专利名称：：一种肉苁蓉乙醇提取物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种以肉苁蓉提取物，尤其涉及一种肉苁蓉乙醇提取物，同时还涉及该肉苁蓉乙醇提取物的制备方法和应用。
背景技术：
：肝脏是全身代谢和营养的中心器官，碳水化合物、蛋白质(氨基酸)、脂肪的合成和分解主要通过肝脏完成。同时，有多种维生素通过肝脏进行合成、活化和储存。此外，肝脏还具有生物转化功能，大部分内源性和外源性代谢终末产物需要通过肝脏转化后方能以安全的形式排出体外。而肝脏疾病是影响人类健康的最为常见的疾病之一。各种有害因素导致的肝损伤主要有病毒性肝炎、酒精性肝炎和药物性肝炎等类型，其临床表现为肝坏死、脂肪肝、胆汁淤积、肝纤维化、肝硬化以及肝癌等。目前，对肝损伤的治疗仍是全球性的严峻课题。肉灰蓉又名灰蓉、大芸、金笋和地精，为列当科植物肉苁蓉(Cistanchedeset-icolaY.C.Ma)的带鳞片的干燥肉质茎。始载于《神农本草经》，列为上品，《本草经疏》、《本草汇言》和《本草求真》等也多有记载。李时珍曰"此物补而不峻，故有从容之兮。"肉苁蓉味甘、咸，性温，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功能，用于阳痿、不孕、腰膝酸软、筋骨无力和肠燥便秘。在我国已有1000多年的使用历史，有"沙漠人参"的美称。肉苁蓉在全世界约有22种，我国有6种，包括荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉、白花盐苁蓉、沙苁蓉和管花肉苁蓉。研究表明，肉苁蓉主要含苯乙醇苷类、环烯醚萜类、木脂素类、多糖、生物碱等多种成分。现代药理学表明，肉苁蓉除作为传统的补肾壮阳中药，还具有增强免疫力、抗衰老、增强记忆和抗氧化等多种药理活性。但对于肉苁蓉在治疗肝病方面应用尚未有任何报道。
发明内容本发明的目的在于提供一种中药肉苁蓉的乙醇提取物。同时，本发明的目的还在于提供一种肉苁蓉乙醇提取物的制备方法。本发明的目的还在于提供一种肉苁蓉乙醇提取物在制备治疗肝脏疾病方面的应用；以及在制备防治肝损伤的药物中应用。为了实现上述目的，本发明的技术方案采用了一种肉苁蓉乙醇提取物，该提取物由以下方法制备而得，将肉苁蓉干品，粉碎，用食用酒精按体积比为食用酒精肉苁蓉=(2—4):1冷浸2—4次，经过滤，合并滤液并减压回收溶剂即得肉苁蓉乙醇提取物。所述的冷浸为3次，其中第一次6—8，后两次2—4天。本发明的技术方案还采用了一种肉苁蓉乙醇提取物的制备方法，包括以下步骤肉苁蓉干品，粉碎，用食用酒精按体积比为食用酒精肉苁蓉=(2—4):1冷浸2—4次，经过滤，合并滤液并减压回收溶剂即得肉苁蓉乙醇提取物。所述的冷浸为3次，其中第一次6—8，后两次2—4天。本发明的技术方案采用了一种肉苁蓉乙醇提取物在制备治疗肝脏疾病方面的应用。同时还采用了一种肉灰蓉乙醇提取物在制备防治肝损伤的药物中应用。以肉苁蓉的乙醇提取物灌胃，以四氯化碳诱导肝损伤，检测小鼠血清中的ALT和AST值，以及肝组织匀浆中的SOD和MDA值，实验表明肉苁蓉乙醇提取物能有效降低四氯化碳肝损伤小鼠的ALT值，AST值和MDA值，且能显著的升高小鼠肝细胞的SOD活力值。证明肉苁蓉乙醇提取物具有很好的保护肝脏和防治肝损伤的作用。通过采用本发明的方法处理所得的肉苁蓉乙醇提取物，可以制成各种制剂，包括栓剂、片剂、丸剂、颗粒剂、膜剂、微囊剂、滴丸剂、气雾剂、酒剂、糖浆剂、口服液和注射剂。本发明所提供的肉苁蓉提取物对于治疗肝脏疾病、改善和恢复肝功能方面疗效显著，并可作为用于保护肝脏的保健品使用。