专利名称：治疗糖尿病肾病的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗糖尿病肾病的新的药物组合物及其制剂。
技术背景糖尿病的慢性并发症渐渐成为了威胁患者健康的主要病症。其中糖尿病肾病是糖尿病最 严重的慢性并发症之一；也是糖尿病患者的主要死亡原因之一。据报道，1型糖尿病患者中 有50%死于慢性肾功能衰竭，而2型糖尿病也有5%~10%死于肾功能衰竭。随着糖尿病发病率的增加，DN患者R益增多，因其发病隐蔽，进展缓慢，如果任其发 展，当临床上出现持续性蛋白尿时，肾脏病变已不属早期，肾脏已出现了不可逆的病变，再 用药物也无法逆转，至今尚无有效的措施阻止其发生与发展。随着人均寿命延长，老年人口 增加，糖尿病患病率的增高，诊断治疗糖尿病肾病及控制其高危因素，应引起足够的重视， 以提高老年人的生命质量。1型或2型糖尿病患者中大约有20% 40%会发展为肾病。然而，20% 40%具有早期 肾脏病变标记的糖尿病患者依然会发展为晚期肾脏损害，最终演变为肾终未期疾病而导致死 亡。目前糖尿病肾病的药物治疗主要集中在控制血糖、血压和血脂水平，减轻高血糖、高血 压和高血脂造成的肾脏损伤，近年來炎症在糖尿病肾病的发病中所起的作用已经引起许多学 者的注意。抗炎治疗在理论上有望成为糖尿病肾病的治疗策略之一。但这些治疗措施取得的 效果并不理想，不能有效地抑制糖尿病肾病的发展。研究开发全新作用机制、疗效好的新的 治疗方法和药物，这是摆在我们医药工作者面甜十分紧迫的任务。格列酮类药物(TZD s)是一类新型的胰岛素增敏剂，通过激活过氧化物酶增殖物激活受 体(PPAR s)7而显著改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗状态，降低血糖，并且可通过活化 PPAR7，下调TGF-m，显著减少糖尿病患者尿微量白蛋白，从而延缓肾脏损伤。TZDs的肾 保护保护作用可以独立于胰岛素增敏和糖脂代谢的调节而直接发挥，如抑制系膜增生、抑制 炎症损害等。TZD s可能通过抑制ox-LDL的受体Lox-l的表达及由其引起的氧化应激，从 而减轻ox-LDL对肾脏的损伤。其中吡咯列酮(pioglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)、 环格列酮(giglitazone)、恩格列酮(englitazonne)等都属于格列酮类药物。内皮素受体阻断剂，能降低血管压力，阻止心脏和血管增生，减轻肺纤维化和炎症，临 床用于肺动脉高压的治疗。对包括高血压、冠状动脉疾病和心衰在内的多种心血管疾病均有 治疗作用。最近研究表明内皮素受体阻断剂还可以明显抑制SHR-DM组肾脏NF-zcB、 TGF-/31、 p21和p27的表达，起到肾脏保护作用。现在临床上使用的内皮素受体阻断剂是波 生坦，它的临床适应症是肺动脉高压，spp301已经进入临床研究，它是一个新型的内皮素受 体拮抗剂。其化学名称为5-Methyl-pyridine-2-sulfonicacid [6陽methoxy-5-(2-methoxy-phenoxy)-2-(pyridin-4—yl)陽pyrimidin-4-yl]陽amide。艮卩 5-甲基-吡啶-2-磺酸[6-甲氧基-5_(2-甲氧基-苯氧基)-2- (4 —吡啶基)-4-嘧啶基]-酰胺。 它的结构式如下SPP301发明内容本发明提供了一种治疗糖尿病肾病的新的药物组合物，它包括内皮素受体阻断剂和胰岛 素增敏剂。糖尿病肾病是糖尿病最严重的慢性并发症之一，其发生率和死亡率非常高，是威胁糖尿 病患者生命安全的隐性杀手。但是目前治疗糖尿病肾病的方法却十分有限，没有有效的措施 阻止其发生和发展。我们根据目甜缺乏有效的治疗方法的现状，对糖尿病肾病进行了深入研 究。惊奇的发现原来临床上一直用于治疗肺动脉高压的内皮素受体阻断剂与胰岛素增敏剂联 合用药虽然对于糖尿病患者血糖水平的降低没有取得协同作用，但对于糖尿病肾脏的保护作 用取得了相当好的协同作用。我们经过大量的动物药效学实验验证了我们的发明。控制好血 糖是预防糖尿病肾病的关键，长期血糖控制不佳将可引起对肾脏的损害，患者最终因出现全 身水肿、蛋白尿、尿毒症，而死于肾功能衰竭。我们通过实验比较了尿微量白蛋白、羟脯氨 酸含量和肌酐清除率等肾功能的指标，结果均有显著性差异P〈0.05，甚至有极显著的差异 p<().01，充分验证了我们的发明在糖尿病肾病的治疗中肾脏保护方面的协同作用。本发明将作用机制不同的两种药物科学组合，机制互补、作用协同、达到提高疗效、合 理用药的目的。另外，内皮素受体阻断剂临床一直用于肿动脉高压的治疗，本发明创造性的 将其和胰岛素增敏剂联合用药用于治疗糖尿病肾病取得了非常好的效果。全新作用机制和ti好的治疗效果，使本发明可能成为糖尿病肾病治疗方法的新突破。根据药物的性质、药效发挥的程度和患者的用药方便，我们将内皮素受体阻断剂和胰岛 素增敏剂复方制备成固体制剂，主要以口服的形式给药。口服给药形式我们选择了片剂、胶 囊等剂型。我们选择的片剂包括普通片剂、分散片、缓释片、泡腾片、口崩片等。
