专利名称：：一种抗血小板活化因子化合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种对于血小板活化因子(PAF)具有拮抗作用的药物，特别涉及在银杏内酯B的10位上的氧原子上连接有含氮基团的化合物。技术背景银杏作为药用植物由来已久，公元1000年左右，我国民间就使用银杏叶治疗哮喘与支气管炎。随着药物提取工艺标准化和药理作用活性硏究的深入，世界各国，特别是德国、法国等欧洲国家已将银杏提取物(GB)广泛用于治疗呼吸系统、心脑血管系统等疾病。银杏内酯是存在于银杏叶及根茎中的一系列二萜类化合物，化学性质相当稳定。银杏内酯是血小板活化因子(platelet-activatingfactor,PAF)的强拮抗物，血小板活化因子是一个很强的生理调节器，在很多生理现象上扮演着重要角色，如过敏、发炎及哮喘等等，因此寻找适当的PAF对抗物来作为医疗上的使用便是医学界一个很重要的课题。银杏内酯B(GinkgolideB,GB)是从银杏叶中提取的一种六环笼状结构的二萜化合物，是迄今发现的最强的血小板活化因子(PAF)捨抗剂，它直接参与血栓形成，可刺激冠状动脉和脑动脉，引起它们的收縮、痉挛，导致心肌和脑组织缺血。银杏内酯B是一种六环笼状结构的二萜化合物，口服LD505g/kg，显示出具有高度的安全性，但银杏内酯B是刚性结构，不溶于水，生物利用度差，致使药效的充分发挥受到限制，影响临床应用效果。目前国内外己有一些关于银杏内酯B衍生物的研究(W09518131),对于改变银杏内酯B的溶解性和药效有一些研究，但均未涉及到其安全性等指标的研究，寻找到一些安全、有效、生物利用度高的衍生物将为银杏内酯B的市场化开发带来光明的前途。
发明内容技术问题本发明提供一种更安全、能够提高水溶性并有利于充分发挥药效的一种抗血小板活化因子化合物。技术方案本发明采用如下技术方案一种抗血小板活化因子化合物，在银杏内酯B的10位上的氧原子上连接有N-乙基吗啉基团，结构如下。该化合物可以和各类有机酸或无机酸成盐；该化合物的有机酸盐可以为枸橼酸盐或乙酰水杨酸盐；该化合物的无机酸盐可以为甲磺酸盐或盐酸盐；用该化合物可以制成临床需要的口服制剂或注射剂。有益效果与现有技术相比，本发明具有如下优点本发明是以银杏内酯B为母体，经结构修饰，成为银杏内酯B的含氮衍生物，合成方法步骤少，处理简单。产物在其成盐后，其水溶性、生物利用度及疗效均有提高和增强。其毒性的研究结果显示比现有文献提到的银杏内酯B衍生化合物毒性要低。本化合物具有血小板活化因子(PAF)拮抗作用，可应用于治疗和预防缺血性中风、炎症、哮喘等与PAF因子相关疾病的药品制备中。具体实施例方式实施例IIO-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B及其甲磺酸盐的制备工艺流程600mg(1.4mmol)银杏内酯B溶于40mL乙腈中，依次加入N-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐370mg(2.0mmol)，碳酸钾2.5g，碘化钾50mg，加热回流1小时，反应基本完全。冷却，过滤，滤液减压浓缩，所得固体中加入氯仿洗涤后得粗品。粗品柱层析，乙酸乙酯/石油醚(l:l)洗脱，得无色油状物，该油状物中加入适量无水乙醚，即有白色固体析出，过滤，干燥得白色固体300mg(收率40M)，即为10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B。所得固体溶于乙醇，将等摩尔量的甲磺酸的乙醇溶液滴加入，搅拌、旋干即得IO-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸盐。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B及其甲磺酸盐的合成路线:实施例210-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B乙酰水杨酸盐及制备工艺流程将300mg的(N-乙基吗啉基)银杏内酯B溶于乙醇，将等摩尔量的乙酰水杨酸的乙醇溶液滴加入，搅拌、旋干即得10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B乙酰水杨酸盐。10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B乙酰水杨酸盐的合成路线实施例3修饰前后的化合物水溶性比较将结构修饰前后化合物水溶性进行简单的对比，同样取等摩尔量的银杏内酯B、10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B、10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B盐酸盐及IO-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸盐，测定其溶解状况，结果见表l。表1修饰前后的化合物水溶性比较结果化合物银杏内酯B10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B盐酸盐IO隱O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸盐溶解性不溶不溶溶解溶解说明通过结构修饰后，银杏内酯B衍生物相应的盐的水溶性能够改变原银杏内酯B水溶性差的性状。