专利名称：：地钱挥发油及制剂的制法和在制备抗癌药中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明属中药领域，具体地说是涉及一种以中药材为原料而提取的药物活性成分及其制剂的制备方法和在制备抗癌药中的应用。二
背景技术：
：地钱目(Marchantiaceae)植物是民间常用传统中草药，在广西、贵州、云南等高寒山区常用来治疗烫伤、烧伤、蛇虫咬伤、肝炎等疾病[1-3]。广西壮族自治区有大量野生地钱资源，主要有地钱(Marchantiapolymorpha)，拳巻地钱(Marchantiaconvoluta)和粗裂地钱(Marchantiapaleacea)等，其中拳巻地钱是中国特有品种[4]。这些植物由于混生而难于区别分离，民间应用多为混合品。地钱(Marchantiapolymorpha)是地钱目的代表植物,是具有叶状体的苔类植物中形态构造最复杂,进化比较高等的种类;是苔藓植物中最常见的草药之一。我国古代就对地钱有了一定的研究和记载，如地钱属植物的药用始载于《名医别录》，明代李时珍《本草纲目》中谓之"石衣"，味淡，性凉,归肝经，有清热利湿,解毒敛疮,清心明目之功效。但由于地钱植物形体微小、缺乏直接的经济价值、不易识别、抵抗环境污染的能力较差而远离大都市、与其实用相关的学科发展速度缓慢。国外学者对日本、德国、南非和印度的地钱属植物地钱(Marchantiapolymorpha)[5-14]，表明其含有黄酮类化合物、联节类、双联节类化合物、菲类和薛类化合物，而很少涉及到中国出产的地钱，更别提对中国出产地钱的开发。尽管国内外对地钱属植物的化学成分的研究取得了不少进展,但对我国的传统草药地钱有效成分的提取、分离和结构鉴定是一个空白。申请者对中国出产的地钱(Marchantiapolymorpha)和中国特有品种拳巻地钱(Marchantiaconvoluta)的化学成分和生物活性进行了广泛研究[15-33]。目前国内尚无有关地钱的中成药成品，就连地钱原药材使用也很少。而广西、贵州、云南等地有大量野生地钱植物资源,特别是广西大明山地区野生地钱植物资源极其丰富,要利用好这些植物资源，迫切需要广大学者在地钱的植物化学、分离提取、药理药效和临床等方面进行广泛的研究,以充分发挥我国的地钱资源优势，开发地钱新药,造福人类。I]XiaoJ,etal.Ato匿/Wm"ic&D，2005,17(4):463-4642]朱华，周春山，黄海滨，王孝勋。广西植物，2003,23(5):571-573.3]江苏植物研究所.新华本草纲目.上海科学技术出版社，1990。4]CYTian，JQWu,SXLiu,RLHu(1999)17:149-152.5]YAsakawa.尸/^oc/z,勿2001;56:297-312.:6]AMatsuo,NNakayama，MNakayama.尸一oc/z膽勿1985;24:777-781■7]YAsakawa，MTori,TMasuya，etal.iVy^oc/ze/m'Wo;1990;29:1577-1584.8]YAsakawa,KOkada,GWPerold.尸/z声/zeTO勿1988;27:16卜163.:9]YAsakawMTori,KTakikawa，etal.P/^toc/ze/m/W71987;26:1811-1816.10]ARieck，NBillow,CFricke,etal.P/zj;/oc/eTO曙Wo;1997;45:195-197.II]KRMarkham，LJPorter.尸一oc/z画勿1974;13:1937-1942.12]KRMarkham,KGRyan,SJBloor,KAMitchell.尸/9/toc/ze附/Wy1998;48:791-794.13]KPAdam,HBecker,i^ytoc/ze/w/s^y1994;35:139-143.14]MSaruwatari,STakio，KOno.尸/^toc/emh71999;52:367-372.15]JBXiao,JWChen,FLRen，CSYang,MXu.^ra/.CTn'w./4cto,2007,589，186-19116]JBXiao,JWChen,MXu.￡/ecfro"./5Zofec/z"o/.，2007，10(1):317]JBXiao,XQChen,YWZhang,MXu.Sraz.>/Med及'o/.,2006,39(6):731-73818]HuiCao，JBXiao,MXu,>/FoodCompos.」wa/.