专利名称：：一种治疗乳房炎的药物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种奶业动物乳房炎治疗药物，特别是以大黄为主要成分的乳腺灌注剂。
背景技术：
：临床型乳房炎常表现为乳腺的急性炎症，对奶业生产危害极大。当前，国内外乳房炎研究多以单纯的抗菌思路为主，治疗中使用抗生素肌注或乳腺内注入，治疗效果常有限，然而抗生素在乳品中的残留受到越来越多的关注，抗生素使用后的休药期弃奶问题，也大大增加了乳房炎治疗的成本。国内相关中兽药的研究中，仍沿用抗菌的思路，以寻找抗菌作用强的中药提取物为目标，方剂以清热解毒药为主。另一方面，炎症反应过于强烈时可使用抗炎药。现行的抗炎药主要包括糖皮质激素类和非激素类。这类药物可以降低血管通透性、减少炎性渗出、稳定溶酶体膜，从而缓解炎区微循环障碍，减轻组织损伤。然而在奶牛，现有抗炎药物的使用受到很大限制。糖皮质激素类抗炎药，小剂量即可导致孕牛流产，而奶牛多数时间处于怀孕状态，故一般不宜使用。非激素类抗炎药，虽无致流产的隐患，但均有较大的胃肠道刺激性，尤其在草食动物使用后易引起消化道溃疡等问题，在奶牛临床亦基本不可用。这些都限制了临床型乳房炎治疗中的抗炎手段。
发明内容本发明的目的在于针对上述不足提供一种治疗乳房炎的药物。本发明药物，其含有下述重量份的药效成分大黄素2~6、紫草素3~9、桉叶油4~200。优选地，大黄素3~4、紫草素6~7、桉叶油50150。更优选，大黄素3.8、紫草素6.5、桉叶油100。本发明药物可以与适当的辅料制成各种剂型，优选地是溶于油性基质形成油悬液，油性基质可按照9785-9910重量份添加，优选按照9887重量份添加。可用的油性基质包括豆油、芝麻油、茶油等，优选为豆油。在对临床型乳房炎自然病例和疾病模型的研究中，我们发现，临床型乳房炎症状明显后，乳汁中细菌含量常极低，细菌培养常呈阴性,而同时患畜的血液流变学、炎症介质释放等微循环相关指标恶化显著。这提示，乳房炎临床症状的持续与微循环障碍有密切关系。病理学认为，微循环障碍是炎症的根本特指之一。控制炎症反应、改善局部微循环是急性炎症的治疗要点。中兽医的观点认为，乳房炎属湿热熏蒸、经络阻塞引起血瘀证，治宜凉血化瘀，也指明了改善微循环的治疗原则。无论何种原因引起的乳房炎，"炎"是其共同问题。但是由于激素和非激素类抗炎药的副作用，目前，奶业动物发生乳房炎后，基本无抗炎药物可用。本发明直接针对炎症中"微循环障碍"的基本矛盾，提出以改善微循环为主的临床型乳房炎治疗原则，并形成相关制剂，治疗效果比较可靠。临床型乳房炎表现为乳腺红、肿、热、痛、泌乳障碍等，症状表现明显，中兽医辨证多属血瘀实证，故，用药宜凉血散瘀。本发明中，大黄素、紫草素为主药，桉叶油为臣佐，豆油为基质。大黄是凉血化瘀的要药，性味苦寒，入脾、肝、胃、大肠、心包经，能泻热通肠，凉血解毒，逐瘀通经。《药性赋》载"通秘结导瘀血必资大黄"，明李中梓认为"大黄乃血分之药......泻四经血分伏火"。《本草纲目》中载"乳痈肿毒，全黄散用川大黄、粉草各一两为末，好酒熬成膏收之，以绢摊贴，仰卧，仍先以温酒服一大匙，明日取下恶物……"，就是以大黄为主治疗乳房炎。大黄素是大黄的主要页有效成分，现代药理研究发现，大黄素能抑菌、抗炎、抗纤维化、抑制血小板聚集、改善微循环、抗癌等，具有较好的临床应用价值。中医临床上，大黄也常用于感染性及非感染性炎症的治疗，尤其是全身炎症反应综合征和急性胰腺炎等方面。紫草是常用的凉血药物，味甘、咸，性寒，归心、肝经。《本草纲目》载"紫草，其功长于凉血活血......"，有清热凉血活血，解毒透瘆的功能。常用于治水火烫伤，多以植物油浸泡，滤取油液，外涂患处，或配大黄等药，麻油熬膏外搽。紫草素是紫草的主要药用成分之一，既是药物，也是食品行业中常用的色素。现代研究发现，其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌等具有抑制作用；紫草素对大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌及金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用；紫草乙醚、水、乙醇提取物均有一定的抗炎、解热、抗肿瘤作用。