一种^99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒及其制备方法

专利名称：一种^99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种99mTC-Tr0dat-1标记冻干品药盒及其制备方法。
背景技术：
放射性药物(radiopharmaceuticals)是指可用于临床诊断或治疗的放射性核 素或其标记的单质、化合物及生物制剂。利用它及相应的核医学显像设备，可以在 分子水平上实现对心血管、脑神经系统疾病及肿瘤的早期诊断，大大提高对此类疾 病的预防与治疗的准确率和成功率。由于放射性药物的特殊性(具有放射性和不稳 定性、半衰期短、有效期短等)，其快速制备方法及其方便有效的制剂研制是其走 向市场的重要环节，也是当前国际放射性药物研发的热点和难点，成为放射性药物 应用研究的重要内容，市场前景广阔。
""Tc标记药物是以冻干品配套药盒形式提供给医院或核药房(放射性药品即时 供应的企业)，由他们将配套药盒和放射性同位素""Tc标记后，即时提供给医院核 医学临床应用。这种方式适用于各种即时标记的放射性药物，可以有效保证药品质
现有技术中存在的问题如下
"7c标记冻干品药盒由多种组分组成的即时标记用药盒，配方中除主原料和
亚锡还原剂外，主要包含赋形剂、交换配体、助溶剂或分散剂以及保护剂等，以保
证标记药物的放射化学纯度。但通常药盒的稳定性不好，有效期只有3 6个月， 其中亚锡被氧化失效是一个普遍问题，此外，主原料药不稳定也严重导致标记药物 失败，因此配方的选择就显得尤其重要，既要保证药盒的稳定性以便于储存和运输、 又要保证即时标记药物的质量满足临床使用要求。
由于""Tc核素具有优良核性质(6. 02h半衰期短和140Kev的射线能量)、以发 生器的形式供应、使用方便、价格低廉等，在核医学SPECT显像上有着不可替代的 优越性。""Tc有着丰富多彩的化学性质，其化学价态可以从正七价到负一价，能与 各种配体形成种类繁多的金属配合物，因此""Tc标记药物的研究一直是一个十分 活跃的领域。在各种显像剂研制中，研究具有脂溶性、零电荷、能穿透血脑屏障并 具有明确生物靶向的""Tc放射性药物是十分活跃但又具有巨大挑战性的一个研究领域。截至目前，只有9，c-Trodat-l成功用于人脑受体的临床显像。
作为第一个成功用于人脑多巴胺转运蛋白显像的99mTc标记的受体显像剂 99mTc-Trodat-1 (结构如下)，是由美籍华裔科学家孔繁渊教授研究小组于1996年 首次报道。至今，在国内外已做了大量的临床研究，发表了 500余篇相关文章，台 湾于2005年已将99mTc-Trodat-r商品化，并在台湾上市。大量研究证明， "7c-Trodat-l在体内能特异性地与脑纹状体区多巴胺转运蛋白(DAT)结合；脑内 代谢稳定，纹状体与周围脑组织对比度好，获得清晰的脑断层图像，它在帕金森病、 注意力缺陷一一多动障碍病、老年痴呆症、药物成瘾等多种病症的诊断、机理、疗 效评价等多个方面有广泛的临床应用前景。
Trodat-l 99mTc-Trodat-1
作为受体显像剂""Tc-Trodat-l的99mTc标记Trodat-1药盒，其性能和质量是 "7c-Trodat-l能否成功走向市场的关键。目前，国内外均处于临床前或临床研究 阶段，由于Trodat-l配体(""Tc-Trodat-l，结构如上)的不稳定性，使得Trodat-l 药盒的研究极为复杂，配方也不尽相同，截止目前，在Trodat-1药盒制备方面还 存在关键的质量和技术问题，并未得到很好解决，例如如何阻止药盒中微量亚锡 的失效、延长药盒保质期，如何安全有效减少药盒中Trodat-l用量以节约成本、 但同时防止其分解产物影响脑显像，如何选择有效的稳定剂和赋形剂而保障药盒中 各组分的稳定、防止其相互作用而降低标记药物放射化学纯度，以及如何减少标记 物由于脂溶性高而使得注射液粘壁损失等问题亟待有效的解决。
因此，提供一种含有有效助溶剂、稳定剂和赋形剂，增加Trodat-1 (base) 溶解性、防止药盒中微量亚锡失效、稳定药盒各组分以延长药盒保质期、减少 ""Tc-Trodat-l标记物粘壁损失的冻干品药盒就成为该技术领域急需要解决的问 题。

发明内容
