专利名称：：注射用阿莫西林钠舒巴坦钠及其冻干粉针剂的制备方法
技术领域：
：本发明提供一种注射用的阿莫西林钠和舒巴坦钠的分离纯化方法，以及阿莫西林钠舒巴坦钠粉针剂的制备方法。属于医药领域。技术背景阿莫西林系杀菌性广谱抗生素，舒巴坦钠系不可逆的广谱e—内酰胺酶抑制剂，可有效地抑制耐药菌产生的e—内酰胺酶。临床上许多革兰阳性和革兰阴性细菌产生p—内酰胺酶，此酶可使阿莫西林失去抗菌活性。由于舒巴坦钠的存在，可使阿莫西林免遭p—内酰胺酶的破坏，从而使己对阿莫西林耐药并产生p—内酰胺酶的细菌，仍然对阿莫西林敏感。本品为杀菌性抗生素，在临床上能杀灭多种革兰阳性和革兰阴性细菌，特别是对产生e—内酰胺酶的耐药菌有疗效。阿莫西林钠和舒巴坦钠的联合用药，适用于呼吸系统感染、泌尿生殖道感染、严重系统感染、耳鼻喉感染、皮肤及软组织感染及其他感染等。本品临床用量大，疗效确切，市场前景好。本品和大多数头孢菌素类抗生素一样，其制剂都是由阿莫西林钠和舒巴坦钠无菌原料分装或冻干制得。大多数阿莫西林钠和舒巴坦钠存在纯度低，溶解后可见异物多，水溶液极不稳定的问题。高速逆流色谱(High-SpeedCountercurrentChromatography)是一种连续高效的液-液分配色谱分离技术，由于采用液态固定相而不需要固体支撑物，因而避免了因不可逆吸附引起的样品损失、失活变性等，在近2030年发展十分迅速。但现有技术尚未有将高速逆流色谱用于阿莫西林钠和舒巴坦钠的分离纯化的报导，也没有提供应用高速逆流色谱制备阿莫西林钠舒巴坦钠冻干粉针剂的报道。
发明内容本发明的目的之一在于提供一种注射用的阿莫西林钠和舒巴坦钠的分离纯化方法，以提高阿莫西林钠和舒巴坦钠的注射剂稳定性。本发明的目的之二在于提供一种阿莫西林钠舒巴坦钠粉针剂的制备方法，用这种方法制备的粉针剂稳定性好。为实现上述发明目的，本发明技术方案如下-本发明提供一种阿莫西林钠舒巴坦钠注射剂的制备方法，其特征在于包括阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用高速逆流色谱进行纯化的步骤，其中所述高速逆流色谱的条件为以三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯配制构成固定相、流动相的溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，使高速逆流色谱仪整个柱体中充满固定相，再将流动相泵入柱内，阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用流动相作为溶剂溶解后由进样阀进样。上述所述的方法，其中所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比是13:0.82.5:1.22:1;更加优选所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为2:1:1.5:1。本发明上述所述的方法，高速逆流色谱的主机转速、流速等，没有特别限制。作为本发明具体实施方式，本发明优选将固定相和流动相超声脱气后，先用固定相充满整个柱体，然后开启高速逆流色谱仪，转速为10002000rpm，以1.02.0ml/min流速将流动相泵入柱内，待整个体系建立动态平衡后，再进行进样。更加优选高速逆流色谱的主机转速为1500rpm，以1.5ml/min的流速将流动相泵入柱内。本发明上述所述方法，可以制得纯度至少在98%以上的注射用阿莫西林钠和注射用舒巴坦钠。所制得的注射用阿莫西林钠和注射用舒巴坦钠，可以根据需要配制成各种注射剂。作为本发明优选方案，所述方法，其中所述的注射剂为冻干粉针，阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用高速逆流色谱分离，分别收集阿莫西林钠98%以上部分和舒巴坦钠98%以上部分，冷冻干燥、粉碎后，按比例进行无菌分装。如果需要，上述所述的方法，其中收集到的98%以上部分，在进行冷冻干燥前，先用活性炭脱色，然后用微孔滤膜(例如0.22um微孔滤膜)过滤除菌，再进行冷冻千燥，制成粉针剂。本发明上述所述的方法，其中所述注射剂中阿莫西林钠和舒巴坦钠的重一定比例混合。作为优选方式，所述注射剂中阿莫西林钠和舒巴坦钠的重量比为(12):(12);更优选阿莫西林钠和舒巴坦钠的重量比为2:1。