用于治疗消化性溃疡病的包含月见草鞣质c的药物组合物的制作方法

专利名称：：用于治疗消化性溃疡病的包含月见草鞣质c的药物组合物的制作方法用于治疗消化性溃疡病的包含月见草鞣质c的药物组合物发明领域本发明涉及药物组合物，其包含治疗有效量的化合物月见草鞣质(oenothein)C和任选地一种或多种药物可接受的载体、添加剂、润滑剂和稀释剂。更具体地，本发明涉及使用所述药物组合物在个体中治疗消化性溃疡病的方法。另外，本发明还涉及化合物月见草鞣质C在治疗包括胃溃疡、十二指肠溃疡和胃炎、胃食管反流病(GERD)的消化性溃疡病中的用途。
背景技术：
：和现有技术消化性溃疡病(PUD)是包括不同类型的胃溃病和十二指肠溃疡的粗分类，所有消化性溃疡病在临床上均以胃肠道的一个或多个区域中的被覆粘膜的腐蚀为特征。当攻击因素和防御因素平衡时不发生PUD，只有当前一种因素变得比常态强或后一种因素变弱时才出现[l]。然而，幽门螺杆菌(//6//(:0&"^py/on')存在于超过90。/。的十二指肠溃疡和70-80%的胃潰疡中是目前公认的[2]。因此，PUD现在也被当作传染病对待，用抗生素来治疗。消化性溃疡病的两种主要病因是胃酸分泌过多和病原幽门螺杆菌(//."/on')引起的感染。对于不是由幽门螺杆菌引起的溃疡，除了简单地使用诸如抗酸剂的酸中和剂，推荐以H2受体拮抗剂或质子泵抑制剂的形式单独釆用酸抑制疗法。然而，在治疗幽门螺杆菌时，应当总是将抗生素疗法与酸抑制疗法结合。因此，目前对于由幽门螺杆菌引起的PUD的治疗方案包含两种抗生素，一种是抗分泌药，一种是粘膜涂层剂(四联疗法)，粘液涂层剂由下述药物中的适当的四种组成阿莫西林、四环素、曱红霉素、曱硝唑和碌4t铝或次水杨酸铋、或次枸橼酸铋以及两种酸抑制剂H2受体阻断剂或质子泵抑制剂之一[3]。然而，与大多数药物一样，许多副作用与它们的^f吏用有关。细胞色素P450系统与H2受体阻断剂的药物不良相互作用，由质子泵抑制剂引起的超敏反应和肝损伤，将抗酸剂的剂量加倍以减轻仅緩解症状的状况的需要，以及抗生素抗性的发展，加上溃疡复发问题[4]，使得寻找更好的PUD治疗手段成为必需。为了开发出具有低毒性的有效的抗溃疡剂，本发明者研究了宽广范围的印度药用植物。结果发现奸子花的花及其提取物具有低毒性和优秀的抗溃疡活性，从而完成本发明，同时待审的专利申请(WO03/080095PCTIN/03/0067)和美国专利20060040005描述了植物花虫下子花(『/w"cwa)的提取物的抗消化性溃疡活性[5]，记述了新的活性成分月见草鞣质C。奸子花(,o咖niz'ayh^'cosaKurz)(syn.W/ZoWZm"(iaSalisb.)属于千屈菜科。频繁用于该植物的英文名称是FireFlameBush(火焰灌木)和Shimnjitea。由于其广泛的传统应用，地方和传统的名称数不胜数，特别是在印度。在印度，一些众所周知的名称有Z)/2ato"、"aW、/wgf、/7"otw7'、P/wAy""/、Z)/^vA等[6，7]。才直物虾子花在印度各地大量存在，上升至高达约1500米的海拔。植物虾子花也存在于东南亚和远东亚的大部分国家，如马来西亚、印度尼西亚、斯里兰卡、中国、曰本和巴基斯坦以及热带非洲[8]。在整个印度和不同的东南亚国家，这种才直物长久以来已在传统医学的医师中有经常需求。在印度，该植物在阿育吠陀(Ayurvedic)和尤那尼(Unani)医学体系中是广泛使用的药物植物[8-13]。虽然这种植物的所有部分均具有有价值的药用性能，但是对花有大量的需求，其在国内和国际市场都专门用于草药的制备[14]。根据印度的医学体系，这种花是刺鼻的、辛辣的、凉性的、有毒的、alexiteric、子宫镇静的和驱虫的，用于口渴、痢疾、麻疯病、丹毒、血液疾病、白带、月经过多和牙痛[8-19]。许多已上市的药物包含该植物的花和其它部分[ll，16-18]。该花用于制备被称为'^^to，s和'Asava，s的阿育吠陀发酵药物[9，19],并且在印度次大陆和其它南非国家非常受欢迎[20,21]。