专利名称：：一种红曲制品及其在制备降血压药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种红曲发酵产物及其用途，尤其涉及-种红曲制品及其在制备降血压药物中的应用。
背景技术：
：红曲产品在我过已有上千年的历史。"金元四大医家"之一朱丹溪先生在《本草衍义补遗》中记载了红曲甘、温、无毒。主治消食活血，健脾暖胃，治赤白痢、下水谷、陈久者良。1979年日本农业大学远滕章教授根据朱丹溪先生的中医理论记载对红曲具有活血功效的启示，研究发现利用红曲发酵后的产品对人体具有降血脂、降血压、降血糖的功效；这引起了全世界医学界的极大兴趣和关注。近年来美国、日本、英国、泰国、韩国、比利时、法国、捷克和台湾等国家和地区对红曲的研究方兴未艾。经现代医学研究表明，红曲的降血脂作用主要是洛伐它汀(Lovastation)降血压的主要成分为Y_氨基丁酸(简称GABA)(Y—aminobutyricacid)及Glucosamine。除此以外，红曲的发酵产物还有许多其它功能。如降低胆固醇，降血糖，抗菌防腐，治疗血胺症，防止骨质疏松，预防老年痴呆症，动脉粥样硬化引起的冠心病极其它心血管疾病等等，因此，红曲的研究前景十分广阔Y—氨基丁酸是由麸酸脱羧而成的一种天然非蛋白质，存在于哺乳动物的大脑、脊髓中的抑制性神经传递物质，对交感神经具有调节作用，因此作为红曲酶的代谢产物有着降血压的作用；自古以来，红曲菌由于其含有Y—氨基丁酸(GABA)，常常被人们制成各种食品来起到降血压保健作用，1987年Kohama等人从红曲中分离出GABA及乙酰胆碱具有降血压之功效，现有技术中主要用红曲菌来生产红曲酒或红曲醋，在生产红曲酒或红曲醋过程中产生的大量酒糟只能作为饲料，附加值极低。
发明内容本发明的目的在于提供一种红曲制品，该红曲制品以红曲酒糟为原料，通过再次发酵制成，该红曲制品不仅含有较高含量的Y—氨基丁酸，而且提高了本发明的上述技术问题是通过以下技术方案来实施的一种红曲制品，其特征在于该红曲制品由下述方法制备而成，采用早籼米和红曲霉菌种发酵制成红曲，取红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀，发酵40200小时，烘干，粉碎后消毒杀菌制成红曲制品，其中红曲酒糟、米皮、红曲之间的重量比为1.02.0:0.51.5:0.080.15;其中上述三种原料和水的重量比为跳75150。在上述的红曲制品中，所述的红曲霉菌种为红色红曲霉菌株丹溪一l号、红曲霉菌株丹溪一3号中的一种。红色红曲霉菌株丹溪一l号于2005年06月10日在中国微生物菌种保藏管理委员会保藏，保藏编号CGMCCNo.1405;本发明人已经单独申请专利，申请号为200510061479.0;红曲霉菌株丹溪一3号于2005年06月10日在中国微生物菌种保藏管理委员会保藏，保藏编号CGMCCNo.1407;本发明人已经单独申请专利，申请号为200510061481.8。采用红色红曲霉菌株丹溪一l号进行发酵，产品的Y—氨基丁酸含量能够达到8000mg/kg以上，采用红曲霉菌株丹溪一3号进行发酵，产品的Y—氨基丁酸含量能够达到4000mg/kg以上，因此，作为优选，本发明采用的红曲霉菌种为红色红曲霉菌株丹溪一l号。水分含量的多少涉及到底物的浓度和红曲的浓度，一般来讲，当红曲酶的浓度一定时，底物浓度决定着红曲酶反应的速度，随着底物的浓度增加而增加，当底物浓度达到一定值之后，反应速度就不会再增加，这时底物的浓度几乎与反应速度无关。而当底物浓度充足时，如果其它条件不变，则酶反应速度在一定范围内是随着酶浓度的增加而增加；本发明制成功能性红曲制品的原料是生产红曲酒的附料一红曲酒糟，红曲酒糟中含有吡咯羧酸一麸酸的酸酐，红曲霉菌种产GABA能力强，米皮中含有活性较强的GAD，二者共同作用于红曲酒糟，使其经过二次发酵，提高了GABA的含量。本发明将红曲酒糟、米皮、红曲之间的重量比控制为L02.0:0.51.5:0.08~0.15;其中上述三种原料和水的重量比控制为100:75150;在一定的温度和PH值条件下，可以使产品的Y一氨基丁酸含量达到4000rag/kg以上。在上述的红曲制品中，所述的红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀后发酵时的温度为3(TC5(TC，发酵时的PH值为46。Y—氨基丁酸是麸酸经谷氨酸脱羧酶(GAD)脱羧形成的代谢产物，任何一种酶对于温度都相当敏感，GAD当然也不例外。