专利名称::用于肥胖症的小分子介入的制作方法
技术领域:
:和产业适用性Prieurianin是革巴向脂肪生成的新型抗肥胖症药物。Prieurianin抑制前脂肪细胞的增殖和分化,并降低分化的培养物中脂质阳性脂肪细胞的数量。另外,Prieurianin是用于探测脂肪生成的生物化学和生理学的重要药理学工具。
背景技术:
:近年来,肥胖症发生率及其相关的健康问题的增加已经对全球医疗保健产生了明显的影响。仅在美国,据估计大约三分之二的成年人过重,其中的三分之一认为是肥胖。肥胖症惊人的增长速率很大程度上源于久坐的生活方式习惯,伴随过度消耗富含能量的食物,这些食物产生慢性的能量不平衡,而导致身体脂肪形式的体重增加。随着肥胖的增加,患例如糖尿病、高血压和心血管疾病的伴随疾病(comorbidity)的风险也显著提高了。也认识到不是所有的脂肪都生来等同,内脏脂肪组织而非皮下脂肪的积累增加了心血管疾病和代谢疾病的风险。事实上,肥胖症是触发胰岛素抵抗、血脂异常(特征在于高三酸甘油酯血症)、低水平的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、小的密度HDL颗粒以及升高的磷脂转移蛋白(PLTP)活性的发生。因此,在世界范围内肥胖症流行的增加及其伴随疾病的全部宿主保证了急需有效的治疗性药物和生活方式改变的发明,以对抗威胁全球数十亿人的新出现的健康问题。十多年前,瘦素及其体重降低药理学作用的发现产生了对脂肪组织功能的新理解。现在已知脂肪组织不仅储存和释放脂肪酸,也产生许多对体重调控和血糖内稳态有巨大影响的激素因子或脂肪因子。脂肪组织作为内分泌器官发挥作用,并且产生许多在食物摄取、能量消耗和一系列代谢过程中具有重要作用的物质。同时,脂肪细胞表达并释放参与信号传导通路并在能量储存和新陈代谢中起到重要作用的蛋白质。这些进展还阐述了白色脂肪组织实际上在调控能量平衡中起到关键作用,并且作为介导许多生理学和病理学过程的分泌/内分泌器官发挥作用。白色脂肪组织量的调控异常引起肥胖症和脂肪萎缩。作为脂肪细胞大小和/或数量的改变而导致的白色脂肪组织量的改变,由前脂肪细胞的增殖和分化之间的复杂相互影响,以及脂肪细胞分泌的多种蛋白质和因子所调控。由脂肪组织释放的主要激素因子之一是脂连蛋白(adiponectin),其是最近发现的、仅由脂肪细胞产生的激素。脂连蛋白在血浆中大量存在,并且已经显示其通过刺激脂肪酸氧化来升高胰岛素敏感性,降低血浆三酸甘油酯以及改善糖代谢。脂连蛋白与肥胖负相关,并且其水平在肥胖受试者中显著降低。在临床上,血浆中降低的脂连蛋白水平也与肥胖症相关胰岛素抵抗和动脉硬化相关联。脂连蛋白的抗动脉粥样化和抗炎症性质及其刺激胰岛素敏感性的能力使得脂连蛋白成为以潜在治疗性应用为目标的生理学研究和病理学研究的重要靶标。除了脂连蛋白,包括抵抗素(resistin)、内脏脂肪素(visfatin)、肿瘤坏死因子a和促酰化蛋白(acylation-stimulatingprotein)构成了多样的脂肪细胞来源的激素和细胞因子,其编织成(orchestrate)脂肪组织对中心和外周代谢信号的应答。也确认这些蛋白中的一些作为候选药物乾标用于开发疗法以治疗肥胖症,并且现在已经在药物开发阶段中。这些进展为可以在不久的将来使用药物有效治疗如今的肥胖症流行的提供了希望。肥胖症中的磷脂转移蛋白(PLTP)-与肥胖症相关联的血脂异常的标志是高三酸甘油酯症、低HDLC和升高的血浆PLTP活性。在人类中,现在认为血浆PLTP活性在肥胖受试者中显著升高,并且在与高血浆三酸甘油酯和肥胖症相关的胰岛素抵抗和2型糖尿病受试者中也显著升高。而且,胃束带手术后的明显体重损失导致PLTP活性的显著降低。认为PLTP在调控HDL的大小和组成,并且因此控制血浆HDL水平中的反向胆固醇转运中发挥功能。因此,肥胖个体中血浆PLTP活性的矛盾(paradoxical)升高产生了其在肥胖症中起何种作用的问题。PLTP的概要-人PLTP是一种主要的血清蛋白,其由在染色体20ql2-q13.1上的含16个外显子、跨越大约13kb的基因编码,cDNA为1750个碱基对,476个氨基酸长。在SDS-PAGE上,纯化的PLTP的分子量是大约81kDa,比从cDNA上预测的蛋白质质量大的多,其niRNA转录物在多种组织中可见,其中包括胰腺、肺、肾脏、心脏、肝脏、骨骼肌和大脑,并且在脂肪组织中的皮下脂肪组织和内脏脂肪组织之间显示出贮藏相关差异。PLTP是脂多糖结合/脂转移蛋白家族的成员,该家族包括胆固醇酯转移蛋白、脂多糖结合蛋白和杀菌性/通透性增加蛋白。杀菌性/通透性增加蛋白的晶体结构说明该家族中的蛋白(包括PLTP)含有内在的脂结合位点,并且表现出作为在脂蛋白之间穿梭的载体蛋白发挥作用以再分配脂质。PLTP的预测模型结构由2个特征为非极性残基的脂结合凹陷(pocket)构成,其中N末端凹陷对PLTP转移活性是关键的,而C末端凹陷涉及脂结合。PLTP的功能-促动脉粥样硬化(proatherogenic)或抗动脉粥样硬化(antiatherogenic)-在乳糜微粒和VLDL的血管内脂类分解作用期间,PLTP以反向的胆固醇转运,运送多余的表面磷脂和胆固醇从富含三酸甘油酯的脂蛋白至HDL。另外,体外研究显示PLTP在脂蛋白和重构的嚢泡之间转移不同的磷脂和游离胆固醇。PLTP也能够修饰HDL颗粒尺寸的分布,被称为HDL转换或者重塑的过程产生前P-HDL的形成,其被认为是胆固醇的一种有效受体。另外,在通过同源重组敲除小鼠中的PLTP缺失提供了HDL水平的大约50%降低,从而说明其在从富含三酸甘油酯的脂蛋白至HDL转移磷脂中的重要作用。有趣的是,过表达PLTP也降低血浆HDL水平。据信PLTP有抗动脉粥样硬化的潜力,而其他人发现血浆PLTP水平和活性与冠状动脉疾病正和对立相关,具有提高的怀疑患有动脉粥样硬化风险的转基因小鼠模型培育成PLTP敲除或者过表达小鼠,证明PLTP的促动脉粥样硬化作用。另外,PLTPmRNA水平和活性始终与肥胖症相关,从而提示PLTP在调控身体脂肪中可能具有其他功能。还没有完全理解PLTP和肥胖症之间的这种功能性意义,但推测PLTP合成的升高可能是脂肪组织的量增大的结果,因为在体重损失后PLTP活性下降。这些结果似乎与基因组范围扫描研究相一致,该研究显示与PLTP的染色体座内肥胖症相关表型联系的明显证据。然而在几个小鼠研究中,染色体2上的影响身体脂肪的基因与人染色体20q上的区域位于同一个染色体上。也显示低水平PLTP与增加的腰围直接相关。另外,矛盾的是,在秀丽隐杆线虫中,通过RM干扰失活PLTP基因引起脂肪储存的增加,从而提示在哺乳动物PLTP同源物中的功能突变能导致肥胖症。本发明人在秦的美国专利号7,078,411中鉴定了用于升高反向胆固醇转运的方法,其通过施用喜树碱或喜树碱衍生物来促进PLTP表达的增加。本发明人已经在本文中提供了用于以有效方式调控PLTP的进一步的进展。展。日、、,、、、<:另外,本文还提供了用于开发有效治疗药物以调控个体体重的进展。发明概述一方面,本发明涉及用于以转录方式激活磷脂转移蛋白(PLTP)基因表达的方法,其通过施用有效量的柠檬苦素类化合物(limonoid),例如prieurianin。另一方面,本发明涉及诱导显著体重损失和/或食物摄取降低的方法,其通过施用有效量的prieurianin。另一方面,本发明还提供了以下各项减少内脏和皮下脂肪组织的方法,其包括施用有效量的prieurianin。降低血清非酯化脂肪酸水平的方法,其包括施用有效量的prieurianin。抑制前脂肪细胞的增殖和分化的方法,其包括施用有效量的prieurianin。引起在脂肪细胞中去分化或脂肪积累的损失的方法,其包括施用有效量的prieurianin。本发明另一方面涉及用于肥胖受试者的体重降低组合物,其包括柠檬苦素类化合物,例如prieurianin。在某些实施方式中,受试者包括哺乳动物。在另一方面中,本发明涉及用于探测脂肪生成的生物化学和生理学的药学组合物,其包括柠檬苦素类化合物。本发明另一方面涉及用于刺激磷脂转移蛋白(PLTP)反式激活(transactivation)的方法,其包括使用prieurianin来i秀导受试者体内体重和肥胖的减少。也提供了用于在受试者体内抑制前脂肪细胞增殖和用于阻止前脂肪细胞分化成成熟脂肪细胞的方法,该方法包括对受试者施用有效量的prieurianin。在某些实施方式中,受试者被认为是肥胖的。也提供了用于引起在分化的成熟脂肪细胞中的去分化或用于抑制在分化的成熟脂肪细胞中脂质的积累的方法。该方法包括对受试者施用有效量的prieurianin。在另一方面中,本发明涉及用于脂肪生成的一种或多种生物标志物。在某些实施方式中,生物标志物包括磷脂转移蛋白(PLTP)。也提供了用于调控PLTP基因表达的方法,其包括施用有效量的prieurianin。也提供了用于阻止prieurianin对PLTP反式激活的方法,其包括施用有效量的星状孢菌素(Staurosporine)。在阅读附图的指导下,从有限实施方式的以下详细说明,本发明技术人员可以清楚本发明的多种目的和优点。图1.通过DNA微阵列,显示HepG2细胞对托泊替康的药理学反应。用500nM托泊替康多次(A)或者多种浓度的托泊替康(B)处理HepG2!细胞24小时。树状示磷脂转移蛋白(PLTP)的表达变化。(C)通过Northern印迹分析独立地验证了托泊替康对PLTP表达的i秀导。图2.托泊替康对PLTP启动子的反式激活。图2A.托泊替康以剂量依赖方式反式激活融合至萤光素酶报告基因的1.5Kb的PLTP启动子。图2B.在含有融合至新霉素可选择标记物盒的PLTP启动子萤光素酶报告基因的HepG2转基因细胞中,托泊替康激活PLTP启动子,所述PLTP启动子萤光素酶报告基因稳定转染入HepG2细胞以产生转基因系(上区)。托泊替康对PLTP启动子的剂量依赖式诱导(下区)。结果是用海肾(^"i7/a)萤光素酶标准化后的三次实验的平均S.E.。图3.prieurianin对PLTP启动子的反式激活。图3A.在HepG2转基因细胞中prieurianin对PLTP启动子的剂量依赖反式激活。结果是用海肾(^/7//")萤光素酶标准化后的三次实验的平均S.E.。图3B.星状孢菌素对PLTP启动子的prieurianin反式激活的抑制。在存在或不存在星状孢菌素下,用prieurianin处理转基因HepG2/PLTPpLuc细胞。1,对照;2,DMSO;3,200nM星状孢菌素;4、5和6分别是500、1000和2000nM的prieurianin;7、8和9分别是500、1000和2000nM大prieurianin+200nM的星状孢菌素。结果是一式三份实验的平均±S.E.。图4.prieurianin对血液胰岛素、糖和NEFA水平的作用。用5mg/kg的prieurianin处理正常和06/06小鼠,然后收集血清样品用于(图")胰岛素;(图4B)糖;和(图4C)非酯化脂肪酸(NEFA)概要分析。结果是对每种处理的每组中3个动物的平均值。蓝色柱,正常C57BL/6J;红色柱,瘦素缺陷o6/o6小鼠。图5.M/o6小鼠中prieurianin对脂肪生成的作用。用5mg/kg的prieurianin处理瘦素缺陷od/o6小鼠,切除皮下和内脏脂肪组织并称重。结果是如指示(n)的每组3-5个动物的平均值。图6.prieurianin抑制NIH-3T3/L1前脂肪细胞的增殖。用多种浓度(O.5、1和2pM)的prieurianin处理细胞,通过在7天里每天计数来评估生长。结果是一式三份实验的平均±S.E.。图7.prieurianin抑制前脂肪细胞分化。诱导NIH-3T3/L1细胞进入分化,并同时用2pM的prieurianin处理。用油红0染色分化的细胞-图7A,未分化的对照。