这些花能够进行酒精发酵，如通常通过使用纯酵母培养实现的那样[9,19]。印度尼西亚和马来西亚的流4亍的天然药物(被称为'5Wowaya，或'5Wawa戸/z，)主要包含虾子花的干燥花[22]。该植物也是用来使不孕妇女怀孕的药剂的成分[22，23]。虾子花的花的系统的植物化学研究表明，在水和醇提取物中特征性地存在约22%的鞣质和皂苷类[6]。据报道，在低极性溶剂提取物中，除类固醇和类固醇类分子、生物碱和黄酮之外，还存在三萜系化合物[6,7，24,25]。描述了存在槲皮素-3-鼠李糖苷、2-羟基-l:4-萘醌、多酚类和痕量的生物石成[24-29]。鞣花酸作为主要的多酚从花和叶中分离[30]。所分离的其它多酚包括蓼属苷、杨梅黄酮-3-半乳糖苷和天竺葵色素-3,5-二葡糖苷，最后一种是赋予花漂亮颜色的猩红色素[30]。到目前为止已经分离出一系列大环的可水解鞣质-单体的、二聚的以及三聚的-并且通过光谱和化学证据阐明了它们的结构[31-34]。基于该植物及其部分的传统疗法的系统药理学和生物化学研究证实了许多早期的经验观察。传统上，被称为'Jn、/2to，s的发酵的阿育吠陀药物在东南亚国家非常流行。它们被用来治疗各种各样的疾病。在许多MnWto，s的制备中，虾子花的干燥花被用来促进蔗糖水解[35]。证实了包含虾子花的花的阿育吠陀药物'iWw^a^^/zto，的免疫调节活性。观察到了对人补体活性和由酶原刺激的人多形核白细胞产生的化学发光的抑制的明显增加。这样的增加的生物活性归因于从虾子花的花中释放出的免疫活性组分[36]。'Aava，和'^^/to，组的药物是被称为'Sa/anWto，的阿育吠陀药物，包含作为主要组分之一的虾子花的花，并用于治疗灼热感G4gm'mfl"办a)、虚弱(DflM^a(ya)和风湿性疾病(^toj'a[37]。这种广泛用于治疗风湿病的多成分的阿育吠陀药物在大白鼠中对由小棉球诱导的肉芽肿已显示出抗炎活性。与参考抗炎药物保泰松相比，这样的阿育吠陀制剂显著降低了标志酶如酸性磷酸酶、GPT(谷丙转氨酶)和GOT(谷草转氨酶)的活性[38]。花的水提物被记录为在白带和月经过多时有效的子宫镇静剂[6，39]。研究表明包含虾子花的阿育吠陀制剂的抗白带(leucorrhoeic)特性对功能障碍性子宫出血有效[40]。最近，基于从虾子花的花和叶中分离的一些复杂大分子的临床前观察结果的新生物学正变得越来越可获得。从叶的曱醇提取物中分离出的大环二聚可水解鞣质坏子花鞣质C[33],对体外DNA拓朴异构酶II和体内抗肺瘤活性显示出显著的抑制作用[41]。在人癌细胞系和肉瘤180荷瘤ICR小鼠中评价了虫下子花鞣质C和月见草鞣质B的抗肿瘤活性[42]。大环鞣花鞣质在体内和体外抑制了肉瘤-180肿瘤细胞的生存能力。细胞培养中的细胞毒性作用被证明是选择性的，并可能通过宿主免疫防御体系来表达，如NK细胞的激活作用和/或白细胞介素分泌的增加[42，43]。最近，奸子花鞣质I已经显示出诱导人慢性骨髓性白血病(CML)K562细胞的细胞凋亡。虫下子花鞣质I抑制了这些CML细胞的增殖并i秀导了这些CML细胞的细胞凋亡，如通过细胞形态学、核小体间DNA碎裂和磷脂酰丝氨酸的分泌所判断的那样。从虾子花以及其它药用植物中分离的几种天然存在的多酚类化合物，包括黄酮、蒽醌和某些大环鞣花鞣质，抑制了LPS诱导型iNOS和COX-2基因的表达，暗示出它们在抗炎治疗中的推定作用[44,45]。已经乂>开了描述来自植物提取物如补骨脂(Aora/aecoo;/《/b"a)[46]、五加科人参属CP朋axgem^)[47]或多草药制剂[48,49]的抗溃疡剂的发明的专利。植物虾子花在各种传统医学体系中的应用，以及包含在其中的若干成分的作用，如上所述，引起了一些涉及妇科疾病和雄激素过多症[50,51]或支气管哮喘[52]的治疗的专利。包含虾子花植物提取物的皮肤美白化妆品已经在日本专利中公开[53]。PUD是特殊的病理状态，其中酸HC1和病菌幽门螺杆菌^皮/H人为胃十二指肠溃疡发病机制的两种主要病因。由于目前的医学治疗在使用适当的四联疗法(曱红霉素、阿莫西林、质子泵抑制剂或H2受体阻断剂和硫糖铝)后在复发和抗生素抗性方面的失败，需要无毒并且有效的天然药剂来同时治疗胃和十二指肠溃疡。
