专利名称：左卡尼汀脂质体注射剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种脂质体制剂，具体涉及左卡尼汀脂质体注射剂及其制法，属于医药技术领域。
背景技术：
左卡尼汀，又称左旋肉碱，化学名称为(R)-3-羧基-2-羟基-N，N，N-三甲基-1-丙铵氢氧化物，内盐，分子式C7H15NO3，分子量161.20，结构式为
是一种广泛存在于肌体组织内的特殊氨基酸，是人类及动物必需的营养物质，是类维生素营养素，相当于维生素B族。研究发现左卡尼汀是一种与动物体内脂肪酸代谢有关的化合物，它的基本功能是辅助长链脂肪酸穿透线粒体内膜进行β-氧化的载体。左卡尼汀是一种必需营养素，其功能与活体器官和组织的代谢密切相关。人们还发现，用外源性左卡尼汀治疗某些疾病，可改善临床症状。1973年Engel报道首例左卡尼汀缺陷症并开始用左卡尼汀进行治疗，直到1984年才明确左卡尼汀是一种很重要的营养剂。
早在60年代，D，L-肉碱作为胃药已用于临床，主要用于助消化，增进食欲。后来发现只有L-肉碱起作用、D-肉碱有拮抗作用，因此逐渐为左旋肉碱所替代。左旋肉碱的临床研究是从1973年Engel报道了首例肉碱缺乏症开始的。左旋肉碱可广泛用于各种缺血性心脏病的治疗。对于一般缺血性心脏病的治疗，左旋肉碱的用量为每天1-3g。对于急性心肌梗塞、急性心力衰竭，需每天3-6g。临床证明冠心病患者试用左卡尼汀的初步结果也是积极的。对于心绞痛患者，左卡尼汀能提高运动能量，降低ST段下降程度，减少心绞痛发作频率和硝酸甘油的使用。另外，左卡尼汀对于休克、急慢性心功能不全、心肌炎、心律失常都有较好作用。肾病及糖尿病引发的肾衰患者由于长期的血液透析导致肉碱缺乏，这些病人补充肉碱是必需的。肉碱可用于肝病患者的辅助治疗，其机理是肉碱可减少肝病患者的血氨浓度，降低门脉高压，减少酯类在肝中积累，左卡尼汀还可以降血脂、减肥、治疗血管疾病。它的另外一个重要作用是用于手术或胃肠瘘恶性肿瘤接受全肠外营养支持的病人和新生儿。
随着科学的不断发展，左卡尼汀在营养保健、减肥健美、医学治疗及饲料添加方面有新的研究成果，具有广阔的市场前景。目前主药用于原发和继发左卡尼汀缺乏。休克、急、慢性心功能不全、缺血性心肌病、心肌炎、心律失常、心绞痛、心肌梗塞；急慢性肝炎，肝硬化，慢性肝功能不全的辅助治疗；全肠外营养和创伤。另外还用于减少抗肿瘤药物对心脏毒性和减少丙戊酸的毒性；新生儿营养不良，产后子宫收缩不良的辅助治疗。
目前已有左卡尼汀注射液和冻干粉针剂上市，但产品质量很不稳定，不能达到有效期的质量要求。
在中国专利CN101011373A公开了一种左卡尼汀药物组合物的制备方法，通过溶解、混悬、乳化的手段将组合物配方中的活性物质与相应辅料混合制备成液体组合物，进一步制备成软胶囊和乳剂。中国专利CN1864673A中公开了一种左卡尼汀冻干粉针剂的制备方法，采用盐酸调节pH值，甘露醇作为赋形剂，冷冻干燥，制得注射用左卡尼汀粉针。上述所述的专利中，只是对左卡尼汀的溶解进行了研究，制备的制剂稳定性较差，左卡尼汀在乳剂中长期放置变质，影响了药品质量，而冻干粉针则复溶性较差，不能得到澄明溶液，质量不合格。
因此，存在进一步的需要，以提供稳定性更好的左卡尼汀制剂。本发明人经过长期认真的研究，意想不到地发现了将靶向给药系统的一种新剂型脂质体应用于左卡尼汀注射制剂中，解决了左卡尼汀的稳定性问题，从而完成了本发明。
脂质体(liposomes)最初是由英国学者Bangham和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中自然形成多层泡囊，每层均为脂质的双分子层；囊泡中央和各层之间被水相隔开，双分子层厚度约4nm，后来将这种类似生物膜结构的双分子小囊成为脂质体。
脂质体研究是当前一个十分活跃的领域，脂质体最早是指天然脂类化合物悬浮在水中形成的具有双层封闭结构的泡囊，现在也可以由人工合成的磷脂化合物来制备。20世纪60年代末Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用，近年来，随着生物技术的不断进展，脂质体制备工艺逐步完善，脂质体作用机制进一步阐明，加之脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是大量试验数据证明脂质体作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用，并减少药物剂量等优点。然而脂质体普遍存在容易聚集、融合，导致包封药物泄漏，脂质体的不稳定已成为其制药工业的主要问题，因此需要优化脂质体处方，以获得稳定性优良的脂质体。
