专利名称：用于治疗癌症相关病症的6.7-二烷氧基喹唑啉衍生物的制作方法
用于治疗癌症相关病症的6. 7- 二烷氧基喹唑啉衍生物本发明涉及6，7_ 二烷氧基喹唑啉衍生物，或其药学可接受的盐，其具有抗癌活 性，并且因此能用于人的治疗方法中。本发明还涉及制备所述喹唑啉衍生物的方法，以及含 有该喹唑啉衍生物的药物组合物。过去对于细胞增殖疾病诸如银屑病和癌症的大多数治疗方案利用了抑制DNA合 成的化合物。这些化合物对细胞有毒性，并且仅当它们对迅速分裂的肿瘤细胞显示选择性 时才可以得到它们的有益效果。近年来，已经发现细胞可能因为其DNA的一部分转化为癌基因而变成癌性的，即， 所述癌基因是在激活时导致恶性肿瘤细胞形成的基因(Bradshas，Mutagenesis (诱变)， 1986，1 :91)。几种癌基因编码酪氨酸激酶并且某些生长因子受体也是酪氨酸激酶(Larsen 等，Ann. Reports in Med. Chem.(医学与化学年度评论)1989，第13章)。受体酪氨酸激酶在启动细胞复制的生物化学信号的传递中很重要。它们拥有细胞 外结合结构域和细胞内部分，所述细胞外结合结构域针对生长因子诸如表皮生长因子，所 述细胞内部分作为蛋白中的磷酸化酪氨酸氨基酸并且因此影响细胞增殖的激酶起作用。还 已知这些激酶经常存在于常见的人类癌症诸如乳腺癌(Saimbury等，Brit, J. Cancer (英 国癌症杂志)，1988，58 :458)，胃肠道癌症诸如结肠癌、直肠癌和胃癌(Bolen等，Oncogene Res.(癌基因研究)，1987，1 149)中。发现在酪氨酸激酶活性(TK活性)在恶性细胞中比 在正常细胞中可更为常见地被检测到(Hunter，Cell (细胞)，1987，50 823)。近年来，已经显示具有TK活性的表皮生长因子受体(EGFR)在许多人类癌症中过 度表达，所述癌症诸如脑癌、肺鳞状细胞癌、膀胱癌、胃癌、乳腺癌、头颈部癌、食管癌、甲状 腺癌等(W. J. Gullick,Brit. Med. Bull.(英国医学通报)1991，47 :87)。表皮生长因子受体 (EGFR)，是受体酪氨酸激酶(RTK)家族的成员，其包括四种受体Erbl/HERl，Erb/HER2，Erb/ HER3 和 Erb/HER4。抑制EGFR-TK活性的重要策略已经开发了小的合成分子(Arteaga CL, Exp. Cell Res.(实验细胞研究)，2003，284 122-130)。已经广泛地研究了某些喹唑啉衍生物如吉非 替尼(gefitinib)(易瑞#TM(Iressa )，阿斯利康(Astra Zeneca))，厄洛替尼(erlotinib) (0SI-774,特罗凯 (Tarceva ))，PD-183805，PKI-166，EKB-569，PD-168393，CGP-59362 对几种类型癌症的可能治疗选择(Baselga等，Oncology (肿瘤学)2002，63 :6_16，Cohen RB.，(临床结直肠癌),2003,2 246-251)。欧洲专利申请，即 EP 0566226，EP0602851A:，EP 0635507Αι;ΕΡ 0635498Αι;Ε0 0520722A!公开了由于其TK抑制特性而具有抗癌活性的某些 喹唑啉衍生物。美国专利US 5475001，US 5457105，US 5616582，US 5770599，US5747498，US 6900221等涉及具有如下结构特征的喹唑啉衍生物，所述结构特征诸如在喹唑啉核中在4 位中具有诸如取代的苯胺基结构部分并且在6位和7位中具有各种官能化烷基。