图7B.分化的脂肪细胞。图7C.存在2pM的prieurianin下,对分化的i秀导。图7D.膜联蛋白V结合磷脂酰丝氨酸的流式细胞学分析,凋亡细胞在右上象限。所有的实验进行一式三份。图8.prieurianin诱导分化的脂肪细胞的损失。将NIH-3T3/L1前脂肪细胞诱导进入分化。分化后5天,用多种浓度(O.5、1和2jiM)的prieurianin处理细月包以另外的5天,其后用油红0染色。从一式三份实验的代表中获得显微图像。在510nm处,分光光度法定量阳性染色细胞的异丙醇提取物,显示在右面的柱形图中。结果是一式三份实验的平均±S.E.。图9.星状孢菌素阻止prieurianin诱导的前脂肪细胞分化。在prieurianin(0.5、1和2jiM)中分化的前脂肪细胞一起用或不用200nM的星状孢菌素处理。显微图像显示了诱导后12天,油红0染色的细胞。图9A.未分化的;图9B.分化的;图9C.在2jiM的prieurianin中分化的;图9D.在2pM的prieurianin和200nM的星状孢菌素中分化的。柱状图显示了来自细胞的油红0染色异丙醇提取物对A510nm处的吸光度。结果是一式三份实验的平均±S.E.。图10.由前脂肪细胞和脂肪细胞,以及在正常小鼠血清中,脂连蛋白和PLTP的释放。用2jtiM的prieurianin处理前脂肪细胞(B和D),36小时后收集培养基用于前脂肪细胞(A和B)或者PLTP(C和D)的Western印迹分析。备选地,分化后5天,收集脂肪细胞的条件培养基(A和C)用于Western分析。E.给予prieurianin或托泊替康(0、2、5和10mg/kg)的正常C57BL/6J小鼠的血清通过Western印迹就PLTP进行分析。图11.细胞毒性和非细胞毒性药物反式激活PLTP启动子。在HepG2转基因细胞中,进行多种细胞毒性和非细胞毒性药物反式激活PLTP启动子的测量。结果是3次试验的平均S.E.。图12.制滴菌素A(TrichostatinA,TSA)对prieurianin反式激活PLTP启动子的作用。在存在或不存在200nMTSA时,prieurianin剂量反应激活PLTP启动子。结果是3次试验的平均S.E.。图13.在正常C45BL/6J或C57BL/6J瘦素缺失小鼠中,prieurianin处理对体重和食物才聂取的作用。图l4.在正常C57BL/6J或C57BL/6J瘦素缺失小鼠中,prieurianin处理对血清脂蛋白、PLTP活性和痩素水平的作用。图15.在c^/W和饮食诱导的肥胖Ceacs/z7+小鼠中,prieurianin的作用。图15A.对10只W/W和小鼠的组,每日i.p.给予3或5mg/kg的prieurianin以30天。图15B.对遗传糖尿病Cescayz/—^敲除小鼠饲喂高脂肪饮食以增肥4周,然后每日prieurianin处理(3或5mg/kg)21天。载体处理的M/W和Ceaca/z+小鼠给予等量的Captisol。结果是每组10只动物的平均S.E.。图16.在饮食诱导的肥胖C57B1/6J小鼠中,prieurianin的作用。对B6小鼠施以60%kcal的高脂肪饮食以大约15周,然后分成每组IO只,然后用1(绿色)或3(棕色)rag/kg的prieurianin每日腹腔内处理3周,并与未处理(蓝色)或载体处理(红色)的对照比较。图16A.在3周的处理期间,用prieurianin处理的小鼠与对照比较的平均体重变化。图16B.如在A中用prieurianin处理的B6小鼠的平均食物消耗。图16C.如在文中描述的,用prieurianin以"开-关,,循环时间表处理4个循环的B6小鼠中的平均体重变化。结果是每组10只动物,和3mg/kg组20只小鼠的平均S.E.。图17.用于克服药物诱导的耐受性的"开-关"或"循环"处理时间表。该处理策略包括处理的特定剂量用于处理的特定持续时间并伴以间歇药物休息期,能够克服在代谢病症和其他病症的治疗中药物诱导的耐受性、脱敏或缺乏反应。图18.在脂肪生成中,prieurianin对C/EBPa和p以及PPARY介导转录的作用。将对应于C/EBPa和p以及PPARy的反应元件克隆入pGL3碱性萤光素报告基因质粒。在存在或不存在克隆入表达栽体的响应转录因子的情况下,用报告基因质粒共转染Ll前脂肪细胞,其后用2nM的prieurianin处理。15-24小时后,收集细胞用于萤光素酶分析。结果是一式三份实验的平均土S.E.。图19.蟾蜍灵对前脂肪细胞分化以及脂肪细胞中的去分化/去脂的作用。诱导NIH-3T3/L1细胞进入分化并同时用1jiM的蟾蜍灵或2jiM的prieurianin处理。用尼罗红对分化的细胞染色。备选地,诱导前脂肪细胞进入分化,并且在分化后5天用1的蟾蜍灵或2pM的prieurianin处理细胞以另外的5天,其后用尼罗红染色。通过荧光显微镜检查来评估染色的细胞。优选实施方式的详细描述本系统提供了用于诱导PLTP基因表达的方法。本系统也提供了用于提高PLTP水平和调控反向胆固醇转运的方法。在另一方面中,提供了提高PLTP水平和调控反向胆固醇转运的的非毒性天然产物小分子。在秀丽隐杆线虫中siRM诱导的PLTP损失升高了脂肪储存。现在发现prieurianin反向激活PLTP基因表达,并且是拒食剂。在另一方面中,本文提供了使用prieurianin作为新型药学组合物用于探测脂肪生成的生物化学和生理学的方法。prieurianin诱导PLTP基因表达并有效降低体重和脂肪量。prieurianin也抑制前脂肪细胞的增殖和分化,并且引起脂肪细胞去分化或者阻止脂肪细胞积累脂质。源于prieurianin对06/06小鼠的脂肪细胞的作用,以及其对培养的前脂肪细胞和脂肪细胞的抗脂肪生成作用,本发明人认为PLTP是prieurianin对体重和脂肪量降低的抗脂肪生成作用所需要的在另一方面中,提供了使用prieurianin作为有效抗肥胖症药物的方法。在小鼠中测试其有效性,并且prieurianin显著降低总体重、脂肪和食物摄取。该药物也逆转小鼠的高血糖状态至与正常小鼠相当的水平。在另一个分子学研究中,认为prieurianin抑制前脂肪细胞的增殖,并且还阻止前脂肪细胞分化成脂肪细胞。Prieurianin能够引起脂肪细胞的去分化或者阻止脂肪细胞积累脂质。Prieurianin抑制前脂肪细胞的脂连蛋白释放,因此导致阻止前脂肪细胞分化成脂肪细胞。矛盾的是,尽管prieurianin诱导脂肪细胞中PLTP的分泌,但在前脂肪细胞中的PLTP释放不被抑制。在细胞培养研究中,prieurianin与托泊替康相比是相对无毒的(数据未显示),并且在实验的持续时间内在给予该药物的动物中,没有观察到明显的毒性。因此,prieurianin是具有靶向脂肪生成的抗肥胖症作用的天然产物小分子。在特定的实施方式中,本文显示prieurianin在肥胖症小鼠才莫型中具有对产生体重损耗的作用,具有通过抑制食欲以及另外的通过其在抑制前脂肪细胞的增殖和分化、引起脂肪细胞的去分化和去脂中的特别的药理学性质的多种潜在的致病机制。另外,本文显示prieurianin的分子机制据信是其通过激活NFkB信号传导通路和通过抑制C/EBPa和p以及PPARy介导的前脂肪细胞分化成脂肪细胞的转录激活,而抑制脂肪生成的转录调控的能力。现在通过如下非限制性的实施例示例说明上文描述的优点。实施例1-HepG2细胞对托泊替康的药理学反应研究通过表达基因组对拓朴异构酶(Top)l抑制剂的抗性的机制,通过进行时间过程和剂量反应时间,用DNA微阵列来研究人肝细胞母细胞瘤HepG2细胞对托泊替康的药理学反应,所述细胞用500nM的托泊替康(细胞毒性抗癌试剂)处理多种时间(0、1、3、5、10、15和24小时)或用多种剂量的托泊替康(0、10、50、100、300、500和1000nM)处理24小时。托泊替康诱导的整体基因表达变化是适度的,除了PLTP基因外,其他大多数基因表现出表达的低水平改变。图1中的结果显示了PLTP对托泊替康反应的时间过程(图1A)和剂量反应(图1B)表达的树状图。托泊替康对PLTP表达的激活是是时间调控和剂量依赖的,具有晚期开始,在24小时达到峰值约20倍诱导。通过Northern印迹分析独立地评估托泊替康诱导的PLTP表达,其显示托泊替康以剂量依赖方式诱导PLTP(图1C),与在微阵列研究中观察到的结果一致。PLTP基因表达的诱导是被托泊替康以转录方式调控,因为融合至萤光素酶报告基因的PLTP启动子被托泊替康以剂量依赖方式反式激活(图2A),印迹分析。因此,Topl抑制剂诱导培养中的HepG2细胞中(参见图1和2)以及小鼠体内的PLTP基因表达(数据未显示)。另外,本发明人在本文中显示PLTP用作肥胖症的生物标志物,并且在肥胖症的脂肪生成中具有重要作用。实施例2.筛选PLTP基因表达的天然产物小分子诱导物PLTP涉及反向胆固醇转运。而且,PLTP表达和活性与肥胖症相关。另外,通过RNA介导的干扰失活PLTP基因表达之后的秀丽隐杆线虫中脂肪储存的增加表明靶向PLTP的小分子可用于开发治疗肥胖症的药物。为确定非细胞毒性小分子是否能诱导PLTP表达,本发明人将PLTP-启动子萤光素酶报告基因亚克隆到含有新霉素(G418)抗性可选择标志物的栽体中,并通过稳定的基因转染和用G418的选择产生转基因HepG2细胞系,该细胞系具有PLTP-启动子萤光素酶报告基因。该转基因细胞系HepG2/PLTPpLuc显示出与用PLTP-启动子报告基因瞬时转染的HepG2细胞相似的托泊替康反应(图2B)。随后,用来自天然产物的小分子库来筛选该转基因细胞。Prieurianin显示出最强的PLTP启动子反向激活,并且显示出剂量依赖方式的PLTP诱导(图3A)。本发明人还发现星状孢菌素抑制prieurianin对PLTP启动子活性待反向激活,从而暗示prieurianin对PLTP表达转录调控被一种蛋白激酶所调控(图3B)。实施例3.prieurianin的抗肥胖症作用关于prieurianin的已知很少。其是一种柠檬苦素类化合物,也是一种天然产物拒食剂(anti-feedant),其在培养中的果蝇细胞中表现出抗20-羟基蜕皮酮的拮抗作用。在细胞培养研究中,该药物与托泊替康相比是相对地无细胞毒性。将prieurianin腹腔内施用至12-14周龄的正常C57BL/6J小鼠和遗传瘦素缺陷小鼠,每周2次(2或5mg/kg)以2周。对照接受等量注射的药物载体。每3天测量体重和食物摄取,并且在实验结束时收集血液样品。对于2或5mg/kg处理的瘦素缺陷oft/"小鼠在2周后,用prieurianin的处理产生多至10%总体重的剂量依赖式的下降(参见图13其中包含的表1)。另外,相对与未处理和载体处理对照,在5mg/kg处理组中也观察到多达50%的食物摄取的剂量依赖式下降。在正常C57BL/6J小鼠中也观察到适度的体重损失以及减少的食物摄取。这些结果说明所得的体重损失和食物摄取下降归因于prieurianin的拒食剂作用。实施例4.prieurianin的代谢作用肥胖症导致高血压、高血清胆固醇、低HDL胆固醇和高血糖症,从而潜在地导致心血管疾病的高风险。腹部肥胖症特别与代谢风险因子相关。瘦素缺陷小鼠是高血脂和高血糖的。为测试prieurianin是否改变除了食欲以外的代i射和内分泌参数,测量了血清脂质情况、胰岛素和糖水平。然而,在prieurianin处理和未处理正常对照以及。6/"小鼠中没有观察到三酸甘油酯的显著变化(数据未显示)。在正常未处理或载体处理小鼠中,用或不用prieurianin处理,胆固醇和HDL水平也保持相对不变(参见图14,其中含有表2)。相反,尽管适度,但在prieurianin处理的ob/ob小鼠中,总胆固醇水平显著降低。