专利名称：一种枸杞多糖提取物及其药用用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及枸杞多糖及其药用用途。
背景技术：
对中药多糖的研究始于50年代末，经过近年来对多糖不断的深入研究，对其 作用又有了新的认识，它参与细胞的各种生命现象的调节，如免疫细胞间信息的 传递和感受，与细胞表面的多糖体的介导密切相关，大量的药理和临床研究表明， 多糖类化合物是一种免疫调节剂，它能激活免疫细胞，提高机体的免疫功能，而对 正常细胞没有毒副作用，还具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗炎、抗凝血、抗辐 射、抗病毒等多方面的活性。多糖的免疫调节多糖对抗体的免疫调节作用，主要 通过以下几种方式和途径，(1)激活巨噬细胞；(2)激活网状内皮系统(RES);
(3)激活T和B淋巴细胞；(4)激活补体许多植物多糖有激活补体的作用，补体 蛋白上存在的识别点可识别多糖的结构。抗癌活性，抗癌活性是多糖类化合物所 显示的重要生物活性。(1)增强机体免疫功能而发挥抗肿瘤作用；(2)诱生肿瘤 坏死因子(TNF); (3)改变细胞膜的生化特性；(4)抗自由基作用。(河北职工医 学院学报第15巻第3期《植物多糖的药理研究概况》李建恒郑富稳)。大量的文 献和专利报道枸杞多糖都具有很好的抗癌活性，作为中药的有效部位不应舍弃。 但现有技术中保留的枸杞多糖是多糖中的全部，没有针对多糖进行深入的研究， 特别是药效作用不是很好或很弱的部分进行深入的研究。
现有文献记载了多糖的提取分离和纯化方法，但大多数采用的柱层析的方法， 而这种方法是无法工业化生产的，造成资源的巨大浪费。 发明内容基于上述原因，我们通过科学的实验，确定枸杞多糖中酸性多糖和中性多糖 是其药效活性较好的部分，将药效作用不好的碱性多糖去除，在尽量保留有效部 位的基础上，将无效部位尽量去除，同时根据保留的有效部位的物质基础，采用 超滤和离子交换有机结合的方法，得到枸杞多糖有效提取物。
本发明通过以下技术方案实现的。
一种枸杞子多糖提取物，其中酸性多糖含量为85%—95%，中性多糖为1% 一5%。
其中优选的枸杞多糖提取物为酸性多糖90%—95。％，中性多糖1%—3%。 一种枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。 种枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
一种枸杞子多糖提取物，其制备方法为
(1) 取枸杞子，加水提取，提取液浓縮，浓縮液加乙醇使含醇量达到40% — 60%,静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到70%—80%， 静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80%_90%，静置， 沉淀物，干燥，得到干燥物；
(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓縮，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。
一、检测分析多糖的检测分析
运用高效液相色谱法进行检测分析。 各种单糖标准品均为生化试剂，其它为分析试剂。
仪器:Beckman-332型高效液相色谱仪，岛津RID-6A示差折光检测器，色谱柱 MICROSORB-MVTM86-700-C5NH25pm。
方法取样品加乙醇沉淀，用高速离心仪进行离心，离心沉淀物用蒸馏水溶 解后，进样20ul。
结果见表l:
表l制剂中有效成分含量比较
多糖含量
组别
mg/瓶
本发明水针剂121.3
本发明输液剂119.6
本发明粉针剂121,5
结论通过以上检测分析实验表明，本发明工艺具有实际意义。 二、药理实施例 实施例1
对气虚型大鼠肝肿瘤抑制作用
实验动物大鼠，150g 180g,雌雄不分。(由沈阳药科大学中药药理教研室根 据文献造成气虚模型)
实验药物本发明各组枸杞多糖提取物(多糖类有效部位制备而成，北京药 物药物开发有限公司实验室提供)；黄芪多糖粉针剂(山西中医研究院提供)；枸杞碱性多糖；生理盐水。
实验方法取大鼠作W256的肝内接种，接种7天后，用戊巴比妥钠按35mg /kg的剂量腹腔注射麻醉，固定，剖腹暴露肝，测量肝上肿瘤表面最大径(a)和最 小径(b),按(a*b2) /2=V (肿瘤体积)。分离胃、十二指肠动脉、肝总动脉和肝 固有动脉，结扎胃、十二指肠动脉远端，以银夹阻断肝总动脉，于手术放大镜下 在胃十二指肠动脉上切口并插入外径0.3mm导管后再送入肝固有动脉，然后按实 验分组分别注入受试药物，给药剂量为12mg有效部位/kg，生理盐水等容不等量， 术后拔管结扎胃十二指肠动脉，放开肝总动脉银夹，再缝合切口，将大鼠置于动 物室待苏醒，继续饲养观察，手术后8天，按上法检测肿瘤体积，结果见表l: 表1本发明提取物对气虚型大鼠肝肿瘤抑制作用
iij 给药前肿瘤体积 给药后肿瘤体积 体积变化百分数~~
mm3 mm3 %
生理盐水 4.19±0.76 6.25±1.09 " +49.2
黄芪多糖粉针剂 4.24±0.85 3.30±0.94* -22.7*
本发明枸杞多糖提取物 4.34±0.72 2.54±0.86** -41.5**
枸杞碱性多糖4.11±0.65 4.34±0.99 +5.6
与生理盐水组比较* 〈0.05， **P 〈0.01 按上述方法，在进行实验，观察大鼠存活天数，见表2
表2大鼠存活天数比较
存活天数
组别
(大)
生理盐水 15.9±1.6 黄芪多糖粉针剂 20.3±1.5 本发明枸杞多糖提取物 24.6±2.4 枸杞碱性多糖 16.2±1.4
实施例2
物理、化学和生物因素均能诱发癌症，但人癌发病原因的80%-90%认为是环境化学物质引起的。
对二乙基亚硝胺(DENA)诱发大鼠肝癌的抑制 实验动物大鼠30只，120g左右，雌雄不分。
实验药物本本发明各组枸杞多糖提取物(多糖类有效部位制备而成，北京 药物药物开发有限公司实验室提供)；黄芪多糖粉针剂(山西中医研究院提供)； 枸杞碱性多糖；生理盐水。
实验方法用含二乙基亚硝胺(DENA)的饮水喂养大鼠，36周得原发性肝 癌，按照实施例l进行实验，实验结果见表3:
表3本发明提取物对肿瘤的抑制
,, 给药前肿瘤体积 组别 ,给药后肿瘤体积
mm3
生理盐水 10.03±1.0916.54±3.26
黄芪多糖粉针剂 10.28±0.978.03±2.17**-
本发明枸杞多糖提取物 10.54±1.036.45±1.95**
枸杞碱性多糖 10.83±0.9512.34±1.83
与生理盐水组比较+P 〈0.05, **P 〈0.01
表4大鼠存活天数比较
组别存活天数 (天)
生理盐水9.8土1.9
黄芪多糖粉针剂13.6士2.3
本发明枸杞多糖提取物16.7±1.4
枸杞碱性多糖10.2±0.9
三、制备实施例 实施例1
(l)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓縮液加乙醇使含醇量达到40%，
静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到70%，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80%，静置，沉淀物，干燥， 得到干燥物；
(2) 取千燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓縮，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓縮，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。
枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为85%，中性多糖为5%。 枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。 枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
实施例2
(1) 取枸杞子，加水提取，提取液浓縮，浓縮液加乙醇使含醇量达到60%， 静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80%，静置，沉淀 物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90%，静置，沉淀物，干燥， 得到干燥物；