具体地，US5457105，US 5616582 涉及 N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧 基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺(吉非替尼)，以及US 5747498和US 690221 涉及N-(3-乙炔基苯基)-6，7_双(2-甲氧基乙氧基)-4_喹唑啉胺(厄洛替尼)。WO20005/070909, WO 2007/060691A2和WO 06/090413涉及这两种极性抗癌药的合成或多晶
型中的变化。鉴于所述喹唑啉类化合物所提供的巨大潜力，我们开始合成并筛选了大量的具有 新结构特征的新化学实体。已经令人惊奇地和出人意料地发现在第4位处具有3-乙炔基 苯胺基并且在6和7位中被特别地取代的烷氧基的喹唑啉，当与喹唑啉类药物的其他杰出 成员相比时，其具有较强的和特殊的抗增殖特性。此外，令人惊奇地，本发明的化合物的毒 性较低，并且其安全性非常有益于治疗性应用。本发明中所述的新化学实体表示为通式结 构(I)并且以前从未被合成，且其治疗性益处和安全性也从未被研究过。 且 R2 = OCH3. OC2H5 化合物(I)是 NRC-2694，当R1 = -O-CH2-CH2-CH2- Ν
且 R2 = OCH3 时NRC-2694 的单盐酸盐是 NRC-2694A。NRC-2694 的二盐酸盐是 NRC-2694B。本发明 的新化合物尤其是NRC-2694与此类的杰出药物相比，具有如下所详述的出人意料的优良 的抗癌/抗增殖特性，并且提供其他的治疗益处1)较低的抑制浓度在MTT增殖测定法中的抑制浓度(IC5tl)表明该值的范围为 40-90ng/ml (100_200nm)，而厄洛替尼盐酸盐的值为 836ng/ml (1945nm)。通过 western 印迹 分析和基质胶侵袭性实验(Matrigel invasion assay)已经证实了相同的结果。2)完全的肿瘤消退通过在植入A549人肺肿瘤细胞的裸鼠中以10mg/Kg的剂量 施用所述化合物观察到完全的肿瘤消退。在对比研究中，甚至以100mg/Kg剂量，厄洛替尼 盐酸盐都不能诱导完全的肿瘤消退。植入A549的小鼠的肺组织的肉眼检查和萤光素酶表 达试验均证实了相同的观察结果。3)药物功效有效剂量的评价表明本发明的典型化合物，即，NRC-2694的值(ED5tl) 为6. 3mg/Kg，相比使用厄洛替尼盐酸盐获得的值为22mg/Kg。
使用NRC-2694观察到100%的疗效，而在厄洛替尼盐酸盐的情况下仅为50_60%。4)其他独特的指征本发明的化合物，典型地为NRC-2694，显示其他的指征，如下 调ErbB2，ErbB3, ErbB4和VEGFR受体的表达水平。此特殊的、非常有前途的和令人惊奇的 结果完全是出人意料的，并且使用厄洛替尼盐酸盐未发现此结果。5)安全性本发明的化合物，典型地为NRC-2694，其安全性是十分有前途的，出人 意料地很宽，并且是非常有益的。因此，NRC-2694显示的最大耐受剂量(MTD)为500mg/Kg， 相比厄洛替尼盐酸盐为2000mg/Kg。NRC-2694所提供的宽治疗窗由其LDtl值证明，其LDtl值为2000mg/Kg，相比厄洛替 尼盐酸盐为500mg/Kg。对NRC-2694的LD5tl值不能精确地获得，而对厄洛替尼盐酸盐测定 其值为805mg/Kg。下面的实施例的给出是为了说明制备本发明的化合物的方法及其优良的生物学 功效，因此其不应该被认为限制本发明的范围或精神。(路线图-ι) 路线图-I
