专利名称：：替加环素冻干粉针剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及的是一种替加环素冻干粉针剂，可以作为复杂的成人腹内感染(cIAI)和复杂皮肤及其软组织感染(cSSSI)，包括复杂阑尾炎、烧伤感染、腹内脓肿、深部软组织感染及溃疡感染的治疗药物。技术背景耐药性细菌尤其是耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(Methicillin-ResistantStaphylococcusaureus简称MRSA)感染正在全球七大医药市场区域内肆虐蔓延。据英国国家审计报告显示，MRSA感染在欧洲的发病率正节节攀升，其中英国、爱尔兰、希腊和意大利的发病率最高，且在重症监护病房内高发。在美国，社区获得性MRSA感染呈上升趋势，而在英国的医院，MRSA感染也极其常见。根据最近的研究数据表明，英国国民健康服务体系(NHS)医院的感染性疾病患者中有9°/。是通过外科手术或门诊的途径而获得的。每年约有10万人遭受该感染的侵袭，其中死亡约5000人，且会造成l0亿英镑以上的花费。据此，英国政府及卫生部门官员于2005年4月在伦敦专门召开了一项"清洁医院高级会议"，旨在研究对付院内获得性感染的最好方法。从而可以看出，MRSA感染严重性及世界各国对其的重视。替加环素是已知甘氨酰环素类抗生素的一个新类。甘氨酰环素类抗生素制剂是美满霉素的衍生物。四环素类的作用机制是，与30S核糖体A位结合，阻止氨基酸转运RNA进入核糖体，从而阻止了氨基酸残基形成肽链。甘氨酰环素类与四环素类作用机制相似，但其亲和力比后者强。甘氨酰环素类与核糖体A位的另一个区域直接相互作用。替加环素抑制肽链形成，影响细菌结构形成及一些功能实现，从而杀灭细菌或抑制细菌繁殖。临床研究表明，替加环素可用于大肠埃希氏杆菌，粪肠球菌(仅万古霉素敏感株)，金黄色葡萄球菌(甲氧西林敏感和耐药株)，无乳链球菌，咽峡链球菌属(包括咽峡链球菌，咽峡链球菌中间型和星群链球菌)，脓性链球菌和脆弱拟杆菌，费氏柠檬酸杆菌，阴沟肠杆菌，大肠埃希氏杆菌，产酸克雷伯菌，肺炎克雷白菌,粪肠球菌(仅万古霉素敏感株)，金黄色葡萄球菌(仅甲氧西林敏感株)，咽峡链球菌属(包括咽峡链球菌，链球菌中间型和星群链球菌)，脆弱拟杆菌，多形拟杆菌,单形拟杆菌，普通拟杆菌，产气荚膜梭菌，微小消化链球菌等引起的成人腹内感染(cIAI)和复杂皮肤及其软组织感染(cSSSI)。具有抗菌谱广的特点。另外，研究还表明，替加环素能克服限制很多抗生素使用的两种主要耐药机制外排泵和核糖体保护。因此，替加环素不易产生耐药性，适用范围将会更广。替加环素半衰期长，单次用药半衰期约27小时，多次用药半衰期约42小时。因此，每12小时用药一次，使用比较方便。基于上述原因，替加环素毫无疑问地将成为超级抗生素。替加环素稳定性较差，其溶液易氧化降解并发生差向异构而破坏，加热会加速破坏，普通解决方案是将替加环素制备成冻千粉针剂，但我们发现，即便是制备成冻干制剂也不能保证其制备、运输和贮存过程中的稳定性，其制剂的有关物质还是有明显增加的，且临床使用时对配制和输注时间有苛刻要求，极不方便且对患者用药安全带来隐患。现有公知技术也没有改善以上缺陷的建议。
发明内容本发明的目的是针对以上不足之处提供一种替加环素冻干粉针剂及其制备方法，通过该方法可以大大提高替加环素溶液的稳定性，制备时无论是配制、分装还是冻干过程中替加环素溶液的有关物质均无明显增加，制备的替加环素冻干粉针剂在运输和贮存过程中的稳定性良好，临床使用时配伍溶液可以较长时间放置，使临床使用变得方便，同时也大大减小了因杂质(有关物质)增加给患者用药安全带来的隐患。替加环素的化学名称为(4S，4aS,5aR，12aS)-4，7-双(二甲氨基)-9-[(叔丁基氨基)乙酰胺基]-3，10,12，12a-四羟基-l,ll-二氧代-l，4,4a,5,5a,6，ll,12a-八氢并四苯-2-甲酰胺，结构式为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>分子式C29H39N508分子量585.65一种替加环素冻干粉针剂，由替加环素、右旋糖酐、无水亚硫酸钠和枸橼酸钠按下列重量配比组成，其中，替加环素10份，右旋糖酐10-90份，无水亚硫酸钠0.1-3份，枸櫞酸钠0.1-3份。一种替加环素冻干粉针剂，其pH值为7.09.0。一种替加环素冻干粉针剂，其pH值优选为7.58.5。一种替加环素冻干粉针剂的制备方法，具体的制备过程为-称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至28'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均勾，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至7.09.0之间，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检查合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22pm的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一4(TC时继续冷冻24小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45'C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25t:，保持该温度24小时后，关闭中隔阀，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。本发明一种替加环素冻千粉针剂及其制备方法，通过该方法可以大大提高替加环素溶液的稳定性，制备时无论是配制、分装还是冻干过程中替加环素溶液的有关物质均无明显增加，制备的替加环素冻干粉针剂有关物质含量更低，质量均一稳定，水分干燥彻底，在运输和贮存过程中的稳定性良好，临床使用时配伍溶液可以较长时间放置，使临床使用变得方便，同时也大大减小了因杂质(有关物质)增加给患者用药安全带来的隐患。本发明制备工艺简单，方便可行，重复性好，生产成本较低，很容易实现工业化大生产，从而可以产生可观的经济和社会效益。具体实施方式下面通过实施例来进一步说明本发明。在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。应该正确理解的是本发明的实施例仅仅是用于说明本发明而给出，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。