实际上，制药领域具有一般经验的技术人员清楚地知道在制备脂质体-药物复合物方面面临的种种困难，所有这些绝非现有的理论可以预期解决的，要得到符合稳定性的药物脂质体需要克服许多难题。
发明内容
针对目前的左卡尼汀溶液长期放置易变质，粉针剂复溶性差的问题，本发明的目的在于提供一种左卡尼汀脂质体注射剂，其通过pH值梯度法用脂质体进行包裹，从而解决了上述存在的问题。
脂质体制剂可应用本领域已知的方法制备，优选采用硫酸铵pH梯度法。
磷脂通常可选用天然磷脂和合成磷脂，所述天然磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰肌醇中的一种或几种；所述合成磷脂为二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油中的一种或几种。本发明经预试验证实，磷脂优选为大豆卵磷脂。
发明人在采用一般脂质体注射剂常用的磷脂和胆固醇为膜材料制备左卡尼汀脂质体，发现这样得到的左卡尼汀脂质体在高温40℃、相对湿度75％±5％加速试验下，左卡尼汀脂质体的稳定性不佳，渗漏率高达30％以上。
不受理论限制，本发明人出乎意料地发现加入部分抗氧剂具有意想不到的效果，从而获得了稳定性优良的左卡尼汀脂质体。所述抗氧剂选自L-半胱氨酸、硫脲、维生素E、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种，优选维生素E。
本发明解决的技术方案如下 一种左卡尼汀脂质体注射剂，由活性成分左卡尼汀、大豆卵磷脂、胆固醇、抗氧剂和药学上可接受的载体组成，其中各组分的重量份数比为左卡尼汀1份，大豆卵磷脂3-15份，胆固醇0.4-7.5份、抗氧剂0.02-1份。
作为本发明一优选实施方案，所述的左卡尼汀脂质体注射剂各组分的重量份数比为左卡尼汀1份，大豆卵磷脂5-9份，胆固醇0.8-6份、抗氧剂0.1-0.6份。
作为本发明进一步地优选实施方案，所述的左卡尼汀脂质体注射剂各组分的重量份数比为左卡尼汀1份，大豆卵磷脂7.2份，胆固醇2.8份、抗氧剂0.36份。
其中，上述组分中的抗氧剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种，优选L-半胱氨酸、硫脲、维生素E、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种，更优选维生素E。
上述所述的左卡尼汀脂质体注射剂，药学上可接受的载体可包括渗透压调节剂、缓冲溶液、支持剂。
其中，渗透压调节剂为调节药液和血浆具有相同渗透压的溶液，不会引起血象的任何异常变化。常用的渗透压调节剂有氯化钠、葡萄糖、甘油、甘露醇、山梨醇、氯化钾、乳酸钠、氨基酸类、右旋糖酐、明胶、聚维酮类、淀粉衍生物等，本发明中的渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘油、木糖醇等中的一种或几种，优选氯化钠、葡萄糖和甘油，更优选氯化钠；渗透调节剂的用量为1.08-10重量份，浓度为0.9％-10％(g/ml)。
其中，缓冲溶液用来调节脂质体溶液的pH值至标准要求的范围内，可以选自pH值6.0-6.5的磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，优选磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液、醋酸-醋酸钠缓冲液、枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，更优选磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液。
其中，支持剂的重量份数为4-10份，选自甘露醇、葡萄糖、海藻糖、乳糖、蔗糖、山梨醇、氯化钠、甘氨酸的一种或多种，优选甘露醇和海藻糖，更优选海藻糖。