具体实施方式
实施例l片剂处方波生坦吡咯列酮微晶纤维素8%羟丙基甲基纤维素溶液低取代羟丙基纤维素硬脂酸镁50g10g冊g适量50g2g制备工艺波生坦和吡咯列酮过100目筛，微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过80目 筛，称取处方量的波生坦、吡咯列酮与低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入 8%羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒，6(TC干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂 酸镁混匀，压片即得。实施例处方片剂波生坦 罗格列酮 微晶纤维素 PEG6。/。溶液 羧甲基纤维素钙 硬脂酸镁制备工艺同实施例1 。50g 1.5g 100g适量15g实施例3胶囊处方 波生坦吡咯列酮50g 20g甘露醇 50g乳糖 40g6%PVP的95%乙醇溶液 适量微粉硅胶 5g制备工艺将处方中的波生坦、吡咯列酮、预胶化淀粉、甘露醇、乳糖和微粉硅胶分别 过100目筛，混匀，加6。/。PVP的95。/。乙醇溶液适量制粒，6(TC烘干，18目筛整粒，胶囊充 填即可。实施例4分散片处方 波生坦 100g吡咯列酮 20 g交联聚乙烯吡咯烷酮 80g 微晶纤维素 110g 5%PVP K3o无水乙醇溶液 适量 硬脂酸镁 2g 制备工艺波生坦和吡咯列酮过100目筛，交联聚乙烯吡咯烷酮过80目筛，称取处方 量的波生坦、吡咯列酮和交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，加入5。/。PVPk3o无水乙醇溶液造量 制粒，干燥后加入处方量微晶纤维素、硬脂酸镁混匀，压片即得。 实施例5分散片处方 波生坦罗格列酮 羟丙基纤维素 交联聚乙烯吡咯烷酮 10%淀粉浆 硬脂酸镁制备工艺同实施例4。100g 1.5g 40g 40g适量 4g实施例6胶囊处方 Spp301 20g吡咯列酮 10g微晶纤维素 50g羧甲基纤维素钙 15g乳糖 40g6%PVP的95%的乙醇溶液 适量微粉硅胶 5g 制备工艺同实施例3。实施例7处方缓释片Spp301 罗格列酮交联羧甲基淀粉钠 微晶纤维素 乙基纤维素 维生素E脂酸镁20g l,5g 120g 70g 2g 5g 2g制备工艺按缓释片的制备工艺制备成缓释片即可,实施例8片剂处方 Spp301吡咯列酮 微晶纤维素8%羟丙基甲基纤维素溶液 低取代羟丙基纤维素 硬脂酸镁 制备工艺同实施例l。40g10g100g适量50g2g实施例9泡腾片处方Spp301吡咯列酮羧甲基纤维素钙交联聚乙烯吡咯烷酮40g 15g 15g 15g微品纤维素 80g10%的淀粉浆 适量硬脂酸镁 6g碳酸氢钠 10g枸橼酸 81g制备工艺按常规泡腾片的制备工艺制备成所需的泡腾片即可。 实施例10动物模型与分组选用SD大鼠，雄性，体重(250±20) g。适应性平衡饲养l周后， 用于实验。实验大鼠禁食12h后，用10X水合氯醛300mg/kg体重腹腔麻醉下行左侧肾脏结 扎术，结扎方法为沿肾缔同时结扎肾脏动静脉及输尿管。术后2周，大鼠禁食18h， 一次 性腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ) 50mg/kg，即具体给药量为2.5ml/kg体重。注射药物后大 鼠自由摄食水。以造模72h非空腹尾静脉血糖水平》13.8mmol/L作为模型成立选择标准。成模DN大鼠随机分成模型组(缓冲液)、波生坦组(波生坦，20mg.kg—'.cT')、吡咯列 酮组(吡咯列酮，3mg.kg—'.d—1)、复方(波生坦+吡咯列酮)低剂量组(6.67 mg.kg—'.d一1 波生坦+ 1 mg.kg—'.d—'吡咯列酮)、复方中剂量组(20 mg.kg—'.d—'波生坦+ 3mg.kg—'.d—'吡咯 列酮)、复方高剂量组(60mg.kg—'.d—'波生坦+9mg.kg—'.d—'吡咯列酮)。另设一空白组，给 予相同体积的生理盐水。每组8只，各组均为灌胃给药。