的提取物方法l(歩骤d)将在步骤(b)内描述的部分纯化方法(实施例3)结束时得到的具有168 g干残渣的澄清水溶液浓缩成10。/。w/w的干残渣。已部分纯化提取物的这 种澄清溶液具有具有3.75% w/w儿茶素HPLC含量和2.87% w/w表儿茶 酸HPLC含量和6.62% w/w HPLC单体总含量(儿茶素+表儿茶酸)的干残 渣。将该水溶液加温至室温、随后上样至含有用水调湿的3300 ml Rohm and Haas XAD7HP⑧树脂的色镨柱上。水溶液吸附至树脂上，而去除从柱 中流出的未滞留的溶液。树脂随后用6.6升水洗涤，也去除该溶液，因为该溶液的单体含量可忽略不计并且矢车菊苷配基含量低。这些弃去的水溶液(产物l)具有69 g总干残渣(基于原材料的重量产率6.9% w/w)、 0.09% 儿茶素HPLC含量、0.10%表儿茶酸HPLC含量，总单体含量(儿茶素+ 表儿茶酸)是0.19% w/w。柱用9升卯％ v/v含水乙醇洗脱。将得到的洗脱物回收并在60。C在 减压下干燥，产生98克干燥产物(产物2)，对应于基于原材料的产率9.80% w/w。该产物具有6.25%儿茶素HPLC含量、4.77%表儿茶酸HPLC含量 和11.02% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)。实施例6纯化从葡萄籽中得到的提取物:方法2(歩骤d)将通过水-丙酮提取(步骤a;实施例2)并且随后通过步骤(b)内所述的 部分纯化(实施例4)而得到的具有173 g干残渣的澄清水溶液浓缩成10% w/w的干残渣。此后，将该水溶液加温至室温，随后上样至含有3300 ml Rohm and Haas XAD1180⑧树脂的色镨柱上;去除从柱中流出的未滞留的溶液。树脂 随后用6升水洗涤，并且将洗涤溶液与未滞留的溶液合并。产生的水溶液 干燥得到产物3,其中产物3具有99.4g干残渣、1.29% w/w儿茶素HPLC 含量、0.46% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升10% v/v丙酮洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物4) 。所述的产物具有23.9g干残渣，13.5% w/w儿茶素HPLC含量、 8.41%w/wHPLC表儿茶酸含量。树脂随后用6升20% v/v丙酮洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物5) 。所述的产物具有15.3g干残渣、14.3% w/w儿茶素HPLC含量、 10.9% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升30% v/v丙酮洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物6) 。所述的产物具有14.95g干残渣，2.21% w/w儿茶素HPLC含量、 2.04% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升40% v/v丙酮洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物7) 。所述的产物具有14.2 g干残渣，1.06% w/w儿茶素HPLC含量、0.66% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升50% v/v丙酮洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物8) 。所述的产物具有3.51g干残渣，0.67% w/w儿茶素HPLC含量、 0.46% w/w表儿茶酸HPLC含量。得到的产物可以随意加以混合以得到具有所需单体含量的产物。例如， 可以这样得到具有减少的单体含量的产物，即通过3.51 g产物8与14.2 g 产物7混合以得到具有0.98% w/w儿茶素HPLC含量、0.62% w/w表儿 茶酸HPLC含量、1.60% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的 17.71 g产物。或者，3.51 g产物8可以与14.2g产物7及与15.0g产物3混 合，以得到具有1.12% w/w儿茶素HPLC含量、0.55% w/w表儿茶酸 HPLC含量和1.67% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的32.71 g产物。