专利名称：：一种治疗系统性红斑狼疮注射液新药的制作方法
技术领域：
：本发明属于药物
技术领域：
，尤其涉及一种治疗系统性红斑狼疮注射液新药。
背景技术：
：红斑狼疮是一种胶原组织即人体自身免疫系统疾病。"红斑狼疮"分为系统性红斑狼疮和盘状红斑狼疮两种病变，多发病于青春期和生育期女性，特别是年轻女性。发病高峰在15一0岁，男女的比例为1:5—9，也见于儿童和老人，且在儿童和老人中男女发病差别縮小，男女比例大约是l:2。发病原因除了有遗传、感染、药物、环境因素外，同时与人体的内分泌有着相连的关系，尤为与女性雌性激素有关，所以多发病于女性。盘状红斑狼疮主要表现在皮肤表面，而系统性红斑狼疮显现为高热持续不退，关节疼痛，狼毒侵入五脏六腑时，人体整个免疫系统失去防御能力病情恶化，很快使心脏、肺、肝及肾脏、大脑及关节、血管受累，直接危害人的生命，很快导致死亡。而盘状红斑狼疮随着病情的发展也可转化为系统性红斑狼疮。人一旦发病很难治愈，目前国际国内还没有能有效治疗红斑狼疮的药物。红斑狼疮系结缔组织病中最为凶险的一个病种，被国际医学界称为摧残人类生命的四大疑难病之一，对人类的威胁不亚于癌症、艾滋病。每年中国约有60万红斑狼疮新发病人，世界约有新发病人420万人.社会现拥有红斑狼疮病人，世界约有3000万人，其中仅美国约有246万人，中屆约有386万人.红斑狼疮发病率正以较快的速度增长，一般人群由70年代的十万分之一猛增到十万分之七十(增70倍)，高发区占万分之四百零八，独生子女发病率约占发病率18.6%，严重威胁新一代的健康成长.患该病的青少年，较多为高智商型，因此对国家来说，也是一个巨大损失。红斑狼疮病人的存活时间平均5年至10年左右，而当年发病死亡人数占发病总人数20%左右。可见红斑狼疮是危害人类健康的重大疾病。而每年花费在治疗系统性红斑狼疮病人的药物费用高达数十亿美元。50年代，系统性红斑狼疮患者的死亡率很高，曾被视为"不治之症"，但随着近代医学、免疫学、药学和分子生物学的飞速发展，对本病的发病机制有了进一步的了解，对系统性红斑狼疮可以做到早期诊断和早期治疗，加上治疗手段的提高和新药物涌现，患者的预后已大大改善，己把该病从"不治之症"转为可治，患者可以如正常人一样学习、工作和生活。然而目前治疗系统性红斑狼疮主要使用激素类物灾、抗疟疾药物和抗肿瘤细胞免疫抑制性药物。这些药物对治疗系统性红斑狼疮有一定的疗效，但是副作用非常大，不能长期使用。
发明内容本发明的目的是开发比现有药物效力更高、副作用更低或无副作用的并且更特异的治疗系统性红斑狼疮药物。本发明运用中医治疗红斑狼疮取得了可喜的成果。我们发现红斑性狼疮患者大多烦躁易怒，遇风湿则病情加重，属内有肝气之逆，外有风湿之状，郁久化火消毒，终至整体失调，根据中医辨证施治原则，当解郁夫正，协调整体，清热除湿。从西医的观点，我们首先顾及改善和纠正机体紊乱的免疫系统使其行使正常的免疫功能，兼顾抗菌消炎，最后考虑加强机体生机愈合的能力。就是根据这一理论基础，经过数年的苦心研制而成的一种抗系统性红斑狼疮纯中药制剂。这种抗系统性红斑狼疮新药是通过多次试验发现三氧化二砷、苦参碱、蟾酥(如华赡素)和冰片四种不同中药成份按一定比例组合而制备的注射液。"三氧化二砷注射液"于九九年八月通过国家药品监督管理局新药审评作为国家二类新药获准上市，该产品用于治疗急性早幼粒细胞白血病疗效突出，(完全缓解率91%)处于国际国内领先地位。