本发明的目的之一是提供一种含有有效助溶剂、稳定剂和赋形剂，增加 Trodat-l (base)溶解性、防止药盒中微量亚锡失效、稳定药盒各组分以延长药盒 保质期、减少"，c-Trodat-1标记物粘壁损失的冻干品药盒。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的
一种99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒，其配方如下30-150重量份的Trodat-1， 30-150重量份的SnCl2.2H20， 500-5000重量份的EDTA (乙二胺四乙酸钠盐)， 500-5000重量份的GH (葡庚糖酸钠)，10000-30000重量份的环糊精。
一种优选技术方案，其特征在于所述Trodat-1为100重量份，所述SnCl2. 2H20 为80重量份，所述环糊精为20000重量份，所述EDTA为1000重量份，所述GH 为1000重量份。
一种优选技术方案，其特征在于所述环糊精为P或Y环糊精，所述标记冻干药 盒中溶液的PH为5 — 7。
一种优选技术方案，其特征在于所述Trodat-1为30 150 Pg/ml，所述 SnCl2. 2H20为30~150吗/ ml，所述环糊精为10 30 mg / ml，所述EDTA为0. 5~5.0 mg /ml，所述GH为0.5 5.0mg/ral。
一种优选技术方案，其特征在于所述Trodat-1为100吗/ ml，所述SnCl2. 2H20 为80吗/ml，所述环糊精为20mg/ml，所述EDTA为1 mg / ml，所述GH为1 mg /ml。
本发明的另一目的是提供一种上述99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒的制备方 法，其步骤如下
(1) 溶液配制
A. 30-150重量份的Trodat-1， 500-5000重量份的EDTA (乙二胺四乙酸 钠盐)，500-5000重量份的GH (葡庚糖酸钠)，10000-30000重量份的 环糊精溶于50000重量份水中；
B. 称取30-150重量份的SnCl2. 2H20溶于1000重量份的HC1溶液(O. 1M);
C. 将步骤B所得溶液加入到步骤A所得溶液混合后，用NaOH(O. IN)或 HC1 (0. 1N)溶液或用磷酸缓冲液调pH值5_7之间，然后加水至100000 重量份；
(2) 过滤分装D. 将步骤C所得溶液用0. 22Mm无菌过滤膜过滤；
E. 以l.Oml/瓶分装到西林瓶中； (3)冷冻干燥
F. 将步骤E所得西林瓶置于冷冻干燥机内冷冻干燥24_48小时，
G. 充入氮气、压盖取出，得到冻干品药盒。 一种优选技术方案，其特征在于所述环糊精为(3或Y环糊精。 一种优选技术方案，其特征在于所述步骤(1)中所述A溶液的具体配方为
所述Trodat-1为30~150吗，所述环糊精为10 30mg，所述EDTA为0. 5~5.0mg， 所述GH为0.5~5.0 mg;溶于50ml水中；所述步骤(1)中的所述B溶液中所述 SnCl2.2H20为30-150 pg，溶于1. Oml HC1溶液(0. 1M);所述步骤(1)中所述C 溶液，最后加水至100.0ml。 本发明的有益效果
Trodat-1盐酸盐(Trodat-1 3HC1)固体无论在低温还是室温下极易分解变 色，均无法稳定保存，通常以其水溶液形式冷冻保存，因此制备药盒时很难准确定 量；而非盐酸盐形式的Trodat-1 (base)相对较为稳定，易于定量，本发明选择 它作为原料进行药盒的制备。本药盒组份中，首次选择环糊精做助溶剂，有效解决 Trodat-1 (base)在水中的溶解度问题，同时环糊精还起到赋形剂的作用。
本发明的""Tc-Trodat-l标记冻干品药盒首次选择((3或y等)环糊精做稳定剂和 助溶剂，同时也是赋形剂；将冻干药盒中的助溶剂、稳定剂、保护剂和赋形剂基于 一种化合物一环糊精，在保障放射化学纯度的前提下，降低了药盒制作的复杂性， 增加药盒的稳定性。具体地说，由于环糊精的加入，使得本发明的冻干品药盒具有 如下优点
(1)组分简单、合理；(2)配制容易、质量控制简单方便；(3)稳定性好、 易于运输；(4)保持了标记产品的有效性，更重要的是有效抑制了药物在玻璃容器 上粘壁所造成的严重丢失。
下面通过附图和具体实施方式
对本发明做进一步说明，但并不意味着对本发明 保护范围的限制。