而且在prieurianin处理的ob/ob小鼠中的HDL水平,比未处理和载体处理动物中大约4氐2倍。用prieurianin处理也引起在正常C57BL/6J小鼠中血清PLTP活性的升高(图14)。矛盾的是,给予prieurianin的ob/ob小鼠显示出血清PLTP活性的降低,即使prieurianin激活了PLTP基因的表达(图3)。然而,在prieurianin处理的ob/ob小鼠中PLTP活性的降低与在人肥胖受试者在体重损失后报道的情况一致。在正常小鼠中,用prieurianin的处理引起瘦素水平下降,但这在ob/ob小鼠中不能如预期的那样检测到(图14)。ob/ob小鼠中的高血月旨症被逆转至与prieurianin(5mg/kg)处理的ob/ob小鼠中正常对照相当的水平(参见图4B)。在ob/ob小鼠中,prieurianin也引起胰岛素水平降低大约3-4倍(参见图4A)。然而,在正常C57BL/6J小鼠中,prieurianin处理不显著改变胰岛素和葡萄糖糖水平。脂解作用和脂肪酸调控通路中的紊乱在肥胖症病因学中是重要的。骨骼肌和脂肪组织摄取非酯化脂肪酸(NEFA)的改变是其在血浆总浓度的关键决定因素。如图4C所示,与正常C57BL/6J小鼠相比,痩素缺陷ob/ob小鼠中的NEFA水平更高。在正常小鼠中用prieurianin处理导致NEFA水平的降低。然而,在ob/ob小鼠中,施用prieurianin后只观察到NEFA水平的适度降低。实施例5.prieurianin对脂肪生成的作用为进一步检查prieurianin对正常C57BL/6J小鼠和ob/ob小鼠的肥胖的作用,我们测量了它们的内脏和皮下体脂。与未处理和载体处理的对照相比,prieurianin处理的ob/ob小鼠中总体脂显著下降大于50%(参见图5)。任何剂量prieurianin的都没有显著改变正常C57BL/6J小鼠的百分比体脂(数据未显示)。之前已经显示TNFa、IL-1(3、IFNy或TGFpi完全抑制培养中的前脂肪细胞分化成成熟的脂肪细胞,这与脂连蛋白释放的消失相伴。因为prieurianin显著减少ob/ob小鼠中皮下和内脏脂肪组织(参见图5),本发明人在细胞培养研究中检查了其对以下各项的作用(i)前脂肪细胞的增殖;(ii)前脂肪细胞分化成脂肪细胞;和(iii)对脂肪细胞的脂质积累的抑制或去分化的促进。如图6所示,prieurianin以剂量依赖方式抑制NIH-3T3/L1前脂肪细胞的增殖。2jiM的prieurianin在第7天观察到显著的抑制(50%)。为确定prieurianin对前脂肪细胞分化成脂肪细^^的作用,在开始诱导分化的同一时间,用或不用所述药物处理NIH-3T3/L1前脂肪细月包。我们发现prieurianin也以剂量依赖方式防止前脂肪细胞分化成脂质积累的脂肪细胞,在与未处理/未分化以及分化的对照相比,油红O染色的脂质积累脂肪细胞的数量显著减少是明显(参见图7A-C)。有趣的是,与前脂肪细胞相比,prieurianin处理的前脂肪细胞获得了十分不同的形态(图7C),并且没有如通过缺少膜联蛋白V结合至磷酯酰丝氨酸所示的差异诱导前脂肪细胞的细胞调亡(参见图7D)。在未处理或载体处理对照和药物处理的分化细胞之间的细胞数量是相对地相当的(数据未显示)。这些结果说明prieurianin抑制前脂肪细胞的增殖,也防止前脂肪细胞分化成成熟的脂肪细胞。为评估prieurianin是否对分化的脂肪细胞具有任何作用,使前脂肪细胞分化成脂肪细胞,然后进一步培养大约5天,之后用prieurianin处5里月旨肪细月包以另夕卜的5—6天,其后通过油红0染色用于脂质积累脂肪细胞的存在。在prieurianin处理的细胞(参见图8,下区)中观察到油红0染色的细胞数量的很大程度的剂量依赖式降低,而载体处理的细胞显示出与分化的对照相当数量的脂质阳性染色细胞。当用油红0染色A510吸光度定量时,我们显示在2nM的prieurianin,脂质阳性细胞几乎没有或者其数量降低到与未分化对照相当的水平(参见图8,右边的柱状图)。这些结果还暗示,除了抑制前脂肪细胞增殖和阻止其分化,prieurianin也作用于分化的成熟脂肪细胞,这是通过引起其去分化或抑制其脂质的积累。实施例6.星状孢菌素部分地逆转prieurianin对分化的抑制prieurianin对PLTP的反向激活可被星状孢菌素所阻止(参见图3B),星状孢菌素是"常规,,蛋白激酶C(PKC)异构酶的有效抑制剂。我们也显示prieurianin对PLTP的转录方式激活抑制前月旨肪细胞分化(参见图7)。为评估通过星状孢菌素抑制prieurianin介导的PLTP反向激活是否逆转对分化的阻止,在存在prieurianin(0、0.5、1和2nM)同时有或没有200nM的星状孢菌素情况下诱导前脂肪细胞的分化。与上述结果相一致(参见图7),在没有星状孢菌素情况下,2fiM的prieurianin几乎完全抑制前脂肪细胞分化(参见图9C)。在分化豫导的同时加入星状孢菌素部分地逆转prieurianin产生的抑制(参见图9D),而单独的星状孢菌素没有显示出可观察到的对分化的作用(数据未显示)。通过监视油红0染色的前脂肪细胞的异丙醇提取物的AM。吸光度来验证这些结果。Prieurianin以剂量依赖方式抑制前脂肪细胞分化,并且该抑制被星状孢菌素部分地逆转(参见图9,柱状图)。因此,本发明人现在认为暗示prieurianin谦导的PLTP表达是抑制前脂肪细胞分化所需要的。实施例7.prieurianin对脂肪因子(adipokine)和PLTP分泌的作用脂肪组织含有多种类型的细胞,其中包括前脂肪细胞和脂肪细胞。而且,前脂肪细胞分泌涉及其自身分化的因子。一旦分化,成熟的脂肪细胞获得通过分泌瘦素和脂连蛋白远距离与其他器官(包括脑、肝和骨骼肌),局部与其他细胞(例如前脂肪细胞、内皮细胞和单核细胞/巨噬细胞)通讯的能力。另外,抗脂肪生成细胞因子阻止前脂肪细胞的脂连蛋白释放。因此,评估了前脂肪细胞和脂肪细胞的脂连蛋白和PLTP的生产。在用prieurianin处理后大约36小时,观察对前脂肪细胞释放脂连蛋白进入条件培养基的抑制(参见图10B)。托泊替康诱导PLTP的表达(参见图10),其也显著地抑制NIH-3T3/L1前脂肪细胞产生脂连蛋白(图10B)。这些结果与之前的报道相一致,即对前脂肪细胞分化的阻止伴随对脂连蛋白释放的抑制。另外,prieurianin而不是托泊替康诱导在分化的脂肪细胞中脂连蛋白的高分子量形式的产生和释放,以及总脂连蛋白分泌的适度增加(参见图10A)。也评估了前脂肪细胞和脂肪细胞的PLTP的表达和分泌。因此,前脂肪细胞产生和分泌PLTP的低和高分子量形式,而脂肪细胞仅分泌低分子量形式进入条件培养基(参见图10C和10D)。意外的是,在用托泊替康或prieurianin处理前脂肪细胞后,降低PLTP低分子形式的释放,而没有降低其高分子形式的释放(参见图10D)。相反,托泊替康或prieurianin仅诱导脂肪细胞中低分子量形式释放的增加(参见图10C)。前脂肪细胞和脂肪细胞之间PLTP释放的这些不同概况暗示对prieurianin药理学作用的复杂内源性生理学反应。实施例8.prieurianin和托泊替康处理后的血清PLTP蛋白水平在微阵列分析中对托泊替康的时间过程和剂量反应研究显示PLTP是在所述药物处理后大约12-15小时开始诱导的晚期基因(参见图10A)。Prieurianin对PLTP反式激活的开始与托泊替康的作用相似。prieurianin或托泊替康(0、2、5和10mg/kg)对PLTP基因表达的诱导伴随血清PLTP蛋白水平的升高(参见图10E)。实施例9.-prieurianin对PLTP的反式激活在小鼠中对体重降低和肥胖的药理学抑制检查在正常和ob/ob小鼠中,在肥胖方面星状孢菌素对prieurianin的药理学抑制。PKC激活物,12-0_十四酰佛波-13-乙酯(TPA)诱导PLTP启动子(参见图11),并且该激活被PKC抑制剂星状孢菌素消除。本发明人认为PKC信号传导通路参与PLTP表达的转录调控。这些结果也表明prieurianirH秀导的PLTP启动子活性^皮星状孢菌素所抑制(参见图3B)。另外,prieurianin对前脂肪细胞分化的抑制被星状孢菌素部分地逆转(参见图9),进一步指出PKC在PLTP的反式激活和prieurianin对分化的抑制中的潜在作用。因为prieurianin对PLTP的反式激活被星状孢菌素所阻止,这些结果表明prieurianin诱导的体重损失和脂肪生成的抑制可通过共施用星状孢菌素来取消或逆转。实施例10.-在脂肪生成方面,星状孢菌素对prieurianin诱导的PLTP表达的药理学抑制脂肪生成转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体-Y(PPARy)以及CCAAT/增强子结合蛋白a和p(C/EBPa和P)在脂肪生成过程中发生的复杂的转录级联中起到重要作用。PPARy和RB之间的相互作用通过招募组蛋白脱酰基酶HDAC3降低PPARy的转录活性。抑制HDAC活性随后造成PPARY的强激活。已经显示丙戊酸在小鼠和NIH-3T3/L1前脂肪细胞中抑制脂连蛋白基因表达,并且降低C/EBPa蛋白水平及其与脂连蛋白启动子的结合。因为prieurianin是PLTP的转录激活物,本发明人认为所述药物的一些药理学作用被这些转录因子所影响。如图12所示,HDAC抑制剂制滴菌素A(TSA)尽管是适度地,增强prieurianin对PLTP启动子活性的反式激活,从而表明PPAR在prieurianin的转录调控中具有作用。这些初步的结果也显示星状孢菌素(一种PKC抑制剂)强烈地抑制prieurianin对PLTP的反式激活(参见图3B),并且也逆转prieurianin对前脂肪细胞增殖和分化的抑制(参见图6和7)。尽管prieurianin和内皮缩血管肽1对前脂肪细胞分化的抑制有某些相似性,但星状孢菌素对prieurianin和内皮缩血管肽1的药理学作用是不同的,从而说明prieurianin和内皮缩血管肽1可能通过不同的通路抑制前脂肪细胞分化。实施例11.-prieurianin的抗肥胖症作用在3个另外的肥胖症小鼠;f莫型中测试prieurianin的作用,3个模式包括遗传高胰岛素血型瘦素受体缺陷db/db、Ceacam-/-糖不耐性/糖尿病、以及々大食诱导肥胖小鼠。将prieurianin腹腔内(i.p.)施用至12-14周龄的db/db小鼠,每日3或5mg/kg,30天。对饮食诱导肥胖Ceacam-Z-糖尿病小鼠饲喂高脂肪饮食4周,从而增肥,其后prieurianin处理(3或5mg/kg)3周。栽体处理组接受等量注射的Captisol(CyDexInc.,Lenexa,KS)。每3天测量体重和食物揭^取,在实验结束时收集血液样品。在prieurianin处理的db/db小鼠中没有观察到体重损失,但我们发现与未处理或载体处理对照,在3周内体重获得显著减少50%(参加图15A)。在饮食诱导的肥胖06&0&111-/-糖尿病小鼠中,与对照相比prieurianin处理的动物中观察到大约20-26%的体重损失(参见图15B),伴随>50%减少的食物摄取(数据未显示)。在3rag/kg处理组中,体重恢复到增肥前水平。由于严重的体重损失和未知毒性,在处理后14天对给予5mg/kg的小鼠实施安乐死。在这些小鼠的尸体检查中观察到,相对于对照的极少皮下或内脏脂肪(数据未显示)。密集的高卡路里饮食,伴随久坐生活方式在全世界的流行造成了肥胖症发生率的急剧升高。为了进一步测试prieurianin在肥胖症中的功效,还研究了其在饮食诱导的肥胖(DIO)C57BL/6J(B6)小鼠模型中的作用。