专利名称：一种盾叶薯蓣总皂苷元口服药物制剂及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含盾叶薯蓣总皂苷元的药物制剂，特别是一种盾叶薯蓣中的皂苷类成分 水解成以皂苷元为主要有效成分的口服药物制剂及其用途。属中药领域。
背景技术：
盾叶薯蓣Dioscorea zingiberensis C. H. W right又名黄姜、火头根，隶属于单子叶植 物百合目薯蓣科薯蓣属根状茎组多年生缠绕草质藤木植物，主要含有皂苷类成分，包括薯蓣 皂苷、纤细皂苷、原纤细皂苷、盾叶新苷、原盾叶皂苷等十几种甾体皂苷类成分，从中共分 得4种甾体皂苷元，薯蓣皂苷元(diosgenin， Dio)是其中一种甾体皂苷元，也称为薯蓣皂 甙元或薯蓣皂素，它是由薯蓣皂苷(dioscin)经水解反应脱去糖基后的产物(黄亚辉、盛孝 邦的文章"薯蓣皂甙元的研究进展"，发表于2005年10月的《中国野生植物资源》第24巻 第5期第20页)。
虽然盾叶薯蓣中的皂苷类成分一直被做为药用物质被临床应用，但近年来的研究发现， 真正在人体内发挥药效的，是皂苷在人肠道内被菌群分解转化得到的皂苷元。大量实验证明， Dio在抗肿瘤、免疫调节、抗炎、降血脂、抗艾滋病等方法均表现出很强的生物活性(王晓 鹏综述文章"薯蓣皂苷生物活性研究新进展"，发表于《国外医学中医中药分册》2004年第 26巻第3期的第138页)。
许多药代动力学研究证明，皂苷类成分在肠道内难以吸收，绝大多数需经肠道细菌、酶 分解为皂苷元才能透过粘膜被吸收入血而发挥疗效。故为减少盾叶薯蓣中皂苷类成分在体内 吸收利用的步骤，在体外先以酸水解、酶水解或微生物水解的方法对皂苷类成分进行水解， 以其苷元用药，则发挥疗效迅速，比较合理。苷由苷元和糖组成，其亲水性强，分子量大， 而苷元的亲脂性强，分子量小。苷元相对于苷，脱去了糖基，其极性减小，脂溶性增强。从 生物药剂学的研究中可以得知，脂溶性强的物质虽然会更易于被人体吸收，但又正因为其脂 溶性强，造成其不易被体液润湿，所以实际上很难进入吸收的过程，其生物利用度较低。这 一问题并不是常规制剂工艺所能解决的，多年来也一直没有引起重视，所以才会出现皂苷元 没有被制成制剂的现象。盾叶薯蓣中的皂苷类成分同样存在这样问题，因此对盾叶薯蓣总皂 苷元的研究有着重要的意义。但是，现有的技术都忽视了对盾叶薯蓣总皂苷元的研究，其效 果与应用情况一直处于空白状态。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种以盾叶薯蕷总皂苷元为活性成分的口服药物；第二目的是提供该药物的制剂形式，特别是一种高效制剂； 第三目的是提供该药物高效制剂的制备方法。
最后是提供该药物在治疗痛风病、高脂血症、糖尿病、冠心病、心绞痛、风湿病或抑郁 病的药物中的应用。
本发明目的第一 目的是这样实现的
发明人提供一种口服的药物，该药物以盾叶薯蓣总皂苷元为活性成分。
以往尽管人们服用的是含盾叶薯蕷总皂苷的制剂，但必须要等到皂苷被肠道菌群分解转 化成苷元后，才能真正起效。而这一转化过程中存在的诸多缺陷导致药效不稳药物在体内 运行时间长、转化效率低；转化过程不确定，分解得到的不仅是苷元，也可能是其他无效物 质；个体差异大，每个人转化效率高低不同，不能充分发挥药效等等。鉴于以上原因，只有 将盾叶薯蕷总皂苷元直接做成药物制剂应用于人体，才能保证减少用药量的同时，提高药效。
针对盾叶薯蓣的药用价值，发明人按现有技术从盾叶薯蓣药材中提取得到盾叶薯蓣总皂 苷，并对其进行水解，使其中的皂苷类成分脱去糖基，生成更具生物活性的皂苷元，即成为 本发明所提供的盾叶薯蓣总皂苷元。发明人经研究证实，苷类物质经水解后所得苷元没有了 糖基，其亲脂性大大增强，因而苷元较苷更易透过肠粘膜被吸收；同时，药物的分子越小也 越容易被吸收，苷水解掉所带的糖分子变成苷元后，分子变得更小，也会更易吸收。另外， 以苷元直接作为药用物质，克服了以往苷类物质在体内运行时间长、转化效率低、转化结果 不确定等因素，大大提高了药物的生物利用率，节约了药物资源。
在本发明提供的药物中，盾叶薯蓣总皂苷元可以单独使用，也可以与其他药物成分联合 使用，即在药物活性成分中，可以只有盾叶薯蓣总皂苷元纯品，也可以是盾叶薯蓣总皂苷 元粗品，还可以是盾叶薯蓣总皂苷元与其他药物的混合物，达到配合治疗、辅助治疗的目的。 本发明优选使用盾叶薯蓣总皂苷元粗品，即从药材中提取盾叶薯蓣总皂苷，再以适当方式水 解，并根据需要进行精制，得到所需纯度。所得提取物中除了主要含有盾叶薯蓣总皂苷元外， 还含有其他提取和水解过程中不可避免的附产物及杂质，包括少量未水解的苷以及次生苷等。
上述的水解方法包括了酸水解、酶水解或微生物水解，发明人经过筛选，分别提供如下 几种具体的水解方法酸水解可以用1 10mol/L的盐酸、硫酸、醋酸及甲酸等进行水解；酶 水解可以用苦杏仁酶、麦芽糖酶、转化糖酶、橙皮苷酶等进行水解；微生物可以用大肠杆菌、 肠球菌、乳酸杆菌、梭状芽孢杆菌、畸形菌体、双岐杆菌及人体肠道正常菌群等进行水解。