温度低则酶的催化作用就小，温度升高则酶解速度就加快，但因为酶是一蛋白质，绝大多数酶在60。C时就会变性而失活。将本发明发酵时的温度控制在3(TC5(TC，酶的催化作用最大，活力最强，酶促反应最快，最后产品的Y—氨基丁酸含量可达到4000mg/kg以上；酒糟中的麸酸以它的酸酐一一吡咯羧酸的形式存在的。在酸性条件下它易水解成麸酸，吡咯羧酸的水解是在酸性条件下进行的，因此在红曲酒糟的二次发酵过程中控制PH值就显得异常重要。这是其一；其二麸酸转化成GABA是通过GAD的催化而进行的，而[H+]对酶的影响很大，酶对PH值和对温度一样，也相当敏感，同一种酶在不同PH值的条件下其活力是不同的。只有在最适PH条件下才会显示其最强的活力，在吡咯羧酸与麸酸动态平衡条件下，GAD将麸酸脱羧生成GABA后，这种动态平衡就被打破，GABA生成后，麸酸的浓度就减小了。因此，水解反应就不断向生成麸酸的方向进行。GABA的生成速度在同一温度下取决于溶液中的PH值是多少，将本发明的PH值控制在为46范围内GABA生成速度快，最终产品中GABA的含量可达到4000mg/kg以上，PH值太高或太低都会影响得率。作为优选，所述的红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀后发酵时间为100150小时。红曲酒糟的发酵时间对GABA的得率有一定的影响，在发酵过程中GAD将麸酸脱羧生成GABA，随着时间的增加而增加，但并不是无止境的。其一是随着底物浓度的减少，在单位时间里GABA的生成量将会逐步减少，最后停止。其二是红曲霉菌中的脱氨酶在一定的条件下会使GABA脱氨生成丁烯酸，其三，氨基酸脱羧酶在一定的条件下也会催化相应的氨基酸脱羧而生成相应的胺，形成尸碱，一元氨基酸脱羧生成一元胺，二元氨基酸脱羧生成二元胺，GABA是一元氨基酸，其脱羧后生成丙胺，红曲酒糟发酵到一定时间后，GABA的含量有下降的趋势，因此，掌握发酵时间对GABA的得率相当重要，不然既浪费能源，又减产减收，得不偿失。而本发明将发酵时间控制100150小时为最佳发酵时间，在一定的温度和ra值控制条件下，最终得到的红曲制品产品中GABA含量可达到4000mg/kg以上。本发明的另一个目的在于提供该红曲制品在制备降血压药物中的应用，该红曲制品中含有较高含量的GABA，人体的神经元细胞上有GABAa和GABAb两种受体，其中GABAa受体接收GABA刺激后会抑制肾上腺素分泌儿萘酚胺，从而减弱交感神经的作用使血压降低，此外GABA还具有活化肾功能的功能来促进血压降低；由于普通的蔬菜、水果中的GABA含量甚微，因此无法用于制备降血压药物。在上述的的应用过程中，所述的红曲制品中Y—氨基丁酸的含量为400010000毫克/千克。在上述的的应用过程中，所述的红曲制品为胶囊剂型，本发明的红曲制品填于胶囊中就形成红曲胶囊，采用红曲胶囊不仅易于服用，而且携带方便。在上述的的应用过程中，所述的红曲制品为丸剂，本发明的红曲制品通过加入2%6%的明胶或豆胶后，在药丸机中成型为红曲丸剂。纵上所述本发明的红曲制品具有以下优点-1、本发明利用Y—氨基丁酸较低的红曲酒糟制成Y—氨基丁酸含量较高的红曲制品，提高了红曲酒糟的附加值；2、本发明的红曲制品不仅对治疗和预防高血压可以取得意想不到的效果，而且具有辅助降血压功能，记载动物实验结果如下1材料和方法1.1实验动物和检测条件实验用自发高血压大鼠(S服)，雄性，清洁级，周龄10-12周，体重180—220克；实验用SD大鼠，雄性，清洁级，体重180—220克，均由中科院上海实验动物中心提供，实验动物生产许可证号为SCXK(沪)2002-0010。实验动物使用许可证号SYXK(浙)2005-0059。动物饲料由浙江省实验动物中心提供，执行标准GB14924-2001。检测环境条件，温度范围20-23°C，相对湿度范围40-70%。大鼠试验前在动物房环境中适应7天。1.2方法1.2.1剂量设计和配制实验分自发高血压大鼠(SHR)和正常SD大鼠试验，S服大鼠设低、中、高三个剂量组，分别为5、10和30mg/kg体重，相当于人推荐量的5倍、10倍、30倍(人推荐量为60mg/日)，另设一个阴性对照组(H20)。正常大鼠设受试样品高剂量组和阴性对照组(H20)。灌胃给样品，灌胃容量按100mg/100g体重计。1.2.2实验方法实验前一周对受试动物采用尾脉搏法进行多次血压测量，使其适应测压环境。