取代的氨酰基五元杂环烷类化合物及其用途的制作方法

专利名称：取代的氨酰基五元杂环烷类化合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及取代的氨酰基五元杂环烷类衍生物、其制备方法、含它们的药物组合 物及其作为凋亡抑制蛋白IAPsdnhibitor of Apoptosis Proteins)抑制剂用于制备抗肿 瘤活性的化合物的用途。
背景技术：
细胞凋亡、或称作程序性细胞死亡，通常发生在多细胞生物中健康组织的发育和 保养阶段。已知细胞凋亡途径在胚胎发育、病毒性发病机理、癌症、自身免疫性疾病和神经 变性疾病，以及其它事件中具有重要的作用。已发现细胞凋亡反应中的改变与癌症、自身免 疫性疾病例如系统性红斑狼疮和多发性硬化症的发展并且与包括与疱疹病毒、痘病毒和腺 病毒相关的病毒感染有关。凋亡抑制蛋白IAPs(Inhibitor of Apoptosis Proteins)是凋亡主要调节者 Caspases (半胱天东酶)的内源性抑制物，它们选择性地与Caspase-3、Caspase-7和/或 Caspase-9结合，阻断细胞凋亡所必须依赖的Caspases的蛋白水解活性，进而抑制细胞凋 亡。迄今为止，在人体中发现的IAPs有8个成员，包括NAIP、XIAP, cIAPl、cIAP2、ILP2、 Bruce、Survivin 和 Livin(ML-IAP)。其中，NAIP、XIAP、cIAPl 和 cIAP2 含有三个 BIR 结构 域(BIR1、BIR2、BIR3)，而 ILP2、Bruce、Survivin 和 Livin 只含有一个 BIR 结构域。已经证 明许多IAPs在癌细胞中异常表达，Survivin在多种恶性肿瘤中有高表达，但在正常细胞中 没有检查到该蛋白的存在。其它的IAPs成员虽然在多种正常组织中存在，但也像Survivin 一样在多种恶性肿瘤中过量表达。过量表达的IAPs诱导肿瘤细胞对化疗产生耐药性，同时 也抑制化疗或放疗引起的细胞凋亡。另一方面，线粒体中释放的Smac/Diablo蛋白可以与 IAPs结合，其结合的位点正是IAPs与Caspase-3、_7和Caspase-9结合的位置，从而抑制 了 IAPs的抗凋亡活性。根据IAPs家族蛋白在凋亡通路中的功能以及IAPs与Caspases和 Smac相互作用的机制，目前已经发现了多种能抑制IAPs功能并具有抗肿瘤活性的化合物。尽管一系列IAPs抑制剂已被开发出来，但目前还没有上市药物，不少化合物也还 涉及到效能、稳定性或毒性等方面的局限。因此，开发不同结构类型的安全有效IAPs抑制 剂具有积极的社会意义和良好的市场前景。

发明内容
本发明的目的是寻找新结构的选择性IAPs受体高亲和性的抑制剂，用于抑制人 体内IAPs的活性，进而增强Caspases的蛋白水解活性，从而起到治疗癌症的目的。本发明人已发现一系列结合IAPs并通过调节IAPs功能而促进细胞凋亡的新 化合物，且它们具有药学可接受的稳定性和生物利用度。该类化合物能够阻断IAPs与 Caspase-3, Caspase-7和Caspase-9的相互作用。本发明结果表明该类小分子可以在细 胞凋亡前下调节IAPs蛋白，由此说明当与其它细胞凋亡的诱导物一起给药时，该化合物的 应用在临床上可提供有益的效果。本发明人已证明本发明化合物与哺乳动物XIAP-BIR3、CIAP-BIR3结构域结合，从而促进癌细胞凋亡。本文中描述的化合物在多种癌细胞系中具有 促凋亡活性，这些细胞系例如膀胱癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、白血病、肺癌、淋巴瘤、多发 性脊髓瘤和卵巢癌细胞系，并且还可能用于其它癌细胞系和细胞对细胞凋亡具有抗性的疾 病中。这些结果表明本发明的化合物将具有针对实体瘤和起源于恶性血液疾病的肿瘤的治 疗活性。此外，本发明的化合物还可用于预防癌细胞的转移、入侵、发炎，和其它具有抗凋亡 细胞的特征的疾病中。本发明人经过研究发现，本发明化合物能够抑制IAPs的活性，进而 增强Caspases的蛋白水解活性，恢复Caspases的凋亡调节作用。因此，该类化合物可以用 于肿瘤的治疗。本发明基于上述发现而得以完成。发明概述本发明第一方面提供通式I的化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中X 是-CH2-或-0-或-S-；Y 是-CH2-或-CH2CH2-或-CO-；R1 选自1)-H,2) -C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，和3)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代；R2 选自1)-H,2)-C1-C6 烷基，3)-C3-C8 环烷基，4)-(C1-C6 烷基)-R7，和5)-Ar1,其中，R7 选自D-OR8,2)-SR8,3)-NR8R9,4) -NCONR8R9,5) -NCNNR8R9,6)-COOR8，7)-CONR8R9,和