本发明的第二目的是提供上述盾叶薯蓣总皂苷元的药物制剂，尤其是一种高效制剂。本 领域技术人员可以方便地将本发明的盾叶薯蓣总皂苷元配合适当的辅料，制备成各种常规制 剂。但是发明人还注意到另一个问题，即由于苷元的脂溶性相对较强，因而其制剂应用于人体后，其中的苷元成分不易被润湿和溶出，如果不能解决这一问题，也会影响苷元的吸收。 所以，针对这一问题，发明人提供了一种新技术方案，可以保证将盾叶薯蓣总皂苷元制成高 效制剂，该技术方案是-
方案一 一种以本发明所述盾叶薯蕷总皂苷元为活性成分的高效药物制剂，其辅料中中 含有生物黏附剂和润湿剂，还可以含有分散剂及其他药剂学上的常规辅料，并被制成片剂、 胶囊剂、颗粒剂、丸剂等口服制剂。
该技术方案的核心在于将盾叶薯蓣总皂苷元用于药物制剂，并通过特殊辅料保证盾叶薯 蕷总皂苷元的高效利用。因而，体现到具体的药物制剂中，其药物活性成分中可以只有本发 明的盾叶薯蓣总皂苷元，也可以与其他药用或非药用物质配合使用，只要其目的是将所含的 盾叶薯蓣总皂苷元利用生物黏附剂和润湿剂，还可以利用分散剂，进行润湿、分散，以制成 口服高效制剂，均应在本发明申请保护的范围内。同理，本发明技术方案选用生物黏附剂和 润湿剂，还可以用分散剂作为主要辅料，目的在于使盾叶薯蓣总皂苷元得以充分、均匀的分 散，利于吸收；在实际应用中，还可以根据需要加入其他常规辅料及成型辅料，如淀粉、微 晶纤维素、羧甲淀粉钠、柠檬酸、碳酸氢钠、低取代羟丙甲纤维素、乳糖、甘露醇、枸橼酸、 阿斯帕坦、糊精、硬脂酸镁等，这些均应视为在本发明技术的基础上完成的工作，也应受本 发明申请的保护。
在该技术方案中，生物黏附剂优选为壳聚糖、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮或它们之间的混 合物；润湿剂优选为卵磷脂、泊洛沙姆或其混合物；分散剂优选为微粉硅胶、环糊精、聚乙 二醇或它们之间的混合物。
其中，壳聚糖、卡波姆作为生物黏附剂，具有生物黏附性能，可延长药物在胃肠道的滞 留时间，显著提高药物的生物利用度。卵磷脂、泊洛沙姆等表面活性剂对盾叶薯蓣总皂苷元 有表面润湿的作用，降低表面张力，增加脂溶性的盾叶薯蓣总皂苷元的溶解度，促进其迅速 吸收利用，利于迅速发挥疗效。微粉硅胶、环糊精、聚乙二醇作为分散剂，其本身具有亲水 性，利于苷元的润湿、分散，增强药物的稳定性。将本发明的盾叶薯蓣总皂苷元与上述辅料 配合使用，充分混合均匀，可以增强其中盾叶薯蓣总皂苷元的分散性、润湿性，提高其生物 利用度。
在优选的情况下，本发明药物中各成分所占比例优选为活性成分20 60%，生物黏附剂
1 10%，润湿剂5 20%，分散剂0 30%，其他辅料0 50%。其中的其他辅料是指制剂
在成型过程中的一些其他辅料，如淀粉、微晶纤维素、羧甲淀粉钠、柠檬酸、碳酸氢钠、
低取代羟丙甲纤维素、乳糖、甘露醇、枸橼酸、阿斯帕坦、糊精、硬脂酸镁等。
上述技术方案主要应用于口服制剂，最适宜的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂和丸剂。
方案二 一种以本发明所述盾叶薯蓣总皂苷元为活性成分的高效药物制剂，其辅料中中 含有分散剂和润湿剂，还可以含有生物黏附剂及其他药剂学上的常规辅料，并被制成的软胶 囊剂、液体硬胶囊剂、滴丸剂等口服制剂。
该技术方案的核心在于将盾叶薯蓣总皂苷元用于药物制剂，并通过特殊辅料保证盾叶薯 蓣总皂苷元的高效利用。因而，体现到具体的药物制剂中，其药物活性成分中可以只有本发 明的盾叶薯蓣总皂苷元，也可以与其他药用或非药用物质配合使用，只要其目的是将所含的 盾叶薯蓣总皂苷元利用分散剂和润湿剂，还可以利用生物黏附剂，进行润湿、分散，以制成 口服高效制剂，均应在本发明申请保护的范围内。同理，本发明技术方案选用分散剂和润湿 剂，还可以用生物黏附剂作为主要辅料，目的在于使盾叶薯蓣总皂苷元得以充分、均匀的分 散，利于吸收；在实际应用中，还可以根据需要加入其他常规辅料及成型辅料，如甘油、甘 氨酸、柠檬酸、尼泊金乙酯、蜂蜡等，这些均应视为在本发明技术的基础上完成的工作，也 应受本发明申请的保护。
在该技术方案中，分散剂优选为植物油或聚乙二醇；润湿剂优选为卵磷脂、泊洛沙姆、 丙二醇或它们之间的混合物；生物黏附剂优选为壳聚糖、卡波姆或其混合物。将皂苷元与上 述辅料配合使用，充分混合均匀，可以增强苷元分散性、润湿性，提高其生物利用度。
其中，卵磷脂、泊洛沙姆、丙二醇等表面活性剂对盾叶薯蓣总皂苷元有表面润湿的作用， 降低表面张力，增加脂溶性的盾叶薯蓣总皂苷元的溶解度，促进其迅速吸收利用，利于迅速 发挥疗效。植物油、聚乙二醇作为分散剂，可以将盾叶薯蕷总皂苷元分散均匀。壳聚糖、卡 波姆作为生物黏附剂，具有生物黏附性能，可延长药物在胃肠道的滞留时间，显著提高药物 的生物利用度。将本发明的盾叶薯蓣总皂苷元与上述辅料配合使用，充分混合均匀，可以增 强其中盾叶薯蓣总皂苷元的分散性、润湿性，提高其生物利用度。
在优选的情况下，本发明药物中各成分所占比例优选为活性成分10 40%，生物黏附剂0 10%，润湿剂5 20%，分散剂50 80%，其他辅料0 20%。其中的其他辅料是指制剂在 成型过程中的一些其他辅料，如甘油、甘氨酸、柠檬酸、尼泊金乙酯、蜂蜡等。