本发明解决的技术方案还包括 一种左卡尼汀脂质体注射剂的制备方法，步骤包括 (1)将处方量的大豆卵磷脂、胆固醇和抗氧剂溶于有机溶剂中，缓慢注入硫酸铵溶液，加热搅拌蒸除有机溶剂，超声，得空白脂质体； (2)将空白脂质体置于透析袋中，封口，将透析袋置于渗透压溶液中，除去脂质体外相中的硫酸铵； (3)将透析好的空白脂质体60℃保温，在搅拌下缓慢加入左卡尼汀的水溶液，继续保温20-30min，加入缓冲溶液和渗透压调节剂溶液，混匀，即得左卡尼汀脂质体混悬液； (4)将处方量的支持剂溶于水，加入上述混悬液中，搅拌混匀，过滤，冷冻干燥，得左卡尼汀脂质体冻干剂；或者，将上述混悬液过滤，分装，灭菌，得左卡尼汀脂质体注射液。
上述所述的制备方法中，有机溶剂选自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种，优选叔丁醇、异丙醇、乙醇，更优选异丙醇。有机溶剂的量根据加入的大豆卵磷脂、胆固醇和抗氧剂的量进行选择，以完全溶解上述成分为最低量的要求，优选是基于大豆卵磷脂、胆固醇、抗氧剂三者总重量计的1∶5-10(g/ml)体积的有机溶剂。
上述所述的制备方法中，所述的硫酸铵溶液的浓度为0.01-0.1mol/L，其用量和有机溶剂的量相同。
在上述所述的制备方法中，溶解左卡尼汀水的量为能够使其完全溶解即可，优选为基于左卡尼汀重量计的1∶20-50(g/ml)体积的水；溶解支持剂水的量为能够使其完全溶解即可，优选为基于支持剂重量计的1∶5-12(g/ml)体积的水。
作为本发明另一优选实施方案，本发明所述的左卡尼汀脂质体注射剂的制备方法为 (1)将处方量的大豆卵磷脂、胆固醇和抗氧剂溶于基于三者总重量计的1∶5-10(g/ml)体积的有机溶剂中，缓慢注入0.01-0.1mol/L的硫酸铵溶液，加热搅拌蒸除有机溶剂，超声10-20分钟，得空白脂质体；硫酸铵溶液的体积与有机溶剂的体积相同； (2)将空白脂质体置于透析袋中，封口，将透析袋置于0.72-2.5重量份的浓度为0.9％-10％(g/ml)渗透压溶液中，除去脂质体外相中的硫酸铵； (3)将左卡尼汀溶于基于左卡尼汀重量计的1∶20-50(g/ml)体积的水中，将透析好的空白脂质体60℃保温，在搅拌下缓慢加入左卡尼汀的水溶液，继续保温20-30min，加入缓冲溶液和渗透压调节剂溶液，混匀，即得左卡尼汀脂质体混悬液； (4)将4-10重量份的支持剂溶于基于支持剂重量计的1∶5-12(g/ml)体积的水中，加入上述混悬液中，搅拌混匀，过滤，冷冻干燥，得左卡尼汀脂质体冻干剂；或者，将上述混悬液过滤，分装，灭菌，得左卡尼汀脂质体注射液。
本发明提供的左卡尼汀脂质体注射剂，进行稳定性试验考察，在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化；在高温25℃、相对湿度60％±10％条件下长期试验18个月，各项检测指标没有明显变化。
本发明提供的左卡尼汀脂质体注射剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检查，均符合规定，安全性得到证明。
本发明提供的左卡尼汀脂质体注射剂，与现有技术相比，具有意想不到的效果，主要优点如下 (1)将左卡尼汀包裹于脂质体内，大大提高了水溶液中的稳定性，保证了产品质量； (2)药物载体脂质体体内降解、无毒性和无免疫原性，而且可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用；获得了稳定性优良的脂质体； (3)采用常规的工艺设备，可工业规模、高效率生产，产品质量稳定，是一种独特的和普遍适用的，低成本的工业化制备方法。
具体实施例方式 以下通过实施例进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。
实施例1 左卡尼汀脂质体注射液的制备 处方(100瓶)左卡尼汀25g 大豆卵磷脂 180g 胆固醇 45g 维生素E 6g 制备工艺 (1)将180g大豆卵磷脂、45g胆固醇和6g维生素E溶于1500ml异丙醇中，搅拌下缓慢注入0.1mol/L硫酸铵溶液1500ml，加热搅拌蒸除异丙醇，置冰浴中超声10min，得空白脂质体； (2)将空白脂质体置于透析袋中，封口，将透析袋置于0.9％氯化钠溶液3000ml中透析20小时，除去脂质体外相中的硫酸铵； (3)将25g左卡尼汀溶于800ml水中，将透析好的空白脂质体60℃保温，在搅拌下缓慢加入左卡尼汀的水溶液，继续保温20min，加入0.9％氯化钠溶液1000ml和pH值6.5磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液500ml，混匀，即得左卡尼汀脂质体混悬液； (4)将上述混悬液过滤，分装成100瓶，灭菌，得左卡尼汀脂质体注射液。
