专利名称：：一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种复合抗衰老粉末的制备方法。
背景技术：
：目前市场上现有的抗衰老药物多各种中成药成分，科学研究证明，使用多种不明复合中成药成分不仅不能起到更好的抗衰老作用，而且会损害人的身心健康。现有的抗衰老产品大多由多种具有抗衰老功能的中药提取物组成，人们认为产品中的抗衰老成分越多，抗衰老作用越全面，抗衰老效果越好，但是各种中药提取物由于其成分复杂、各成分性质和功效也不尽相同，难以被定性和定量，有效成分不明确，所以用一般的中药提取的方法不能够保证提取出的有效成分配比合理，从而影响了产品的抗衰老效果，另外现有抗衰老产品还存在生产工艺繁琐的缺陷。
发明内容本发明是为了解决现有制备抗衰老的产品的方法存在不能够保证提取出的有效成分配比合理和生产工艺繁琐的缺陷，而提供一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法。本发明的大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法按照如下步骤进行一、先将大果沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓分别用水浸泡，清洗、除去茎叶等杂质及腐烂果，再分别在真空度为0.40.7mbar、温度为-3(TC的条件下冻干24小时后再粉碎至40目；二、分别向粉碎后的原料加入体积浓度为70%的乙醇溶液，使料液比为lg:20mLlg:40mL，再用超声波提取2040min，然后以3000r/min的速度离心35min，将上层提取液和沉淀分离；三、将沉淀加入到体积浓度为70%的乙醇溶液中，使料液比为lg:20mL40mL，再用超声波提取2040min，然后以3000r/min的速度离心35min，将上层提取液和沉淀分离；四、重复步骤三的操作一次，再分别合并上层提取液并浓縮至提取物液体积的1/201/40，分别得到大果沙棘提取物、蓝靛果提取物、山葡萄提取物和蓝莓提取物；五、按照重量份分别取30~50份的步骤四得到的大果沙棘提取物、1030份的步骤四得到的蓝靛果提取物、1030份的步骤四得到的山葡萄提取物和10~30份的步骤四得到的蓝莓提取物混合，再在40MPa条件下均质812min，然后在真空度为0.40.7mbar、温度为-3(TC的条件下将混合物冻干24小时，再粉碎成60目粉末；即得到大果沙棘复合抗衰老粉末。本发明将大果沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓进行科学合理的配伍，使四种成分作用于体内不同的靶点，形成多靶点机制，从而产生良好的抗衰老效果，与现有抗衰老产品相比，本发明制备的大果沙棘复合抗衰老粉末有以下优点1.配方科学合理本发明制备的产品以黄酮和各种花色苷含量为指标，根据动物实验最佳效果的摄入量配制，不仅能发挥大果沙棘抗衰老复合制剂的最佳功效，而且保证了其安全性，无毒副作用；2.制备的大果沙棘复合抗衰老粉末中的大果沙棘黄酮和蓝靛果、山葡萄、蓝莓中的花色苷具有协同作用，它们作用于机体不同耙点，得到良好的抗衰老效果；动物实验结果表明，大果沙棘抗衰老复合制剂抗衰老效果优于单独服用大果沙棘提取物和其他三种提取物，也优于含有沙棘与蓝靛果、山葡萄、蓝莓提取物复配的多组分复配物和按先后顺序服用同等剂量的大果沙棘提取物和蓝靛果、山葡萄、蓝莓提取物；动物实验28天证明大果沙棘复合抗衰老粉末能使衰老小鼠体重减轻25%，能使衰老模型小鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)酶活性提高22.71%43.79%，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性提高15.74%24.96%，过氧化脂质产物丙二醛(MDA)含量降低22.93%26.7%，说明大果沙棘复合抗衰老粉末是通过提高机体抗氧化酶活性、降低脂质过氧化产物从而起到延缓衰老的作用的，这是因为大果沙棘果浆和蓝靛果、山葡萄、蓝莓制成大果沙棘抗衰老复合粉末后，其中的黄酮类物质和蓝靛果、山葡萄、蓝莓花色苷以及其它有效成分相互融合，相互促进大果沙棘黄酮可升高血红蛋白.增加肺活量，改善机体供氧功能，使衰竭肌肉组织恢复正常，蓝靛果、山葡萄、蓝莓花色苷能够提高抗氧化酶活性，清除体内由于各种原因产生的自由基，能够增强氧的利用率，降低体内由于脂质氧化而引起的细胞损伤，延缓衰老，当体内由于过度劳累、辐射、免疫下降、饮食不当而使体内自由基过多时，就会引起氧化性损伤。黄酮和花色苷都具有提高免疫能力、强心、抗缺氧、抗氧化损伤、延缓衰老的功效，符合中医学药物配伍相使的关系；3、产品适用范围广本发明将大果沙棘和蓝靛果、山葡萄、蓝莓提取物制成了抗衰老粉末，由于大果沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓都属于药食两用植物，对人体不会产任何毒副作用，适合各种人群；4、本发明制备的大果沙棘复合抗衰老粉末中含有的黄酮、蓝靛果花色苷、山葡萄花色苷和蓝莓花色苷，有效成分明确。