专利名称：：从泽泻中提取并富集泽泻总三萜酮醇类组分的方法
技术领域：
：本发明涉及从中药材泽泻中提取总三碎酮醇类组分的方法，尤其涉及一种利用大孔树脂分离纯化泽泻药材中总三萜酮醇类组分的方法。
背景技术：
：以23—乙酰泽泻醇B为指标性成分的泽泻总三萜酮醇类组分是泽泻中的主要有效成分，泽泻总三辟酮醇类组分多具有原萜烷(protostane)型四环三辟的基本骨架，其结构多为原萜烷(protostane)型四环三萜。据现有文献报道,从泽泻中分离出了约30多个三萜类化合物，主要包括23—乙酰泽泻醇B、24—乙酰泽泻醇A等。泽泻中部分泽泻四环三萜酮醇类成分的结构如下0ROHalisolA(R=H)alisolA-24-acetate(R=Ac)alisolB(Rl=OH,R2=H)alisolE(R=H)alisolB-23-acetate(Rl=OH,R2=Ac)alisolE-23-acetate(R=Ac)11-deoxyalisolB(Rl=H,R2-H)OHOHalisolC-23-acetatealisolFalisolG、抗糖尿病及抗癌等多种功效，在药品原料、保健食品等领域具有广泛的应用前景。随着中药现代化进程的加快和走向世界的需要，特别是欧美国家制药企业，要求中药提取物中的活性部位和活性成分含量越高越好，以便定性定量分析、使用。为此，开展有效提取并富集泽泻总三萜酮醇类组分的制备工艺研究，以生产出符合市场要求的泽泻降血脂活性部位泽泻总三碎酮醇类组分含量较高的产品，具有积极的现实意义。目前，泽泻传统提取工艺较多地采用水煎煮法、热回流法、渗漉法等，现代新工艺采用超临界流体方法。这些方法中水煎煮法因三萜类成分偏于脂溶性，因而三萜酮醇类有效成分溶出少；有一几溶剂热回流法、渗漉法、超声提取法等均存在提取物中的杂质成分多，泽泻总三萜酮醇类组分含量低的缺点；而现代超临界流体提取法，要求具有超临界流体设备，投资大，代价高，以上方法所得提取物均难以达到有效提取与富集泽泻中的泽泻总三薛酮醇类组分的目标。本发明人在《福建中医学院学报》2007年第2期上发表的文章《大孔树脂法纯化泽泻总碎醇类成分的实验研究》一文中提出了如下纯化步骤先用乙醇溶液浸取泽泻药材，然后对提取液进行浓缩至溶液乙醇浓度15%,再使用大孔树脂进行吸附，采用乙醇溶液对吸附后的大孔树脂进行洗脱，收集的洗脱液。但是该方法仍然存在以下两个主要问题1.制得的成品中泽泻总三萜酮醇类组分含量仍然不够高;2.浓缩后的准备上大孔树脂柱吸附的料液因溶解度的问题，有部分泽泻总三萜酮醇类化合物沉淀析出而导致浪费，以及因沉淀物堵塞大孔树脂而影响吸附。
发明内容本发明解决的技术问题是提供一种从泽泻中提取并富集泽泻总三碎酮醇类组分的方法，该制备方法可克服上述方法中制得的成品中泽渴总三辟酮醇类组分含量仍然不够高的技术问题，而且浓缩后的准备上大孔树脂柱吸附的料液可以达到较高的浓度并且无泽泻总三碎酮醇类化合物沉淀析出。为实现本发明目的，本发明提供的技术方案包括以下步骤a.预处理将泽泻药材粉碎或切片；b.提取将预处理后的药材置于浓度为60%—95%(体积)的乙醇水溶液(本发明中所述乙醇浓度如无特殊说明均为体积分数(v/V)，本发明中所述添加或使用的乙醇如无特殊说明均为乙醇水溶液，下同)中浸泡、提取可溶性成分；c.调整提取液乙醇浓度将提取液中乙醇的浓度调整至20%—50%;d.吸附用经过预处理的或再生好的非极性或弱极性的大孔树脂对调整乙醇浓度后的提取液进行吸附处理；e.洗脱将吸附后的大孔树脂以树脂柱的形式，先通入浓度为0%—50°/。