实施例2 左卡尼汀脂质体注射液的制备 处方(100瓶)左卡尼汀 50g 大豆卵磷脂250g 胆固醇40g 叔丁基对羟基茴香醚5g 制备工艺 (1)将250g大豆卵磷脂、40g胆固醇和5g叔丁基对羟基茴香醚溶于2000ml叔丁醇中，搅拌下缓慢注入0.05mol/L硫酸铵溶液2000ml，加热搅拌蒸除叔丁醇，置冰浴中超声20min，得空白脂质体； (2)将空白脂质体置于透析袋中，封口，将透析袋置于10％的甘油溶液4000ml中透析24小时，除去脂质体外相中的硫酸铵； (3)将50g左卡尼汀溶于2000ml水中，将透析好的空白脂质体60℃保温，在搅拌下缓慢加入左卡尼汀的水溶液，继续保温30min，加入10％的甘油溶液1000ml和pH值6.0醋酸-醋酸钠缓冲液500ml，混匀，即得左卡尼汀脂质体混悬液； (4)将上述混悬液过滤，分装成100瓶，灭菌，得左卡尼汀脂质体注射液。
实施例3 左卡尼汀脂质体注射液的制备 处方(100瓶)左卡尼汀 100g 大豆卵磷脂900g 胆固醇600g 维生素E 36g 制备工艺 (1)将900g大豆卵磷脂、600g胆固醇和36g维生素E溶于10000ml乙醇中，搅拌下缓慢注入0.03mol/L硫酸铵溶液10000ml，加热搅拌蒸除乙醇，置冰浴中超声20min，得空白脂质体； (2)将空白脂质体置于透析袋中，封口，将透析袋置于5％葡萄糖溶液15000ml中透析26小时，除去脂质体外相中的硫酸铵； (3)将100g左卡尼汀溶于5000ml水中，将透析好的空白脂质体60℃保温，在搅拌下缓慢加入左卡尼汀的水溶液，继续保温20min，加入5％葡萄糖溶液1000ml和pH值6.2枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液500ml，混匀，即得左卡尼汀脂质体混悬液； (4)将上述混悬液过滤，分装成100瓶，灭菌，得左卡尼汀脂质体注射液。
实施例4 左卡尼汀脂质体冻干剂的制备 处方(100瓶)左卡尼汀50g 大豆卵磷脂 360g 胆固醇140g 硫脲 18g 海藻糖300g 制备工艺 (1)将360g大豆卵磷脂、140g胆固醇和18g硫脲溶于3000ml异丙醇中，搅拌下缓慢注入0.05mol/L硫酸铵溶液3000ml，加热搅拌蒸除异丙醇，置冰浴中超声20min，得空白脂质体； (2)将空白脂质体置于透析袋中，封口，将透析袋置于0.9％氯化钠溶液5000ml中透析20小时，除去脂质体外相中的硫酸铵； (3)将50g左卡尼汀溶于2000ml水中，将透析好的空白脂质体60℃保温，在搅拌下缓慢加入左卡尼汀的水溶液，继续保温30min，加入0.9％氯化钠溶液1000ml和pH值6.0磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液800ml，混匀，即得左卡尼汀脂质体混悬液； (4)将300g海藻糖溶于2000ml水中，加入上述混悬液中，搅拌混匀，过滤，冷冻干燥，得左卡尼汀脂质体冻干剂。
对比例1 左卡尼汀脂质体注射液的制备 处方(100瓶)左卡尼汀 25g 大豆卵磷脂180g 胆固醇45g 制备方法同实施例1，制得不含抗氧剂的左卡尼汀脂质体注射液。
对比例2 左卡尼汀脂质体注射液的制备 处方(100瓶)左卡尼汀 50g 大豆卵磷脂250g 蛋黄卵磷脂40g 胆固醇40g 制备方法同实施例2，制得含两种磷脂不含抗氧剂的左卡尼汀脂质体注射液。
对比例3 左卡尼汀脂质体注射液的制备 处方(100瓶)左卡尼汀 100g 大豆卵磷脂900g 胆固醇600g 丁基羟基甲苯 36g 制备方法同实施例3，应用丁基羟基甲苯代替维生素E制得本发明优选抗氧剂之外的左卡尼汀脂质体注射液。