发明内容因此，本发明竭力开发出药物组合物，其包含治疗有效量的通过生物测定引导的分级分离技术从植物虫下子花的花的水-曱醇(50%)提取物中分离的化合物月见草鞣质C,所述月见草鞣质C将有效地治疗以酸HC1和病菌幽门螺杆菌为两种主要病理学原因的消化性溃疡病。发明目的本发明的主要目的在于提供用于治疗消化性溃疡病的药物组合物。本发明的另一目的在于提供使用所述药物组合物在个体中治疗消化性溃痴病的方法。另外，本发明的另一目的在于提供化合物月见草鞣质c在治疗包括胃溃疡、十二指肠溃疡和胃炎、胃食管反流病(GERD)的消化性溃疡病中的用途。本发明的另一目的在于提供用于治疗各种与消化性溃疡相关的各种疾病的安全的化合物月见草糅质C，所述消化性溃疡包括胃溃疡、十二指肠溃疡和胃炎、胃食管反流病(GERD)。发明概述因此，本发明涉及药物组合物，其包含治疗有效量的化合物月见草鞣质C和任选地一种或多种药物可接受的载体、添加剂、润滑剂和稀释剂，所述化合物月见草鞣质C从植物坏子花的生物活性部分中获得。此外，本发明还提供使用所述药物组合物在个体中治疗消化性溃疡病的方法。本发明还涉及月见草鞣质c在治疗消化性溃疡相关疾病中的用途和分离所述化合物的方法。在本发明的一实施方案中，用于治疗消化性溃疡病的药物组合物，其中所述药物组合物包含治疗有效量的化合物月见草鞣质c，或任选地和一种或多种药物可接受的载体、添加剂、润滑剂和稀释剂。在本发明的另一实施方案中，用于治疗消化性溃疡病的药物组合物，包含从植物虫下子花的生物活性部分中获得的化合物月见草鞣质c。在本发明的另一实施方案中，药物组合物含有的载体选自蛋白、碳水化合物、糖、硬脂酸镁、纤维素、碳酸钙、淀粉-明胶糊或药物可接受的载体、赋形剂、稀释剂或溶剂。在本发明的另一实施方案中，药物组合物，其中化合物月见草鞣质C以0.005mg/Kg体重/天至0.5mg/Kg体重/天的剂量给予。在本发明的一实施方案中，药物组合物，其中化合物月见草鞣质C优选以至少0.05mg/Kg体重/天的剂量给予。在本发明的另一实施例中，药物组合物，其中单剂量水平达到250mg/Kg体重时，化合物月见草鞣质C没有显示任何毒性作用。在本发明的另一实施方案中，所述组合物所用的给药途径选自口腔、肌内或静脉内。在本发明的另一实施方案中，使用所述组合物的剂型选自散剂、注射剂、糖浆剂、胶嚢剂或片剂。在本发明的一实施方案中，所述组合物用于治疗的消化性溃疡病选自胃溃疡、十二指肠溃疡或胃炎、胃食管反流病(GERD)。在本发明的另一实施方案中，药物组合物，其中化合物月见草鞣质C在抗胃质子泵和抗幽门螺杆菌活性方面具有双重功能。在本发明的另一实施方案中，药物组合物，其中化合物月见草鞣质C在0.13(iM至1.3pM的浓度范围内体外抑制胃质子泵活性，其中ICso值为0.6iaM至0.8nM。在本发明的另一实施方案中，药物组合物，其中化合物月见草鞣质C对幽门螺杆菌的临床和标准菌抹显示抑菌和杀菌活性。在本发明的一实施方案中，药物组合物，其中化合物月见草鞣质C对幽门螺杆菌显示抑菌活性，最低抑制浓度(MIC)范围为6.25吗/mL至25.0吗/mL。在本发明的另一实施方案中，药物组合物，其中化合物月见草鞣质C对幽门螺杆菌显示杀菌活性，最低杀菌浓度(MBC)范围为25.0|ig/mL至50.0吗/mL。在本发明的另一实施方案中，化合物月见草鞣质C仅特异性抑制幽门螺杆菌，而不抑制其它需氧细菌，以对革兰阳性和革兰阴性菌具有较高的MIC值来证明(〉400吗/mL)。图表简述图1(a)表示从植物虫下子花中获得的生物活性部分的HPLC图谱。图1(b)表示从植物虾子花的生物活性部分中获得的没食子酸曱酯的HPLC图谱。该图示出与最初的生物活性部分中的主峰之一对应的单峰。