其中，上述所述方法中，所述冻干粉针的制剂规格，可以根据需要确定，本发明优选每瓶装量为0.375g3.0g。进一步地，本发明还提供一种注射用阿莫西林钠或者注射用舒巴坦钠的纯化方法，其特征在于包括阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用高速逆流色谱进行纯化的步骤，其中所述高速逆流色谱的条件为以三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯配制构成固定相、流动相的溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，使高速逆流色谱仪整个柱体中充满固定相，再将流动相泵入柱内，阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用流动相作为溶剂溶解后由进样阀进样。上述所述方法，其中所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为13:0.82.5:1.22:1;优选所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为2:1:1.5:1。作为本发明具体实施方式，本发明优选将固定相和流动相超声脱气后，先用固定相充满整个柱体，然后开启高速逆流色谱仪，转速为10002000rpm，以1.02.0ml/min流速将流动相泵入柱内，待整个体系建立动态平衡后，再进行进样；优选转速为1500rpm，以1.5ml/min的流速将流动相泵入柱内。本发明采用高速逆流色谱，以三氯甲垸、乙酸乙酯、甲醇、水配制构成固定相、流动相的溶剂体系，对阿莫西林钠和舒巴坦钠进行分离纯化，得到注射用阿莫西林钠和舒巴坦钠，所得产品纯度至少在98%以上，所制得的注射剂具有改善的稳定性。本发朋的优点是1、本发明采用了高速逆流色谱分离方法，高速逆流色谱技术避免了因吸附作用引起的样品损失、样品组分的化学变性，分离效能与容量可以与制备HPLC相比，而且一般不存在峰的拖尾现象。2、釆用高速逆流色谱纯化方法，使原料的纯度得到很大的提高，产品纯度至少达到98%以上，而且纯化过程无污染，便于工业连续化生产。3、本方法纯化阿莫西林钠和舒巴坦钠的有效理论塔板数为13002500，具有分离高效、快速、分离量大、样品无损失、回收率高、分离环境温和、节约溶剂等特点。4、除去了很多水不溶性杂质，提高了在水中的溶解性。本发明提供的制备阿莫西林钠舒巴坦钠粉针剂的方法，制备的粉针剂纯度高，溶解性好，性质稳定。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以助于理解本发明的内容。下面的实施例中所用的阿莫西林钠和舒巴坦钠原料，均由山东瑞阳制药有限公司提供，纯度分别为96.1%和95.9%。实施例l使用半制备型高速逆流色谱仪，配有恒流泵，15ml进样阀，聚四氟乙烯柱，柱体积为200ml，UV紫外检测器。将体积比为2:h1.5:1三氯甲烷、甲醇、水、乙酸乙酯混溶于分液漏斗中，摇匀后静置分层，取其上层溶液(上相)为固定相，下层溶液(下相)为流动相，超声脱气后，先用固定相充满整个柱体，然后开启高速逆流色谱仪，调整主机转速为1500rpm，以1.5ml/min的流速将流动相泵入住内，待整个体系建立动态平衡后，将阿莫西林钠原料溶于下相中，由进样阀进样，然后根据检测器紫外图谱，收集98%以上部分，活性炭脱色，0.22um微孔滤膜过滤除菌后，冷冻干燥，得纯化原料粉。经HPLC分析，阿莫西林钠的纯度为99.2%，有效理论塔板数为2042。同法纯化舒巴坦钠原料，冷冻干燥，得舒巴坦钠纯化原料粉。经HPLC分析，舒巴坦钠的纯度为99.5%，有效理论塔板数为1668。将冷冻干燥后的阿莫西林钠和舒巴坦钠纯品分别过60目筛粉碎，然后按重量比2:l混合均匀，在无菌室内IOO级条件下分装，得注射用阿莫西林钠舒巴坦钠粉针制剂，每瓶装量为0.375g。实施例2按实施例1的高速逆流色谱法操作步骤纯化阿莫西林钠和舒巴坦钠原料，三氯甲烷、甲醇、水、乙酸乙酯的用量体积比为1:0.8:1.2:1，经HPLC分析，阿莫西林钠的纯度为99.3%，有效理论塔板数为1870，舒巴坦钠的纯度为99.2%，有效理论塔板数为2230。将纯化的阿莫西林钠和舒巴坦钠原料分别过80目筛粉碎，然后按重量比2:l混合均匀，在无菌室内100级条件下分装，得注射用阿莫西林钠舒巴坦钠粉针制剂，每瓶分装3.0g。