的乙醇对所述大孔树脂进行洗脱，弃去该部分洗脱液，再通入70%以上浓度的乙醇对所述大孔树脂进行洗脱，收集该部分洗脱液；f.浓缩对收集的洗脱液进行浓缩处理，得到浓缩液；g.干燥对浓缩液进行干燥处理，得到成品。相比本发明人在《福建中医学院学报》2007年第2期上发表的文章《大孔树脂法纯化泽玛总辟醇类成分的实验研究》中提供的技术方案，本方案在步骤c中调整了吸附前提取液中的乙醇浓度，由原来的15%调整为20%—50%。发明人在实—险研究中发现，利用非极性或弱极性的大孔树脂吸附泽泻总三辟酮醇类化合物时，随溶液中乙醇浓度的不同，非极性或弱极性的大孔树脂对泽泻药材用乙醇溶液提取处理后的提取液的吸附情况也不同，所指吸附情况既包括对提取液中泽泻总三辟酮醇类化合物也包括提取液中含有的其他杂质。在溶液中乙醇浓度为20%—50%的情况下，杂质不容易为非极性或弱极性的大孔树脂所吸附，从而提高目标成分的吸附率和与杂质成分的分离效果，这一点可以参见实施例6吸附条件实验1,另一方面，减少了洗脱有效成分前的洗脱杂质步骤中所用的水和低浓度乙醇的用量，节省了环节、时间和成本，提高了效率。此外由于泽泻总三萜酮醇类化合物在非极性溶剂环境中更容易溶解，所以在乙醇含量更高的水溶液中，相同的料液可以溶解更多的泽泻总三辟酮醇类化合物，从而避免吸附过程中由于泽泻总三碎酮醇类化合物不溶解析出而导致的浪费以及因沉淀物堵塞大孔树脂，提高收率。作为本发明的优选技术方案，步骤c将提取液中乙醇的浓度调整至20%一^0%。在此工艺条件下杂质与目标产物不仅分离效果更佳，而且非极性或弱极性的大孔树脂对泽泻总三萜酮醇类化合物的吸附效果更好，即吸附能力更强，泄漏更少。这一点可参见实施例7吸附条件实验2。作为本发明的更优选方案，在所述步骤c调整提取液中乙醇浓度至20%一40°/。的基础上，步骤d改进为所述的树脂吸附具体为，将调整乙醇浓度后的提取液流经树脂柱作动态吸附，且吸附至饱和。相比较静态吸附，动态吸附的树脂吸附饱和度更高，而且在产业上更容易规模化生产。作为本发明的更优选方案，在所述步骤c调整提取液中乙醇浓度至20%_40%;步骤d改进为所述的树脂吸附具体为，将调整乙醇浓度后的提取液流经树脂柱作动态吸附，且吸附至饱和的基础上，所述的树脂吸附步骤还包括将流经树脂柱的流出液重复通过树脂柱l一2次，吸附次数总共为2—3次。这样可以进一步吸附流出液中残留的泽泻总三辟酮醇类化合物，提高收率。作为本发明的更优选方案，在所述步骤C调整提取液中乙醇浓度至20%~40%的基础上，步骤e所述洗脱改进为先通入l一5倍量树脂体积的浓度为0%—50%的乙醇洗脱，该部分洗脱液弃去，再通入3—12倍量树脂体积的浓度为70%以上浓度的乙醇水溶液洗脱树脂柱，收集该部分洗脱液。这样前期用1—5倍量树脂体积的0%—50%浓度的乙醇洗涤吸附后的树脂可以将一些极性较强的吸附在大孔树脂上的杂质洗脱掉，同时又不至于将吸附在大孔树脂上的泽泻总三萜酮醇类化合物大量洗脱下来，进一步达到纯化的目的。然后再使用70%以上浓度的乙醇洗脱树脂柱，收集该部分洗脱液，此时我们需要的泽泻总三碎酮醇类化合物绝大部分包含在这部分洗脱液中。作为本发明的优选方案，步骤d中所述的非极性或弱极性的大孔树脂为D4020、DlOl、AB—8中任意一种。发明人经过大量树脂筛选试验后发现，在本发明的工艺条件下，这三种树脂具有较好的分离效果，具体表现为成品得率较高，成品的泽泻总三萜酮醇类化合物含量较高，这三种树脂中以D4020效果最佳，其次是AB—8，而D101效果也较好且是当前唯一通过食品级论证的大孔树脂，有着广泛的应用前景。