(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓缩液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为95%，中性多糖为1%。
枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。
枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
实施例3
(1) 取枸杞子，加水提取，提取液浓縮，浓縮液加乙醇使含醇量达到50%， 静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到75%，静置，沉淀 物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到85%，静置，沉淀物，干燥， 得到干燥物；
(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓縮，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓缩，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。
枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为90%，中性多糖为1%。 枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。 枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
实施例4
(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓縮，浓縮液加乙醇使含醇量达到45%， 静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到60%，静置，沉淀 物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90%，静置，沉淀物，干燥，得到干燥物；
(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓縮，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓縮，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。
枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为86%，中性多糖为4%。
枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。
枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
实施例5
(1) 取枸杞子，加水提取，提取液浓縮，浓縮液加乙醇使含醇量达到55%， 静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80%，静置，沉淀 物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90%，静置，沉淀物，干燥， 得到干燥物；
(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓縮，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓縮，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。
枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为95%，中性多糖为3%。枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。 枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
实施例6
(1) 取枸杞子，加水提取，提取液浓縮，浓縮液加乙醇使含醇量达到60%，
静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到85%，静置，沉淀 物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90%，静置，沉淀物，干燥， 得到干燥物；
(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓缩，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓縮，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。
枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为93%，中性多糖为2%。
枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。
枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
实施例7
(1)取枸杞子，加水提取，提取液浓缩，浓縮液加乙醇使含醇量达到50%， 静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到70%,静置，沉淀 物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到90%，静置，沉淀物，干燥， 得到干燥物；(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓縮，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；
(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行草绿，保留小于分子量 500000的溶液，浓縮，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
注上述离子交换树脂按照现有技术进行选择。
枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为94%，中性多糖为1.5%。
枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。
枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
权利要求
1、一种枸杞子多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为85％-95％，中性多糖为1％-5％。
2、 根据权利要求1所述的一种枸杞子多糖提取物，其中酸性多糖90%_95 %，中性多糖1%—3%。
3、 根据权利要求1所述的一种枸杞子多糖提取物为活性成分制备的药物制剂。
4、 根据权利要求1或2所述的一种枸杞子多糖提取物在制备治疗抗肿瘤药物 中的应用。
5、 根据权利要求1或2所述的一种枸杞子多糖提取物，其特征在于制备方法为(1) 取枸杞子，加水提取，提取液浓縮，浓縮液加乙醇使含醇量达到40%_ 60%，静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到70%—80%， 静置，沉淀物加水溶解完全，过滤，滤液加乙醇使含醇量达到80%—90%，静置， 沉淀物，干燥，得到干燥物；(2) 取干燥物，用水溶解完全，用截取分子量为10000的超滤装置进行超滤， 保留大于分子量10000的溶液，将溶液浓縮，浓縮液上阴离子交换树脂，保留洗 脱液；(3) 洗脱液用截取分子量为500000的超滤装置进行超滤，保留小于分子量 500000的溶液，浓縮，干燥，得到枸杞子多糖提取物。
全文摘要
本发明公开了一种枸杞多糖提取物，其特征在于酸性多糖含量为85％-95％，中性多糖为1％-5％。本发明采用水提醇沉、超滤和离子交换有机结合的方法，提取得到枸杞多糖提取物；药理实验表明，本发明枸杞多糖具有很好的治疗肿瘤的作用。
文档编号A61P35/00GK101564469SQ20081010472
公开日2009年10月28日 申请日期2008年4月23日 优先权日2008年4月23日
发明者伟 李, 王爱民 申请人:北京卓越同创药物研究院