实施例-1N-(3-乙炔基苯基)-7_甲氧基-6-[3-(4_吗啉基)丙氧基]_4_喹唑啉胺(I， NRC-2694)的制备i)4-氯-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基_4_喹唑啉胺(IIIa)的制备向清洁的和干燥的装配有机械搅拌器、回流冷凝器、均压滴液漏斗和温度计插座 的5升四颈圆底烧瓶中装入氯仿(3000ml)，二甲基甲酰胺(30ml)，然后加入根据公开为 WO. 2005/070909A!的PCT国际申请的实施例1中所给出的方法获得的7-甲氧基-6-(3-吗 啉代丙氧基)-3，4-二氢-喹唑啉-4-酮(IIa) (150g)。缓慢地加入草酰氯(120g)，并将 反应物质加热至回流温度，并且在回流温度下保持约5小时。通过HPLC试验发现反应结 束。通过施加低真空蒸馏掉溶剂氯仿和过量的草酰氯。反应物质冷却至约40°C并加入 氯仿(300ml)，并且再次施加低真空蒸馏出溶剂。反应混合物冷却至室温，并且加入乙腈 (3000ml)，搅拌10-15分钟，在氮气气氛中保持以继续进行下一步骤。ii)N-(3_乙炔基苯基)-7_甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]_4_喹唑啉胺(I， NRC-2694)的制备向含有来自上述步骤(i)的乙腈中的含氯化合物的装配有机械搅拌器、回流冷 凝器和温度计插座的5升四颈圆底烧瓶中在约10-15分钟内缓慢地加入3-乙炔基苯胺 (69g)，将反应物质加热至回流温度，并且在回流温度下保持约4小时。通过HPLC试验发现 反应结束。然后反应物质冷却至25-35°C并过滤，用乙腈(500ml)洗涤滤饼并使滤饼干燥。将上述干燥的粗制化合物加入至另一 5升圆底烧瓶中，并加入水(2500ml)，并且 使温度缓慢地升至60-65°C，用稀氢氧化钠溶液将反应物质的pH调节至10-12。将分离的 固体产物过滤，并用水洗涤，在70-75°C下干燥得到173. Og为灰白色固体的N-(3-乙炔基苯 基)-6-(3_吗啉丙氧基)-7-甲氧基-4-喹唑啉胺。iii)从甲苯重结晶制备N-(3-乙炔基苯基)-7_甲氧基-6-[3-(4_吗啉基)丙氧 基]-4-喹唑啉胺。向装配有机械搅拌器、回流冷凝器和温度计插座的5升四颈圆底烧瓶中加入甲 苯(3750ml)，然后加入通过上面给出的实施例(1)中所述的方法获得的N_(3_乙炔基苯 基)-6- (3-吗啉代丙氧基)-7-甲氧基-4-喹唑啉胺(50g)。将反应混合物加热至90-95°C， 使得固体完全溶解。然后进行碳处理并过滤。滤液冷却至25-35°C，保持约1小时并过滤， 将物质干燥得到40. 15g为白色结晶固体的N-(3-乙炔基苯基)-7_甲氧基-6-[3-(4-吗啉 基)丙氧基]-4-喹唑啉胺。mp: 185-187 °C纯度99.72% (HPLC)IR(KBr) (cm-1) 3280. 9,2954. 6,2810. 3，1620. 1，1604. 2，1572. 1，1527. 7，1505. 2， 1484，1430. 5，1388. 2，1247. 5，1211. 2，1140. 3，1110. 4，1010. 3,953. 4,859. 6,784. 2Cm_11HNMR(300MHZ ；DMS0-d6) :9.57(s，lH) ；8. 48 (s, 1H) ；7. 99 (s, 1H) ；7. 86—7. 92 (d， 2H) ；7. 34-7. 44 (t，1H) 7. 18-7. 21 (s，2H) ；4. 15—4. 21 (t，4H) ；3. 92 (s，3H) 3. 5-3. 6 (t，4H)； 2. 4-2. 52 (m, 5H) ；1. 95-2. 01 (m, 2H).质量419·4(M+1)实施例-2