图1(C)表示从植物虫下子花的生物活性部分中获得的化合物月见草鞣质C的HPLC图谱。该图示出与最初的生物活性部分中的主峰之一对应的单峰。生物活性部分中的月见草鞣质c的相对丰度(产量％)被测定为0.008%。图2表示化合物月见草鞣质C的质子NMR图谱。图3表示化合物月见草鞣质C的13CNMR图谱。图4表示化合物月见草鞣质C的质谱图。从ESI-MS谱推断，其分子量为784(准分子离子峰为m/z807)。对]H、"C和2D-NMR谱的详细分析表明，所分离的化合物是作为异头混合物存在的酚苷(a和b)。文献研究显示出两种密切相关的结构来自于月见草(OewoAeraeo^mse;a/a)的月见草鞣质C[54,55]和来自于柳叶菜(五j^7o6^m/z^M^m)的月见草鞣质C的同分异构体[56]。特别地，2D-NMR研究证实了前者的可能性。发现月见草鞣质C的[a]D为+68°(文献值为+72°)。月见草鞣质C的系统化学命名为D-葡萄糖2-[2-[(5,10-二氢-3，7,8-三羟基-5，10-二氧代[l]苯并吡喃[5,4,3-ccfe][l]苯并吡喃-2-基)氧]-3，4，5-三羟基苯曱酸酯]-3-(3,4,5-三羟基苯曱酸西旨)。[54-58]中描述了各种大环鞣花鞣质如虫下子花鞣质和月见草鞣质的结构说明。图5表示化合物没食子酸曱酯的质子NMR图谱。图6表示化合物没食子酸曱酯的质谱图。图7表示化合物月见草鞣质C和没食子酸曱酯的化学结构。表1示出月见草鞣质C的抗胃质子泵活性。表2示出月见草鞣质C和曱红霉素的抗幽门螺杆菌活性。表3示出月见草鞣质C、曱红霉素、阿莫西林和曱硝唑在不同的幽门螺杆菌菌^^中的MIC和MBC值。发明详述从可在印度次大陆大量获得的植物虾子花的花中已经分离出月见草鞣质C分子。通过在室温下用1:1的曱醇-水浸泡过夜来提取虾子花的干燥花。重复该过程三次。在旋转蒸发器中于45。C下使合并后的提取物蒸发，得到粗提物。使粗提物在正丁醇和水之间分开。将各层于45。C下分别浓缩，获得两部分。按照生物测定引导的分级分离技术用diaionHP-20和sephadexLH-20柱重复地色谱分离正丁醇可溶部分以获得纯化的月见草鞣质C，其性质为灰白固体，无定形。其可溶于曱醇、丙酮和DMSO。在HPLC中，月见草鞣质C显示出与粗提物中的主峰之一对应的单峰。粗提物的HPLC图语如图l(a)所示。图1(c)示出所分离的单分子月见草鞣质C的HPLC图语。图2、3和4表示化合物月见草鞣质C的NMR图i普和质i普图。在通过色谱法的分级分离过程中，还分离出另一化合物没食子酸曱酯。其结构通过iHNMR和ESI-质谱来阐明，然后通过与在实验室中制备的标准样品比较来证实。图1(b)示出其HPLC图谱。没食子酸曱酯相对于生物活性部分的相对丰度(收率百分数)被测定为0.003%。图5和图6分别表示化合物没食子酸曱酯的NMR图谱和质谱图。然而，化合物没食子酸曱酯在下述任何测试中都没有显示出任何活性。然而，没食子酸曱酯会与月见草鞣质C一起在最终的药物制剂中作为HPLC图谱的两种指紋成分，由此可以判断生物活性部分的真实性。没食子酸曱酯和月见草鞣质C两种分子已经被确定描绘为由生物活性部分制成的药物制剂的指紋成分。以下实施例以阐述本发明的方式给出，而不应该被解释为限制本发明的范围。实施例-1在#为、庠化合#力JS革潔jC浚分子月见草鞣质C和没食子酸曱酯已经从植物虾子花的花中分离。通过在室温下用1:1的曱醇-水浸泡过夜来提取虾子花的干燥花。重复该过程三次。在旋转蒸发器中于45。C下使合并后的提取物蒸发，得到粗提物。使粗提物在正丁醇和水之间分开。将各层于45°C下分别蒸发，获得两部分。按照生物测定引导的分级分离技术用diaionHP-20和sephadexLH-20柱重复地色谱分离正丁醇可溶部分来获得纯化的月见草鞣质C，其性质为灰白固体，无定形(收率0.008%)。其可溶于曱醇、丙酮和DMSO。没食子酸曱酯的相应的收率为0.003%。实施例-2^合#力^草模#(7付拔ff杀话遂；根据[59]制备顶端富集的猪胃膜和微管泡膜。