图1是本发明实施例中GH的量与标记率之间的关系图。
图2是本发明实施例中EDTA的加入量与标记率之间的关系图。图3是本发明实施例中pH与标记率之间的关系图。 图4是本发明实施例中Trodat-1的加入量与标记率之间的关系图。 图5是本发明实施例中SnCl2. 2H20的加入量与标记率之间的关系图。
具体实施方式
实施例
1. (5或Y环糊精存在下的Trodat-l药盒最佳组分确定 首先确定环糊精的量20mg环糊精/ral;根据冻干药盒的一般要求，每支药 盒的赋形剂的量一般应该10-20mg，本发明人对于环糊精的用量对标记率的影响进 行了实验，结果显示，5 —30mg之间均可以达到上述要求，不影响药物标记。综合 考虑环糊精在药盒中的多重的作用，选择20rag/ml。 1. 1 GH和EDTA的量对trodat-l标记的影响
(1) GH的量对标记的影响
配制一定体积的Trodat-1待标记溶液每mL含有1.0rag EDTA、 80Pg SnCl2.2H20和100Pg Trodat-1的PBS溶液(pH6. 0)，将上述溶液每瓶1. 0mL分装 于若干lOmL西林瓶中，将不同量的GH分别加入上述各西林瓶内，每瓶含GH0.0 20mg，再分别加入1. OmL新淋洗的"mTcCV溶液(5~10mCi/mL)(总体积为2. OmL)， 立即置于沸水浴中加热30分钟，取出后室温放置冷却，分别用TLC (薄层色谱层 析法)和HPLC测定产物的放射化学纯度。GH的加入量与标记率之间的关系如图1 所示。从图l可以看出，GH的量从l 20mg，均可以得到满意的结果。
(2) EDTA的量对标记的影响
配制一定体积的TRODAT-l待标记溶液每mL含有l.OmgGH、 80Pg SnCl2.2H20 和100Pg Trodat-1的PBS溶液(pH6. 0)，将上述溶液每瓶1. OmL分装于若干10mL 西林瓶中，将不同量的EDTA分别加入上述各西林瓶内，每瓶含EDTA 0.0 10mg， 再分别加入1.0mL新淋洗的"mTc(V溶液(5 10mCi/mL)(总体积为2.0mL)，立即 置于沸水浴中加热30分钟，取出后室温放置冷却，分别用TLC和HPLC方法测定产 物的放射化学纯度。EDTA的加入量与标记率之间的关系如图2所示。从图2可以 看出，EDTA的最佳含量为1-5mg。
1. 2 pH对标记的影响
分别配制不同pH值(4 8)的PBS溶液，按照下述各组分用量选择合适配方， 配制成不同pH值的待标记溶液，分别加入l.OmL新淋洗的"mTc(V溶液(5 10mCi/mL)(总体积为2.0mL)，立即置于沸水浴中加热30分钟，取出后室温放置 冷却，分别用TLC和HPLC方法测定产物的放射化学纯度。pH值与标记率之间的关 系如图3所示，由图3可以看出，pH的最佳值为5-7。 1. 3 Trodat-l的量对标记的影响 配制待标记溶液方法同1.2，只是改变Trodat-l含量，进行标记，比较 Trodat-l的量对标记的影响。Trodat-l的量与标记率(放射化学纯度)之间的关 系如图4所示，可以看出，Trodat-l的含量大于15Pg时，99mTc-Trodat-1的放射 化学纯度均大于90%。 1.4亚锡量对标记的影响 配制待标记溶液方法同1.2，只是改变亚锡含量，进行标记，比较亚锡量对标 记的影响。SnCl2.2H20的加入量与标记率之间的关系如图5所示，可以看出， SnCl2. 2H20的最佳含量为30-150 (Pg)。 2. Trodat-l药盒制备及其稳定性试验 2.1药盒制备及"mTc标记产物的质量控制 [1]配方l: (1)药盒配方l及制备工艺流程
Trodat-l 30 |ag/ml
EDTA 0.5 mg/ml
GH 5.0 mg/ml
SnCl2.2H20 30 ng/ml
Y环糊精 10mg/ml
HC1 (0. 1N) pH 5 冻干药盒制备流程(100瓶)
溶液配制
A. 按照配方l将Trodat-1、 EDTA、 GH和环糊精溶于50ml水中；
B. 称取配方1规定量的SnCl2. 2H20溶于1. 0ml HC1溶液(0. 1M);
C. 将B加入到A混合后，用HCl调pH值5之间，然后加水至100.0ml; 过滤分装
D. 将C溶液用0. 22Pm无菌过滤膜过滤；
E. 以1. 0ml/瓶分装到10ml西林瓶中； 冷冻干燥
F. 将E置于冷冻干燥机内冷冻干燥24—48小时；