从乙腈中重结晶N-(3-乙炔基苯基)-7_甲氧基-6-[3_(4-吗啉基)丙氧 基]-4-喹唑啉胺向装配有机械搅拌器、回流冷凝器和温度计插座的2升三颈圆底烧瓶中加入乙 腈(1000ml)，然后加入由上面给出的实施例(1)中所述的方法获得的N-(3-乙炔基苯 基)-7_甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺(25g)。反应物质缓慢地加热至 65-70 V，使得固体物质完全溶解并且进行碳处理和过滤反应物质。将滤液转移至另一圆底 烧瓶中并缓慢地冷却至10_15°C，并且在该温度下保持30分钟。将物质过滤，用冷乙腈洗涤 滤饼并干燥后得到20. 50g为白色结晶固体的N-(3-乙炔基苯基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗 啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺。mp: 186-187 °C纯度99.68% (HPLC)实施例-3从乙酸乙酯中重结晶N-(3-乙炔基苯基)-7_甲氧基-6-[3-(4_吗啉基)丙氧 基]-4-喹唑啉胺向装配有机械搅拌器、回流冷凝器和温度计插座的3升三颈圆底烧瓶中加入乙酸 乙酯(2000ml)，然后加入由上面给出的实施例(1)中所述的方法获得的N-(3-乙炔基苯 基)-7_甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺(25g)。反应物质缓慢地加热至 65-70°C，使得固体物质完全溶解并且进行碳处理和过滤反应物质。将滤液转移至另一圆底 烧瓶中并缓慢地冷却至10_15°C，并且在该温度下保持30分钟。将结晶物质过滤，用冷乙酸 乙酯洗涤滤饼并干燥后得到20. 95g为白色结晶固体的N-(3-乙炔基苯基)-6-(3_吗啉代 丙氧基)-7_甲氧基-4-喹唑啉胺。mp: 185-187 °C纯度99.7% (HPLC)实施例-4N- (3-乙炔基苯基)-7-甲氧基-6-[3- (4-吗啉基)丙氧基]_4_喹唑啉胺单盐酸 盐(NRC-2694A)的制备向装配有机械搅拌器、回流冷凝器和温度计插座等的500ml三颈圆底烧瓶中加入 异丙醇(250ml)，然后加入由实施例1中给出的方法获得的N-(3-乙炔基苯基)-7_甲氧 基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺(5g)。反应物质的温度升高至65-70°C，使得固 体物质溶解并且进行碳处理和过滤。将滤液冷却至约55-60°C，并且当向其加入1摩尔当量 的溶解在异丙醇溶液中的HCl-gas时析出单盐酸盐。反应物质在回流温度下保持约2小时， 然后冷却至室温，过滤和干燥得到5. Ig为白色结晶物质的N- (3-乙炔基苯基)-6- (3-吗啉 代丙氧基)-7-甲氧基-4-喹唑啉胺单盐酸盐。纯度99.8% (HPLC)HCl 含量(化学):8·19% (理论值8· 01% )IR(KBr) (cnf1) 3407，3305，3259. 5，2934，2619，1625. 9，1593. 8，1579. 9，1530. 8， 1512，1476. 9，1392. 2，1356. 8，1282. 1，1242. 1，1207. 9，1141. 3，1100. 8，1076. 1，1042. 1， 1026. 5，1011. 5,957. 7,941. 5,922. 1,857. 3,852,838. 1,796,782. 4