上述技术方案主要应用于口服制剂，最适宜的剂型为液体硬胶囊剂、软胶囊剂和滴丸剂。 本发明的第三目的是提供上述高效制剂的制备方法，其中的核心技术是将盾叶薯蓣总皂 苷元与所需辅料通过熔融、溶解、搅拌、研磨或超微粉碎混合中的任一种方法混合均匀后， 再加入所需常规制剂辅料，按常规工艺制成制剂。而这里的混合方法优选振动磨超微粉碎混 合的方法。
只有通过有效的混合方式，才能保证提取物中所含盾叶薯蕷总皂苷元与特殊辅料充分分散均匀，应用于人体时才能够迅速润湿、溶出、吸收，发挥高效的作用。经发明人验证，熔 融、溶解、搅拌、研磨或超微粉碎混合等方式，都能够实现本发明目的，而其中的超微粉碎 方式效果最为突出。
虽然超微粉碎技术早已出现，但在中药技术领域的应用， 一直停留于"粉碎"的概念上， 始终没有突破，因而其范围很局限。发明人在实践中发现，超微粉碎技术己不仅仅是粉碎技 术，更是一种高效混合技术，它可使苷元与辅料一起受到强烈的正向挤压力和切向剪切力的 作用，运用高速、高能量进行粉碎、混合，所得到的粉末中心粒径由原来的75um减小到10 ym以下，粒度细腻、均匀，表面积增加，孔隙率增大，使药物粒子与辅料粒子充分接触、混 合，既提高了药物粒子的分散度，又保证了其迅速润湿并溶出，大大提高了药物的吸收率和 生物利用度，其优势是目前常规混合方法不可比拟的。在这其中，振动磨超微粉碎方式是实 现本发明目的的最佳方法。
本发明药物可以在制备用于治疗痛风病、高脂血症、糖尿病、冠心病、心绞痛、风湿病 或抑郁病的药物中应用。 有益效果
本发明的技术方案，从实用的角度考虑，结合制剂的需要，将盾叶薯蓣中的皂苷类成分 水解后，所得的盾叶薯蕷总皂苷元加适宜辅料，通过超微粉碎的方法高度粉碎混合，制成所 需制剂。既能使活性成分最大程度的润湿、溶解和吸收，又能延长苷元的滞留时间，更进一 步促进苷元的吸收利用，提高生物利用度。具体来说，本专利方法具有以下优势-
1、 提高生物利用度采用本专利发明制备方法，可明显改善其他方法的不足，其具有以 下几个明显优势苷元的水溶性差，亲脂性强，不易润湿吸收，而本发明在制剂微粉混合前 加入了亲水性的高分子生物黏附剂及润湿剂、分散剂，增强了苷元的润湿性，利于其吸收利 用，而且水解后剩余的部分皂苷类成分利于润湿，也能够对亲脂性的苷元有一定的润湿性能； 微粉化本身即可大大的增强药物的黏附性能，提高润湿性，而且本发明加入了高效生物黏附 剂，可以延长微粉的滞留时间，增强有效成分的吸收。
2、 节省原料，提高利用率本发明方法能最大限度地利用原料药，用小于一般制剂的药 量即可获得原处方的疗效，节约原料，提高原料药的利用率，又可以减少资源的浪费。
故本发明取得了突出的技术效果，达到了发明目的。为进一步验证本发明在为了证明本 发明药物制剂提高生物利用度的作用，发明人依据其功能主治，进行了动物对比药效学实验 一、动物体内代谢试验 1、材料 1. 1试验动物大耳白兔，体重(2.0土0.2)kg，雌雄各半。由山东大学实验动物中心提供。
1、 2试验药品及仪器
皂苷制剂取盾叶薯蓣总皂苷64g (相当于盾叶薯蓣药材lkg)，加卡波姆10g、卵磷脂 10g，并加微粉硅胶至100g，超微粉碎混合60分钟，取其中50g以水混悬至100ml;
皂苷元一般制剂取盾叶薯蓣总皂苷元45g(相当于盾叶薯蓣药材lkg)，加淀粉至100g， 混匀，取其中50g以水混悬至100ml;
皂苷元高效制剂取盾叶薯蓣总皂苷元46g (相当于盾叶薯蓣药材lkg)，加卡波姆10g、 卵磷脂10g，并加微粉硅胶至100g，超微粉碎混合60分钟，取其中50g以水混悬至100ml。
仪器TGL-20B离心机；岛津LC一10A高效液相色谱仪。
2、 试验方法取禁食12h，自由饮水的大耳白兔6只，体重为(2.0士0.2)kg，随机分为 3组，每组2只。第1组为皂苷元高效制剂组(实验组)；第2组为皂苷元一般制剂组(参比组 1);第3组为皂苷制剂组(参比组2)。每组灌胃给药剂量均为8ml/只，分别于给药后第5、 10、 20、 30、 60、 90、 120、 180、 240min耳缘静脉采血约2nd，置于肝素化试管中，以4000r/min 离心20min，血浆于-20。C冰箱保存待用。取lml血浆样品，100。C水浴10min以15000r/min 离心20min，取上清液以HPLC法检测薯蓣皂苷元浓度。每个时间的峰面积为2只白兔同一时 间点的平均值。计算血药浓度，绘制药时曲线。
3、 试验结果结果见下表。
表 对白兔血药浓度测定结果(ug/ml)
时间(分钟)皂苷元高效制剂皂苷元--般制剂皂苷制剂
526.1015.9611.48
1031.7918.3712. 38
2043.1524.8314. 98
3050.2531.7319.86
6062.1237.9228.86
9069.0836.7529. 70
12073.8234.9227.42
18071.7231.3023.68
24063.9229.0221. 35