另一方面，可以这样得到具有高含量单体的产物，即通过23.9g产物 4与15.3 g产物5混合，以得到具有13.81% w/w儿茶素HPLC含量、9.38% w/w表儿茶酸HPLC含量和23.19% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿 茶酸)的39.2 g产物。实施例7去除从葡萄籽得到的提取物中的水溶性鞣质(步骤c)处理从步骤b的部分纯化(实施例3)中得到的具有168 g干残渣的澄清 水溶液以除去水溶性鞣质。向溶液添加对应于待处理提取物的大约20%干 残渣重量的34gPVPP。在室温搅拌l小时后，将PVPP经折叠式滤器滤除。得到的溶液具有 部分纯化提取物的160 g干残渣，鞣质含量为2.7% w/w。基于原材料的重量产率是16.0% w/w。实施例8去除从葡萄籽得到的提取物中的水溶性鞣质(歩骤c)处理从步骤b的部分纯化(实施例4)中得到的具有168 g干残渣的澄清水溶液以除去水溶性鞣质。向溶液添加对应于待处理提取物的大约30% w/w干残渣重量的52 g PVPP。在室温搅拌l小时后，PVPP经折叠式滤器滤除。得到的溶液具有部分纯化提取物的163g干残渣，鞣质含量为1.5% w/w o基于原材料的重量产率是16.3% w/w。 实施例9纯化从葡萄籽方法1中得到的提取物(步骤d)从步骤(c)(实施例7)的部分纯化中得到的具有160 g干残渣的澄清水 溶液浓缩成10% w/w的干残渣。已部分纯化提取物的这种澄清溶液具有 具有3.87%儿茶素HPLC含量、2.96%表儿茶酸HPLC含量和6.83% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的千残渣。将该水溶液加温至室温，随后上样至含有用水调湿的3200ml Rohm and Haas XAD7HP⑧树脂的色镨柱上。水溶液吸附至树脂上，而去除从柱 中流出的未滞留的溶液。树脂随后用6.4升水洗涤，也去除该溶液，因为 该溶液的单体含量可忽略不计并且矢车菊苷配基含量低。这些弃去的水溶 液(产物9)具有65 g的总干残渣(基于原材料的重量产率6.5% w/w)、 0.09。/。儿茶素HPLC含量、0.10。/。表儿茶酸HPLC含量、单体总含量(儿茶 素+表儿茶酸)是0.19% w/w。将柱用9升90% v/v含水乙醇洗脱。将得到的洗脱物回收并在60。C 在减压下千燥，产生95克千燥产物(产物10)，对应于基于原材料的产率 9.50% w/w。该产物具有6.34%儿茶素HPLC含量、4.85%表儿茶酸 HPLC含量和11.19% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)。实施例10纯化从葡萄籽中得到的提取物方法3(步骤d) 将从步骤(c)的部分纯化(实施例7)中得到的具有160 g干残渣的澄清 水溶液浓缩成10"/。w/w的干残渣。将该水溶液加温至室温，随后上才羊至含有1600 ml Rohm and HaasXAD118(f树脂的色语柱上。水溶液吸附至树脂上，而去除从柱中流出的 未滞留的溶液。树脂随后用3升水洗涤。收集洗涤溶液并与未滞留的溶液 合并。产生的水i^液干燥得到产物(产物11)。所述的产物具有106.2 g干残 渣、1.39% w/w儿茶素HPLC含量、0.95% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用3升乙醇(10% v/v)洗涤，随后将得到的溶液收集并干燥(产 物12)。所述的产物具有12.0g干残渣、12.0% w/w儿茶素HPLC含量、 7.80% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用3升乙醇(20% v/v)洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物13) 。所述的产物具有14.7 g干残渣、11.5% w/w儿茶素HPLC含量、 9.23% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用3升乙醇(30% v/v)洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物14) 。所述的产物具有20.0 g干残渣、6.49% w/w儿茶素HPLC含量、 5.76% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用3升乙醇(40% v/v)洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物15) 。