用作组蛋白去乙酰酶抑制剂的磺酰基衍生物的制作方法

专利名称：用作组蛋白去乙酰酶抑制剂的磺酰基衍生物的制作方法
技术领域：
本发明是涉及一种具有组蛋白去乙酰酶(HDAC)抑制酶活性的化合物。并进一步涉及其制法、含其的组合物、及其于活体内及活体外抑制HDAC的用途及其作为医药的用途，例如作为抑制增生性病症(如癌症与牛皮癣)的药物的用途。

背景技术：
所有真核生物细胞中，染色质中的基团组DNA与组蛋白结合形成核体。各核体分别由各组蛋白质H2A、H2B、H3与H4的两套复本形成的蛋白质八聚体组成。DNA环绕此蛋白质核心，其中组蛋白的碱性氨基酸与DNA的带负电价磷酸根交互作用。这些组蛋白核心最常见的转译后修饰作用为已保留的高碱性N-末端赖氨酸残基的ε-氨基的可逆性乙酰化作用。由组蛋白乙酰基转化酶(群)与本文中称为“HDAC”的组蛋白去乙酰酶(群)之间竞争形成的动态平衡建立组蛋白乙酰化作用的稳定状态。组蛋白乙酰化作用与去乙酰化作用长久以来即与转录控制相关。近来近克隆出编码不同组蛋白乙酰基转化酶及组蛋白去乙酰酶的基团提供了组蛋白乙酰化作用与转录控制之间关系的可能解释。组蛋白的可逆性乙酰化作用可造成染色质再造及因此作为基团转录的控制机转。通常，组蛋白的过度乙酰化作用会促使基团表现，而组蛋白去乙酰化作用则与转录抑制有相关性。已知组蛋白乙酰基转化酶具有作为转录共活化剂的作用，而组蛋白去乙酰酶则属于转录抑制途径。
组蛋白乙酰化与去乙酰化之间的动态平衡是正常细胞生长所必需。抑制组蛋白去乙酰酶则可造成细胞循环停止、细胞分化、细胞凋亡及使转形的表型逆转。因此，HDAC抑制剂在治疗细胞增生疾病或病症上具有极大医疗潜力(Marks等人，Nature ReviewsCancer 1194-202，2001)。
涉及组蛋白去乙酰酶(HDAC)的抑制剂研究显示，这些酶的确在细胞增生及分化上扮演重要角色。抑制剂三克定A(Trichostatin A)(TSA)造成G1与G2期的细胞循环停止，使不同细胞株的已转形表型反转，并诱发弗瑞德(Friend)白血病细胞及其它细胞分化。已有文献指出，TSA(与辛二酰基替苯胺异羟肟酸SAHA)在小白鼠体内，可制抑细胞生长，诱发末端分化，及防止肿瘤形成(Finnin等人，Nature，401188-193，1999)。
亦有文献指出，三克定A适用于治疗纤维变性，例如肝纤维变性与肝硬化(Greets等人，1998年3月11日公告的欧洲专利申请案EP 0 827742)。
2001年5月31日公告的专利申请案WO 01/38322特别揭示通式Cy-L1-Ar-Y1-C(O)-NH-Z的其它组蛋白去乙酰酶抑制剂，并提供治疗细胞增生疾病与病症的组合物与方法。
2001年9月27日公告的专利申请案WO 01/70675提示如式Cy-S(O)2-NH-Y3-W的组蛋白去乙酰酶抑制剂，并进一步提供治疗细胞增生疾病与病症的组合物与方法。
所要解决的问题为提供具有高酶活性的组蛋白去乙酰酶抑制剂，亦需具备有利性质，如细胞活性及提高的生物可利用率，最好提高口服的生物可利用率，且副作用很小或没有。
本发明新颖化合物可解决上述问题.本化合物的结构式不同于先前技艺。
本发明化合物具有优越的活体外组蛋白去乙酰酶抑制酶活性。本化合物在细胞活性上具有有利性质，且针对抑制G1与G2两个检查点的细胞循环发展具有专一性质(p21诱发能力)。本发明化合物具有良好代谢稳定性及高度生物可利用率，更尤其是，其具有口服生物可用性。此外，本发明化合物对P450酶的亲和性低，可降低药物-药物不良交互作用的危险，因此亦可提供较广的安全范围。


发明内容
本发明是涉及式(I)化合物
其N-氧化物型、其医药上可接受的加成盐及立体化学异构型， 其中 n为0、1、2或3，且当n为0时，则为一直接键结； t为0、1、2、3或4，且当t为0时，则为一直接键结； 各Q为氮或-C≤； 各X为氮或-C≤； 各Y为氮或-C≤； 各Z为氮或-CH<； R1为-C(O)NR7R8、-N(H)C(O)R9、-C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10(C(O)N(OH)R9、-NR10C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10C(O)C＝N(OH)R9或另一Zn-螯合基， 其中R7与R8分别独立选自氢、羟基、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基或氨芳基； R9分别独立选自氢、C1-6烷基、C1-6烷羰基、芳基C1-6烷基、C1-6烷基吡嗪基、吡啶酮、吡咯烷酮或甲基咪唑基； R10分别独立选自氢或C1-6烷基； R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、二(C1-6烷基)氨基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基； -L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、氨基、羰基或氨羰基； 各R3分别独立代表氢原子，且其中一个氢原子可被芳基置换； R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、羟羰基、氨基C1-6烷基、氨羰基C1-6烷基、羟羰基C1-6烷基、羟氨羰基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；

为选自下列的基团


其中各s分别为0、1、2、3、4或5； 各R5与R6分别独立选自氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；经芳基与C3-10环烷基取代的C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷氧基C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基；羟基C1-6烷氨基；氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨羰基；二(羟基C1-6烷基)氨基；(芳基)(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基C1-6烷基；芳基磺酰基；芳基磺酰基氨基；芳氧基；芳氧基C1-6烷基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基)；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基； 氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基； 氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基； 二(C1-6烷基)氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基； 二(C1-6烷基)氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；氰基；噻吩基； 经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基； 呋喃基；经羟基C1-6烷基取代的呋喃基；苯并呋喃基；咪唑基；噁唑基；经芳基与C1-6烷基取代的噁唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；吡咯烷基；吡咯基；哌啶基C1-6烷氧基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；吗啉基C1-6烷氧基；吗啉基C1-6烷基；吗啉基C1-6烷氨基；吗啉基C1-6烷基C1-6烷基；哌嗪基；C1-6烷基哌嗪基；C1-6烷基胺哌嗪基C1-6烷氧基；哌嗪基C1-6烷基；萘磺酰基哌嗪基；萘磺酰基哌啶基；萘磺酰基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氨基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氨基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基磺酰基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷氧基；氨基磺酰基哌嗪基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；羟基C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷氧基哌啶基；C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基；哌啶基氨基C1-6烷氨基；哌啶基氨基C1-6烷氨基C1-6烷基； (C1-6烷基哌啶基)(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基； (C1-6烷基哌啶基)(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基C1-6烷基； 羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基； 羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基； (羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基；(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基C1-6烷基； 羟基C1-6烷氨基C1-6烷基；二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基； 吡咯烷基C1-6烷基；吡咯烷基C1-6烷氧基；吡唑基；硫吡唑基；经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基中两个取代基取代的吡唑基； 吡啶基；经C1-6烷氧基、芳氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；四氢嘧啶基哌嗪基；四氢嘧啶基哌嗪基C1-6烷基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列的1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基C1-4烷氧基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷氧基C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰基、氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨羰基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基、氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氰基、哌啶基C1-4烷氧基、吡咯烷基C1-4烷氧基、氨基磺酰基哌嗪基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷氧基哌啶基、C1-4烷氧基哌啶基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、呋喃基、经-CH＝CH-CH＝CH-取代的呋喃基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、吗啉基C1-4烷氨基、吗啉基C1-4烷氨基C1-4烷基、哌嗪基、C1-4烷基哌嗪基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氧基、哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氨基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氨基C1-6烷基、四氢嘧啶基哌嗪基、四氢嘧啶基哌嗪基C1-4烷基、哌啶基氨基C1-4烷氨基、哌啶基氨基C1-4烷氨基C1-4烷基、(C1-4烷基哌啶基)(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基、(C1-4烷基哌啶基)(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基C1-4烷基、吡啶基C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氨基、羟基C1-4烷氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基、氨基噻二唑基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷氧基、或噻吩基C1-4烷氨基； 中心

部份基团亦可与亚甲基、亚乙基或亚丙基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)； 各R5与R6可置于氮上替代氢； 上述芳基为苯基，或经一个或多个分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、氰基或羟羰基的取代基取代的苯基。
“组蛋白去乙酰酶抑制剂”是指可与组蛋白去乙酰酶交互作用且可抑制其活性，更尤其是抑制其酶活性的化合物。抑制组蛋白去乙酰酶活性意指降低组蛋白去乙酰酶脱除组蛋白的乙酰基的能力。优选，这种抑制作用为专一性的，亦即组蛋白去乙酰酶抑制剂降低组蛋白去乙酰酶脱除组蛋白的乙酰基的能力时所需浓度低于该抑制剂为了产生一些其它不相关生物效应时所需浓度。
如上文与下文中定义所使用的卤基通指氟、氯、溴与碘；C1-4烷基指含有1至4个碳原子的直链与支链饱和烃基，如，例如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基乙基、2-甲基丙基，等等；C1-6烷基包括C1-4烷基及含有5至6个碳原子的较高碳数同系物，如，例如戊基、2-甲基-丁基、己基、2-甲基戊基，等等；C1-6烷二基指含有1至6个碳原子的二价直链与支链饱和烃基，如，例如亚甲基、1，2-乙二基、1，3-丙二基、1，4-丁二基、1，5-戊二基、1，6-己二基，及其支链异构体，如2-甲基戊二基、3-甲基戊二基、2，2-二甲基丁二基、2，3-二甲基丁二基，等等；三卤C1-6烷基指含有三个相同或不同卤基取代基的C1-6烷基，例如三氟甲基；C2-6烯二基指含有一个双键及2至6个碳原子的二价直链与支链烃基，如，例如乙烯二基、2-丙烯二基、3-丁烯二基、2-戊烯二基、3-戊烯二基、3-甲基-2-丁烯二基，等等；芳基指苯基，及经一个或多个选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、氰基或羟羰基中的取代基取代的苯基；氨芳基指经氨基取代的芳基；及C3-10环烷基包括含有3至10个碳原子的环状烃基，如环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环辛基、等等。
“另一Zn-螯合基”指可与Zn-离子交互作用的基团，其可出现在酶结合位置。
医药上可接受的加成盐包括医药上可接受的酸加成盐及医药上可接受的碱加成盐。如上述的医药上可接受的酸加成盐包括式(I)化合物可形成的具医疗活性的无毒性酸加成盐型。具有碱性性质的式(I)化合物的碱型经过适当酸处理后，可转化成其医药上可接受的酸加成盐。适当的酸包括例如无机酸类，如氢卤酸，例如盐酸或氢溴酸；硫酸；硝酸；磷酸，等等酸类；或有机酸类如，例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、羟乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸(亦即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己胺磺酸、水杨酸、对氨基-水杨酸、双羟萘酸，等等酸类。
具有酸性性质的式(I)化合物可经过适当有机或无机碱处理后，转化成其医药上可接受的碱加成盐。适当的碱盐型包括例如铵盐、碱金属与碱土金属盐，例如锂、钠、钾、镁、钙盐等等，与有机碱形成的盐例如双羟基乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺、哈胺青霉素的盐类，及与氨基酸如，例如精胺酸、赖氨酸，等等形成的盐类。
“酸或碱加成盐”一词也包括式(I)化合物可形成的水合物及溶剂加成型。这些型式的实例为例如水合物与醇化物，等等。
本文所采用“式(I)化合物的立体化学异构型”指由式(I)化合物的相同原子组成相同键结顺序但具有无法互换的不同立体结构的所有可能化合物。除非另有说明，否则化合物的化学式包括该化合物可能出现的所有可能立体化学异构型的混合物。该混合物可包含该化合物基本分子结构的所有非对映异构体与/或对映异构体。呈纯型或其混合物的式(I)化合物的所有立体化学异构型均包括在本发明范围内。
式(I)化合物的N-氧化物型包括式(I)中一个或数个氮原子被氧化成所谓的N-氧化物的那些化合物，尤其是，式中一个或多个哌啶基、哌嗪基或哒嗪基的氮被N-氧化的N-氧化物。
有些式(I)化合物亦可呈其互变异构型。这些型式虽然未出现在上式中，但也包括在本发明范围内。
本文中若使用“式(I)化合物”一词时，也包括医药上可接受的加成盐及所有立体异构型。
本文所采用“组蛋白去乙酰酶”与“HDAC”意指可自组蛋白的N-末端赖氨酸残基的ε-氨基上脱除乙酰基的酶族群中的任一种。除非本文中另有说明，否则“组蛋白”一词意指来自任何物种的任何组蛋白的蛋白质，包括H1、H2A、H2B、H3、H4与H5。人类HDAC蛋白质或基因产物包括(但不限于)HDAC-1、HDAC-2、HDAC-3、HDAC-4、HDAC-5、HDAC-6、HDAC-7、HDAC-8、HDAC-9与HDAC-10。组蛋白去乙酰酶亦可衍生自原虫或真菌来源。
第一类值得注意的化合物包括彼等式(I)中符合下列一项或多项限制的化合物 a)n为1或2 b)t为0、1或2； c)各Z为氮； d)R10为氢； e)R2为氢、硝基、C1-6烷氧基、三氟甲基、二(C1-6烷基)氨基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基； f)-L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、羰基或氨羰基； g)各R3代表氢原子； h)R4为氢、羟基C1-6烷基、氨羰基、羟氨羰基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基； i)

为选自(a-1)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-14)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-30)、(a-34)、(a-49)或(a-50)的基团； j)各s分别为0、1、2或5； k)各R5与R6分别独立选自氢；卤基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷磺酰基；(芳基)(C1-6烷基)氨基；芳基磺酰基；芳氧基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C2-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基； 呋喃基；噁唑基；吡咯基；吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基取代的吡啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基，或中心

部份基团亦可与亚甲基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)。
第二类值得注意的化合物包括式(I)中符合下列一项或多项限制的化合物 a)n为1或2； b)t为0或2； c)各Z为氮； d)R1为-C(O)NH(OH)； e)R2为氢； f)-L-为一直接键结； g)各R3代表氢原子； h)R4为氢； i)

为选自(a-1)、(a-9)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-49)或(a-50)的基团； j)各s分别为0、1、2或5； k)各R5与R6分别独立选自氢；卤基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基； 呋喃基；噁唑基；吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基取代的吡啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基，或 中心

部份基团亦可与亚甲基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)。
第三类值得注意的化合物包括式(I)中符合下列一项或多项限制的化合物 a)n为1； b)t为0； c)各Z为氮； d)R1为-C(O)NH(OH)； e)R2为氢； f)-L-为一直接键结； g)各R3代表氢原子； h)R4为氢； i)

为选自(a-1)或(a-20)的基团； j)各s分别为0或1； k)各R5与R6分别独立选自氢；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；呋喃基；苯基；经分别独立选自下列之1个取代基取代的苯基二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基或C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基。
第四类值得注意的化合物包括式(I)中R1为-C(O)NH(OH)且-L-为一直接键结的那些化合物。
第五类值得注意的化合物包括式(I)中R1为-C(O)NH(OH)，R2为氢且-L-为一直接键结的那些化合物。
第六类值得注意的化合物包括式(I)中符合下列一项或多项限制的那些化合物 a)t为0； b)R1为-C(O)NR7R8、-C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10C(O)N(OH)R9、-NR10C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10C(O)C＝N(OH)R9或另一Zn-螯合基， 其中R7与R8分别独立选自氢、羟基、羟基C1-6烷基或氨基C1-6烷基； c)R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基或二(C1-6烷基)氨基； d)-L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、氨基或羰基； e)R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基； f)

为选自下列的基团(a-1)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-24)、(a-25)、(a-26)、(a-28)、(a-29)、(a-30)、(a-31)、(a-32)、(a-33)、(a-34)、(a-35)、(a-36)、(a-37)、(a-38)、(a-39)、(a-40)、(a-41)、(a-42)、(a-44)、(a-45)、(a-46)、(a-47)、(a-48)或(a-51)； g)各s分别为0、1、2、3或4； h)R5为氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；羟基C1-6烷基；芳氧基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；噻吩基；呋喃基；经羟基C1-6烷基取代的呋喃基；苯并呋喃基；咪唑基；噁唑基；经芳基与C1-6烷基取代的噁唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；吡咯烷基；吡咯基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；哌嗪基；C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基；C1-6烷氧基哌啶基；吡唑基；经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基的一或两个取代基取代的吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基、芳氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；或经分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或三氟甲基中的1或2个取代基取代的苯基； i)R6为氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；羟基C1-6烷基；芳氧基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；吡啶基；苯基；或经分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或三氟甲基中之1或2个取代基取代的苯基； 中心

部份基团亦可与亚乙基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)。
第七类值得注意的化合物包括式(I)中符合下列一项或多项限制的那些化合物 a)R7与R8分别独立选自氢、羟基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基或氨芳基； b)R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基； c)R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、羟羰基、氨基C1-6烷基、氨羰基C1-6烷基、羟羰基C1-6烷基、羟氨羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基； d)

为选自下列的基团(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-24)、(a-25)、(a-26)、(a-27)、(a-28)、(a-29)、(a-30)、(a-31)、(a-32)、(a-33)、(a-34)、(a-35)、(a-36)、(a-37)、(a-38)、(a-39)、(a-40)、(a-41)、(a-42)、(a-43)或(a-44)；及 e)各R5与R6分别独立选自氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷氧基C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷磺酰基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基；羟基C1-6烷氨基；氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨羰基；二(羟基C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基；芳基磺酰基；芳基磺酰基氨基；芳氧基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；呋喃基；咪唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；哌啶基C1-6烷氧基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；吗啉基C1-6烷氧基；吗啉基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氧基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基磺酰基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷氧基；氨基磺酰基哌嗪基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；羟基C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷氧基哌啶基；C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基；(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；吡咯烷基C1-6烷氧基；吡唑基；硫吡唑基；经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基中两个取代基取代的吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；喹啉基；苯基；经分别独立选自下列的1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、哌啶基C1-4烷氧基、吡咯烷基C1-4烷氧基、氨基磺酰基哌嗪基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷氧基哌啶基、C1-4烷氧基哌啶基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氧基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氨基、二(羟基C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基、氨基噻二唑基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷氧基、或噻吩基C1-4烷氨基。
有一类优选化合物是由彼等式(I)中如下说明的化合物组成 R7与R8分别独立选自氢、羟基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基或氨芳基； R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基； R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、羟羰基、氨基C1-6烷基、氨羰基C1-6烷基、羟羰基C1-6烷基、羟氨羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；