实施例3按实施例1的高速逆流色谱法操作步骤纯化阿莫西林钠和舒巴坦钠原料，三氯甲垸、甲醇、水、乙酸乙酯的用量体积比为3:2.5:2:1，经HPLC分析，阿莫西林钠为99.0%，有效理论塔板数为2042，舒巴坦钠的纯度为99.4%，有效理论塔板数为1955。将纯化的阿莫西林钠和舒巴坦钠原料分别过100目筛粉碎，然后按重量比2:l混合均匀，在无菌室内IOO级条件下分装，得注射用阿莫西林钠舒巴坦钠粉针制剂，每瓶分装1.5g。实施例4(对比)按实施例1的高速逆流色谱法操作步骤纯化阿莫西林钠和舒巴坦钠原料，三氯甲垸、甲醇、水、乙酸乙酯的用量体积比为0.9:2:2.1:1，经HPLC分析，阿莫西林钠为97.5%，有效理论塔板数为1836，舒巴坦钠的纯度为97.6%，有效理论塔板数为2278。将纯化的阿莫西林钠和舒巴坦钠原料分别过60目筛粉碎，然后按重量比2:l混合均匀，在无菌室内IOO级条件下分装，得注射用阿莫西林钠舒巴坦钠粉针制剂，每瓶分装0.375g。实施例5(对比)按实施例1的高速逆流色谱法操作步骤纯化阿莫西林钠和舒巴坦钠原料，三氯甲垸、甲醇、水、乙酸乙酯的用量体积比为3丄0.7:1.1:1，经HPLC分析，阿莫西林钠为97.0%，有效理论塔板数为2244，舒巴坦钠的纯度为97.7%，有效理论塔板数为1996。将纯化的阿莫西林钠和舒巴坦钠原料分别过80目筛粉碎，然后按重量比2:l混合均匀，在无菌室内100级条件下分装，得注射用阿莫西林钠舒巴坦钠粉针制剂，每瓶分装3.0g。实验例6质量研究分别将以上制得的样品在高温6(TC、光照4500Lx条件下放置IO天进行影响因素试验考察,其结果见表1;在高温4(TC、相对湿度75%±5%条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表2;在高温25°C、相对湿度60%±10%条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，结果见表3。表1影响因素结果时间样品性状碱度澄明度澄清度与颜色有关物质(%)含量(%)o天实施例1白色粉末9.2符合规定澄清，〈Y11.3099.3实施例2白色粉末9.1符合规定澄清，〈Y11.32100.4实施例3白色粉末8.9符合规定澄清，〈Y11,3199.8实施例4白色粉末9.1符合规定澄清，〈Y14.1299.7实施例5白色粉末9.0符合规定澄清，〈Y1楊101.1IO天高温60°C实施例1白色粉末9.1符合规定澄清，〈Y11.3599.3实施例2白色粉末9.1符合规定澄清，〈Y11.36跳2实施例3白色粉末8.9符合规定澄清，<Y11.3599.7实施例4白色粉末8.9符合规定澄清，〈Y34.8899.3实施例5白色粉末8.8符合规定澄清，<Y44.90100.8IO天光照4500Lx实施例1白色粉末9.0符合规定澄清，〈Y113399.2实施例2白色粉末9.0符合规定澄清，<Y11.35跳3实施例3白色粉末8.9符合规定澄清，<Y11.3499.8实施例4白色粉末8.8符合规定澄清，〈Y34.7999.4实施例5白色粉末8.6符合规定澄清，<Y34.75100.69<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注以上表格中的"Y1，Y2，Y3……"分别表示黄色l号、黄色2号、黄色3号标准比色液，"<Y1"表示不深于黄色l号标准比色液。由以上数据结果可以看出，本发明实施例1、实施例2、实施例3制得的样品纯度很好，而且影响因素10天、加速6月和长期18月后各项质量指标无明显变化，均符合质量标准。充分说明了在本发明技术范围内可以很好的纯化阿莫西林钠和舒巴坦钠原料，制备质量合格的注射用阿莫西林钠舒巴坦钠制剂。已经根据优选实施例对本发明作了描述。应当理解的是前面的描述和实施例仅仅为了举例说明本发明而已。在不偏离本发明的精神和范围的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。