专利名称：一种治疗心脑血管疾病的三七提取物及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药领域，涉及一种新的以三七为来源的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
三七为五加科多年生草本植物三七Ranax notoginseng(Burk)F.H.Chen的根，主产于云南、广西等地，别名参三七、田七。三七的主要活性成分是三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponins，PNS)，其块根中含皂苷约12％，目前已经从三七各部位分离出20种达玛烷型皂苷。国内外对三七总皂苷的药理作用特别是心脑血管药理作用的研究非常活跃，三七总皂苷商品名和处方名有三七总皂苷片、三七总皂苷冲剂、三七总皂苷注射液、血塞通片、血塞通胶囊、血塞通软胶囊、血塞通注射液、洛泰粉针剂、血栓通注射液、路路通注射液等。三七总甙(PNS)为中药三七的有效成分，它所含的人参皂甙单体水解后即生成人参二醇和人参三醇。人们从生药三七中提取的PNS制剂与原生药三七相比，具有质量稳定、生物利用度高、使用方便、作用迅速、毒性低和安全性好的优点。它可减低血小板表面活性、抗氧化、清除氧自由基、改善血液循环、耐缺氧，故有保护心肌、保护血管内皮、改善心功能等作用。用它治疗缺血性心脏病、高血压病、高黏血症和高脂血症等，疗效显著。
三七的提取物制剂较多，在临床上有广泛的应用，先前的三七提取物制剂受到当时技术水平的限制，普遍存在纯度低、杂质成分多、颜色较深、工艺复杂，对于注射制剂还存在着安全隐患高的问题。近年来研究人员对三七的进一步研究表明，三七总皂苷中有效成分是三醇部分，因此三七三醇的含量影响着三七提取物制剂的疗效。我们将新型强极性大孔吸附树脂技术应用到三七的提取纯化当中，很好地解决了上述问题。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种新的三七提取物，本发明的另一个目的是提供该提取物的制备方法。
为了达到上述目的，本发明采取了如下的技术手段我们提供了一种治疗心脑血管疾病的三七提取物，含有80-99.9％的三七三醇，不含有鞣制、蛋白质。
我们所述的三七提取物可以按以下步骤制备1)处方量三七粉碎成粗颗粒，加入8-15倍量65-85％乙醇提取，合并提取液过滤；2)提取液回收乙醇后加入水分散，冷藏过夜，过滤，续滤液备用；3)续滤液上预处理好的SA-1大孔吸附树脂，水冲洗后，70-85％浓度乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，烘干得三七提取物。
其中较优选的方案是提取步骤为处方量三七粗颗粒加入10倍量75％的乙醇提取三次，每次2小时。
制备工艺中所述的SA-1大孔吸附树脂为强极性含有酰胺键的苯乙烯二乙烯苯骨架功能性大孔吸附树脂，由天津市欧瑞生物科技有限公司研制开发。
较优选的树脂纯化工艺是上大孔吸附树脂吸附后，先用2倍床体积的水冲洗树脂，再用2倍床体积80％的乙醇洗脱，流速为2小时每个床体积。
我们还提供了三七提取物在制备治疗心脑血管疾病药物中的用途，可以用于制备三七总皂苷片、三七总皂苷冲剂、三七总皂苷注射液、血塞通片、血塞通胶囊、血塞通软胶囊、血塞通注射液、洛泰粉针剂、血栓通注射液、路路通注射液等。
本发明成功的制备了新的三七提取物，并且将该提取物进一步制备成三七总皂苷片、三七总皂苷冲剂、三七总皂苷注射液、血塞通片、血塞通胶囊、血塞通软胶囊、血塞通注射液、洛泰粉针剂、血栓通注射液、路路通注射液等。使用新型强极性大孔吸附树脂SA-1树脂制备的该提取物克服了以往三七提取物制剂纯度较低，颜色深，工艺复杂，尤其是用于注射制剂时因为有致敏物质导致不安全隐患高的问题。实践证明，新的丹参降香提取物用于制备三七总皂苷片、三七总皂苷冲剂、三七总皂苷注射液、血塞通片、血塞通胶囊、血塞通软胶囊、血塞通注射液、洛泰粉针剂、血栓通注射液、路路通注射液等三七提取物制剂工艺可控，质量稳定，重现性好，药理实验证明药效优于原工艺制备物。
下面用具体实施例进一步说明本发明，但是并不能用于唯一限定本发明。