桉叶油性辛凉，归肺；胃；脾；肝经。能解表、清热、解毒、杀虫。本发明中，以其辛凉、走窜之性，助大黄素、紫草素散瘀之力。从现代药理学角度看，桉叶油尚有一定的抗菌和轻微的麻醉作用。另外，桉叶油有较强的还原性，加入制剂，有助于抑制豆油基质的氧化酸败，有利于制剂的稳定性。豆油，作为制剂的基质，对组方中各药物有较好的溶解能力；油性基质对药物有效成分起到缓释作用，使药物作用时间延长，并极大地降低了药物对乳腺的刺激性。另外，油的密度较低，油剂药物注入乳腺后，易于向上升浮，切实作用于乳腺组织。全方有凉血化瘀、辛散通络的作用。本发明还提供一种制备上述油悬液的方法，包括如下步骤1.称取处方量的紫草素和桉叶油，将紫草素溶于桉叶油中备用；2.取处方量的大黄素和油性基质，将大黄素投于基质中，搅拌、加热至120°C130°C,使之充分溶解后，冷却备用；3.将上述两溶液混勾，过滤至澄清即得，过滤时可使用多层无纺布过滤。本发明药物不含抗生素成分，较好地解决了乳品抗生素残留和休药期弃奶的问题，大大降低了临床型乳房炎治疗过程中的损失，提高了经济效益。另一方面，减少抗生素在奶牛上的使用，提高了乳品质量，有利无抗奶的生产，有利消费者健康，有利提高我国奶制品的竟争力。具体实施方式以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例1本发明复方大黄灌注剂的制备取紫草素750g、80%桉叶油11.7kg，密闭混和搅拌，使成紫草素-桉叶油溶液；取50。/。大黄素450g、豆油约1147kg,混和搅拌，直火加热至125'C后，保温IO分钟，其间不断搅拌，使成大黄素-豆油溶液，强制冷却至40-50'C;将上两步所得之紫草素-桉叶油溶液和大黄素-豆油溶液混和搅拌均匀，经多层无纺布过滤至澄明；无菌操作下分装，即得。实施例2本发明复方大黄灌注剂的制备取紫草素650g、桉叶油10kg，密闭混和搅拌，使成紫草素-桉叶油溶液；取大黄素380g、豆油约989kg，混和搅拌，直火加热至125'C后，保温10分钟，其间不断搅拌，使成大黄素-豆油溶液，强制冷却至40-50°C;将上两步所得之紫草素-桉叶油溶液和大黄素-豆油溶液混和6搅拌均匀，经多层无纺布过滤至澄明；无菌操作下分装，即得。实施例3本发明复方大黄灌注剂的制备取紫草素300g、80%桉叶油22.7kg，密闭混和搅拌，使成紫草素-桉叶油溶液；取50。/。大黄素200g、茶油约1100kg,混和搅拌，直火加热至12(TC后，保温15分钟，其间不断搅拌，使成大黄素-豆油溶液，强制冷却至40-50°C;将上两步所得之紫草素-桉叶油溶液和大黄素-豆油溶液混和搅拌均匀，经多层无纺布过滤至澄明；无菌操作下分装，即得。实施例4本发明复方大黄灌注剂的制备取紫草素1000g、80%桉叶油11.7kg，密闭混和搅拌，使成紫草素-桉叶油溶液；取50。/。大黄素700g、芝麻油约1150kg,混和搅拌，直火加热至130'C后，保温IO分钟，其间不断搅拌，使成大黄素-豆油溶液，强制冷却至40-50。C;将上两步所得之紫草素-桉叶油溶液和大黄素-豆油溶液混和搅拌均匀，经多层无纺布过滤至澄明；无菌操作下分装，即得。实施例5本发明复方大黄灌注剂的制备取紫草素300g、80。/。桉叶油0.5kg，密闭混和搅拌，使成紫草素-桉叶油溶液；取50。/。大黄素500g、豆油约978.5kg，混和搅拌，直火加热至125'C后，保温IO分钟，其间不断搅拌，使成大黄素-豆油溶液，强制冷却至40-50'C;将上两步所得之紫草素-桉叶油溶液和大黄素-豆油溶液混和搅拌均匀，经多层无纺布过滤至澄明；无菌操作下分装，即得。实施例61.本发明药物药理试验本试验主要探讨临床型乳房炎模型病理过程中细胞因子和血液流变学等微循环相关指标的变化，以及复方大黄灌注剂对上述变化的影响。材料1.