8)-Ar1,Ar1选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) -CF3,5)-R8,6)-OR8,7)-NR8R9,和8)-COOR8,R8和R9各自独立地选自1)-H,2) - (C1-C6亚烷基)Q_3-苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自-C1-C4烷基、卤素 的基团取代，3)-C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) -C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6) -C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代；R3 选自1)-H,2)-C1-C6 烷基，3)-C3-C8 环烷基，4)-((^-(6烷基)-1 10，5)-Ar1,其中，R1 选自D-OR8,2)-SR8,3)-NR8R9,4) -NCONR8R9,5) -NCNNR8R9,6)-COOR8，7)-CONR8R9,和8)-Ar1,Ar1选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) -CF3,
5)-R8,6)-OR8,7)-NR8R9,和8)-COOR8，R8和R9各自独立地选自1)-H,2) - (C1-C6亚烷基)Q_3-苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自-C1-C4烷基、卤素 的基团取代，3)-C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5)-C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6) -C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代；[优选的，R3所连接碳原子可以为任意光学构型]R4和R4°°各自独立地选自1)-H,2)-C1-C6 烷基，3)-C3-C8 环烧基，4)-C2-C6 烯基，禾口5) -C2-C6 炔基；R5和R5°°各自独立地选自1)-H,2)-C1-C6 烷基，3)-C3-C8 环烧基，4)-C2-C6 烯基，禾口5) -C2-C6 炔基；R6 选自D-R11,2)-OR11,3)-NR11R12,4)-SOR11，*5)-SO2R11,其中，R11和R12各自独立地选自1)-H,2)-C1-C6 烷基，3)-C3-C8 环烷基，4)-C2-C6 烯基，5)-C2-C6 炔基，6)-COR8,7)-Ar1,




取代，
8)-(C1-C6烷基 PAr1，
9)-CO-Ar1JP
10)-CO-(C1-C6烷基 PAr1， 其中，
Ar1选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代
卤素， 硝基， 氰基， -CF3, -R8, -OR8， -NR8R9,和 -COOR8，
和R9各自独立地选自 -H,
-(C1-C6亚烷基)苯基，其中的苯基一个或多个选自-C1-C4烷基、卤素的基团
-C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代， -C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代， -C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和 -C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。
R1HN
Ia
及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中X、R1、R2、R3、R4、R4°°、 .和R6如本发明第一方面对通式I的化合物的定义。 根据本发明第一方面的化合物，其为式Ib化合物
及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中X、R1、R2、R3、R4、R4°°、 .和R6如本发明第一方面对通式I的化合物的定义。
根据本发明第一方面的化合物，其为式Ic化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中1^、记、铲、铲、和R9如 本发明第一方面对通式I的化合物的定义。根据本发明第一方面的化合物，其为式Id化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、! 8、和R9如 本发明第一方面对通式I的化合物的定义。根据本发明第一方面的化合物，其为式Icl化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、! 8、和R9如 本发明第一方面对通式I的化合物的定义。根据本发明第一方面的化合物，其为式Idl化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R\R2、R3、R8、和R9如 本发明第一方面对通式I的化合物的定义。根据本发明第一方面的化合物，其为式Ie化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、R2、R3、和Ar1如本发明第一方面对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) -CF3,5)-R8,6)-OR8,7)-NR8R9,和8)-COOR8，其中，R8和R9各自独立地选自1)-H,2) _ (C1-C6亚烷基)Q_3-苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自-C1-C4烷基、卤素的基团取代，3)-C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) -C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。