作为本发明的优选方案，步骤b中所述的浸泡、提取可溶性成分的方法为将预处理后的泽泻药材按每kg药材原重量加入6—12L的比例加入浓度为60%—95%的乙醇,浸泡1一24小时至药材湿透，持续0.5~4小时进行超声波、渗滤或热回流方法之一或以上方法的组合进行提取，收集提取液，对剩下的药渣按每kg药材原重量加入6—12L的比例加入浓度为60%—95%的乙醇，持续0.5~4小时进行超声波、渗滤或热回流方法之一或以上方法的组合进行再次提取，收集提取液，将两次收集的提取液合并、过滤。这样的提取方法可以确保尽可能的将药材中的有效成分浸取出来，同时又保证了提取过程不至过于漫长。作为本发明的优选方案，步骤c所述的调整溶液乙醇浓度或f所述的浓缩，采取的方法为减压蒸馏浓缩。因为减压蒸馏是化工生产中常用的工艺手段之一，而且我们所需提取的泽泻总三萜酮醇类化合物对热相对稳定，可以采用此工艺手段。在步骤C所述调整溶液乙醇浓度的过程中，采用对溶液进4亍减压蒸馏，既可以减少上柱溶液体积，减少需处理的料液体积；同时可以提高溶液浓度，有利于吸附；而且在减压蒸馏的过程中溶液的乙醇浓度是不断下降的，所以同时可以达到调整溶液乙醇浓度的目的。不过步骤c所述调整溶液浓度也可以采取其他方式，诸如直接往料液中加入水溶液直接调节乙醇浓度也是允许的，虽然这样可能带来料液体积变大等结果，或者采用同为蒸发浓缩的薄膜浓缩并调整溶液乙醇浓度，此外还可以对料液选用合适的超滤膜或纳滤膜过滤浓缩，同时过滤过程中结合加水顶洗等手段也可以达到调节溶液乙醇浓度和浓缩的目的。同理在步骤f中的浓缩过程也可以采用薄膜浓缩的方式或超滤、纳滤过滤浓缩。作为本发明的优选方案，步骤a具体为将泽泻药材进行粉碎，粉碎至粒度范围为饮片大小至60目。这样大小的药材便于药材后续的浸泡提取，同时这样尺度的药材颗粒也较为方便加工制取。作为本发明的优选方案，步骤g所述干燥处理为冷冻千燥或喷雾干燥。这两种干燥方式都便于产业上实施操作，同时喷雾干燥受热时间极短，冷冻干燥更是无需受热，所以这两种干燥方式都有利于成品中泽泻总三碎酮醇类化合物保持稳定的化学状态。本发明优化后的工艺流程如图9所示。作为本发明中所选用树脂的预处理或再生方案，依照常规方式预处理或再生即可。本发明实施例中树脂的预处理方案为乙醇浸泡、蒸馏水清洗等。本发明中所采用的检测方法如下一.对泽泻总三萜酮醇类组分含量的测定采用分光光度法测量，具体如下仪器752紫外可见光栅分光光度计，水浴锅；试剂高氯酸(分析纯，上海金鹿化工有限公司)，冰醋酸(中国医药集团上海化学试剂公司)，5%香草醛一冰醋酸显色剂(中国医药集团上海化学试剂公司)，23—乙酰泽泻醇B标准品(自制)。方法采用水醋酸一香草醛一高氯酸分光光度法测定泽泻中三碎类化合物质量分数，采用C(香草醛一冰醋酸)=5%溶液0.3ml,高氯酸0.8ml,60。C水浴20min，冰浴冷却5min，加冰醋酸至5.0ml，摇匀，在544nm处测定样品的吸光度，与23—乙酰泽渴醇B标准品的吸光度做比对，计算得出样品中以23—乙酰泽渴醇B计的泽泻总三辟酮醇类组分含量。该;险测方法可以参见发明人在《福建中医学院学报》2007年第2期上发表的文章《大孔树脂法纯化泽泻总萜醇类成分的实验研究》一文中提到的方法。二、本发明中对23—乙酰泽泻醇B采用高效液相色谱测量，代表23—乙酰泽泻醇B的吸收峰出现在8.5min—9.5min之间，测量方法具体如下仪器岛津LC—20A高效液相色谱仪，SPD~20A型紫外检测器，CBM—10A色谱工作站。