对比例4 左卡尼汀脂质体冻干剂的制备 处方(100瓶)左卡尼汀 50g 大豆卵磷脂360g 胆固醇140g 硫脲 18g 海藻糖300g 选用不同于实施例4的制备工艺，制得左卡尼汀脂质体冻干剂，如下(1)将360g大豆卵磷脂、140g胆固醇和18g硫脲溶于3000ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去异丙醇，制得磷脂膜； (2)加入pH值6.0磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液800ml，振摇，搅拌40min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化20min，转速15000r/min，再用0.45μm微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将50g左卡尼汀溶于2000ml水中，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，保温60℃搅拌40分钟，得左卡尼汀脂质体混悬液； (4)将300g海藻糖溶于2000ml水中，加入上述混悬液中，搅拌混匀，过滤，冷冻干燥，得左卡尼汀脂质体冻干剂。
脂质体制剂可应用本领域已知的方法制备，通过下述试验例所述方法证实应用实施例4所述的方法要优于对比例4的方法，因此本发明优选采用硫酸铵pH梯度法。
试验例1 粒径的测定 对实施例1-4和对比例1-4制备的脂质体制剂的粒径进行检测，具体方法为取本发明制备的脂质体制剂，加水溶解或稀释成每1ml含左卡尼汀30μg的溶液，用H3LA920激光散射粒度仪进行检测。结果，实施例1-4制备的脂质体制剂为圆球状，粒径均匀，80％的粒径小于150nm，90％的粒径小于180nm，符合静脉注射用脂质体制剂的相关要求；对比例1-3制备的脂质体制剂粒径不均匀，大小不一，形状不定，杂乱无章，85％的粒径大于850nm，不符合静脉注射要求。对比例4的脂质体制剂虽然符合要求但不如实施例4所述脂质体。
试验例2 包封率的测定 将实施例1-4和对比例1-4制备的脂质体制剂加水溶解或稀释成每1ml含左卡尼汀30μg的溶液，高速离心，5000r/min，离心30min，取清液1ml，用甲醇溶解，以高效液相色谱法测定左卡尼汀含量，确定被包封的含量M1，脂质体制剂中左卡尼汀总量为M0，包封率N为 N＝M1/M0×100％ 结果，本实施例1-4制备的脂质体制剂包封率均大于88％，对比例1-3制备的脂质体制剂包封率均小于60％，对比例4的脂质体制剂也不如实施例4，包封率小于75％。
试验例3 稳定性考察 将以上各实施例制备的样品与上市的左卡尼汀注射液(意大利Sigma-Tau公司生产，批号070611057)和左卡尼汀粉针剂(锦州九泰药业有限责任公司生产，批号20071019)在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表1；在高温25℃、相对湿度60％±10％条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，结果见表2。
表1 加速试验结果
表2 长期试验结果
由以上结果发现加速3月、6月，长期12月、18月时上市的左卡尼汀注射液澄明度不符合规定，pH值下降较大，含量降低明显，有关物质升高；上市的左卡尼汀粉针剂澄明度不符合规定，其他指标也变化较明显；而本发明制备的样品外观性状没有明显变化，澄明度、pH值、含量和有关物质也没有明显的变化。说明本发明制备的样品长期贮存质量稳定性更好。
试验例4 渗漏率试验 取实施例1-4和对比例1-4制备的样品，分别置于低温4℃、常温25℃、高温40℃条件下180天，定期检查，用试验例2测定包封率的方法测定包封量，与0天包封的药量比较，由公式Q渗％＝(W包-W贮)/W包×100％计算渗漏率，结果如下表3。
表3 渗漏率试验结果(％)
由以上实验结果可知，本发明实施例制备的样品在长期贮存过程中渗漏率变化不大，完全满足常温贮存下稳定性的要求，而本发明范围之外的对比例制备的样品渗漏率逐渐增大，脂质体渗漏严重，而且贮存温度越高渗漏率越大，充分说明了本发明组合的优越性，其中抗氧剂带来了意想不到的效果，是理论上无法合理预期的。
权利要求
1、一种左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于由活性成分左卡尼汀、大豆卵磷脂、胆固醇、抗氧剂和药学上可接受的载体组成，其中各组分的重量份数比为左卡尼汀1份，大豆卵磷脂3-15份，胆固醇0.4-7.5份、抗氧剂0.02-1份，所述抗氧剂选自L-半胱氨酸、硫脲、维生素E、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种。