权利要求1、一种阿莫西林钠舒巴坦钠注射剂的制备方法，其特征在于包括阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用高速逆流色谱进行纯化的步骤，其中所述高速逆流色谱的条件为以三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯配制构成固定相、流动相的溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，使高速逆流色谱仪整个柱体中充满固定相，再将流动相泵入柱内，阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用流动相作为溶剂溶解后由进样阀进样。2、如权利要求1所述的方法，其特征在于所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为1～3∶0.8～2.5∶1.2～2∶1；优选所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为2∶1∶1.5∶1。2、如权利要求l所述的方法，其特征在于所述溶剂体系中三氯甲垸、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为13:0.82.5:1.22:1;优选所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为2:1:1.5:1。3、如权利要求1一2所述的方法，其特征在于固定相和流动相超声脱气后，先用固定相充满整个柱体，然后开启高速逆流色谱仪，转速为10002000rpm，以1.02.0ml/min流速将流动相泵入柱内，待整个体系建立动态平衡后，再进行进样；优选转速为1500rpm，以1.5ml/min的流速将流动相泵入柱内。4、如权利要求1一3所述的方法，其中所述的注射剂为冻干粉针，阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用高速逆流色谱分离，分别收集阿莫西林钠98%以上部分和舒巴坦钠98%以上部分，冷冻干燥、粉碎后，按比例进行无菌分装。5、如权利要求4所述的方法，其特征在于在进行冷冻干燥前先用活性炭脱色，然后用微孔滤膜过滤除菌。6、如权利要求1一5所述的方法，其中所述注射剂中阿莫西林钠和舒巴坦钠的重量比为(12):(12)，优选阿莫西林钠和舒巴坦钠的重量比为2:1。7、如权利要求4一6所述的方法，其特征在于所述冻干粉针的每瓶装量为0.375g3.0g。8、一种注射用阿莫西林钠或者注射用舒巴坦钠的纯化方法，其特征在于包括阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用高速逆流色谱进行纯化的步骤，其中所述高速逆流色谱的条件为以三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯配制构成固定相、流动相的溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，使高速逆流色谱仪整个柱体中充满固定相，再将流动相泵入柱内，阿莫西林钠或者舒巴坦钠的原料用流动相作为溶剂溶解后由进样阔进样。9、如权利要求8所述的方法，其特征在于所述溶剂体系中三氯甲烷、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为13:0.82.5:1.22:1;优选所述溶剂体系中三氯甲垸、甲醇、水和乙酸乙酯的用量体积比为2:1:1.5:1。10、如权利要求8—9所述的方法，其特征在于固定相和流动相超声脱气后，先用固定相充满整个柱体，然后开启高速逆流色谱仪，转速为10002000rpm，以1.02.0ml/min流速将流动相泵入柱内，待整个体系建立动态平衡后，再进行进样；优选转速为1500rpm，以1.5ml/min的流速将流动相泵入柱内。全文摘要本发明提供一种注射用阿莫西林钠舒巴坦钠及其冻干粉针剂的制备方法，以及注射用的阿莫西林钠和舒巴坦钠的分离纯化方法。本发明采用高速逆流色谱，以三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、水配制构成固定相、流动相的溶剂体系，对阿莫西林钠和舒巴坦钠进行分离纯化，得到注射用的阿莫西林钠和舒巴坦钠，所得产品纯度可达98％以上，所制得的注射剂具有改善的稳定性。文档编号A61P31/04GK101322701SQ20081013482公开日2008年12月17日申请日期2008年8月1日优先权日2008年8月1日发明者民邱申请人:海南百那医药发展有限公司