，2007，20(1):45-5119]JBXiao,FLRen，MXu.P/2ot"附ace^Zffied2006,3(1):310-313■20]JBXiao，FLRen，MXu./ra"./f/ar亂77era/peW.，2005，4(2):128-13121]JBXiao,XYJiang,XQChen.j#TradC4M，2005,2(3):244-25222]XChen,JXiao.浙TradC载2006,3(3):32-36■23]XiaoJ"etal.Atowre尸to血c;2005,17(2):186-190■24]XiaoJ"etal.AtoweicfeA2005，17(1):38-4125]曹慧，肖建波，周春山，张懿伟.质谱学报，2005,26(1):卜526]曹慧，肖建波，蒋新宇.广西植物，2005,25(6):596-59727]朱华，邹登峰，肖建波，等.食品科学，2005,26(10):156-15928]曹慧，肖建波，周春山，等.中南药学,2005，3(1):7-929]朱华，肖建波，周春山，等.地钱总黄酮的提取研究.林产化学与工业，2004,24(2):69-7230]肖建波，朱华，钟世安，等.反相高效液相色谱法用于地钱中黄酮类化合物的分离与测定.分析试验室，2005，23(3):17-19[31]肖建波，曹慧，周春山.中药新药与临床药理.2005，16(3):33-37[32]朱华，肖建波，周春山，等.中医药学刊，2005，.23(1):.20-22[33]朱华，肖建波，等.光谱实验室，2004，21(2):373-37
发明内容癌症是严重威胁人类生命的恶性疾病，寻找疗效好、毒副作用小、不产生交叉耐药性的新型有效药物一直是世界各国的研究热点。从天然植物中筛选优良抗癌活性成分或部位，并以此制成新型抗癌中成药，是具有重要研究价值、富有挑战性的课题，结合现代医学的观点和手段,在中草药资源宝库中寻找和开发具有我国自主知识产权的新药不仅对促进人类的健康，而且对推进我国民族医药工业的发展和中药现代化具有十分重要的意义。在此指导思想下，我们以传统清热解毒药中药材地钱为原药材，以其有效部位地钱挥发油为研究对象，系统研究了地钱挥发油及制剂的制法和在制备抗癌药中的应用。1、发明目的本发明目的是提供地钱挥发油及制剂的几种制备方法，以及在制备抗癌药中的应用。实际上本发明涉及地钱中活性成分作为制备治疗或预防癌症药物的应用。同时地钱中具有治疗或预防癌症的活性成分是地钱挥发油，其可用于制成具有治疗或预防癌症作用的单方或复方药物。2、技术方案<1>挥发油提取常采用水蒸气蒸馏法、溶剂提取法、超临界萃取法等方法，其中水蒸气蒸馏法具有操作方便、成本低廉、无污染、适用于大生产等特点，故本发明采用水蒸气蒸馏法提取挥发油。一种地钱挥发油，其特征是地钱80-120克，加水8-12倍量，水蒸气蒸馏而得到的提取物。一种地钱挥发油的提取方法，其特征是由下列步骤提取(1)称取地钱全草地钱80-120克，加水8-12倍量，水蒸气蒸馏2-8小时；(2)用油水分离器分离得含水地钱挥发油；(3)在-915。C下冰冻636小时，去冰除水，得地钱挥发油。<2>法多索提取法也叫环保冷媒萃取法，是一种室温低压液化提取技术。这种方法主要是使用一系列新型的在室温低压下易液化的溶剂，Phytosols,如1，1,1，2-四氟乙烷等。这种溶剂的特性就是可以在室温或低于室温的状态下萃取出植物中的易挥发性精油，这样可以确保植物挥发性精油中一些较脆弱，容易受热所破坏的成分得以完整的被萃取出来。本发明提出使用法多索提取法提取植物挥发性油。一种地钱挥发油，其特征是地钱10-150克，通过加压液化加法多索溶剂6-10倍量，室温低压提取而得到的提取物。一种地钱挥发油的提取方法，其特征是由下列步骤提取(1)称取地钱全草地钱10-150克，投入法多索提取器中，通过加压液化加入法多索溶剂(如l,l，l,2-四氟乙烷等)10-14倍量，室温低压提取6-12小时;(2)滤膜过滤后，常压回收法多索溶剂，得地钱挥发油。<3>—种地钱挥发油制剂，其特征在于加入制备不同剂型的各种辅料于地钱挥发油中，以专门的制剂工艺可制成胶囊剂、丸剂、注射剂及其他各种剂型。一种硬胶囊剂的制备方法，其制备步骤为(1)取l-2g的地钱挥发油，加6-12倍量的(3-环糊精和18-22倍p-环糊精的蒸馏水，在25-40。C条件下用分散机高速分散10-60分钟，进行药液包结；(2)将包结后药液用喷雾干燥法去除黏附的挥发油，喷雾干燥的进风温度为140-180。C，出风温度为60-80。C;(3)将包结物喷干成粉末，加适当的95%乙醇，进行干式制粒，罐装胶囊。