专利名称：含有独一味提取物的贴膏剂及其制备方法
技术领域：
本发明提供一种含有中药有效成分的贴膏剂的组方和配比以及制备方法，尤其是含有该有效成分的巴布剂的组方配比。
背景技术：
中药经皮给药制剂(transdermal drug delivery systems，简称TDDs)是指采用适宜的基质材料将药物制成专供外用的一类固体或半固体剂型.中药经皮给药系统虽然是一种古老的给药方式，但真正发展起来还是在20世纪90年代，由于可以直接施于患处或相应穴位，有效成分通过皮肤透入血液循环而发挥全身疗效，可避免肝脏及胃肠道的首过效应，降低药物的毒副作用，在体内维持恒定的、持久的血药浓度，提高药物疗效，主要适合于一些慢性疾病治疗及预防的药物、半衰期太短需要频繁给予的药物，用常规口服或注射剂型疗效不可靠或具有禁忌以及严重副作用的药物。
巴布剂系指药材提取物、药材或和化学药物与适宜的亲水性基质混匀后，涂布于背衬材料上制成的贴膏。巴布剂作为经皮给药制膏的一种，具备经皮给药独特的优点1、避免了口服给药可能发生的肝脏首过效应及胃肠灭活，提高了治疗效果；2、维持恒定的血药浓度或药理效应，增强了治疗效果，减少了副作用；3、延长作用时间，减少用药次数，增加患者的用药顺应性；4、患者可以自主用药，相对减少患者个体间差异和个体内差异。另外，巴布剂和传统的橡胶膏比较，巴布剂对皮肤具有更强的生物相容性、亲和性、耐汗性、重复揭贴性，含水量高，能使皮肤角质层细胞水化膨胀，更有利于经皮吸收。巴布剂不易过敏，特别适用于对黑膏药、橡胶膏、压敏胶膏过敏的患者使用。生产过程中不使用有机溶膏，不污染环境。
独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo为唇形科植物，以根及根状茎入药。功能主治是活血祛瘀，消肿止痛，用于跌打损伤，骨折，腰部扭伤。
目前市场上的独一味剂型主要是以口服药为主，如独一味胶囊、独一味片、独一味颗粒等。由于口服制剂本身存在的缺点，如起效时间长、肝脏首过效应、患者用药顺应性差等，不能满足独一味在局部损伤治疗中外用的应用要求。
发明内容
为了解决独一味提取物的外用的研发难题，本发明欲提供一种适合独一味提取物的贴膏剂，尤其是巴布剂(或称巴布膏剂)，该含有独一味有效成分的巴布剂不易过敏，特别适用于对黑膏药、橡胶膏、压敏胶膏过敏的患者使用。
本发明的目的在于提供一种含有独一味提取物的贴膏剂，通过特定的配方使得产品对皮肤具有更强的生物相容性、亲和性、耐汗性、重复揭贴性，含水量高，能使皮肤角质层细胞水化膨胀，更有利于经皮吸收。
本发明的目的还在于提供一种含有独一味提取物的贴膏剂的制备方法，通过该方法使得该贴膏剂食用方便，不对环境造成污染。
本发明提供了一种含有独一味提取物的贴膏剂，该贴膏剂含有的组分包括独一味提取物、水溶性聚合物、粘合剂、透皮吸收促进剂、交联剂、交联调节剂和保湿剂；其中，所述的水溶性聚合物为丙烯酸聚合物，所述粘合剂选自聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇，所述的交联剂为二价或者三价离子的金属盐，所述的交联调节剂为有机酸；且，所述的独一味提取物、水溶性聚合物、粘合剂、透皮吸收促进剂、交联剂、交联调节剂和保湿剂的重量比例为100∶2～10∶1～7∶5～30∶0.1～2∶0.1～3∶30～90；所述的独一味提取物的量为折合成独一味药材的量。
上述的贴膏剂中的主要成分即为独一味提取物，其为该贴膏剂的活性成分、治疗成分，所述的独一味提取物采用以下步骤得到取独一味药材加至少2倍量的水煎煮至少一次，得到提取液，将提取液浓缩至60℃时的相对密度1.10～1.15，加入乙醇使乙醇浓度为50～90％，搅拌，放置，过滤，滤液浓缩，得到独一味提取物。
本发明所述的含有独一味提取物的贴膏剂中，所述的独一味提取物(折合成独一味药材的量)、水溶性聚合物、粘合剂、透皮吸收促进剂、交联剂、交联调节剂和保湿剂的重量比例为1∶0.0626∶0.0374∶0.1857∶0.00495∶0.00688∶0.62586。
在本发明所述的贴膏剂中，所述的水溶性聚合物优选为丙烯酸聚合物，该丙烯酸聚合物包括聚丙烯酸钠、卡波姆中的任一或其组合；所述的透皮吸收促进剂优选选自氮酮、丙二醇、冰片中任一或其至少两种的组合；所述的交联剂优选为铝盐；所述的交联调节剂优选为选自柠檬酸、羟基丁二酸、乳酸、酒石酸中任一或其组合的有机酸。
为了使本发明的贴膏剂达到医药学的卫生标准，该膏剂还含有0.1～2份的抑菌剂(以独一味提取物为100重量份计)。抑菌剂的量更优选为1份独一味提取物0.62586份的保湿剂0.0055份的抑菌剂。
在本发明所述的含有独一味的贴膏剂中，优选，以重量份计，该膏剂含有独一味提取物以独一味药材计100份，(即，该独一味提取物的重量份为折合成独一味药材的重量，独一味提取物的重量以独一味药材的重量计)，水溶性聚合物5～8份、粘合剂4～6份、透皮吸收促进剂10～25份、交联剂0.2～1份、交联调节剂0.2～1.5份，保湿剂50～80份。