试剂泽泻醇B—23乙酸酯标准品为自制(按文献方法)，乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水。方法色谱条件为色谱柱Kromasil~C18柱(4.6mmx250mm,5)im);流动相乙腈一水(9:1);4全测波长210nm;流速0.8ml/min。图1为实施例6所述实验中原提取药液高效液相图谱；图2为实施例6所述实验中乙醇浓度为15。/。的提取液上D4020树脂柱吸附残留液高效液相图"^普；图3为实施例6所述实验中乙醇浓度为20%的提取液上D4020树脂柱吸附残留液高效液相图语；图4为实施例6所述实验中乙醇浓度为30%的提取液上D4020树脂柱吸附残留液高效液相图谱；柱吸附残留液高效液相图谱;图6乂柱吸附残留液高效液相图谱；图7为实施例8所述实验中用70%的乙醇洗脱的洗脱液的高效液相图谱；图8为实施例8所述实验中用90%的乙醇洗脱的洗脱液的高效液相图谱；图9为优化后的工艺流程示意图。具体实施例方式实施例l:本发明以泽泻药材为原料生产具有降低血脂作用的富含泽泻总三辟酮醇类组分物质，主要包括如下步骤1.预处理泽渴药材取自福建建瓯吉阳镇的泽泻GAP基地生产的泽泻球茎，将泽泻球茎敲碎后，选择20目的筛板对泽泻球茎碎块进行粉碎。2.提取将上述泽泻粗粉20kg装入提取浓缩机组的提取容器中,加入160L的85%乙醇,浸泡2h,提取温度70。C，热回流提取2h,过滤提取液;再加入120L的85%乙醇，提取温度70。C,热回流提取lh进行第二次的提取与过滤。3.调整溶液乙醇浓度。合并两次提取液，回收乙醇，至乙醇浓度约为30%时停止浓缩，取其上清液备用。4.吸附选择非极性D4020大孔树脂，经过乙醇浸泡、蒸馏水清洗等使用前常规处理后，装柱，将前期制备好的泽泻乙醇提取物上清液上柱，进行动态吸附，将流出液再过柱2次以达到树脂的充分吸附饱和。5.解吸附将吸附有泽泻总三萜酮醇类组分的大孔树脂在常温常压下用5倍量BV(说明书中"BV"代表树脂体积，下同)的30%乙醇洗脱，以除去非目标性成分，弃去上述步骤洗脱液，再用12倍量BV的，70%乙醇洗脱，收集该部分洗脱液置于贮罐中。6.浓缩将上述收集的洗脱液，减压回收乙醇，并浓缩至一定程度即可(密度为l.lg/m3)。7.千燥将上述所得的浓缩液经DC—1500喷雾千燥仪器干燥既得成品436g，得率为2.2%，成品中23—乙酰泽泻醇B约为32.56。/。；总三萜酮醇类物质约为68.20%。喷雾干燥具体条件为进口温度为180—200。C，出口温度为85—9(TC，进料量为300ml/h。将上述成品放入密闭包装容器内，置于阴凉干燥处存放。实施例2:本发明以泽泻药材为原料生产具有降低血脂作用的富含泽泻总三萜酮醇类组分物质，主要包^^如下步骤1.预处理泽渴药材购自医药公司的泽泻饮片。2.提取将上述泽泻饮片20kg装入提取浓缩机组的提取容器中,加入160L的95%的乙醇,浸泡12h,提取温度7(TC,热回流提取2h,过滤提取液;再加入120L的95%乙醇，提取温度70。C,热回流提取30min进行第二次的提取与过滤。3.调整溶液乙醇浓度合并两次提取液，回收乙醇，至乙醇浓度约为30%时停止浓缩，取其上清液备用。4.吸附选择非极性D101大孔树脂，经过乙醇浸泡、蒸馏水清洗等使用前常规处理后，装柱，将前期制备好的泽泻乙醇提取物上清液上柱，进行动态吸附，将流出液再过柱l次以达到树脂的充分吸附饱和。5.洗脱将吸附有泽泻总三萜酮醇类组分的大孔树脂在常温常压下用5倍量BV的30。/。乙醇洗脱，以除去非目标性成分，弃去该部分洗脱液，再用8倍量BV的95。/。