根据上述时间与血药浓度数据，绘制药时曲线，详见附图。
以上试验结果表明，皂苷元高效制剂中的薯蓣皂苷元吸收入血浓度比皂苷元一般制剂及 皂苷制剂高，效果明显。二、对高尿酸血症大鼠血尿酸水平的影响
1、 材料
1.1动物Wister大鼠，雌雄各半，体重200土20g。由山东大学实验动物中心提供。 1.2药品与试剂
皂苷制剂取盾叶薯蓣总皂苷64g (相当于盾叶薯蓣药材lkg)，加壳聚糖5g、卵磷脂5g、 微粉硅胶25g，并加微晶纤维素至100g，超微粉碎混合50分钟，取其中20g以水混悬至lOOml;
皂苷元一般制剂取盾叶薯蓣总皂苷元45g(相当于盾叶薯蓣药材lkg)，加淀粉至100g， 混匀，取其中20g以水混悬至100ml;
皂苷元高效制剂取盾叶薯蓣总皂苷元45g (相当于盾叶薯蓣药材lkg)，加壳聚糖5g、 卵磷脂5g、微粉硅胶25g，并加微晶纤维素至100g，超微粉碎混合50分钟。取其中20g以 水混悬至100ml。
阳性对照药取秋水仙碱6g，加水制成100ml的溶液。
试剂次黄嘌呤，烟酸，血尿酸测试药盒。
1.3仪器紫外-可见光分光光度计UV1100(上海天美科学仪器有限公司)。
2、 方法与结果
2. l试验方法将60只大鼠随机分为六组，每组10只空白对照组、模型组、阳性药 对照组、苷元高效制剂组、苷元一般制剂组、皂苷制剂组，每天灌胃给药l次，连续给药4d， 给药剂量分别为10ml/kg，空白对照组、模型组灌胃同体积生理盐水。各组动物末次给药lh 后，除空白对照组外其余4组动物腹腔注射次黄嘌呤100mg/kg，同时灌胃给予烟酸80mg/kg; 空白对照组动物腹腔注射并灌胃给予等体积的生理盐水。注射后30min，各组动物经腹主动 脉取血，3000r/min离心15min，取血清，按血尿酸测试盒说明书操作，测血尿酸值。
2.2试验结果见下表。
表 对高尿酸血症大鼠血尿酸水平的影响(x ±S)
组别动物数(只)剂量(g/kg)血尿酸值("mol/L)
空白对照组10一95. 63±15. 95
模型组10一311.87±25. 28
苷元高效制剂组102. 0156. 36 ±28. 42**
苷元一般制剂组102.0219. 21 ±20. 36'
皂苷制剂组102.0248. 15±17. 07+
秋水仙碱组100.6160. 03±23. 25**
10注与模型组比较，〈0.05， "P〈0.01。
以上试验结果表明，与空白对照组比较，模型组动物血尿酸值明显升高，提示造模成功。 阳性药对照组、皂苷元高效制剂组与模型组比较，血尿酸值明显降低，具有极显著性差异； 苷元一般制剂组、苷类制剂组与模型组比较，血尿酸值降低，具有显著性差异，苷元一般制 剂组较苷类制剂组效果好。
三、 盾叶薯蓣总皂苷元抗大鼠静脉血栓形成的作用 1、材料
1.1动物Wister大鼠，雌雄各半，体重200土20g。由山东大学实验动物中心提供。
1. 2药品
皂苷制剂、皂苷元一般制剂、皂苷元高效制剂的制备方法同上。
2、 方法与结果
2. l试验方法取Wistar大鼠40只，雌雄各半，体重200士20g，随机分为4组，每组 10只皂苷元高效制剂组、皂苷元一般制剂组、皂苷制剂组、空白对照组，灌胃给药每天l 次，给药剂量分别为10ml/kg，空白对照组灌胃给予同体积生理盐水，连续7天。末次给药 6h后，用内径为lmm的玻璃毛细管插入鼠内眦静脉丛取血，至毛细管血柱达5cm，每隔30s 折断毛细管一段，检查有无出现凝血丝，计算毛细管采血到出现血凝丝时间，即为凝血时间。
2.2试验结果结果见下表。
表 对大鼠静脉血栓形成的影响(又土S)
组别 动物数(只) 剂量(g/kg) 凝血时间(s)
苷元高效制剂组 10 2.0 123.00±26.27，
苷元一般制剂组 10 2.0 96.00±18.97**
皂苷制剂组 10 2.0 81.00±14.49*
空白对照组 10 — 69.00±20.25
与空白对照组比较(t检验)，*P<0.05， **P〈0.01， WP<0.001。
以上试验结果表明，盾叶薯蓣总皂苷元高效制剂组均可明显延长凝血时间，与空白对照 组比较具有显著性差异，均较皂苷元一般制剂组、皂苷制剂组效果好。
四、 盾叶薯蓣总皂苷元对抑郁小鼠的影响 1、材料
1. l动物昆明种小鼠，(20士2)g，雌雄各半，由山东大学实验动物中心提供。饲养在25 r条件下，实验前稳定3d，自由进食饮水。1.2药品
皂苷制剂、皂苷元一般制剂、皂苷元高效制剂的制备方法同上。 阳性对照药取氟西汀3g，加水制成100ml的溶液。 2、方法与结果
2. l试验方法小鼠强迫游泳实验。
取小鼠50只，雌雄各半，体重(20士2)g，随机分为5组，每组10只空白组、阳性药 组、皂苷元高效制剂组、皂苷元一般制剂组、皂苷制剂组。给药剂量均为20ml/kg，空白组 灌胃给予同体积的生理盐水，各组动物每日灌胃给药l次，连续给药7d。末次给药30min后， 将小鼠放入高20cm，直径14cm的圆柱形玻璃缸中，每缸一只，缸中水深10cm，水温(25士1) °C。小鼠游泳2min后，立即开始观察，观察持续4min，累计此4min内的不动(小鼠在水中 停止挣扎，或动物呈漂浮状态，仅有细小的肢体运动)时间。 2.2试验结果结果见下表。
