专利名称：：一种治疗糖尿病及其并发症的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明属于医药领域，具体涉及一种治疗糖尿病及其并发症的药物组合物。
背景技术：
：糖尿病发病率仍在逐年增加。根据世界卫生组织(WHO)提供的数据，发达国家糖尿病患病率已高达5%10%，在我国则为3%左右，全世界有1.3亿糖尿病患者；到2030年，全世界糖尿病患者人数将比2000年翻一番。值得注意的是，糖尿病患病率在发展中国家增加速度特别快，尤其是在那些从穷变富的发展中国家。糖尿病不只是一个富贵病，在经济和生活水平发生剧变的地区，现实地存在着糖尿病爆发流行的危险。我国糖尿病正处于爆发性流行。糖尿病并发症困扰着患者和医务界糖尿病得不到适当的控制并发肾病、视网膜病变、外周神经病变、:心脏病变的几率很高，严重影响生活质量。我国每年用于糖尿病的直接医疗成本超过180亿，占医疗总费用的4%。尽管患者数量如此之多，但较低的诊断率，疾病的慢性病程，对联合治疗的需要，缺少有效的长程治疗糖尿病的口服药物以及与注射治疗相关联的较差的患者依从性,均意味着目前在该领域中，仍有许多需求未得到满足。近年来医药工作者开展了大量有关糖尿病药物研发的工作，解决了糖尿病治疗中的一些问题，同时也潜在地改变了这种疾病的治疗模式。1990年由德国B公司推出第一个a-葡萄糖苷酶抑制剂-阿卡波糖(acarbose)，具有降低餐后血糖的特点，从而调节血糖，改善糖代谢异常等，因此被认为是抗糖尿病药物作用的一种新途径。近年来，同类药物伏格列波糖(voglibose)及米格列醇(miglitol)也相继上市。格列酮类药物(TZDs)是一类新型的胰岛素增敏剂，通过激活过氧化物酶增殖物激活受体(PPARs)y而显著改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗状态，降低血糖，并且可通过活化PPARy,下调TGF-pl，显著减少糖尿病患者尿微量白蛋白，从而延缓肾脏损伤。TZDs的肾保护保护作用可以独立于胰岛素增敏和糖脂代谢的调节而直接发挥，如抑制系膜增生、抑制炎症损害等。TZDs可能通过抑制ox-LDL的受体Lox-l的表达及由其引起的氧化应激，从而减轻ox-LDL对肾脏的损伤。其中吡咯列酮(pioglitazone)是格列酮类最畅销的药物。AnthologyofMedicine,August2003，Vol.22，第四期《肝素钙对2型糖尿病的影响》讨论了肝素钙对2型糖尿病人的辅助降糖作用，但肝素的使用剂量很大，而且也没有给出肝素钙与其他降糖药联合应用的具体实施方案。尽管市面上口服降糖药种类繁多，但迄今为止，还没有哪种药物能够凭一己之力将2型糖尿病患者的HbAlc水平长期保持在目标范围之内。传统保守的逐步治疗模式正是由于容易消耗患者胰岛e细胞功能，而成为患者血糖达标的"绊脚石"。研究发现，传统治疗从单一用药到不得不联合用药，平均每名患者要用is个月的时间，从而大大损耗胰岛e细胞。目前国际最新治疗模式，要求在3个月内实现从单药到联合用药的治疗过程，强调6个月内必须使患者血糖达标，要保护患者的胰岛e细胞，防止其功能衰竭是实现血糖长期稳定达标并预防并发症的重要途径。因此，开发具有疗效显著的复方降糖药成为一种趋势。IshidaH，KatoS等，Beneficialeffectoflong-termcombinedtreatmentwithvogliboseandpioglitazoneonpancreaticisletfunctionofgeneticallydiabeticGKrats.HormMetabRes.1998Nov;30(ll):673-8.报道了长期联合伏格列波糖和吡格列酮对糖尿病大鼠胰岛功能的促进作用。