乙醇洗脱，收集该部分洗脱液置于贝i罐中。6.浓缩将上述收集的洗脱液，减压回收乙醇，并浓缩至一定程度即可(密度为l.lg/m3)。7.干燥将上述所得的浓缩液经DC—1500喷雾干燥仪器干燥既得成品412g，得率为2.1%。成品中23—乙酰泽泻醇B约为30.73。/。；总三薛酮醇类物质约为67.75%,喷雾干燥具体条件为进口温度为180—200。C，出口温度为85—90。C，进料量为400ml/h。将上述成品放入密闭包装容器内，置于阴凉干燥处存放。实施例3:本发明以泽泻药材为原料生产具有降低血脂作用的富含泽泻总三萜酮醇类组分物质，主要包括如下步骤1.预处理泽泻药材购自医药公司的泽泻饮片，选择20目的筛板对泽泻饮片进行粉碎。2.提取将上述泽泻粗粉20kg装入提取浓缩机组的提取容器中,加入180L的70y。的乙醇,浸泡lh，提取温度70。C，热回流提取2h，过滤提取液;再加入140L的70%乙醇，提取温度70。C,热回流提取3h进行第二次的提取与过滤。3.调整溶液乙醇浓度合并两次提取液，回收乙醇，至乙醇浓度约为30%时停止浓缩，取其上清液备用。4.吸附选择非极性AB—8大孔树脂，经过乙醇浸泡、蒸馏水清洗等使用前常规处理后，装柱，将前期制备好的泽泻乙醇提取物上清液上柱，进行动态吸附，将流出液再过柱2次以达到树脂的充分吸附饱和。说明书第11/14页5.洗脱将吸附有泽泻总三碎酮醇类组分的大孔树脂在常温常压下用IO倍量BV的蒸馏水清洗，再以3倍量BV的50。/q乙醇洗脱，以除去非目标性成分，弃去上述步骤洗脱液，再用6倍量BV的95。/。乙醇洗脱，收集该部分洗脱液置于贮罐中。6.浓缩将上述收集的洗脱液，减压回收乙醇，并浓缩至一定程度即可(密度为l.lg/m3)。7.干燥将上述所得的浓缩液经冷冻干燥干燥既得成品401g，得率为2.0%。成品中23—乙酰泽泻醇B约为30.51。/。；总三萜酮醇类物质约为67.28%,将上述成品放入密闭包装容器内，置于阴凉干燥处存放。实施例4:本发明以泽泻药材为原料生产具有降低血脂作用的富含泽泻总三萜酮醇类组分物质，主要包括如下步骤1.预处理泽泻药材购自医药公司的泽泻饮片，选择60目的筛板对泽泻饮片进行粉碎。2.提取将上述泽泻粗粉20kg装入提取浓缩机组的提取容器中,加入240L的60。/Q的乙醇,浸泡24h,提取温度70。C,热回流提取4h,过滤提取液;再加入120L的70%乙醇，提取温度70。C，热回流提取30min进行第二次的提取与过滤。3.调整溶液乙醇浓度合并两次提取液，回收乙醇，至乙醇浓度约为20%时停止浓缩，取其上清液备用。4.吸附选择非极性D4020大孔树脂，经过乙醇浸泡、蒸馏水清洗等使用前常规处理后，装柱，将前期制备好的泽泻乙醇提取物上清液上柱，进行动态吸附，将流出液再过柱2次以达到树脂的充分吸附饱和。5.洗脱将吸附有泽泻总三辟酮醇类组分的大孔树脂在常温常压下用1BV的蒸馏水清洗，再以2倍量BV的40。/。乙醇洗脱，以除去非目标性成分，弃去上述步骤洗脱液，再用10倍量BV的80Q/。乙醇洗脱，收集该部分洗脱液置于贮罐中。6.浓缩将上述收集的洗脱液，减压回收乙醇，并浓缩至一定程度即可(密度为l.lg/m3)。7.千燥将上述所得的浓缩液经冷冻干燥干燥既得成品420g,得率为2.1%。成品中23—乙酰泽泻醇B约为23。/o;总三萜酮醇类物质约为68°/。，将上述成品放入密闭包装容器内，置于阴凉干燥处存放。实施例5:本发明以泽泻药材为原料生产具有降低血脂作用的富含泽泻总三萜酮醇类组分物质，主要包括如下步骤1.预处理泽泻药材购自医药公司的泽泻饮片，选择30目的筛板对泽泻饮片进行粉碎。