实施例1:处方替加环素50g右旋糖酐50g无水亚硫酸钠4g枸橼酸钠5g注射用水加至2000ml共制成1000瓶称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至4'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均匀，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至7.8，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检査合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22)Lim的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一40'C时继续冷冻3小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45'C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25°C，保持该温度3小时后，关闭中隔阀，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。实施例2:处方替加环素50g右旋糖酐450g无水亚硫酸钠4g枸橼酸钠5g注射用水加至5000ml共制成1000瓶称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至2'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均匀，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至8.0，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检査合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22|_1111的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一4(TC时继续冷冻4小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45'C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25°C，保持该温度4小时后，关闭中隔阀，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。实施例3:处方替加环素50g右旋糖酐200g无水亚硫酸钠10g枸橼酸钠10g注射用水加至3000ml共制成1000瓶称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至6'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均匀，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至7.0，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检査合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22^111的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一40'C时继续冷冻3小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45"C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25°C，保持该温度4小时后，关闭中隔阀，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。实施例4:处方替加环素50g右旋糖酐100g无水亚硫酸钠2g枸橼酸钠3g注射用水加至2500ml共制成1000瓶称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至8'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均匀，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至8.5，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检査合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22nm的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一40'C时继续冷冻2小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45"C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25°C，保持该温度2小时后，关闭中隔阀，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。实施例5:处方替加环素50g右旋糖酐450g无水亚硫酸钠0.5g枸橼酸钠0.5g注射用水加至5000ml共制成1000瓶称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橡酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至2'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均匀，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至7.5，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检査合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22nm的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一4(TC时继续冷冻3小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45'C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25°C,保持该温度3小时后，关闭中隔阀，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。