实施例-5N- (3-乙炔基苯基)-7-甲氧基-6-[3- (4-吗啉基)丙氧基]_4_喹唑啉胺二盐酸 盐(NRC-2694B)的制备向装配有机械搅拌器、回流冷凝器和温度计插座等的500ml三颈圆底烧瓶中加入 异丙醇(250ml)，然后加入由实施例1中给出的方法获得的N-(3-乙炔基苯基)-7_甲氧 基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺(5g)。反应物质的温度升高至65-70°C，使得 所有固体物质溶解。进行碳处理并过滤。将滤液冷却至约55-60°C，并且当向其加入2摩尔 当量的溶解在异丙醇溶液中的HCl-gas时析出二盐酸盐。反应物质在回流温度下保持约2 小时，然后冷却至室温，过滤和干燥得到5. 5g为白色结晶物质的N-(3-乙炔基苯基)-7-甲 氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺二盐酸盐。纯度99.78% (HPLC)HCl 含量(化学)14. 9 % (理论值14. 83 % )IR(KBr) (cm-1) 3406. 8,3194. 1,2942. 7,2681. 9,2623. 6，1633. 7，1566. 2，1528. 6， 1512. 5，1438. 6，1359. 6，1282. 3，1218. 3，1157. 1，1132. 7，1105. 9，1075. 6，1001. 9,942. 1， 875. 3,816. 1,787. 2实施例-6最大耐受剂量(MTD)和急性毒性评价(表1&2)在雄性和雌性Swiss Albino小鼠(重量20_25gm)中进行MTD早期引用研究 (early citation study)。根据OE⑶准则420条进行研究，研究在9am-5pm之间进行以避免昼夜节律周期， 化合物厄洛替尼和NRC-2694用2%阿拉伯树胶悬浮，化合物以5，50，300和2000mg/Kg的剂 量(po) 口服给药。根据死亡率施用中间剂量。每小时观察动物的总行为变化直至药物施 用后6小时。如果有的话，进一步观察动物直至72小时的死亡率。将存活的动物尸检以评 估化合物通过胃肠道的吸收。厄洛替尼和NRC-2694的急性毒性在雄性和雌性小鼠中进行。口服施用500，750， 1000和2000mg/Kg的剂量。每组由5只小鼠组成。观察动物的死亡率持续至化合物给药后 14天。将存活的动物尸检以评估化合物通过胃肠道的吸收。使用Litchfield 和 Wilcoxon (J. Pharmacol. Exp. Ther.(药理学和实验治疗学杂 志)1949，96 99-113)测定 LD50。毒性研究的结果制成表-1&2。发现厄洛替尼盐酸盐的最大耐受剂量(MTD)为 500mg/Kg (po)，而对于NRC-2694，为2000mg/Kg (po)。类似地，发现厄洛替尼盐酸盐的LD。为 500mg/Kg(po)，NRC-2694为2000mg/Kg。因此，已经确定了 NRC-2694的出人意料和令人惊 奇的超过厄洛替尼盐酸盐的低毒性和安全性。表-1厄洛替尼盐酸盐和NRC_2694(小鼠)早期引用研究的比较(mtd)