2.提取将上述泽泻粗粉20kg装入提取浓缩机组的提取容器中,加入120L的95%的乙醇,浸泡311,提取温度70。C，热回流提取30min,过滤提取液;再加入2401^的60%乙醇提取温度70。C,热回流提取4h，进行第二次的提取与过滤。3.调整溶液乙醇浓度合并两次提取液，回收乙醇，至乙醇浓度约为40。/。时停止浓缩，取其上清液备用。4.吸附选择非极性D4020大孔树脂，经过乙醇浸泡、蒸馏水清洗等使用前常规处理后，装柱，将前期制备好的泽渴乙醇提取物上清液上柱，进行动态吸附，将流出液再过柱1次以达到树脂的充分吸附饱和。5.洗脱将吸附有泽泻总三萜酮醇类组分的大孔树脂在常温常压下以l倍量BV的50Q/。乙醇洗脱，弃去上述步骤洗脱液，以除去非目标性成分，再用3倍量BV的95。/。乙醇洗脱，收集洗脱液置于贮罐中。6.浓缩将上述收集的洗脱液，减压回收乙醇，并浓缩至一定程度即可(密度为l.lg/m3)。7.干燥将上述所得的浓缩液经冷冻干燥干燥既得成品402g,得率为2.0%。成品中23—乙酰泽泻醇B约为24。/。；总三碎酮醇类物质约为67%,将上述成品放入密闭包装容器内，置于阴凉干燥处存放。实施例6吸附条件实验1:发明人进行的实验l过程如下取用同一份提取药液，将料液乙醇浓度分别调整为15%、20%、30%、40%、50%，分别使用同样的D4020树脂柱进行吸附，对各个树脂柱吸附饱和前流出的吸附残液进行收集，将原提取药液与收集到的各吸附残液分别用液相色谱分析如下从图上我们可以直观地观察到，图3、图4、图5、图6所表征的乙醇浓度为20%—50%的4是耳又液上D4020树脂柱吸附残留液高效液相图谱，相对于图2所表征的乙醇浓度为15%的提取液上D4020树脂柱吸附残留液高效液相图谱，在lmin—2.5min之间的杂质吸收明显增大，这说明这些杂质在较高浓度的乙醇环境中不易为树脂所吸附。实施例7吸附条件实验2:发明人进行的实验2过程如下取相同体积VI的提取液6份，将其中5份分别调节为不同的乙醇浓度且最终各份提取液体积相同V2,所述5份提耳又液乙醇浓度分别为15%、20%、30%、40%、50%,将这些料液分别使用同样的D4020树脂柱进行吸附，且树脂量足够以保证吸附后树脂柱未饱和，对各个树脂柱流出的吸附残液进行收集；同时将剩余的1份提取液，同样也调整体积为V2,将该份提取液与之前收集到的5份吸附残液分别用液相色谱分析如下<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>由上述表格可知，提取液中乙醇浓度为20%、30%、40%的提取液，其有效成分23—乙酰泽泻醇B的泄漏率较提取液中乙醇浓度为15%的提取液低，尤其当提取液乙醇浓度为30。/。时有效成分23—乙酰泽泻醇B的泄漏率最低，吸附效果最佳。实施例8洗脱实验发明人进行的实验具体如下取一份吸附饱和的D4020树脂，用5倍量的30°/。的乙醇洗，然后将树脂分为等量的两份，装填成一样的树脂柱，分别用树脂体积8倍量的70%的乙醇与90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，对收集到的洗脱液用液相色谱定性分析，如图7、图8，我们可以发现高浓度的乙醇溶液洗脱下的洗脱液中杂质含量更少，洗脱液中23—乙酰泽泻醇B含量更高。权利要求1.一种从泽泻中提取并富集泽泻总三萜酮醇类组分的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤a.预处理将泽泻药材粉碎或切片；b.