专利名称：一种骨碎补有效成分的制备方法
技术领域：
本发明涉及中药技术领域，具体涉及中药骨碎补有效成分的制备方法。
背景技术：
骨碎补又名猴姜、毛姜，为多年生水龙骨科植物槲蕨的根茎，主要产于广西、广东、 四川、云南等地。此药味苦，性温，传统临床认为骨碎补具有活血化淤、消肿止痛、补肾续筋 的效能。对肾虚腰痛、筋骨损伤、耳鸣、斑秃等有较好疗效。而现代研究骨碎补具有治疗肾衰 的作用，但多采用骨碎补的有效部位，申请号为02114169的专利公开了利用骨碎补治疗肾 衰的疾病，其提取方法采用的是硅胶柱层析、聚酰胺柱层析的方法，这些方法只适用实验室 少量中药的提取纯化，无法工业化生产；申请号200410006265. 9的专利采用超临界萃取、 超声提取等方法得到骨碎补有效部位，用来治疗肾衰，该方法虽然可以在生产上应用，但超 临界萃取生产线动辄上百万，给生产厂家带来巨大的经济负担，而这些负担只有转嫁到产 品上进而让患者负担，造成患者巨大的经济负担，另外超声提取需要很好的隔音车间，不然 会造成工作人员耳聋、耳鸣等职业病，因此，一种新的提取方法的研究开发势在必行。
发明内容
本院的科研人员通过长期的研究发现，骨碎补采用乙醇提取、大孔树脂纯化，有机 溶剂结晶的方法，得到的有效成分，同样具有治疗肾衰的药理作用，该方法工艺方法简单可 行，工业化生产无任何问题，没有特殊设备，得到骨碎补有效成分的成本低廉，适宜药物开发。本发明通过以下技术方案实现的。一.工艺制法(1)取骨碎补饮片，粉碎，用70% -90%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，(2)取备用干燥，与大孔吸附树脂混合，上大孔吸附树脂柱，用水洗脱，洗脱液弃 去，再用70% -90%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。所述大孔吸附树脂为弱极性或极性的一种。所述的骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。二.药理实施例实施例1治疗庆大霉素中毒引起的肾衰的实验实验药物本发明骨碎补有效成分；庆大霉素；开同片；
NRKSIE人肾小管细胞株。实验方法肾小管细胞庆大霉素损伤模型按照现有文献制作，对照组为庆大霉素 组，庆大霉素+本发明有效成分组，庆大霉素+开同片组，检测指标为细胞培养72小时后， 收集培养上清液和细胞，检测细胞内超氧化物歧化酶、丙二醛和上清液乳酸脱氢酶，同时测 定细胞蛋白含量作校正，测定结果见表1 表1对肾小管细胞影响的比较 注与对照组比较< 0. 01。实施例2对肾衰大鼠存活率影响实验药物本发明骨碎有效成分；生理盐水材料；肾衰胶囊；实验动物SD大鼠体重230 270g，雌雄各半，由北京大学医学部动物实验室提供实验方法取大鼠饲养1周后开始手术，戊巴比妥钠麻醉，常规皮肤消毒，腹部正 中切口暴露右肾，结扎肾带，剥离皮膜，切除右肾；然后暴露左肾，迅速切除上下极，所切除 部分占肾皮质的1/6，切除后立即以明胶海绵压迫止血，关闭腹腔，青霉素40万/支，肌肉注 射3天以防感染。手术后灌胃给药，计算死亡率，见表2:表2对肾衰大鼠存活率的影响 注与生理盐水组比较< 0. 01，P < 0. 05 ；与肾衰胶囊比较#P < 0. 05。实验结论本发明骨碎补有效成分具有很好的治疗肾衰的药理作用。三.制备实施例实施例1(1)取骨碎补饮片，粉碎，用70%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与AB-8大孔吸附树脂混合，上AB-8大孔吸附树脂柱用水洗脱，洗
4脱液弃去，再用70%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。实施例2(1)取骨碎补饮片，粉碎，用90%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与DlOl大孔吸附树脂混合，上DlOl大孔吸附树脂柱，用水洗脱， 洗脱液弃去，再用90%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。实施例3(1)取骨碎补饮片，粉碎，用75%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与NKA大孔吸附树脂混合，上NKA大孔吸附树脂柱，用水洗脱，洗 脱液弃去，再用85%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。实施例4(1)取骨碎补饮片，粉碎，用80%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与DlOl大孔吸附树脂混合，上的DlOl大孔吸附树脂柱，用水洗 脱，洗脱液弃去，再用70%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。实施例5(1)取骨碎补饮片，粉碎，用90%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与AB-8大孔吸附树脂混合，上AB-8大孔吸附树脂柱，用水洗脱， 洗脱液弃去，再用70%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。实施例6(1)取骨碎补饮片，粉碎，用70%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；
(2)取备用干燥，与NKA大孔吸附树脂混合，上NKA大孔吸附树脂柱，用水洗脱，洗 脱液弃去，再用90%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。
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实施例7(1)取骨碎补饮片，粉碎，用75%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与NKA大孔吸附树脂混合，上NKA大孔吸附树脂柱，用水洗脱，洗 脱液弃去，再用75%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。实施例8(1)取骨碎补饮片，粉碎，用80%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与DlOl大孔吸附树脂混合，上DlOl大孔吸附树脂柱，用水洗脱， 洗脱液弃去，再用80%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。实施例9(1)取骨碎补饮片，粉碎，用85%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与AB-8大孔吸附树脂混合，上AB-8大孔吸附树脂柱，用水洗脱， 洗脱液弃去，再用75的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得 到骨碎补有效成分。骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。
权利要求
一种骨碎补有效成分的提取方法，该方法采用乙醇提取、大孔吸附树脂法、有机溶剂结晶的方法对骨碎补进行提取纯化，得到所述有效成分。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于(1)取骨碎补饮片，粉碎，用70%-90%的乙醇提取，提取液回收乙醇至尽，干燥，备用；(2)取备用干燥，与大孔吸附树脂混合，上大孔吸附树脂柱，用水洗脱，洗脱液弃去，再 用70% -90%的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇至尽，干燥备用；(3)将(2)中干燥物加乙醇溶解完全，加入乙酸乙酯，静置，得到结晶物，干燥，得到骨 碎补有效成分。
3.根据权利要求2的方法，所述大孔吸附树脂为弱极性或极性的一种。
4.根据权利要求1或2所述的骨碎补有效成分在制备治疗肾衰药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及中药骨碎补有效部位的提取方法、由该方法得到的提取物、该提取物的用途、包含该提取物的药物和该药物的制备方法；该药物可用于治疗肾衰。药理实验结果表明，与市售同类品种进行比较，本发明的中药注射制剂对肾衰疾病具有更强药理作用。
文档编号A61P13/12GK101897734SQ200910084830
公开日2010年12月1日 申请日期2009年5月25日 优先权日2009年5月25日
发明者周亚君, 安晓雪, 王爱民 申请人:北京卓越同创药物研究院