为选自下列的基团(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-24)、(a-25)、(a-26)、(a-27)、(a-28)、(a-29)、(a-30)、(a-31)、(a-32)、(a-33)、(a-34)、(a-35)、(a-36)、(a-37)、(a-38)、(a-39)、(a-40)、(a-41)、(a-42)、(a-43)或(a-44)；及 各R5与R6分别独立选自氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷氧基；C1-6烷氧基C1-6烷羰基；C1-6烷磺酰基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基；羟基C1-6烷氨基；氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨羰基；二(羟基C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基；芳基磺酰基；芳基磺酰基氨基；芳氧基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；呋喃基；咪唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；吡咯烷基；哌啶基C1-6烷氧基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；吗啉基C1-6烷氧基；吗啉基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氧基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基磺酰基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷氧基；氨基磺酰基哌嗪基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；羟基C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷氧基哌啶基；C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基；(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；吡咯烷基C1-6烷氧基；吡唑基；硫吡唑基；经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基中两个取代基取代的吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；喹啉基；苯基；经分别独立选自下列的1、2或3个取代基取代的苯的卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、哌啶基C1-4烷氧基、吡咯烷基C1-4烷氧基、氨基磺酰基哌嗪基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷氧基哌啶基、C1-4烷氧基哌啶基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氧基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氨基、二(羟基C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基、氨基噻二唑基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷氧基、或噻吩基C1-4烷氨基。
另一类优选化合物是由彼等式(I)中如下说明的化合物组成 其中t为0； R1为-C(O)NR7R8、-C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10(C(O)N(OH)R9、-NR10(C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10C(O)C＝N(OH)R9或另一Zn-螯合基，其中R7与R8分别独立选自氢、羟基、羟基C1-6烷基或氨基C1-6烷基； R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基或二(C1-6烷基)氨基； -L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、氨基或羰基； R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；

为选自下列的基团(a-1)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-24)、(a-25)、(a-26)、(a-28)、(a-29)、(a-30)、(a-31)、(a-32)、(a-33)、(a-34)、(a-35)、(a-36)、(a-37)、(a-38)、(a-39)、(a-40)、(a-41)、(a-42)、(a-44)、(a-45)、(a-46)、(a-47)、(a-48)或(a-51)； 各s分别为0、1、2、3或4； R5为氢；卤基；羟基；氨基、硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；羟基C1-6烷基；芳氧基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；噻吩基；呋喃基；经羟基C1-6烷基取代的呋喃基；苯并呋喃基；咪唑基；噁唑基；经芳基与C1-6烷基取代的噁唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；吡咯烷基；吡咯基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；哌嗪基；C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基；C1-6烷氧基哌啶基；吡啶基；经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基的1或2个取代基取代的吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基、芳氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；或经分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或三氟甲基中的1或2个取代基取代的苯基； 且R6为氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；羟基C1-6烷基；芳氧基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；吡啶基；苯基；或经分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或三氟甲基中的1或2个取代基取代的苯基；或 中心

部份基团亦可与亚乙基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)。
另一类优选化合物由式(I)中如下说明的化合物组成 其中n为1或2；t为0、1或2；各Z为氮；R10为氢；R2为氢、硝基、C1-6烷氧基、三氟甲基、二(C1-6烷基)氨基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基；-L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、羰基或氨羰基；各R3代表氢原子；R4为氢、羟基C1-6烷基、氨羰基、羟氨羰基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；

为选自(a-1)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-14)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-30)、(a-34)、(a-49)或(a-50)的基团；各s分别独立为0、1、2或5；且各R5与R6分别独立选自氢；卤基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷磺酰基；(芳基)(C1-6烷基)氨基；芳基磺酰基；芳氧基；芳基C2-6烯二基二(C1-6烷基)氨基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；呋喃基；噁唑基；吡咯基；吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基取代的吡啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基，或 中心

部份基团亦可与亚甲基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)。
另一类更佳化合物由式(I)中如下说明的那些化合物组成 其中n为1或2；t为0或2；各Z为氮；R1为-C(O)NH(OH)；R2为氢；-L-为一直接键结；各R3代表氢原子；R4为氢；

为选自(a-1)、(a-9)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-49)或(a-50)的基团；各s分别独立为0、2或5；且各R5与R6分别独立选自氢；卤基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；呋喃基；噁唑基；吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基取代的吡啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基；二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4氨基)氨基C1-4烷基二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基；或 中心

部份基团亦可与亚甲基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)； 另一类更佳化合物由式(I)中如下说明的那些化合物组成 其中n为1；t为0；各Z为氮；R1为-C(O)NH(OH)；R2为氢；-L-为一直接键结；各R3代表氢原子；R4为氢；

为选自(a-1)或(a-20)的基团；各s分别独立为0或1；且各R5与R6分别独立选自氢；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基或C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；呋喃基；苯基；经一个分别独立选自下列的取代基取代的苯基二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基或C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基。
最佳化合物为No.6、No.100、No.104、No.128、No.144、No.124、No.154、No.125、No.157、No.156、No.159、No.163、No.164、No.168、No.169、No.127、No.171、No.170、No.172与No.173化合物。


最佳化合物为No.6化合物.
式(I)化合物及其医药上可接受的盐与N-氧化物及立体化学异构型可依一般方式制备。其各种一般合成途径包括例如 1a)式(I)中R1为-C(O)NH(OH)的异羟肟酸(称为式(I-a)化合物)的制法可由式(II)中间体与适当酸，如，例如三氟乙酸反应。该反应于适当溶剂，如，例如甲醇中进行。

1b)式(II)中间体的制法可由式(III)中间体与式(IV)中间体于适当试剂的存在下反应，如N′-(乙基碳化亚胺酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐(EDC)与1-羟基-1H-苯并三唑(HOBT)。该反应可于合适溶剂，如DCM与THF的混合物中进行。

1)式(III)中间体的制法可由式(V)中间体与适当碱(如NaOH)，于合适溶剂，如乙醇的存在下反应。

2)式(I)中R1为-C(O)NH(OH)的异羟肟酸(称为式(I-a)化合物)的制法亦可由式(VI)中间体与氢于催化剂(如，例如Pd/C(10％)的存在下进行催化性氢化反应。该反应于适当溶剂，如，例如二甲基甲酰胺(DMF)或THF中进行。或者，这些化合物的制法也可由式(VI)中间体与环己二烯，于催化剂(如，例如Pd/C(10％))的存在下进行。该反应于适当溶剂，如，例如1-丙醇中进行。

3)式(I)R1为如下式基团的化合物

或
(称为式I-b)化合物)的制法可由式(VII)中间体与式(VIII)中间体，其中R′为

或
于N′-(乙基碳化亚胺酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐(EDC)与羟基苯并三唑(HOBT)的存在下反应。该反应可于合适溶剂，如，例如二氯甲烷(DCM)与THF的混合物中进行。

式(I)化合物亦可使用固相合成技术制备。通常，固相合成法涉及由中间体于合成法中与聚合物载体反应。该聚合物承载的中间体可再进行许多合成步骤。每一步骤之后，过滤树脂，以多种不同溶剂洗涤数次，以排除杂质。每一步骤的树脂可以分开与下一个步骤中的不同中间体反应，以合成大量化合物。在制备过程的最后一个步骤之后，以试剂处理树脂或加工裂解树脂上的样品。固相化学中所使用技术的更详细说明示于例如The Combinatorial Index＂(B.Bunin，Academic Press)及Novabiochem’s 1999 Catalogue & Peptide Synthesis Handbook(瑞士Novabiochem AG)，其内容已以引用的方式并入本文中。
式(I)化合物及一些中间体的结构式可具有至少一个立体中心。该立体中心可呈R或S构型。
依上述制法制备的式(I)化合物通常为对映异构体的消旋混合物，其可依相关领域已知的解析法分离。式(I)的消旋化合物可经由与合适的手性酸反应而转化成相应的非对映异构性盐型。该非对映异构性盐型再经例如选择性或分段式结晶法分离，使用碱释出对映异构体。另一种分离式(I)化合物的对映异构型的方法涉及使用手性固相进行液相层析。如果该反应为立体专一性反应，该纯立体化学异构型也可衍生自适当起始物的相应纯立体化学异构型。如果需要专一性立体异构体，最好以立体专一性制法合成该化合物。这些方法最好使用纯对映异构性起始物。
式(I)化合物其医药上可接受的酸加成盐及立体异构型具有抑制组蛋白去乙酰酶(HDAC)效果的有价值的医药性质。
本发明提供一种抑制细胞(包括转形细胞)异常生长的方法，其中供给有效量的本发明化合物。细胞的异常生长指细胞不依靠正常的调节机制生长(亦即丧失接触抑制作用)。其包括直接造成癌症细胞生长停止、末端分化及/或细胞凋亡，及间接抑制肿瘤的新血管形成两种作法来抑制肿瘤生长。
本发明亦提供一种抑制肿瘤生长的方法，其中对有此需要的个体例如哺乳动物(更尤其是人类)供给有效量的本发明化合物。尤其是，本发明提供一种抑制肿瘤生长的方法，其是供给有效量的本发明化合物。可受抑制的肿瘤实例为(但不限于)肺癌(例如腺癌瘤，包括非小细胞肺癌)、胰癌(例如胰癌瘤，如，例如外分泌胰癌瘤)、结肠癌(例如结肠直肠癌瘤，如，例如结肠腺癌瘤与结肠腺瘤)、前列腺癌包括前进式疾病、类淋巴球的造血性肿瘤(例如急性淋巴球性白血病、B-细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma))、骨髓性白血病(例如急性骨髓性白血病(AML))、甲状腺滤泡癌、脊髓发育不良症候群(MDS)、间质性肿瘤(例如纤维肉瘤与横纹肌肉瘤)、黑色素瘤，恶性畸胎瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、良性皮肤肿瘤(例如角化棘皮瘤)、乳癌瘤(例如前进式乳癌)、肾癌瘤、卵巢癌瘤、膀胱癌瘤、与上皮癌瘤。
根据本发明化合物可用于其它医疗目的，例如 a)在治疗癌症的肿瘤放射法之前、其间或之后供给根据本发明化合物，使肿瘤对放射疗法产生敏化作用； b)治疗关节病变与骨病变病症，如类风湿关节炎、骨关节炎、幼年型关节炎、痛风、多关节炎、乾癣性关节炎、僵直性脊柱炎与全身性红斑狼疮； c)抑制平滑肌细胞增生，包括血管增生性病变、动脉粥样硬化及术后再狭窄； d)治疗炎症与皮肤病，如溃疡性结肠炎、克隆氏症、过敏性鼻炎、移植物对抗宿主疾病、结膜炎、气喘、ARDS、贝希特氏症(Behcetsdisease)、移植排斥、荨麻疹、过敏性皮肤炎、局部性脱发、硬皮症、疹病、湿疹、皮肌炎、痤疮、糖尿病、全身性红斑狼疮、川崎氏症、多发性硬化、肺气肿、囊性纤维变性与慢性支气管炎；、 e)治疗子宫内膜异位症、子宫纤维瘤、功能障碍性子宫出血及子宫内膜增生； f)治疗眼睛血管形成，包括影响视网膜与脉络膜血管之血管病变； g)治疗心功能障碍； h)抑制免疫抑制性病症，如治疗HIV感染； i)治疗肾功能障碍； j)抑制内分泌病变； k)抑制生糖作用异常的功能障碍； l)治疗神经病变，例如，巴金森氏症或造成认知异常的神经病变，例如阿兹海默氏症或与聚麸酰胺病变涉及的神经元疾病； m)抑制神经肌肉病变，例如肌萎缩性侧硬化； n)治疗脊柱肌肉萎缩； o)治疗其它可因加强基因表现而治疗的其它病变； p)加强基因疗法。
因此，本发明揭示以式(I)化合物作为医药的用途及以式(I)化合物制造医药供治疗上述一种或多种病症的用途。
式(I)化合物、其医药上可接受的酸加成盐及立体异构型因为其可用于生物样品中检测或判别HDAC而具有有价值的诊断性质，其包括检测或测定有标记的化合物与HDAC之间所形成的配合物。
该检测或判别法可使用标记如放射性同位素、酶、萤光物质、发光物质，等等的标记试剂的化合物。放射性同位素的实例包括125I、131I、3H与14C。酶的检测法通常与适当底物的共轭后，再催化可检测的反应。其实例包括例如β-半乳糖苷酶、β-葡糖苷酶、碱性磷酸酶、过氧化酶与苹果酸脱氢酶，优选辣根过氧化酶。发光物质包括例如鲁米诺(luminol)及鲁米诺衍生物、萤光素、多管水母素(aequorin)与萤光素酶。
生物样品的定义为体组织或体液。体液实例为脑脊髓液、血液、血浆、血清、尿液、痰、唾液，等等。
就其实用的医药性质而言，本化合物可制成不同给药用的医药形式。
为了制备本发明的医药组合物，使用有效量的碱或酸加成盐型特定化合物作为活性成分，与医药上可接受的载体均匀混合，该载体可呈多种不同形式，取决于所需给药制剂型式。这些医药组合物最好呈适合例如经口、直肠、经皮肤给药或非经肠式注射用的单位剂型。例如制备口服剂型组合物时，任何常用的医药介质均可使用，如，例如水、甘醇、油类、醇类，等等，可用于制备口服用液体制剂，如悬浮液、糖浆、酏剂与溶液；或固态载体如淀粉、糖类、高岭土、润滑剂、结合剂、崩解剂，等等，可用于制备散剂、丸剂、胶囊、与锭剂。
由于锭剂与胶囊方便给药，因此代表最有利的口服单位剂型，此时当然使用固态医药载体。非经肠式组合物中的载体通常包括无菌水，至少占绝大部分，但如可包含其它成份，例如有助于溶解的成份。例如可制备注射液，其中载体则包括盐水溶液，葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖溶液的混合物。也可制备注射用悬浮液，此时则可使用适当液态载体、悬浮剂，等等。在适合经皮肤给药的组合物中，载体可视需要包含渗透加强剂及/或合适的湿化剂，可视需要与任何性质的少量合适添加物组合，该添加物不可对皮肤引起显著的不良效应。这些添加物可促进给药至皮肤及/或可能有助于制备所需组合物。这些组合物可促进给药至皮肤及/或可能有助于制备所需组合物。这些组合物可依多种方法给药，例如呈透皮式贴布、滴剂、或油膏。
上述医药组合物特别有利于调配形式方便给药且剂量均一的单位制剂。本说明书与申请专利范围所使用的单位剂型指物理性分离的单位剂量，各单位包含经计算可产生所需医疗效果的预定量活性成份，与所需的医药载体组合。这些单位剂型实例为锭剂(包括有画线或有包衣的锭剂)、胶囊、丸剂、散剂包、扁囊片、注射用溶液或悬浮液、茶匙剂、汤匙剂，等等，及其多重剂量组合。
熟悉相关技艺的人士很容易即可由下文出示的试验结果决定有效量。通常，医疗有效量为每公斤体重0.005毫克至100毫克，特定盐之每公斤体重0.005毫克至10毫克。可以在一天内将所需剂量分成2、3、4或更多个小剂量，在适当间隔时间下给药。该小剂量可调配成单位剂型，例如每单位剂型包含0.5至500毫克，特定言的10至500毫克活性成份。
本发明另一方面提出一种含HDAC-抑制剂与另一种抗癌剂的组合，尤其用于医药，更明确言说，用于治疗癌症或相关疾病。
治疗上述病症时，本发明化合物宜用于与一种或多种其它医药剂组合，更尤其是，与其它抗癌剂组合。抗癌剂的实例为 -铂配位化合物，例如顺氯铵铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)或草酸铂(oxalyplatin)； -紫杉烷化合物，例如帕尼特西(paclitaxel)或哚希特西(docetaxel)； -拓扑异构酶I抑制剂，如喜树硷化合物，例如；抑特康(irinotecan)或托普特康(topotecan)； -拓扑异构酶II抑制剂，如抗肿瘤鬼臼毒素衍生物，例如抑托泊苷(etoposide)或登尼泊苷(teniposide)； -抗肿瘤长春花植物硷，例如长春花硷、长春新硷或长春瑞宝(vinorelbine)； -抗肿瘤核苷衍生物，例如5-氟尿嘧啶、真希嗒本(gemcitabine)或卡希嗒本(capecitabine)； -烷化剂，如氮芥或亚硝酸脲，例如环磷酰胺、苯丁酸氮芥、卡莫司汀(carmustin)或洛莫司汀(lomustin)； -抗肿瘤蒽环素衍生物、例如道诺红菌素(daunorubicin)、道索红菌素(doxorubicin)、依道红菌素(idarubicin)或米托恩昆(mitoxantrone) -HER2抗体，例如嗒兹美布(trastuzumab)； -雌激素受体撷抗剂或选择性雌激素受体控制剂，例如嗒莫希芬(tamoxifen)、妥洛米芬(toremifene)、特洛希芬(droloxifene)、法洛得斯(faslodex)、或拉洛希芬(raloxifene)； -芳构酶抑制剂，如抑美斯坦(exemestane)、安斯特唑(anastrozole)、乐特唑(letrazole)、与弗洛唑(vorozole)； -分化剂，如类视黄素、维生素D与视黄酸代谢阻断剂(RAMBA)，例如异维甲酸(accutane)； -DNA甲基转化酶抑制剂，例如阿扎胞苷(azacytidine) -激酶抑制剂，例如黄吡哚(flavoperidol)、抑麻特本(imatinib)甲磺酸盐或吉菲特本(gefitinib)； -法呢基转化酶抑制剂；或 -其它HDAC抑制剂。
“铂配位化合物”一词在本文中指可抑制任何肿瘤细胞生长的铂配位化合物，其可提供离子形式的铂。
“紫杉烷化合物”一词指具有紫杉烷环系且与某些紫杉类(Taxus)树木的萃出物相关或其所衍生物的化合物。
“拓朴异构酶抑制剂”一词是指可于真核生物细胞中改变DNA拓朴结构的酶。其对细胞重要功能及细胞增生具有重要性。真核生物细胞中有两类拓朴异构酶，亦即I型与II型。拓朴异构酶I为一种分子量约100,000的单体酶。该酶会结合DNA，引进一个暂时性单股裂口，打开双螺旋(或使之解开)，然后先使裂口封合后，再自DNA股上解离。拓朴异构酶II的作用机理类似，其涉及诱导DNA股开裂或形成游离基。
“喜树碱化合物”是指与喜树碱母化合物涉及或其所衍生的化合物，它是衍生自中国树种Camptothecin acuminata及印度树种Nothapodytes foetida的不可溶于水的植物硷。
“鬼臼毒素化合物”一词指与自剥度比尔莫(mandrake)植物萃出的鬼臼毒素母化合物涉及或其所衍生的化合物。
“抗肿瘤长春花植物硷”一词指与自长春花(Vinca rosea)植物的萃出物涉及或其所衍生的化合物。
“烷化剂”一词包括一类共同特点为在生理条件下有能力提供烷基给具有生物活性的大分子如DNA的化学剂。大多数的较重要制剂如氮芥及亚硝基脲中的活性烷化部分基团在活体内在复杂的降解反应(其中有些为酶反映)之后产生。烷化剂的最重要医药作用为特别在DNA合成与细胞分裂过程中干扰与细胞增生涉及的基本机理。烷化剂在快速增生组织中干扰DNA功能与整体性的能力可作为其医疗用途及其多种毒性的基础。
“抗肿瘤蒽环素衍生物”一词包括得自真菌波赛链霉菌(Strep.peuticus var.caesius)的抗生素及其衍生物，其特征在于具有一个四环素环结构，利用糖苷键连接一种罕见糖道诺糖苷(daunosamine)。
已知原发性乳癌瘤中人类的上皮生长因子受体2蛋白质(HER2)的扩增作用与某些患者的临床预后结果不佳有相关性。嗒兹美布(trastuzumab)为一种高度纯化的重组DNA-衍生的拟人化单株1gGI-k抗体，与其HER2受体的细胞外功能部位具有高的和专一的结合性。
许多乳癌有雌激素受体，且这些肿瘤的生长可受到雌激素刺激。“雌激素受体撷抗剂”及“选择性雌激素受体调控剂“是指与雌激素受体(ER)结合的雌二醇的竞争性抑制剂。选择性雌激素受体调控剂与ER结合时，会诱发受体的三维空间形状改变，抑制其与DNA上雌激素反映元素(ERE)的结合。
停经后妇女的循环雌激素主要来源为肾上腺与卵巢雄激素(雄烯二醇与睾固酮)经由周边组织中芳构酶转化成雌激素(雌固酮与雌二醇)。经由抑制芳构酶或去活化作用消耗雌激素的作法可有效且选择性治疗停经后某些与激素相关的乳癌患者。
“抗雌激素剂”一词不仅包括雌激素受体撷抗剂与选择性雌激素受体调控剂，而且包括如上所述的芳构酶抑制剂。
“分化剂”一词包括可依不同方式抑制细胞增生及诱发分化的化合物。已知维生素D与类视黄素在调节多种正常及恶性细胞型态的生长与分化上扮演重要角色。视黄酸代谢作用阻断剂(RAMBA′s)通过抑制细胞色素P450-所媒介的视黄酸分解代谢作用而提高内因性视黄酸含量。
DNA的甲基化变化为人体赘生瘤最常见的异常现象。特定基因的发动子中的过度甲基化通常与所涉及的基因失去活性有关。“DNA甲基转化酶抑制剂”一词指透过DNA甲基转化酶的医药抑制作用而发挥作用及使肿瘤抑制基因表达再活化的化合物。
“激酶抑制剂”一词包括涉及细胞循环发展及计划性细胞死亡(细胞凋亡)的激酶的强力抑制剂。
“法呢基转化酶抑制剂”一词指其设计用于防止Ras及其它细胞内蛋白质的法呢基化反应的化合物。已知其可影响恶性细胞增生与存活。
“其它HDAC抑制剂”一词包括(但不限于) -短链脂肪酸，例如丁酸酯、4-苯基丁酸酯或2-丙基戊酸。
-异羟亏酸，例如辛二酰基替苯胺异羟亏酸(SAHA)、双芳基异羟肟酸酯A-161906、双环芳基-N-羟基羧酰胺、焦酰胺(pyroxamide)、CG-1521、PDX-101、磺酰胺异羟肟酸、LAQ-824、三克定A(trichostatinA)(TSA)、欧色弗丁(oxamflation)、史克嗒(scriptaid)、间羧基肉桂酸双异羟肟酸或查布辛素(trapoxin)、异羟肟酸类似物。
-环状四肽，例如查布辛素、阿狄辛(apidicin)或狄希肽(depsipeptide) -苯甲酰胺，例如MS-275或CI-994，或 -狄普特辛(depudecin)。
治疗癌症的根据本发明化合物可配合放射疗法，依上述供给患者。放射疗法指离子线照射，尤其是指迦玛射线，尤指由直线加速器所发射的或由现在常用的放射核种发射的。使用放射核种照射肿瘤的方法可外部或内部进行。
本发明还涉及抗癌剂与根据本发明HDAC抑制剂的根据本发明的组合。
本发明还涉及以根据本发明的组合于例如抑制肿瘤细胞生长的医疗法上的用途。
本发明还涉及以根据本发明的组合于抑制肿瘤细胞生长的用途。
本发明还涉及一种于人体中抑制肿瘤细胞生长的方法，其包括对该个体供给有效量的根据本发明的组合。
本发明还提供一种抑制异常细胞(包括转型细胞)生长的方法，其中供给有效量的根据本发明的组合。
其它医药剂与HDAC抑制剂可同时(例如分开或呈单一组合物)或按任何次序给药。后项作法中，两种化合物将在同一时期给药。其用量与方式应足以确保达成有利或增效的效用。可以理解，该组合中各成分的优选给药法与给药顺序及相应的剂量与疗程将依所供给的特定的其它医药剂及HDAC抑制剂、其给药途径、所治疗的特定肿瘤及所治疗的特定宿主而定。最佳给药方法及顺序及剂量与疗程很容易由熟悉相关技艺的人士使用常用方法，依据本文中所示的资料即可决定。
铂配位化合物的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用1至500毫克(mg/m2)，例如50至400mg/m2，尤其是，每个疗程的顺氯铵铂(cisplatin)剂量为约75mg/m2，卡铂(carboplatin)剂量为约300mg/m2。
紫杉烷化合物的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用50至400毫克(mg/m2)，例如75至250mg/m2，尤其是，每个疗程的帕尼特西(paclitaxel)剂量为约175至250mg/m2，及哚希特西(docetaxel)的剂量为约75至150mg/m2。
喜树硷化合物的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用0.1至400毫克(mg/m2)，例如1至300mg/m2，尤其是，每个疗程的抑特康(irinotecan)剂量为约100至350mg/m2，托普特康(topotecan)剂量为约1至2mg/m2. 抗肿瘤鬼臼毒素衍生物的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用30至300毫克(mg/m2)，例如50至250mg/m2，尤其是，每个疗程的抑托泊苷(etoposide)剂量为约35至100mg/m2，登尼泊苷(teniposide)剂量为约50至250mg/m2。
抗肿瘤长春花植物硷的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用2至30毫克(mg/m2)，尤其是，每个疗程的长春花碱剂量为约3至12mg/m2，长春新硷剂量为约1至2mg/m2，长春瑞宝(vinorelbine)剂量为约10至30mg/m2。
抗肿瘤核苷衍生物的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用200至2500mg/m2，例如700至1500mg/m2，尤其是，每个疗程的5-FU剂量为200至500mg/m2，真希嗒本(gemcitabine)剂量为约800至1200mg/m2，卡希嗒本(capecitabine)剂量为约1000至2500mg/m2。
烷化剂，如氮芥或亚硝基脲的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用100至500毫克(mg/m2)，例如120至200mg/m2，尤其是，每个疗程的环磷酰胺剂量为约100至500mg/m2，苯丁酸氮芥剂量为约0.1至0.2mg/m2，卡莫司汀(carmustin)剂量为约150至200mg/m2，洛莫司汀(lomustin)剂量为约100至150mg/m2。
抗肿瘤蒽环素衍生物的合宜给药剂量为每平方米体表面积使用10至75毫克(mg/m2)，例如15至60mg/m2，尤其是，每个疗程的道诺红菌素(daunorubicin)剂量为约40至75mg/m2，道索红菌素(idoxorubicin)剂量为约25至45mg/m2，依道红菌素(darubicin)剂量为约10至15mg/m2。
嗒兹美布(trastuzumab)的合宜给药剂量为约每平方米体表面积使用1至5毫克(mg/m2)，尤其是，每个疗程剂量为2至4mg/m2。
抗雌激素的合宜给药剂量为每天使用约1至100毫克，依所使用的特定药剂及所治疗病症而定。嗒莫希芬(tamoxifen)的合宜口服剂量为一天服用两次5至50毫克，优选为10至20毫克，持续治疗一段足够时间，以达成及维持医疗效果。妥洛米芬(toremifene)的合宜口服剂量为一天服用一次约60毫克，持续治疗一段足够时间，以达成及维持医疗效果。安斯特唑(anastrozole)的合宜口服剂量为一天服用一次约1毫克。特洛希芬(droloxifene)的合宜口服剂量为一天服用一次约20-100毫克。拉洛希芬(raloxifene)的合宜口服剂量为一天服用一次约60毫克。抑美斯坦(exemestane)的合宜口服剂量为一天服用一次约25毫克。
这些剂量可以每个疗程给药例如一次，两次或多次，可以每7、14、21或28天重复一次。
就其有用的医药性质而言，根据本发明的组合中的成分(亦即其它医药剂与HDAC抑制剂)可调配成各种不同给药用医药形式。各成分可于分开的医药组合物中分开调配，或于单一医药组合物中同时含有两种成分。
因此本发明还涉及包含其它医药剂与HDAC抑制剂及一种或多种医药用载体的医药组合物。
本发明还涉及呈医药组合物型式的根据本发明的组合，其包含抗癌剂与根据本发明HDAC抑制剂及一种或多种医药用载体。
本发明还涉及以根据本发明的组合于制造抑制肿瘤细胞生长的医药组合物上的用途。
本发明还涉及一种产品，其包含根据本发明HDAC抑制剂作为第一种活性成分，及包含抗癌剂作为第二种活性成分，形成组合制剂，供同时，分开或顺序用于治疗癌症患者。