表 对小鼠强迫游泳不动时间的影响(又土S， n=10)
组别剂量(g/kg)不动时间(秒)相对强度(°/。)
苷元高效制剂组4. 092. 8±21.5**49. 2
苷元一般制剂组4. 0114. 7±16. 9*37.2
皂苷制剂组4. 0121. 2±26. 1*33.7
阳性药组0.691.9±19. 3"49.7
空白组—182. 7±18. 80
注与对照组比较，*P<0.05， ，〈0.01。
以上试验结果表明，皂苷元的高效制剂组、阳性药组均可明显縮短小鼠不动时间，与空
白对照组比较具有极显著性差异，均较皂苷制剂组效果好；皂苷元一般制剂组、皂苷制剂组， 与空白对照组比较具有显著性差异，皂苷元一般制剂组优于皂苷制剂组。 五、盾叶薯蓣总皂苷元对酒石酸锑钾致小鼠扭体反应的影响
1、 材料
1.1动物昆明种小鼠，由山东大学实验动物中心提供。 1.2药品与试剂
药品皂苷制剂、皂苷元一般制剂、皂苷元高效制剂的制备方法同上。 试剂酒石酸锑钾。
2、 方法与结果 2. 1试验方法
12取小鼠40只，雌雄各半，体重20土2g，随机均匀分为4组，每组10只，即空白组、皂 苷元高效制剂组、皂苷元一般制剂组、皂苷制剂组，灌胃给药剂量均为25nil/kg，空白组灌 胃给予同体积的生理盐水，每天给药1次，连续给药5天，于最后l次给药后lh，每鼠腹腔 注射新配制的酒石酸锑钾液，立即观察小鼠首次出现扭体反应的潜伏期及lOrnin内小鼠扭体 发生数。
2.2试验结果结果见下表。
表对酒石酸锑钾所致小鼠扭体反应的影响(又±S)
细a|动物数 ^11 首次发生扭体反应~10min内扭体发生 一且"_(只)(g/kg) 的潜伏期(min) 次数(次)
苷元高效制剂组10 5.0 3.65土0.47" 11.8±3.9"
苷元一般制剂组10 5.0 3.41±0.43* 13.2±3.7*
皂苷制剂组 10 5.0 3.37±0.62* 14.4±4.6*
空白对照组 10 — 2.52±0.59 19.5±6. 1
注与空白对照组比，*P<0.05， **P<0.01。
以上试验结果表明，皂苷元的高效制剂组可明显延长小鼠首次发生扭体的潜伏期，减少 小鼠扭体次数，与空白对照组比较具有极显著性差异，较皂苷制剂组效果好；皂苷元一般制 剂组、皂苷制剂组与空白对照组比较，具有显著性差异，皂苷元一般制剂组优于皂苷制剂组。
六、盾叶薯蓣总皂苷元对高脂血症大鼠血清TC、 TG、 HDL-C的影响
1、 材料
1.1动物Wistar大鼠，由山东大学实验动物中心提供。 1.2药品与试剂
皂苷制剂、皂苷元一般制剂、皂苷元高效制剂的制备方法同上。 阳性对照药取洛伐他汀2g，以水混悬至100ml。
试剂高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测试盒，总胆固醇(TC)测试盒，甘油三酯(TG)测试盒。 1.3仪器ZS-3型半自动生化测定仪。
2、 方法与结果
2. l动物模型的建立用1%胆固醇，0.2%甲基硫氧嘧啶，0.3%胆盐，7.5°/。猪油，10%蛋黄 粉，81%基础饲料制成高脂饲料，喂词大鼠。
2.2试验方法大鼠适应性饲养5天，禁食12h，检测血清TC和TG，按体重和血脂水平 将大鼠随机分为6组，每组10只即空白对照组、模型对照组、苷元高效制剂组、苷元一般 制剂组、皂苷制剂组、洛伐他汀组。除空白对照组喂饲基础饲料外，其余各组均喂高脂饲料，平均每鼠每天18g，不足给予普通词料补充。在给予高脂饲料的同时，灌胃给药剂量均为 10ml/kg，空白组和模型组灌胃给予同体积的生理盐水，每天给药1次，连续给药30天，末 次给药后，禁食12h，下腔静脉取血，酶法测定TC、 TG、 HDL-C。
2. 3试验结果对高脂血症大鼠血清TC、 TG、 HDL-C的影响见下表。
表对高脂血症大鼠血清TC、 TG、 HDL-C的影响(腿ol/L， X ±S， n=10)
组别剂量(g/kg)TCTGHDL-C
空白对照组一1.99±0. 290. 97±0.350.93±0. 21
模型对照组一6. 14±0. 522. 98±0. 160. 44 ±0. 08
苷元高效制剂组2. 03. 45±0. 5广1.46±0. 34**0. 66 ±0. 26*
苷元一般制剂组2.04. 16±0. 17*1. 76±0. 53*0. 57±0. 11*
皂苷制剂组2.04. 28 ±0. 56*1.88±0. 38*0. 51 ±0. 56*
洛伐他汀组0.23. 42±0. 48**1.51 ±0.41**0. 68±0. 31*
注与模型对照组比较，*P<0.05， *卞〈0.01。
以上试验结果表明，模型对照组大鼠血中TC、 TG水平显著高于空白对照组(P〈0.01)， HDL-C显著低于空白对照组(P〈0.01)，提示造模成功；与模型对照组比较，苷元高效制剂组 和洛伐他汀组均能显著降低TC、 TG，并升高血HDL-C水平；苷元一般制剂组、苷制剂组与模 型对照组比较，能降低TC、 TG，升高血HDL-C水平。