所述的产物具有5.08 g干残渣、2.84% w/w儿茶素HPLC含量、 2.59% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用3升乙醇(50% v/v)洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物16) 。所述的产物具有1.55 g干残渣、0.51% w/w儿茶素HPLC含量、 0.35% w/w表儿茶酸HPLC含量。得到的产物可以随意加以混合以得到具有所需单体含量的产物。可以 这样得到具有减少的单体含量的产物，即通过1.55 g产物16与5.08 g产物 15混合以得到具有2.26% w/w儿茶素HPLC含量、2.11% w/w表儿茶酸 HPLC含量和4.37% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的6.63 g 产物，或1.55 g产物16可以与7.00 g产物11混合以得到具有1.19% w/w 儿茶素HPLC含量、0.89% w/w表儿茶酸HPLC含量和的2.08% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的8.55 g产物。另一方面，可以这样得到具有高含量单体的产物，即通过12.0g产物 12与12.0 g产物13和15.0 g产物14混合，以得到具有9.73%w/w儿茶素HPLC含量、7.46% w/w表儿茶酸HPLC含量和17.19% w/w 的HPLC 总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的39.0 g产物，或12.0 g产物12可以与 12.0 g产物13混合以得到具有11.75% w/w儿茶素HPLC含量、8.52% w/w表儿茶酸HPLC含量和20.27% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿 茶酸)的24.0 g产物。 实施例11纯化从葡萄籽中得到的提取物方法4(歩骤d)从步骤(c)的部分纯化(实施例7)中得到的具有160 g干残渣的澄清水 溶液浓缩成10°/。 w/w的干残渣。将该澄清水溶液浓缩成干残渣(12% w/w),随后对其添加320 ml乙醇 (95% v/v)，以得到约10% w/w的干残渣和约20% Wv乙醇含量。将这种 水-醇溶液加温至室温，随后上样至含有1600 ml Rohm and Haas XAD1180 树脂的色镨柱上。去除从柱中流出的未滞留的溶液。树脂随后 用9.60升乙醇20。/。v/v洗涤，也去除洗涤溶液，得到135.6 g干残渣，具 有4.37% w/w儿茶素HPLC含量、3.35% w/w表儿茶酸HPLC含量和 7.72% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)。柱用6.60升70。/。v/v含水乙醇洗脱，并且将从柱中流出的洗脱物收集 并在60°C在减压下干燥，产生具有24.3 g干残渣、0.79% w/w儿茶素 HPLC含量、0.62% w/w表儿茶酸HPLC含量和1.41% w/w HPLC总单体 含量(儿茶素+表儿茶酸)的产物(产物17)。实施例12纯化从葡萄籽中得到的提取物方法2(步骤d)将通过步骤(a)的水-丙酮提取(实施例2)并且随后通过步骤(b)的部分 纯化(实施例4)以及步骤(c)的鞣质去除(实施例8)而得到的具有163g干残 渣的澄清水溶液浓缩成10% w/w的干残淹。将该澄清水溶液加温至室温，随后上样至含有用水调湿3200 ml Rohm and Haas XAD7HP⑤树脂的色语柱上；水-醇溶液吸附至树脂上，而 去除从柱中流出的未滞留的溶液。树脂随后用6.4升水洗涤，也弃去这种溶液，因为该溶液的单体含量可忽略不计并且矢车菊苷配基含量低。这些弃去的水溶液(产物18)具有62.5 g的总干残渣(重量产率对原材料6.3% w/w)、 0.11%儿茶素HPLC含量、0.14%表儿茶酸HPLC含量和0.25% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)。柱用9升90n/。v/v含水丙酮洗脱，并且将得到的洗脱物回收并在60。C 在减压下干燥，产生99.8克干燥产物(产物19)(产物对原材料10% w/w)。 