专利名称：灰兜巴有效成份的提取方法
技术领域：
本发明涉及从菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工艺方法，属于中 草药开发应用领域。
背景技术：
灰兜巴(又名闭口袋)是一种山蜘蛛寄生在海拔1500米以上的峨眉山老
茶树头部生长出来的菌科植物。性味平、淡。功能1、益气健脾，滋补 肾阴、消除、缓解糖尿病症状。2、改善胰岛B细胞性不足，促进体内血糖的 自然平衡。3、平衡阴阳，调和气血，纠正代谢絮乱，防止糖尿病并发症。 主治糖尿病。适用于T型E型糖尿病，当血糖下降到正常值时，应健康饮食，
坚持运动，使其控制血糖稳定，不需依赖药物治疗。称为仙山灵药、糖尿病 克星、天然纯绿色的大自然珍宝。民间已有患者服用并显示其免疫力增强， 血糖下降到正常值，且无毒副作用。但目前为止，人们对灰兜巴的理论研究 尚少。
发明内容
本发明目的在于从研究一种灰兜巴有效成份的提取方法，以进一步开发 灰兜巴产品为目的。
本发明技术方案是将灰兜巴浸泡水提，抽滤分离，将滤液经旋转蒸发 仪浓縮，然后用浓度不低于80。/。的乙醇沉淀，采用低温超速离心，分离出多
糖沉淀，将沉淀出的多糖用有机溶剂洗涤，再经真空干燥，得灰兜巴粗多糖。 本发明方法工艺简单，不含游离的蛋白质，无需三氯醋酸沉淀蛋白质， 不必洗涤除酸，易于操作，能防止有效成份氧化失效。可将灰兜巴粗多糖作
为口服药防治T型E型糖尿病使用，以提高药物疗效，可望该多糖有效成份 提取利用对增强人的免疫力，具有积极作用和深远意义。
本发明中，灰兜巴浸泡时，水为室温，提取时水浴温度6(TC 9(TC。如 温度太低，有效成份溶出速率慢，如温度太高，可能会造成有效成份部分氧 化。
为了将灰兜巴粗多糖尽可能完全地提取出来，按浓縮液体积3 4倍量的 无水乙醇沉淀出多糖，并依次用有机溶剂洗涤。
为了进一步提纯，获得精制灰兜巴有成份，本发明还将粗多糖经柱层析 分离得多糖产品。
为了充分利用灰兜巴，使有效成份尽可能完全溶解在水中，本发明先将 灰兜巴粉碎后再浸泡。
所述有机溶剂为乙醇或丙酮或乙醚或石油醚。
具体实施例方式
一、 灰兜巴有效成份的提取-
称取一定质量灰兜巴剪碎，投入圆底烧瓶中，加蒸馏水至刚好将药品浸 没，室温浸泡1 3小时后，于水浴回流提取lh，水浴温度6(TC 9(TC，抽 出提取液。用同样的方法以蒸馏水再提取2次，每次lh，合并提取液。
将滤液经旋转蒸发仪浓縮，再用浓縮液体积3 4倍量的无水乙醇沉淀 多糖，冰箱冷藏静置12小时，采用低温超速离心分离出固体多糖，然后依 次用无水乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂反复洗涤多糖沉淀(每种溶剂至少洗 3次)。真空干燥(由于最后用乙醚洗涤，所以真空干燥箱内放置一定量的吸 水剂、抗氧剂，室温抽真空12小时，)，得粉红色粉末，此为灰兜巴粗多糖。
将粗多糖再经柱层析分离得多糖产品。
洗涤多糖沉淀物时，可用的有机溶剂还有石油醚。
二、 多糖产品性能表征、特点 与镁粉-浓盐酸反应不显橙红色，提示不含黄酮类。
加入中性盐，三氯醋酸，未见絮状物析出，表明无游离蛋白质。
与茚三酮共热，显蓝紫色，紫外光谱测定在波长280nm处有吸收，表明 提取物中有蛋白质结构部分。
红外光谱显示此多糖含有a -和P -糖苷键。
毛细管电泳分析灰兜巴多糖中氨基酸的组成。色谱法测定多糖分子量。
灰兜巴多糖系肽多糖。
三、应用
某患者，经常感冒，血糖指数12mmol/L 。
服用经本发明提取的灰兜巴粗多糖，每日30g灰兜巴的水提液，经60 天后，其免疫力增强，与服用前的同季节相比，患感冒次数明显下降，血糖 下降到正常值。
权利要求
1、灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于将灰兜巴浸泡水提，抽滤分离，将抽滤液经旋转蒸发仪浓缩，然后用浓度不低于80％的乙醇沉淀，采用低温超速离心分离出多糖沉淀，将沉淀出的多糖用有机溶剂洗涤，再经真空干燥，得灰兜巴粗多糖。
2、 根据权利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于浸泡灰兜 巴时，水温为室温，提取时水浴温度为6(TC 9(TC。
3、 根据权利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于所述有机 溶剂为乙醇或丙酮或乙醚或石油醚。
4、 根据权利要求1或2所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于先将 灰兜巴剪碎后再浸泡。
5、 根据权利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于沉淀多糖 时，按浓縮液体积3 4倍量的无水乙醇沉淀出多糖。
全文摘要
灰兜巴有效成份的提取方法，涉及从菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工艺方法，属于中草药开发应用领域。将灰兜巴浸泡水提，抽滤分离，将滤液经旋转蒸发仪浓缩，然后用浓度不低于80％的乙醇沉淀，采用低温超速离心，分离出多糖沉淀，将沉淀出的多糖用有机溶剂洗涤，再经真空干燥，得灰兜巴粗多糖。本方法工艺简单，不含游离的蛋白质，无需三氯醋酸沉淀蛋白质，不必洗涤除酸，易于操作，能防止有效成份氧化失效。可将灰兜巴粗多糖作为口服药防治T型E型糖尿病使用，以提高药物疗效。
文档编号A61K36/06GK101380339SQ200810154890
公开日2009年3月11日 申请日期2008年10月17日 优先权日2008年10月17日
发明者宋根萍 申请人:扬州大学