具体实施例方式 实验部份 下列实例供说明用。
下文中，“AMMC”指3-[2-(N，N-二乙基-N-甲氨基)乙基]-7-甲氧基-4-甲基香豆素，“BFC”指苯甲氧基-三氟甲基香豆素“BINAP”指2，2′-双(二苯基膦基)-1，1′-联萘，“Boc”指第三丁氧羰基，“BuLi”指正丁基锂，“BTEAC”指苯甲基三乙基铵化氯，“BSA”指牛血清白蛋白，“DCM”指二氯甲烷，“DIC”指二异丙基碳二亚胺，“DIEA”指二异丙基乙胺，“DIPE”指二异丙基醚，“DMAP”指二甲氨基吡啶，“DMF”指二甲基甲酰胺，“DMSO”指二甲亚砜，“EDC”指N′-(乙基碳化亚胺酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐，“EDTA”指乙二胺四乙酸，“EtOAC”指乙酸乙酯，“Fmoc”指芴基甲氧羰基，“Hepes”指4-(2-羟乙基)-1-哌嗪-乙磺酸，“HOAC”指乙酸，“MeOH”指甲醇，“MTT”指3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基-2H-四唑鎓溴化物，“NMP”指N-甲基吡咯烷酮，“PBS”指鏻酸盐缓冲生理食盐水，“PyBOP”指苯并三唑-1-基-氧-参-吡咯烷基-膦六氟磷酸盐，“PyBrOP”指溴-参-吡咯烷基-鏻六氟磷酸盐，“TEA”指三乙胺，“TFA”指三氟乙酸，“TIS”指三异丙基矽烷，“THF”指四氢呋喃，“THP”指四氢吡喃基，及“TMSOTf”指三甲矽烷基三氟甲磺酸酯。ExtrelutTM为德国Darmstadt市Merck KgaA药厂的产品，是一种含矽藻土的短柱。FlashtubeTM为Trikonex的产品，是一种填充8.0克含萤光指示剂的矽石的聚乙烯管。
A中间体的制法 实例A1 a)取含4-(六氢-1H-1，4-二氮杂

-1-基)-苯甲酸乙酯盐酸盐(12)(0.01mol)与2-萘磺酰氯(0.011mol)的DCM p.a.(150mol)混合物于室温下搅拌。添加NaHCO3(饱和水溶液，50ml)，反应混合物于室温下搅拌4小时。分层。有机层干燥，过滤及蒸发溶剂。残余物与2-丙醇研磨，过滤及干燥，产生4.5g(全收量)4-[六氢-4-(2-萘磺酰基)-1H-1，4-二氮杂

-1-基]-苯甲酸乙酯(中间体1)。
b)取含中间体1(0.0091mol)的35％HCl(10ml)与1，4-二噁烷(30ml)的混合物搅拌及回流24小时，然后冷却，过滤所得沉淀，以二噁烷洗涤，干燥。取一部份(0.9g)残余物(3.9g，96％)自含有少量DMF的乙醇中再结晶，过滤及干燥，产生0.43g4-[六氢-4-(2-萘磺酰基)-1H-1，4-二氮杂

-1-基]苯甲酸(中间体2)。
c)取含中间体2(0.0067mol)、O-(苯基甲基)-羟基胺盐酸盐(2当量，0.0134mol)、4-甲基吗啉(4当量，0.027mol)与DMAP(0.5g)的DCMp.a.(200ml)混合物于室温下搅拌。添加DIC(2当量，0.0134mol)，反应混合物于室温下搅拌2小时。蒸发溶剂。残余物与乙醇研磨，过滤及干燥。残余物经玻璃滤器上的矽胶纯化(洗脱剂DCM/MeOH99/1)。收集所需级分，蒸发溶剂。残余物与DCM(30ml)研磨，过滤及干燥，产生1.9g(55％)4-[六氢-4-(2-萘磺酰基-1H1，4-二氮杂