上述水溶性聚合物为聚丙烯酸钠和/卡波姆，所述粘合剂为聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇，所述透皮吸收促进剂选自氮酮、丙二醇、冰片中任一或其至少两种的组合。
交联剂为二价或三价离子如铝、镁、锌等，常用为铝盐。铝与聚合物骨架中的羧基官能团发生离子化反应，引起基质的固化。交联剂的用量与巴布剂的粘接性能有直接关系，用量不足，基质交联不完全，凝胶层的内聚力差，可发生脱膏现象；交联剂超量，基质交联过度，膏面粘性降低甚至没有粘性。
交联调节剂为有机酸类。是催化调节基质交联速度、交联程度的关键物质，主要是柠檬酸、羟基丁二酸、乳酸、酒石酸等。
交联调节剂一般为有机酸类，是催化调节基质交联速度、交联程度的关键物质，主要是柠檬酸、羟基丁二酸、乳酸、酒石酸等。
本发明所述的交联剂为铝盐，该铝盐选自Al(OH)3、甘氨酸铝、AlCl3中任一或其组合；所述的交联调节剂为有机酸类；所述的保湿剂为甘油。
众所周知，巴布剂系指药材提取物、药材或和化学药物与适宜的亲水性基质混匀后，涂布于背衬材料上制成的贴膏剂。巴布剂作为经皮给药制剂的一种，具备经皮给药独特的优点(1)可避免肝脏的首过效应和药物在胃肠道的降解，药物的吸收不受胃肠道因素影响，减少了用药的个体差异；(2)使用方便，可以随时中断给药，特别不宜口服的患者。另外，巴布剂和传统的橡胶膏剂比较，巴布剂对皮肤具有更强的生物相容性、亲和性、耐汗性、重复揭贴性，含水量高，能使皮肤角质层细胞水化膨胀，更有利于经皮吸收。巴布剂不易过敏，特别适用于对黑膏药、橡胶膏剂、压敏胶膏剂过敏的患者使用。生产过程中不使用有机溶剂，不污染环境。因此，综合本发明的主要活性成分独一味提取物的性质，本发明所述的含有独一味的贴膏剂优选为巴布剂(也称巴布剂或巴布剂)。
在本发明的优选实施例中，该贴膏剂，以独一味提取物为100重量份计，其还含有0.2～1份的抑菌剂。
本发明还提供了上述含有独一味提取物的贴膏剂的制备方法，该方法包括 (1)取独一味药材加至少2倍量的水煎煮至少一次，得到提取液，将提取液浓缩至60℃时的相对密度1.10～1.15，加入乙醇使乙醇浓度为50～90％，搅拌，放置，过滤，滤液浓缩，得到独一味提取物； (2)在独一味提取物中加入粘合剂、交联调节剂，使之溶解完全，得到I； (3)另取保湿剂，分别加入水溶性聚合物、透皮吸收促进剂和交联剂，搅拌使分散均匀，得到II； (4)将I与II混合，搅拌均匀，得到本发明的膏剂。
本发明的膏剂优选为巴布剂，即，将该膏剂涂展于无纺布上，同时覆盖塑料薄膜，剪切，包装，即得成品巴布剂。
本发明提取工艺为经过严格的筛查后得到的优选工艺，具体考察方案如下 一.独一味提取物的考察 1.提取溶剂考察 选择不同的溶剂分别对独一味药材进行提取，考察对提取效果的影响，以水、50％乙醇和95％乙醇三种溶剂进行考察。
试验方法取独一味药材三份，各100g，切碎，分别加入7倍量水、50％乙醇和95％乙醇回流提取三次，每次1小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，即得。
评价指标以提取液木犀草素含量与浸出物收率作为指标进行评价，分别将提取液初步制成巴布剂，以小鼠醋酸扭体法镇痛试验和二甲苯所致小鼠耳肿胀试验，对巴布剂镇痛作用与抗炎作用进行比较。
木犀草素含量测定高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.4％磷酸溶液(55∶45)为流动相；检测波长为350nm。理论板数按木犀草素峰计算应不低于1500。
测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
浸出物收率精密量取提取液溶液100ml，置于已干燥并称定重量的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃干燥3小时，放冷，称定重量，计算浸出物收率，如下 木犀草素含量与浸出物收率结果
小鼠醋酸扭体法镇痛试验证明，各给药组均能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数，并能显著延长疼痛发作的潜伏期，镇痛率分别为56.10％、57.07％、54.63％，各给药组之间无显著差异，表明三种溶剂提取所制得独一味巴布剂均具有明显的镇痛作用。
二甲苯所致小鼠耳肿胀试验证明，各给药组均能显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀，肿胀抑制率分别为43.69％、42.58％、43.26％，各给药组之间无显著差异，表明三种溶剂制成独一味巴布剂均具有明显的抗炎作用。
综合几种评价指标，以水、50％乙醇和95％乙醇三种溶剂分别对独一味药材进行提取后得出的巴布剂样品镇痛作用与抗炎作用无明显差异，结合生产实际，考虑到生产成本，选择以水作为提取溶剂，以水煎煮的形式对独一味药材进行提取。
2.水提工艺考察 以正交试验考察水提过程中水用量、提取时间与提取次数三个因素对独一味药材提取效果的影响。
因素水平选择采用正交表L9(34)安排试验，各因素水平选择如下 因素水平表
