专利名称：：注射用12种复合维生素脂质体及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及12种复合维生素脂质体冻干制剂及其制备方法。
背景技术：
：维生素又名维他命，是维持人体生命活动必需的一类有机物质，也是保持人体健康的重要活性物质。维生素在体内的含量很少，但在人体生长、代谢、发育过程中却发挥着重要的作用，缺乏时可导致代谢障碍，而引致多种疾病。目前国内生产的维生素制剂大多以单独成分给药，复合维生素制剂较少，而且剂型多为片剂和胶囊的口服制剂，大大限制了人体对不同维生素的吸收，致使用药麻烦，也可能影响用药安全。包含水溶性维生素和脂溶性维生素的复合维生素制剂，可以使人体全面吸收所需维生素，克服了单一维生素的作用局限性，更易被患者接受。然而，大多数维生素均不稳定，极易氧化，见光易分解变质，长期储存后失效，现有技术披露的制备含水溶性维生素和脂溶性维生素的剂型时，也容易造成维生素分解，影响其疗效。因此，采用一种新方法制备复合维生素制剂成为当前迫切需要。现有技术CN200610054218.0公开了一种制含多种维生素的冻干制剂的方法，水溶液维生素和脂溶性维生素是先与辅料混合，未形成脂质体，不利于最终产品的稳定性。本发明的制备方法与其不同，通过用脂质体进行包裹维生素，并采用特定的缓冲体系，经证明进一步提高其稳定性。
发明内容针对目前大多维生素稳定性差，存在单一性和质量问题的缺陷，本发明提供了一种复合维生素脂质体冻干制剂及其制备方法，通过用脂质体进行包裹，解决了稳定性问题并提高其疗效。本发明采用如下技术方案一种复合维生素脂质体冻干制剂，是由大豆卵磷脂和甘氨胆酸所形成的脂质体包封12种维生素制成的复合物维生素冻干制剂。12种维生素是选自视黄醇棕榈酸酯、四水合硫胺磷酸酯、核黄素磷酸钠、盐酸吡多辛、氰钴胺、胆骨化醇、抗坏血酸、消旋a-生育酚、D-生物素、烟酰胺、叶酸、右泛醇<制备1000瓶单位剂型所需的以上各组分的重量配比为:视黄醇棕榈酸酯280420万单位烟酰胺41.450.6g四水合硫胺磷酸酯.22~6.38g叶酸332496mg核黄素磷酸钠'106.24g右泛醇14.5417.77mg盐酸吡卩多辛氰钴胺4.95~6.05g4.8~7.2mg大豆卵磷脂100150g甘氨胆jU0170g胆骨化醇抗坏血酸17.6万单位112.5~137.5g枸橼!《0g消旋a-生育酚9.181L22g甘氨酸200300gD-生物素55'282'5mg枸橼酸和枸橼酸钾的溶液构成优选的缓冲系统。甘氨酸作为优选的冻干支持剂。本发明还提供了一种制备上述12种复合维生素脂质体冻干制剂的方法，其特征在于包括如下步骤(1)称取大豆卵磷脂、甘氨胆酸，用适量的氯仿使其溶解，混合均匀，然后将形成的溶液减压去除氯仿，制备脂质膜；(2)配制pH值为6.08.0的枸橼酸和枸橼酸钾的缓冲液，将该缓冲液加入到步骤(1)中制的脂质膜中，待其完全水化后，用均浆机制备脂质体，备用；(3)称取12种维生素，将烟酰胺、四水合硫胺磷酸酯、叶酸、核黄素磷酸钠、右泛醇、盐酸吡哆辛、氰钴胺、抗坏血酸、D-生物素溶解于注射用水，将视黄醇棕榈酸酯、胆骨化醇、消旋a-生育酚溶解于无水乙醇，将水溶液和无水乙醇溶液分别经微孔滤膜过滤除菌后，混合均匀，在5060。C水浴保温；(4)将步骤(2)中制得的脂质体加入到步骤(3)制得的预热的维生素溶液中，再加入甘氨酸，506(TC水浴中保温2030分钟，不时振摇，然后经微孔滤膜过滤除菌；(5)将过滤除菌后半成品冻干，得成品。上述所述的制备方法中，选用0.22pm的微孔滤膜过滤除菌。脂质体属微型胶囊的新剂型。