实施例4修饰前后抗血小板聚集活性比较血小板聚集反应与体内血栓形成、动脉粥样硬化等发病机制密切相关。这类疾病是当前危害人类健康，导致死亡率最高的祸首之一。而防治血栓栓塞性疾病药物，包括①抗凝剂②抗血小板药③溶血栓剂等的药理作用均与抑制血小板聚集反应有关。家兔体外血小板聚集率测定方法新西兰白兔，雌雄不拘，用利多卡因局部麻醉，颈动脉插管放血，3.8%的枸橼酸钠1:9抗凝，以800r/min离心10min，取富血小板血浆(PRP)，剩余部分以3000r/min离心，取贫血小板血浆(PPP)，聚集诱导剂用PAF(终浓度0.37ug/ml)、。每管250^1PRP中加入不同浓度的药物10ul，对照组PRP中加入生理盐水10ul，温育5min，然后加入10ug/ml的PAFlO(il，检测定血小板lmin、5min、max聚集率，并按下述公式计算抑制率，结果见表2。计算公式对照组血小板聚集率-给药组血小板聚集率血小板聚集抑制率(％)=^/n^,一^+X100对照组血小板聚集率表2.10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B对PAF诱导家兔体外血小板聚集率的影响(Z土SZ))<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>从表2知10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B的IC50为16.26Ug/L，据文献(Physuol.Rev.2000，80:16691699和Prog.Neurobiol.2002，67:235~257)报道银杏内酯B的IC50为106ng/L，大于10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B的IC50，说明银杏内酯B通过结构修饰后的产物，药物活性也随之增加。实施例5药物毒性实验药物的毒性反应，是由于用药超过正常剂量或长期使用正常剂量而由于药物积蓄体内(如由于肾脏有病，药物的排泄减少或肝脏有病，药物在体内的分解破坏减少)而发生的反应。正常剂量无毒的药物在过量使用或积蓄到一定浓度时，即可能产生毒性反应。有些毒性大的药物，稍过量即可中毒，有些药物在治疗剂量时即有毒性反应。LD50是衡量药物毒性大小的指标，是评价药物优劣的重要参数。本试验采用改良的寇氏法测定LD50以大鼠作为受试动物，选用文献(W09518131)中化合物作对比。结果见表3。表3药物毒性实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>从表3可以看出，10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸盐口服时LD50大于5g/kg，基本上没有显示出药物毒性，具有很高的安全性，10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸注射时LD50为lg/kg，其剂量远远大于其体内的药物有效剂量，具有高度的安全性，同时也可以看出，本发明涉及的化合物的LD50在口服和注射时较其它化合物的LD50大，显示出毒性更低，具有更加安全的药理性质。实施例610-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸盐注射液的制备称取10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸盐20g，加注射用水2000ml溶解，灌装成1000支，灭菌，包装即得。肌肉、静脉注射或静脉滴注。实施例710-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸胶囊的制备称取10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B甲磺酸盐100g，加淀粉等辅料适量，混匀制成片剂1000粒即得，口服。权利要求1、一种抗血小板活化因子化合物，结构如下其特征是在银杏内酯B的10位上的氧原子上连接有N-乙基吗啉基团。2、根据权利要求1所述的一种抗血小板活化因子化合物，其特征在于该化合物和各类有机酸或无机酸成盐。3、根据权利要求2所述的一种抗血小板活化因子化合物，其特征在于该化合物的有机酸盐为枸橼酸盐或乙酰水杨酸盐。4、根据权利要求2所述的一种抗血小板活化因子化合物，其特征在于该化合物的无机酸盐为甲磺酸盐或盐酸盐。5、根据权利要求1或2所述的一种抗血小板活化因子化合物，其特征在于用该化合物制成临床需要的口服制剂或注射剂。全文摘要本发明公开了一种抗血小板活化因子化合物，该化合物在银杏内酯B的10位上的氧原子上连接有N-乙基吗啉基团。10-O-(N-乙基吗啉基)银杏内酯B分子结构式如图该化合物还可以与相应的有机酸或无机酸成盐，将这种化合物制成适宜的剂型应用于临床，本发明具有能够提高水溶性并有利于充分发挥药效降低毒性、提高安全性等优点。文档编号A61K31/5377GK101302221SQ20071002187公开日2008年11月12日申请日期2007年5月9日优先权日2007年5月9日发明者秦引林申请人:秦引林