表-2小鼠中的急件LD=研究(单剂量7天观察结果) ^LD0 在7天结束时没有观察到死亡。实施例-7体外和体内评价研究以及治疗功效的评价样品使用厄洛替尼作为对照参考药物，与作为阳性对照的此药物比较，检测本发 明的新化合物的生物学活性。i) MTT增殖测定 MTT [3- (4，5- 二甲基噻唑_2_基)_2，5_ 二苯基四唑溴鐺]测定法，首先由Mosmarm 在1983年描述，该测定基于来自活细胞的线粒体脱氢酶裂解淡黄色MTT的四唑鐺环并且形 成主要对细胞膜不通透的深蓝色甲腊晶体的能力，由此导致其在健康细胞内的积累。通过 加入去垢剂溶解细胞使晶体释放，使该晶体溶解。存活细胞的数目与生成的甲腊产物的水 平直接成正比。然后可使用简单的比色测定法对颜色进行定量。使用O-lOOOng/ml浓度的 厄洛替尼和测试化合物在A549和H1299细胞中完成此测定。试验方案基于ATCC并且根据 生产厂商的使用说明书(目录编号30-1010K)。从MTT增殖测定，确定本发明的化合物的抑制浓度(IC5tl)为40-90ng/ ml (100-200nm)，而用作阳性对照的“厄洛替尼盐酸盐”的值高达836ng/ml (1945nm)。因此 得出结论，本发明的新化合物的效力为厄洛替尼盐酸盐的至少10倍。ii) Western 印迹分析(图 _1)使用从MTT增殖测定中确定的理想药物浓度来处理在适当的培养基中的 1χ106Η1299或A549细胞72hr，然后提取细胞溶胞产物，并在10% SDS PAGE凝胶上在还原 条件下分级。凝胶点样在经处理的尼龙膜(Biorad)上，并免疫探测EGFR，P13K和AKT。观察到EGFR表达以剂量依赖方式的显著变化。80ng(190nm)浓度的NRC-2694导 致的EGFR表达的抑制与800ng(1860nm)浓度的厄洛替尼盐酸盐相当。因此，显然NRC-2694 有10倍水平的效力。iii)基质胶侵袭性测定(图-2)
在各种浓度的NRC化合物(如通过MTT测定所确定)的存在下使用改良的Boyden 小室测定(Boyden chamber assay)来评估H1299和A549细胞的体外侵袭性。细胞用这些 化合物处理48小时。IxlO6细胞悬浮在600 μ 1补充了 0. 2% BSA的无血清培养基中并放 置在包被以基质胶(0. 7mg/ml)的 transwell 小室(Corning Costar Fisher Scientific cat#07-200-158，匹兹堡，PA)的上室中。小室的下室充以200 μ 1血清培养基，并使细胞迁 移24h。温育后，将细胞固定并用Hema-3染色，如前所述进行定量(Mohanam等，1993)。将 迁移的细胞定量为侵袭性百分比。化合物NRC-2694显示以剂量依赖的方式显著地减少侵 袭性。iv)裸鼠中皮下肺肿瘤的体内评价(图-3):在裸鼠的右后肢侧面植入2x106A549细胞。在观察到肿瘤(> 2mm)后，小鼠口服 或经腹膜内给予测试化合物治疗，包括用作阳性对照的厄洛替尼盐酸盐。100mg/Kg剂量的 厄洛替尼盐酸盐被鉴定为基线剂量。测量肿瘤尺寸，并且在使用10mg/Kg剂量NRC-2694治疗的小鼠中观察到肿瘤的完 全消退。然而在类似地用即使以100mg/Kg剂量水平的厄洛替尼盐酸盐治疗的对照组中肿 瘤仍然存在。因此已经确定本发明的化合物(NRC-2694)具有10倍的功效优越性。ν)治疗后从裸鼠获得的肺组织的评价(图_4)检验从用各种浓度的厄洛替尼盐酸盐和NRC-2694经口服/腹膜内途径治疗的植 入A549萤光素酶表达细胞的裸鼠获得的肺中的残余肿瘤。在NRC-2694治疗组中观察的肿瘤的完全消退，而在厄洛替尼盐酸盐治疗组中肿 瘤仍然存在，由此确定了本发明的化合物的出人意料的和令人惊奇的优良功效。vi)肺组织中肿瘤肉眼检查(图_5)通过肺内注射A549细胞而植入至裸鼠中。小鼠使用厄洛替尼盐酸盐和NRC 2694 以2. 