对B6小鼠饲喂60%kcal的高脂肪饮食大约15周,从而增加体重,然后用1或3mg/kg的prieurianin腹腔内每日处理3周。在处理期间,小鼠自由采食60%kcal的饮食。这些结果显示在7天的处理期间剂量依赖方式诱导了多至10%总体重的体重损失(参见图16A),并伴随70-80%的食物消耗下降,在3周治疗的结束时最终几乎恢复到正常水平(参见图16B)。然而,在2周后,达到的体重损失后是体重的逐渐增加。这些结果暗示prieurianin处理的小鼠可能产生了对所述药物的耐受性。为防止药物诱导的耐受性这一问题,开发了新的方法,其中对DIO小鼠停止prieurianin处理,该小鼠继续维持在高脂肪60。/。kcal饮食。4周后,用以下方法再次处理该小鼠3mg/kg的prieurianin处理5天,然后是5天的药物休息期(无处理),重复该处理3个循环或更多;或者5mg/kg的prieurianin处理3天,然后是5天的药物休息期,重复该处理3个循环或更多。观察到这种"开-关"处理策略(参见图17)似乎克服了药物诱导的耐受性,并且导致更明显的反应,3或5mg/kg的prieurianin处理导致多至20%的体重下降,并且在接近研究结束时没有观察到体重的升高(图16C)。食物消耗下降了大约40%,并且在循环处理方法的持续时间内保持不变(图16B)。这些结果说明每日药物处理产生的药物有效性的损失可以通过这种新型的循环或开关处理方法来克服,该方法产生了更大的反应以及体重损失的维持,从而防止了药物诱导的耐受性。本发明人认为食欲抑制性抗肥胖症药物(包括曲美(Meridia))和其他抗肥胖症药物可能在经过延长的处理时程后损失其有效性,并且因为对破坏能力代谢的药物治疗反应的补偿性生理激素变化而遭遇耐受性。该新型循环或开关处理方法是一种提高抗肥胖症药物的功效的方式,并且可用于一般代谢病症和其他人类病症的处理。实施例12.-prieurianin的作用才几制prieurianin抑制前脂肪细胞的增殖和分化,也引起脂肪细胞的去分化或去脂作用。为查明prieurianin的分子机制,评价了prieurianin对脂肪生成的转录调控作用。如图18所示,prieurianin诱导来自NFkB反应元件介导的转录的反式激活,但抑制C/EBPa和(3以及PPARy的反式激活潜力(参见图18)。这些报告基因分析从而用于进一步筛选可能是prieurianin的化学类似物或其靶向调控脂肪生成的这些转录过程的相关小分子的家族。因此,用于促进诱导NFkB介导的转录通路或者引起抑制通过C/EBPa和p以及PPARy的转录(重要地调控脂肪生成)的小分子的高通量筛选是用于鉴定有效的新型抗肥胖症药物的创新方法。实施例13.-蟾蜍灵和prieurianin对脂肪生成的作用强心类类固醇,蟾蜍灵如prieurianin刺激PLTP启动子,但不抑制前脂肪细胞分化,而且既不引起脂肪细胞去分化或去脂作用(参见图19)也不调节NFkB、C/EBPa和卩以及PPARy的转录活性(数据未显示)。这些结果表明prieurianin在脂肪生成中作用的特异性,并进一步表明prieurianin及其衍生物的药效团在脂肪生成中的特定作用。实施例14.-用途和/或适应症的非限制性实施例在另一方面,本文提供了用于在受试者中预防或治疗肥胖症的方法,该方法包括对受试者施用治疗有效量的prieurianin。在某些实施方式中,所述受试者需要这种治疗或预防。在另一方面,本文提供了用于在受试者皮下脂肪组织内下调PLTP表达的方法,起包括对所述受试者施用治疗有效量的prieurianin。在另一方面,本文提供了用于在哺乳动物中改善或预防脂肪生成的方法,起包括对所述哺乳动物施用治疗有效量的prieurianin及其衍生物。当脂肪生成于疾病相关时,也可使用本文所公开的方法。另外,可通过任何合适的方式实现上述方法,其中包括但不局限于通过注射、口服或皮下注射入脂肪组织来施用。在某些实施方式中,预防脂肪生成实质上减少脂肪组织量。实施例15.-体内刺激NFKB信号传导通路在另一方面,本文提供了用于对有此需要的受试者在体内刺激NFKB信号传导通路的方法,其包括对所述受试者施用prieurianin以诱导减少体重和/或肥胖。在另一方面,本文提供了用于篩选柠檬苦素类化合物或者其他小分子实体或模拟物的NFkB反应元件报告系统。在另一方面,本文提供了筛选一种或多种小分子实体或模拟物的方法,其包括使用NFKB反应元件报告系统。在某些实施方式中,所述分子实体或模拟物包括一种或多种柠檬苦素类化合物。另外在某些实施方式中,就在诱导减少体重和/或肥胖中的功效篩选所述柠檬苦素类化合物。实施例16.-通过天然启动子的体内反应元件在另一方面,本文提供了用于抑制一种或多种C/EBPa和p以及PPARy介导的转录激活的方法,其包括通过天然启动子在体内使用一种或多种反应元件。在另一方面,本文提供了筛选用于诱导减少体重和/或肥胖的小分子实体的方法,其包括通过天然启动子在体内使用一种或多种反应元件来抑制一种或多种C/EBPa和p以及PPARy介导的转录激活。实施例U.-转录因子的反应元件在另一方面,本文提供了用于抑制一种或多种C/EBPa和卩以及PPARY介导的转录激活的方法,其包括使用含有所述转录因子的反应元件的反应元件驱动的才艮告系统。在另一方面,本文提供了筛选用于诱导减少体重和/或肥胖的小分子实体的方法,其包括通过使用含有所述转录因子的反应元件的反应元件驱动的报告系统来抑制一种或多种C/EBPa和p以及PPARy介导的转录激活。实施例18.-在分化的成熟脂肪细胞中去分化和/或抑制脂质积累在另一方面,本文提供了用于在分化的成熟脂肪细胞中引起去分化或抑制脂质积累的方法,所述方法包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。实施例19.-克服药物诱导的耐受性在另一方面,本文提供了通过以"开-关,,或"循环,,方案施用所述药物用于克服药物诱导的耐受性的方法,所述方法包括以特定的剂量对所述受试者施用所述药物以第一特定持续时间,停止施用所述药物以第二特定持续时间,然后,恢复施用所述药物以一个或多个特定持续时间,以及如果需要,重复所述方案。在某些实施方式中,所述方法用于治疗肥胖症。另外在某些实施方式中,所述药物包括prieurianin。实施例20.-药物治疗的最大反应在另一方面,本文提供了用于治疗其中延长药物治疗导致功效降低、缺少反应、脱敏或耐受性的人类中的任何疾病的方法,以从所述药物治疗中获得最大反应。在某些实施方式中,本文所述的方法特别用于预防脂肪生成实质上减少脂肪组织量。另外,在具体的实施方式中,本文公开的方法用于脂肪生成是与疾病相关的主题。在某些实施方式中,本文公开的方法用于药物递送施用是通过注射。在某些实施方式中,本文公开的方法用于药物递送施用是通过口服。在某些实施方式中,本文公开的方法用于药物递送施用是通过皮下注射入脂肪组织。在某些实施方式中,本文公开的方法用于药物递送施用是通过皮肤方式应用在脂肪组织周围。实施例21.-配置含有prieurianin的组合物在另一方面,本文提供了用于配置含有prieurianin或其衍生物的组合物的方法,其包括将所述组合物溶解在乳浮或Captisol中。在某些实施方式中,所述组合物包含prieurianin或其衍生物。另外,在某些实施方式中,配置所述组合物以用于对有此需要的受试者施用,并且其中所述组合物包括所述组合物的预摄取形式。在具体实施方式中,配置所述组合物以用于对有此需要的受试者施用,并且其中所述组合物在体内形成药学活性代谢物。尽管通过参考多种以及优选实施方式描述本发明,但本领域技术人员应当理解可产生多种变化,并且等同物可以替换其元件而不脱离本发明的实质范围。另外,可产生多种修改以适应具体的介导或材料从而教授本发明而不脱离其实质范围。因此,本发明旨在不受限于本文公开的、用于实施本发明的具体实施方式,而是本发明包括落入其权利要求书中的所有实施方式。参考文献1.Mercer,J.G.(2001)Dietaryandgeneticinfluencesonsusceptibilityorresistancetoweightgainonahighfatdiet.NutrMetabCardiovascDis,11,114-7.2.Muoio,D.M.andNewgard,C.B.(2006)Obesity-relatedderangementsinmetabolicregulation.AnnuRevBiochem,75,367-401.3.Blackburn,G.L.andWaltm叫B.A.(2005)Pharmacotherapytoreducevisceralfat.ClinCornerstone,7,52-60.4.Riches,F.M.,Watts,G.F.,Naoumova,R.P.,Kelly,J.M.,Croft,K.D.andThompson,G.R.(1998)Hepaticsecretionofvery-low-densitylipoproteinapolipoproteinB-100studiedwithastableisotopetechniqueinmenwithvisceralobesity.IntJObesRelatMetabDisord,22,414-23.5.Campfield,L.A.,Smith,F丄,Guisez,Y.,Devos,R.andBurn,P.(1995)RecombinantmouseOBprotein:evidenceforaperipheralsignallinkingadiposityandcentralneuralnetworks.Science,269,546-9.6.Halaas,J丄.,Gajiwala,K.S.,Maffei,M.,Cohen,S.L.,Chait,B.T.,Rabinowitz,D"Lallone,R丄"Burley,S,K.andFriedman,J.M.(1995)Weight-reducingeffectsoftheplasmaproteinencodedbytheobesegene.Science,269,543-6.7.PeJJeymounter,M.A.,Cullen,M丄,Baker,MB.,Hecht,R.,Winters,D.,Boone,T-andCollins,F.(1995)Effectsoftheobesegeneproductonbodyweightregulationinob/obmice.Science,269,540-3.8.Zhang,Y"Proenca,R"Maffei,M"Barone,M.,Leopold,L,andFriedman,J.M.(1994)Positionalcloningofthemouseobesegeneanditshumanhomologue.Nature,372,425-32.9.Kobayashi,K.(2005)Adipokines:therapeutictargetsformetabolicsyndrome.CurrDrugTargets,6,525-9.10.Rondinone,C.M,(2006)Adipocyte-derivedhormones,cytokines,andmediators.Endocrine,29,81-90.,11.Trayhurn,P.,Bing,C.andWood,I,S.(2006)Adiposetissueandadipokines—energyregulationfromthehumanperspective.JNutr,136,1935S-1939S.12.Nedvidkova,J.,Smitka,K-,Kopsky,V.andHainer,V.