-1-基)-N-(苯基甲氧基)-苯酰胺(中间体3) 实例A2 a)取含4-(4-羧苯基)-1-哌嗪羧酸1-(1，1-二甲基乙基)酯(0.032mol)、O-(苯基甲基)-羟基胺盐酸盐(0.64mol)、DMAP(0.03mol)的DCMp.a.(250mol)与TEA(14ml)混合物于室温下搅拌。添加DIC(0.64mol)。反应混合物于室温下搅拌8小时。然后以水、HCl(0.5N)与水洗涤。分离的有机层干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH 98/2)。收集所需级分，蒸发溶剂，产生13.7g4-[4-[[(苯基甲氧基)氨基]羰基]苯基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙酯(中间体4)。
b)取含中间体4(0.0137mol)的TFA(57ml)于DCM(300ml)混合物于室温下搅拌2小时。蒸发溶剂。残余物溶于水/DCM中，以NH4OH碱化。分离的水层经NaCl饱和，以DCM萃取。合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物悬浮于DIPE中。沉淀物过滤及干燥，产生1.6g(37.6％)N-(苯基甲氧基)-4-(1-哌嗪基)-苯酰胺(中间体5)。
c)取含中间体5(0.011mol)的DCM(150mol)与TEA(1.75ml)混合物于室温下搅拌。取2-萘磺酰氯(0.013mol)溶于DCM(10mol)中，滴加至反应混合物中。反应混合物于室温下搅拌30分钟，然后以水洗涤。分离的有机层干燥(MgSO4)过滤及蒸发溶剂。残余物悬浮于DIPE中。过滤沉淀物及干燥。产生3.6g 4-[4-(2-萘磺酰基-1-哌嗪基)-N-(苯基甲氧基)-苯酰胺(中间体6)。
实例A3 取含1-(2-萘磺酰基)-4-(4-硝基苯基)-哌嗪(7.5mmol)的THF(150ml)混合物于50℃下，使用Pd/C10％(1g)为催化剂，于噻吩溶液(0.5ml)的存在下氢化。在吸收H2(3当量)后，滤出催化剂，蒸发滤液。残余物自2-丙醇中结晶。滤出所形成的沉淀，以2-丙醇洗涤及干燥(55℃，真空)，产生2.39g(87％)1-(4-氨基苯基)-4-(2-萘磺酰基)-哌嗪(中间体7)。
实例A4 a)于室温下分批添加NaH 60％(0.0217mol)至N2气流下含1-(2-萘磺酰基)-哌嗪(0.011mol)的THF(50ml)溶液中。混合物于室温下1小时。然后冷却至0℃。加速添加含2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.014mol)的THF(30ml)溶液。混合物于室温下搅拌2小时，倒至水中，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物溶于乙醚中。滤出沉淀并干燥，产生3.92g(84％)2-[4-(2-萘磺酰基)-1-哌嗪基]-5-嘧啶羧酸乙酯(中间体8)，熔点>260℃。
b)取含中间体8(0.0011mol)于氢氧化钾(4.7mmol)的乙醇(5ml)混合物搅拌及回流24小时，然后冷却，倒至冷水中，以HCl 6N酸化。混合物部份蒸发，冷却。滤出沉淀，以水洗涤，干燥，产生0.47g(100％)2-[4-(2-萘磺酰基)-1-哌嗪基]-5-嘧啶羧酸(中间体9)，熔点>260℃。
c)于室温下添加TEA(0.0011mol)、EDC(0.0011mol)、1-羟基苯并三唑(1.1mmol)与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0011mol)至N2气流下含中间体9(8mol)的DCM/THF(50/50)(20ml)溶液中。混合物搅拌24小时，然后倒至冰水中，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(0.56g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM100至DCM/MeOH 90/10；5μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.471g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 92/8/1；15-40μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生0.293g(69％)2-[4-(2-萘磺酰基)-1-哌嗪基]-N-[(四氢-2H-吡喃-2-基)氧]-5-嘧啶羧酰胺(中间体10)，熔点198℃。
实例A5 a)中间体11的制法
中间体11 取含1-(2-萘基磺酰基)-哌嗪(1当量；37mmol)、3-(溴甲基)-苯甲酸甲酯(0.00037mol)与吗啉基甲基聚苯乙烯2％ DVB(0.2g，Novabiochem01-64-0171，200-400筛目，承载量3.2-3.8mmol/g)的DMP，p.a.(5ml)混合物于100℃下搅拌过夜(20小时)。反应混合物过滤。树脂经DMF洗涤。于80℃及温和的N2气流下蒸发溶剂。残余物经管柱层析法纯化(洗脱剂CH2Cl2/EtOAC 1/1)。收集产物级分，产生0.044g中间体11。
b)中间体12的制法
取含中间体11(1mmol)的THF p.a.(3ml)与NaOH 1N(1ml)混合物于60℃下搅拌过夜。添加HCl IN(1ml)。添加DCM(10ml)，反应混合物经ExtrelutTMNT(供应商MERCK过滤。滤液(有机层)蒸发，产生0.036g中间体12。
c)中间体13的制法
取中间体12(0.088mmol)溶于THF/DCM 50/50(6ml)中。依序添加EDC(1.1当量)、TEA(1.2当量)、1-羟基-1H-苯并三唑(1.1当量)、及O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(1.3当量)。反应混合物于室温下搅拌过夜。添加水(2ml)，反应混合物搅拌15分钟。添加DCM(10ml)，混合物经ExtrelutTMNT(供应商MERCK药厂)干燥。分离有机层，于50℃及N2气流下蒸发溶剂。残余物经FlashtubeTM2008(供应商Trikonex药厂)(洗脱剂EtOAC)急骤管柱层析法纯化。收集产物级分(分段)，然后以DCM/MeOH(90/10)洗脱。收集产物级分，于50℃及N2气流下蒸发溶剂，产生0.025g中间体13。
实例A6 a)中间体14的制法
中间体14 取含4-[[[4-(苯基甲基)-1-哌嗪基]羰基]氨基]-苯甲酸乙酯(9.6mmol)的乙醇(100ml)混合物于室温下使用Pd/C10％(1g)为催化剂氢化。在吸收H2(1当量)后，经矽藻土滤出催化剂，蒸发滤液，产生3g中间体14。
b)中间体15的制法
取含中间体14(9.6mmol)与TEA(0.012mol)的DCM(100ml)混合物于室温下搅拌。于室温下分批添加2-萘磺酰氯(9.6mol)。反应混合物于室温下搅拌30分钟，然后以水洗涤。干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物自DIPE/CH3CN中结晶，过滤及干燥。产生3.02g(67.4％)中间体15，熔点182℃。
c)中间体16的制法
取含中间体15(2mmol)的NaOH IN(30ml)、THF(80ml)与MeOH(20ml)混合物于室温下搅拌20小时。混合物经HCl IN(30ml)中和。混合物加水(100ml)稀释，然后以DCM萃取3次。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂，产生0.9g(95.7％)中间体16，熔点242℃。
d)中间体17的制法
取含中间体16(0.23mmol)、O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.25mmol)、1-羟基-苯并三唑(0.00025mol)与TEA(0.00030mol)的DCM，p.a.(10ml)混合物于室温下搅拌。添加EDC(0.00025mol)，反应混合物于室温下搅拌一个周末。反应混合物经水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂，产生中间体17。
实例A7 a)中间体18的制法
中间体18 取含1-(2-萘磺酰基)-4-(4-硝基苯基)-哌嗪(7.5mmol)的THF(150ml)混合物于50℃下，使用Pd/C 10％(1g)为催化剂，于噻吩溶液(0.5ml)的存在下氢化。在吸收H2(3当量)后，过滤催化剂，蒸发滤液。残余物自2-丙醇中结晶。滤出所形成的沉淀，以2-丙醇洗涤，及干燥(55℃，真空)，产生2.39g(87％)中间体18。
b)中间体19的制法
中间体19 于室温下添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(8.5mmol)、至含α-氧代-苯丙酸(7.8mmol)的吡啶(12ml)与乙醇(23ml)混合物中。混合物于室温下搅拌1小时。蒸发溶剂至干。残余物(2.6g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 85/15/170/30/3；15-40μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生1.7g(83％)中间体19。
c)中间体20的制法
中间体20 于室温与N2气流下，添加EDC(1.3mol)至含中间体18(1.1mmol)、中间体19(1.3mmol)与1-羟基苯并三唑水合物(1.3mmol)的DCM/THF(8ml)混合物中。混合物于室温下搅拌过夜。添加10％K2CO3。混合物经DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂至干，残余物(0.9g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂环己烷/EtOAC 65/35；15-35μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.35g，52％)自CH3CN中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.3g(45％)中间体20，熔点213℃。
实例A8 a)中间体21的制法
中间体21 取含1-(2-萘磺酰基)-哌嗪(7.2mmol)、1-(4-氟苯基)-乙酮(11mmol)与Na2CO3(11mmol)的二甲基乙酰胺(5ml)混合物于140℃下搅拌24小时，添加1-(4-氟苯基)-乙酮(4mmol)。混合物于140℃下搅拌48小时，然后冷却，倒至冰水中，以EtOAC萃取。有机层以水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(3.5g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂环己烷/EtOAC 65/35；15-35μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.95g，34％)自乙腈中结晶。滤出沉淀，及干燥，产生0.8g中间体21，熔点218℃。
b)中间体22的制法
于室温下，添加含中间体21(2.2mmol)的三氯甲烷(15ml)溶液至含CuBr2(3.7mmol)的EtOAC(25ml)混合物中。混合物于50℃下搅拌12小时，然后冷却至室温，倒至水中，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及蒸发溶剂，产生1g(96％)中间体22。
实例A9 a)中间体23的制法
取含1-(2-萘磺酰基)-哌嗪(3.6mmol)、4-氟-2-(三氟甲基)-苯甲酸乙酯(7.2mmol)与Na2CO3(7.2mmol)的二甲基乙酰胺(10ml)混合物于140℃下搅拌20小时，然后冷却至室温，倒入冰水中，以EtOAC萃取。有机层经水洗涤、干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(2.93g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂环己烷/EtOAC 75/35；15-40μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(1.8g)自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生1.265g中间体23(71％)，熔点122℃。
b)中间体24的制法
取含中间体23(3.4mmol)与KOH(0.017mol)的乙醇(15ml)混合物搅拌及回流24小时，倒至水中，以HCl 3N萃取。滤出沉淀，以水/乙醚洗涤及干燥，产生1.255g(80％)中间体24，熔点194℃。
c)中间体25的制法
中间体25 于12℃下，依序添加TEA(1.4mmol)、EDC(1.4mmol)、1-羟基苯亚三唑水合物(1.4mmol)与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(1.4mmol)至N2气流下，含(中间体24)(1mmol)的DCM/THF 50/50(20ml)溶液中。混合物于室温下搅拌24小时，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物自DCM/乙醚中结晶。滤出沉淀，及干燥，产生0.48g(79％)中间体25，熔点192℃ 实例A10 a)中间体26的制法
于室温下分批添加NaH 60％(15mmol)至含1-(2-萘磺酰基)-哌嗪(7.5mmol)的THP(35ml)混合物中。混合物于室温下与N2气流下搅拌1小时30分种。滴加含4-氯-2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(9.8mmol)的THF(35ml)溶液。混合物于室温下搅拌3小时30分钟，倒至冰水中，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(4.6g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂环己烷/EtOAC 80/20至20/80；15-40μm)。收集三种级分，蒸发溶剂。其中一种级分即用于进行下一种反应，产生0.48g(14％)中间体26，熔点123℃。
b)中间体27的制法
取含中间体26(0.8mmol)与KOH(4.2mmol)的乙醇(10ml)混合物搅拌及回流24小时，然后冷却至室温，倒至冰水中，以HCl 6N酸化。滤出沉淀，以水/乙醚洗涤，及干燥，产生0.33g(93％)中间体27，熔点244℃。
c)中间体28的制法
于室温下依序添加TEA(0.8mmol)、1-羟基苯亚三唑水合物(0.8mmol)、EDC(0.8mmol)及O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.8mmol)至N2气流下含(中间体27)(0.6mmol)的DCM/THF(10ml)溶液中。混合物于室温下搅拌24小时，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(0.47g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0.115-40μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生0.18g(53％)中间体28，熔点80℃。
实例A11 a)中间体29的制法
取1-(苯基甲基)-哌嗪(0.125mol)溶于乙腈(200ml)中。添加K2CO3(0.34mol)。滴加含2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.161mol)的乙腈(200ml)溶液。混合物于室温下搅拌2小时，然后以DCM(1000ml)稀释，以水洗涤。分离有机层、干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物经矽胶管柱层析法纯化(DCM/MeOH 98/2)收集纯级分，蒸发溶剂。残余物于50℃下真空干燥，产生33.6g(82.5％)中间体29。
b)中间体30的制法
中间体30 取含中间体29(0.03mol)的乙醇(250ml)混合物50℃下使用Pd/C10％(2g)为催化剂进行氢化。吸收H2(1当量)后，经矽藻土过滤催化剂，滤液于旋转蒸发器上蒸发。残余物经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/(MeOH/NH3)90/10)收集产物级分，蒸发溶剂。产生6.8g(>96％)中间体30。
c)中间体31的制法
中间体31 添加TEA(0.038mol)至含中间体30(0.029mol)的DCM(150ml)溶液中。添加2-萘磺酰氯(0.032mol)，反应混合物于室温下搅拌过夜，然后以水洗涤混合物。分离有机层，以水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物自CH3CN中结晶。过滤及真空干燥，产生7.4g(>60％)中间体31，熔点>260℃ d)中间体32之制法
中间体32 取含中间体31(0.017mol)的THF(250ml)、NaOH 1N(250ml)与MeOH(50ml)的混合物于室温下搅拌5小时。添加HCl IN(250ml)。混合物于室温下搅拌45分钟。滤出沉淀，干燥(真空，60℃，过夜)，产生6.0g(89％)中间体32，熔点>260℃。
e)中间体33的制法
取中间体32(0.015mol)于DCM/THF 50/50(650ml)中搅拌。添加EDC(0.018mol)。添加TEA(0.020mol)。依序添加1-羟基-1H-苯并三唑(0.018mol)及O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.018mol)。反应混合物于室温下搅拌6小时，然后以水洗涤2次，添加DCM。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物悬浮于煮沸的CH3CN中，然后于室温下搅拌过夜，滤出所得沉淀，以CH3CN洗涤，干燥(真空；50℃)，产生6.1g(82％)中间体33，熔点198℃。
实例A12 a)中间体34的制法
中间体34 于室温下添加NaH(6.5mmol)至N2气流下含4-(1-哌嗪基磺酰基)-吗啉(3.2mmol)的THF(15ml)溶液中。混合物搅拌1小时，然后冷却至0℃。添加含2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(4.2mmol)的THF(9ml)溶液。混合物搅拌2小时，倒至冰水中。滤出沉淀，及干燥。残余物(0.665g)溶于乙醚中。滤出沉淀，及干燥。滤液蒸发，与沉淀合并，产生0.408g中间体34。
b)中间体35的制法
中间体35 取含中间体34(1mmol)与LiOH H2O(3.1mmol)的THF(6ml)与水(6ml)混合物搅拌及回流24小时，然后冷却。蒸发溶剂。混合物经HCl 3N酸化。添加EtOAC。混合物经寅式盐过滤。有机层经EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂，产生0.139g中间体35。
c)中间体36的制法
中间体36 于10℃下添加1-羟基苯并三唑水合物(0.5mmol)与EDC(0.5mmol)至N2气流下含中间体35(0.3mmol)与TEA(0.5mmol)的THF/DCM(6ml)溶液中。混合物搅拌1小时。添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.5mmol)。混合物于室温下搅拌过夜。添加冰与水。混合物经DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.259g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂CH2Cl3/iPrOH/NH4OH 98/2/0.210μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生0.024g中间体36。
实例A13 a)中间体37的制法
中间体37 取中间体30(114mmol)与800ml DCM中搅拌，添加TEA(180mmol)、分批添加4-碘-苯磺酰氯(149mmol)。反应混合物于室温下搅拌过夜。添加DCM(1000ml)与水(300ml)。萃取有机层，分层及干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。(粗)产物悬浮于煮沸的乙腈中，使之回到室温，过滤。产物于50℃下真空干燥，产生51.4g(89.5％)中间体37。
b)中间体38的制法
添加含中间体37(0.1mmol)与碳酸铯(0.15mmol)的DMF(2ml)溶液至含(3-甲氧苯基)二羟硼酸(0.149mmol)的DMF(1ml)溶液中。反应混合物于N2蒙气下振荡2分钟。添加乙酸钯(II)(0.02mmol)及1，3-双(二苯膦基)丙烷(0.02mmol)。反应混合物于80℃下振荡4小时，然后使之回到室温。于80℃下真空蒸发溶剂。残余物溶于DCM(20ml)与MeOH(2ml)中，然后以3ml 10％ Na2CO3的水溶液洗涤。反应混合物经ExtrelutTMNT(供应商MERCK药厂)干燥，于50℃与N2气流下浓缩。产物经矽胶管柱层析法纯化，收集纯级分，蒸发溶剂。于50℃与N2气流下干燥，产生中间体38。
c)中间体39的制法
取中间体38(0.0352mmol)溶于THF(4ml)与MeOH(1ml)中。添加NaOH(1.5mmol)。混合物于室温下搅拌过夜。添加含HCl(1.5ml)与10至20ml THF的混合物。反应混合物经ExtrelutTMNT(供应商MERCK药厂)干燥。蒸发溶剂(60℃，N2吹入气流)。添加甲苯。于70℃下真空蒸发溶剂。再添加甲苯。于80℃下真空蒸发溶剂，产生16mg(100％)中间体39。
d)中间体40的制法
中间体40 添加含1-羟基苯亚三唑(0.1mmol)、EDC(0.1mmol)与TEA(0.12mmol)的DCM(3ml)与THF(4ml)溶液至(中间体39)(0.1mmol)中。反应混合物于室温下搅拌5分钟，添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.1mmol)。反应混合物于室温下搅拌过夜。添加水(3ml)与DCM(10ml)。反应混合物干燥。反应混合物于60℃与N2蒙气下浓缩。残余物溶于DCM(5ml)中，与150mg异氰酸甲酯聚苯乙烯2％DVB 200-400筛目，承载量1.4-1.8mmol/g(供应商Novabio Chem 01-64-0169)温和振荡4小时，以清除过量O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺。混合物过滤，树脂经DCM(2ml)洗涤2次。混合物于40℃与N2气流下浓缩，然后经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂50％ EtOAC/DCM)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生中间体40。
实例A14 中间体41的制法
中间体41 取含3，6-二氯-哒嗪(0.0034mol)与1-(2-萘磺酰基)-哌嗪(0.0034mol)的DMF(2ml)混合物于110℃下搅拌4小时，然后冷却至室温，倒至EtOAC/H2O中。过滤混合物。萃取滤液。有机层经水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(0.85g)经矽胶管柱层析法纯化(20-45μm)(洗脱剂环己烷/EtOAC 90/10)。收集纯级分，蒸发溶剂。(0.56g，42％)。级分自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.178g(14％)中间体41，熔点213℃。
实例A15 a)中间体42的制法
中间体42 于0℃下，滴加含2-萘磺酰氯(0.0066mol)的DCM(15ml)溶液至含2，5-重氮双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸1，1-二甲基乙酯，(1S，4S)(0.0051mol)与TEA(0.0098mol)的DCM(15ml)混合物中。混合物室温下搅拌12小时，倒至冰水中，以DCM萃取。有机层以10％碳酸钾洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生2.05g(85％)中间体42(S，S)，熔点129℃。
c)中间体43的制法
中间体43 取含中间体42(S，S)(0.0049mol)的HCl 6N(20ml)与THF(5ml)混合物于80℃下搅拌12小时，然后冷却至室温，倒至冰水中，以NH4OH碱化，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(1.4g)自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.5g(36％)中间体43(S，S)，熔点159℃。
c)中间体44的制法
于0℃下添加氢化钠60％(0.0051mol)至N2气流下含中间体43(S，S)(0.0034mol)的THF(20ml)混合物中。混合物搅拌1小时。滴加含2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.0045mol)的THF(10ml)溶液。混合物于室温下搅拌2小时，倒至冰水中。添加EtOAC。混合物过滤，以乙醚洗涤，干燥，产生0.4g中间体44(S，S)，熔点212℃。萃取过滤。有机层以水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(1.7g)经矽胶管柱层析法纯化(15-35μm)(洗脱剂环己烷/EtOAC 60/40)。收集纯级分，蒸发溶剂，产生1g(66％)中间体44(S，S)。