根据本发明第一方面的化合物，其为式If化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、和Ar1如本发明第一方面对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) -CF3,5)-R8,6)-OR8,7)-NR8R9,和8)-COOR8,其中，R8和R9各自独立地选自1)-H,2) “ (C1-C6亚烷基)0_3"苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自-C1-C4烷基、卤素的基团取代，3)-C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) -C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。根据本发明第一方面的化合物，其为式Iel化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、和Ar1如本发明第一方面对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) -CF3,5)-R8,6)-OR8,7)-NR8R9,和8)-COOR8,其中，R8和R9各自独立地选自1)-H,2) - (C1-C6亚烷基)μ-苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自-C1-C4烷基、卤素 的基团取代，3)-C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) -C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。根据本发明第一方面的化合物，其为式Ifl化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、R2、R3、和Ar1如本发明第一方面对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代
1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) -CF3,5)-R8,6)-OR8,7)-NR8R9,和8)-COOR8,其中，R8和R9各自独立地选自1)-H,2) - (C1-C6亚烷基)o_3-苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自-C1-C4烷基、卤素 的基团取代，3)-C1-C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) -C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。根据本发明第一方面的化合物，其选自 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物。本发明第二方面提供了本发明第一方面任一项所述化合物的制备方法，其包括以 下步骤a)使式II化合物

II(例如式
表示的化合物)与式H-R6表
示的化合物反应，得到式
表示的化合物，然后脱除基团Z，得到式
表示的化合物； b)使式
表示的化合物与式
表示的化合物反应，得到
式
表示自制七☆物，然后在碱存在下水解，得到式
表示的化合物； c)在适宜的试剂(例如氯甲酸异丁酯、三乙胺、和N-甲基吗啡啉中的一种或多种)存在下，使式
表示的化合物与式
表示的化合物
反应，得到式
表示的化合物，然后脱除基团-Boc，得到式I化合物和任选的，d)使步骤C)的产物形成药学可接受的盐；其中，X、Y、R1、R2、R3、R4、R4°°、R5、R5°°、和R6如本发明第一方面任一项对通式I的化 合物的定义，Z选自-H、-Boc、和-Cbz。根据本发明第二方面的方法，其任选地具有以下一项或多项特征在步骤a)中，其中的第一步骤的反应条件可以采用干燥的四氢呋喃、N，N_ 二甲基 甲酰胺或者二氯甲烷作为溶剂，优选四氢呋喃，可以以DCC+HOBt组合或是氯甲酸异丁酯+ 叔胺组合作为反应辅助试剂，优选可以使用DCC+HOBt组合，反应温度可以在_15°C 25°C，
2优选0°C 10°C，反应可以为1小时到24小时，优选12小时；第二步骤脱保护可以采用干 燥的溶解有2-4N HCl的有机溶剂，例如四氢呋喃、乙酸乙酯、二氧六环，可以优选4N HCl/ 乙酸乙酯，温度可以在-15°C 25°C，优选0°C，反应可以为1小时到8小时，优选2小时；在步骤b)中，其中的第一步骤的反应条件可以采用干燥的四氢呋喃、N, N-二甲 基甲酰胺或者二氯甲烷作为溶剂，优选四氢呋喃，可以以DCC+HOBt组合或是氯甲酸异丁 酯+叔胺组合作为反应辅助试剂，优选DCC+HOBt组合，反应温度可以在-15°C 25°C， 优选0°C 10°C，反应可以是1小时到24小时，优选12小时；第二步骤脱保护可以采用 1-4N NaOH或LiOH的混合的甲醇/水溶液，优选IN NaOH的50%甲醇溶液，反应温度可以 在-15°C 25°C，优选0°C 10°C，反应可以是1小时到24小时，优选3小时；禾口在步骤c)中，其中的第一步骤的反应条件，可以采用干燥的四氢呋喃、N，N-二甲 基甲酰胺或者二氯甲烷作为溶剂，优选四氢呋喃，优选氯甲酸异丁酯+N-甲基吗啡啉作为 反应辅助试剂，反应温度可以在_15°C 25°C，优选0°C 10°C，反应可以是1小时到24小 时，优选12小时；第二步骤脱保护可以采用干燥的溶解有2-4N HCl的有机溶剂，例如四氢 呋喃、乙酸乙酯、二氧六环，优选4N HCl/乙酸乙酯，温度可以在_15°C 25°C，优选0°C，反 应可以是1小时到8小时，优选2小时。根据本发明第二方面的方法，其中的