具体实施例方式实施例1本实施例为肉苁蓉提取物——乙醇部位的提取方法，具体包括以下步骤:取肉苁蓉干品，粉碎，用食用酒精按体积比为3:l冷浸3次，第一次7天，后两次均为3天，过滤，合并滤液并减压回收溶剂即得肉苁蓉乙醇提取物。实施例2本实施例为肉苁蓉乙醇提取物的肝脏保护作用实验。方法体内法-四氯化碳急性肝损伤模型原理CCU是使用最早、最广泛的肝纤维化诱导剂，在急性肝损伤实验中也是常用药品，关于ccu的肝毒作用机制，研究较多，存在多种意见，但都一致公认，自由基的形成及引发的链式过氧化反应是其主要机制。对于CC14小鼠肝损伤模型的稳定性研究中，主要是通过不同剂量的ccu花生油，在注射后所致肝损伤，一定时间内检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT/GPT)、谷草转氨酶(AST/GOT)和肝组织中的超氧化物歧化酶SOD)、丙二醛(MDA)的含量来判定小鼠的肝损情况。ALT与AST主要分布在肝脏的肝细胞内，如果肝细胞坏死ALT和AST就会升高。但这两种酶在肝细胞内的分布是不同的。ALT分布在肝细胞浆，AST分布在肝细胞浆和线粒体中。急性肝炎和轻症的慢性肝炎，主要表现为ALT的升高。因此，AST/ALT<1;慢性肝炎的后期，肝硬化和肝癌患者，肝细胞的破坏程度是严重的，线粒体也受到了严重的破坏，因此，AST升高明显，AST/ALT>1甚至>2。ALT与AST主要分布在肝脏的肝细胞内，正常值均为040国际单位。如果肝细胞坏死，ALT和AST就会升高，是目前最常用的肝功能指标。仪器UV-2000型紫外可见分光光度计(尤尼可上海仪器有限公司)，CS-H1型混合器(北京博励阳科技公司)，LRH-150生化培养箱(上海一恒科技有限公司)，MultiskanMK3酶标仪(热电上海仪器有限公司)，TGL-16高速离心机(江苏金坛市中大仪器厂)，985370-395型组织匀浆机(BIOSREC，Mexico),各种规格移液器等。试剂联苯双酯滴丸(浙江万邦药业有限公司，批号080210)，ALT、AST、SOD、MDA检测试剂盒(均为南京建成生物工程研究所)，当飞利肝宁胶囊(四川美大康药业股份有限公司，生产批号080302)，考马斯亮蓝G250(上海化学试剂公司分装厂，批号20050115)，其他试剂均为分析纯。方法小鼠(20土2g)随机分为7组，每组10只，空白对照组、模型组每天灌胃(ig)给予0.5。/。的CMC-Na溶液20mL/kg;联苯双酯滴丸阳性对照组每天灌胃100mg/kg，当飞利肝宁胶囊阳性对照组每天灌胃1400mg/kg，肉苁蓉乙醇提取物高、中、低剂量组分别灌胃1000mg/kg、500mg/kg、250mg/kg给药8d，以末次给药2h后，除空白组外均按照O.lmL/10g腹腔注射0.5y。四氯化碳油溶液，禁食不禁水16h后，摘眼球取血并分离出血清，检测ALT和AST，分离出肝脏称重，并称量约300mg和约30mg的肝脏用0-3"C生理盐水匀浆成10n/。(测MDA)和P/。(测SOD)的肝脏匀浆液，测定MDA和SOD，考马斯亮蓝除蛋白。ALT、AST、SOD和MDA的测定均按照试剂盒的要求进行，实验数据x±s表示，实验统计采用spss10.O统计软件进行单因素方差分析。结果(1)肉欢蓉乙醇提取物对四氯化碳急性肝损伤小鼠ALT和AST的影响结果见表l，表中显示，肉苁蓉乙醇提取物剂量组的ALT和AST活力值均明显低于模型组，数据差异具有显著性意义。且随剂量的降低其降低的程度减小，说明存在剂量依赖性。