专利名称：检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法
背景技术：
本发明涉及一种用于诊断病因检测方法，特别涉及一种检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法。
背景技术：
在医疗领域中，常用一些快捷的检测方法对患者进行诊病，以助于医生确定其病因，选择治疗措施和判断预后。在临床检测如肝功和免疫球蛋白的检测中均采用的血清，其原因是血浆中含有纤维蛋白原，因此采用血清进行有关的检测实验，可以避免纤维蛋白原对检测结果的影响。慢性荨麻疹的实验，是检测患者的抗高亲和力IgE受体自身抗体是否呈阳性。目前检测慢性荨麻疹的自身抗体有三种方法自身血清皮肤实验、嗜碱粒细胞组胺释放实验和免疫印迹实验，其中嗜碱粒细胞组胺释放实验和免疫印迹实验多用于科学研究，而自身血清皮肤实验是用于临床的检测抗高亲和力IgE受体自身抗体的常规方法，是诊断慢性荨麻疹的主要依据。
自身血清皮肤实验的操作步骤如下(一)抽取患者外周血2毫升，加入到空白无菌试管中；(二)静置1-3小时待血液凝集；(三)离心分离血清；(四)吸取50微升血清注射于同一患者皮内，50微升生理盐水注射于对侧做对照；(五)30分钟后观察结果。这种方法由于需要血液凝固血清析出，才能分离血清进行皮内实验，实验时间长，通常需要大约一个工作日才能得到使用结果，若患者下午抽血，则需要第二天才能得到实验结果，因此患者就医等待时间长。
发明内容
本发明的目的是提供一种检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法，它大大缩短患者等待结果的时间，检测结果准确，可以用于临床代替自身血清皮肤实验进行特异性抗高亲和力IgE受体自身抗体的检测。
本发明所述检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法有以下步骤 (1)按照通常皮肤实验允许的剂量抽取患者外周血，加入盛有血液抗凝剂的试管中； (2)离心分离血浆； (3)吸取二十分之一离心分离的血浆注射于同一患者前臂屈侧皮肤内，取相同体积的生理盐水注射于同一患者前臂屈侧位置的对侧皮肤做对照； (4)30分钟后观察检测结果。
慢性荨麻疹的实验，是检测患者的抗高亲和力IgE受体自身抗体，检测的是血液中的自身抗体，而自身抗体本身存在于血液中，对血清和血浆中的自身抗体活性没有影响。由于自身血清皮肤实验、自身血浆皮肤实验均为定性实验，只需要检测其特异自身抗体有或者没有，不需要定量，尽管血浆有纤维蛋白原，也不会影响本发明所述慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验的结果，临床实验结果也表明，本检测方法检测结果准确，可以用于临床代替自身血清皮肤实验进行特异性抗高亲和力IgE受体自身抗体的检测，即完全可以取代慢性荨麻疹的自身血清皮肤实验。
本发明由于是直接采用血浆做实验，不需要等待血液凝固析出血清，而直接离心沉淀血细胞，缩短了实验时间，因此可以大大减少患者等待结果的时间，基本可以做到上午就诊上午得到结果，下午就诊下午得到结果，整个实验比自身血清皮肤实验节省了约3个小时，利于医生尽早的诊病和确诊，可以大大减少患者的痛苦，同时还减少了检测人员的工作时间，提高了检测效率。
本发明申请人通过以下临床试验 对63例慢性特发性荨麻疹病人进行自身血浆皮肤实验，有19例为阳性，其中19例的阳性患者中的11例进行自身血清皮肤实验，结果是11例均为阳性。
对32例自身血浆皮肤实验阴性的病例进行自身血清皮肤实验，其结果均为阴性。
另外，对19例自身血浆皮肤实验阳性的病例用免疫印迹的方法检测抗高亲和力IgE受体自身抗体，其结果均为阳性。