5、本发明的产品制备工艺简单、成本低廉、经济效益良好，易于推广；6、本发明制备过程中采用真空冻干技术，操作在低温下运行，最大程度的保留了大果沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓制中的有效活性成分。具体实施例方式本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一本实施方式大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法按照如下步骤进行一、先将大果沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓分别用水浸泡，清洗、除去茎叶等杂质及腐烂果，再分别在真空度为0.40.7mbar、温度为-3(TC的条件下冻干24小时后再粉碎至40目；二、分别向粉碎后的原料加入体积浓度为70%的乙醇溶液，使料液比为lg:20mLlg:40mL，再用超声波提取2040min，然后以3000r/min的速度离心35min，将上层提取液和沉淀分离；三、将沉淀加入到体积浓度为70%的乙醇溶液中，使料液比为lg:20mL40mL，再用超声波提取2040min，然后以3000r/min的速度离心35min，将上层提取液和沉淀分离；四、重复步骤三的操作一次，再分别合并上层提取液并浓縮至提取物液体积的1/201/40，分别得到大果沙棘提取物、蓝靛果提取物、山葡萄提取物和蓝莓提取物；五、按照重量份分别取3050份的步骤四得到的大果沙棘提取物、10~30份的步骤四得到的蓝靛果提取物、1030份的步骤四得到的山葡萄提取物和1030份的步骤四得到的蓝莓提取物混合，再在40MPa条件下均质812min，然后在真空度为0.40.7mbar、温度为-3(TC的条件下将混合物冻干24小时，再粉碎成60目粉末；即得到大果沙棘复合抗衰老粉末。具体实施方式二本实施方式与具体实施方式一的不同点为步骤一中将原料分别在真空度为0.450.65mbar的条件下冻干。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。具体实施方式三本实施方式与具体实施方式一的不同点为步骤一中将原料分别在真空度为0.55mbar的条件下冻干。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。具体实施方式四本实施方式与具体实施方式二的不同点为步骤二中料液比为lg:25mL35mL。其它步骤及参数与具体实施方式二相同。具体实施方式五本实施方式与具体实施方式二的不同点为步骤二中料液比为lg:30mL。其它步骤及参数与具体实施方式二相同。具体实施方式六本实施方式与具体实施方式四的不同点为步骤二中用超声波提取2535min。其它步骤及参数与具体实施方式四相同。具体实施方式七本实施方式与具体实施方式四的不同点为步骤二中用超声波提取30min。其它步骤及参数与具体实施方式四相同。具体实施方式八本实施方式与具体实施方式六的不同点为步骤二中离心4min。其它步骤及参数与具体实施方式六相同。具体实施方式九本实施方式与具体实施方式八的不同点为步骤三中料液比为lg:25mL35mL。其它步骤及参数与具体实施方式八相同。具体实施方式十本实施方式与具体实施方式八的不同点为步骤三中料液比为lg:30mL。其它步骤及参数与具体实施方式八相同。具体实施方式十一本实施方式与具体实施方式九的不同点为步骤三中用超声波提取2535min。其它步骤及参数与具体实施方式九相同。具体实施方式十二本实施方式与具体实施方式九的不同点为步骤三中用超声波提取30min。其它步骤及参数与具体实施方式九相同。具体实施方式十三本实施方式与具体实施方式十一的不同点为步骤三中离心4min。其它步骤及参数与具体实施方式十一相同。具体实施方式十四本实施方式与具体实施方式十三的不同点为步骤四中浓縮至提取物液体积的1/251/35。其它步骤及参数与具体实施方式十三相同。具体实施方式十五本实施方式与具体实施方式十三的不同点为步骤四中浓縮至提取物液体积的1/30。其它步骤及参数与具体实施方式十三相同。具体实施方式十六本实施方式与具体实施方式十四的不同点为步骤五中按照重量份分别取3545份的步骤四得到的大果沙棘提取物、15~25份的步骤四得到的蓝靛果提取物、15-25份的步骤四得到的山葡萄提取物和15~25份的步骤四得到的蓝莓提取物。其它步骤及参数与具体实施方式十四相同。具体实施方式十七本实施方式与具体实施方式十四的不同点为步骤五中按照重量份分别取30份的步骤四得到的大果沙棘提取物、20份的步骤四得到的蓝靛果提取物、20份的步骤四得到的山葡萄提取物和20份的步骤四得到的蓝莓提取物。其它步骤及参数与具体实施方式十四相同。具体实施方式十八本实施方式与具体实施方式十六的不同点为步骤五中均质10min。其它步骤及参数与具体实施方式十六相同。具体实施方式十九本实施方式与具体实施方式十八的不同点为步骤五中在真空度为0.450.65mbar的条件下冻干。