根据自发高血压大鼠的基础血压值随机分为3个剂量组和一个阴性对照组和溶剂对照组，每组10只；根据正常SD大鼠的基础血压值随机分为30mg/kg体重剂量组和一个阴性对照组，每组10只，剂量组每天给予不同量受试物，阴性对照组给予水，经口给予4周，每周测量血压、心率和称体重1次。1.3实验数据统计采用SPSS/PC11.5软件包进行分析。2.结果2.1红曲制品对自发高血压大鼠体重的影响表1.红曲制品对自发高血压大鼠体重的影响(龙i5"Amg)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>在整个试验过程中，各组动物生长良好，活动正常。结果见表1，原始数据符合方差齐性要求(尸,ft05)，试验各观察期各剂量组体重和阴性对照组0120)比较差异均无显著性(方差，"ft^)。2。2红曲制品对自发高血压大鼠血压的影响表2.红曲制品对自发高血压大鼠血压的影响(f±5%誦Hg)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>阴性对照(H20)10201.3±9.2205.6±10.1201.4±9.8201.8±11.0201.1±10.3510201.7±1().4201.2±9.2199.7±8.9195.3±9.0200.6±8.71010201.4±9.6201.5±9.2196.6±9.9192.6±7.4188.3±8.8;3010201.9±10.()199.3±10.1191.7±9.0180.9±9.7*A167.0±8.3*A,0.0040.5821.9557.94125.133p1.0000.6770.1180.0000.000。維.与微詹鋭饿#缀^;絲舰微仏熟A/YftM结果见表2，原始数据符合方差齐性要求(户>"05")，与阴性对照组0120)比较，第3周高剂量组的血压低于阴性对照组，差异均有显著性(g澄验，尸".第4周中、高剂量组的血压均明显低于阴性对照组，差异均有显著性(G^t验,，.粉。2.3红曲制品对自发高血压大鼠心率的影响表3.红曲制品对自发高血压大鼠心率的影响(fi幼，次/分)组别鼠数试验前第l周第2周第3周第4周(mg/kg)(只)阴性对照(貼)10417.3±32.1417.9±18.3416.0±29.1415.2±20.0415.1±25.4510419.5±36.6419.3±29.6414.9±31.9415.3±20.8415.1±18.91010426.1±36.0418.8±29.3417.2±26.7414.4±20.9415.9±26.43010416.2±12.6418.2±21.3418.5±20.8417.1±22.8415.6±26.80.0180.0080.0120.0950.009<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>结果见表3，原始数据符合方差齐性要求(/^fttt)，试验各观察期各剂量组自发高血压大鼠心率和阴性对照组(H20)相比差异均无显著性(；^差分桥，亂2.4红曲制品对正常SD大鼠体重的影响表4.红曲制品对正常SD大鼠体重的影响(fi5^，mg)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>在整个试验过程中，动物生长良好，活动正常。结果见表4，原始数据符合方差齐性要求(尸,ft0^),试验各观察期30mg/kg剂量组大鼠体重和阴性对照组0120)比较差异均无显著性(t检验，尸,ft^^)。2.5红曲制品对正常SD大鼠血压的影响表5.红曲制品对正常SD大鼠血压的影响(f土5P，mmHg)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>3010130.0±9.1130.0±8.7130.7±7.8130.4±9.2129.8±10.1t0.1510.2100.019—0.2480.0090.8820.8360.9850.8070.993结果见表5，原始数据符合方差齐性要求(尸,ft05),试验各观察期30mg/kg体重剂量组大鼠血压和阴性对照组(H2〔))比较差异均无显著性(t^^發，/^ft05)。2.6红曲制品对正常SD大鼠心率的影响表6.