七、盾叶薯蓣总皂苷元对糖尿病大鼠模型高血糖的影响
1、 材料
1.1动物Wistar大鼠，由山东大学实验动物中心提供。 1.2药品与试剂
皂苷制剂、皂苷元一般制剂、皂苷元高效制剂的制备方法同上。 阳性对照药取优降糖3g，以水混悬至100ml。 1.3仪器血糖分析仪。
2、 方法与结果
2. l试验方法选取健康大鼠100只，体重200土20g，雌雄各半，适应性饲养l周，室温18 。C 24。C。造糖尿病模型前禁食12h后，从大鼠尾静脉取血，使用血糖分析仪测血糖值，选取 血糖值在5. 0mmol/L 6. Ommol/L范围内大鼠以55mg/kg链脲佐菌素腹腔注射；72h后禁食12h 并取血测血糖，选择血糖值相近的大鼠50只，随机分为5组模型组、优降糖组、苷元高效制 剂组、苷元一般制剂组、苷类制剂组；另取血糖值在5.0ramol/L 6.0mmol/L范围内健康大鼠
1410只，雌雄各半，作为空白对照组，各组灌胃给药剂量均为10ml/kg，空白组和模型组灌胃给 予同体积的生理盐水，每天给药1次，连续14d，分别于给药期间第3天、第7天、第14天禁食 12h取血，测血糖值。
2.2试验结果试验结果见下表。
表对糖尿病大鼠模型高血糖的影响(X士S， n = 10)
组别剂量血糖值(mmol/L)
(g/kg)造模前第o天第3天第7天第14天
空白对照组—5. 3±0. 265. 8±0. 175. 2±0. 335. 8±0. 196. 1±0.21
模型组一5. 7±0. 6224, 6±0. 8424. 2±1. 6123. 5±1. 1523. 1±0. 94
优降糖组0.35.2±0. 4522.6±1.0519, 7±1.3116. 3 士 1.03*11.7土1.37*
苷元高效制剂组2. 05. 9±0. 3122. 8±0, 8620. 1±1. 6816. 8±0. 95*11. 5±1. 14*
苷元一般制剂组2.05. 8±0. 1823. 3±1. 1422. 1±1. 5120. 3±1. 5815. 7±0, 78*
苷制剂组2. 05. 4±0. 2423.8±1.0322. 9±1. 1121. 8±1. 4616. 9±0. 95*
注与模型组比较，*P〈0.05， **P〈0.01。
以上试验结果表明，以55mg/kg链脲佐菌素腹腔注射后可使大鼠血糖明显升高，连续灌 服苷元高效制剂及优降糖，第7天血糖明显降低，第14天其降糖作用更为明显；苷元一般制 剂、皂苷制剂第14天降糖作用较为明显。
附图为盾叶薯蓣中薯蓣皂苷及其苷元不同制剂形式的药时曲线
具体实施例方式
下面列举实施例，进一步说明本发明，各实施例仅用于说明本发明，并不限制本发明 实施例1
取盾叶薯蓣总皂苷元100g，加入壳聚糖20g、卡波姆10g、泊洛沙姆50g、卵磷脂50g、 微粉硅胶30g、倍他环糊精80g，并加淀粉至450g，振动磨超微粉碎混合30分钟，制粒，干 燥，整粒，制成胶囊。 实施例2
取盾叶薯蓣总皂苷元70g、盾叶薯蓣总皂苷元20g，加入壳聚糖20g、泊洛沙姆30g、卵 磷脂10g、微粉硅胶30g、倍他环糊精20g、微晶纤维素50g，并加淀粉至300g，振动磨超微 粉碎30分钟，加70%乙醇合坨10分钟，制丸条、分粒与搓圆，干燥，打光，制成丸剂。 实施例3取盾叶薯蓣总皂苷元120g，加入壳聚糖2g、卵磷脂10g、阿斯帕坦lg，并加糊精至200g， 搅拌均匀，干压制粒，分装，制成颗粒剂。 实施例4
取盾叶薯蓣总皂苷元60g，加入壳聚糖10g、聚乙烯吡咯烷酮2g、泊洛沙姆8g、倍他环 糊精20g，并加淀粉至200g，过筛混合均匀，制粒，装肠溶胶囊，制成胶囊剂。 实施例5
取盾叶薯蓣总皂苷元100g，加入聚乙烯吡咯烷酮10g、泊洛沙姆20g、卵磷脂10g、微粉 硅胶10g，倍他环糊精50g，振动磨超微粉碎混合50分钟，制粒，压片，包衣，制成片剂。 实施例6
取盾叶薯蓣总皂苷元20g，加入丙二醇10g、泊洛沙姆10g、卵磷脂20g、壳聚糖10g、 卡波姆10g、加入聚乙二醇400至200g，振动磨超微粉碎20分钟，使混合均匀，制成液体硬 胶囊，即得。 实施例7
取盾叶薯蓣总皂苷元30g，加入卵磷脂10g、甘氨酸10g，甘油30g，再加入聚乙二醇600 至200g，振动磨超微粉碎30分钟，使混合均匀，压制成软胶囊，即得。 实施例8
取盾叶薯蓣总皂苷元50g，加入壳聚糖10g、卵磷脂20g、泊洛沙姆4g、尼泊金乙酯lg， 蜂蜡5g，并加入大豆油至200g，搅匀，胶体磨研磨5分钟，压制成软胶囊，即得。 实施例9
取盾叶薯蓣总皂苷元40g、丙二醇10g、甘油5g、聚乙二醇6000 50g、聚乙二醇4000 50g， 加热熔融，混合均匀，滴制成滴丸，即得。 实施例10
取盾叶薯蓣总皂苷元100g、卵磷脂25g、尼泊金乙酯2.5g，蜂蜡47.5g，并加入大豆油 至500g，振动磨超微40分钟，使混合均匀，压制成软胶囊，即得。 实施例11