实验动物唐山奶山羊24头，雌性，产后60-80天，体重30-40Kg，检疫合格，经BMT检验，双侧乳房无隐性乳房炎。由河北遵化巿铁厂兽医站提供。2.菌种大肠杆菌0128:K99，F41。由中国兽药监察所提供。培养基营养肉汤，普通琼脂。3.药品3.1复方大黄灌注剂实施例1制得。3.2注射用青霉素钠，80万单位/支；注射用硫酸链霉素IOO万单位/支。均为华北制药股份有限公司生产。方法1.造模方法大肠杆菌肉汤培养液，生理盐水2000r/min洗涤3次，再以生理盐水配成107个/1111的细菌悬液。奶山羊右侧乳区注入大肠杆菌悬液，剂量为lml/30Kg体重/乳区。2.分组及处理奶山羊随机分组，8头为l组。分组后分别造模,造模后4h开始用药，每12h用药l次。每日维持2次挤奶。A组无治疗对照组，造模后不治疗。B组抗生素对照组。青/链霉素乳房注入剂以灭菌注射用水溶解青霉素钠和硫酸链霉素，使终浓度为每lml药液含青霉素钠4万单位和硫酸链霉素2.5万单位，使用前配制。按lml/20Kg体重剂量经患侧乳头口向乳池注入，每日2次。C组复方大黄灌注剂组按1.5ml/20Kg体重，经患侧乳头口向乳池注入，每日2次。3.指标测定3.1微循环相关指标颈静脉釆血，检测下列指标。细胞因子测定包括TNF-oc、IL6，釆用酶联免疫试剂盒测定，美国Sigma公司产品，由百威盛试剂公司进口分装。3.2数据统计组间釆用方差分析、多重比较法；组内自身对照釆用配对t检验。结果1.模型有效性检验攻毒后3,5小时内，全部试验羊均呈现造模乳区坚硬、肿胀、温度升高、拒绝触诊；乳汁分泌急剧减少或无乳，乳汁灰暗清稀或白色粘稠，部分乳区出现凝乳块；大部分试验羊体温升高1°C以上。以上症状符合临床型乳房炎诊断标准。本试验所检测的TNF-oc、IL6、全血粘度等指标，造模前各组间无显著差异(P〉0.05)，说明试验羊分组合理；造模后4小时釆血，各组间各指标亦无显著差异(P〉0.05),但各组较造模前自身对照提高，经配对t检验，差异均极其显著(PO.Ol),说明模型羊发病均匀，并且TNF-oc、IL6指标在奶山羊乳房炎中有明显提高，与相关的文献报道结果一致。2.造模乳区局部临床症状变化用药后定时进行临床触诊检查，以患侧乳区指压后能否明显变形为乳房硬肿程度的判断标准。结果抗生素组和复方大黄灌注剂组造模乳区坚硬、肿胀程度均于12h内明显下降，无治疗对照组造模乳区于24h后才开始逐渐软化。TNF-a含量攻毒后24h检测，抗生素对照组TNF-a含量较无治疗对照组下降，差异极其显著(PO.01),复方大黄灌注剂组又显著低于抗生素组(PO.Ol)。见表l。表1各组TNF-a含量变化(ng/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>IL-6含量攻毒后24h检测，抗生素组和复方大黄灌注剂组IL-6含量较无治疗对照组下降，差异极其显著(PO.Ol)，复方大黄灌注剂组与抗生素组间差异不显著(P〉0.05)。见表2。表2各组IL-6变化含量(ng/ml)攻毒前攻毒后4h攻毒后24hA组0.03955±0.013740.09901±0.030160.09190±0.02205AB组0.03641±0.011220.10391±0.019100.07469±0.01443ABC组0.04041±0.009450.09637±0.019360.06662±0.01337B2.本发明药物刺激性试验灌注剂型，如有较强的刺激性，则不利于乳腺炎症反应的消退。药物本试验主要检验本发明药物对乳腺组织的刺激性。材料1.实验动物同上。2.对照药物注射用青霉素钠80万单位/支，华北制药股份有限公司生产。注射用硫酸链霉素100万单位/支，华北制药股份有限公司生产。无致热源氯化钠注射液四川科伦大药厂有限责任公司生产。方法1.分组方法将隐性乳房炎BMT法检验阴性的奶山羊随机分为氯化钠注射液组、青链霉素组、复方大黄灌注剂组，共3组，每组7只。2.