红曲制品对正常SD大鼠心率的影响(i"i讽次/分)组别鼠数试验前第1周第2周第3周第4周(mg/kg)(只)阴性对照(H20)10376.7±22.8375.6±21.0374.3±18.0380.8±14.1378.1±14.03010378.5±19.5377.6±20.9375.6±19.1379.5±15.1377.8±16.2f-0,189-0.214-0.1570.1980.044p0.8520.8330.8770.8450.965结果见表6，原始数据符合方差齐性要求(P>d),试验各观察期30mg/kg体重剂量组大鼠心率和阴性对照组(H20)比较差异均无显著性(t检验，P〉O.M)。具体实施方式下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步具体的说明；但本发明并不局限于这些实施例制造例1取丹溪一l号(红色红曲霉菌株丹溪一l号)菌种，在无菌条件下(无菌室或超净工作台)，用接种挑取少许菌种，转接于已灭菌的固体麦芽糖琼脂培养基培养皿中，置于培养箱内25"C土rC活化培养96小时。取出活化96小时的菌种，在无菌条件下，以同样方式接入活化好的菌种到以灭菌的一级固体麦芽糖琼脂培养基中，在25t:土rC培养96小时，即为丹溪一l号一级种子。采用500毫升玻璃三角瓶，装入配制好的液体麦芽糖培养基100毫升，15磅灭菌30分钟备用。取丹溪一l号一级种子，在无菌条件下，接种于装有IOO毫升液体麦芽糖培养基500毫升玻璃三角瓶中，一级种子接种量为每个培养皿接五个三角瓶，至25t:土rC摇床培养96小时后，作为红曲发酵二级种子液。制造例2取丹溪一3号(红曲霉菌株丹溪一3号)菌种，在无菌条件下(无菌室或超净工作台)，用接种挑取少许菌种，转接于已灭菌的固体麦芽糖琼脂培养基培养皿中，置于培养箱内25t:土rC活化培养168小时。取出活化168小时的菌种，在无菌条件下，以同样方式接入活化好的菌种到以灭菌的一级固体麦芽糖琼脂培养基中，在25'C土rC培养168小时，即为丹溪一3号一级种子。采用500毫升玻璃三角瓶，装入配制好的液体麦芽糖培养基100毫升，15磅灭菌30分钟备用。取丹溪一3号--级种子，在无菌条件下，接种于装有100毫升液体麦芽糖培养基500毫升玻璃三角瓶中，一级种子接种量为每个培养皿接五个三角瓶，至25t:土rC摇床培养168小时后，作为红曲发酵二级种子液。实施例1采用早籼米制造例2和制造例3中作为二级种子液的丹溪1号菌种和丹溪3号菌种7重量份，发酵5天后，晾千成红曲，取辣寥草5重量份榨成汁，取汁浸泡小麦3—10重量份，再发酵10—20天成曲，取糯米100重量份煮熟，加入红曲和辣蓼草做成的曲，先初发酵，再发酵2个月，然后压搾得到红曲酒糟和罐装得到红曲酒；取早籼米加水润料蒸熟，接着将上述制造例l中作为二级种子液的丹溪1号加入到早籼米饭中搅拌均匀发酵5天制成红曲，将上述的红曲晾干备用；取红曲酒糟、米皮加入红曲，然后加入水混匀，，在温度为4(TC，PH值为5.0的条件下发酵80小时在温度为4(TC的条件下烘干，然后粉碎后过100目的筛，得到颗粒的粒径为100目，经杀毒灭菌后填充于规格为0.18克/粒的胶囊中制成红曲胶囊；经检测本发明的红曲胶囊中Y—氨基丁酸的含量为400010000毫克/千克；其中上述红曲酒糟、米皮和红曲的重量比为2.0:1.0:0.11;述三种原料和水的重量比为100:150。实施例2红曲酒糟的制备过程同实施例1，将不再赘述；取早籼米加水润料蒸熟，接着将上述制造例1中作为二级种子液的丹溪1号加入到早籼米饭中搅拌均匀发酵5天制成红曲，将上述的红曲晾千备用；取红曲酒糟、米皮加入红曲，然后加入水混匀，，在温度为50°C，PH值为4.0的条件下发酵60小时在温度为4CTC的条件下烘干，然后粉碎后过100目的筛，得到颗粒的粒径为100目，经杀毒灭菌后填充于规格为0.18克/粒的胶囊中制成红曲胶囊；经检测本发明的红曲胶囊中Y—氨基丁酸的含量为400010000毫克/千克；其中上述红曲酒糟、米皮和红曲的重量比为1.5:0.7:0.10;述三种原料和水的重量比为100:130。实施例3红曲酒糟的制备过程同实施例1，将不再赘述；取早籼米加水润料蒸熟，接着将上述制造例2中作为二级种子液的丹溪3号加入到早籼米饭中搅拌均匀发酵5天制成红曲，将上述的红曲晾干备用；取红曲酒糟、米皮加入红曲，然后加入水混匀，，在温度为30°C，PH值为6.0的条件下发酵100小时在温度为4(TC的条件下烘干，然后粉碎后过100目的筛，得到颗粒的粒径为100目，经杀毒灭菌后填充于规格为0.18克/粒的胶囊中制成红曲胶囊；经检测本发明的红曲胶囊中Y—氨基丁酸的含量为400010000毫克/千克；其中上述红曲酒糟、米皮和红曲的重量比为1.0:1.2:0.08;述三种原料和水的重量比为100:100。