(2005)Adiponectin,anadipocyte-derived'protein.PhysiolRes,54,133-40.13.Havel,P丄(2000)Roleofadiposetissueinbody-weightregulation:mechanismsregulatingleptinproductionandenergybalance.ProcNutrSoc,59,359-71.14.Cancello,R.,Tounian,A.,Poitou,C.andClement,K.(2004)Adipositysignals,geneticandbodyweightregulationinhumans.DiabetesMetab,30,215-27.15.Trayhurn,P.andBeattie,J.H.(2001)Physiologicalroleofadiposetissue:whiteadiposetissueasanendocrineandsecretoryorgan.ProcNutrSoc,60,329-39.16.Hoist,D.andGrimaldi,P.A.(2002)Newfactorsintheregulationofadiposedifferentiationandmetabolism.CurrOpinLipidol,13,241-5.o17.Guerre-Millo,M.(2004)Adiposetissueandadipokines:forbetterorworse.DiabetesMetab,30,13-9.18.Matsuzawa,Y.,Funahashi,T.,Kihara,S.andShimomura,I.(2004)Adiponectinandmetabolicsyndrome.ArteriosclerThrombVaseBiol,24,29-33.19.Goldstein,B.J.andScalia,R.(2004)Adiponectin:AnoveladipokinelinkingadipocytesandvascularfUnction.JTClinEndocrinolMetab,89'2563-8.20.Rabin,K.R.,Kamari,Y.,八vni,I.,Grossman,E.andSharabi,Y.(2005)Adiponectin:inkingthemetabolicsyndrometoitscardiovascularconsequences.ExpertRevCardiovascTher,3,465-71-21.Maeda,K"Okubo,K"Shimomura,L,Funahashi,T.,Matsuzawa,Y.andMatsubara,K.(1996)cDNAcloningandexpressionofanoveladiposespecificcollagen-likefactor,apMl(AdiPoseMostabundantGenetranscript1).BiochemBiophysResCommun,221,286-9.22.Takahashi,M.,Arita,Y"Yamagata,K.,Matsukawa,Y.,Okutomi,K.,Horie,M.,Shimomura,I.,Hotta,K.,Kuriyama,H"Kihara,S,etal.(2000)Genomicstructureandmutationsinadipose-specificgene,adiponectin.IntJObesRelatMetabDisord,24,861-8.23.Arita,Y.,Kihara,S"Ouchi,N.,Takahashi,,M.,Maeda,K.,Miyagawa,J"Hotta,K.,Shimomura,I.,Nakamura,T.,Miyaoka,K.etal.(1999)Paradoxicaldecreaseofanadipose-specificprotein,adiponectin,inobesity.BiochemBiophysResCommun,257>79-83.24.Haluzik,M.,Parizkova,J.andHaluzik,M,M.(2004)Adiponectinanditsroleintheobesity-inducedinsulinresistanceandrelatedcomplications.PhysiolRes,53,123-9.25.Shimada,K.,Miyazaki,T,andDaida,H.(2004)Adiponectinandatheroscleroticdisease.ClinChimActa,344,1-12.26.Haluzik,M.andHaluzikova,D.(2006)Theroleofresistininobesity-inducedinsulinresistance.CurrOpinInvestigDrugs,7,306-11.27.Sethi,J.K.andVidal-Puig,A.(2005)Visfathi:themissinglinkbetweenintraabdominalobesityanddiabetesTrendsMolMed,11,344-7.28.Hotamisligil,G.S,(1999)TheroleofTNFalphaandTNPrec印torsinobesityandinsulinresistance.JInternMed,245,621-5.29.Cianflone,K.(1997)Acylationstimulatingproteinandtheadipocyte.JEndocrinol,155,203-6.30,Dullaart,R.P.,Sluiter,W丄,Dikkeschei,L.D.,Hoogenberg,K.andVanTol,A.(1994)Effectofadiposityonplasmalipidtransferproteinactivities:apossiblelinkbetweeninsulinresistanceandhighdensitylipoproteinmetabolism.EurJClinInvest,24,188-94.31.Dullaart,R.P.,DeVries,R.,Scheek,L.,Borggreve,S.E.,VanGent,T.,Dallinga-Thie,G.M"Ito,M.,Nagano,M.,Sluiter,W丄,Hattori,H-etal.(2004)Type2diabetesmellitusisassociatedwithdifferentialeffectsonplasmacholesterylestertransferproteinandphospholipidtransferproteinactivitiesandconcentrations.ScandJClinLabInvest,64,205-15.32.Duvillard,L.,Pont,F.,FIorentin,E.,Galland-Jos,C.,Gambert,P.andVerges,B.(2000)MetabolicabnormalitiesofapolipoproteinB-containinglipoproteinsinnon-insulin-dependentdiabetes:astableisotopekineticstudy.EurJClinInvest,30,685-94.33.Kaser,S.,Laimer,M.,Sandhofer,A.,Salzmann,K.,Ebenbiehler,C.F.andPapch,J.R.(2004)EffectsofweightlossonPLTPactivijtyandHDLparticlesize.IntJObesReJatMetabDisord,28,1280-2.34.Albers,J丄andCheung,M.C.(2004)Emergingrolesforphospholipidtransferproteininlipidandlipoproteinmetabolism.CurrOpinLipidol,15,255-60.35.Groen,A.K.,OudeElferink,R.P.,Verkade,H丄andKuipers,F.(2004)Theinsandoutsofreversecholesteroltransport.AnnMed,36,135-45.36.Tu,A.Y.,Deeb,S.S.,Iwasaki,L.,Day,J.R.andAlbers,J丄(1995)Organizationofhumanphospholipidtransferproteingene.BiochemBiophysResComm叫207,552-8.37.Whitnaore,T.E.,Day,J.R.andAlbers,J丄(1995)Localizationofthehumanphospholipidtransferproteingenetochromosome20ql2-ql3丄Genomics,28,599-600.38.Day,J.R.,Albers,J丄,Lofton-Day,C.E.,Gilbert,T,L.,Ching,A.F.,Grant,F丄,O'Hara,P.J.,Marcovina,S.M.andAdolphson,J丄.(1994)CompletecDNAencodinghumanphospholipidtransferproteinfromhumanendothelialcells.JBiolChem,269,9388-91.39.Albers,J丄,Tu,A.Y.,Wolfbauer,G.,Cheung,M.C.andMarcovina,S.M.(1996)Molecularbiologyofphospholipidtransferprotein.CurrOpinLipidol,7,88-93.40.Dusserre,E.,Moulin,P.andVidal,H.(2000)DifferencesinmRNAexpressionoftheproteinssecretedbytheadipocytesinhumansubcutaneousandvisceraladiposetissues.BiochimBiophysActa,1500,8896.41.Linder,K.,Amer,P.,Flores-Morales,A.,Tollet-Egnell,P.andNorstedt,G.(2004)Differentiallyexpressedgenesinvisceralorsubcutaneousadiposetissueofobesemenandwomen.JLipidRes,45,148-54,42.Bingle,C.D.andCraven,C丄(2004)Meettherelatives:afamilyofBPI-andLBP-relatedproteins.TrendsImmunol,25,53-5.43.Be咖er,L.J.,Carroll,S.F.andEisenberg,D.(1997)CrystalstructureofhumanBPIandtwoboundphospholipidsat2.4angstromresolution.Science,276,1861-4.44.Huuskonen,J.,Wohlfahrt,G.,Jauhiainen,M.,Ehnholm,C.,Teleman,O.andOIkkonen,V,M.