表示的化合物可以用式
表示的化合物代替，得到式I化合物的异构体本发明第三方面提供了一种药物组合物，其包含治疗和/或预防有效量的本发明 第一方面任一项所述的化合物以及任选的药学可接受的载体或赋形剂。本发明第四方面提供了本发明第一方面任一项所述的化合物在制备用于治疗和/ 或预防与IAPs过度表达相关的疾病的药物中的用途。根据本发明第四方面的用途，其中所述的疾病选自膀胱癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠 癌、白血病、肺癌、淋巴瘤、多发性脊髓瘤、卵巢癌和宫颈癌，尤其例如是卵巢癌和宫颈癌。本发吸第五方面提供了在有需要的哺乳动物(例如人)中治疗和/或预防与IAPs 过度表达相关的疾病的方法，该方法包括给所述哺乳动物(例如人)施用治疗和/或预防 有效量的本发明第一方面任一项所述的化合物。根据本发明第五方面的用途，其中所述的疾病选自膀胱癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠 癌、白血病、肺癌、淋巴瘤、多发性脊髓瘤、卵巢癌和宫颈癌，尤其例如是卵巢癌和宫颈癌。发明详述在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的X是-0-。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的X是-S-。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的Y是-CH2_。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的Y是-CO-。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R1选自-H、任选被一个或多个卤 素取代的-C1-C6烷基。
在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R1选自-H、和-C1-C6烷基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R1选自-H、和-C1-C4烷基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R1选自-H、甲基、乙基、丙基、异丙基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R1选自-H、甲基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R2选自^HcC1-C6烷基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R2选自-H、-C1-C4烷基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R2选自-H、甲基、乙基、丙基、异丙基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R2选自-H、甲基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R3选自-Η、 烷基、-C3-C8环 烧基、-(C1-C6 烷基)-R1。，其中 R1。选自-OR8、-SR8、-NR8R9、-NCONR8R9、-NCNNR8R9、-COOR8、-CON R8R9, R8和R9各自独立地选自^UC1-C6亚烷基)。_3_苯基，其中的苯基任选被一个或多个 选自-(^-(；烷基和卤素的基团取代、任选被一个或多个卤素取代的-C1-C6烷基、任选被一个 或多个卤素取代的-C3-C8环烷基、任选被一个或多个卤素取代的-C2-C6烯基、和任选被一个 或多个卤素取代的-C2-C6炔基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R3选自^HrC1-C6烷基、-C3-C8环 烷基、-(C1-C6烷基)-0R8，其中R8选自-H、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、和-C2-C6炔基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R3选自^HrC1-C4烷基、-C4-C6环 烷基、-(C1-C4烷基)-0R8，其中R8选自-C2-C6炔基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R3选自-H、甲基、乙基、丙基、异 丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、环戊基、环己基、2-丙炔基氧基-乙基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R4和R4tltl各自独立地选 自-H、-C1-C4 焼基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R4和R4°°各自独立地选自-H、甲