2、根据权利要求1所述的左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于各组分的重量份数比为左卡尼汀1份，大豆卵磷脂5-9份，胆固醇0.8-6份、抗氧剂0.1-0.6份。
3、根据权利要求1所述的左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于各组分的重量份数比为左卡尼汀1份，大豆卵磷脂7.2份，胆固醇2.8份、抗氧剂0.36份。
4、根据权利要求1-3所述的左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于所述抗氧剂为维生素E。
5、根据权利要求1所述的左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于药学上可接受的载体可包括渗透压调节剂、缓冲溶液、支持剂。
6、根据权利要求5所述的左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘油、木糖醇等中的一种或几种，优选氯化钠、葡萄糖和甘油，更优选氯化钠。
7、根据权利要求5所述的左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于缓冲溶液选自pH值6.0-6.5的磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，优选磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液、醋酸-醋酸钠缓冲溶液、枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液，更优选磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液。
8、根据权利要求5所述的左卡尼汀脂质体注射剂，其支持剂选自甘露醇、葡萄糖、海藻糖、乳糖、蔗糖、山梨醇、氯化钠、甘氨酸中的一种或多种，优选甘露醇和海藻糖，更优选海藻糖。
9、一种制备权利要求1-8任一项所述的左卡尼汀脂质体注射剂的方法，包括如下步骤
(1)将处方量的大豆卵磷脂、胆固醇和抗氧剂溶于有机溶剂中，缓慢注入硫酸铵溶液，加热搅拌蒸除有机溶剂，超声，得空白脂质体；
(2)将空白脂质体置于透析袋中，封口，将透析袋置于渗透压溶液中，除去脂质体外相中的硫酸铵；
(3)将透析好的空白脂质体60℃保温，在搅拌下缓慢加入左卡尼汀的水溶液，继续保温20-30min，加入缓冲溶液和渗透压调节剂溶液，混匀，即得左卡尼汀脂质体混悬液；
(4)将处方量的支持剂溶于水，加入上述混悬液中，搅拌混匀，过滤，冷冻干燥，得左卡尼汀脂质体冻干剂；或者，将上述混悬液过滤，分装，灭菌，得左卡尼汀脂质体注射液。
10、根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于有机溶剂选自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种，优选叔丁醇、异丙醇、乙醇，更优选异丙醇。
全文摘要
本发明公开了左卡尼汀脂质体注射剂，其特征在于由活性成分左卡尼汀、大豆卵磷脂、胆固醇、抗氧剂和药学上可接受的载体组成，其中各组分的重量份数比为左卡尼汀1份，大豆卵磷脂3-15份，胆固醇0.4-7.5份、抗氧剂0.02-1份，所述抗氧剂选自L-半胱氨酸、硫脲、维生素E、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种，最优选维生素E。本发明也公开左卡尼汀脂质体注射剂优选的制备方法，优选硫酸铵pH梯度法。本发明提供了稳定性优良的左卡尼汀脂质体注射剂，其具有包封率高，长期贮存过程中渗漏率低，急性毒性试验、异常毒性试验和热源检查，均符合规定，且适用于工业化生产。
文档编号A61K9/127GK101637450SQ200910017768
公开日2010年2月3日 申请日期2009年8月28日 优先权日2009年8月28日
发明者明 王 申请人:海南永田药物研究院有限公司