具体实施例实施例1新的三七提取物的制备取1000g三七过粉碎机打成粗颗粒，加入10升70％乙醇提取三次，每次2小时，合并提取液过滤。续滤液回收乙醇后继续浓缩到相对密度1.15-1.20(40℃)(实测值1.18)，充分搅拌下加入4倍量水分散，冷藏过夜，过滤。续滤液备用上预处理好的SA-1大孔吸附树脂，流速2小时/BV，2BV水冲洗后，4BV80％浓度乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，烘干得三七提取物。
样品编号SQTQW-1实施例2三七提取物的制备取1000g三七过粉碎机打成粗颗粒，加入15升75％乙醇提取二次，每次2小时，合并提取液过滤。续滤液回收乙醇后继续浓缩到相对密度1.15-1.20(40℃)(实测值1.16)，充分搅拌下加入5倍量水分散，冷藏过夜，过滤。续滤液备用上预处理好的SA-1大孔吸附树脂，流速2小时/BV，2BV水冲洗后，3BV80％浓度乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，烘干得三七提取物。
样品编号SQTQW-2实施例3丹参降香提取物的制备取1000g三七过粉碎机打成粗颗粒，加入12升80％乙醇提取三次，每次3小时，合并提取液过滤。续滤液回收乙醇后继续浓缩到相对密度1.15-1.20(40℃)(实测值1.19)，充分搅拌下加入5倍量水分散，冷藏过夜，过滤。续滤液备用上预处理好的SA-1大孔吸附树脂，流速2小时/BV，2BV水冲洗后，3BV80％浓度乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，烘干得三七提取物。
样品编号SQTQW-3实施例4血栓通注射液的制备取实施例1制备的三七提取物SQTQW-1，加入600ml注射用水，加热条件下充分溶解，冷却后放入0-4℃冷库中冷藏过夜，取出后取上清液过滤，续滤液加入1ml土温80，补充注射用水至1100ml，加热至80℃，加入5g活性炭，保温30min，脱碳，过0.22微米微孔滤膜，灌封，灭菌，既得。
实施例5血塞通注射液的制备取实施例2制备的三七提取物SQTQW-2，加入500ml注射用水，加热条件下充分溶解，冷却后放入0-4℃冷库中冷藏过夜，取出后取上清液过滤，续滤液加入1ml土温80，补充注射用水至1000ml，加热至80℃，加入5g活性炭，保温30min，脱碳，过0.22微米微孔滤膜，灌封，灭菌，既得。
实施例6路路通注射液的制备取实施例3制备的三七提取物SQTQW-3，加入500ml注射用水，加热条件下充分溶解，冷却后放入0-4℃冷库中冷藏过夜，取出后取上清液过滤，续滤液加入1ml土温80，补充注射用水至1000ml，加热至80℃，加入5g活性炭，保温30min，脱碳，过0.22微米微孔滤膜，灌封，灭菌，既得。
实施例7本发明新的血栓解注射液体外兔血栓溶解实验实验药物本发明新的血栓解注射液。
原血栓解注射液取10ml，加入生理盐水40ml制备成丹参注射溶液。
实验动物1.0-1.5kg新西兰兔2只实验方法于兔颈静脉取血，取兔静脉血30ml于聚氯乙烯管中(自径0.34cm)，室温下让其凝固，60min后用注射器推出凝块，切成0.15cm3大小备用，共制备12块，制得全血凝块。取兔静脉血30ml，用柠檬酸钠抗凝，以800r/min离心10min，收集上层血浆及中层血小板，然后加入凝血酶，按每毫升血浆加0.1ml(10μ/ml)凝血酶的剂量，混匀后在平皿中形成凝块，切成0.15cm3的小块备用，共制备12块，制得多血小板血浆凝块。取浓度为20mg/ml(不含纤溶酶和纤溶酶原)的纯纤维蛋原溶液2ml，加2ml(10μ/ml)的凝血酶，在自径为0.5cm的小试管中形成凝块，将凝块轻轻摇出，切成0.15cm3的小块备用，共制备12块，制得纯纤维蛋白凝块。将制好的兔全血凝块、兔多血小板血浆凝块和纯纤维蛋白凝块分别投入高、低浓度的本发明新的血栓解注射液、原血栓解注射液溶液阳性对照液和生理盐水阴性对照液中(均为600μl溶液)，置37℃恒温水溶液中保温并观察其溶解情况，记录其完全溶解时间，各实验重复做3次。
实验结果见表1
表1各组血栓完全溶解的时间比较(
)