脂质体的主要成分是磷脂和甘氨胆酸，二者都有亲水和疏水两种基团，其分子相互间隔，定向排列形成疏水基向内，亲水基向外的类脂质双分子层。在脂质体内部为水相，水溶性药物可以被包封在脂质体的内部。在磷脂双分子层中有一个疏水的微环境，疏水性物质或兼性分子可与脂质双层疏水基团结合而嵌入脂质体的膜内或插入脂质体膜中。脂质体的基本组分磷脂是生物体内固有的成分，无毒、无免疫原性，可以在体内降解，因此脂质体是作为药物载体的最佳选择之一。现有技术CN200610054218.0公开了一种制含多种维生素的冻干制剂的方法，先将大豆磷脂与水溶性维生素用乙醇溶解，再把单独制得甘氨胆酸的水溶液，将两溶液混合之后再加入水溶性维生素的水溶液，最后过滤、冻干。该方法中，大豆磷酸甘氨胆酸作为增溶剂使用，产生包裹维生素胶束，并未完全包封维生素，容易产生分解。本发明是先制得脂质体，再将水溶性维生素和脂溶性维生素的热混合物同时进行包封，能实现维生素的完全包封，更利于其避免分解和增进溶解，实现静脉给药，不仅解决了水溶性和脂溶性维生素不能同时给药的缺陷，还解决了多种维生素同时存在的质量稳定性问题，药效作用显著提高，而且毒副作用也相对减少。本发明的脂质体的粒径位于150nm200nm之间，药物包裹率可达99.9%，生产过程中关键的均粒步骤可由高效的高压均浆器来完成，简单易操作，促进该制剂的工业化生产。本发明提供的复合维生素脂质体制剂，进行稳定性试验考察，在高温60°C、光照4500Lx条件下放置IO天，各项检测指标均无明显变化；在高温40°C、相对湿度75%士5%条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化；在高温25'C、相对湿度60%±10%条件下长期试验18个月，各项检测指标没有明显变化。本发明提供的复合维生素脂质体制剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检查，均符合规定，安全性得到证明，具体实验结果参见下文。具体实施方式实例112种复合维生素脂质体冻干制剂配方IOOO瓶单位剂型所需要组分的量视黄醇棕榈酸酯420万单位烟酰胺50.6g四水合硫胺磷酸酯&38g叶酸496mg核黄素磷酸钠6.24g右泛醇17.77mg盐酸吡p多辛6.05g大豆卵磷脂150g氰钴胺7.2mg甘氨胆酸170g胆骨化醇26.4万单位枸橼酸35g抗坏血酸137.5g枸橼酸钾60g消旋a-生育酚H.22g甘氨酸，gD-生物素82.5mg制备工艺(1)称取大豆卵磷脂、甘氨胆酸，用适量的氯仿使其溶解，混合均匀，然后将形成的溶液减压去除氯仿，制备脂质膜；(2)配制pH值为6.0~8.0的枸橼酸和枸橼酸钾的缓冲液，将该缓冲液加入到步骤(1)中制的脂质膜中，待其完全水化后，用均浆机制备脂质体，备用；(3)称取12种维生素，将烟酰胺、四水合硫胺磷酸酯、叶酸、核黄素磷酸钠、右泛醇、盐酸吡哆辛、氰钴胺、抗坏血酸、D-生物素溶解于注射用水，将视黄醇棕榈酸酯、胆骨化醇、消旋a-生育酚溶解于无水乙醇，将水溶液和无水乙醇溶液分别经微孔滤膜过滤除菌后，混合均匀，在506(TC水浴保温；(4)将步骤(2)中制得的脂质体加入到步骤(3)制得的预热的维生素溶液中，再加入甘氨酸，506(TC水浴中保温2030分钟，不时振摇，然后经0.22|im的微孔滤膜过滤除菌；(5)将过滤除菌后半成品冻干，得成品。实例212种复合维生素脂质体冻干制剂配方IOOO瓶单位剂型所需要组分的量视黄醇棕榈酸酯280万单位烟酰胺41-4g四水合硫胺磷酸酯522g叶酸332mg核黄素磷酸钠5'1()g右泛醇"^mg<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>制备工艺采用如实施例1的生产方法制得实施例2的产品。