d)中间体45的钠盐的制法
取含中间体44(S，S)(0.0021mol)与氢氧化钠(0.0042mol)的EtOH(40ml)混合物搅拌及回流12小时，然后冷却。滤出沉淀，以乙醚洗涤及干燥，产生0.56g(62％)中间体45.Na(S，S)。
e)中间体46的制法
中间体46 于室温下添加EDC(0.0017mol)与DCM(20ml)至含中间体45(0.0013mol)、O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0017mol)与1-羟基苯并三唑(0.0017mol)的THF(20ml)混合物中。混合物于室温下搅拌12小时，倒至水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.8g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH90.5/0.5)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.43g，66％)自乙醚/DIPE中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.36g中间体46(S，S)，熔点176℃。
实例A16 a)中间体47的制法
取含中间体26(0.001mol)、N-甲基-甲胺盐酸盐(0.0015mol)与碳酸钾(0.003mol)的乙腈(10ml)混合物于80℃下搅拌24小时，然后冷却，倒至冷水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.45g)自DIPE中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.254g(53％)中间体47，熔点117℃。
b)中间体48的制法
取含中间体47(0.0008mol)与氢氧化钠(0.0019mol)的EtOH(10ml)混合物搅拌及回流24小时，然后冷却至室温，倒至冰水中，以HCl 3N酸化，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂，产生0.25g(67％)中间体48。此产物直接用于下一反应。
c)中间体49的制法
于室温下添加1-羟基苯并三唑(0.0007mol)与EDC(0.0007mol)至含中间体48(0.0005mol)与TEA(0.0007mol)的THF/DCM(6ml)溶液中。混合物搅拌30分钟。添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0007mol)。混合物于室温下搅拌24小时，倒至冰水中。混合物经EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.48g)经矽胶管柱层析法纯化(10μm)(洗脱剂DCM/MeOH 98/2)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.127g)自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.12g(40％)中间体49，熔点118℃。
实例A17 a)中间体50的制法
于室温下添加氢化钠(0.0181mol)至N2气流下含1-(2-萘磺酰基)-哌嗪(0.009mol)的THF(15ml)溶液中，混合物搅拌1小时，然后冷却至0℃。添加含5-氯-吡嗪羧酸甲酯(0.0136mol)的THF(5ml)溶液。混合物于90℃下搅拌过夜，然后冷却，倒至冰水中。滤出沉淀，以水洗涤，然后以乙醚洗涤，干燥，产生3.3g(89％)中间体50，熔点216℃。
b)中间体51的制法
取含中间体50(0.0079mol)与氢氧化钾(0.039mmol)的MeOH(50ml)混合物搅拌及回流过夜，然后冷却。倒至冰水中，以HCl 3N酸化。滤出沉淀，以水洗涤，干燥，产生2.88g(92％)中间体51，熔点273℃。
c)中间体52的制法
于室温下添加EDC(0.0092mol)与1-羟基苯并三唑(0.0092mol)至N2气流下含中间体51(0.007mol)与TEA(0.0092mol)的THF/DCM(96ml)溶液中。混合物搅拌1小时。添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0092mol)。混合物于室温下搅拌2天，倒至冰水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(4.2g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0.1)。收集两种级分，蒸发溶剂。产生2g F1与1.2g F2。F1自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生1.84g中间体52，熔点210℃。F2自乙醚/DCM/MeOH中结晶。滤出沉淀及干燥，产生1.2g(24％)中间体52。共产生2.576g(77％)中间体52。
实例A18 a)中间体53的制法
于室温下添加氢化钠60％(0.0052mol)至N2气流下含1-(2-萘磺酰基)-哌嗪(0.0026mol)的THF(10ml)溶液中。混合物于室温下搅拌1小时，然后冷却至0℃。快速添加含4-氯-2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.0008mol)的THF(5ml)溶液。混合物于0℃下搅拌3小时，倒至冰水中。以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.86g)经矽胶管柱层析法纯化(10μm)(洗脱剂环己烷/EtOAC 80/20)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.29g)溶于乙醚中。滤出沉淀，及干燥，产生0.264g(43％)中间体53，熔点124℃。
b)中间体54的制法
取含中间体53(0.0003mol)与氢氧化钾(0.0012mol)的EtOH(8ml)混合物搅拌及回流24小时，然后冷却。蒸发溶剂。残余物溶于冰水中，以HCl 3N酸化，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂，产生(0.14g)中间体54。该级分直接进行下一反应。
c)中间体55的制法
于室温下添加1-羟基苯并三唑(0.0002mol)与EDC(0.0002mol)至N2气流下含中间体54(0.0002mol)和TEA(0.0002mol)的THF/DCM(6ml)溶液中。混合物于室温下搅拌1小时。添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0002mol)。混合物于室温下搅拌过夜，倒至冰水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.16g)经矽胶管柱层析法纯化(10μm)(洗脱剂DCM 100然后DCM/MeOH 99/1)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生0.023g中间体55。
实例A19 a)中间体56的制法
中间体56 于0℃下滴加含2-萘磺酰氯(0.0022mol)的DCM(5ml)溶液至含3-(氨基羰基)-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙酯(0.0022mol)与TEA(0.0044mol)的DCM(5ml)混合物中。混合物室温下搅拌20小时，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物(0.9g)自DCM/甲醇/乙醚中结晶。滤出沉淀，及干燥，产生0.7g(76％)中间体56，熔点200℃。
b)中间体57之制法
中间体57 添加三氟乙酸(2ml)至含中间体56(0.0015mol)的DCM(20ml)溶液中，于室温下搅拌7小时。混合物倒至冰水中，以NH4OH碱化，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂，产生0.44g(90％)中间体57，熔点148℃。
c)中间体58的制法
于10℃下添加2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.0164mol)的乙腈(30ml)溶液至含中间体57(0.0164mol)与碳酸钾(0.019mol)的乙腈(30ml)溶液中。混合物于室温下搅拌4小时，倒至冰水中，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(8.4g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.1)。收集两种级分，蒸发溶剂。产生1.49g F1与2.41g F2。F1自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生1.42g(19％)中间体58。熔点171℃。F2自乙醚/MeOH中结晶。滤出沉淀及干燥，产生1.405g(18％)中间体58。共产生2.8g(37％)中间体58。
d)中间体59的制法
取含中间体58(0.0059mol)与氢氧化锂单水合物(0.0095mol)的THF(50ml)与水(50ml)混合物于室温下搅拌5小时，倒至冰水中，以HCl3N酸化。滤出沉淀，过滤，以水洗涤，于真空下使用乙醚干燥，产生1.96g(76％)中间体59，熔点277℃。该级分直接用于下一反应。
e)中间体60的制法
于10℃下添加EDC(0.0058mol)与1-羟基苯并三唑(0.0058mol)至N2气流下含中间体59(0.0044mol)与TEA(0.0058mol)的THF/DCM(40ml)溶液中。混合物搅拌1小时。添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0058mol)。混合物由10℃搅拌至室温过夜，倒至冰水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(2.95g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/Me4OH 97/3/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(1.6g)自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生1.355g(57％)中间体60，熔点160℃。
实例A20 a)中间体61之制法
取含中间体26(0.0043mol)与氢氧化锂单水合物(0.013mol)的THF(60ml)与水(60ml)混合物于室温下搅拌24小时，倒至冰水中，以HCl 3N酸化，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(2.37g)自乙醚中结晶。滤出沉淀干燥，产生1.76g(94％)中间体61。
b)中间体62的制法
于室温下添加EDC(0.0007mol)与1-羟基苯并三唑(0.0007mol)至含中间体61(0.0005mol)与TEA(0.0007mol)的THF/DCM(6ml)溶液中。混合物搅拌30分钟，添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0007mol)。混合物于室温下搅拌24小时，再添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0007mol)。混合物搅拌过夜，倒至冰水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.47g)经矽胶管柱层析法纯化(10μm)(洗脱剂DCM100然后DCM/MeOH 99/1)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.25g82％)自乙醚中结晶。滤出沉淀，及干燥，产生0.215g(70％)中间体62，熔点122℃。
实例A21 a)中间体63的制法
取含中间体41(0.0013mol)、Pd(OAC)2(0.0006mol)、1，3-丙烷二基双[二苯基]膦(0.0006mol)与乙酸钾盐(0.0026mol)的MeOH(35ml)混合物于5巴CO压力及100℃下搅拌5小时，倒至冰水中。添加DCM。混合物经寅式盐过滤。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(2.06g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂，产生0.40g(74％)中间体63。
b)中间体64的制法
取含中间体63(0.0014mol)与氢氧化钾(0.0059mol)的MeOH(15ml)混合物于60℃下搅拌5小时，然后冷却至室温，倒至冰水中，以HCl 3N酸化。滤出沉淀以水/乙醚洗涤，干燥，产生0.47g(80％)中间体64。熔点238℃。该产物直接用于下一反应。
c)中间体65的制法
于室温下添加含EDC(0.0015mol)与1-羟基苯并三唑(0.0015mol)的溶液至N2气流下含中间体64(0.0012mol)与TEA(0.0015mol)的THF/DCM(50/50)(16ml)中。混合物搅拌30分钟，添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0015mol)。混合物于室温下搅拌24小时，倒至冰水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(1g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/Me4OH98/2/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.36g)自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.275g(46％)中间体65，熔点211℃。
实例A22 a)中间体66的制法
于0℃下，滴加含2-萘磺酰氯(0.028mol)的DCM(40ml)溶液至N2气流下含4-(三苯基甲基)-2-哌嗪羧酸乙酯(0.025mol)与TEA(0.038mol)的DCM(70ml)混合物中。混合物室温下搅拌12小时，倒至冰水中，以DCM萃取。有机层以水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(15g)自乙腈中结晶。滤出沉淀，及干燥，产生6g中间体66，熔点145℃。母液层蒸发，自CH3CN/乙醚中结晶。滤出沉淀，及干燥，产生2.2g中间体66。母液层蒸发，产生4.5g中间体66。
b)中间体67的制法
于0℃下，分批添加中间体66(0.0102mol)至N2气流下含LiAlH4(0.0203mol)的THF(60ml)悬浮液中，然后添加THF(200ml)。混合物从0℃搅拌至室温2小时。依序添加EtOAC与水。混合物经Celite过滤。以MeOH洗涤Celite。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂，产生5.3g(95％)中间体67。取部分的该级分(0.15g)自乙醚/DIPE中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.049g中间体67，熔点277℃。
c)中间体68的制法
中间体68 取含中间体67(0.0091mol)的HCl 3N(3ml)与2丙酮(100ml)混合物于室温下搅拌3小时，蒸发溶剂。加水。混合物经乙醚萃取2次。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。产生1.4g(50％)中间体68。取部分的该级分(0.2g)自DIPE中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.08g中间体68，熔点130℃。
d)中间体69的制法
取含中间体68(0.0036mol)、2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.0047mol)与碳酸钾(0.0072mol)的乙腈(80ml)混合物于室温下搅拌过夜，倒至水中，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残留(1.5g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.1)。收集级分，蒸发溶剂。产生0.91g中间体69。取部分的该级分(0.59g)自CH3CN/DIPE中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.3g中间体69。熔点151℃ e)中间体70钠盐的制法
取含中间体69(0.0011mol)与氢氧化钠(0.0022mol)的EtOH(30ml)混合物于80℃下搅拌12小时，然后冷却至室温。滤出沉淀，以EtOH洗涤，然后以乙醚洗涤，干燥，产生0.36g(72％)中间体70.Na盐，熔点>260℃。
f)中间体71的制法
于室温下依序添加1-羟基苯并三唑(0.001mol)与EDC(0.001mol)至含中间体70(0.0007mol)与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.001mol)的DCM(20ml)与THF(20ml)混合物中，混合物于室温下搅拌12小时，倒至水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.4g)自CH3CN/乙醚中结晶。滤出沉淀并干燥，产生0.17g(41％)中间体71，熔点194℃。
实例A23 a)中间体72的制法
中间体72 取含2-哌嗪羧酸乙酯(0.0108mol)、2-(甲磺酰基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.012mol)与碳酸钾(0.0215mol)的乙腈(20ml)混合物于80℃下搅拌24小时，然后冷却至室温，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂，产生2.56g中间体72。该产物直接用于下一反应。
b)中间体73的制法
于10℃下，添加含2-萘磺酰氯(0.0095mol)的DCM(30ml)溶液至含中间体72(0.0086mol)与TEA(0.0172mol)的DCM(30ml)溶液中。混合物于室温下搅拌6小时，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(6.04g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂环己烷/EtOAC80/20；15-40μm)，收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.69g，16％)自乙醚/DM中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.45g(10％)中间体73，熔点148℃。
c)中间体74的制法
中间体74 取含是间物73(0.0011mol)与氢氧化锂单水合物(0.0044mol)的THF与水(5ml)混合物于室温下搅拌27小时，倒至冰水中，以HCl 3N酸化，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.62g)自乙醚中结晶。滤出沉淀，干燥，产生0.26g(54％)中间体74，熔点247℃。
d)中间体74的制法
于室温下依序添加EDC(0.0027mmol)与1-羟基苯并三唑(0.0027mol)至N2气流下含中间体74(0.001mol)的TEA(0.0027mol)与THF/DCM(16ml)溶液中。混合物于室温下搅拌48小时，倒至冰水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(2.22g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH97/3/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生0.242g中间体75。
实例A24 a)中间体76的制法
于10℃下，添加含2-(甲磺醯基)-5-嘧啶羧酸乙酯(0.0048mol)的乙腈(20ml)溶液至N2气流下含N，N-二甲基-2-哌嗪甲胺(0.01mol)与碳酸钾(0.02mol)的乙腈(20ml)溶液中。混合物于室温下搅拌4小时，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(2.25g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 96/4/0.5)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生1.34g(91％)中间体76。
b)中间体77的制法
于10℃下滴加含2-萘磺酰氯(0.0027mol)的DCM(5ml)溶液至N2气流下含中间体76(0.0018mol)与TEA(0.0037mol)的DCM(10ml)溶液中。混合物于室温下搅拌5小时，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(1.22g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(1.1g)自乙醚中结晶。滤出沉淀及干燥，产生0.74g(84％)中间体77，熔点138℃。
c)中间体78的钠盐的制法
取含中间体77(0.0014mol)与氢氧化钠(0.0057mol)的EtOH(20ml)混合物搅拌及回流6小时，然后冷却至室温。滤出沉淀，以乙醚洗涤，并干燥，产生0.56g(84％)中间体78.Na盐。该产物直接用于下一反应 d)中间体79的制法
于室温下添加EDC(0.0015mol)与1-羟基苯并三唑(0.0015mol)至N2气流下含中间体78(0.0012mol)的THF(5ml)与DCM(5ml)溶液中。混合物搅拌45分钟。添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0015mol)。混合物于室温下搅拌过夜，倒至冰水中。以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.62g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH94/6/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生0.55g(77％)中间体79，熔点100℃。
实例A25 a)中间体80的制法
取含中间体30(0.066mol)的TEA(0.1mol)与DCM(500ml)的混合物于室温下搅拌，然后于室温下滴加含4-碘-苯磺酰氯(0.079mol)的DCM(50ml)溶液，反应混合物于室温下搅拌2小时。混合物经水洗涤，干燥(MgSO4)及蒸发溶剂。残余物悬浮于CH3CN中，滤出所得沉淀，然后以CH3CN洗涤，干燥，产生27g(81.4％)中间体80，熔点257℃。
b)中间体81的制法
取含中间体80(0.0995mol)悬浮于DMF(250mol)中，混合物于N2气氛下搅拌5分钟。依序添加碳酸铯(0.0184mol)及(2-甲酰基-3-噻吩基)-二羟硼酸(0.0149mol)，反应混合物于N2气氛下搅拌5分钟。最后，添加二氯双-(三苯基膦)-钯(0.00199mol)反应混合物于N2气氛与80-100℃下搅拌及回流3.5小时。使混合物回升室温，蒸发溶剂(真空)。残余物悬浮于乙腈中，滤出所得沉淀，然后经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH由100/0至98/2)。收集产物级分，蒸发溶剂，过滤残余物后，干燥(真空)，产生4.250g(87.8％)中间体81。
c)中间体82的制法
取含N-甲基-甲胺(0.011mol)与中间体81(0.0021mol)的EtOH(100ml)混合物于50℃下使用Pd/C 10％(1g)为催化剂，于噻吩溶液(1ml)的存在下氢化过夜。在吸收H2(1当量)后，反应混合物经矽藻土过滤，蒸发溶剂。残余物经矽胶管柱层析法纯化(梯度洗脱剂DCM/MeOH由100/0至97/3)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生0.54g(51％)中间体82。
d)中间体83的制法
取含中间体82(0.001mol)与氢氧化钠(0.010mol)的THF(10ml)混合物于室温下搅拌4天，然后添加HCl 1N(10ml)，反应混合物搅拌10分钟。滤出所得沉淀，于50℃下真空干燥5小时，产生0.47g(92％)中间体83。
e)中间体84的制法
中间体84 取中间体83(0.0009639mol)与DCM(20ml)与THF(20ml)中搅拌，然后依序添加N′-(乙基碳化亚胺酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐(0.001253mol)、1-羟基-1H-苯并三唑(0.001253mol)与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.001253mol)。反应混合物于室温下搅拌2天，加水，分离有机层，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂。残余物经矽胶管柱层析法纯化(梯度洗脱剂DCM/MeOH由100/0至97/3)。收集产物级分，蒸发溶剂。产生0.5g(8841％)中间体84。
实例A26 a)中间体85的制法