因此，本发明的检测结果可靠。
具体实施例方式 慢性荨麻疹病人符合如下条件可以进行自身血浆皮肤实验①皮肤粘膜表面复发性风团，持续时间不超过24h；②每周发作不少于2次；③病程超过2个月；④排除了食物、药物为过敏原；⑤非物理性荨麻疹(寒冷性荨麻疹，胆碱能性荨麻疹和人工荨麻疹)及荨麻疹性血管炎患者；⑥1周内未使用抗组胺药物、类固醇激素药物及免疫抑制药物；⑦同意进行自身血清皮肤试验；⑧非特应性体质者。整个实验过程均需要无菌操作。
具体实验过程为 (一)抽取患者外周血2毫升，加入到盛有0.2毫升3.8％的枸橼酸钠溶液抗凝剂的试管中； (二)立即离心分离血浆，5000转/分钟条件下分离5分钟； (三)吸取50微升血浆注射于同一患者前臂屈侧皮肤内，50微升生理盐水注射于同一患者前臂屈侧皮肤对侧做对照； (四)30分钟后观察结果，注射血浆侧皮肤起红斑或者风团直径大于对侧1.5毫米者为阳性。
本发明所述枸橼酸钠溶液为市售产品。
申请人:对63例慢性特发性荨麻疹病人进行自身血浆皮肤实验的临床试验 患者平均年龄为38岁(23～59岁)，其中男性29例，女性34例。病程从3个月到16年不等。
整个实验过程严格无菌操作，皮肤实验血浆和对照生理盐水均为50微升。
对63例慢性特发性荨麻疹病人进行自身血浆皮肤实验，有19例为阳性，在19例自身血浆皮肤实验阳性病例中，6例为风团反应；4例为红斑或者红晕反应；其余9例为风团和红斑混合反应，其反应最快者8分钟，持续时间为3-10个小时不等，起风团或者红斑时间无头晕乏力烦躁等系统症状，所以一般不必象青霉素皮试那样准备抢救措施，偶有局部瘙痒者可以不必处理，可自行消退。
虽然本发明已以较佳实施例披露如上，然其并非用以限定本发明，任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明之精神和范围内，当可作些许之变动与改进，因此本发明之保护范围当视权利要求所界定者为准。
权利要求
1.一种检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法，其特征在于有以下步骤
(1)按照通常皮肤实验允许的剂量抽取患者外周血，加入盛有血液抗凝剂的试管中；
(2)离心分离血浆；
(3)吸取二十分之一离心分离的血浆注射于同一患者的前臂屈侧皮肤内，取相同体积的生理盐水注射于同一患者前臂屈侧的对侧，做对照实验；
(4)30分钟后观察检测结果。
2.根据权利要求1所述的检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法，其特征在于所述血液抗凝剂为枸盐酸钠溶液。
3.根据权利要求2所述的检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法，其特征在于枸盐酸钠溶液的重量百分比浓度为3.8％。
全文摘要
本发明涉及一种检测慢性荨麻疹的自身血浆皮肤实验方法，有以下步骤(1)按照通常皮肤实验允许的剂量抽取患者外周血，加入盛有血液抗凝剂的试管中；(2)离心分离血浆；(3)吸取二十分之一离心分离的血浆注射于同一患者的前臂屈侧皮肤内，取相同体积的生理盐水注射于同一患者前臂屈侧的对侧，做对照实验；(4)30分钟后观察检测结果。本发明大大缩短患者等待结果的时间，检测结果准确，可以用于临床代替自身血清皮肤实验进行特异性抗高亲和力IgE受体自身抗体的检测。
文档编号A61B10/00GK101209212SQ200710093199
公开日2008年7月2日 申请日期2007年12月24日 优先权日2007年12月24日
发明者孙仁山, 刘荣卿, 陈晓红, 程天民, 伍津津, 叶庆佾, 刁庆春, 黄秀英, 杨亚东, 红 鲍 申请人:中国人民解放军第三军医大学野战外科研究所