其它步骤及参数与具体实施方式十八相同。具体实施方式二十本实施方式与具体实施方式十八的不同点为步骤五中在真空度为0.50.6mbar的条件下冻干。其它步骤及参数与具体实施方式十八相同。具体实施方式二十一本实施方式与具体实施方式十八的不同点为步骤五中在真空度为0.55mbar的条件下冻干。其它步骤及参数与具体实施方式十八相同。具体实施方式二十二本实施方式大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法按照如下步骤进行一、先将大果沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓分别用水浸泡，清洗、除去茎叶等杂质及腐烂果，再分别在真空度为0.5mbar、温度为-30。C的条件下冻干24小时后再粉碎至40目；二、分别向粉碎后的原料加入体积浓度为70%的乙醇溶液，使料液比为lg:30mL，再用超声波提取30min，然后以3000r/min的速度离心4min，将上层提取液和沉淀分离；三、将沉淀加入到体积浓度为70%的乙醇溶液中，使料液比为lg:30mL，再用超声波提取30min，然后以3000r/min的速度离心4min，将上层提取液和沉淀分离；四、重复步骤三的操作一次，再分别合并上层提取液并浓縮至提取物液体积的1/30，分别得到大果沙棘提取物、蓝靛果提取物、山葡萄提取物和蓝莓提取物；五、按照重8量份分别取40份的步骤四得到的大果沙棘提取物、20份的步骤四得到的蓝靛果提取物、20份的步骤四得到的山葡萄提取物和20份的步骤四得到的蓝莓提取物混合，再在40MPa条件下均质10min，然后在真空度为0.5mbar、温度为-3(TC的条件下将混合物冻干24小时，再粉碎成60目粉末；即得到大果沙棘复合抗衰老粉末。本实施方式制备的每100克大果沙棘复合抗衰老粉末中的黄酮含量为400mg，蓝靛果花色苷含量为100mg，山葡萄花色苷含量为25mg，蓝莓花色苷含量为50mg。用本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末做动物试验说明其抗衰老的优越性，并与喂食单一大果沙棘黄酮、单一蓝靛果、山葡萄、蓝莓提取物、喂食含有沙棘和蓝靛果、山葡萄、蓝莓的多组分复配物和按顺序喂食沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓天提取物的小鼠作比较，所有试验均按照卫生部抗衰老功能检验方法进行-将喂养一个月小鼠随机分为8组，空白对照组、D-半乳糖衰老模型组、大果沙棘提取物组、蓝莓提取物组、蓝靛果提取物组、大果山葡萄提取物组、先后喂食各提取物组(按照先后顺序分别喂食大果沙棘提取物、蓝酶提取物、蓝靛果提取物和山葡萄提取物)、复合抗衰老粉末组(喂食本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末)。动物模型的建立将小鼠适应性喂养l个月后，除空白对照组外，模型组和各制剂组皮下注射25%的D-半乳糖溶液125mg'kg"，cTV连续28天；空白组每日皮下注射等剂量0.9%生理盐水1次，连续28d，制做衰老模型。大果沙棘、蓝酶、蓝靛果、山葡萄提取液冻干粉和抗衰老复合粉末制剂每天分别按20mg'kg—、bw"喂养老鼠，用蒸馏水溶解将其等体积灌胃，衰老模型组和对照组灌胃等体积的生理盐水。实验组灌胃不同剂量的受试物水溶液。动物自由摄食和饮水，每鼠日灌胃量O.lSmL'lOg+bw-1,连续灌喂28天。实验结果如下1、大果沙棘复合粉末及各提取物对小鼠体重的影响小鼠连续灌胃28天以后，和空白对照组相比，D-半乳糖衰老模型(I)组小鼠的体重增加缓慢，大果沙棘各复合粉末组实验组和生理盐水CTL组相比体重增加也比较缓慢，但增加量要高于D-半乳糖衰老模型组，具体结果见表1。表1的数据说明本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末可促进D-半乳糖衰老模型小鼠体重的增加，具有促进生长的作用，效果优于其它各组。表1大果沙棘复合粉末及各提取物对小鼠体重的影响(1±8，11=16)组喂食l天体重/g喂食28天体重/g增长率/%空白组21.94±1.4929.63±4.6335.05D-半乳糖衰老模型组22.02±1.6427.46±6.0524.70大果沙棘提取物组22.22±1.7627.94±3.9225.74蓝靛果提取物组23.53±0.9629.76±2.9026.48山葡萄提取物组22.02±0.5227.80±2,3826.24蓝莓提取物组22.70±1.4328.9±2.427.31先后喂食各提取物组21.1±1.0227.02±2.3528.09复合抗衰老粉末组21.52±0.9227.81±2.8529.222、大果沙棘复合粉末及各提取物对小鼠血清和组织匀浆SOD活性的影响与空白对照组相比，半乳糖衰老模型组小鼠血清和肝、脑器官组织中的SOD活性显著低于空白组(PO.Ol);和衰老模型组相比，灌服各复合提取物组小鼠的血清、肝脏和脑组织中S0D活性的明显增强(PO.05);但大果沙棘复合粉末组小鼠体内SOD活性最高，且和模型组相比差异显著(P0.05)，血清、肝脏和脑组织中SOD活性分别增加30.27%，22.71%和43.79%，具体结果如表2所示。