在多位医学界院士带领下展开"三氧化二砷注射液"的深入研究，用于治疗肝癌、肺癌等实体瘤，目前已进入临床验证阶段，近期即将完成。由于在治疗肿瘤疾病时所需三氧化二砷剂量比较大，因而对病人所带来的毒副作用巨大，所以在临床医生和病人都难以接受"三氧化二砷注射液"的治疗。虽然三氧化二砷能抑制淋巴细胞生长和诱导淋巴细胞凋亡，但是还未见到任何关于三氧化二砷用来治疗系统红斑琅疮性疾病。苦参碱是山豆根水提取物，对肉瘤-180、吉田肉瘤、腹水肝癌等实验性肿瘤均呈抑制作用；苦参碱对白血病细胞有抑制作用；有抑制胃酸分泌，对实验性溃疡有明显的修复作用；对金黄色葡萄球菌、絮状表皮癣菌及白色念珠菌均有抑制作用，还有升高白血球、抗心律失常的作用，同时对肝脏有保护作用。华蟾素是蟾酥一种水提物，它主要含有蟾素内酯素，华蟾素注射液临床用于乳腺癌，对肝癌、胃癌，食管癌、肺癌、宫颈癌、皮肤癌等。华蟾素对CTX(环磷酰胺)所致的白细胞减少症有防治作用，能提高小鼠淋巴细胞比率，也可提高LgG、LgA、LgM的含量，证明华蟾素注射液有促进机体免疫和细胞免疫的功能。苦参素和华蟾素'从未有报导用来治疗系统红斑狼疮性疾病。冰片是一种结晶性混合化合物，它本身具有消炎生肌作用，此外它还具有帮助别药物进入靶细胞来提高药物有效浓度。本发明含有以下重量百分比的原料药物三氧化二砷1%10°/0苦参碱20%60%华蟾素20%60%冰片1°/。10%其中，三氧化二砷购买于美国Sigma公司，其纯度为99.99%。苦参碱和苦参碱注射液购买于吉林玉皇药业有限公司。华蟾素和华蟾素注射液购买于安徽金蟾生化股份有限公司。冰片购买于广州市黄浦制药厂。本发明含有以下重量百分比的原料药物三氧化二砷5°/。8%苦参碱30%50%华蟾素30%50%冰片5%8%本发明有以下的制备方法先用少许生理盐水溶解三氧化二砷(白色颜色)，然后再加华蟾素(白色颜色不变)。最后加苦参碱和冰片，颜色变为淡黄色液体并消毒后即为本发明产物一种治疗系统性红斑狼疮注射液。本发明的有益效果为本发明将三氧化二砷、苦参碱、华赡素、冰片四种药物按一定比例混合而成的抗系统性红斑狼疮新注射制剂在小鼠系统性红斑狼疮疾病模型中具有强大的抗系统性红斑狼疮作用，四种药物之间相互产生显著的协同作用，而且对抗由单一的三氧化二砷注射液带来的副作用使其成为无毒的抗系统性红斑狼疮最有前景的药物，这种新药的开发和投入使用，将成为抗系统性红斑狼疮的首选药物。具体实施例方式下面是本发明以实施例作进一步说明，并不是把本发明的实施范围限制于此。实施例1先将l毫克的三氧化二砷溶解在生理盐水中，然后加入40毫克华蟾素，搅拌溶解；最后加40毫克苦参碱和1毫克冰片，搅拌均匀使之颜色变为淡黄色液体并消毒后即为成品。本实施例注射液中，每毫升含1毫克三氧化二砷，40毫克苦参碱，40毫克华蟾素(含5-羟色胺浓度为18微克/毫升或含蟾生物碱浓度为25微克/毫升)和1毫克冰片。实施例2先将5毫克的三氧化二砷溶解在生理盐水中，然后加入50毫克华蟾素，搅拌溶解；最后加50毫克苦参碱和5毫克冰片，搅拌均匀使之颜色变为淡黄色液体并消毒后即为成品。本实施例注射液中，每毫升含5毫克三氧化二砷，50毫克苦参碱，50毫克华蟾素和5毫克冰片。为了进一步说明本发明注射液的突出效果，将制备的单一注射液与本发明注射液做一对比，制备单一三氧化二砷注射液用生理盐水溶解三氧化二砷(白色颜色)，每毫升三氧化二砷注射液含1毫克三氧化二砷。制备苦参碱口服液用生理盐水溶解苦参碱,每毫升苦参碱注射液含1毫克苦参碱。