处理方法生理盐水组单侧乳腺灌注无致热源氯化钠注射液2ml，按摩0.5min，每日3次；青/链霉素组单侧乳腺灌注青/链霉素乳房注入剂2ml(青/链霉素乳房注入剂以灭菌注射用水溶解青霉素钠和硫酸链霉素，使终浓度为每lml药液含青霉素钠4万单位和硫酸链霉素2.5万单位，使用前配制)，按摩0.5min,每日3次；复方大黄灌注剂组单侧乳腺灌注复方大黄灌注剂2ml，按摩0.5min,每日3次；3.指标检测分别于灌注前及药用2天后，以BMT法测定试验乳区乳汁中体细胞数。结果经乂2检验，试验前各组间BMT指标差异不显著(P>0.05);灌注后，青链霉素组BMT指标显著高于其他组(PO.01);生理盐水组和复方大黄灌注剂药用前后BMT指标差异不显著(PX).05)。结果见表3。表3本发明药物刺激性试验结果单位例<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>3.临床试验试验目的检验复方大黄灌注剂临床疗效，与常规的青-链霉素联合乳腺内注入法进行疗效对比。1.材料和方法1.1病例来源天津工农联盟奶牛场临床型乳房炎的自然发病病例，随机分别用复方大黄灌注剂和青、链霉素治疗。1.2药物和分组1.2.1复方大黄灌注剂用法经患侧乳头口向乳池注入，高剂量组每次30ml，中剂量组每次20ml，低剂量组每次10ml,均为每曰2次，疗程5天。1.2.2青、链霉素乳房注入剂青霉素钠80万单位，链霉素50万单位，使用前以注射用水配成20ml，经患侧乳头口向乳池注入，每日2次，疗程5天。2.临床性乳房炎诊断标准临床性乳房炎是以乳汁变性、乳房组织不同程度地肿胀、温热和疼痛，明显的乳房和乳汁变化为特点的乳房的炎症。具备以下症状或部分症状者可诊断为临床型乳房炎a.乳房体积增大、发热、质地变硬；b.乳房皮肤发红，触诊有疼痛；c.各乳区大小不一，乳房上淋巴结肿大；d.乳汁变色、粘稠、出现絮状物、凝乳块、血块。3.疗效判定3.1治愈临床症状消失，直观乳汁无异常，奶产量基本恢复。3.2有效临床症状减轻或消失，乳汁中有少量絮状物，但乳汁色泽无异常。产量未能恢复正常。3.3无效临床症状未减轻或加剧。4.治疗结果(见表4)经乂2检验，复方大黄灌注剂低剂量组疗效显著低于其他各组(PO.05)其他各组间差异不显著(P>0.05)。表4:本发明药物和抗生素疗效比较治疗乳治愈有效无效总治愈率总有效药物区数乳区数乳区数乳区数(%)率(％)乳房炎灌注剂高剂量2016228090乳房炎灌注剂中剂量21163276.290乳房炎灌注剂低剂量1776441.276.5青、链霉素23202187.095.71权利要求1、一种治疗乳房炎的药物，其含有下列重量份的药效成分大黄素2～6、紫草素3～9、桉叶油4～200。2、如权利要求1所述的药物，其含有下列重量份的药效成分大黄素3~4、紫草素6~7、桉叶油50~150。3、如权利要求l所述的药物，其含有下列重量份的药效成分大黄素3.8、紫草素6.5、桉叶油100。4、如权利要求1~3任一项所述的药物，其还含有9785-9910重量份的油性基质。5、如权利要求4所述的药物，其特征在于，所含有性基质的重量份为9887。6、如权利要求4所述的药物，其特征在于，所述的油性基质为豆油。7、一种制备权利要求16任一项所述药物的方法，其包括步骤:1)称取处方量的紫草素和桉叶油，将紫草素溶于桉叶油中备用；2)称取处方量的大黄素和油性基质，将大黄素投于基质中，搅拌、加热至120°C130°C,使之充分溶解后，冷却备用；3)将上述两溶液混句，过滤至澄清。全文摘要本发明提供了一种治疗乳房炎的复方大黄素药物，该药物含有下列重量份的药效成分大黄素、紫草素、桉叶油。本发明药物可溶于油性基质(如豆油)中制成油悬液。本发明药物不含抗生素成分，较好地解决了乳品抗生素残留和休药期弃奶的问题，大大降低了临床型乳房炎治疗过程中的损失，提高了经济效益。另一方面，减少抗生素在奶牛上的使用，提高了乳品质量，有利无抗奶的生产，有利消费者健康，有利提高我国奶制品的竞争力。文档编号A61K36/185GK101322747SQ20081011817公开日2008年12月17日申请日期2008年8月13日优先权日2008年8月13日发明者开范,赵德明申请人:中国农业大学