5和20mg/Kg的剂量经口服/腹膜内途径治疗。每天药物治疗后30天，将小鼠处死， 并获取肺。肺组织固定在10%缓冲的甲醛中，石蜡包埋并切片。将切片根据法定试验方案 进行H&E染色以观察实体或弥漫性肿瘤。在所有剂量水平上NRC 2694治疗组均表现得好于厄洛替尼盐酸盐处理组，因此 确定NRC 2694的优良功效。vii)使用A549萤光素酶表达细胞植入的裸鼠(图6&7)观察用各种浓度的厄洛替尼盐酸盐和NRC 2694通过口服和腹膜内途径治疗用 A549萤光素酶表达细胞植入的裸鼠的肿瘤，并且图像观察结果在图6和图7中给出。观察 到NRC 2694治疗组表现得远好于厄洛替尼盐酸盐治疗组。在用NRC 2694治疗42天结束 时没有观察到肿瘤，而在厄洛替尼盐酸盐治疗组中残余肿瘤仍然存在，两者均通过口服和 腹膜内途径治疗。viii)来自裸鼠体内研究的疗效对作为治愈的动物数目与研究中使用的动物数目的比率的疗效制表，并且显示在 表3中。表-3 NRC-2694和厄洛替尼盐酸盐对肺癌的疗效 可以看出在NRC 2694时该比率接近100%，而在厄洛替尼盐酸盐的研究组时该比 率为 40-60%。ix) ED5。的评价基于肺切片和肿瘤消退研究评价ED5tl值。通过口服途径对NRC 2694计算的值为 6. 3mg/Kg，而对厄洛替尼盐酸盐获得的值为22mg/Kg。因此确定了本发明的化合物的优良功效。χ)其他受体诸如 HER-I，HER-2, HER-3, HER-4 和 VEGFR 的体外研究(图 _8)为了确定NRC 2694对EGFR家族(Erb/HER)的各种其他的受体的作用，人肺癌细 胞A549用各种浓度的NRC 2694以及厄洛替尼盐酸盐处理以进行并排比较。通过western 印迹分析测定Erb-I，Erb-2, Erb-3, Erb-4和VEGFR的水平。观察到NRC 2694有效地下调Erb B2, Erb B3, Erb B4和VEGFR的水平，而厄洛替 尼盐酸盐没有此指征。上面提及的受体表达水平的额外的抑制指征清楚地证明了本发明的 主要分子，即NRC 2694，的出人意料和令人惊奇的特性。xi)结论因此，在上面的试验中与厄洛替尼盐酸盐的比较，确定了本发明的化合物的出人 意料的，令人惊奇的和优良的抗肿瘤特性和额外的治疗潜力。实施例-8下列是用于人类预防性治疗应用的含有式NRC-2694的化合物或其药学可接受的盐的说明性的代表性药物剂型
权利要求
一种式(I)的喹唑啉衍生物，其中或其药学可接受的盐。FPA00001183532100011.tif
2.如权利要求1所述的式(I)的喹唑啉衍生物，其中 )0且R2 = 0CH3(NRC-2694)或其药学可接受的盐。
3.如权利要求2所述的式(I)的喹唑啉衍生物，其中所述药学可接受的盐是单盐酸盐 (NRC-2694A)。
4.如权利要求2所述的式(I)的喹唑啉衍生物，其中所述药学可接受的盐是二盐酸盐 (NRC-2694B)。
5.一种在温血动物中产生针对EGF型受体酪氨酸激酶的抑制作用的方法，包括向所述 动物施用有效量的如权利要求1-4所述的式(I)的喹唑啉衍生物或其药学可接受的盐。
6.一种在温血动物中产生针对如Erb-2、Erb-3、Erb-4的Erb族受体酪氨酸激酶敏感 性癌症的抑制作用的方法，包括向所述动物施用有效量的如权利要求1-4所述的式(I)的 喹唑啉衍生物或其药学可接受的盐。
7.—种在温血动物中产生针对EGF型受体酪氨酸激酶的抑制作用的方法，包括向所述 动物施用有效量的如权利要求2所述的式(I)的喹唑啉衍生物NRC-2694或其药学可接受 的盐。