制备华蟾素口服液用生理盐水溶解华蟾素,每毫升华蟾素注射液含1毫克华蟾素。1、本发明注射液对小鼠的急性毒性研究取两组8周龄的BlabC小鼠，每组10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量12ml/kg和多次剂量1.2ml/kg(QDX15)尾静脉给予本发明注射液，然后分别观察1周和4周。每两天称体重。试验结束后，将受试小鼠处死，进行病理分析。2、，本发明注射液对小鼠系统性红斑狼疮疾病模型作用的研究动物模型及分组纯系昆明小鼠，2022g，810周，雌雄各半，由南方医科大学实验动物中心提供。于造模前2h按分组灌胃给予相应药物。用细菌脂多糖LPS(购于北京拜尔迪生物公司)诱导昆明纯种小鼠制备了系统性红斑狼疮疾病样模型(IOO微克/小鼠,腹腔注射)。将制模好的100只小鼠随机分为5组，设A组为正常对照组，B组为模型对照组，给予等量的阴性(生理盐水)对照组尾静脉注射；C组用本发明注射液治疗，1.2毫升/公斤体重；D组用三氧化二砷注射液治疗，1.2毫升/公斤体重；E组用苦参碱注射液治疗，3.6毫升/公斤体重。F组用华蟾素注射液液治疗，4.8毫升/公斤体重。G组用醋酸潘尼松，12.5ml/公斤体重。所有试验组给药每天一次，连续给药二周。于第15天采用摘眼球取血的方法制备血清标本，按试剂盒说明操作检测各项指标包括有血清IL-IO、抗ds-DNA抗体含量的测定。我们采用考马斯亮蓝法检测蛋白尿，用牛血清白蛋白制作标准曲线，将测得的OD值带入标准曲线方程，得蛋白尿浓度。将蛋白尿浓度与24h尿量相乘，得到24h尿蛋白总量。统计学方法采用SPSS10.0统计软件包进行统计学处理，所有资料均用(x士s)表示，采用多样本均数比较的方差分析法。3、本发明注射液对阻止细菌脂多糖诱导小鼠盘状红斑狼疮形成的研究取128只纯系昆明雌性小鼠，2022g，810周(由南方医科大学实验动物中心提供)，每只小鼠腹腔注射100微克细菌脂多糖来诱导小鼠盘状红斑狼疮形成。然后随机将这些小鼠分为4组，设A组给予等量的阴性(生理盐水)对照组尾静脉注射；B组用本发明注射液治疗，1.2毫升/公斤体重；C组用三氧化二砷注射液治疗，1.2毫升/公斤体重；D组用苦参碱注射液治疗，3.6毫升/公斤体重。E组用华蟾素注射液治疗，4.8毫升/公斤体重。所有试验组给药每天一次，连续给药二周。并观察这些受试小鼠是否发生盘状红斑狼疮形成。4、试验结果1)对小鼠的急性毒性研究取两组8周龄的BlabC小鼠，每组10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量12ml/kg和多次剂量1.2ml/kg(QDX15)尾静脉给予本发明注射液，然后分别观察1周和4周。每两天称体重。试验结束后，将受试小鼠处死，进行病理分析。结果显示，以单次剂量12ml/kg和多次剂量1.2ml/kg(QDX15)给予本发明注射液，均未观察到毒性，所有受试小鼠生长良好,无一死亡。因此给予本发明注射液是具有很大开发前景的治疗统性红斑狼疮新药。2)对小鼠系统性红斑狼疮疾病模型作用的研究为了研究本发明新药口服液是否对小鼠系统性红斑狼疮疾病模型具有疗效作用，我们采用腹腔注射细菌脂多糖来诱导小鼠出现系统性红斑狼疮病证。然后将这些小鼠分组并接收治疗，给药二周后于第15天采用摘眼球取血的方法制备血清标本和收集24小时的尿样品，按试剂盒说明操作检测各项指标。