一种软胶囊剂的制备方法，其制备步骤为(1)取l-2g的地钱挥发油，加30-40g的聚乙二醇-400和l-4g的甘油，在25-40。C条件下用搅拌机搅拌30-60分钟，进行药液分散；(2)将分散后的药液压制成软胶囊；(3)将压制后的软胶囊用60-90%的乙醇洗粒，20-40。C烘干24-48小时，即得。一种喷雾剂的制备方法，其制备步骤为(1)取l-2g的地钱挥发油，力口30-40%的乙醇及10%-30%的聚乙二醇，分散成溶液状；(2)加水200-400ml,分装成喷雾剂。以地钱挥发油为原料，可将其开发成各种制剂，如胶囊剂、喷雾剂、注射剂等，亦可将其开发成其它剂型。地钱挥发油在制备抗癌药中的应用。以下结合地钱挥发油的药效学试验，进一步说明本发明的有益效果。使用人小细胞肺癌细胞株H1299和人肝癌细胞株HepG2,在细胞水平上完成了地钱挥发油的抗癌药效试验工作，证明其对肺癌细胞有一定的抑制作用,对肝癌细胞有明显的抑制效果(见表1和表2)。表l地钱挥发油对H12"细胞生长的影响(x±7，n=5)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2地钱挥发油对HepG2细胞生长的影响(x±s，n=5)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>(注地钱挥发油处理细胞24h后，测定细胞活性，结果以细胞生长抑制率表示，与对照组相比,P<0.01。)具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步描述。实施例1(提取地钱挥发油)取地钱全草干燥品100g,粉碎成粗粉，加入1000mL水煮沸，蒸馏2小时，冷却回收芳香水，芳香水静置24小时，用油水分离器分离上层挥发油，得地钱挥发油。实施例2(提取地钱挥发油)取地钱全草干燥品10g,粉碎成粗粉，投入法多索提取器中，加入法多索溶剂1，1,1,2-四氟乙烷100ml,室温低压提取8小时，滤膜过滤后，得地钱挥发油。实施例3(软胶囊)按上述实施例l或2制备地钱挥发油后取出2克，其中地钱挥发油含量50%，加40g的聚乙二醇-400和4g的甘油，在30。C条件下用搅拌机搅拌30分钟，进行药液分散，压制成软胶囊，软胶囊用60-90%的乙醇洗粒，20。C烘干48小时，即得。实施例4:(硬胶囊)按上述实施例l或2制备地钱挥发油后取出2克，其中地钱挥发油含量为70%,加20gp-环糊精和40g蒸馏水，在40。C条件下用分散机高速分散20分钟，喷雾干燥法去除黏附的挥发油，喷雾干燥的进风温度为150°C,出风温度为60。C，将包结物喷干成粉末，加适当的95%乙醇100ml,进行干式制粒，得硬胶攀。实施例5:(喷雾剂)按上述实施例1或2制备地钱挥发油后取出1克，加100ml95。/。乙醇和20g聚乙二醇，分散均匀后，加水400ml，分装成喷雾剂。权利要求1、一种地钱挥发油，其特征是地钱80-120克，加水8-12倍量，水蒸气蒸馏而得到的提取物。2、一种地钱挥发油，其特征是地钱10-150克，通过加压液化加法多索溶剂6-10倍量，室温低压提取而得到的提取物。3、根据权利要求l所述的地钱挥发油，其特征是由下列步骤提取(1)称取地钱全草地钱80-120克，加水8-12倍量，水蒸气蒸馏2-8小时；(2)用油水分离器分离得含水地钱挥发油；(3)在-915。C下冰冻636小时，去冰除水，得地钱挥发油。4、根据权利要求2所述的地钱挥发油，其特征是由下列步骤提取(1)称取地钱全草地钱10-150克，通过加压液化加入法多索溶剂(如l，l，l,2-四氟乙烷等)10-14倍量，室温低压提取6-12小时；(2)滤膜过滤后，常压回收法多索溶剂，得地钱挥发油。5、一种地钱挥发油制剂，其特征在于加入制备不同剂型的各种辅料于权利要求l-2所述的地钱挥发油中，以专门的制剂工艺可制成胶囊剂、丸剂、注射剂及其他各种剂型。6、地钱挥发油在制备抗癌药中的应用。全文摘要本发明公开了一种地钱挥发油及其制剂的制备方法和药效学作用。以地钱全草为原料，加入水，蒸馏，分离得含水地钱挥发油，或将地钱全草投入法多索提取器中，加入法多索溶剂提取，过滤，得地钱挥发油。再以地钱挥发油为活性物质，加入不同剂型的辅料，可制成各种剂型，为胶囊剂、喷雾剂。地钱挥发油及其制剂具有较好的抗癌、防癌作用。文档编号A61P35/00GK101336941SQ20071003527公开日2009年1月7日申请日期2007年7月4日优先权日2007年7月4日发明者明徐,徐晓萌,肖建波申请人:徐明;肖建波;徐晓萌