发明内容我们鲁南制药集团紧跟降糖药物的研究前沿，根据近来的临床试验和糖尿病及其并发症治疗的最新理念，我们结合现有降糖药物的疗效特点，创造性地提出将肝素或低分子肝素或其可药用盐与其它降糖药联合使用，用于临床上血糖水平控制不佳，产生胰岛素抵抗的患者。或者用于糖尿病并发症患者的治疗，比如糖尿病肾病。经过大量的药效学试验，取得了很好的效果。本发明提供的一种治疗糖尿病及其并发症的药物组合物，其特征在于它含有糖苷酶抑制剂、盐酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可药用盐。其中，本发明的所有技术方案和实施例中涉及的肝素或其可药用盐的效价均为179U/mg，低分子肝素或其可药用盐的效价为104.4U/mg，另外，糖苷酶抑制剂优选米格列醇、伏格列波糖、阿卡波糖。并且我们发现，当所述药物组合物中糖苷酶抑制剂、盐酸吡格列酮和肝素钠或低分子肝素钠在1-90:0.5-9:0.9-50范围时，本发明具有较好的效果。更具体地，当本发明药物组合物米格列醇、盐酸吡格列酮和肝素钠或低分子肝素钠的重量比为1-45:0.5-9:0.9-50时，具有更好的效果。我们根据肝素、低分子肝素的钠盐和钙盐、盐酸吡格列酮、米格列醇、伏格列波糖和阿卡波糖的理化性质和便于广大患者的用药，将其制成固体制剂，包括胶囊、普通片剂、泡腾片、肠溶片、缓释片、胃漂浮片等剂型。本发明在确保降低血糖水平的前提下增强胰岛素的敏感性，并且可以减轻对胰岛e细胞刺激，对胰岛P细胞有一定的保护作用。本复方通过三种不同降血糖药物的科学组合，达到机制互补、相互协同、提高疗效、合理用药的目的。由实施例IO、11.12可以看出，在动物糖尿病模型的长期给药中，我们发现，本发明不仅在降糖方面具有很好的协同作用，更重要地，本发明在预防糖尿病并发症发面也表现出显著的协同作用，这对糖尿病患者的预后带来了福音。具体实施例方式实施例处方肝素钠盐酸吡格列酮米格列醇微晶纤维素乳糖2%羟丙基甲基纤维素水溶液低取代羟丙基纤维素0.9g0.5glg38g40g8g0.8g制备工艺肝素钠、盐酸吡格列酮和米格列醇过100目筛，微晶纤维素、乳糖以及低取代羟丙基纤维素过80目筛，然后称取处方量的肝素钠、盐酸吡格列酮、米格列醇采用等量递增法与低取代羟丙基纤维素、乳糖、微晶纤维素混合均匀，加入2%羟丙基甲基纤维素溶液适量，然后制粒，6CTC干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀，压片即得。实施例2低分子肝素钠50g盐酸吡格列酮9g伏格列波糖90g微晶纤维素150g乳糖90g2%羟丙基甲基纤维素水溶液适量交联聚乙烯吡咯烷酮35g硬脂酸镁2g制备工艺低分子肝素钠、盐酸吡格列酮和伏格列波糖过100目筛，微晶纤维素、乳糖以及交联聚乙烯吡咯垸酮过80目筛，然后称取处方量的肝素钠、盐酸吡格列酮、米格列醇与交联聚乙烯吡咯烷酮素、乳糖、微晶纤维素混合均匀，加入2%羟丙基甲基纤维素溶液适量，然后制粒，6(TC干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀，压片即得。实施例3低分子肝素钠15g盐酸吡格列酮3g阿卡波糖10g预胶化淀粉60g乳糖35g羧甲基纤维素钙14g1%羧甲基纤维素钠溶液适量硬脂酸镁lg肠溶包衣粉适量制备工艺按常规片剂工艺制作成所需规格的片剂(丸芯)，再用肠溶包衣粉包衣即可。实施例4低分子肝素钙8g盐酸吡格列酮3g米格列醇20g预胶化淀粉70g乳糖羧甲基纤维素钙6%聚乙二醇4000水溶液硬脂酸镁制备工艺同实施例2。31g16glg实施例5肝素钙20g盐酸吡格列酮3g米格列醇30g预胶化淀粉60g甘露醇38g羧甲基纤维素钙16g5%PVP的95%乙醇溶液适量微粉硅胶1.4g制备工艺将处方中的肝素钙、盐酸吡格列酮、米格列醇、预胶化淀粉、甘露醇和微粉硅胶分别过100目筛，混匀，加5%PVP的95%乙醇溶液适量制粒，60。C烘干，18目筛整粒，胶囊充填即可。实施例6低分子肝素钠加g盐酸吡格列酮3g阿卡波糖50g微晶纤维素100g乳糖50g羧甲基纤维素钙20g5%PVP的95%乙醇溶液适量微粉硅胶制备工艺同实施例5。1.4g实施例7低分子肝素盐酸吡格列酮阿卡波糖羧甲基纤维素钙交联聚乙烯吡咯烷酮微晶纤维素乳糖甘露醇5%聚乙二醇4000水溶液碳酸氢钠枸橼酸硬脂酸镁40g3g50g81080302553g80g2.5g制备工艺按常规泡腾片的制备工艺制备成所需的泡腾片即可(实施例8肝素钠10g盐酸吡格列酮.lg伏格列波糖60g微晶纤维素56g交联羧甲基淀粉钠10g乙基纤维素15g维生素E5g硬脂酸镁lg制备工艺按缓释片的制备工艺制备成缓释片即可。实施例98肝素钠5g盐酸吡格列酮3g米格列醇15g交联羧甲基淀粉钠8g微晶纤维素15g可压性淀粉45维生素E3g硬脂酸镁0.8g制备工艺直接压片制备成普通片剂即可。