表2的数据说明各提取物以及本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末均可提高半乳糖衰老小鼠血清、肝脏和脑中SOD活性,并抑制模型小鼠体内SOD活性的下降，且本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末的各成分具有协同增效的作用，本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末作用效果最好。表2大果沙棘复合粉末及各提取物对小鼠血清和组织匀浆SOD活性的影响(^士s,n-16)组全血SOD活性肝SOD活性脑SOD活性/u-mi;1/U.mgProteirf1AJ'mgProtein"空白组329.17土57.621)263.01士16.961)31.50士2.07"D-半乳糖衰老模型组179.42±18.70203,74±25.0422.79±1.86大果沙棘提取物组206.19±31.042)222.67±27.972'24.21±2.81'蓝靛果提取物组227.56土22.611)246.36士31.18')26.86±2.592)山葡萄提取物组209.12士16.501)229.89±24.872)25.24±2.192)蓝莓提取物组215.25士14.851)230.35±25.622)25.03±2.482)先后喂食各提取物组213.49土20.08"240.15士30.271)30.08士2.401)复合抗衰老粉末组234.49±26.491)4)250.45±37.181)4)32.77±3.001)3)注"尸<0.01，2)尸<0.05;3)尸<0.01,4)尸<0.05(表3，4同)3、大果沙棘复合粉末及各提取物对小鼠血清和组织匀浆GSH-Px活性的影响与空白对照组相比，半乳糖衰老模型组小鼠血清和肝、脑器官组织中的GSH-Px活性显著低于空白组(PO.01);和衰老模型组相比，灌服各复合提取物组小鼠的血清、肝脏和脑组织中GSH-Px活性的明显增强(PO.05);但大果沙棘复合粉末组小鼠体内GSH-Px活性最高，且和模型组相比差异显著(P<0.05)，血清、肝脏和脑组织GSH-Px活性分别增加15.74%，24.96%和24.82%，具体数据如表3所示。表3的数据说明各提取物以及本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末均可提高半乳糖衰老小鼠血清、肝脏和脑中GSH-Px活性,并抑制模型小鼠体内GSH-Px活性的下降，且本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末的各成分具有协同增效的作用，本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末作用效果最好。表3大果沙棘复合粉末及各提取物对小鼠血清和组织匀浆SOD活性的影响(X:tv^16)组全血GSH-Px活性肝GSH-Px活性/U-mgProteirf1脑GSH-Px活性AJ,mgProtein管1空白组188.81土15.191)83.40士5.82"5.59±0.17)D-半乳糖衰老模型组141.08±29.0763.33±5.134.15±0.31大果沙棘提取物组149.91±30.342)69.85±5.322)4.51±0.32'>蓝靛果提取物组158.61±30.422)76.28±9.40')5.33±0.711)4)山葡萄提取物组144.36±25.222)73.54±8.422)4.72士0.39')蓝莓提取物组152.59±21,212)72.99±7.582)4.50±0.402)先后喂食各提取物组158.54il8.291>3)75.30±9.841)3)4.50士0.27"3)复合抗衰老粉末组163.29±23.441)3>79.14±10.3'>4)5.41±0.741>3>4、大果沙棘复合粉末对小鼠血清和组织匀浆MDA含量的影响与空白对照组相比，半乳糖衰老模型组小鼠(I)血清、肝脏和脑中MDA含量显著升高(PO.01)，而灌而灌服各提取物组的小鼠血清、肝脏和脑中MDA含量均明显低于半乳糖衰老模型组(PO.05)，且大果沙棘复合粉末组的小鼠血清、肝脏和脑中MDA含量最低，分别比衰老模型MDA含量降低22.93%、24.59%和26.7%，具体数据如表4所示。表4的数据说明各复提取物均有降低半乳糖衰老小鼠血清、肝脏和脑组织中MDA含量作用，本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末各成分具有协同效果抗脂质氧化损伤、延缓衰老作用。