该产物具有7.11%%儿茶素HPLC含量、4.52%表儿茶酸HPLC含量和 11.63% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)。实施例13纯化从葡萄籽中得到的提取物方法3(步骤d)将通过步骤(a)的水-丙酮提取(实施例2)并且随后通过步骤(b)的部分 纯化(实施例4)以及步骤(c)的鞣质去除(实施例8)而得到的具有163g干残 渣的澄清水溶液浓缩成10% w/w的干残渣。将该澄清水溶液加温至室温，随后上样至含有用水调湿3200 ml Rohm and Haas XAD1180⑤树脂的色镨柱上。水溶液吸附至树脂上，而去除从柱中流出的未滞留的溶液。树脂随后 用6升水洗涤，也弃去这种溶液与未滞留的溶液合并。产生的水溶液干燥 得到产物(产物20)。所述的产物具有106.4g干残渣、1.58% w/w儿茶素 HPLC含量、0.47。/ow/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升20。/。v/v丙酮升洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物22) 。所述的产物具有11.7g干残渣、16.8% w/w儿茶素HPLC含量、 15.2% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升30% v/v丙酮洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物23) 。所述的产物具有11.8g干残渣、2.20% w/w儿茶素HPLC含量、 2.20% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升40% v/v丙酮洗涤，将得到的溶液收集并千燥(产物24) 。所述的产物具有10.2g干残渣、1.15% w/w儿茶素HPLC含量、0.75% w/w表儿茶酸HPLC含量。树脂随后用6升50% Wv丙酮洗涤，将得到的溶液收集并干燥(产物 25)。所述的产物具有3.04g干残渣、0.71% w/w儿茶素HPLC含量、 0.43% w/w表儿茶酸HPLC含量。得到的产物可以随意混合以得到具有所需要的单体含量的产物。例如 可以这样得到具有减少的单体含量的产物，即通过3.04g产物25与10.2g 产物24混合以得到具有1.05% w/w儿茶素HPLC含量、0.68% w/w表儿 茶酸HPLC含量和1.73% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的 13.24 g产物，或3.04g产物25可以与10.2 g产物24和15.0 g产物20混 合以得到具有1.33% w/wHPLC单体含量、0.57% w/w表儿茶酸HPLC含 量和1.90% w/w HPLC总单体含量(儿茶素+表儿茶酸)的28.24g产物。另一方面，可以这样得到具有高含量单体的产物，即通过19.6g产物 21与11.7g产物22混合，以得到具有15.80% w/w儿茶素HPLC含量、 11.88% w/w表儿茶酸HPLC含量和27.76% w/w HPLC总单体含量(儿茶 素+表儿茶酸)的3L3g产物。
权利要求
1.用于提取葡萄籽的方法，其包括a)用溶剂提取葡萄籽(总提取物)；b)去除水不溶性鞣质；c)任选地去除水溶性鞣质；d)通过在柱上的色谱纯化，分离具有不同分子量的产物。
2. 如权利要求1内所述的方法，其中步骤(a)通过用丙酮或CrC3醇 或其混合物或含水量不高于卯。/。(v/v)的水溶液提取葡萄籽而实施。
3. 如权利要求2内所述的方法，其中提取溶剂是40% v/v的水-乙醇 溶液。
4. 如权利要求2或3内所述的方法，提取在70。C下实施。
5. 如权利要求1至4任一项内所述的方法，其中步骤(c)通过使用聚 乙烯吡咯烷酮(PVPP)而实施。
6. 如权利要求1至5任一项内所述的方法，其中色镨分离在苯乙烯-二乙烯苯树脂或丙烯酸树脂上实施。
7. 具有预定含量的儿茶素、表儿茶酸、原花青素寡聚体和多聚体 (矢车菊苷配基)的提取物，其通过权利要求1-6的方法可得到。
8. 组合物，含有权利要求7的提取物。
全文摘要
用于提取葡萄籽的方法，其包括a)用溶剂提取葡萄籽(总提取物)；b)去除水不溶性鞣质；c)任选地去除水溶性鞣质；d)通过在柱上的色谱纯化，分离具有不同MW的产物。
文档编号A61K8/97GK101232865SQ200680027531
公开日2008年7月30日 申请日期2006年7月13日 优先权日2005年7月29日
发明者A·焦里, A·阿内利 申请人:因德纳有限公司