(1999)StructureandphospholipidtransferactivityofhumanPLTP:analysistiymolecularmodelingandsitedirectedmutagenesis.JLipidRes,40,1123-30.45.Ponsin,G.,Qu,S.J.,Fan,H.Z.andPownall,H丄(2003)Structuralandfunctionaldeterminantsofhumanplasmaphospholipidtransferproteinactivityasrevealedbysite-directedmutagenesisofchargedaminoacids.Biochemistry,42,4444-51.46.Tall,A.R.,Kruraholz,S.,Olivecrona,丁.andDeckebaum,R丄(1985)Plasmaphospholipidtransferproteinenhancestransferandexchangeofphospholipidsbetweenverylowdensitylipoproteinsandhighdensitylipoproteinsduringlipoysis.JLipidRes,26,842-51.47.Havel,R丄,Kane,J.P.andKashyap,M.L.(1973)Interchangeofapolipoproteinsbetweenchylomicronsandhighdensitylipoproteinsduringalimentarylipemiainman.JClinInvest,52,32-8.48.Albers,J,J.,Tollefson,J.H.,Chen,C.H.andSteinmetz,A.(1984)Isolationandcharacterizationofhumanplasmalipidtransferproteins.Arteriosclerosis,4,49-58.49.Huuskonen,J.,OIkkonen,V.M.,Jauhiainen,M.,Metso,J.,Somerharju,P.andEhnholm,C.(1996)Acylchainandheadgroupspecificityofhumanplasmaphospholipidtransferprotein.BiochimBiophysActa^1303,207-14.50.Rao,R.,Albers,J丄,Wolfbauer,G.andPownall,H丄(1997)Molecularandmacromolecularspecificityofhumanplasmaphospholipidtransferprotein.Biochemistry,36,3645-53.51.Nishida,H.I.andNishida,T.(1997)Phospholipidtransferproteinmediatestransferofnotonlyphosphatidylcholinebutalsocholesterolfromphosphatidylcholine-cholesterolvesiclestohighdensitylipoproteins.JBiolChem,272,6959-64.52.Tu>A.Y.,Nishida,H.LandNishida,T.(1993)Highdensitylipoproteinconversionmediatedbyhuman,plasmaphospholipidtransferprotein.JBiolChem,268,23098-105.53.Jauhiainen,M.,Metso,J.,Pahlman,R.,Blomqvist,S"vanTol,A.andEhnhohn,C.(1993)Humanplasmaphospholipidtransferproteincauseshighdensitylipoproteinconversion.JBiolChem,268,4032-6.54.Pussinen,P.,Jauhianinen,M.,Metso,J.,Tyynela,J.andEhnl)ohn,C.(1995)PigplasmaphospholipidtransferproteinfacilitatesHDLinterconversion,JLipidRes:36,975-85.55.Jiang,X.C.,Bruce,C.,Mar,J.,Lin,M.,Ji,Y.,Francone,O.L,andTdl,A.R.(1999)Targetedmutationofplasmaphospholipidtransferproteingenemarkedlyreduceshigh-densitylipoproteinlevels.JClinInvest,103,907-14.56.Foger,B.,Santamarina-Fojo,S.,Shamburek,R.D.,Parrot,C,L.,Talley,G.D.andBrewer,H.B.,Jr.(1997)Plasmaphospholipidtransferprotein.Adenovirus-mediatedoverexpressioninmiceleadstodecreasedplasmahighdensitylipoprotein(HDL)andenhancedhepaticuptakeofphospholipidsandcholesterylestersfromHDL.JBiolChem,272,27393-400.57.Ehnholm,S.,vanDijk,K.W.,van'tHof,B.,vanderZee,A.,Olkkonen,V.M.,Jauhiainen,M.,Ho汰er,M.,Havekes,L.andEhnholm,C.(1998)AdenovirusmediatedoverexpressionofhumanphospholipidtransferproteinaltersplasmaHDLlevelsinmice.JLipidRes,39,1248-53.58.Yamashita,S.,Sakai,N.,Hirano,K.,Ishigami,M.,Maruyama,T.,Nakajima,N.andMatsuzawa,Y,(2001)Rolesofplasmalipidtransferproteinsinreversecholesteroltransport.FrontBiosci,6,D366-87.59.Jiang,X.,Francone,O丄.,Bruce,C.,Milne,R.,Mar,J.,Walsh,A.,Breslow,J丄.andTall,A.R.(1996)Increasedprebeta-highdensitylipoprotein,apolipoproteinAI,andphospholipidinmiceexpressingthehumanphospholipidtransferproteinandhumanapolipoproteinAItransgenes.JCHnInvest,98,237380.60.vanHaperen,R,,vanTol,A.,Vermeulen,P.,Jauhiainen,M"vanGent,T"vandenBerg,P.,Ehnholm,S.,Grosveld,F.,vanderK咖p,A.anddeCrom,R.(2000)Humanplasmaphospholipidtransferproteinincreasestheantiatherogenicpotentialofhighdensitylipoproteinsintransgenicmice:ArteriosclerThrombVaseBiol,20,1082-8.61.Dullaart,R.P.andvanTol,A.(2001)Roleofphospholipidtransferproteinandprebeta-highdensitylipoproteinsinmaintainingcholesteroleffluxfromFu5AHcellstoplasmafrominsulin-resistantsubjects.ScandJClinLabIn'vest,61,69-74.62.Jiang,X,C.,Qin,S.,Qiao,C.,Kawano,K,,Lin,M.,Skold,A.,Xiao,X.andTall,A.R.(2001)ApplipoproteinBsecretionandatherosclerosisaredecreasedinmicewithphospholipid-transferproteindeficiency.NatMed,7,847-52.63.Albers,J.J.,Tu,A.Y.,Paigen,B.,Chen,H.,Cheung,M.C.andMarcovina,S.M.(1996)TransgenicmiceexpressinghumanphospholipidtransferproteinhaveincreasedHDL/ncm-HDLcholesterolratio.IntJClinLabRes,26,262-7.64.Schlitt,A.,Bickel,C.,Thumma,P.,Blankenberg,S.,Rupprecht,H.J.,Meyer,J.andJiang,X.C.(2003)Highplasmaphospholipidtransferproteinlevelsasariskfactorforcoronaryarterydisease.ArteriosclerThrombVaseBiol,23,1857-62.65.Lie,J.,deCrom,R.,vanGent,T.'vanHaperen,R.,Scheek,L.,Sadeghi-Niaraki,F.andvanTol,A.(2004)ElevationofplasmaphospholipidtransferproteinincreasestheriskofatherosclerosisdespitelowerapolipoproteinB-containinglipoproteins.JLipidRes,45,805-11.66.Yang,XJP.,Yan,D.,Qiao,C,Liu,R丄,Chen,J.G.,Li,J.,Schneider,M.,Lagrost,L.,Xiao,X.andJiang,X.C.(2003)IncreasedatheroscleroticlesionsinapoEmicewithplasmaphospholipidtransferproteinoverexpression.ArteriosclerThrombVaseBiol,23,1601-7..67.Lie,J.,Moerland,M.,vanGent,T.,vanHaperen,R.,Scheek,L.,Sadeghi-Niaraki,F.,deCrom,R.andvanTol,A.(2006)Sexdifferencesinatherosclerosisinmicewithelevatedphospholipidtransferproteinactivityarerelatedtodecreasedplasmahighdensitylipoproteinsandnottoincreasedproductionoftriglycerides.BiochimBiophysActa,1761,1070-7.68.vanHaperen,R.,vanTol,A.,vanGent,T.,Scheek,L.,Visser,P.,vanderKamp,A"Grosveld,F.anddeCrom,R.