试验方法称取独一味药材100g，切碎，分别按正交表试验安排进行提取，合并提取液，过滤，滤液浓缩，即得。
评价指标测定独一味提取液木犀草素含量和浸出物收率，结果如下 试验安排及结果
备注(1)独一味药材木犀草素含量为0.20％，最大转移率为86.3％；(2)综合评分由公式 计算而得，以木犀草素最高含量172.6mg为60分，浸出物收率最高值20.1％为40分。
结果分析从上表的R值可知，以综合评分为评价指标，各因素的影响大小为C＞B＞A，最佳提取工艺为A3B3C3。由于因素A和因素B对评价指标影响较小，将A、B因素取为第二水平，最终将提取工艺确定为A2B2C3，即取独一味药材切碎，加水8倍量水煎煮3次，每次提取1.0小时，提取液过滤，即得。
3.醇沉工艺考察 根据初步预试，直接采用独一味水提液制备巴布剂，巴布剂内聚强度弱，皮肤粘附性差，不能达到外用制剂要求，试验决定采用醇沉工艺对水提液进行纯化除杂，降低浸出物收率，相对减少巴布剂含药量。选择不同的乙醇浓度对提取液进行醇沉，考察不同的醇沉浓度对木犀草素含量与浸出物收率的影响。
试验方法称取独一味药材500g，切碎，加8倍量水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(60℃)的浸膏，将浸膏等分成五份，每份中加入乙醇，分别使溶液乙醇浓度为40％、50％、60％、70％、80％，充分搅拌，静置过夜；将醇溶液过滤，测定滤液木犀草素含量与浸出物收率，试验结果见下表。
醇沉工艺考察
由上表可见，浸出物收率与木犀草素含量均随醇沉浓度的增加而降低，醇沉浓度达到80％，木犀草素含量有明显下降，选择将醇沉浓度确定到70％。
重复验证试验证明，该工艺操作可行，重现性良好。
综上所述，独一味提取物的提取工艺确定为取独一味药材切碎，加8倍量水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(60℃)，加入乙醇使乙醇浓度为70％，充分搅拌，静置过夜；将醇溶液过滤，滤液回收乙醇，浓缩，即得。
二、制剂工艺研究的考察 巴布剂系指药材提取物、药材或和化学药物与适宜的亲水性基质混匀后，涂布于背衬材料上制成的贴膏剂，按巴布剂的基质成分，可分为交联型巴布剂与非交联型巴布剂。非交联型巴布剂受环境湿热因素影响较大，容易吸潮后使膏体变稀，揭贴后有残留污染衣物，交联型巴布剂较非交联型巴布剂，具有更强的内聚力，皮肤无残留，可以避免膏体分离、流出等优点，确定采用交联型巴布剂进行独一味巴布剂的制备。常用的交联型巴布剂是通过交联剂(Ca2+、Mg2+、Al3+等高价金属离子)与水溶性聚合物聚合，从而形成交联网状结构，组成巴布剂凝胶骨架的原理。交联型巴布剂基质是由交联剂、水溶性聚合物、保湿剂、粘合剂、抑菌剂和水等组分构成。
辅料种类选择 (1)水溶性聚合物常用的水溶性聚合物以丙烯酸聚合物居多，丙烯酸聚合物与金属离子聚合能形成较强的内聚强度，如聚丙烯酸钠、卡波姆等，通过初步预试对聚丙烯酸钠与卡波姆进行比较。
称取甘油两份置烧杯中，每份25g，分别加入聚丙烯酸钠和卡波姆2g，再加入Al(OH)30.2g，搅拌均匀后加入1.0％酒石酸水溶液25ml，充分搅拌，均匀涂展于无纺布上，即得。比较最终试验结果，聚丙烯酸钠作为水溶性聚合物制备得出最终样品较卡波姆，皮肤粘附性稍好，由此选择聚丙烯酸钠作为水溶性聚合物。
(2)交联剂交联剂的种类有Ca2+、Mg2+、Al3+等高价金属离子，其中以使用铝盐作为交联型巴布剂交联剂居多，常用的铝盐有Al(OH)3、甘氨酸铝、AlCl3三种，初步预试，对三种铝盐进行筛选。
试验方法称取甘油三份置烧杯中，每份25g，加入聚丙烯酸钠2g，分别加入Al(OH)3、甘氨酸铝、AlCl30.2g，搅拌均匀后加入1.0％酒石酸水溶液25ml，充分搅拌，均匀涂展于无纺布上，即得。
交联剂的筛选
由试验过程中可以看出，以AlCl3作为交联剂，溶液中Al3+浓度较大，膏体交联速度过快，不适宜搅拌与涂展。甘氨酸铝与Al(OH)3交联速度适中，工艺操作性强，且甘氨酸铝与Al(OH)3作为交联剂时，溶液中Al3+浓度受酸度影响较大，可以通过有机酸(酒石酸、柠檬酸等)作为交联调节剂对交联速度进行调节，更适合于工业化生产。试验选择以甘氨酸铝作为交联剂。
其它，参考文献以甘油作为保湿剂，以酒石酸作为交联调节剂。
透皮吸收促进剂研究，试验选择氮酮、乙醇、丙二醇、N-甲基-吡咯烷酮、冰片五类促透剂进行筛选。
载药巴布剂制备称取甘油25g置烧杯中，加入聚丙烯酸钠2g，甘氨酸铝0.2g，按表12-10分别加入各种透皮吸收促进剂，搅拌均匀；另精密量取20ml药液(每1ml相当于独一味药材2g)，加入酒石酸0.25g，溶解完全后加入甘油相中，充分搅拌，均匀涂展，即得。
体外透皮吸收试验取大鼠，处死，用电动剃须刀将腹部毛小心除尽，剪下腹部皮肤，小心剥离脂肪与粘液组织，选取完整皮肤，用生理盐水冲洗干净，冰箱贮存，一周内备用。透皮吸收试验装置采用垂直式Franz扩散池，由上下两只筒状玻璃管对合而成，夹于玻璃管间的皮肤将其分为上下两室。上室为扩散室，下室为接收室，在接收室一侧连一取样管，供取样、排除气泡用。扩散室容积为20ml，有效扩散面积为3.0cm2，水浴加热，温度控制在扩散温度±0.2℃。