实施例10米格列醇吡格列酮肝素钠复方对糖尿病大鼠模型的影响1动物模型的制备随机取出5只大鼠作为对照组，其余55只大鼠禁食12h后，尾静脉注射四氧嘧啶60mg/kg，72h后，禁食5h测血糖，剔出造模未成功者。2分组与给药将造模成功大鼠按照血糖水平随机分为模型组，肝素组，米格列醇+吡格列酮组，肝素+米格列醇+吡格列酮复方高、中、低组，每组8只。各组分别灌胃给药如下模型组相同体积的生理盐水肝素组3mg/(kg.d)肝素钠米+吡组15mg/(kg.d)米格列醇+3mg/(kg.d)盐酸吡格列酮复方高组45mg/(kg.d)米格列醇+9mg/(kg.d)盐酸吡格列酮+9mg/(kg.d)肝素钠复方中组15mg/(kg.d)米格列醇+3mg/(kg.d)盐酸吡格列酮+3mg/(kg.d)肝素钠复方低组5mg/(kg.d)米格列醇+lmg/(kg.d)盐酸吡格列酮+lmg/(kg.d)肝素钠每天灌胃两次，连续10周。每次灌胃前8小时禁食，灌胃后即刻给予饲料。采血测定空腹血糖。3检测指标3.1血糖的测定将造模成功大鼠随机分组后，按剂量灌胃给药，连续10周，正常词养。所有大鼠分别于给药后4周、6周、8周、IO周取尾静脉血检测空腹血糖(FBG)。将取出的血样放入蛋白沉淀剂中，室温放置7min后，离心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法测全血糖。实验结果由表l可以看出，自第4周开始，复方高组和复方中组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，自第7周开始，复方低组与模型组比较有显著性差异，这说明各复方组有很好的降糖作用。另外，在给药10周后，复方高组和复方中组与米+吡组比较都有显著差异，与肝素组比较有极显著性差异，由此可以说明，米格列醇吡格列酮肝素钠复方对于降低糖尿病大鼠的血糖有很好的协同作用。表l复方对糖尿病大鼠空腹血糖的影响(mmol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*与模型组比较，P<0.05;"与模型组比较，P<0.01;*与米+吡组比较，P<0,05;^与米+吡组比较，P<0,01;&与肝素组比较，P<0.05;"与肝素组比较，P<0.013.2尿中微量清蛋白的测定试剂1、10%(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液(PH3.0):称取22.72g甘氨酸，用10%冰醋酸溶液稀释成1000ml，加NaN3l00mg，室温密封可稳定1年。3、溴酚蓝(1.924mmol/L)贮存液精确称取257、36mgBPB,用先水乙醇溶至200ml，4'C冰箱可稳定1年。4、溴酚蓝(0.231咖ol/L)显色剂取60mlBPB贮存液，加入2.5mlTritonX-100，用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存1年。标本的采集和检测于第2、4、7和10周将大鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜12小时尿，准确记录尿量。取4ml，叠氮钠处理后，离心(2000r/min)10min，取上清液置一2(TC冰箱保存待测尿白蛋白。取相应浓度的白蛋白标准液400于对应的杯内，各加200显色剂，混匀(防止产生气泡)，用紫外分光光度计，于600nm下测定吸光度A。实验结果由表2可以看出，自第7周开始，复方各组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的肾功能保护作用。另外，在给药10周后，复方高组和复方中组与米+吡组或肝素组比较都有显著差异，由此可以说明，米格列醇吡格列酮肝素钠复方对于降低糖尿病大鼠尿微量白蛋白方面有很好的协同作用。