中间体85 取含中间体80(0.015mol)的DMF(700ml)混合物于N2气氛下搅拌15分钟。然后添加碳酸铯(0.023mol)，混合物于N2气氛下搅拌5分钟。依序添加2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)-苯酚(0.023mol)与二氯双(三苯基膦)-钯(0.00030mol)，反应混合物于80℃与N2气氛下搅拌4小时。混合物经矽藻土过滤，该矽藻土经DCM与DMF洗涤。分离有机层，浓缩。添加DCM，混合物经10％碳酸钠溶液洗涤，然后分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeO97/3)。收集产物级分，蒸发溶剂。产生5.6g(79％)中间体85。
b)中间体86的制法
此制备过程的第一部分进行10次取含1-(2-氯乙基)吡咯啶盐酸盐(0.0006mol)与中间体85(0.0002mol)的THF(4ml)混合物于氢氧化纳(2ml)于150℃下在微波中反应2小时。然后合并10次反应混合物，加水稀释，以HCl(1N)酸化至pH4.5-5.5。滤出所得沉淀，并干燥(真空)，产生2g中间体86。
c)中间体87的制法
中间体87 取中间体86(0.00372mol)与DCM(50ml)与THF(50ml)中搅拌，依序添加TEA(0.03594mol)、N′-(乙基碳亚氨酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐(0.00372mol)、1-羟基-1H-苯并三唑(0.004836mol)及最后添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.004836mol)。反应混合物于室温下搅拌1天，然后使混合物溶于DCM中，以水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物经矽胶管柱层析法纯化(Biotage，40M，梯度洗脱剂DCM/(MeOH/NH3)由100/0至93/7)。合并产物级分，蒸发溶剂。产生0.770g中间体87。
实例A27 a)中间体88的制法
中间体88 取中间体80(0.020mol)于EtOH(500ml)中搅拌，然后于N2气氛及室温下搅拌20分钟。依序添加(2-甲酰基苯基)-二羟硼酸(0.030mol)、碳酸铯(0.030mol)及最后添加二氯双-(三苯基膦)-钯(0.00040mol)。反应混合物于N2气氛下搅拌及回流6小时。然后蒸发溶剂。残余物溶于DCM中，以水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂，残余物经矽胶管柱层析法纯化(梯度洗脱剂DCM/MeOH由100/0至98/2)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生5.1g(53％)中间体88。
b)中间体89的制法
中间体89 取含中间体88(0.00208mol)与N-甲基-甲胺(0.0222mol)的MeOH(100ml)混合物于室温下，使用Pd/C10％(0.5g)为催化剂，于噻吩溶液(1ml)的存在下氢化1天。在吸收H2(1当量)后，反应混合物经矽藻土过滤，滤液蒸发。残余物经矽胶管柱层析法纯化(梯度洗脱剂DCM/MeOH由100/0至90/10)。收集产物级分，蒸发溶剂。残余物自乙腈中结晶，滤出所得沉淀，经洗涤及干燥(真空)，产生0.710g(66.9％)中间体89。
c)中间体90的制法
中间体90 取含中间体89(0.00139mol)与氢氧化钠1N(0.010mol)的THF(10ml)与MeOH(2ml)混合物与室温下搅拌过夜，然后添加HCl 1N(10ml)，反应混合物与室温下搅拌15分钟。滤出所得沉淀，并干燥(真空，60℃)，产生0.610g(90.9％)中间体90。
d)中间体91的制法
中间体91 取中间体90(0.001267mol)于DCM(50ml)与THF(50ml)中搅拌，依序添加TEA(0.007189mol)、N′-(乙基碳亚氨酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐(0.001647mol)、1-羟基-1H-苯并三唑(0.001647mol)及最后添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.001647mol)。反应混合物于室温下搅拌1天，然后使混合物溶于DCM中，以水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂。残余物自乙腈中结晶，滤出所得沉淀，并干燥(真空，50℃)，产生0.560g(76.13％)中间体91。
实例A28 a)中间体92的制法
中间体92 于-70℃下，滴加nBnLi 1.6M的己烷溶液(0.0069mol)至N2气流下含[2-(3-溴苯基)乙氧基](1，1-二甲基乙基)二甲基-矽烷(0.0063mol)的THF(20ml)溶液中，混合物搅拌1小时，滴加三-异丙氧硼烷(0.0069mol)。混合物于-70℃下搅拌30分钟，然后回升至-20℃。加水，混合物经DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂至干，产生1.8g(100％)中间体92。
b)中间体93的制法
添加含中间体92(0.0063mol)的DMF(60ml)溶液至含中间体80(0.0045mol)与碳酸铯(0.0063mol)的DMF(20ml)混合物中。混合物搅拌15分钟。添加四-(三苯基膦)-钯(0.0004mol)。混合物于80℃下搅拌18小时，然后冷却至室温。添加HCl 3N。混合物于室温下搅拌3小时，然后经Celite过滤。以水洗涤Celite数次。滤液溶于DCM中数次。有机层经水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂至干，残余物(2.4g)经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH 99/1)。收集纯级分，蒸发溶剂，产生1.76g(78％)中间体93。
c)中间体94的制法
于5℃下滴加甲磺酰氯(0.0133mol)至N2气流下含中间体93(0.0044mol)与TEA(0.0177mol)的DCM(30ml)混合物中。混合物搅拌1小时，然后回升室温。加冰水。混合物经DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂至干。产生3.43g(>100％)中间体94，该产物未再纯化即使用。
d)中间体95的制法
取含中间体94(0.0014mol)、吡咯烷酮(0.0147mol)与碳酸钾(0.0222mol)的乙腈(20ml)混合物搅拌及回流18小时。加水。混合物经DCM/MeOH萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂至干。残余物(1g)经矽胶管柱层析法纯化(70-200μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 95/5/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂。产生0.4g(49％)中间体95，熔点190℃。
e)中间体96的钠盐的制法
中间体96的钠盐 取含中间体95(0.0007mol)与氢氧化钠(0.0014mol)的EtOH(10ml)混合物搅拌及回流3小时，然后冷却至室温。滤出沉淀，以EtOH洗涤，然后以乙醚洗涤，于50℃下真空干燥，产生0.35g(88％)中间体96.Na盐。
f)中间体97的制法
中间体97 添加EDC(0.0008mol)至N2气流下含中间体96(0.0006mol)、O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0008mol)。与1-羟基苯并三唑(0.0008mol)的DCM/THF(10ml)混合物中。混合物于室温下搅拌18小时。加水。混合物以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂至干，残余物(0.7g)经矽胶管柱层析法纯化(5μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH92/8/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂，产生0.31g(77％)中间体97。
实例A29 a)中间体98的制法
取含中间体30(0.00021mol)、[1，1-联苯]-4-磺酰氯(±0.00032mol，1.5当量)与吗啉基甲基-PS-清除剂(供应商NovabioChem目录No01-64-0171)(0.150g)的DCM(5ml)混合物于室温下搅拌20小时，然后添加三-(2-氨基乙基)胺-PS清除剂(供应商NovabioChem目录No01-64-0170)(0.150g)，混合物再搅拌4小时，产生中间体98。
b)中间体99的制法
取含中间体98(0.00021mol)的氢氧化钠1N(1.5ml)、MeOH(1ml)与THF(4ml)混合物于60℃下搅拌2小时，然后于室温下搅拌20小时。反应混合物经1.5ml HCl 1N中和。收集所需产物，干燥，产生中间体99。
c)中间体100的制法
取含中间体99(0.00021mol)、1-羟基-1H-苯并三唑(0.00014mol)、N′-(乙基碳亚氨酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐(0.00015mol)与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.00015mol)的TEA(0.025ml)与DCM/THF(10ml)混合物于室温下搅拌过夜，然后加水(2ml)，反应混合物经ExtrelutTMNT(供应商MERCK药厂)过滤。添加异氰酸酯-PS-树脂(供应商Argonaut目录No 800260)(0.100g)，混合物于室温下搅拌4小时，然后滤出树脂，滤液蒸发。残余物经FlashtubeTM2008(供应商Trikonex)管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/EtOAC 1/1)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生中间体100。
实例A30 a)中间体101的纳盐制法
中间体101的钠盐 取含中间体93(0.001mol)与氢氧化钠(0.004mol)的EtOH(20ml)混合物搅拌及回流4小时，然后冷却至室温。添加乙醚。滤出沉淀，并干燥，产生0.476(97％)中间体101.Na盐。
b)中间体102之制法
于室温下添加EDC(0.0014mol)与1-羟基苯并三唑(0.0014mol)至含中间体101(0.0009mol)之THF(5ml)与DCM(5ml)溶液中。混合物于室温下搅拌30分钟，添加O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟基胺(0.0014mol)。混合物于室温下搅拌2天，倒至冰水中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂，残余物(0.62g)经矽胶管柱层析法纯化(5μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.3)。收集纯级分，蒸发溶剂，残余物(0.38g，69％)自乙醚中结晶，滤出沉淀并干燥，产生0.3g(54％)中间体102，熔点214℃。
B.最终化合物的制法 实例B1 N-Fmoc-羟基胺2-氯三苯甲基树脂(Novabiochem，01-64-0165)经50％哌啶的DMF溶液处理而去保护(室温，24小时)1。树脂经DCM与DMF洗涤2，于DMF中膨胀。一次性添加2当量酸3，PyBrOP4及4当量DIEA。混合物振荡24小时，沥干液体，树脂经DCM与DMF洗涤数次。树脂于含2当量胺的DMF中膨胀。于室温下振荡24小时。沥干液体，树脂经DCM与DMF洗涤。一次性添加芳基磺酰氯(2当量)至己于含4当量TEA的DMF中膨胀的树脂中。反应搅拌过夜，沥干，树脂经DCM与DMF洗涤。以含5％TFA的DCM溶液裂解终产物，以HPLC及MS分析，于已预先称重的试管中蒸发。
1其中一项实例使用化合物16甘氨醇2-氯三苯甲基-树脂(Novabiochem，01-64-0087)。另两项实例使用2-氯三苯甲基氯-树脂(Novabiochem，01-64-0114)与1，2-苯二胺化合物17或乙二胺化合物18。另一项实例使用化合物19羧基甲硫醇4-甲氧基三苯甲基树脂(Novabiochem，01-64-0238)。
2有些例子亦以MeOH用于化合物16、17、18与19的不同洗涤过程中。
3以树脂的承载量为基准计。
4有些例子用PyBOP(化合物16、17、18与19)替代PyBrOP。
为了说明本发明，本文中包括下列方案
实例B2 化合物1的制法
化合物1 取含中间体3(0.0027mol)的DMF(100ml)混合物于室温下使用Pd/C 10％(0.5g)为催化剂氢化48小时。在吸收H2(1当量)后，滤出催化剂，滤液蒸发。残余物与DCM研磨，过滤，然后自HOAc中再结晶，过滤，以HOAc与乙醇洗涤，然后干燥，产生0.75g(65％)化合物1。
实例B3 化合物2的制法
化合物2 取含中间体6(0.0022mol)的THF(100ml)使用Pd/C10％(1g)为催化剂氢化5小时。在吸收H2(1当量)后，经矽藻土过滤催化剂，蒸发溶剂。残余物悬浮于DCM中。滤出沉淀，以少量DCM洗涤，干燥(真空)，产生0.9g(100％)化合物2。
实例B4 化合物3的制法
化合物3 于N2气流下，依序添加TEA(0.0008mol)与乙酰氯(0.0008mol)至含中间体7(0.0008mol)的DCM(5ml)混合物中。混合物保持在室温下30分钟，倒至10％K2CO3/H2O中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂至干。残余物(0.41g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH 98/2；10μm)。收集纯级分，蒸发溶剂，残余物(0.22g，66％)自DCM/CH3CN中结晶。滤出沉淀，以乙醚洗涤，干燥，产生0.18g(54％)化合物3，熔点200℃。
实例B5 化合物4的制法
化合物4 于室温下添加1，1-羰基二咪唑(0.0003mol)至N2气流下含中间体7(0.0002mol)的DCM(1ml)混合物中。混合物保持室温下1小时。添加羟基胺(0.0003mol)。混合物搅拌过夜。添加10％ K2CO3。混合物经DCM萃取。滤出沉淀，以乙醚洗涤及干燥，产生0.034g(29％)化合物4，熔点210℃ 实例B6。
化合物5的制法
化合物5 取含中间体7(0.0013mol)、1-甲基-1H-咪唑-4-羧酸(0.002mol)、EDC(0.002mol)与1-羟基苯并三唑(0.002mol)的DCM/THF(10ml)混合物于室温下搅拌18小时，倒至10％ K2CO3中，以DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂至干。残余物(1.3g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH 98/2；15-40μm)。收集纯级分，蒸发溶剂，残余物(0.25g，39％)溶于CH3CN中。滤出沉淀，并干燥，产生0.15g(23％)化合物5，熔点252℃。
实例B7 化合物6的制法
于0℃下添加TFA(4ml)至含中间体10(0.0005mol)的MeOH(20ml)溶液中。混合物于室温下搅拌48小时。蒸发溶剂至干。残余物溶于乙醚中。滤出沉淀，并干燥，产生0.195g(83％)化合物6，熔点265℃。
另一种制备化合物6的方法 添加CF3COOH(25ml)至含中间体33(0.012mol)的DCM p.a.(250mol)与MeOH p.a.(250mol)混合物中。反应混合物于室温下搅拌24小时。滤出沉淀，悬浮于热CH3CN中，然后搅拌冷却至室温，然后过滤，以CH3CN洗涤，干燥(真空，50℃)，产生3.43g化合物6。取相应的滤液浓缩。固体残余物悬浮于热CH3CN中，搅拌，使之冷却至室温，过滤并干燥(真空，50℃)，产生1.22g化合物6。共产生4.65g(94％)化合物6。
实例B8 化合物7的制法
化合物7 取含中间体13(0.000049mol)的5％CF3COOH/MeOH(5ml)混合物于室温下振荡40小时。于室温及N2气流下蒸发溶剂。添加DCM，然后再蒸发溶剂。添加二噁烷，然后再于室温及N2气流下蒸发溶剂。添加DCM，于30℃及N2气流下蒸发溶剂。残余物于40℃下真空干燥度过周末，产生0.024g化合物7。
实例B9 化合物8的制法
取含中间体17(0.00018mol)的5％CF3COOH/MeOH(6ml)混合物于室温下搅拌度过周末。混合物于室温和之氮气流下风干。残余物悬浮于EtOAC中，然后过滤并真空干燥，产生0.0222g化合物8。
实例B10 化合物9的制法
于室温下添加甲磺酸(1.5ml)至含中间体20(0.0018mol)的MeOH(15ml)混合物中。混合物保持18小时。加冰。混合物经10％K2CO3碱化，以DCM萃取。有机层经水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂至干。残余物(1.1g)自DCM/MeOH中结晶。滤出沉淀，干燥，产生0.68g(76％)化合物9，(E构型)，熔点226℃。
实例B11 化合物10的制法
于0℃下添加乙硫代酸(0.0023mol)至含中间体22(0.0021mol)与TEA(0.0032mol)的2-丙酮(10ml)混合物中。使混合物回升至室温，然后搅拌2小时。加水。混合物经DCM萃取。有机层经水洗涤2次，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂。残余物(0.85g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂环己烷/EtOAC 70/30；10μm)。收集级分，蒸发溶剂。残余物自乙醚中结晶。滤出沉淀，并干燥，产生0.088g(10％)化合物10，熔点179℃。
实例B12 化合物11的制法
化合物11 添加CF3COOH(0.7ml)至含中间体25(0.0007mol)的MeOH(7ml)与DCM(7ml)溶液中。混合物于室温下搅拌过夜。滤出沉淀，以乙醚洗涤及干燥。残余物(0.23g，68％)再干燥一次，产生0.194g(57％)化合物11，熔点196℃。
实例B13 化合物12的制法
化合物12 添加CF3COOH(2.6ml)至含中间体28(0.0005mol)的MeOH(12ml)与DCM(10ml)溶液中。混合物于24℃下搅拌过夜。蒸发溶剂至干。残余物自DCM/乙醚中结晶。滤出沉淀并干燥，产生0.124g(49％)化合物12，熔点197℃。
实例B14 化合物13的制法
于室温下添加EDC(0.0026mol)与1-羟基苯并三唑水合物(0.0023mol)至含中间体32(0.0017mol)与TEA(0.0021mol)的DMF(14ml)溶液中。混合物搅拌1小时。添加1，2-苯二胺(0.0021mol)。混合物于室温下搅拌过夜，然后于60℃下搅拌3小时，倒至冰水中，以EtOAC萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发溶剂，残余物(0.9g)经矽胶管柱层析法纯化(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.1；15-40μm)。收集纯级分，蒸发溶剂。残余物(0.45g)自乙醚中结晶。滤出沉淀，干燥，产生0.414g(48％)化合物13，熔点238℃。
实例B15 化合物14的制法
于0℃下，添加CF3COOH(0.2ml)至含中间体36(0.0005mol)的MeOH(1ml)与DCM(1ml)混合物中。混合物于室温下搅拌24小时。蒸发溶剂至干，产生0.0174g(89％)化合物14。
实例B16 化合物15的制法
取中间体40(0.0903mmol)溶于DCM(2ml)与MeOH(3ml)中。添加三氟乙酸(250μl)。混合物于室温下搅拌2天。于室温及N2气流下蒸发溶剂。添加两次二噁烷。产物于40℃及N2气流下吹干，产生化合物15。
实例B17 化合物113的制法
添加Pd(PPh3)4(0.0002mol)与碳酸钾(0.0056mol)至含中间体41(0.0028mol)的EtOH(22ml)与DMF(22ml)混合物中。混合物于80℃与5巴CO压力下搅拌48小时，然后溶于EtOAc/H2O中，经Celite过滤。有机层以水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤及蒸发溶剂，残余物经矽胶管柱层析法纯化(15-40μm)(洗脱剂DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0.1)。收集纯级分，蒸发溶剂，产生0.27g(23％)化合物113，熔点200℃。
实例B18 化合物114的制法
化合物114 于0℃下添加TFA(0.5ml)至含中间体46(S，S)(0.0006mol)的MeOH(10mol)混合物中。使混合物回升至室温，然后搅拌12小时。再添加TFA。混合物于室温下搅拌72小时。滤出沉淀，以MeOH洗涤，然后以乙醚洗涤，并干燥。残余物(0.276g)于60℃下干燥4小时，产生0.258g，然后于75℃下干燥8小时，然后溶于DCM中，于室温下搅拌。滤出沉淀，以乙醚洗涤，干燥，产生0.158g(56％)化合物114(S，S)。
实例B19 化合物115的制法
化合物115 取含中间体49(0.0001mol)的TFM(2ml)、MeOH(4ml)与DCM(3ml)的混合物于室温下搅拌19天。蒸发溶剂。残余物自乙醚中结晶。滤出沉淀，产生0.0852g(85％)化合物115，熔点135℃。
实例B20 化合物116的制法
于0℃下添加TFA(10ml)至含中间体52(0.0051mol)的MeOH(50mol)与DCM(50ml)溶液中。混合物于室温下搅拌48小时。滤出沉淀，以乙醚洗涤及干燥，产生2.07g(97％)化合物116，熔点249℃。
实例B21 化合物117的制法
取含中间体55(0.00003mol)的TFA(0.5ml)、MeOH(3ml)与DCM(2ml)的混合物于室温下搅拌5天。蒸发溶剂至干，产生0.017g(62％)化合物117.2C2HF3O2，熔点80℃。
实例B22 化合物118的制法
取含中间体60(0.0022mol)的TFA(3ml)、MeOH(10ml)与DCM(10ml)混合物于室温下搅拌24小时。添加乙醚。滤出沉淀并干燥，产生1g(97％)化合物118，熔点210℃。
实例B23 化合物119的制法
取含中间体62(0.0024mol)的TFA(5ml)、MeOH(22ml)与DCM(10ml)的混合物于室温下搅拌8天。然后过滤。沉淀弃置不要，滤液蒸发。残余物(1.4g)自DCM/MeOH/CH3CN/乙醚中结晶。滤出沉淀并干燥，产生0.388g(36％)化合物119，熔点225℃(纯度90％)。
实例B24 化合物120的制法
取含中间体65(0.0004mol)的TFA(2ml)、MeOH(20ml)与DCM(10ml)的混合物于室温下搅拌72小时。蒸发溶剂。添加乙醚，滤出沉淀并干燥，产生0.19g(94％)化合物120，熔点>260℃。
实例B25 化合物121的制法
取含中间体71(0.0003mol)的TFA(1ml)、MeOH(10ml)混合物于室温下搅拌4天。滤出沉淀，以MeOH洗涤，然后以乙醚洗涤并干燥，产生0.096g(72％)化合物121，熔点220℃。
实例B26 化合物122的制法
取含中间体75(0.0003mol)的TFA(2ml)与MeOH(5ml)混合物于室温下搅拌72小时。滤出沉淀，以乙醚洗涤并干燥，产生0.112g(63％)化合物122，熔点166℃。
实例B27 化合物123的制法
取含中间体79(0.0009mol)的TFA(0.5ml)与MeOH(5ml)混合物于室温下搅拌48小时。然后蒸发溶剂至干。残余物溶于MeOH/乙醚中。滤出沉淀并干燥，产生0.42g(82％)化合物123.C2HF3O2，熔点114℃。
实例B28 化合物124的制法
化合物124 取中间体84(0.000852mol)于TFA(5％MeOH/DCM溶液)(40ml)中搅拌3天，然后滤出所得沉淀并干燥(真空，50℃)，产生0.316g(60％)化合物124.C2HF3O2，熔点192℃。
实例B29 化合物125的制法
.0.2 H2O .C2HF3O2 化合物125 于室温下，取中间体87(0.00121mol)于TFA(5％ MeOH溶液)(60ml)中搅拌6天(4天后添加0.25ml TFA)，于室温下蒸发溶剂(真空)。残余物自EtOAC中于回流下结晶，滤出所得沉淀并干燥(真空)，产生0.356g(44.2％)化合物125.0.2 H2O.C2HF3O2，熔点146.9℃。
实例B30 化合物126的制法
.C2HF3O2 化合物126 于室温下，取中间体91(0.00096mol)于TFA(40ml 5％ DCM/MeOH溶液)中搅拌4天，于室温下部分蒸发溶剂(真空)。于浓缩液中产生沉淀，滤出沉淀，然后干燥(真空，50℃)产生0.455g(78％)化合物126.C2HF3O2，熔点190.7℃。
实例B31 化合物127的制法
化合物127 添加TFA(0.5ml)至含中间体97(0.0004mol)的MeOH(10ml)混合物中。混合物于室温下搅拌18小时。滤出沉淀，及干燥，产生0.22g(66％)化合物127.1.16C2HF3O2，熔点243℃。
实例B32 化合物128的制法
取含中间体100(0.00021mol)的TFA(5ml，5％ MeOH溶液)与DCM(1ml)混合物于室温下搅拌48小时。然后蒸发溶剂，产生化合物128。
实例B33 化合物129的制法
取含中间体102(0.0005mol)的TFA(1.2ml)、MeOH(10ml)与DCM(2ml)混合物于室温下搅拌3天。添加乙醚。滤出沉淀及干燥，产生0.232g(94％)化合物129，熔点>260℃。
表F-1列出根据上述实例之一制备化合物。表中采用下列缩写Co.No.代表化合物编号，Ex.[Bn0]指与Bn0实例中所述的相同方法，C2HF3O2代表三氟乙酸盐。有些化合物已说明其熔点(mp)特性，其它化合物以质谱数据[MH+](ms.)说明其特性。
表F-1