这样的膜具有能够被奥美拉唑特异性阻断的K+刺激的H+转运三磷酸腺苷酶活性[60]。37°C下在含有2mMMgCl2、2mMATP、10mMPIPES(pH6.8)、10mMKCl和IO至12吗膜蛋白的1-mL反应混合物中测定11+,:^+-三磷酸腺苷酶活性。在开始与ATP反应之前，将另外的完全测定混合物在存在和不存在不同浓度的月见草鞣质C或奥美拉唑的情况下预孵育10min。预孵育10min后，通过添加1mL冰冻的TCA(14%)终止反应。被称为11+乂+-三磷酸腺苷酶的K+刺激的活性，通过Mg+加K+存在下的活性与Mg+单独存在下的基本活性(Mg、三磷酸腺苷酶)的差异来计算。膜显示出约40至501imolpi/mg/h的高K+刺激的活性，而仅约10(imolpi/mg/h的基本活性。按照酶测定方法[61]评价了月见草鞣质C的抑制活性。效果根据11+,1^-三磷酸腺苷酶的抑制百分数来定量，并与胃11+,1^+-三磷酸腺苷酶的特异性抑制剂奥美拉唑的效果进行比较。月见草鞣质C分子显示出对胃质子泵活性的极强抑制。在1.3jiM下，在相同的实一验条件下进^f亍比较时，月见草鞣质C对约70-90°/0的11+，1^+-三磷酸腺苷酶产生抑制(表1)，高于标准药物奥美拉唑(在3pM下抑制约20%)。因此，月见草鞣质C对胃质子泵的抑制程度(在0.13pM至1.30(iM下为20%至卯％)与标准药物奥美拉唑(在3至30|iM下抑制10%至卯％)相比，约高20倍。表l:月见草鞣质C的抗胃质子泵活性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实施例-3必合參力^革荐產CW戎幽/7螺，并萝活遂,月见草鞣质C抗幽门螺杆菌活性的作用采用圆片扩散敏感性测定并通过用微量肉汤稀释法测定MIC/MBC值来确定。在适当的条件下(C0210%、025%、N285%和相对湿度大于95%)，将六种不同的幽门螺杆菌菌抹维持于37°C的培养箱中，其中两种是临床菌林[80A(无致病力)和121A(有致病力)]，四种是标准菌抹[ATCC43504、ATCC49503、NCTC26695和ATCC43629]。将月见草鞣质C分子溶解于DMSO中。对于圆片扩散敏感性试验[62],培养板用添加10%的胎牛血清(FCS)、Isovitalex(0.5。/。)和Dent(0.0025。/。)的脑心浸液琼脂制成。板中注满lxl06CFU/mL的幽门螺杆菌的液态培养物，将圆片放置于板上，在5iiL/圓片或10iiL/圆片的剂量下使样品直接在圆片上浸透以便得到100(ig/圆片和200pg/圓片。孵育3天后，测量抑菌圈的直径，并与标准抗生素曱红霉素的抑菌圈进行比较。在测试6种不同的幽门螺杆菌菌抹时，月见草鞣质C分子在100(ig/圆片至200(ig/圆片的剂量下产生1.7cm至2.5cm的抑菌圈直径。在相似的实验条件下测定标准抗生素曱红霉素的活性(表2)。表2:月见草鞣质C和曱红霉素的抗幽门螺杆菌活性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>对于曱红霉素，括弧中的值表示使用各个菌抹的浓度。对于通过微量肉汤稀释法来测定MIC和MBC值[63],在含有总体积100(iL的添加5%FCS的布鲁氏肉汤的96-孔微量滴定板中制备月见草鞣质C的两倍连续稀释液(l|ag/mL至50(ig/mL)。在布鲁氏肉汤中将幽门螺杆菌的3天的液态培养物稀释10倍，并将100的这些培养物接种到各个孔中以得到约io6CFU/mL的终浓度。在微需氧性空气中于37。C将该板孵育3天。孵育后，对板进行目检，显示出完全抑制生长的最低浓度被记为各个化合物的MIC。对于MBC测定，从上述的微量滴定板中取出没有检测到生长的72-h培养物的等分部分(10pL)，并且用于在新鲜的脑心浸液琼脂板上划线。于37。C进一步培养72小时后，通过对这些板进行目4全来测定MBC,将没有出现生长的点(小于10个菌落)看作MBC。