实施例6:处方替加环素50g右旋糖酐100g无水亚硫酸钠15g枸橼酸钠15g注射用水加至2500ml共制成1000瓶称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至4'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均匀，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至9.0，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检査合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22)irn的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一4(TC时继续冷冻4小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45'C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25'C，保持该温度4小时后，关闭中隔阔，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。实施例7:替加环素冻干粉针剂有关物质测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部)测定色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.2mol/L醋酸铵溶液(含0.01mol/L乙二胺四乙酸二钠)-N,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃(67:29:4)(用三乙胺调pH值为7.90±0.05)为流动相；检测波长为254nm。称取替加环素约25mg置于50ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，在水浴中加热1小时，冷却，摇匀，取20pl注入液相色谱仪，记录色谱图，理论板数按替加环素峰计算不低于1500，替加环素峰与差向替加环素峰(相对保留时间为0.70.9)的分离度应符合规定。精密量取替加环素冻干粉针剂内容物适量，加流动相溶解并稀释成每lml中约含替加环素0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取lml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20pl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%25%;精密量取供试品溶液与对照溶液各2(^1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，量取除辅料峰外各杂质峰面积之和，计算即得替加环素冻干粉针剂有关物质百分含量。实施例8:替加环素冻干粉针剂含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部)测定色谱条件与系统适用性试验用辛垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.2mol/L醋酸铵溶液(含0.01mol/L乙二胺四乙酸二钠)-N，N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃(67:29:4)(用三乙胺调pH值为7.90±0.05)为流动相；检测波长为254nm。称取替加环素约25mg置于50ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，在水浴中加热1小时，冷却，摇匀，取20^1注入液相色谱仪，记录色谱图，理论板数按替加环素峰计算不低于1500，替加环素峰与差向替加环素峰(相对保留时间为0.70.9)的分离度应符合规定。精密称取本品适量，加稀释液[水-N，N-二甲基甲酰胺(67:33)]溶解并稀释成每lml中约含O.lmg的溶液，精密量取注入液相色谱仪，记录色谱图；另取替加环素对照品适量，精密称定，加稀释液溶解并稀释制成每lml中约含替加环素0.1mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得替加环素冻干粉针剂的含量。实施例9:替加环素冻干粉针剂水分测定取替加环素冻干粉针剂内容物，照水分测定法(中国药典2005年版二部)实施例10:取实施例16分别制备的替加环素冻干粉针剂，再分别检査其外观、含量(测定方法如实施例8)、有关物质(测定方法如实施例7)和水分(测定方法如实施例9)，统计上述检验结果，其结果见表l。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>权利要求1、一种替加环素冻干粉针剂，其特征在由替加环素、右旋糖酐、无水亚硫酸钠和枸橼酸钠按下述重量配比组成，其中，替加环素10份，右旋糖酐10-90份，无水亚硫酸钠0.1-3份，枸橼酸钠0.1-3份。2、根据权利要求1所述的替加环素冻干粉针剂，其特征在于所述的替加环素冻干粉针剂的pH值为7.09.0。3、根据权利要求2所述的替加环素冻干粉针剂，其特征在于所述的替加环素冻干粉针剂的pH值为7.58.5。4、一种替加环素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于制备过程为称取处方量的替加环素、右旋糖酐、枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，先将右旋糖酐置无菌容器中，加80%量注射用水使之溶解，待注射用水冷却至28'C后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀，再加入替加环素，搅拌使之全部溶解并混合均勾，用lmol/L盐酸或lmol/L氢氧化钠溶液调pH至7.09.0之间，再加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附30分钟，抽滤脱炭，中间体检查合格后，加注射用水定容至全量。溶液经两道0.22|um的微孔滤膜过滤后送至无菌室中，灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞，装盘，置冻干箱中，关闭箱门，开机制冷，利用导热油使品温下降，当品温达一40'C时继续冷冻24小时，停导热油，开启冷凝器，当冷凝器温度达一45'C时，开启真空系统，进行升温升华干燥，最后干燥温度为25'C，保持该温度24小时后，关闭中隔阀，前箱真空度无明显下降后，停真空泵，通入氮气，压塞、出箱，用铝塑组合盖轧口，经质检合格后包装，即得。全文摘要本发明涉及一种替加环素冻干粉针剂，由替加环素、右旋糖酐、亚硫酸钠和枸橼酸钠按下述重量配比组成，其中，替加环素10份，右旋糖酐10-90份，无水亚硫酸钠0.1-3份，枸橼酸钠0.1-3份。该替加环素冻干粉针剂的pH值为7.0～9.0。其制备过程为先将右旋糖酐用加80％量注射用水溶解，冷却后加入枸橼酸钠及无水亚硫酸钠，溶解并搅拌均匀后加入替加环素，混匀，调pH至7.0～9.0之间，加入针用活性炭搅拌吸附并脱炭，定容。溶液经两道微孔滤膜过滤后灌装于西林瓶中，半加塞，装盘，冻干，通入氮气，压塞，出箱，轧口，经质检合格后包装，即得。文档编号A61K31/65GK101401812SQ200810234680公开日2009年4月8日申请日期2008年11月14日优先权日2008年11月14日发明者东叶,盛琼波,俊赵,陈卫东申请人:江苏奥赛康药业有限公司