G. 充入氮气、压盖后取出，压外盖后得到冻干品药盒。
(2)药盒的标记方法及放射化学纯度测定99raTc-Trodat-1标记方法
取上述冻干药盒一支，将新淋洗的高锝["7c]酸钠注射液1 3ral约1850MBq (50mCi)注入药盒中，充分振摇，使冻干物溶解，立即放入沸水浴中加热30 一40分钟，取出冷却至室温，即可得到^Tc-Trodat-1 (1)。 [2]配方2: (1)药盒配方2及制备工艺流程
Trodat-1 100 |ig/ml
EDTA 1 mg/ml
GH 1 mg/ml
SnCl2.2H20 80吗/ml
y环糊精 20mg/ml 磷酸缓冲液 pH6
冻干药盒制备流程(100瓶) 溶液配制
A. 按照配方将Trodat-l、 EDTA、 GH和环糊精溶于50ml水中;
B. 称取配方量的SnCl2. 2H20溶于1. 0ml HC1溶液(0. 1M);
C. 将B加入到A混合后，用磷酸缓冲液调pH值6之间，然后加水至 100. 0ml;
过滤分装
D. 将C溶液用0. 22陶无菌过滤膜过滤；
E. 以1. 0ml/瓶分装到10ml西林瓶中； 冷冻干燥
F. 将E置于冷冻干燥机内冷冻干燥24—48小时；
G. 充入氮气、压盖后取出，压外盖后得到冻干品药盒。 (2)药盒的标记方法及放射化学纯度测定 99mTc-Trodat-1标记方法
取上述冻干药盒一支，将新淋洗的高锝["Tc]酸钠注射液l 3ml约1850MBq (50mCi)注入药盒中，充分振摇，使冻干物溶解，立即放入沸水浴中加热30 一40分钟，取出冷却至室温，即可得到"，c-Trodat-1 (2)。 [3]配方3: (1)药盒配方及制备工艺流程
Trodat-l 150 ng/ml
EDTA 5.0mg/ml
GH 0,5 mg/ml
SnCl2.2H20 150 pg/ml
"/环糊精 30mg/ml
Na0H(0.1N) pH7 冻干药盒制备流程(100瓶)
溶液配制
A. 按照配方将Trodat-1、 EDTA、 GH和环糊精溶于50ml水中；
B. 称取配方量的SnCl2. 2H20溶于1. 0ml HC1溶液(0. 1M);
C. 将B加入到A混合后，用Na0H (0. IN)溶液调pH值7之间，然后加水 至跳0ml;
过滤分装
D. 将C溶液用0. 22|im无菌过滤膜过滤；
E. 以1. 0ml/瓶分装到10ml西林瓶中； 冷冻干燥
F. 将E置于冷冻干燥机内冷冻干燥24—48小时；
G. 充入氮气、压盖后取出，压外盖后得到冻干品药盒。 (2)药盒的标记方法及放射化学纯度测定
99mTc-Trodat-1标记方法
取上述冻干药盒一支，将新淋洗的高锝["了c]酸钠注射液l 3ml约1850MBq (50mCi)注入药盒中，充分振摇，使冻干物溶解，立即放入沸水浴中加热30 一40分钟，取出冷却至室温，即可得到""Tc-Trodat-1 (3)。
放射化学纯度测定选用薄层层析法或Radio-HPLC方法测定标记产物的放射化学纯度
A. 薄层层析法
层析液氯仿甲醇(v : v) =9 : i
支持物聚酰氨片
Rf值,c(V、 9*Tc02和""Tc-EDTA的Rf值为0; 99mTc-Trodat-1的Rf值为0. 8 1. 0;
放射化学纯度(％)=(前沿计数xiooy。) +总计数。
B. Radio-HPLC方法(R-HPLC): HPLC条件
流动相..ImM NH4AC水溶液/乙腈=1/9; 色谱柱C18， 5u， 4.6X250匿； 流速lmL/rain; Rt: 8 —lOmin。 2. 2药盒及标记产物的稳定性实验
(1) 药盒保存温度和时间
将上述冻干药盒Trodat-1分别于-20和25摄氏度存放，不同时间间隔取出， 检测标记物的放射化学纯度。
结果显示按照上述配方所制备Trodat-l药盒，在室温下存放两周、冷冻保 存7个月以上，仍可以达到90%以上的标记率和放化纯度，满足运输和临床使用要 求；相比之下，不含环糊精的药盒，同样条件下的标记率只有40 70%，不能满足 临床使用要求(大于90%)。
(2) 标记产物稳定性及残留量
选用TLC和R-HPLC方法，测定标记产物99mTc-Trodat-l的放射化学纯度随放 置时间变化情况，并考察在注射器中的残留(粘壁)。
结果显示室温放置6小时后，标记率和放化纯均大于90%，满足临床使用要 求。粘壁试验显示，标记后的溶液只有小于5%的放射性残留在注射器内，而不加 环糊精(相转移催化剂)的,c-TR0DAT-l标记液，则有大于20%的放射性残留量。