纳入标准抗生素曱红霉素、阿莫西林和曱硝唑，用来与使用不同幽门螺杆菌菌林的月见草鞣质C进行比较。通过微量肉汤稀释法测定月见草鞣质C分子对五种菌抹的MIC和MBCM直。对于菌才朱80A、ATCC43504、ATCC49503、NCTC26695和ATCC43629,观测到的MIC值分别为25、25、6.25、12.5和25(ig/mL(表3)。在相同实验条件下，曱红霉素对各个菌抹的MIC值为20、25、6.25、62.5和50ng/mL。同样，观测到使用这些菌林的阿莫西林的MIC值分别为20、25、12.5、100和25ng/mL。基于对不同菌林的MIC值，与曱红霉素和阿莫西林两者相比，月见草鞣质C分子的效力约低500-1000倍。然而，对于曱硝唑的MIC值(12.5、50、1.56、1.56和1.56|ig/mL)，月见草鞣质C的效力仅低约2-20倍，如在五种这样的菌林中观察到的那样。在杀菌活性的量度MBC值方面，本发明人注意到月见草鞣质C同三种标准抗生素的效力相比趋势相似。表3:月见草鞣质C、曱红霉素、阿莫西林和曱硝唑在不同幽门螺杆菌菌林中的MIC和MBC值。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>总之，月见草鞣质C分子对临床的和标准的不同菌抹的效力是明显的。另外，由于某些菌林产生毒素(cag-A、vac-A，细胞毒素阳性)，期望该分子在致病条件下对这样的菌林具有效力。另外，基本上按照NCCLS(国家临床试验标准委员会)的指导原则，在水解酪蛋白胨肉汤中，采用微量肉汤稀释法测定了月见草鞣质C对四种需氧细菌(1种革兰阳性(蜡状芽孢杆菌(及cere^))和3种革兰阴性(伤寒沙门菌(S.^p/n')、大肠杆菌(Eco/0和肺炎克雷伯菌(《./"ewmom'fle)))的抗菌活性[64]。月见草鞣质C分子没有对任何细菌菌林显示出活性(MI0400吗/mL)。因此该化合物对幽门螺杆菌是特异性的。实施例-4^合參刀^革模產C^#遂#斧；检测化合物月见草鞣质C对瑞士小白鼠的致死率。通过口腔途径将250mg/Kg体重的最大剂量的化合物月见草鞣质C给予5只瑞士小白鼠。24小时后，没有看到任何小鼠死亡。此外，将小鼠保持监视15天，在此期间发现它们仍然健康，并且没有观察到行为异常。有益效果1化合物月见草鞣质C对胃质子泵的抑制作用比标准药物奥美拉唑强很多(约20倍)。2本发明还提供了相同的月见草鞣质C分子对幽门螺杆菌的临床菌林和不同的标准菌林的适当低的MIC值(6.25jig/mL至25.0(ig/mL)。3从月见草鞣质C分子对需氧细菌组的高MIC值(〉400吗/mL)来看，其明显具有特异性的抗幽门螺杆菌活性，暗示其作为有效的治疗剂的潜力。4由于酸HC1和病菌幽门螺杆菌是胃十二指肠溃疡发病的两种主要原因，作为单分子抗胃十二指肠溃疡药物，月见草鞣质C的地位是独一无二的。这更多地是因为目前的医学治疗即使是使用三联疗法和四联疗法(曱红霉素、阿莫西林、质子泵抑制剂、H2受体阻断剂、^琉糖铝-根据诊断和其它标准的任何3种或4种)后在复发和抗生素抗性方面的失败。参考文献Rogers,A.I.1990.PostgradMed.88，57-60.LeeA.1996.In7/e//coZ)ac/er;y/on':TechniquesforClinicalDiagnosis&BasicResearch(幽门螺杆菌临床诊断与基础研究技术)(Eds.AdrianLee&FrancisMegraud)，WBSaundersCo.Ltd,,London,pp.xiii-xiv.Hoogerwerf,W.A.andPasricha，PJ.InGoodman&Gilman，sPharmacologicalBasisofTherapeutics(Goodman与Gilman的治疗学的药理学基础)(Eds.Hardman，J.G.