ii表4大果沙棘复合粉末对小鼠血清和组织匀浆MDA含量的影响(xis，w-16)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>以上动物实验数据表明本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末能显著提高小鼠体重增长，说明其具有促进细胞系陈代谢、具有促进生长的作用；同时能显著提高D-半乳糖衰老模型小鼠的血液、肝脏和脑中的SOD和GSH-Px活性，降低衰老模型小鼠体内血液、肝脏和脑中过氧化脂质产物MDA的含量(户<0.05)，进而说明本实施方式制备的大果沙棘复合抗衰老粉末具有较好的清除氧自由基，防止脂质过氧化作用而产生的脂质过氧化物，对细胞代谢及功能具有保护作用，抗衰老作用明显。权利要求1、一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法按照如下步骤进行一、先将大果沙棘、蓝靛果、山葡萄、蓝莓分别用水浸泡，清洗、除去茎叶等杂质及腐烂果，再分别在真空度为0.4～0.7mbar、温度为-30℃的条件下冻干24小时后再粉碎至40目；二、分别向粉碎后的原料加入体积浓度为70％的乙醇溶液，使料液比为1g∶20mL～40mL，再用超声波提取20～40min，然后以3000r/min的速度离心3～5min，将上层提取液和沉淀分离；三、将沉淀加入到体积浓度为70％的乙醇溶液中，使料液比为1g∶20mL～40mL，再用超声波提取20～40min，然后以3000r/min的速度离心3～5min，将上层提取液和沉淀分离；四、重复步骤三的操作一次，再分别合并上层提取液并浓缩至提取物液体积的1/20～1/40，分别得到大果沙棘提取物、蓝靛果提取物、山葡萄提取物和蓝莓提取物；五、按照重量份分别取30～50份的步骤四得到的大果沙棘提取物、10～30份的步骤四得到的蓝靛果提取物、10～30份的步骤四得到的山葡萄提取物和10～30份的步骤四得到的蓝莓提取物混合，再在40MPa条件下均质8～12min，然后在真空度为0.4～0.7mbar、温度为-30℃的条件下将混合物冻干24小时，再粉碎成60目粉末；即得到大果沙棘复合抗衰老粉末。2、根据权利要求1所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤一中将原料分别在真空度为0.55mbar的条件下冻干。3、根据权利要求2所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤二中料液比为lg:25mL35mL。4、根据权利要求3所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤二中用超声波提取2535min。5、根据权利要求4所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤二中离心4min。6、根据权利要求5所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤四中浓縮至提取物液体积的1/25~1/35。7、根据权利要求6所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤五中按照重量份分别取35~45份的步骤三得到的大果沙棘提取物、15~25份的步骤三得到的蓝靛果提取物、1525份的步骤三得到的山葡萄提取物和15~25份的歩骤三得到的蓝莓提取物。8、根据权利要求7所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤五中均质10min。9、根据权利要求8所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤五中在真空度为0.50.6mbar的条件下冻干。10、根据权利要求8所述的一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，其特征在于步骤五中在真空度为0.55mbar的条件下冻干。全文摘要一种大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法，它涉及了一种复合抗衰老粉末的制备方法。本发明解决了现有制备抗衰老的产品的方法存在不能够保证提取出的有效成分配比合理和生产工艺繁琐的缺陷。本发明大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法按照如下步骤进行1.清洗，冻干，粉碎；2.超声波提取，离心；3.超声波提取，离心；4.重复步骤三，再分别合并上层提取液并浓缩；5.提取物混合，均质，然后冻干，再粉碎；即得到大果沙棘复合抗衰老粉末。本发明大果沙棘复合抗衰老粉末的制备方法能够保证提取出的有效成分配比合理，具有生产工艺简易的优点。文档编号A61K36/185GK101439124SQ20081020984公开日2009年5月27日申请日期2008年12月30日优先权日2008年12月30日发明者叶秋艳,岩焦,王振宇申请人:哈尔滨工业大学