基、乙基、丙基、异丙基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R4和R4°°各自独立地选自-H、甲基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R5和R5tltl各自独立地选 自-H、-C1-C4 焼基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R5和R5°°各自独立地选自-H、甲
基、乙基、丙基、异丙基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R5和R5°°各自独立地选自-H、甲基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R6是-NR"R12。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R6是-NR11R12,其中R11和R12各 自独立地选自-H、-C1-C4 烷基-C4-C6 环烷基、-C0R8、-Ar1、-(C1-C4 烷基 PAr1、-CO-Ar1, 和-CO-(C1-C4 烷基 PAr1。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R6是-NR11R12,其中R11和R12各自独立地选自-H、-C1-C4 烷基-C4-C6 环烷基、-C0R8、-Ar1、-(C1-C4 烷基 PAr1、-CO-Ar1, 和-CO- (C1-C4烷基)-Ar1，其中Ar1是任选被一个或多个选自以下的基团取代的苯基卤素、 硝基、氰基、-CF3、-R8、-OR8、-NR8R9JP -COOR8。在本发明化合物的一个实施方案中，其中所述的R6是-NR11R12,其中R11和R12各 自独立地选自-H、-C1-C4 烷基-C4-C6 环烷基、-C0R8、-Ar1、-(C1-C4 烷基 PAr1、-CO-Ar1, 和-CO- (C1-C4烷基)-Ar1，其中Ar1是任选被一个或多个选自以下的基团取代的苯基卤素、 硝基、氰基、-CF3、-R8、-OR8、-NR8R9、和-C00R8，其中R8和R9各自独立地选自-H、_(C「C4亚 烷基)μ-苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自-C1^4烷基和卤素的基团取代、任选被 一个或多个卤素取代的-C1-C4烷基、任选被一个或多个卤素取代的-C4-C6环烷基、任选被一 个或多个卤素取代的-C2-C4烯基、和任选被一个或多个卤素取代的-C2-C4炔基。在本发明化合物的一个实施方案中，其中X 是-0-或-S-；Y 是-CH2-或-CO-；R1 选自-H、-C1-C4 烷基；R2 选自-H、-C1-C4 烷基；R3-H、-C1-C6 烷基、-C3-C8 环烷基、_ (C1-C6 烷基)_0R8，其中 R8 选自-H、-C1-C6 烷 基、-C2-C6烯基、和-C2-C6炔基；R4和R4°°各自独立地选自-H、-C1-C4烷基；R5和R5°°各自独立地选自-H、-C1-C4烷基；R6是-NR11R12,其中R11和R12各自独立地选自-H、-C1-C4烷基-C4-C6环烷 基、-COR^-Ar1、-(C1-C4 烷基 PAr1、-CO-Ar1JP -CO-(C1-C4 烷基 PAr1，其中 Ar1 是任选被一 个或多个选自以下的基团取代的苯基卤素、硝基、氰基、-CF3、-R8, -OR8、-NR8R9^n -C00R8， 其中R8和R9各自独立地选自^UC1-C4亚烷基)。_3_苯基，其中的苯基任选被一个或多个 选自-(^-(；烷基和卤素的基团取代、任选被一个或多个卤素取代的-C1-C4烷基、任选被一个 或多个卤素取代的-C4-C6环烷基、任选被一个或多个卤素取代的-C2-C4烯基、和任选被一个 或多个卤素取代的-C2-C4炔基。本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文 献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和 短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和 短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表 述的含义为准。本文中使用的术语“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴、和碘。本发明中所采用的术语“烃基”包括烷基、烯基和炔基。这些烷基、烯基和炔基可 以是直链的或者可以是支链的。本文中使用的术语“烷基”是指包括具有指定数目碳原子的支链的和直链的饱和 脂族烃基，例如C1-C6烷基中的C1-C6被定义为包括具有1、2、3、4、5或6个以线型或支链型 排列的碳的基团。如上定义的C1-C6烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、 正丁基、叔丁基、异丁基、戊基和己基。本文中使用的术语“烯基”是指其中含有指定数目碳原子、且其中至少有两个碳原子以一个双键彼此连接、且具有E或Z构型和其组合构型的不饱和的直链或支链烃基。例 如，C2-C6烯基中的C2-C6被定义为包括具有2、3、4、5或6个以线型或支链型排列的碳且至 少两个碳原子通过一个双键连接的基团。C2-C6烯基的实例包括乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯 基、I- 丁烯基等。本文中使用的术语“炔基”是指其中含有指定数目碳原子、并且其中至少有两个碳 原子通过一个三键连接在一起的不饱和的直链或支链烃基。