&Limbird,L.E.)McGraw-Hill2001,pp1005-1020.Bullard,W.PepticUlcerDiseases(消化性溃病病)，USNationalCommunityPharmacistsAssociation,June1997.Das，P.K.,Sahu,N.P.,Banerjee,S.,Sett,S.,Goswami，S.,Bhattacharya，S"2003.PCT(WO03/080095「PCT/IN/03/00671)&美国专利申请20060040005.Shome,U.,Mehrotra,S.，Sharma,H,P.,1981.ProceedingsofIndianAcademyofSciences(PlantScience)90,335-351.Khare，C.R，2004.EncyclopediaofIndianMedicinalPlants:RationalWesternTherapy,AyurvedicandOtherTraditionalUsage,Botany(印度药用植物百科全书合理的西方疗法，阿育吠陀及其它传统用法，植物学).Springer,Berlin,pp.483-484.Kirtikar,K.R.,Basu,B.D.，1935.IndianMedicinalPlants(印度药用植物).Parts1-3,L.M.Basu，Allahabad,India.CentralCouncilforResearchinIndianMedicineandHomeopathy.(1978)T/a"(io/Do騰WcMe血/"eawc/Com附o"4>wveAc7eweA^(家庭医疗和普通印度草药治疗手册)，MinistryofHealthandFamilyWelfare,NewDelhi,pp.334-35.Krish腿，RN.,Seeni,S.,1994.PlantCellReports14,55-58.Chopra,R.N.,Nayar，S丄.，Chopra,I.C.,1956.GlossaryofIndianMedicinalPlants(印度药用植物辞典)(CSIR，Delhi,India).[12]Watt,G.，1972.ADictionaryofEconomicProductsofIndiaIII(印度经济产品词典III).(PeriodicalExpert,Shahdara,Delhi,India).Dymock，W.,Warden,C丄H.,Hooper,D.,(1995).AHistoryofthePrincipalDrugsofVegetableOriginmetwithinBritishIndiaRepublic(英属印度共和国出现的才直物来源的首选药物历史).PharmacographiaIndica.Vol.I(VivekVlhar，Delhi,India).Oudhia,P"2003.InteractionwiththeherbcollectorsofGandairegion(与Gandai地区药农的相互作用)，Chhatisgarh，M.P.India,www.botanical.com.Sharma,P.V.，1956.DravyagunVigyan(Varanasi:TheChowkhamba).Dutt，U.C.，1922.TheMateriaMedicaoftheHindus(印度人的药材).AdiAyurvedaMachinePress,Kolkata，India.Nadkarni,K.M.，1954.IndianMateriaMedicavol.2，3rdEdin.PopularBookDepot(流行书库)，Mumbai,India,pp.489-497.Ahuja,B.S.，1965.MedicinalPlantsofSaharanpur(萨哈兰普尔的药用才直物).GumkulKangriPrintingPress,Hardwar，India.Atal,C.K.