实验指标的测定连续给药10个月，iH常饲养。期间收集大鼠的尿测尿微量白蛋白。 末次给药后，留24h尿检测尿肌酐。血标本检测血糖、肌酐。1、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠血糖的影响水次给药后，大鼠断尾去血放入蛋白沉淀剂中，室温放置7min后，离心5min (3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法测全血糖。实验结果各组与模型组比较均有显著性差异，即各给药组对于降低血糖都有效果。其 中波生坦与吡咯列酮复方中组和复方高组对于DN大鼠血糖的降低与模型组比较有极显著的 差异。复方组与波生坦组比较都有显著性差异，与吡咯列酮组比较只有复方中组与复方高组 有极显著性差异。说明波生坦与吡咯列酮复方对于降低DN大鼠血糖有很好的协同作用。表1波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠血糖的影响 组别 ' n 血糖(mmol/L)空白组模型组波生坦组吡咯列酮组复方低组复方中组复方高组S 6.9 ±0.98 19.5±3.08 18.9±3.38 11.8±2.9"8 16.3±3. 1A8 10.5士4.2""8 9.3 ± 2. 0""*与投M组比较p<0.05，"与模艰组比较p<O.OL "勾波生坦组比较p<0.01.2、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠尿微量白蛋白的影响 试剂1、 10% (v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。2、 0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液(PH3.0):称取22.72g甘氨酸，用10%冰醋酸溶液稀释成1000ml，加NaN3100mg，室温密封可稳定1年。3、 溴船蓝(1.924mmol/L)贮存液精确称取257、 36mgBPB，用无水乙醇溶至200ml，4'C冰箱可稳定1年。4、 溴酚蓝(0.231mmol/L)显色剂取60mlBPB贮存液，加入2.5mlTriton X陽100'用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存1年。 标本的采集和检测于第2、 4、 6和8周将大鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜12 小时尿，准确记录尿量。取4ml，叠氮钠处理后，离心(2000r/min) 10min，取上清液置一 2(TC冰箱保存待测尿白蛋白。量取储存的大鼠尿液2ml，各加显色剂lml，混匀(防止产生 气泡)，用紫外分光光度计于600nm下测'定吸光度A。实验结果各组与模型组比较均有显著性差异，其中波生坦与吡咯列酮复方中组和复方 高组有极显著性差异，即各组对于DN大鼠的尿微量白蛋白均有影响，复方中组和复方高组 的影响更为显著。复方组分别与波生坦组和吡咯列酮组比较，结果都是复方低组无显著性差 异，复方中组和复方高组有极显著性差异。说明波生坦和吡咯列酮复方对于影响DN大鼠尿 微量白蛋白方面有协同作用。表2波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠尿微量白蛋白的影响组别 n 吸光度A(600nm)[F常组 8 0.1632±0.117模型组 8 0.6921 ±0.049波生坦组 8吡咯列酮组 8复方低组 8复方中组 8复方高组 8 A与模刑绗比较P<0. 05， "Lj模,组比较p<0. 01: *与波生坦组比较p<0.05, "4波生坦绍比较p<0.01; "与吡咯列酮组比较p<0.05;""与吡咯列酮组比较p<0.01.3、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肾脏羟脯氨酸含量的影响最后一次给药24h后处死动物，取出肾脏，然后将肾肌组织匀浆，测定其胶原蛋白(羟 脯氨酸含量测定法)含量。具体方法按试剂盒操作。实验结果各组与模型组比较均有显著性差异，其中波生坦与吡咯列酮复方中组和复方 高组有极显著性差异，即各组对于DN大鼠的羟脯氨酸含量均有影响，复方中组和复方高组 的影响更为显著。复方组分别与波生坦组比较都有显著性差异，与吡咯列酮组比较有极显著 性差异。说明波生坦和吡咯列酮复方对于影响DN大鼠羟脯氨酸含量方面有很好的协同作 用。