8.一种在温血动物中产生针对如Erb-2、Erb-3、Erb-4的Erb族受体酪氨酸激酶敏感 性癌症的抑制作用的方法，包括向所述动物施用有效量的如权利要求2所述的式(I)的喹 唑啉衍生物NRC-2694或其药学可接受的盐。
9.一种在温血动物中产生针对VEGF型受体酪氨酸激酶敏感性癌症的抑制作用的方 法，包括向所述动物施用有效量的如权利要求2所述的式(I)的喹唑啉衍生物NRC-2694或 其药学可接受的盐。
10.一种在温血动物中产生针对EGF型受体酪氨酸激酶敏感性癌症的抑制作用的方 法，包括向所述动物施用有效量的如权利要求3和4所述的喹唑啉衍生物NRC-2694A和 NRC-2694B。
11.一种在温血动物中产生针对如Erb-2、Erb-3、Erb-4的Erb族受体酪氨酸激酶敏感 性癌症的抑制作用的方法，包括向所述动物施用有效量的如权利要求3和4所述的喹唑啉 衍生物 NRC-2694A 和 NRC-2694B。
12.一种在温血动物中产生针对VEGF型受体酪氨酸激酶敏感性癌症的抑制作用的方 法，包括向所述动物施用有效量的如权利要求3和4所述的喹唑啉衍生物NRC-2694A和 NRC-2694B。
13.一种制备如权利要求1所述的式(I)的喹唑啉衍生物或其药学可接受的盐的方法，包括a)式II的喹唑啉 与磷酰氯或草酰氯反应得到式(III)的4-氯喹唑啉 b)上面式III的4-氯喹唑啉与3-乙炔基苯胺缩合反应得到式(I)的喹唑啉衍生物 且 R2 = OCH3, OC2H5
14. 一种制备如权利要求2所述的式(I)的喹唑啉衍生物或其药学可接受的盐的方法， 包括a)式(IIa)的喹唑啉 与磷酰氯或草酰氯反应得到相应的式(IIIa)的4-氯喹唑啉 b)上面式(IIIa)的4-氯喹唑啉与3-乙炔基苯胺缩合反应得到喹唑啉衍生物 NRC-2694。
15.一种制备喹唑啉衍生物NRC-2694的方法，所述方法基本上如上面引用的实施例 1-3中所描述。
16.一种制备NRC-2694A单盐酸盐的方法，所述方法基本上如上面引用的实施例4中所 描述。
17.一种制备NRC-2694B 二盐酸盐的方法，所述方法基本上如上面引用的实施例5中所 描述。
18.—种评价如权利要求1所述的式(I)的喹唑啉衍生物的最大耐受剂量(MTD)和急 性毒性的方法，所述方法基本上如上面引用的实施例6中所描述。
19.一种评价如权利要求1所述的式(I)的喹唑啉衍生物的体外、体内和治疗效果的方 法，所述方法基本上如上面引用的实施例7中所描述。
20.一种药物组合物，包括如上面权利要求1-19中任意一项所述的式(I)的喹唑啉衍 生物，或其药学可接受的盐。
全文摘要
鉴于喹唑啉类化合物所提供的巨大潜力，我们开始合成并筛选了大量的具有新结构特征的新化学实体。已经令人惊奇地和出人意料地发现在第4位处具有3-乙炔基苯胺基并且在6和7位中被特别地取代的烷氧基的喹唑啉，当与喹唑啉类药物的其他杰出成员相比时，具有较强的和特殊的抗增殖特性。此外，令人惊奇地，本发明的化合物的毒性较低，并且其安全性非常有益于治疗性应用。本发明中所述的新化学实体表示为通式结构(I)并且以前从未被合成，且其治疗性益处和安全性也从未被研究过。当结构为(A)时，化合物(I)为NRC-2694。且R2＝OCH3 (A)
文档编号A61P35/00GK101918374SQ200880124819
公开日2010年12月15日 申请日期2008年1月18日 优先权日2008年1月18日
发明者南纳帕内尼·文卡伊亚·乔杜里, 博勒帕里·纳格什瓦拉·拉奥, 布詹拉·拉奥·阿迪巴特拉·卡利·萨蒂亚, 拉马纳达·乔蒂·普拉萨德 申请人:纳特科制药有限公司