，Bhatia，A.K.,Singh，R.P"1982.JournalofResearchinAyurvedaandSiddhaIII((3&4),193-199.Jayaweera,D.M.A.,1981.MedicinalPlantsusedinCeylonPartIII(锡兰使用的药用植物第三部分)(TheNationalScienceCouncilofSriLanka，Colombo)p.289.Weersaooiya,M.K.B.,Yatawara，H.P.，2002.IndianJournalofBiochemistryandBiophysics39,347-350.Burkill，I.H.,1966.ADictionaryofEconomicProductsoftheMalayPeninsula(马来亚半岛经济产物词典)，(MinistryofAgricultureandCo-operatives,Kualalampur)p.2305.Dey，K丄.，1984.TheIndigenousDrugsofIndia(印度本土药斗勿).InternationalBookDistributors,Dehradun，India,p.311.Deshmukh，V.K.，Pandit,U.，1967.IndianJournalofPharmacy29,341.Chauhan，J.S.,Srivastava,S.K.，Srivastava,S.D.,1979.PlantaMedica36，183-184.P6jDan，S.，Dan，S.S.，1984.JournaloftheIndianChemicalSociety61,726-727.Kalidhar，S.B.，Parthasarathy，M.R.,Sharma，P.,1981.IndianJournalofChemistry20B,720-721.Dastur，J.F.,1951.MedicinalPlantsofIndiaandPakistan(印度和巴基斯坦的药用才直物)，TaraporevalaSons&Co.Ltd.,Mumbai,India.Saoji,A.G.,Saoji,A.N.,Deshmukh,V.K.,1972.CurrentScience41，192.Nair，A.G.R.,Kotiyal,J.P.,Ramesh，P.，Subramanian，S.S.，1976.IndianJournalofPharmacy38,110-111.Yoshida，T.,Chou，T.，Haba，K.,OkanosY.，Shingu，T.,Miyamoto,K.,Koshiura，R.，Okuda，T.,1989.ChemicalandPharmaceuticalBulletin37，3174-3176.Yoshida,T.,Chou,T.，Nitta，A.,Miyamoto,K.，Koshiura,R.,Okuda,T.，1990.ChemicalandPharmaceuticalBulletin38，1211-1217.Kadota,S.，Takamori,Y.,Nyein，K.N.,Kikuchi，T,Tanaka,K.，Ekimoto,H.，1990.ChemicalandPharmaceuticalBulletin38,2687-2697.Yoshida,T.,Chou，T.,Matsuda,M.,Yasuhara,T.,Yazaki,K,，Hatano,T.,Nitta,A,，Okuda,T.,1991.ChemicalandPharmaceuticalBulletin39，1157-1162.AyurvedicPharmacopoeia(印度草药药典)1976;1979.DepartmentofAyurveda,ColomboSriLanka.VolIpt.1and2.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