试验结果显示(见表1)本发明注射液对治疗系统性红斑狼疮样小鼠IL-IO、抗dsDNA抗体、和尿白蛋白有明显的影响。模型组和苦参碱注射液治疗组IL-IO、抗ds-DNA抗体、24h尿白蛋白水平明显高于其他各组，差异有显著性。对ds-DNA抗体的影响，各药物治疗组间存在有显著性差异。本发明注射液治疗组其IL-IO、抗ds-DNA抗体、24h尿白蛋白水平最低。三氧化二砷注射液治疗组和华蟾素注射液治疗组其IL-IO、抗ds-DNA抗体、24h尿白蛋白水平有些下降。虽然本发明注射液、三氧化二砷注射液和华蟾素注射液都能降低细菌脂多糖诱导小鼠血清中IL-IO、血清中抗ds-DNA抗体和24h尿白蛋'白水平。但其降这些指标的能力本发明注射液最强。这一结果按示本发明注射液是一种很有前景的治疗系统性红斑狼疮疾病新药。表h本发明新药注射液治疗对系统红斑狼疮样小鼠IL-IO，抗ds-DNA抗体和尿白蛋白水平的影响(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>3)对阻止细菌脂多糖诱导小鼠盘状红斑狼疮形成的研究为了研究本发明注射液是否具有阻止细菌脂多糖诱导小鼠盘状红斑狼疮形成的作用，我们采用腹腔注射细菌脂多糖来诱导小鼠出现盘状红斑狼疮形成，然后将这些小鼠分组并接收治疗。所有受试小鼠给药每天一次，连续给药二周。在给药第15天发现阴性对照组生理盐水治疗组26只小鼠出现盘状红斑狼疮形成；苦参碱注射液治疗组25只小鼠出现盘状红斑狼疮形成；三氧化二砷注射液治疗组21只小鼠出现盘状红斑狼疮形成；华蟾素注射液治疗组19只小鼠出现盘状红斑狼疮形成；而本发明注射液治疗组则没有一只小鼠出现盘状红斑狼疮形成。这一结果进一步证明本发明新药是一种极为有效的治疗系统性红斑狼疮疾病的良药。以上所述仅是本发明的较佳实施方式，故凡依本发明专利申请范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均包括于本发明专利申请范围内。权利要求1、一种治疗系统性红斑狼疮注射液新药，其特征在于含有以下重量百分比的原料药物三氧化二砷1％～10％苦参碱20％～60％华蟾素20％～60％冰片1％～10％。2、根据权利要求1所述的一种治疗系统性红斑狼疮注射液新药，其特征在于含有以下重量百分比的原料药物-三氧化二砷5%8%苦参碱30%50%华蟾素30%50%冰片5%8%。3、根据权利要求1或2所述的一种治疗系统性红斑狼疮注射液新药，其特征在于有以下的制备方法将配方量的三氧化二砷溶解在生理盐水中，加入华蟾素，室温下搅拌均匀，再依次加入苦参碱和冰片，搅拌下颜色变为淡黄色液体并消毒后封装为注射液产品。全文摘要本发明属于药物
技术领域：
，尤其涉及一种治疗系统性红斑狼疮注射液新药，本发明将三氧化二砷、苦参碱、华蟾素、冰片四种药物按一定比例混合而成的抗系统性红斑狼疮新注射制剂在小鼠系统性红斑狼疮疾病模型中具有强大的抗系统性红斑狼疮作用，四种药物之间相互产生显著的协同作用，而且对抗由单一的三氧化二砷注射液带来的副作用使其成为无毒的抗系统性红斑狼疮最有前景的药物，这种新药的开发和投入使用，将成为抗系统性红斑狼疮的首选药物。文档编号A61P29/00GK101401820SQ20081019910公开日2009年4月8日申请日期2008年10月14日优先权日2008年10月14日发明者南张,晓李申请人:张南;李晓