表2复方对糖尿病大鼠尿微量白蛋白的影响组别n2周4周7周10周模型组80.427±0.0860.646±0.0890.538±0.0930.513±0.108肝素组80.392±0.1510.573±0.1160.418±0.0840.382±0.078米+吡组80.423±0.0650.605±0.0940.399±0.0710.393±0.073复方低组80.414±0.0730.617±0,0990.402±0.098*0.321±0.09广复方中组80.436±0.0740.598±0.0720.376±0.182'0.249±0.125，复方高组80.398±0.1580.584±0.0610.361±0.067**0.237±0.086，*与模型组比较，P<0.05;"与模型组比较，P<0.01;"与米+吡组比较，P<0.05;'与肝素组比较，P<0.053.3脏器指数给药10周后，称大鼠体重，取肝脏、肾脏，计算肝指数、肾指数。计算方法脏器指数=(脏器重量/体重)*100%实验结果由表3可以看出，无论是肝指数还是肾指数，复方各组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的预防糖尿病大鼠并发症的作用；复方各组与米+吡组或肝素组比较都有显著性差异，由此可以说明，米格列醇吡格列酮肝素钠复方对于预防糖尿病大鼠并发症方面有很好的协同作用。表3复方对糖尿病大鼠脏器指数的影响组别n—体重(g)肝指数(％)肾指数(％)模型组8307.5士20.25.16±0.110.871±0.13肝素组8301.8±15.74.69±0.360.840±0.09米+吡组8310.5±27.14.85±0.400.852±0.12复方低组8315.7±19.64.58±0.18*0.787±0.08*复方中组8322.9±23.54.25±0.29*督0.763±0.07**#&复方高组8321.0±21.44.22±0.23，0.755±0.07"#&、模型组比较，P<0.05;"与模型组比较，P<0.01;s与米+吡组比较，P<0.05;4与肝素组比较，P<0.05实施例11伏格列波糖吡格列酮低分子肝素钠复方对糖尿病大鼠模型的影响1动物模型的制备方法同实施例102分组与给药将造模成功大鼠按照血糖水平随机分为模型组，低分子肝素组，伏格列波糖+吡格列酮组，低分子肝素+伏格列波糖+吡格列酮复方高、中、低组，每组8只。各组分别灌胃给药如下模型组相同体积的生理盐水低分子肝素组4.5mg/(kg.d)低分子肝素钠伏+吡组30mg/(kg.d)伏格列波糖+3mg/(kg.d)盐酸吡格列酮复方高组60mg/(kg,d)伏格列波糖+9mg/(kg.d)盐酸吡格列酮+13.5mg/(kg.d)低分子肝素钠复方中组30mg/(kg.d)伏格列波糖+3mg/(kg.d)盐酸吡格列酮+4.5mg/(kg.d)低分子肝素钠复方低组15mg/(kg.d)伏格列波糖+lmg/(kg.d)盐酸吡格列酮+1.5mg/(kg.d)低分子肝素钠每天灌胃两次，灌胃前8小时禁食，灌胃后即刻给予饲料，连续10周。采血测定空腹血糖。3检测指标3.1血糖的测定将造模成功大鼠随机分组后，按剂量灌胃给药，连续10周，正常饲养。所有大鼠分别于给药后4周、6周、8周、10周取尾静脉血检测空腹血糖(FBG)。将取出的血样放入蛋白沉淀剂中，室温放置7min后，离心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法测全血糖。实验结果由表4可以看出，自第2周开始，复方高组和复方中组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，自第7周开始，复方低组与模型组比较有显著性差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的降糖作用。另外，在给药7周后，复方高组与伏+吡组或低分子肝素组比较都有显著差异，在给药10周后，复方高组和复方中组与伏+吡组比较都有显著差异，与低分子肝素组比较有极显著性差异，由此可以说明，伏格列波糖吡格列酮低分子肝素钠复方对于降低糖尿病大鼠的血糖有很好的协同作用。