表3波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肾脏羟脯氨酸含量的影响组别 n 羟脯氨酸含量(mg/g)空白组 8模型组 8波生坦组 8吡咯列酮组 8复方低组 8复方中组 8复方高组 8 A与模型组比较P<0. 05，"与模型组比较p<0. 01; *与波生坦组比较p<0. 05，"与波生坦组比较p<0. 01; 睡与吡咯列酮组比较P<0. 05，"与吡咯列酮组比较p<0. 01.4、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肌酐清除率的影响鼓后一次给药后留处死P 24h尿，检测尿肌酐。0.5264±0.081 0.5496 ±0.102 0,5137±0.124 0.3461 ±0.136 0.2794 ±0.1620. 535±0. 023 0.684±0. 028 0.633 ±0. 030A 0. 651±0. 013' 0. 610±0. 051 0. 581 ±0. 085 0. 553 ±0.042实验结果各组与模型组比较均有显著性差异，其中复方组与模型组比较有极显著性差 异，即各组对于DN大鼠的肌酐清除率均有影响，复方组的影响更为显著。复方组与波生坦组比较有显著性差异，与吡咯列酮组比较有极显著性差异。说明波生坦与吡咯列酮复方对于 DN大鼠肌酐清除率的影响方面有很好的协同作用。表4波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肌酐清除率的影响组别 n 肌酐清除率(ml/min)空白组80.028 ±0. 008模型组80.085±0. 032波生坦组80.069 ±0. 011吡咯列酮组80細±0. 018A复方低组80.048 ±0. 023A"复方中组80.039 ±0. 026"**翻复方高组80.031 土0.038""画A与模型组比较P<0. 05，"与模型组比较p<0. 01; *与波生坦组比较p<0. 05，"与波生坦组比较p<0. 01; ■与吡咯列酮组比较p〈0.05.另外，我们公司根据现有技术所公丌的spp301的结构式，由化学合成实验室合成出成 品后，用它与罗格列酮复方治疗糖尿病肾病，对于肾脏的保护同样取得了很好的协同效果。 即内皮素受体阻断剂与胰岛素增敏剂联合给药对于治疗糖尿病肾病有很好的效果。
权利要求
1. 一种治疗糖尿病肾病的药物组合物，其特征在于它含有胰岛素增敏剂和内皮素受体阻断剂。
2、 如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的胰岛素增敏剂是噻啤烷二酮类药物。
3、 如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于所述的噻唑烷二酮类药物是噻唑烷一2， 4 一 二酮衍生物或其可药用的盐。
4、 如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于所述的噻唑垸二酮类药物是罗格列酮、吡 咯列酮、环格列酮、恩格列酮、盐酸吡格列酮、马来酸罗格列酮或盐酸罗格列酮。
5、 如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述的噻唑烷二酮类药物中优选吡咯列酮、 盐酸吡咯列酮、马来酸罗格列酮和盐酸罗格列酮。
6、 如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的内皮素受体阻断剂为波生坦或5-甲 基-吡啶-2-磺酸[6-甲氧基-5-(2-甲氧基-苯氧基)-2- (4 —吡啶基)_4-嘧啶基]-酰胺。
7、 如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于它是胶囊剂或片剂。
8、 如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于所述的片剂是普通片、缓释片、分散片、 双层片、泡腾片或口崩片。
全文摘要
本发明提供一种治疗糖尿病肾病的新的药物组合物，它包括胰岛素增敏剂和内皮素受体阻断剂。本发明将作用机制完全不同的两种药物科学组合，达到机制互补、相互协同、提高疗效、合理用药的目的。不但在降糖方面有很好的协同作用，而且对于肾脏的保护也达到了相当好的协同效果。本发明将可能是糖尿病肾病治疗方法的新突破。
文档编号A61K31/4427GK101229373SQ20071000254
公开日2008年7月30日 申请日期2007年1月26日 优先权日2007年1月26日
发明者姚景春, 赵志全 申请人:鲁南制药集团股份有限公司