将载药巴布剂紧贴于处理好的离体皮肤角质层，排除气泡，固定于扩散室与接收室之间，真皮一侧面向接收室。精密量取20ml生理盐水作为接收液注入接收室，排除接收接与离体皮肤间气泡。接收室水浴加热，加热温度控制为32℃，磁力搅拌，速度为300r·min-1。扩散时间持续24小时后，测定接收液木犀草素含量，计算24小时累积透过量，每种巴布剂样品平行试验三次。
体外透皮吸收试验结果
由上表可见，不使用透皮吸收促进剂，木犀草素透皮效果较差；氮酮、乙醇、丙二醇、N-甲基-吡咯烷酮、冰片五种透皮吸收剂单独使用均有一定的透皮吸收促进作用；使用复合透皮吸收促进剂对透皮效果有明显提高。
小鼠醋酸扭体法镇痛试验取小鼠100只，给药前24h剪去小鼠背部长毛，然后用8％硫化钠溶液对其脱毛处理，脱毛面积2.5cm×2.5cm。次日将脱毛且皮肤无破损的小鼠按体重性别随机分成10组，每组10只，雌雄各半。经皮给药，每日给药1次，连续给药5天，每天给药前用水擦洗给药处，待皮肤干燥后再给予药物涂抹。末次给药后1h，各组小鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/鼠，以腹部内凹，臂部抬高，伸展后肢为扭体指标，观察记录各鼠在腹腔注射醋酸后开始扭体时间及15min内扭体次数，进行组间比较其显著差异性。计算镇痛率，并应用SPSS10.0统计软件进行统计学处理。
小鼠醋酸扭体法镇痛试验结果
注各给药组与对照比较*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果表明，与空白基质对照组比较，给药组II～VIII能显著延长疼痛发作的潜伏期，其中给药组I～VIII均能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数。八个给药组相比较，给药组II、VII、VII的镇痛率明显高于其它各组，分别为68.78％、74.21％、71.04％。
二甲苯所致小鼠耳肿胀试验取小鼠100只，给药前24h剪去小鼠背部长毛，然后用8％硫化钠溶液对其脱毛处理，脱毛面积2.5cm×2.5cm。次日将脱毛且皮肤无破损的小鼠按体重性别随机分成10组，每组10只，雌雄各半。皮肤给药，每日给药1次，连续给药5天，每天给药前用水擦洗给药处，待皮肤干燥后再给予药物涂抹。末次给药后1h，各组动物用二甲苯0.05ml涂于小鼠右耳廓两面致炎，致炎后40min脱颈椎处死小鼠，用直径为8mm的打孔器打下双耳相同部位耳片，分别称重。计算肿胀度和肿胀抑制率，并应用SPSS10.0统计软件进行统计学处理。
肿胀度＝致炎侧耳片重-非致炎侧耳片重
二甲苯所致小鼠耳肿胀试验结果
注各给药组与对照比较*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果表明，与空白基质对照组比较，给药组I～VIII均能显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀，八个给药组相比较，样品II、VII、VIII的肿胀抑制率明显高于其它各组，分别为54.38％、56.97％、54.62％。
综合木犀草素透过量、样品镇痛作用和抗炎作用的研究可见，加入透皮吸收制剂对透皮吸收有明显促进作用，其中采用复合透皮吸收促进剂制备的巴布剂样品，镇痛作用与抗炎作用明显优于其它组样品，因此，确定选择在巴布剂中加入氮酮与丙二醇两类促透剂，通过体外透皮试验继续对用量进行考察。
透皮吸收促进剂用量考察
由上表可见，透皮吸收促进剂用量增大，透皮累积渗透量无明显增加，确定优选使用3％氮酮、10％丙二醇作为独一味巴布剂的透皮吸收促进剂。
粘合剂研究 将独一味提取液加入基质后，巴布剂皮肤粘附性较差，达不到外用制剂要求，选择加入粘合剂增加巴布剂皮肤粘附性。经过初步预试，粘合剂中聚乙烯醇与聚乙烯吡咯烷酮，对巴布剂皮肤粘附性有明显的改善，另外聚丙烯酸钠和甘油的用量对皮肤粘附性有一定的影响，通过正交试验，确定以上辅料的用量。
(1)因素水平选择经过预试，选择各因素水平如下， 因素水平表
(2)评价指标以初粘力与剥离强度测定作为皮肤粘附性评价指标，另外粘合剂用量对膏体均匀性影响较大，同时将膏体均匀性作为粘合剂用量考察指标。
初粘力照贴膏剂粘附力测定法第一法(中国药典2005年版一部附录XII E)测定。取供试品3片，置于30°倾斜板中央，膏面向上，斜面上部10cm及下部15cm用0.025mm厚的绦纶薄膜覆盖，中间留出5cm膏面，将各规格的钢球，自斜面顶端自由滚下，记录以供试样品3片均能粘住的钢球重量。
剥离强度将供试品裁切成4×10cm规格，粘贴于洁净不锈钢板上，用重2000g压辊在供试品上来回滚压三次，确保粘接处无气泡存在，放置20分钟；将供试品一端揭开约1cm，用弹簧秤夹住，以不锈钢板成180°方向缓慢剥离，每2cm记录一次读数，计算三次读数平均值。