取盾叶薯蓣药材4kg，粉碎，加70%乙醇渗滤提取，渗滤液，回收乙醇，水液加0.5%活 性炭脱色，滤过，滤液过DIOI大孔树脂柱，分别用水、20%乙醇、60%乙醇洗脱，收集60%乙 醇洗脱液，回收乙醇，余水液用苦杏仁酶水解72小时，水解液减压浓缩，减压干燥，得盾叶 薯蓣总皂苷元(粗品)221g，加卡波姆40g、卵磷脂40g、微粉硅胶40g，并加淀粉至400g， 超微粉碎混合60分钟，制粒，干燥，整粒，填装胶囊。 实施例12取盾叶薯蓣3kg，粗粉碎，加60%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液， 减压回收乙醇，水液加于D101大孔吸附树脂柱上，分别以水、30%乙醇、70%乙醇洗脱，收集 70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，余水液以2mol/L硫酸水解2小时，水解液加氧化钙适量， 滤过，并以适量乙醇洗涤沉淀，滤过，合并水液与乙醇洗液，减压回收乙醇，减压干燥，得 盾叶薯蓣总皂苷元(粗品)172g，加壳聚糖20g、卵磷脂20g、微粉硅胶100g，并加微晶纤 维素至400g，超微粉碎混合50分钟，制粒，干燥，整粒，压制成1000片。 实施例13
取盾叶薯蓣3.5kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤 液，减压回收乙醇，水液以水饱和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，115 。C灭菌20min，以乳酸菌菌种水解72小时，水解液减压浓縮，减压干燥，得盾叶薯蓣总皂苷 元(粗品)165g，加卡波姆40g、卵磷脂20g、聚乙二醇6000 40g，并加糊精至400g，超微 粉碎混合80分钟，制粒，干燥，整粒，制得颗粒剂。 实施例14
取盾叶薯蓣4kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液， 减压回收乙醇，水液以水饱和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，加于DIOI 大孔吸附树脂柱上，分别以水、30%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收乙 醇，加盐酸使含酸量达5mol/L，水解6小时，水解液加氢氧化钠调节pH至7.0，浓縮、干燥， 以无水乙醇回流提取，回收乙醇，减压干燥，得盾叶薯蓣总皂苷元181g，加壳聚糖10g、泊 洛沙姆50g、环糊精180g、羧甲基淀粉钠20g，并加淀粉至500g，超微粉碎混合30分钟，以 水为黏合剂，制软材，压制成丸。 实施例15
取盾叶薯蓣药材3kg，粉碎，加70%乙醇渗滤提取，渗滤液，回收乙醇，水液加0.5%活 性炭脱色，滤过，滤液过D101大孔树脂柱，分别用水、20%乙醇、60%乙醇洗脱，收集60%乙 醇洗脱液，回收乙醇，余水液用苦杏仁酶水解72小时，水解液浓縮，干燥，得盾叶薯蓣总皂 苷元(粗品)168g，加卡波姆20g、卵磷脂20g，并加聚乙二醇400至400g，超微粉碎混合 60分钟，压制软胶囊。 实施例16
取盾叶薯蓣3kg，粗粉碎，力n 60%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，
减压回收乙醇，水液加于D101大孔吸附树脂柱上，分别以水、30%乙醇、70%乙醇洗脱，收集
70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，余水液以2mol/L硫酸水解2小时，水解液加氧化钙适量，
滤过，并以适量乙醇洗涤沉淀，滤过，合并水液与乙醇洗液，减压回收乙醇，减压干燥，得盾叶薯蓣总皂苷元164g，加丙二醇45g、尼泊金乙酯6g，并加聚乙二醇400至600g，超微粉 碎混合30分钟，灌装成液体硬胶囊。 实施例17
取盾叶薯蓣4kg，粗粉碎，加水煎煮三次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至 相对密度为1. 10 1. 15 (60°C)，加乙醇使含醇量达70%，静置12小时，滤过，滤液回收乙 醇，以水饱和正丁醇提取三次，合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加水溶解，加于D101大孔吸 附树脂柱上，分别以水、30%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，余 水液以5mol/L盐酸水解3小时，水解液加氢氧化钠适量调节至中性，浓縮、干燥，以适量乙 醇提取，滤过，回收乙醇，减压干燥，得盾叶薯蓣总皂苷元195g，加卡波姆7.5g、泊洛沙姆 30g、丙二醇50g、甘氨酸3g，并加聚乙二醇400至600g，超微粉碎混合40分钟，压制软胶 囊1000粒。 实施例18