表4复方对糖尿病大鼠空腹血糖的影响(mraol/L)组别n2周4周7周10周模型组823.7±4.320.4±4.318.8±3.117.0±2.9低分子肝素组821.7±3.617.3±2.815.9±2.313.2±2.1伏+吡组818.1±3.417.6±2.115.8±2.414.3±2.3复方低组820.5±3.717.4±2.513.5±1.9*9.6±2.9**&复方中组818.9±2.4*15.8±2.9*11.6±1.8**8.0±1.4纖复方高组817.3±2.8*13.5±1.7*站10.7±2.5**战77ii2**#她'与模型组比较，P<0.05;"与模型组比较，P<0.01;"与伏+吡组比较，P<0.05;'与肝素组比较，P<0.05;"与低分子肝素组比较，P<0.013.2尿中微量清蛋白的测定试剂1、10%(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。:2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液(PH3.0):称取22.72g货氨酸，用10%冰醋酸溶液稀释成1000ml，加NaN3l00mg，室温密封可稳定1年。3、溴酚蓝(1.924mmol/L)贮存液精确称取257、36mgBPB，用无水乙醇溶至200ml，4'C冰箱可稳定1年。4、溴酚蓝(0.231咖ol/L)显色剂取60mlBPB贮存液，加入2.5mlTritonX-100，用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存l年。标本的采集和检测于第2、4、7和10周将大鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜12小时尿，准确记录尿量。取4ml，叠氮钠处理后，离心(2000r/min)10min,取上清液置一2(TC冰箱保存待测尿白蛋白。取相应浓度的白蛋白标准液400于对应的杯内，各加200显色剂，混匀(防止产生气泡)，用紫外分光光度计，于600nm下测定吸光度A。实验结果由表5可以看出，自第4周开始，复方各组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的肾功能保护作用。另外，在给药10周后，复方高组和复方中组与伏+吡组或低分子肝素组比较都有显著差异，由此可以说明，伏格列波糖吡格列酮低分子肝素钠复方对于降低糖尿病大鼠尿微量白蛋白方面有很好的协同作用。表5复方对糖尿病大鼠尿微量白蛋白的影响组别n2周4周7周10周模型组80.463±0.070.521±0.100.494±0.080.460±0.10低分子肝素组8伏+吡组8复方低组8复方中组8复方高组80.407±0.280.439±0,110.438±0.160.305±0.07*'0.313±0.15*'0.412±0.11*0.486±0.080.496±0.230.311±0.17*0.302±0.18*0,406±0.190.417±0.070.415±0.080.298±0.15*0.231±0.16*0.357±0.080.403±0.090.391±0.15*0.232±0.07*#&0.205±0.25**#&*与模型组比较，P<0.05;"与模型组比较，P<0.01;a与伏+吡组比较，P<0.05;&与低分子肝素组比较，P<0.053.3脏器指数给药10周后，称大鼠体重，取肝脏、肾脏，计算肝指数、肾指数。计算方法脏器指数=(脏器重量/体重)*100%实验结果由表6可以看出，无论是肝指数还是肾指数，复方各组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的预防糖尿病大鼠并发症的作用；复方各组与伏+吡组或低分子肝素组比较都有显著性差异，由此可以说明，伏格列波糖吡格列酮低分子肝素钠复方对于预p糖尿病大鼠并发症方面有很好的协同作用。表6复方对糖尿病大鼠脏器指数的影响组别n体重(g)肝指数(％)肾指数(％)模型组8398.5±30.74.83±0.890.93±0.088低分子肝素组8415±31.24.61±0.840.81±0.087伏+吡组8422±28.44.53±0.680.84±0.094复方低组8419±35.64.50±0.710.78±0.083*复方中组8434±33.54.17±0,72*#&0.73±0.076*#&复方高组8428±31.64.13±0.67*'#&0.71±0.047**#&*与模型组比较，P<0.05;"与模型组比较，P<0.01;#与伏+吡组比较，P〈0.05;&与低分子肝素组比较，P<0.05实施例12阿卡波糖吡格列酮肝素钠复方对糖尿病大鼠模型的影响1动物模型的制备方法同实施例102分组与给药将造模成功大鼠按照血糖水平随机分为模型组，肝素组，阿卡波糖+吡格列酮组，肝素H阿卡波糖+吡格列酮复方高、中、低组，每组8只。