实例312种复合维生素脂质体冻干制剂配方IOOO瓶单位剂型所需要组分的量视黄醇棕榈酸酯350万单位烟酰胺46.0g四水合硫胺磷酸酯5.80g叶酸414mg核黄素磷酸钠5.67g右泛醇16.15mg盐酸吡眵辛5.50g大豆卵磷脂112.5g氰钴胺6.0mg甘氨胆酸140g胆骨化醇22.0万单位枸橼酸30.8g抗坏血酸125.0g枸橼酸钾41.6g消旋a-生育酚10.20g甘氨酸250gD-生物素69.0mg制备工艺采用如实施例1的生产方法制得实施例3的产品。实例4质量研究分别将以上实施例1-3的产品以及采用CN200610054218.0公开方法制得样品(样品A)在高温6(TC、光照4500Lx条件下放置IO天进行影响因素试验考察，结果见表l;在高温4(TC、相对湿度75%±5%条件下6个月，进行加速试验考察,结果见表2;在高温25'C、相对湿度60%士10%条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，数据结果见表3。表1影响因素结果时间样品性状酸度澄清度与颜色干燥失重含量(%)样品A橙黄色块状物5.9澄清；橙黄色1.15均合格o天实施例1橙黄色块状物6.0澄清；橙黄色0.86均合格实施例2橙黄色块状物6.1澄清；橙黄色0.88均合格实施例3橙黄色块状物5.9澄清；橙黄色0.91均合格10天咼温60。C样品A实施例1橙黄色块状物橙黄色块状物6.36.0澄清；澄清；橙黄色橙黄色1.170.87不合格均合格实施例2橙黄色块状物6.0澄清；橙黄色0.89均合格实施例3橙黄色块状物5.9澄清；橙黄色0.90均合格10天光照4500Lx样品A实施例1实施例2实施例3橙黄色块状物橙黄色块状物橙黄色块状物橙黄色块状物6.25.96.05.9澄清；澄清；澄清；澄清；橙黄色橙黄色橙黄色橙黄色1.130.850.870.92不合格均合格均合格均合格表2加速试验结果时间样品性状酸度澄清度与颜色干燥失重含量(%)l月样品A橙黄色块状物5.9澄清；橙黄色1.14均合格实施例1橙黄色块状物5.9澄清;橙黄色0.89均合格实施例2橙黄色块状物6.1澄清;橙黄色0.85均合格实施例3橙黄色块状物6.1澄清;橙黄色0.83均合格样品A橙黄色块状物6.0澄清;橙黄色1.17均合格2月实施例1橙黄色块状物6.0澄清;橙黄色0.84均合格实施例2橙黄色块状物5.9澄清;橙黄色0.87均合格实施例3橙黄色块状物5.9澄清;橙黄色0.85均合格样品A橙黄色块状物6.1澄清;橙黄色1.09不合格3月实施例1橙黄色块状物5.9澄清;橙黄色0.82均合格实施例2橙黄色块状物6.0澄清;橙黄色0.89均合格实施例3橙黄色块状物5.8澄清;橙黄色0.86均合格样品A橙黄色块状物6.3浑浊;橙黄色L12不合格6月实施例1橙黄色块状物5.8澄清;橙黄色0.85均合格实施例2橙黄色块状物5.9澄清;橙黄色0.84均合格实施例3橙黄色块状物5.8澄清;橙黄色0.88均合格表3长期试验结果时间样品性状酸度澄清度与颜色干燥失重含量(%)样品A橙黄色块状物6.0澄清；橙黄色1.11均合格3月实施例1橙黄色块状物6.0澄清；橙黄色0.87均合格实施例2橙黄色块状物6.1澄清；橙黄色0.84均合格实施例3橙黄色块状物5.9澄清；橙黄色0.85均合格样品A橙黄色块状物6.1澄清；橙黄色1.08不合格6月实施例1实施例2橙黄色块状物橙黄色块状物6.06.0澄清；澄清；橙黄色橙黄色0.890.86均合格均合格实施例3橙黄色块状物5.8澄清；橙黄色0.83均