取盾叶薯蓣4.5kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤 液，减压回收乙醇，水液以水饱和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，115 'C灭菌20min，以双岐杆菌菌种发酵水解72小时，水解液减压浓缩，减压干燥，得盾叶薯蓣 总皂苷元208g，加壳聚糖10g、卵磷脂20g，并加大豆油至500g，超微粉碎混合30分钟，灌 装成液体硬胶囊。 实施例19
取盾叶薯蓣2.5kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤 液，减压回收乙醇，水液以水饱和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，加于 D101大孔吸附树脂柱上，分别以水、30%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回 收乙醇，加盐酸使含酸量达5mol/L，水解3小时，水解液加氢氧化钠调节pH至7.0，浓縮、 干燥，以无水乙醇回流提取干燥物，回收乙醇，减压干燥，得盾叶薯蕷总皂苷元116g，加壳 聚糖10g、泊洛沙姆20g，并加聚乙二醇6000至400g，加热熔融，滴制成滴丸。 实施例20
取实施例12所制片剂治疗风湿性关节炎患者60例。治疗方案每日3次，每次3片， 使用20天后，治愈率为37.5%，显效率为46.2°/0。 实施例21
取实施例17所制软胶囊治疗肿瘤患者67例。治疗方案每天2次，每次3粒，2周为 一个疗程，2个疗程后统计治疗结果，显效率为32.5%，总有效率为86.0%。
权利要求
1、一种以盾叶薯蓣总皂苷元为活性成分的口服药物。
2、 根据权利要求l所述的药物，其特征在于所述活性成分可以只有盾叶薯蓣总皂苷元，也可以是盾叶薯蓣总皂苷元与其他药物成分联合使用。
3、 根据权利要求2所述的药物，其特征在于所述盾叶薯蓣总皂苷元是通过水解盾叶薯蓣总皂 苷而得到的。
4、 根据权利要求3所述的药物，其特征在于水解方法为酸水解、酶水解或微生物水解。
5、 根据权利要求1至4中任一项所述的药物，其特征在于药物活性成分与药剂学上可接受的 辅料配合使用。
6、 根据权利要求5所述的药物，其特征在于辅料中含有生物黏附剂和润湿剂。
7、 根据权利要求6所述的药物，其特征在于辅料中还可含有分散剂。
8、 根据权利要求7所述的药物，其特征在于辅料中的生物黏附剂是指壳聚糖、卡波姆、聚乙 烯吡咯垸酮中的任一种或二种以上的组合物；润湿剂是指卵磷脂和/或泊洛沙姆；分散剂是指 微粉硅胶、环糊精、聚乙二醇中的任一种或二种以上的组合物。
9、 根据权利要求8所述的药物，其特征在于药物组成比例为 活性成分 20 60%，生物黏附剂 1 10%， 润湿剂 5 20%， 分散剂 0 30%， 其他辅料 0 50%。
10、 根据权利要求9所述的药物，其特征在于被制成片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。
11、 根据权利要求5所述的药物，其特征在于辅料中含有润湿剂和分散剂。
12、 根据权利要求ll所述的药物，其特征在于辅料中还可含有生物黏附剂。
13、 根据权利要求12所述的药物，其特征在于辅料中的生物黏附剂是指壳聚糖和/或卡波姆； 润湿剂是指丙二醇、卵磷脂、泊洛沙姆中的任一种或二种以上的组合物；分散剂是指聚乙二 醇或植物油。
14、 根据权利要求13所述的药物，其特征在于药物组成比例为 活性成分 10 40%，生物黏附剂 0 10%， 润湿剂 5 20%， 分散剂 50 80%， 其他辅料 0 20%。
15、 根据权利要求14所述的药物，其特征在于被制成软胶囊剂、液体硬胶囊剂或滴丸剂。
16、 制备权利要求6至15中任一项所述药物的方法，其特征在于将药物活性成分与所需辅料 通过熔融、溶解、搅拌、研磨或超微粉碎混合中的任一种方法混合均匀后，再加入所需常规 制剂辅料，按常规工艺制成制剂。
17、 根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于使用振动磨超微粉碎方法混合。
18、 权利要求1至4中任一项所述药物在制备用于治疗痛风病、高脂血症、糖尿病、冠心病、 心绞痛、风湿病或抑郁病的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种盾叶薯蓣总皂苷元口服药物制剂及其制备方法和用途，属中药领域。本发明是将由盾叶薯蓣中的皂苷类成分水解得到的皂苷元，配合高效药用辅料，通过超微粉碎方式混合均匀，并制成口服药物制剂。该制剂可以增加皂苷元类成分的分散性、润湿性、溶解性，增大皂苷元吸收利用的程度，提高皂苷元的生物利用度，在治疗痛风病、高脂血症、糖尿病、冠心病、心绞痛、风湿病或抑郁病等方面均有显著的效果。
文档编号A61P3/06GK101530533SQ20081010173
公开日2009年9月16日 申请日期2008年3月11日 优先权日2008年3月11日
发明者刘国飞, 周小明 申请人:北京凯瑞创新医药科技有限公司