(2002)Increasedriskofatherosclerosisbyelevatedplasmalevelsofphospholipidtransferprotein.JBiolChem,277,48938-43.69.vanTol,A,(2002)Phospholipidtransferprotein-CurrOpinLipidol,13,135-9.70.Murdoch,S丄,Carr,M.C.,Hokanson,J.E.,Brunzell,J.D.andAlbers,J.J,(2000)PLTPactivityinpremenopausalwomen.Relationshipwithlipoproteinlipase,HDL,LDL,bodyfat,andinsulinresistance.JLipidRes,41,237-44.71.Kaser,S.,Sandhofer,A.,Foger,B.,Ebenbichler,C.F.,Igelseder,B.,Malaimare,L.,Paulweber,B.andPatsch,J.R.(2001)Influenceofobesityandinsulinsensitivityonphospholipidtransferproteinactivity.Diabetologia,44,1111-7,72.Cheung,M.C.,Knopp,R.H.,Retzlaff,B.,Kennedy,H.,Wolfbauer,G.and.Albers,J丄(2002)AssociationofplasmaphospholipidtransferproteinactivitywithIDLandbuoyantLDL:impactofgenderandadiposity.BiochimBiophysActa,'1587,53-9.73.Murdoch,S丄,Kahn,S.E.,Albers,J丄,Brunzell,J.D.andPurneH,J.Q.(2003)PLTPactivitydecreaseswithweightloss:changesinPLTPareassociatedwithchangesinsubcutaneousfatandFFAbutnotIAForinsulinsensitivity.JLipidRes,44,1705-12.74.Lee,J.H.,Reed,D,R.,Li,W.D.,Xu,W.,Joo,E丄,Kilker,R丄.,Nanthakumar,E.,North,M.,Sakui,H.,Beii,C-etal.(1999)Genomescanforhumanobesityandlinkagetomarkersin20ql3.AmJHumGenet,64,196-209.75.Norman,R.A.,Tataranni,P.A.,Pratley,R.,Thompson,D.B.'Hanson,R丄.,Prochazka,M.,Baier,L.,Ehm,M.G.,Sakul,H.,Foroud,T.etal.(1998)AutosomalgenomicscanforlocilinkedtoobesityandenergymetabolisminPimaIndians.AmJHumGenet,62,659-68.76.Lembertas,A.V.,Perusse,L.,Chagnon,Y.C.,Fisler,J.S.,Warden,C.H.,Purcell-Huynh,D.A.,Dionne,F.T.,Gagnon,J.,Nadeau,A.,Lusis,A丄etal.(1997)Identificationofanobesityquantitativetraitlocusonmousechromosorae2andevidenceoflinkagetobodyfatandinsulinonthehumanhomologousregion20q.JClinInvest,100,1240-7.77.Pomp,D.(1997)Geneticdissectionofobesityinpolygenicanimalmodels.BehavGenet,27,285-306.78.Mehrabian,M.,Wen,P.Z.,Fisler,J"Davis,R.C.andLusis,A丄(1998)Geneticlocicontrollingbodyfat,lipoproteinmetabolism,andinsulinlevelsinamultifactorialmousemodel.JClinInvest,101,248596,79.Ji,J.,Watts,G.F.,Johnson,A.G.,Chan,D.C.,Ooi,E.M.,Rye,K.A.,Serone,A.P.andBarrett,P.H.(2006)High-densitylipoprotein(HDL)transportinthemetabolicsyndrome:applicationofanewmodelforHDLparticlekinetics.JClinEndocrinolMetab,91,973-9.80.Ashrafi,K.,Chang,F.Y.,Watts,J.L.,Fraser,A.G.,Kamath,R.S.,Ahringer,J.andRuvkun,G.(2003)Genome-wideRNAianalysisofCaenorhabditiselegansfatregulatorygenes.Nature,421,268.-72.81.Kudoh,K.,Ramanna,M.,Ravatn,R.,Elkahloun,A.G.,Bittner,M丄.,Meltzer,P.S.,Trent,J.M.,Dalton,W.S.andChin,K.V.(2000)Monitoringtheexpressionprofilesofdoxorubicin-inducedanddoxorubicin-resistantcancercellsbycDNAmicroarray.CancerRes,60,4161-6.82.Bruce,C.,Chouinard,R.A.,Jr.andTall,A,R.(1998)Plasmalipidtransferproteins,high-densitylipoproteins,andreversecholesteroltransport.AnnuRevNutr,18,297-330.83.Sarker,S.D.,Savchenko,T.,Whiting,P.,Sik,V.andDinan,L.(1997)TwolimonoidsfromTurraeaobtusifb!ia(Me!iaceae),prieurianinandrohitukin,antagonise20-hydroxyecdysoneactioninaDrosophilacellline.ArchInsectBiochemPhysiol,35,2U-7.84.Koul,O.,Daniewski,W.M.,Multani,J.S.,Gumulka,M.andSingh,G.(2003)AntifeedanteffectsofthelimonoidsfromEntandrophragmacandolei(Meliaceae)onthegrampodborer,Helicoverpaarmigera(Lepidoptera:Noctuidae).JTAgricFoodChem,51,7271-5.85.Bray,G.A.andBellanger,T,(2006)Epidemiology,trends,andmorbiditiesofobesityandthemetabolicsyndrome.Endocrine,29,109-17.86.Pollex,R丄.andHegele,R.A.(2006)Geneticdeterminantsofthemetabolicsyndrome.NatClinPractCardiovascMed,3,482-9.87.Dubuc,P.U.(1976)Thedevelopmentofobesity,hyperinsulinemia,andhyperglycemiainob/obmice.Metabolism,25,1567-74.88.Simons,P丄,vandenPangaart,P,S.,vanRoomen,C.P.,Aerts,J.M.andBoon,L.(2005)Cytokinemediatedmodulationofleptinandadiponectinsecretionduringz>vrt>*oadipogenesis:evidencethattumornecrosisfactor-alpha-andinterleukin-1beta-treatedhumanpreadipocytesarepotentleptinproducers.Cytokine,32,94-103.89.Swannie,H.C.andKaye,S.B.(2002)ProteinkinaseCinhibitors.CurrOncolRep,4,3746,90.Harp,J.B.(2004)Newinsightsintoinhibitorsofadipogenesis.CurrOpinLipidol,15,303-7.91.Ailhaud,G.(2006)Adiposetissueasasecretoryorgan:fromadipogenesistothemetabolicsyndrome.CRBioI,329,,570-7;discussion653-5.92.Erickson,J.C.,Hollopeter,G.andPalmiter,R.D.(1996)Attenuationoftheobesitysyndromeofob/obmicebythelossofneuropeptideY.Science,274,1704-7.93.Birk,R.Z.andRubinstein,M.(2006)IFN-alphainducesapoptosisofadiposetissuecells.BiochemBiophysResComm叫345,669-74.94.Koopman,G.,Reutelingsperger,C.P.,Kuijten,G.A.,Keehnen,R,M.,Pals,S.T.andvanOers,M.H.(1994)AnnexinVforflowcytometricdetectionofphosphatidylserineexpressiononBcellsundergoingapoptosis.Blood,84,1415-20.95.Gullicksen,P.S,,Hausman,D.B.,Dean,R.G.,Hartzell,D丄.andBaile,C.A.(2003)Adiposetissueeeiiuiarityandapoptosisafterintraeerebroventricularinjectionsofleptinand21daysofrecoveryinrats.IntJObesRelatMetabDisord,27,302-12.96.Hirsch,J.andGallian,E,(1968)Methodsforthedeterminationofadiposecellsizeinmanandanimals.JLipidRes,9,110-9.97.Korsmeyer,S丄,Shutter,J.R.,Veis,D.J.,Merry,D.E.andOkvai,Z.N.