均匀性观察膏体均匀性和制备难易程度进行打分以膏体无法搅拌，为1～3分；以膏体能够搅拌，但有起团起球现象为4～6分，膏体能够均匀搅拌，以搅拌难易程度，打为7～10分。
(3)试验安排及结果选择正交表L9(34)，分别称取甘油，按试验安排，加入对应用量的聚丙烯酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和甘氨酸铝0.2g，搅拌均匀，再加入氮酮1.5g与丙二醇5g充分搅拌；另取药液20ml(每1ml相当于独一味药材2g)，加入对应用量的聚乙烯醇与0.25g酒石酸，溶解充分后将药液倒入甘油相中，充分搅拌，均匀涂展，裁切，即得。由试验安排及结果(暂欠奉)可以看出，巴布剂对皮肤粘附性随聚乙烯醇和聚丙烯吡咯烷酮的用量增加而得到提高，但粘合剂的用量增加，制备过程中搅拌困难，膏体均匀性差。综合考虑两方面的因素，以综合评分为评价指标，最优工艺为A2B1C2D1，即辅料用量为聚丙烯酸钠2g、聚乙烯醇0.5g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g，甘油25g，对该工艺进行验证。
经试验验证，该工艺重现性良好，操作可行。
交联剂用量考察 交联剂用量直接影响到巴布剂内聚强度，交联剂用量过小，膏体内聚强度差，容易脱落而污染衣物，交联剂用量过大，则会使交联速度迅速，工艺操作性差。试验以巴布剂剥离后塑料膜膏体残留量为指标，考察交联剂用量。
试验方法称取甘油25g，加入聚丙烯酸钠2.0g和聚乙烯吡咯烷酮1.0g，再分别加入相对应量的甘氨酸铝，搅拌均匀，加入氮酮1.5g与丙二醇5g，充分搅拌；另取药液20ml(每1ml相当于独一味药材2g)，加入聚乙烯醇0.5g与酒石酸0.25g，溶解充分后将药液倒入甘油相中，充分搅拌，均匀涂展并覆盖塑料膜，剪切成6×10cm规格。
膜残留量测定取供试品于水平桌面上，用重2000g压辊在供试品上来回滚压三次，放置20分钟，缓慢剥离塑料膜，将塑料膜称重，计算膜残留量。
交联剂用量考察
由上表可知，甘氨酸铝的用量增加，巴布剂交联强度增强，膜残留量减少；甘氨酸铝用量在0.2g以上，塑料薄膜无膏体残留，但由于甘氨酸铝用量过大会导致膏体搅拌与涂展困难，试验选择甘氨酸铝的用量为0.25g。
交联调节剂用量考察 膏体交联速度在巴布剂在制备影响较大，交联速度过快，会使膏体稠度过大，从而导致搅拌困难，不均匀，另外膏体在涂布过程中，流动性差，不利于涂展，交联速度过慢，巴布剂剪切困难，边缘不平整。结合生产实际，考察交联调节剂酒石酸用量，使工艺更具有可操作性。
试验方法称取甘油25g，加入聚丙烯酸钠2.0g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g和甘氨酸铝0.25g，搅拌均匀，加入氮酮1.5g与丙二醇5g，充分搅拌；另取药液20ml(每1ml相当于独一味药材2g)，加入聚乙烯醇0.5g与相对应量的酒石酸，溶解充分后将药液倒入甘油相中，充分搅拌，均匀涂展并覆盖塑料膜。分别进行考察制备过程中的膏体稠度大小、搅拌难易程度和巴布剂成型情况。
酒石酸用量考察
经过考察酒石酸用量，用量在0.2～0.3g，膏体稠度适中，易搅拌和涂展，膏体剪切过程中，边缘无拉丝脱落现象，试验选择加入0.25g酒石酸。
抑菌剂考察 由于巴布剂是高含水量制剂，且中药提取物中含有较多的营养成分，容易引起微生物的污染与繁殖，为保证用药安全，巴布剂生产过程中需添加抑菌剂以防污染变质。参考文献[2]，选择在独一味巴布剂组方中加入0.2％羟苯乙酯与0.2％苯甲酸钠作为抑菌剂，试制样品复合袋包装后室温放置三个月，以中国药典2005版附录VIII C微生物限度检查法进行微生物检查。
抑菌剂考察
根据考察结果，留样时间在三个月以内，微生物检查均符合规定，将抑菌剂暂定为0.2％羟苯乙酯与0.2％苯甲酸钠。另外，组方中选择加入0.5％冰片，以增加巴布剂在使用过程中的舒适程度。
综上所述，独一味巴布剂制备工艺确定为称取甘油25g，加入聚丙烯酸钠2.0g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g和甘氨酸铝0.25g，搅拌均匀，加入氮酮1.5g、丙二醇5g与冰片0.25g，充分搅拌；另取药液20ml(每1ml相当于独一味药材2g)，加入聚乙烯醇0.5g与酒石酸0.25g，溶解充分后将药液倒入甘油相中，充分搅拌，均匀涂展并覆盖塑料膜上，裁切，即得。其中，共计制备得约55克巴布剂，相当于独一味药材40克，即每克独一味药材相对应1.375克独一味巴布剂。
独一味为藏、蒙、纳西等民族民间传统用药，根据文献记载，外用治疗跌打损伤一般用量在5～15克，效果显著，本发明根据药效学研究结果推断，人用药量在9克生药材左右对软组织损伤引起的肿胀疼痛，瘀血有良好的疗效，因此，将本发明的贴膏剂，以巴布剂为例，一贴膏剂的载生药量暂定为大约9克独一味药材，经折算，每贴巴布剂理论含膏量暂定为10-15克，在本发明的优选实施例中，每贴巴布剂理论含膏量暂定为12.375克。
本发明还提供了上述含有独一味提取物的贴膏剂在制备治疗血瘀和肿痛的药物中的应用。