各组分别灌胃给药如下模型组相同体积的生理盐水肝素组3mg/(kg.d)肝素钠阿+吡组:30mg/(kg.d)阿卡波糖+3mg/(kg.d)盐酸吡格列酮复方高组15mg/(kg.d)阿卡波糖+9mg/(kg.d)盐酸吡格列酮+9mg/(kg.d)肝素钠复方中组30mg/(kg.d)阿卡波糖+3mg/(kg.d)盐酸吡格列酮+3mg/(kg.d)肝素钠复方低组60mg/(kg.d)阿卡波糖+lmg/(kg.d)盐酸吡格列酮+lmg/(kg.d)肝素钠每天灌胃两次，灌胃前8小时禁食，灌胃后即刻给予饲料，连续10周。采血测定空腹血糖。3检测指标3.1血糖的测定将造模成功大鼠随机分组后，按剂量灌胃给药，连续10周，正常饲养。所有大鼠分别于给药后2周、4周、7周、10周取尾静脉血检测空腹血糖(FBG)。将取出的血样放入蛋白沉淀剂中，室温放置7min后，离心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法测全血糖。实验结果由表7可以看出，自第2周开始，复方高组和复方中组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，自第7周开始，复方低组与模型组比较有显著性差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的降糖作用。另外，在给药4周后，复方高组和复方中组与肝素组比较都有显著差异，在给药10周后，复方高组和复方中组与阿+吡组比较都有显著差异，与肝素组比较有极显著性差异，由此可以说明，阿卡波糖吡格列酮肝素钠复方对于降低糖尿病大鼠的血糖有很好的协同作用。表7复方对糖尿病大鼠空腹血糖的影响(ramol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>'与模型组比较，P<0.05，"与模型组比较，P<0.01;与阿+吡组比较，p<0.05，"#与阿+吡组比较，P<0.01;4与肝素组比较，P<0.05,"与肝素组比较，P<0.01.3.2尿中微量清蛋白的测定试剂1、10%(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液(PH3.0):称取22.72g甘氨酸，用10%冰醋酸溶液稀释成1000ml，加NaN3l00mg，室温密封可稳定1年。3、溴酚蓝(1.924mmol/L)贮存液精确称取257、36mgBPB，用无水乙醇溶至200ml，4t冰箱可稳定1年。4、溴酚蓝(0.231mmol/L)显色剂取60mlBPB贮存液，加入2.5mlTritonX-100，用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存1年。标本的采集和检测于第2、4、7和10周将大鼠分别放于代谢笼中词养，收集隔夜12小时尿，准确记录尿量。取4ml，叠氮钠处理后，离心(2000r/min)10min，取上清液置一2(TC冰箱保存待测尿白蛋白。取相应浓度的白蛋白标准液400于对应的杯内，各加200显色剂，混匀(防止产生气泡)，用紫外分光光度计，于600nm下测定吸光度A。实验结果由表8可以看出，自第2周开始，复方各组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的肾功能保护作用。另外在给药7周后，复方高组和复方中组与肝素组比较都有显著差异，在给药10周后，复方高组和复方中组与阿+吡组或肝素组比较都有显著差异，由此可以说明，阿卡波糖吡格列酮肝素钠复方对于降低糖尿病大鼠尿微量白蛋白方面有很好的协同作用。