(1993)Bcl-2/Bax:arheostatthatregulatesananti-oxidantpathwayandcelldeath,SeminCancerBio〗,4,327-32.98.Kaser,S.,Foger,B.,Ebenbichler,C.F.,Kirchmair,R.,Gander,R.,Ritsch,A.,Sandhofer,A.andPatsch,J.R.(2001)Influenceofleptinandinsulinonlipidtransferproteinsinhumanhepatomacellline,HepG2.IntJObesRelatMetabDisord,25,1633-9.99.Shillabeer,G.,Forden,J.M.,Russell,J,C.andLau,D.C.(1990)Paradoxicallyslowpreadipocytereplicationanddifferentiationincorpulentrats.AmJPhysiol,258,100.Yan,H.,Aziz,E"Shillabeer,<3"Wong,A.,Shanghavi,E>.,Kermouni,A"Abdel-Hafez,M.andLau,D.C.(2002)Nitric.oxidepromotesdifferentiationofratwhitepreadipocytesinculture.JLipidRes,43,2123-9.101.Ntambi,J.M.andYoung-Cheul,K.(2000)Adipocytedifferentiationandgeneexpression.JNutr,130,3122S-3126S.102.Negrel,R.,Grimaldi,P.andAilhaud,G.(1978)Establishmentofpreadipocyteclonallinefromepididymalfatpadofob/obmousethatrespondstoinsulinandtolipolytichormones,ProcNatlAcadSciUSA,75,6054-8.103.Gurley,L.R.,Umbarger,K.O.,Kim,丄M.,Bradbury,E.M.andLehnert,B.E.(1998)High-performanceliquidchromatographicanalysisofstaurosporineinvivo.Itstranslocationandpharmacokineticsinrats.JChromatogrBBiomedSciAppl,712,211-24.104.Fuse,E.,Kuwabara,T.,Sparreboom,A.,Sausville,E.A.andFigg,W.D.(2005)ReviewofUCN-01development:alessonintheimportanceofclinicalpharmacology.JCJinPharmacol,45,394-403.105.Miard,S.andFajas,L.(2005)AtypicaltranscriptionalregulatorsandcofactorsofPPARgamma.IntJObes(Lond),29S卿l1,SI0-2.106.Qiao,L.,Schaack,J.andShao,J.(2006)Suppressionofadiponeetingeneexpressionbyhistonedeacetylaseinhibitorvalproicacid.Endocrinology,147,865-74.107.Shinohara,O.,Murata,Y.andShimizu,M.(1992)Endothelin-lsuppressionofratadipocyteprecursorcelldifferentiationinserum-freeculture.Endocrinology,130,203卜6.108.Shinohara,O.,Murata,Y.,Kubota,C.andShinagawa,T.(1994)ProteinkinaseCinhibitorsenhancedifferentiationofratadipocyteprecursorcellsinserum-freeculture.BiochemMedMetabBiol,51,8590.109.Wright,H.M"Clish,C.B"Mikami,T.,Hauser,S.,Yanagi,K.,Hiramatsu,R"Serhan,C.N.andSpiegelman,B.M.(2000)Asyntheticantagonistfortheperoxisomeproliferator-activatedreceptorgammainhibitsadipocytedifferentiation.JBiolChem,275,1873-7.权利要求1.用于脂肪生成的生物标志物,其包括磷脂转移蛋白(PLTP)。2.用作PLTP基因表达的上调物的prieurianin。3.抗脂肪生成和抗肥胖症试剂,其包括prieurianin。4.用于有此需要的受试者的体重降低组合物,其包含有效量的柠檬苦素类化合物。5.前述权利要求中任一项的组合物,其中所述柠檬苦素类化合物包括prieurianin。6.用于调控PLTP基因表达的方法,其包括施用有效量的prieurianin。7.用于在有此需要的受试者中激活磷脂转移蛋白(PLTP)基因表达的方法,其包括对所述受试者施用有效量的柠檬苦素类化合物。8.用于在有此需要的受试者中诱导体重损失和/或食物摄取减少的方法,其包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。9.用于在有此需要的受试者中减少内脏和皮下脂肪组织的方法,其包4舌对所述受试者施用有效量的prieurianin。10.用于在有此需要的受试者中降低血清非酯化脂肪酸水平的方法,其包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。11.用于在有此需要的受试者中抑制前脂肪细胞的增殖和/或分化的方法,其包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。12.用于在有此需要的受试者中引起脂肪细胞的去分化和/或脂肪细胞中脂肪积累的损失的方法,其包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。13.用于在有此需要的受试者中引起分化的成熟脂肪细胞的去分化和/或抑制分化的成熟脂肪细胞中脂质积累的方法,其包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。14.用于在有此需要的受试者中刺激磷脂转移蛋白(PLTP)反式激活的方法,其包括施用在所述受试者中有效诱导减少体重和/或肥胖的量的prieurianin。15.用于在有此需要的受试者中抑制前脂肪细胞的增殖和用于防止前脂肪细胞分化成成熟的脂肪细胞的方法,其包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。16.前述权利要求中任一项的方法,其中所述柠檬苦素类化合物包括prieurianin。17.前述权利要求中任一项的方法,其中所述受试者包括哺乳动物。18.前述权利要求中任一项的方法,其中所述受试者被认为是肥胖的。19.用于在有此需要的受试者中阻止prieurianin对PLTP反式激活的方法,其包括对所述受试者施用有效量的星状孢菌素。20.用于调控PLTP基因表达的方法,其包括改变在脂肪生成方面,对prieurianin药理学作用的细胞反应。21.用于在受试者中预防或治疗肥胖症的方法,所述方法包括对所述受试者施用治疗有效量的prieurianin。22.前述权利要求中任一项的方法,其中所述受试者需要所述治疗或预防。23.用于在受试者的皮下脂肪组织中下调磷脂转移蛋白(PLTP)表达的方法,其包括对所述受试者施用治疗有效量的prieurianin。24.在哺乳动物中改善或预防脂肪生成的方法,其包括对所述哺享L动物施用治疗有效量的prieurianin或其4汙生物。25.前述权利要求中任一项的方法,其中所述脂肪生成与疾病相关。26.前述权利要求中任一项的方法,其中所述施用是通过注射。27.前述权利要求中任一项的方法,其中所述施用是通过口服。28.前述权利要求中任一项的方法,其中所述预防脂肪生成实质上减少脂肪组织量。29.前述权利要求中任一项的方法,其中所述施用是通过皮下注射到脂肪组织内。30.前述权利要求中任一项的方法,其中所述施用是以皮肤方式应用在脂肪组织周围区域。31.用于在有此需要的受试者中体内刺激NFkB信号传导途径的方法,其包括施用prieurianin以在所述受试者体内诱导减少体重和/或肥胖。32.用于筛选柠檬苦素类化合物或者其他小分子实体或模拟物的NFkB反应元件报告系统。33.筛选一种或多种小分子实体或模拟物的方法,其包括使用NFkB反应元件报告系统。34.前述权利要求中任一项的方法,其中所述分子实体或模拟物包括一种或多种柠檬苦素类化合物。35.前述权利要求中任一项的方法,其中就在诱导减少体重和/或肥胖中的功效篩选所述柠檬苦素类化合物。36.用于抑制一种或多种C/EBPa和p以及PPARY介导的转录激活的方法,其包括通过天然启动子在体内使用一种或多种反应元件。37.筛选用于诱导减少体重和/或肥胖的小分子实体的方法,其包括通过天然启动子在体内使用一种或多种反应元件来抑制一种或多种C/EBPa和p以及PPARy介导的转录激活。38.用于抑制一种或多种C/EBPa和p以及PPARY介导的转录激活的方法,其包括使用含有所述转录因子的反应元件的反应元件驱动的报告系统。39,篩选用于诱导减少体重和/或肥胖的小分子实体的方法,其包来抑制一种或多种C/EBPa和p以及PPARy介导的转录激活。40.用于在分化的成熟脂肪细胞中引起去分化或抑制脂质积累的方法,所述方法包括对所述受试者施用有效量的prieurianin。41.通过以"开-关"或"循环"方案施用所述药物用于克服药物诱导的耐受性的方法,所述方法包括以特定的剂量对所述受试者施用所述药物以第一特定持续时间,停止施用所述药物以第二特定持续时间,然后,恢复施用所述药物以一个或多个特定持续时间,以及如果需要,重复所述方案。42.权利要求41的方法,其中所述方法用于治疗肥胖症。43.权利要求41的方法,其中所述药物中包括prieurianin。44.权利要求41的方法,其中所述方法用于治疗其中延长药物治疗导致功效降低、缺少反应、脱敏或耐受性的人类中的任何疾病,以从所述药物治疗中获得最大反应。45.用于配置含有prieurianin或其4汙生物的组合物的方法,其包括将所述组合物溶解在乳浮或Captisol中。46.含有prieurianin或其衍生物,并溶解在乳浮或Captisol中的组合物。47.权利要求45的组合物,其中配置所述组合物以用于对有此需要的受试者施用,并且其中所述组合物包括所述组合物的预摄取形式。48.权利要求45的组合物,其中配置所述组合物以用于对有此需要的受试者施用,并且其中所述组合物在体内形成药学活性代谢物。全文摘要用于激活PLTP基因表达的方法和组合物,其包括施用有效量的柠檬苦素类化合物。文档编号A61K31/585GK101541329SQ200780038818公开日2009年9月23日申请日期2007年10月17日优先权日2006年10月17日发明者K-V·秦申请人:托莱多大学