C.药理实例 组蛋白去乙酰酶抑制作用的活体外分析法(参见实例C.1)度量式(I)化合物所得的抑制HDAC酶活性。
式(I)化合物的细胞活性在A2780肿瘤细胞上采用测试细胞毒性或存活性的比色测定法测定(Mosmamm Tim，Journal of ImmunologicaMethods 6555-63，1983)(参见实例C.2)。
在水性介质中的动力溶解性度量该化合物于稀释时保持水溶液状态的能力(参见实例C.3)。
DMSO母液使用单一水性缓冲溶剂，于连续3个步骤中稀释。每一次稀释后的浊度均使用浊度计测定。
药物的通透性表现其由一种介质移动至或通过另一种介质的能力。具体地说，其移动通过肠膜进入血流与/或自血流进入目标的能力。通透性(参见实例C.4)的测定法可测定滤器固定化的人工膜磷脂双层形成量。在滤器固定化的人工膜分析法中，由96孔微滴定板与96孔过滤板形成“夹心”，因此每个复合孔被分隔成两个隔间，底层为供体溶液，上层为受体溶液，中间以涂覆2％(重量/体积)二油酰基磷脂酰基-胆碱的十二碳烷溶液的125微米微过滤片(0.45微米孔径)分隔，当该系统接触到水性缓冲液时，渡片通道内会形成多层膜的双层物。测定通过该人工膜的化合物通透性，以厘米/秒表示。其目的为检视药物在两种不同pH4.0与7.4下通过平行人工膜的通透性。采用UV-分光光度计，于250至500nm之间的最适当波长下检测化合物。
药物的代谢作用指该脂溶性异种生物化合物或生物内生化合物经酶转化成极性，水溶性且可排泄的代谢物(群)。药物代谢作用的主要器官为肝脏。代谢产物的活性通常低于母化合物或无活性。然而，有些代谢物可能加强活性或毒性效果。因此，药物代谢作用可包括“去毒化”与“毒化”过程。其中决定生物体是否有能力处理药物与化学物的主要酶系统代表为细胞色素P450单氧化酶，它是一种NADPH依赖性酶。化合物的代谢安全性可于活体外，使用亚细胞人类组织测定(参见实例C.5)。本文中化合物的代谢稳定性由这些化合物与微粒体培养15分钟后的药物代谢％表示。以LC-MS分析法为化合物定量。
肿瘤抑制子p53可因应DNA损伤而转录性活化多种基因，包括WAF1/CIP1基因。WAFI/基因21kDa产物出现在正常细胞中包括环素、依赖环素的激酶(CDKs)及增生细胞核抗原(PCNA)的复合体中，但不出现在转形细胞中，似乎为CDK活性的通用抑制剂。p21WAF1结合并抑制CDKs的一种后果为防止依赖CDK的磷酸化反应及随后为Rb蛋白质的去活化作用，这对细胞循环发展所必要的。因此，使用HDAC抑制剂因与细胞接触而诱发产生的p21WAF1即可成为细胞循环发展过程中，在G1与G2检查点的抑制作用的强加和专一指示剂。
化合物诱发p21WAF1的能力采用p21WAF1酶连结免疫吸附性分析法测定(致癌基因的WAF1ELISA)。p21WAF1分析法为一种同时使用小白鼠单株抗体与兔子多株抗体的“夹心”酶免疫分析法。对人类WAF1蛋白质具专一性的句子多株抗体已固定在试验套组所提供的塑胶孔表面上。样品中所要分析的任何p21WAF均会与捕捉抗体结合。生物素基化检测剂单株抗体亦可辨识人类p21WAF1蛋白质，而且会与捕捉抗体所保留的任何p21WAF1结合。检测剂抗体则再与辣根过氧化酶-共轭的抗生物素结合。辣根过氧化酶催化发色性受质四甲基联苯胺的无色溶液转呈蓝色溶液(或当添加中止剂后，则转呈黄色)，其深度与分析板上p21WAF1蛋白质的结合量成比例。采用分光光度计定量有色反应产物。使用已知浓度的p21WAF1(冷冻乾燥物)所构成的标准曲线进行定量(参见实例C.6)。
专一性HDAC抑制剂不应限制其它例如大量存在的CYP P450蛋白质的酶。CYP P450(大肠杆菌所表现)蛋白质3A4、2D6及269可将其专一性受质转化成萤光分子。CYP 3A4蛋白质可使7-苯甲氧基-三氟甲基香豆素(BFC)转化成7-羟基-三氟甲基香豆素。CYP 2D6蛋白质转化3-[2-(N，N-二乙基-N-甲氨基)乙基]-7-甲氧基-4-甲基香豆素(AMMC)形成3-[2-(N，N-二乙基-氨基)乙基]-7-羟基-4-甲基香豆素盐酸盐，CYP2C9蛋白质转化-7-甲氧基-4-三氟甲基香豆素(MFC)形成7-羟基-4-三氟甲基香豆素。抑制这种酶反应的化合物即会降低萤光讯号(参见实例C.7)。
实例C.1组蛋白去乙酰酶的抑制作用的活体外分析法 取60ug/ml HeLa核萃出物(供应商Biomol)与2 x 10-8M放射性标记的肽受质培养。测定HDAC活性所使用的受质为合成肽，即组蛋白H4的氨基酸14-21。该受质的NH2末端部份经6-氨基己酸间隔基进行生物素基化，其COOH-末端部份则被酰氨基保护，并于赖氨酸16上专一性[3H]乙酰化。添加受质生物素-(6-氨基己酸)Gly-Ala-([H]3-乙酰基-Lys-Arg-His-Ary-Lys-Val-NH2)至含25mM Hepes、IM蔗糖、0.1mg/mlBSA与0.01％ Triton X-100的pH7.4缓冲液中。30分钟后，添加CHl与乙酸中止去乙酰化反应(终浓度分别为0.035mM与3.8mM)，反应停止后，以乙酸乙酯萃取游离的3H-乙酸酯。混合与离心后，于β-计算器上计算上层有机相的放射活性。
每次实验均平行进行对照组(含HeLa核萃物与DMSO，但不含化合物)、空白培养组(含DMSO，但不含HeLa核萃物或化合物)及样品试验组(含溶于DMSO中的化合物与HeLa核萃物)。第一例中，化合物的试验浓度为1015M。当化合物于10-5M下表现活性时，则在10-5M与10-12M之间浓度测试化合物，制成浓度-响应曲线。每次试验的对照组与样品组的数值均扣除空白组数值。对照组样品代表100％受质去乙酰化。各样品的放射活性以相对于对照组平均值的百分比表示。若适当时，采用概率分析法计算已分级的数据，计算IC50值(使代谢物量下降至对照组的50％时所需药物浓度)。此时，以pIC50(IC50)值的负对数值)表示试验化合物的效应。所有实验化合物在10-5M的实验浓度下均表现酶活性，有144种化合物的pIC50≥5(参见表F-2)。
实例C.2于A2780细胞上测定抗增生活性 所有试验化合物均溶于DMSO中，再于培养基中稀释。细胞增生分析法中的最终DMSO浓度不可超0.1％(v/v)。对照组含有A2078细胞及不含化合物DMSO，但不含细胞。取MTT溶于PBS中，5mg/ml。制备甘胺酸缓冲液，其包含0.1M甘胺酸与0.1M NaCl，经1N NaOH缓冲至pH10.5(所有试剂均来自Merck药厂)。
取人类A2780卵巢癌瘤细胞(美国宾州Fox Chase癌症中心T.C.Hamilton博士的热心捐赠)于补充2mM L-麸酰胺、50ug/ml健大霉素与10％胎牛血清的RPMI 1640培养基中培养。细胞照例呈单层培养物保持在37℃的潮湿5％CO2气氛中。每周使用胰蛋白酶/EDTA溶液傅代细胞一次，分割比例为1:40。所有培养基与补充物均得自LifeTechnologies。采用Gen-Probe霉浆菌组织培养套组(供应商BioMerieuX)测得细胞中不含霉浆菌污染物。
将细胞接种在NUNCTM96孔培养板中(供应商LiFe Technologies)，使之附著在塑胶板上过夜。用于涂覆的密度为每孔1500个细胞，总体积为200μl培养基。细胞附著在培养板上后，换下培养基，添加药物与/溶剂至最终体积200μl。培养4天后，以200μl新鲜培养基置换培养基，采用以MTT为主的分析法分析细胞密度与活力。每孔中添加25μl MTT溶液，细胞再于37℃下培养2小时。小心吸出培养基，依序添加25μl甘胺酸缓冲液及100μl DMSO，使蓝色MTT-甲腊产物溶解。微试验板于微试验板振荡器上振荡10分钟，使用Emax96孔分光光度计(供应商Sopachem)测定540nm的吸光度。实验中，各实验条件的结果均为3个重复孔的平均值。初次筛选用的化合物在单一固定浓度10-6M下测试。活性化合物则重复试验，以建立完整的浓度-响应曲线。每次实验的对照组(不含药物)及空白培养组(不含细胞或药物)均平行进行。所有对照组与样品组数值均扣除空白组数值。每个样品的细胞生长平均值(以吸光度为单位)均以相对于对照组细胞生长平均值的百分比表示。若适当时，采用概率分析法计算已分级的数值，计算IC50值(使细胞生长下降至对照组的50％时所需药物浓度)(Finney，D.J.，Probit Analyses，第2版，第10章，Graded Response，Cambridge University Press，Cambridge，1962)。本文中以pIC50(IC50值的负对数值)表示试验化合物的效果。大多数试验化合物在10-6M的试验浓度下具有细胞活性且有129种化合物的pIC50≥5(参见表F-2)。
实例C.3于水性介质中的动态溶解性 在第一个稀释步骤中，取10μl活性化合物的浓缩母液溶于DMSO中(5mM)，加至100μl磷酸盐柠檬酸盐缓冲液pH7.4中，混合。在第二个稀释步骤中，取一部分(20μl)第一个稀释步骤溶液再加至100μl磷酸盐柠檬酸盐缓冲液pH7.4中，混合。最后，在第三个稀释步骤中，取一部份(20μl)第二个稀释步骤溶液再加至100μl磷酸盐柠檬酸盐缓冲液pH7.4中稀释，混合。所有稀释均于96孔板中进行。最后一次稀释后，立即使用浊度计测定连续3个稀释步骤的浊度。每种化合物的稀释液均进行三重复，以排除偶然误差。依据浊度测定值，分成3级。高溶解度的化合物得到3分，这种化合物的第一次稀释呈澄清状。中度溶解度的化合物得到2分。这种化合物的第一次稀释液不澄清，但第二次稀释液即澄清。低溶解度的化合物得到1分。这种化合物的第一次与第二次稀释液均不澄清。测定112种化合物的溶解度。其中有42种化合物得到3分，32种化合物得到2分，及38种化合物得到1分(参见表F-2)。
实例C.4平行人工膜通透性分析 于含2ml水性缓冲液系统pH4或pH7.4(PSR4系统溶液浓缩物(pION))的深孔或预混合板中稀释母液样品(10μl含于100％DMSO中的5mM母液)。在添加样品至参考板中之前，先添加150μl缓冲液至孔中，测定空白UV值。之后，弃置缓冲液，并将该板用作参考板。所有测定法均在耐UV的板子上进行(供应商Coaster或Greiner)。
在测定参考板的空白值后，添加150μl稀释的样品至参考板中，添加200μl稀释样品至供体板1中。使用4μl人工膜形成溶液(1，2-二油酰基-顺式-甘油-3-胆碱磷酸含于含0.1％ 2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚的十二碳烷中)涂覆受体过滤板1(供应商Millipore，MAIP N45型)，置于供体板1上方，形成“夹心”。添加缓冲液(200μl)至上方的受体孔中。此“夹心”加盖，保存在室温与黑暗中18小时。
在添加150μl缓冲液至孔中后，测定UV值，测定受体板2的空白值。在受体板2测定空白值后，弃置缓冲液，自受体过滤液1中取出150μl受体溶液移至受体板2中。然后自夹心中取出受体过滤板1。在测定供体板2的空白值(如上述)后，自供体板1中取出150μl供体溶液移至供体板2中。扫描供体板2、受体板2及参考板的孔中UV光谱(SpectraMAX 190)。所有光谱均经PSR4p精算软体(Command Software)计算通透性。所有化合物均进行三次重复。每次实验均使用酰胺咪嗪(carbamazepine)、灰黄霉素(griseofulvin)、无环鸟苷(acycloguanosine)、氨酰心安(atenolol)、呋喃苯胺酸(furosemide)与氯噻嗪(chlorothiazide)作为标准物。化合物分成三类低通透性(平均值<0.5 x 10-6cm/s；得分1)，中通透性(1 x 10-6cm/s>平均值≥0.5 x 10-6cm/s；得分2)或高速透性(≥0.5 x 10-6cm/s；得分3)。所试验的22种化合物中，有14种化合物在所测试的两种pH值中之一得到至少3分。有3种化合物在其中一种pH测定值下得到至少2分，及有5种化合物在其中一种pH测定值下只得到1分。
实例C.5代谢稳定性 依据Gorrod等人(Xenobiotica 5453-462，1975)制备亚细胞组织制剂，其中使组织经过机械性均质化后离心分离。肝组织于冰冷0.1MTris-HCl(pH7.4)缓冲液中漂洗，以洗除过量血液。随后吸干组织，称重，使用手术用剪刀粗略间断。组织碎片于3倍体积冰冷的0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.4)中，使用装有铁弗龙捣杆的Pottr-S(意大利Braun公司)或Sorvall Omni-Mix均质器均质化7 x 10秒，均质化期间，容器保持在冰中/上。
组织均质液均4℃下，使用Sorvall离心机或Beckmenn超离心机，于9000xg下离心20分钟。所得的上澄清液保存在-80℃下，称为“S9”。
此“S9”部分再使用Beckmann超离心机，于100,000xg下离心60分钟(4℃)。小心吸出所得上澄液，此部分称为“胞液”。离心块再悬浮于0.1M磷酸盐缓冲液中(pH7.4)，每0.5克组织原始重的终体积为1ml，称为“微粒体”。
所有亚细胞组织部分被等分，立即于液氮中冷冻，保存在-80℃下，直到使用为止。
试验样品的培养混合物含有PBS(0.1M)、化合物(5μM)、微粒体(1mg/ml)与NADPH-发生系统(0.8mM葡萄糖-6-磷酸、0.8mM氯化镁及0.8单位葡萄糖-6-磷酸去氢酶)。对照组样品含有相同材料，但微粒体改为经受热去活性(95℃下10分钟)的微粒体。对照组样品中化合物的回收率总是100％。
混合物于37℃下预培养5分钟。添加0.8mM NADPH的零时间点(t＝0)开始反应，样品培养15分钟(t＝15)。添加2倍体积DMSO停止反应。样品随后于900xg下离心10分钟，分析前保存在室温下的上澄液不可超过24小时。所有培养均进行二次重复。采用LC-MS分析法分析上澄液。于Xterra MS C18(50 X 4.6mm5μm，美国Waters公司)上洗脱样品。采用Alliance 2790(供应商美国Waters公司)HPLC系统。洗脱剂为缓冲液A在H2O/乙腈(95/5)中的25mM乙酸铵(pH5.2))。溶剂B为乙腈，且溶剂C为甲醇，流速为2.4ml/分钟。所使用的梯度为在5分钟内，以线性梯度，使有机相浓度由0％逐渐提高至50％B与50％C，于1分钟内至100％B，然后保持有机相浓度固定1.5分钟。注射样品总体积为25μl。
采用附有ESI光源之Quattro(供应商英国曼撤斯特市Micromass公司)三重四极质谱仪作为检测器。光源与去溶剂化温度分别设定在120与350℃，使用氮气作为气雾剂及干燥气体。以正扫描模式取得数据(单离子反应)，锥管电压设定在10V，滞留时间为1秒。
代谢稳定性以化合物于活性微粒体(E(act))的存在下15分钟培养后的代谢％表示(代谢％＝100％-((E(ast)于t＝15时的总离子电流(TIC)/E(ast)于t＝0时的TIC)X100)。代谢百分比小于20％的化合物则定义为具高度代谢稳定性。代谢百分比在20与70％之间的化合物则定义为具中度稳定性，而代谢百分比高于70％的化合物则定义为具低度代谢稳定性。当进行代谢稳定性试验时，总是包含3种参考化合物。使用菲帕米(Verapamil)作为低度代谢稳定性的化合物(代谢％＝73％)。使用希普莱德(Cisapride)作为中度代谢稳定性的化合物(代谢＝45％)。使用丙醇作为中度至高度代谢稳定性的化合物(代谢％＝25％)。使用这些参考化合物确认代谢稳定性分析法的有效性。
试验5种化合物，3种化合物的代谢百分比小于20％，2种的代谢百分比在20至70之间。
实例C.6p21诱发能力 采用下列方法，于人类A2780卵巢癌瘤细胞上测定p21蛋白质表现程度。将A2780细胞(20000个细胞/180μl)接种在96孔微分析板中的补充2mM L-麸酰胺、50μg/ml健大霉素与10％胎牛血清的RPMI 1640培养基中。溶解细胞前24小时，化合物的最终添加浓度为10-5、10-6、10-7与10-8M。所有试验化合物均溶在DMSO中，再于培养基中稀释。在添加化合物24小时后，排出细胞的上澄液。以200μl冰冷PBS洗涤细胞。吸清凹孔，添加30μl溶胞缓冲液(50mM Tris.HCl(pH7.6))，150mMHCl，1％Nonidet p40与10％甘油)。分析板于70℃下培养过夜。
自金属箔包装中取出适量微滴定孔，置入空的凹孔维持器中。制备洗涤缓冲液(20x 分析板洗涤浓缩液100ml PBS与界面活性剂的20倍浓缩液。含有2％氯乙酰胺)的操作溶液(1x)。冷冻干燥的p21WAF标准物与蒸馏水重新组合，再经样品稀释液(由套组中供应)稀释。
样品经样品稀释液稀释1:4。吸取样品(100μl)与p21WAF1标准物(100μl)加至适当凹孔中，于室温下培养2小时。以1x洗涤缓冲液洗涤凹孔3次后，吸取100μl检测剂抗体试剂。(生物素基化单株p21WAF1抗体溶液)加至各孔中。凹孔于室温下培养1小时后，以1x洗涤缓冲液洗涤3次，稀释400x共轭物(过氧化酶抗生物素共轭物400倍浓缩液)，取100μl 1x溶液加至孔中。凹孔于室温下培养30分钟后，以1x洗涤缓冲液洗涤3次，以蒸馏水洗涤1次。添加受质溶液(发色性受质)(100μl)至孔中，于黑暗中室温下培养30分钟。依前述添加受质溶液的相同顺序添加停止反应溶液至各孔中。使用分光光度计读板机，与450/595nm双重波长下测定各孔吸光度。
每次实验均平行进行对照组(不含药物)与空白培养组(不含细胞或药物)。所有对照组与样品组数值均扣除空白组数值。各样品的p21 WAFI诱发数值(单位为吸光度)以相对于对照组中p21WAF1数值百分比表示。诱发百分比高于130％时，定义为显著诱发。本分析法中，试验34种化合物，其中28种表现显著的诱发作用。
实例C.7P450抑制能力 所有试验化合物均溶于DMSO(5mM)中，再于乙腈中稀释至5x10-4M。进一步使用分析缓冲液(0.1M NaK磷酸盐缓冲液pH7.4)稀释，最终溶剂浓度不可超过2％。
CYP3A4蛋白质的分析法包括每孔中含15pmol P450/mg蛋白质(含于0.01M NaK磷酸盐缓冲液+1.15％KCl中)、NADPH发生系统(含3.3mM葡萄糖-6-磷酸、0.4U/ml葡萄糖-6-磷酸去氢酶、1.3mM NADP与3.3mM MgCl26H2O的分析缓冲液)及化合物，总分析体积为100微升。于37℃下预培养5分钟后，添加150μM含荧光探针受质BFC的分析缓冲液开始酶反应。于室温下培养30分钟后，添加2倍体积乙腈中止反应。于激发波长405nm及发射波长535nm下测定荧光。其中包含酮基康唑(Ketoconazole)(IC50值＝3 x 10-8M)作为此实验的参考化合物。
CYP2D6蛋白质的分析法包括每孔中含6pmol P450/mg蛋白质(含于0.01M NaK磷酸盐缓冲液+1.15％KCl中)、NADPH发生系统(含0.41mM葡萄糖-6-磷酸0.4U/ml葡萄糖-6-磷酸去氢酶、0.0082mM NADP与0.41mM MgCl2·6H2O的分析缓冲液)及化合物，总分析体积为100微升。于37℃下预培养5分钟后，添加3μM含荧光探针受质AMMC的分析缓冲液开始酶反应。于室温下培养45分钟后，添加2倍体积乙腈中止反应。于激发波长405nm及发射波长460nm下测定荧光。其中包含奎尼定(quinidine)(IC50值<5 x 10-8M)作为此实验的参考化合物。
CYP2C9蛋白质的分析法包括每孔中含15pmol P450/mg蛋白质(含于0.01M NaK磷酸盐缓冲液+1.15％KCl中)、NADPH发生系统(含3.3mM葡萄糖-6-磷酸、0.4U/ml葡萄糖-6-磷酸去氢酶、1.3mM NADP与3.3mM MgCl2·6H2O的分析缓冲液)及化合物，总分析体积为100微升。于37℃下预培养5分钟后，添加200μM含荧光探针受质MFC的分析缓冲液开始酶反应。于室温下培养30分钟后，添加2倍体积乙腈中止反应。于激发波长405nm及发射波长535nm下测定荧光。其中包含速吩唑(sulfaphenazole)(IC50值＝6.8 x 10-7M)作为此实验的参考化合物。
初次筛选时，化合物固定在1 x 10-6M的单一浓度下试验。试验活性化合物时，则重复实验，以建立完整的浓度-响应曲线。每次实验均平行进行对照组(不含药物)与空白培养组(不含酶或药物)。所有化合物均分析四次重复。所有对照组与样品组数值均扣除空白组数值。各样品的P450活性平均值(以相对荧光单位表示)以相对于对照组中P450活性平均值的百分比表示。抑制作用百分比以100％减去样品中P450活性平均值表示。若适当时，计算IC50值(使P450活性下降至对照组的50％时所需药物浓度)。本分析法分析4种化合物。其中只有一种化合物可使用CYP3A4蛋白质测得IC50值为7.9 x 10-6M 实例C.8A2780小白鼠异种移植物模式 在免疫缺乏性小白鼠皮下注射A2780卵巢癌瘤细胞(107个细胞/200μl/只)。随后在第4天至第32天之间每天一次经口供给10、20与40mpk化合物。此化合物是溶于0.9％NaCl、20％β-环糊精中。第32天时，收集肿瘤，分别测量每只小白鼠的各肿瘤重量。每次实验包括10只小白鼠。
每天一次经口供给10、20与40mpk No.6化合物的两次独立的A2780异种移植物实验显示，所有试验剂量均具有强烈的抗肿瘤效果，最高抑制作用在20mpk时出现一次，在40mpk时出现一次。
表F-2表F-2示出依据实例C.1、C.2与C.3试验的混合物的结果 D.组合物实例膜衣锭 锭剂核心制法 取含100g式(I)化合物、570g乳糖与200g淀粉的混合物混合均匀后，用含5g十二烷基硫酸钠及10g聚乙烯吡咯烷酮的约200ml水溶液湿化。湿粉末混合物经过筛、干燥及再过筛一次，然后添加100g微晶纤维素与15g氢化植物油。全部混合均匀，压成锭剂，产生10,000片锭剂，各含10mg式(I)化合物。
包衣 添加含5g乙基纤维素的150ml二氯甲烷溶液至含10g甲基纤维素的75ml变性乙醇溶液中。然后添加75ml二氯甲烷与2.5ml 1，2，3-丙三醇。取10g聚乙二醇熔化及溶解于75ml二氯甲烷中。后者溶液加至前者溶液中，然后添加2.5g十八碳烷酸镁、5g聚乙烯吡咯烷酮与30ml浓缩色素悬浮液，全部均质化。于包覆设备中，以所得混合物包覆锭剂核心。
权利要求
1.一种式(I)化合物
其N-氧化物型、其医药上可接受的加成盐及立体化学异构型，
其中
n为0、1、2或3，且当n为0时，则为一直接键结；
t为0、1、2、3或4，且当t为0时，则为一直接键结；
各Q为氮或-C≤；
各X为氮或-C≤；
各Y为氮或-C≤；
各Z为氮或-CH<；
R1为-C(O)NR7R8、-N(H)C(O)NR9、-C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10C(O)N(OH)R9、-NR10C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10C(O)C＝N(OH)R9或另一个Zn-螯合基，其中R7与R8分别独立选自氢、羟基、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基或氨芳基；
R9分别独立选自氢、C1-6烷基、C1-6烷羰基、芳基C1-6烷基、C1-6烷基吡嗪基、吡啶酮、吡咯烷酮或甲基咪唑基；
R10分别独立选自氢或C1-6烷基；
R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、二(C1-6烷基)氨基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基；
-L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、氨基、羰基或氨羰基；
各R3分别独立代表氢原子，且其中一个氢原子可被芳基置换；
R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、羟羰基、氨基C1-6烷基、氨羰基C1-6烷基、羟羰基C1-6烷基、羟氨羰基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
为选自下列的基团
其中各s分别为0、1、2、3、4或5；
各R5与R6分别独立选自氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；经芳基与C3-10环烷基取代的C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷氧基C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基；羟基C1-6烷氨基；氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨羰基；二(羟基C1-6烷基)氨基；(芳基)(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基C1-6烷基，芳基磺酰基；芳基磺酰基氨基；芳氧基；芳氧基C1-6烷基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基)；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基；
氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
二(C1-6烷基)氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基；
二(C1-6烷基)氨基磺酰基氨基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；氰基；噻吩基；
经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或二(羟基C1-6烷基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
呋喃基；经羟基C1-6烷基取代的呋喃基；苯并呋喃基；咪唑基；噁唑基；经芳基与C1-6烷基取代的噁唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；吡咯烷基；吡咯基；哌啶基C1-6烷氧基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；吗啉基C1-6烷氧基；吗啉基C1-6烷基；吗啉基C1-6烷氨基；吗啉基C1-6烷氨基C1-6烷基；哌嗪基；C1-6烷基哌嗪基，C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氧基；哌嗪基C1-6烷基；萘磺酰基哌嗪基；萘磺酰基哌啶基；萘磺酰基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氨基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氨基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基磺酰基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷氧基；氨基磺酰基哌嗪基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；羟基C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷氧基哌啶基；C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基；哌啶基氨基C1-6烷氨基；哌啶基氨基C1-6烷氨基C1-6烷基；
(C1-6烷基哌啶基)(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基；
(C1-6烷基哌啶基)(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基C1-6烷基；
羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基；
羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；
(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基；(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
羟基C1-6烷氨基C1-6烷基；二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
吡咯烷基C1-6烷基；吡咯烷基C1-6烷氧基；吡唑基；硫吡唑基；经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基中两个取代基取代的吡唑基；
吡啶基；经C1-6烷氧基、芳氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；四氢嘧啶基哌嗪基；四氢嘧啶基哌嗪基C1-6烷基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列1、2或3个取代基取代的苯的卤基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基C1-4烷氧基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷氧基C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰基、氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨羰基、二C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基、氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基氨基(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氰基、哌啶基C1-4烷氧基、吡咯烷基C1-4烷氧基、氨基磺酰基哌嗪基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷氧基哌啶基、C1-4烷氧基哌啶基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、呋喃基、经-CH＝CH-CH＝CH-取代的呋喃基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、吗啉基C1-4烷氨基、吗啉基C1-4烷氨基C1-4烷基、哌嗪基、C1-4烷基哌嗪基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氧基、哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氨基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氨基C1-6烷基、四氢嘧啶基哌嗪基、四氢嘧啶基哌嗪基C1-4烷基、哌啶基氨基C1-4烷氨基、哌啶基氨基C1-4烷氨基C1-4烷基、(C1-4烷基哌啶基)(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基、(C1-4烷基哌啶基)(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基C1-4烷基、吡啶基C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氨基、羟基C1-4烷氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基、氨基噻二唑基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷氧基、或噻吩基C1-4烷氨基；
中心
部份基团亦可与亚甲基、亚乙基或亚丙基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)；
各R5与R6可置于氮上替代氢；
上述芳基为苯基，或经一个或多个分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基；三氟甲基、氰基或羟羰基的取代基取代的苯基。
2.根据权利要求1的化合物，其中
R7与R8分别独立选自氢、羟基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基或氨芳基；
R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基；
R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、羟羰基、氨基C1-6烷基、氨羰基C1-6烷基、羟羰基C1-6烷基、羟氨羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
为选自下列的基团(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-24)、(a-25)、(a-26)、(a-27)、(a-28)、(a-29)、(a-30)、(a-31)、(a-32)、(a-33)、(a-34)、(a-35)、(a-36)、(a-37)、(a-38)、(a-39)、(a-40)、(a-41)、(a-42)、(a-43)或(a-44)；
各R5与R6分别独立选自氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷氧基C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷磺酰基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基；羟基C1-6烷氨基；氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨羰基、二(羟基C1-6烷基)氨基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氧基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷氨基；芳基磺酰基；芳基磺酰基氨基；芳氧基；芳基C2-9烯二基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；呋喃基；咪唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；哌啶基C1-6烷氧基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；吗啉基C1-6烷氧基；吗啉基C1-6烷基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷氧基；C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基C1-6烷基哌嗪基磺酰基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷氧基；氨基磺酰基哌嗪基；氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基；二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基；羟基C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；C1-6烷氧基哌啶基；C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基；羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基；
羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；
(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基；(羟基C1-6烷基)(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
吡咯烷基C1-6烷氧基；吡唑基；硫吡唑基；经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基中两个取代基取代的吡唑基；
吡啶基；经C1-6烷氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；喹啉基；苯基；经分别独立选自下列的1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、哌啶基C1-4烷氧基、吡咯烷基C1-4烷氧基、氨基磺酰基哌嗪基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、C1-4烷氧基哌啶基、C1-4烷氧基哌啶基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基、(羟基C1-4烷基)(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷氧基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氨基、二(羟基C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氨基、氨基噻二唑基、氨基磺酰基哌嗪基C1-4烷氧基、或噻吩基C1-4烷氨基。
3.根据权利要求1的化合物，其中t为0；
t为0；
R1为-C(O)NR7R8、-C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10(C(O)N(OH)R9、-NR10(C(O)C1-6烷二基SR9、-NR10(C(O)C＝N(OH)R9或另一Zn-螯合基，其中R7与R8分别独立选自氢、羟基、羟基C1-6烷基或氨基C1-6烷基；
R2为氢、卤基、羟基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基或二(C1-6烷基)氨基；
-L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、氨基或羰基；
R4为氢、羟基、氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷基、氨羰基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基氨基C1-6烷基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
为选自下列的基团(a-1)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a-16)、(a-17)、(a-18)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-24)、(a-25)、(a-26)、(a-28)、(a-29)、(a-30)、(a-31)、(a-32)、(a-33)、(a-34)、(a-35)、(a-36)、(a-37)、(a-38)、(a-39)、(a-40)、(a-41)、(a-42)、(a-44)、(a-45)、(a-46)、(a-47)、(a-48)或(a-51)；
各s分别为0、1、2、3或4；
R5为氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；羟基C1-6烷基；芳氧基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；噻吩基；呋喃基；经羟基C1-6烷基取代的呋喃基；苯并呋喃基；咪唑基；噁唑基；经芳基与C1-6烷基取代的噁唑基；C1-6烷基三唑基；四唑基；吡咯烷基；吡咯基；吗啉基；C1-6烷基吗啉基；哌嗪基；C1-6烷基哌嗪基；羟基C1-6烷基哌嗪基；C1-6烷氧基哌嗪基；吡唑基、经选自C1-6烷基或三卤C1-6烷基中一或两个取代基取代的吡唑基；吡啶基、经C1-6烷基氧基/芳氧基或芳基取代的吡啶基；嘧啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；或经分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或三氟甲基中的1或2个取代基取代的苯基；
R6为氢；卤基；羟基；氨基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；C1-6烷磺酰基；羟基C1-6烷基；芳氧基；二(C1-6烷基)氨基；氰基；吡啶基；苯基；或经分别独立选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或三氟甲基中的1或2个取代基取代的苯基；
中心的
部份基团也可与亚乙基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)。
4.根据权利要求1的化合物，其中n为1或2；t为0、1或2；各Z为氮；R10为氢；R2为氢、硝基、C1-6烷氧基、三氟甲基、二(C1-6烷基)氨基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基；-L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、羰基或氨羰基；各R3代表氢原子；R4为氢、羟基C1-6烷基、氨羰基、羟氨羰基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
为选自(a-1)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-14)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-30)、(a-34)、(a-49).或(a-50)的基团；各s分别为0、1、2或5；各R5与R6分别独立选自氢；卤基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷磺酰基；(芳基)(C1-6烷基)氨基；芳基磺酰基；芳氧基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基；二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C2-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
呋喃基；噁唑基；吡咯基；吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基取代的吡啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基；二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基，或中心的
部份基团亦可与亚甲基桥连基形成桥连(亦即形成双环状部份基团)。
5.根据权利要求1与4的化合物，其中n为1或2；t为0、1或2；各Z为氮；R10为氢；R2为氢、硝基、C1-6烷氧基、三氟甲基、二(C1-6烷基)氨基、羟氨基或萘磺酰基吡嗪基；-L-为一直接键结或选自下列的二价基团C1-6烷二基、羰基或氨羰基；各R3代表氢原子；R4为氢、羟基C1-6烷基、氨羰基、羟氨羰基或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
为选自(a-1)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-14)、(a-19)、(a-20)、(a-21)、(a-22)、(a-23)、(a-30)、(a-34)、(a-49)或(a-50)的基团；各s分别为0、1、2或5；各R5与R6分别独立选自氢；卤基；硝基；三卤C1-6烷基；三卤C1-6烷氧基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；C1-6烷磺酰基；(芳基)(C1-6烷基)氨基；芳基磺酰基；芳氧基；芳基C2-6烯二基；二(C1-6烷基)氨基；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基(C1-6烷基)、C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基、羟基C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基，羟基C1-6烷氧基C1-6烷基哌嗪C1-6烷基二、(C1-6烷基)氨基磺酰基哌嗪基C1-6烷基、C1-6烷氧基哌啶基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、羟基C1-6烷基C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或二(羟基C1-6烷基)氨基C1-6烷基；
呋喃基；噁唑基；吡咯基；吡唑基；吡啶基；经C1-6烷氧基取代的吡啶基；喹啉基；吲哚基；苯基；经分别独立选自下列1、2或3个取代基取代的苯基卤基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基C1-4烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基；二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基、二C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、羟基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、羟基C1-4烷氧基C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基、二(羟基C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷氧基、吗啉基C1-4烷基、C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基，或中心的
部份基团亦可与亚甲基桥形成桥连(即形成双环状部份基团)。
6.根据权利要求1、4与5的化合物，其中n为1；t为0；各Z为氮；R1为-C(O)NH(OH)；R2为氢；-L-为一直接键结；各R3代表氢原子；R4为氢；
为选自(a-1)或(a-20)的基团；各s分别为0或1；各R5与R6分别独立选自氢；噻吩基；经下列基团取代的噻吩基二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、或C1-6烷基哌嗪基C1-6烷基；呋喃基；苯基；经分别独立选自下列的1个取代基取代的苯基二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷基、吡咯烷基C1-4烷氧基或C1-4烷基哌嗪基C1-4烷基。
7.根据权利要求1、4、5与6的化合物，其是选自下列的化合物No.6、No.100、No.104、No.128、No.144、No.124、No.154、No.125、No.157、No.156、No.159、No.163、No.164、No.168、No.169、No.127、No.171、No.170、No.172与No.173化合物。
8.根据权利要求1、2、3、4、5、6与7的化合物，其中该化合物为化合物No.6。
化合物6
9.一种医药组合物，其包含医药上可接受的载体及作为活性成分的医疗有效量的根据权利要求1至8的化合物。
10.一种制备根据权利要求9项的医药组合物的方法，其中均匀混合医药上可接受的载体及根据权利要求1至8的化合物。
11.根据权利要求1至8项中任一的化合物，其是用为医药。
12.根据权利要求1至8项中任一的化合物在制造用于治疗增生疾病的医药的用途。
13.一种制备根据权利要求1的化合物的方法，其特征在于
a)由式(II)中间体与适当酸，如，例如三氟乙酸反应，产生式(I-a)异羟肟酸，式中R1为-C(O)NH(OH)；
b)由式(VI)中间体与氢于催化剂媒(如，例如Pd/C(10％))的存在下进行催化氢化反应，产生式(I-a)异羟肟酸，式中R1为-C(O)NH(OH)；
c)由式(VII)中间体与式(VIII)中间体，其中R′为
或
于N′-(乙基碳化亚胺酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺单盐酸盐(EDC)与羟基苯并三唑(HOBT)的存在下反应，产生式(I-b)化合物，式中R1为
或
14.一种在生物样品中检测或判别HDAC的方法，其包括检测或测定如权利要求1项所定义的标记化合物与HDAC之间所形成的配合物。
15.抗癌剂与根据权利要求1至8项中任一项的HDAC抑制剂的组合。
全文摘要
本发明涉及用作组蛋白去乙酰酶抑制剂的磺酰基衍生物。具体地说，本发明包括一种新颖的式(I)化合物其中n、m、t、R1、R2、R3、R4、L、Q、X、Y、Z与-如本文中定义，其具有组蛋白去乙酰酶抑制酶素活性；并包括其制法、含其之组合物及其作为医药的用途。
文档编号A61K31/53GK101450934SQ20081017042
公开日2009年6月10日 申请日期2003年3月11日 优先权日2002年3月13日
发明者K·范埃梅伦, J·阿特斯, L·J·J·巴克西, H·L·J·德温特, S·F·A·范布兰德特, M·G·C·维当克, L·米尔波, I·N·C·皮拉特, V·S·庞塞勒特, A·B·德亚特金, 吉米·阿诺德·维维恩·范休斯登 申请人:詹森药业有限公司