本发明首次成功将环糊精用于Trodat-l药盒制备，优化了药盒组方，提高了药 盒稳定性、减少了注射液的粘附损失，达到预期目的。
权利要求
1、一种99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒，其配方如下30-150重量份的Trodat-1，30-150重量份的SnCl2.2H2O，500-5000重量份的EDTA，500-5000重量份的葡庚糖酸钠，10000-30000重量份的环糊精。
2、 根据权利要求1所述的99raTc-Trodat-1标记冻干品药盒，其特征在于所 述Trodat-1为100重量份，所述SnCl2. 2H20为80重量份，所述环糊精为20000 重量份，所述EDTA为1000重量份，所述葡庚糖酸钠为1000重量份。
3、 根据权利要求2所述的99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒，其特征在于所 述环糊精为P或y环糊精，所述标记冻干药盒中溶液的PH为5 — 7。
4、 根据权利要求3所述的99aTc-Trodat-1标记冻干品药盒，其特征在于所 述Trodat-1为30~150 pg/ml，所述SnCl2. 2H20为30~150 / ml，所述环糊精为 10 30mg/ml，所述EDTA为0. 5~5.0 mg / ml，所述葡庚糖酸钠为0.5~5.0 mg / ml。
5、 根据权利要求4所述的""Tc-Trodat-1标记冻干品药盒，其特征在于所 述Trodat-1为100 / ml,所述SnCl2. 2H20为80 / ml，所述环糊精为20mg/ml， 所述EDTA为1 mg / ml ，所述葡庚糖酸钠为1 mg / ml 。
6、 如权利要求1 — 5中任一项所述的99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒的制备方 法，其步骤如下(1) 溶液配制A. 30-150重量份的Trodat-1， 500-5000重量份的EDTA, 500-5000重 量份的葡庚糖酸钠，10000-30000重量份的环糊精溶于50000重量份 水中；B. 称取30-150重量份的SnCl2. 2H20溶于1000重量份的0. 1M的HC1溶 液；C. 将步骤B所得溶液加入到步骤A所得溶液混合后，用0. IN的Na0H或 0. IN的HC1溶液或磷酸缓冲液调pH值5 — 7之间，然后加水至100000 重量份；(2) 过滤分装D. 将C溶液用0.22Pm无菌过滤膜过滤；E. 以1.0ml/瓶分装到西林瓶中；(3)冷冻干燥F. 将E置于冷冻干燥机内冷冻干燥24—48小时，G. 充入氮气、压盖取出，得到冻干品药盒。
7、 根据权利要求6所述的99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒的制备方法，其特 征在于所述环糊精为P或Y环糊精。
8、 根据权利要求7所述的99mTc-Trodat-l标记冻干品药盒的制备方法，其特 征在于所述步骤(1)中所述A溶液的具体配方为所述Trodat-1为30~150 pg， 所述环糊精为10 30mg，所述EDTA为O. 5~5.0mg，所述葡庚糖酸钠为0.5~5.0 mg; 溶于50ml水中；所述步骤(1)中的所述B溶液中所述SnCl2.2H20为30 150吗， 溶于1. Oml的0. 1M的HC1溶液；所述步骤(l)中所述C溶液，最后加水至100. Oml。
全文摘要
本发明涉及一种^99mTc-Trodat-1标记冻干品药盒及其制备方法，其配方如下30-150重量份的Trodat-1，30-150重量份的SnCl₂·2H₂0，500-5000重量份的EDTA，500-5000重量份的葡庚糖酸钠，10000-30000重量份的环糊精。本发明首次成功将环糊精用于Trodat-1药盒制备，优化了药盒组方，提高了药盒稳定性、减少了注射液的粘附损失，达到预期目的。
文档编号A61K51/00GK101422623SQ200810239259
公开日2009年5月6日 申请日期2008年12月5日 优先权日2008年12月5日
发明者孔繁渊, 霖 朱 申请人:北京协核吉成科技有限公司