(2)肉灰蓉乙醇提取物对四氯化碳急性肝损伤小鼠抗氧化能力的影响由表l数据可知，模型组的SOD水平明显低于空白对照组，且肉苁蓉剂量组的SOD水平明显高于模型组；甚至高于空白对照组，MDA水平明显低于模型组。表明肉苁蓉乙醇提取物可能通过氧化途径(升高SOD、降低MDA)来保护肝脏组织。表l肉灰蓉乙醇提取物对四氯化碳急性肝损伤的保护作用(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>各组(除样品空白组夕卜)和模型对照比较*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;模型组和空白对照组比较#PO.05,##P<0.01，絲弁PO.OOl实验结果表明，四氯化碳模型组与空白组对照组比较，血清中ALT、AST值和肝细胞中MDA值均明显升高，SOD值降低，说明造模成功，肉苁蓉乙醇提取物各剂量组均具有降低四氯化碳急性肝损伤小鼠的ALT、AST和MDA的值，同时提升小鼠的SOD活力水平。可见肉苁蓉乙醇提取物具有很好的保肝作用。实施例3肉灰蓉乙醇提取物片剂的制备制备方法取上述肉苁蓉提取物100g，加入淀粉250g、阿拉伯胶15g后加入80%的乙醇作润湿剂混匀制成软材，于6(TC的温度下干燥至含水量3%以下，然后将烘干的物料粉碎过14目筛，最后加入硬脂酸镁5g及滑石粉20g混匀后，过12目筛整粒，压片，质检、包衣，制成1000片。最后所应说明的是以上实施例仅用以说明，而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。权利要求1、一种肉苁蓉乙醇提取物，其特征在于该提取物由以下方法制备而得，将肉苁蓉干品，粉碎，用食用酒精按体积比为食用酒精肉苁蓉＝(2—4):1冷浸2—4次，经过滤，合并滤液并减压回收溶剂即得肉苁蓉乙醇提取物。2、根据权利要求l所述的肉苁蓉乙醇提取物，其特征在于所述的冷浸为3次，其中第一次为6—8天，后两次为2—4天。3、一种如权利要求1所述的肉苁蓉乙醇提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤肉苁蓉干品，粉碎，用食用酒精按体积比为食用酒精肉苁蓉=(2—4):1冷浸2—4次，经过滤，合并滤液并减压回收溶剂即得肉苁蓉乙醇提取物。4、根据权利要求3所述的肉苁蓉乙醇提取物，其特征在于所述的冷浸为3次，其中第一次6—8天，后两次2—4天。5、一种肉苁蓉乙醇提取物在制备治疗肝脏疾病方面的应用。6、一种肉苁蓉乙醇提取物在制备防治肝损伤的药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种肉苁蓉乙醇提取物及其制备方法和应用，该提取物由以下方法制备而得，将肉苁蓉干品，粉碎，用食用酒精按体积比为食用酒精∶肉苁蓉＝(2-4)∶1冷浸2-4次，经过滤，合并滤液并减压回收溶剂即得肉苁蓉乙醇提取物。以肉苁蓉的乙醇提取物灌胃，以四氯化碳诱导肝损伤，检测小鼠血清中的ALT和AST值，以及肝组织匀浆中的SOD和MDA值，实验表明肉苁蓉乙醇提取物能有效降低四氯化碳肝损伤小鼠的ALT值，AST值和MDA值，且能显著的升高小鼠肝细胞的SOD活力值。证明肉苁蓉乙醇提取物具有很好的保护肝脏和防治肝损伤的作用。文档编号A61P1/16GK101433595SQ20081023129公开日2009年5月20日申请日期2008年12月10日优先权日2008年12月10日发明者刘瑜新,宋艳丽,康文艺申请人:河南大学