上述“治疗血瘀和肿痛的药物”也可以理解为镇痛和止血的药物。
关于治疗血瘀和肿痛的药效学研究 独一味巴布剂主要药效学研究包括抗炎、镇痛、解热、免疫、挫伤、微循环六个方面的研究。
抗炎作用的观察 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0、1.5g生药/kg给小鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，能明显减轻二甲苯致小鼠耳廓炎症反应，肿胀度与阴性组比较具有非常显著性差异(P＜0.01)。
对醋酸致小鼠皮肤毛细血管通透性的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0g，1.5g(生药)/kg给小鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，能明显抑制H+所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进，与阴性组比较有非常显著及显著性差异(P＜0.01或P＜0.05)。
对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响试验结果显示独一味巴布剂给大鼠皮肤涂抹4.5、3.0g(生药)/kg，每日一次，连续5日，对角菜胶所致的足趾肿胀具有抑制作用，高剂量组于致炎后60、120分钟(P＜0.01或P＜0.05)，中剂量组于致炎后120分钟(P＜0.05)与阴性对照组比较具有非常显著和显著性差异。
对大鼠佐剂型关节炎模型的治疗作用结果显示独一味巴布剂给大鼠皮肤涂抹4.5、3.0、1.5g(生药)/kg，每日一次，连续5日，对完全弗氏佐剂所致的足趾肿胀具有抑制作用，高剂量组于致炎后24、48及72小时(P＜0.001或P＜0.05)，中剂量组于致炎后24、48小时(P＜0.001或P＜0.05)，低剂量组于致炎后24小时(P＜0.05)与阴性对照组比较具有非常显著和显著性差异。
镇痛作用的观察 对醋酸致小鼠疼痛作用的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0g(生药)/kg给小鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，能抑制小鼠腹腔注射醋酸所引起的扭体反应次数，与阴性对照组比较具有显著和非常显著性的差异(P＜0.01或P＜0.05)。
对热刺激致痛的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5g(生药)/kg给小鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，与阴性对照组比较，于给药后的60分钟对热刺激所致足垫疼痛反应具有显著的抑制作用，其痛阈提高百分率有明显的提高，并具有显著的差异(P＜0.05)。
对温水浴致大鼠甩尾反应的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0g(生药)/kg给大鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，与阴性对照组比较，独一味巴布剂高、中剂量于给药后的90、120分钟对热刺激所致疼痛反应具有显著的抑制作用，其痛阈值有明显的提高，并具有非常显著的差异(P＜0.01或P＜0.05)。
解热作用的观察 对角叉菜胶所致大鼠发热作用的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0、1.5g(生药)/kg给大鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，独一味巴布剂高、中、低剂量组各时间点肛温与阴性对照组比较，都无显著性差异(P＞0.05)。表明独一味巴布剂对大鼠角菜叉胶致热无解热作用。
免疫 对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0g(生药)/kg给小鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，与阴性对照组比较，吞噬指数有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05)。
对小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响试验结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0g、1.5g(生药)/kg给小鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，与阴性对照组比较，小鼠耳肿胀度有显著差异(P＜0.01或P＜0.05)。