合格样品A橙黄色块状物6.2澄清；橙黄色1.19不合格9月实施例1实施例2橙黄色块状物橙黄色块状物5.95.9澄清；澄清；橙黄色橙黄色0.840.89均合格均合格实施例3橙黄色块状物5.8澄清；橙黄色0.88均合格12月样品A橙黄色块状物6.4浑浊；橙黄色1.21不合格实施例1橙黄色块状物6.0澄清；橙黄色0.85均合格实施例2橙黄色块状物5.9澄清；橙黄色0.81均合格实施例3橙黄色块状物5.7澄清；橙黄色0.82均合格样品A橙黄色块状物6,5浑浊；橙黄色1.23不合格实施例1橙黄色块状物5.9澄清；橙黄色0.90均合格18月实施例2橙黄色块状物5.8澄清；橙黄色0.89均合格实施例3橙黄色块状物5.7澄清；橙黄色0.87均合格结论经影响因素10天、加速6月和长期18月后，本发明制得的产品质量符合标准要求，而且各项质量指标无明显变化，均符合质量标准，说明了本发明的产品质量稳定性很好；专利CN200610054218.0公开方法制得的样品A酸度变化较大，澄清度稍变浑浊，各成分含量变化较大，超出标准范围。说明本发明产品的稳定性远远高于现有技术的产品。权利要求1、12种复合维生素脂质体冻干制剂，特征在于其是由大豆卵磷脂和甘氨胆酸所形成的脂质体包封视黄醇棕榈酸酯、四水合硫胺磷酸酯、核黄素磷酸钠、盐酸吡多辛、氰钴胺、胆骨化醇、抗坏血酸、消旋α-生育酚、D-生物素、烟酰胺、叶酸、右泛醇等12种维生素制成的冻干制剂。2、权利要求1所述的制剂，其特征在于制得1000瓶单位剂型所需的各组分的重量配比为视黄醇棕榈酸酯280420万单位烟酰胺41.450.6g四水合硫胺磷酸酯5.226.38g叶酸332496mg核黄素磷酸钠5.10~6.24g右泛醇14.5417.77mg盐酸吡眵辛4.95~6.05g大豆卵磷脂腦150g氰钴胺4.87.2mg甘氨胆酸110170g胆骨化醇17.6万单位枸橼酸560g抗坏血酸112.5~137.5g枸橼酸钾560g消旋a-生育酚9.18~11.22g甘氨酸200300gD-生物素55.282.5mg3、一种制备权利要求1-2所述的复合维生素脂质体冻干制剂的方法，其特征在于包括如下步骤(1)称取大豆卵磷脂、甘氨胆酸，用适量的氯仿使其溶解，混合均匀，然后将形成的溶液减压去除氯仿，制备脂质膜；(2)配制pH值为6.08.0的枸橼酸和枸橼酸钾的缓冲液，将该缓冲液加入到步骤(1)中制的脂质膜中，待其完全水化后，用均浆机制成脂质体，备用；(3)称取12种维生素，将烟酰胺、四水合硫胺磷酸酯、叶酸、核黄素磷酸钠、右泛醇、盐酸吡哆辛、氰钴胺、抗坏血酸、D-生物素溶解于注射用水，将视黄醇棕榈酸酯、胆骨化醇、消旋ot-生育酚溶解于无水乙醇，将水溶液和无水乙醇溶液分别经微孔滤膜过滤除菌后，混合均匀，在506(TC水浴保温；(4)将步骤(2)中制得的脂质体加入到步骤(3)制得的预热的维生素溶液中，再加入甘氨酸，506(TC水浴中保温20~30分钟，不时振摇，然后经微孔滤膜过滤除菌；(5)将过滤除菌后半成品冻干，得成品。4、权利要求4所述的复合维生素脂质体冻干制剂的制备方法，其中选用0.22pm的微孔滤膜过滤除菌。全文摘要12种复合维生素脂质体冻干制剂，其特征在于是该制剂是由大豆卵磷脂和甘氨胆酸所形成的脂质体包封视黄醇棕榈酸酯、四水合硫胺磷酸酯、核黄素磷酸钠、盐酸吡多辛、氰钴胺、胆骨化醇、抗坏血酸、消旋α-生育酚、D-生物素、烟酰胺、叶酸、右泛醇等12种维生素制成的冻干制剂。文档编号A61K9/127GK101491499SQ20091001425公开日2009年7月29日申请日期2009年2月19日优先权日2009年2月19日发明者陶灵刚申请人:陶灵刚