提取将预处理后的药材置于浓度为60％-95％(体积)的乙醇中浸泡、提取可溶性成分，得到提取液；c.调整提取液乙醇浓度将提取液中乙醇的浓度调整至20％-50％(体积)；d.吸附用经过预处理的或再生好的非极性或弱极性的大孔树脂对调整乙醇浓度后的提取液进行吸附处理；e.洗脱将吸附后的大孔树脂以树脂柱的形式，先通入浓度为0％-50％(体积)的乙醇对所述大孔树脂进行洗脱，弃去该部分洗脱液，再通入70％(体积)以上浓度的乙醇对所述大孔树脂进行洗脱，收集该部分洗脱液；f.浓缩对收集的洗脱液进行浓缩处理，得到浓缩液；g.干燥对浓缩液进行干燥处理，得到成品。2.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤c将提取液中乙醇的浓度调整至20%~40%(体积)。3.根据权利要求2的方法，其特征在于，其中步骤d所述的树脂吸附为将调整乙醇浓度后的提取液流经树脂柱作动态吸附，且吸附至饱和。4.根据权利要求3的方法，其特征在于，其中所述的树脂吸附步骤还包括将流经树脂柱的流出液重复通过树脂柱l一2次，吸附次数总共为2—3次。5.根据权利要求2的方法，其特征在于，其中步骤e所述洗脱为先通入l一5倍量树脂体积的浓度为0%—50%(体积)的乙醇洗脱，该部分洗脱液弃去，再通入3—12倍量树脂体积的浓度为70%(体积)以上浓度的乙醇水溶液洗脱树脂柱，收集该部分洗脱液。6.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤d所述的非极性或弱极性的大孔树脂为D4020、DlOl、AB—8中的任意一种。7.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤b所述的浸泡、提取可溶性成分的方法为将预处理后的泽泻药材按每kg药材原重量加入6—12L乙醇溶液的比例加入浓度为60%—95%(体积)的乙醇,浸泡1一24小时至药材湿透，持续0.54小时进行超声波、渗滤或热回流方法之一或以上方法的组合进行提取，收集提取液，对剩下的药渣按每kg药材原重量加入6—12L乙醇溶液的比例加入浓度为60%—95%(体积)的乙醇，持续0.5~4小时进行超声波、渗滤或热回流方法之一或以上方法的组合进行再次提取，收集提取液，将两次收集的提取液合并、过滤。8.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤c所述的调整溶液乙醇浓度或步骤f所述的浓缩，所采取的方法为减压蒸馏浓缩。9.根据权利要求1至8任意一项所述的方法，其特征在于，其中步骤a具体为将泽泻药材进行粉碎，粉碎至粒度范围为饮片大小至60目。10.根据权利要求1至8任意一项所述的方法，其特征在于，其中步骤g所述千燥处理为冷冻干燥或喷雾干燥。全文摘要本发明提供了一种从泽泻中提取并富集泽泻总三萜酮醇类组分的方法，该方法包括以下步骤将泽泻药材预处理成颗粒、用乙醇溶液提取、调整提取液乙醇浓度为20％-50％、使用非极性或弱极性大孔树脂吸附提取液、使用乙醇溶液洗脱、将洗脱液浓缩、干燥后制得成品。本法避免了生产过程中使用氯仿、乙酸乙酯等有机溶剂，提高了产品与生产过程的安全性。本法具有工艺简单、成本低、易操作、成品泽泻总三萜酮醇类组分和23-乙酰泽泻醇B含量高等突出优点。文档编号A61K36/884GK101658598SQ20091011252公开日2010年3月3日申请日期2009年9月16日优先权日2009年9月16日发明者吴水生申请人:福建中医学院