组织挫伤作用的观察 对大鼠急性软组织挫伤的影响试验(砝码)结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0g(生药)/kg给大鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，能改善砝码所致大鼠急性挫伤症状。与阴性对照组比较具有显著和非常显著性的差异。
对大鼠急性软组织挫伤的影响试验(哑铃)结果显示独一味巴布剂以4.5、3.0g(生药)/kg给大鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，能改善哑铃所致大鼠急性挫伤症状。与阴性对照组比较具有显著和非常显著性的差异。
微循环作用的观察 对小鼠肠系膜微循环的影响试验结果显示独一味巴布剂4.5、3.0g、1.5g(生药)/kg给小鼠皮肤涂抹给药，每日一次，连续五天，与阴性对照组比较，独一味巴布剂4.5(生药)/kg给药对小鼠肠系膜微动、静脉血管管径明显大于对照组，有显著性的差异(P＜0.01)。滴加去甲肾上腺素后，其血流恢复至给药前状态所需时间明显缩短，与阴性对照组比较，也有非常显著性差异(P＜0.001)。
独一味巴布剂主要药效学研究总结
毒性试验表明连续91天新西兰兔皮肤涂抹独一味浸膏粉20g(生药)/kg·d以下剂量是安全的。
过过敏性、局部刺激性试验 1.单次给药对兔皮肤刺激性试验 完整及破损皮肤兔各6只，单次涂抹独一味巴布剂后的皮肤刺激各观察时间点评分均为0分，刺激强度评价为0-0.49分，故独一味巴布剂单次给药对兔完整及破损皮肤无刺激性。病理组织学检查独一味巴布剂给兔完整和破损皮肤单次涂抹给药，给药局部皮肤表皮层，真皮层组织结构正常，组织无变性坏死，与赋形剂组结果一致。故独一味巴布剂单次给药对兔完整及破损皮肤无刺激性。
2.多次给药对兔皮肤刺激性试验 完整及破损皮肤兔各6只，在连续7天涂抹独一味巴布剂后的皮肤刺激各观察时间点评分均为0分，刺激强度评价为0-0.49分，故独一味巴布剂多次给药对兔完整及破损皮肤无刺激性。病理组织学检查独一味巴布剂给兔完整和破损皮肤多次涂抹给药，给药局部皮肤表皮层，真皮层组织结构正常，组织无变性坏死，与赋形剂组结果一致。故独一味巴布剂多次给药对兔完整及破损皮肤无刺激性。
3.对豚鼠皮肤主动过敏性试验 豚鼠脱毛皮肤涂抹独一味巴布剂过敏试验各观察时间点未见皮肤红斑和水肿反应，评分为0分，致敏率为0％，故对豚鼠不发生皮肤过敏反应。独一味巴布剂涂抹于豚鼠皮肤后对其动物体重增长无明显影响。涂抹于豚鼠皮肤后对其动物体重增长无明显影响。
具体实施例方式 以下结合实施例详细说明本发明，但不限定本发明的实施范围。
实施例1. 处方 独一味提取物(以独一味药材计) 727g甘油455g 聚丙烯酸钠 45.5g 甘氨酸铝3.6g 聚乙烯吡咯烷酮 18.2g 聚乙烯醇9.1g 氮酮 30g 丙二醇 100g 羟苯乙酯 2g 苯甲酸钠2g 酒石酸 5g 冰片5g 制成1000g 制备方法 取独一味药材727g切碎，加8倍量水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(60℃)，加入乙醇使乙醇浓度为70％，充分搅拌，静置过夜；将醇溶液过滤，滤液回收乙醇，浓缩，加入聚乙烯醇5.1g、酒石酸5g，溶解完全(I)；另取甘油455g，分别加入聚丙烯酸钠45.5g、甘氨酸铝3.6g、聚乙烯吡咯烷酮18.2g、丙二醇100g、氮酮30g、冰片5g，充分搅拌使分散均匀(II)；将I与II混合，搅拌均匀，涂展于无纺布上，同时覆盖塑料薄膜，剪切，包装，即得成品巴布剂。
实施例2. 处方 独一味提取物(以独一味药材计) 727g甘油 400g 聚丙烯酸钠 60.3g 卡波姆45.5g 聚乙烯吡咯烷酮 28g 甘氨酸铝 3.6g 氮酮 50g 丙二醇100g 羟苯乙酯 2g 苯甲酸钠 2g 柠檬酸 8g 冰片 5g制成 1000g 制备方法 参见实施例1。
实施例3. 处方 独一味提取物(以独一味药材计) 727g甘油 473g 聚丙烯酸钠36.3g 卡波姆45.5g 聚乙烯醇 31g 甘氨酸铝 5.8g 氮酮 50g 丙二醇57g 羟苯乙酯 2g 苯甲酸钠 2g 酒石酸4.3g冰片 2g 制成 1000g 制备方法 参见实施例1。
实施例4 处方 独一味提取物(以独一味药材计) 727g甘油 436g 聚丙烯酸钠52g 卡波姆45.5g 聚乙烯吡咯烷酮 15g 甘氨酸铝3.1g 氮酮 60g 丙二醇 120g 羟苯乙酯 2g 苯甲酸钠2g 柠檬酸 5.8g 制成 1000g 制备方法 参见实施例1。
对实施例1和2的产品进行稳定性实验， 试验仪器和药品 1试验仪器 仪器Sartorius BS124S电子天平 Sartorius CP225D电子天平 Agilent 1100高效液相色谱仪及配套工作站 LRHS-250B型恒温恒湿培养箱(上海跃进医疗器械厂) 层析缸及做其他检查所需的仪器 2样品批号及对照物质信息 本试验所用样品批号为070601、070602、070603，由实施例1和2中生产制得。
木犀草素对照品中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，批号11520-200504。