实施例4红曲酒糟的制备过程同实施例1，将不再赘述；取早籼米加水润料蒸熟，接着将上述制造例1中作为二级种子液的丹溪1号加入早籼米饭中搅拌均匀发酵天制成红曲，将上述的红曲晾干备用；取红曲酒糟、米皮加入红曲，然后加入水混匀，，在温度为50°C，TO值为4.0的条件下发酵60小时在温度为40°C的条件下烘干，然后粉碎后过100目的筛，得到颗粒的粒径为100目，经杀毒灭菌后加入2%6%的明胶在药丸机(常州市金坛蓝星机械厂制造)中压延成型后形成红曲丸剂；经检测本发明的红曲丸剂中Y—氨基丁酸的含量为400010000毫克/千克;其中上述红曲酒糟、米皮和红曲的重量比为1.5:0.7:0.10;述三种原料和水的重量比为100:130。本发明红曲胶囊/红曲丸剂的服用方法为空腹，每天6粒。本发明红曲胶囊的理化指标及微生物指标如下水分《10.0%细菌总数《8000个/g杂质《0.1%霉菌数《100个/g崩解时限《30分钟大肠菌群《30个/100g本发明中所描述的具体实施例仅仅是对本发明作举例说明。本发明所属
技术领域：
的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明说明书或者超越所附权利要求书所定义的范围。尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实例，但是对本领域熟练技术人员来说，只要不离开本发明的范围可作各种变化或修正是显然的。权利要求1、一种红曲制品，其特征在于该红曲制品由下述方法制备而成，采用早籼米和红曲霉菌种发酵制成红曲，取红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀，发酵40～200小时，烘干，粉碎后消毒杀菌制成红曲制品，其中红曲酒糟、米皮、红曲之间的重量比为1.0～2.0∶0.5～1.5∶0.08～0.15；其中上述三种原料和水的重量比为100∶75～150。2、根据权利要求l所述的红曲制品，所述的红曲霉菌种为红色红曲霉菌株丹溪一1号、红曲霉菌株丹溪一3号中的一种。3、根据权利要求1或2所述的红曲制品，其特征在于所述的红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀后发酵时的温度控制为3(TC5(rC，发酵时的PH值控制为46。4、根据权利要求1或2所述的红曲制品，其特征在于所述的红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀后发酵时间为100150小时。5、根据权利要求3所述的红曲制品，其特征在于所述的红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀后发酵时间为100150小时。6、一种如权利要求1所述的红曲制品在制备降血压药物中的应用。7、根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述的红曲制品中Y—氨基丁酸的含量为400010000毫克/千克。8、根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于所述的红曲制品为胶囊剂型。9、根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于所述的红曲制品为丸剂。全文摘要本发明涉及一种红曲制品及其在制备降血压药物中的应用；该红曲制品由下述方法制备而成，采用早籼米和红曲霉菌种发酵制成红曲，取红曲酒糟加入红曲、米皮后，然后加入水混匀，发酵40～200小时，烘干，粉碎后消毒杀菌制成红曲制品，其中红曲酒糟、米皮、红曲之间的重量比为1.0～2.0∶0.5～1.5∶0.08～0.15；其中上述三种原料和水的重量比为100∶75～150。本发明利用γ-氨基丁酸较低的红曲酒糟制成γ-氨基丁酸含量较高的红曲制品，提高了红曲酒糟的附加值；该红曲制品不仅对治疗和预防高血压可以取得意想不到的效果，而且具有辅助降血压功能。文档编号A61P9/12GK101333500SQ20071006971公开日2008年12月31日申请日期2007年6月25日优先权日2007年6月25日发明者朱丹华,朱兰琴,朱睦元,薛临生,铭陈,陈继承,陈豪锋申请人:义乌市丹溪酒业有限公司