表8复方对糖尿病大鼠尿微量白蛋白的影响组别n2周4周7周10周模型组80.514±0.1410.621±0.1580.540±0.0510.483±0.114肝素组80.442±0.1370.533±0.0750.421±0.0830.366±0.093*阿+吡组80.477±0.0830.557±0.0480.465±0.0720.430±0.099复方低组80.485±0.0330.568±0.1470.458土O.035*0.403±0.135复方中组80.405±0.0310.373±0.139**#0.361±0.032**#0.294±0.027*:复方高组80.400±0.0280.464±0.080*0.345±0.028**她0,267±0.025*:*与模型组比较，P<0.05;"与模型组比较，P<0.01;"与阿+吡组比较，P<0.05;&与肝素组比较，P<0.05.3.3脏器指数给药10周后，称大鼠体重，取肝脏、肾脏，计算肝指数、肾指数。计算方法脏器矛;数=(脏器重量/体重)*100%实验结果由表9可以看出，无论是肝指数还是肾指数，复方各组与模型组比较，有显著差异或极显著性差异，这说明各复方组有很好的预防糖尿病大鼠并发症的作用；复方各组与阿+吡组或肝素组比较都有显著性差异，由此可以说明，阿卡波糖吡格列酮肝素钠复方对于预防糖尿病大鼠并发症方面有很好的协同作用。表9复方对糖尿病大鼠脏器指数的影响组别n体重(g)肝指数(％)肾指数(％)模型组8352.1±27.85.02±0.810.92±0.091肝素组8377.5±25.64.46±0.620.79±0.068阿+吡组8384.8±29.24.70±0,590.88±0.061复方低组8378.0±24.34.44±0.51*0.79±0.076*复方中组8391.4±26.74.11±0.47**#0.74土0.063"#&复方高组8388.6±27.34.06±0.36**#&0.72±0.057**#&与模型组比较，P<0.05;**与模型组比较，P<0.01;与阿+吡组比较，P<0.05;&与肝素组比较，P<0.05.权利要求1.一种治疗糖尿病及其并发症的药物组合物，其特征在于它含有糖苷酶抑制剂、盐酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可药用盐。2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于糖苷酶抑制剂、盐酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可药用盐的重量比是1-90:0.5-9:0.9-50，其中肝素或其可药用盐的效价为179U/mg，低分子肝素或其可药用盐的效价为104.4U/mg。3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于糖苷酶抑制剂是米格列醇、伏格列波糖、阿卡波糖。4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于糖苷酶抑制剂是米格列醇。5.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于它含有肝素钠或低分子肝素钠、盐酸吡格列酮和米格列醇。6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于米格列醇、盐酸吡格列酮和肝素钠或低分子肝素钠的重量比为1-45:0.5-9:0.9-50。7.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于它是固体制剂。8.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于它是胶囊、普通片剂、泡腾片、肠溶片、缓释片、胃漂浮片。全文摘要本发明属于医药领域，具体提供了一种治疗糖尿病及其并发症的药物组合物，含有肝素或低分子肝素或可药用盐、盐酸吡格列酮和糖苷酶抑制剂，并将其制成固体制剂，包括胶囊、普通片剂、泡腾片、肠溶片、缓释片、胃漂浮片等剂型。本发明通过三种不同降血糖药物的科学组合，达到机制互补、相互协同、提高疗效、合理用药的目的。文档编号A61K31/133GK101584688SQ200810098469公开日2009年11月25日申请日期2008年5月24日优先权日2008年5月24日发明者赵志全申请人:鲁南制药集团股份有限公司