独一味对照药材由中国药品生物制品检定所提供，供鉴别用，批号121026-200503。
3实验条件 采用室温留样考察的方法，将上述三批样品置温度5℃～35℃，相对湿度55％～85％的条件下放置，培养箱放置于阴凉处，分别于放置后0、1、2、3、6个月进行检测，共取样5次，考察6个月。
采用加速留样考察的方法，将上述三批样品置温度40℃，相对湿度75％的条件下放置，培养箱放置于阴凉处，分别于放置后0、1、2、3、6个月进行检测，共取样5次，考察6个月。
4考察项目和实验方法 4.1考察项目 共5个项目，性状、鉴别、一般检查项(含膏量、赋形性、粘附性)、微生物限度检查、含量测定。
4.2实验方法 试验方法按本品申报的质量标准(草案)及《中国药典》2005年版附录方法进行。
5结论 在上市包装条件下，分别于室温贮藏条件和高温高湿条件下进行稳定性考察6个月，其性状、鉴别、含膏量、赋形性、粘附性、微生物限度、含量测定等，无明显变化，均符合规定，说明本品在长期试验条件下6个月内稳定，在特殊条件下6个月内稳定。本品拟用的包装材料也能达到贮藏要求。
由此可见本发明的独一味巴布剂较稳定，根据加速条件下6个月的稳定性数据，暂定有效期至少为1.5年。
权利要求
1.一种含有独一味提取物的贴膏剂，其特征在于，该贴膏剂含有的组分包括独一味提取物、水溶性聚合物、粘合剂、透皮吸收促进剂、交联剂、交联调节剂和保湿剂；其中，所述的水溶性聚合物为丙烯酸聚合物，所述粘合剂选自聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇，所述的交联剂为二价或者三价离子的金属盐，所述的交联调节剂为有机酸；且，所述的独一味提取物、水溶性聚合物、粘合剂、透皮吸收促进剂、交联剂、交联调节剂和保湿剂的重量比例为100∶2～10∶1～7∶5～30∶0.1～2∶0.1～3∶30～90；所述的独一味提取物的量为折合成独一味药材的量。
2.如权利要求1所述的贴膏剂，其中，所述的水溶性聚合物为丙烯酸聚合物，该丙烯酸聚合物包括聚丙烯酸钠、卡波姆中的任一或其组合。
3.如权利要求1所述的贴膏剂，其中，所述的透皮吸收促进剂选自氮酮、丙二醇、冰片中任一或其至少两种的组合。
4.如权利要求1所述的贴膏剂，其中，所述的交联剂为铝盐。
5.如权利要求1所述的贴膏剂，其中，所述的交联调节剂为选自柠檬酸、羟基丁二酸、乳酸、酒石酸中任一或其组合的有机酸。
6.如权利要求1所述的贴膏剂，其中，上述的粘合剂选自聚乙烯吡咯烷酮或聚乙烯醇。
7.如权利要求1所述的贴膏剂，其中，以独一味提取物为100重量份计，该膏剂还含有0.1～2份的抑菌剂。
8.如权利要求1所述的贴膏剂，其中，以重量份计，该膏剂含有独一味提取物以独一味药材计100份，水溶性聚合物5～8份、粘合剂4～6份、透皮吸收促进剂10～25份、交联剂0.2～1份、交联调节剂0.2～1.5份，保湿剂50～80份；所述水溶性聚合物为聚丙烯酸钠和/卡波姆，所述粘合剂为聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇，所述透皮吸收促进剂选自氮酮、丙二醇、冰片中任一或其至少两种的组合，所述交联剂为铝盐，该铝盐选自Al(OH)3、甘氨酸铝、AlCl3中任一或其组合，所述的交联调节剂为有机酸类，所述的保湿剂为甘油；所述的贴膏剂为巴布剂。
9.一种权利要求1所述的贴膏剂的制备方法，该制备方法包括
(1)取独一味药材加至少2倍量的水煎煮至少一次，得到提取液，将提取液浓缩至60℃时的相对密度1.10～1.15，加入乙醇使乙醇浓度为50～90％，搅拌，放置，过滤，滤液浓缩，得到独一味提取物；
(2)在独一味提取物中加入粘合剂、交联调节剂，使之溶解完全，得到I；
(3)另取保湿剂，分别加入水溶性聚合物、透皮吸收促进剂和交联剂，搅拌使分散均匀，得到II；
(4)将I与II混合，搅拌均匀，得到本发明的膏剂。
10.权利要求1所述的贴膏剂在制备治疗血瘀和肿痛的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供了含有独一味提取物的贴膏剂及其制备方法，该贴膏剂包括独一味提取物、水溶性聚合物、粘合剂、透皮吸收促进剂、交联剂、交联调节剂和保湿剂；所述的独一味提取物折合成独一味药材、水溶性聚合物、粘合剂、透皮吸收促进剂、交联剂、交联调节剂和保湿剂的重量比例为100∶2～10∶1～7∶5～30∶0.1～2∶0.1～3∶30～90；该方法包括取独一味药材加水煎煮再加入乙醇过滤，得到独一味提取物；然后加入粘合剂、交联调节剂，使之溶解完全，再加入保湿剂、水溶性聚合物、透皮吸收促进剂和交联剂，即可得到本发明的膏剂；本发明还提供了贴膏剂在制备治疗血瘀和肿痛的药物中的应用。
文档编号A61K9/70GK101259162SQ20081009021
公开日2008年9月10日 申请日期2008年4月1日 优先权日2008年4月1日
发明者阙文彬, 廖立东, 熊正涛, 达晓玲 申请人:四川贝力克生物技术有限责任公司