注本发明注射液血栓凝块溶解时间与原血栓解注射液对照组比较**P＜0.01实施例8利用血栓法测定本发明血塞通注射液对大白鼠血栓形成的影响实验药物本发明血塞通注射液。
原血塞通注射液。
实验动物体重300-400克的SD大白鼠40只，雌雄各半。随机分为空白对照、原血塞通注射液对照组、本发明血塞通注射液低剂量、本发明血塞通注射液高剂量四组份，每组10只。
实验方法将大鼠给药，给药剂量，本发明血塞通注射液溶液低剂量组，本发明血塞通注射液溶液高剂量组，原血塞通注射液对照组灌胃。空白对照组等容量生理盐水，灌胃溶积均为6ml/kg，每天一次，共5天。大鼠给药第5天，末次给药后1小时后，动物称重，iv 3％戊巴比妥纳1ml/kg麻醉。仰卧位固定，取颈正中切口，分离气管，分离双侧颈总A，V，在聚乙烯管中穿6cm5个0丝线，以肝素生理盐水溶液充满聚乙烯管，当聚乙烯管的一端插入左侧颈外静脉后，由聚乙烯管准确的注入肝素抗凝，再将聚乙烯管另一端插入右侧颈动脉，打开动脉夹，造成A-V旁路，开放血流15min，取出硅胶管，抽出丝线(含血栓)，按号置于已称重的小培养皿中，分析天平称取血栓湿重，总重量减去丝线重量即得血栓重量。
结果见表2
表2各给药组的血栓重量比较(x±s)
注与生理盐水对照组比较**P＜0.01与丹参注射液对照组比较ΔΔP＜0.0权利要求
1.一种治疗心脑血管疾病的三七提取物，含有80-99.9％的三七三醇，不含有鞣制、蛋白质。
2.如权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的三七提取物，是按以下步骤制备的1)处方量三七粉碎成粗颗粒，加入8-15倍量65-85％乙醇提取，合并提取液过滤；2)提取液回收乙醇后加入水分散，冷藏过夜，过滤，续滤液备用；3)续滤液上预处理好的SA-1大孔吸附树脂，水冲洗后，70-85％浓度乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，烘干得三七提取物。
3.如权利要求2所述的三七提取物的制备方法，其特征是按以下步骤制备的1)处方量三七粉碎成粗颗粒，加入8-15倍量65-85％乙醇提取，合并提取液过滤；2)提取液回收乙醇后加入水分散，冷藏过夜，过滤，续滤液备用；3)续滤液上预处理好的SA-1大孔吸附树脂，水冲洗后，70-85％浓度乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，烘干得三七提取物。
4.如权利要求3所述的三七提取物的制备方法，其特征是提取步骤为处方量三七粗颗粒加入10倍量75％的乙醇提取三次，每次2小时。
5.如权利要求4所述的三七提取物的制备方法，其特征是SA-1大孔吸附树脂为强极性含有酰胺键的苯乙烯二乙烯苯骨架功能性大孔吸附树脂。
6.如权利要求3所述的三七提取物的制备方法，其特征是第三步中上大孔吸附树脂的流速为2小时每个床体积，先用2倍床体积的水冲洗树脂，再用2倍床体积80％的乙醇洗脱。
7.如权利要求1或2所述的三七提取物在制备治疗心脑血管疾病药物中的用途，可以用于制备三七总皂苷片、三七总皂苷冲剂、三七总皂苷注射液、血塞通片、血塞通胶囊、血塞通软胶囊、血塞通注射液、洛泰粉针剂、血栓通注射液、路路通注射液。
全文摘要
一种新的三七提取物，含有80－99.9％的三七三醇，不含有鞣制、蛋白等致敏物质。可以用于制备三七总皂苷片、三七总皂苷冲剂、三七总皂苷注射液、血塞通片、血塞通胶囊、血塞通软胶囊、血塞通注射液、洛泰粉针剂、血栓通注射液、路路通注射液等三七提取物制剂。使用新型强极性大孔吸附树脂SA－1树脂制备的该提取物克服了以往三七提取物制剂纯度较低，颜色深，工艺复杂，尤其是用于注射制剂时因为有致敏物质导致不安全隐患高的问题。实践证明，新的三七提取物用于制备三七总皂苷片、三七总皂苷冲剂、三七总皂苷注射液、血塞通片、血塞通胶囊、血塞通软胶囊、血塞通注射液、洛泰粉针剂、血栓通注射液、路路通注射液等三七提取物制剂工艺可控，质量稳定，重现性好，药理实验证明药效优于原工艺制备物。
文档编号A61P9/10GK101081242SQ200710026318
公开日2007年12月5日 申请日期2007年1月16日 优先权日2007年1月16日
发明者陈文展 申请人:陈文展