例如C2-C6炔基中的C2-C6被定 义为包括链内具有2、3、4、5或6个碳原子、至少有两个碳原子通过一个三键连接在一起的 基团。这种炔基的实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基等。本文中使用的术语“环烷基”是指其中含有指定数目碳原子的单环饱和的脂族烃 基，例如C3-C8环烷基中的C3-C8被定义为包括以单环排列的方式具有3、4、5、6、7或8个碳 的基团。以上定义的C3-C8环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环 庚基。本文中使用的术语“环烯基”是指其中具有指定数目碳原子的单环不饱和的脂族 烃基，例如C3-C8环烯基中的C3-C8被定义为包括以单环排列的方式具有3、4、5、6、7或8个 碳的基团。以上定义的C3-C8环烯基的实例包括但不限于环戊烯基和环己烯基。本文中使用的术语“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。本文中使用的术语“卤代烷基”意指一种如上定义的烷基，其中每个氢原子可相继 被卤素原子代替。卤代烷基的实例包括，但不限于-CH2F、-CHF2和-CF3。本文中使用的术语“芳基"，无论是单独还是与另一个基团结合使用，是指这样一 种含有6个碳原子的碳环芳族单环基团，该基团可进一步稠合于第二个可以是芳族的、饱 和的或不饱和的5元或6元碳环基团上。芳基包括但不限于苯基、2，3- 二氢化茚基、1-萘 基、2-萘基和四氢萘基。稠合的芳基可连接于环烷基环或芳香环上适当位置处的另一个基 团上。本文中使用的术语“联苯基”是指通过苯基环上任何一个可用位点键合在一起的 两个苯基基团。联苯基可从苯环上的任何可用位置以共价的方式连接至其它基团。本文中使用的术语“杂芳基”是指具有最高达十个原子的单环或双环体系，其中 至少一个环是芳环，并且含有1至4个选自0、N和S的杂原子。杂芳基取代基可通过一个 环上碳原子或杂原子之一连接。杂芳基的实例包括但不限于噻吩基、苯并咪唑基、苯并[b] 噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、苯并吡喃基、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑 基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、中氮茚基、异氮茚基、3H-吲哚基^丨哚基、B引P坐 基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、2，3- 二氮杂萘基、1，5- 二氮杂萘基、喹喔啉基、 喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、异噻唑基、异苯并二氢吡喃基、苯并二氢吡喃基、异嗯唑基、呋咕 基、二氢吲哚基、异二氢氮茚基、噻唑并[4，5_b]吡啶，以及荧光衍生物。本文中使用的术语“杂环”、“杂环的”或“杂环基”意指一个含有1至4个选自0、N 和S的杂原子的5、6或7元非芳香环体系。杂环的实例包括但不限于吡咯烷基、四氢呋喃 基、哌啶基、吡咯啉基、哌嗪基、咪唑烷基、吗啉基、咪唑啉基、吡唑烷酮、吡唑啉基。本文中使用的术语“杂双环基”，是指一种稠合于另一个环上的如上文所定义的杂 环，所述另一个环可为一个杂环、一个芳基或本文中定义的其它任何环。这种杂双环的实例 包括但不限于香豆素、苯并[d] [1,3] 二Τ ·茂、2，3_ 二氢苯并[b] [1,4]间二氧杂环戊烯和3，4-二氢-2!1-苯并[b][l，4]间二氧杂环戊烯(dio印ine)。本发明涵盖第一方面的通式I化合物以及它的各种优选的或具体的实施方案的 化合物，还涵盖这些化合物各种异构体。本发明的部分化合物可以光学异构体或互变异构 体的形式存在，本发明包括其所有存在形式，特别是纯异构体的形式。不同的异构体形式可 以以各种常规的手段与其它形式的异构体分离或拆分开，或者某种异构体可以各种常规的 合成方法或立体专一或不对称合成的方法得到。由于本发明通式I化合物是以药用为目的 的，可以理解它们最好以纯的形式提供，例如至少60%的纯度，更合适的至少75%，更好的 至少85%，最好至少98%的纯度(％是指重量百分比)。本发明还涉及本发明化合物的合适的药学可接受的盐、溶剂合物或水合物。本发明的化合物可以以衍生自无机酸或有机酸的药物可接受盐的形式使用。词语 “药学可接受的盐”指在可靠的医学判断范围内，适合用于与人类和低等动物的组织接触而 不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，且与合理的效果/风险比相称的盐。药学可接受的 盐是本领域公知的。例如，S. M. Berge，et al. J. Pharmaceutical Sciences，1977，66 1 中 对药学可接受的盐进行了详细描述。所述盐可通过使本发明化合物的游离碱官能度与合 适的有机酸反应，在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者单独制备。本发 明化合物的药学可接受的盐包括，但是并不局限于，通式I化合物与无机酸如盐酸、硫酸、 磷酸、亚磷酸、氢溴酸和硝酸所成的盐；以及通式I化合物与各种有机酸如马来酸、富马酸、 苹果酸、延胡索酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、乳 酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、棕榈酸、水杨酸等所成的盐。此外，本发 明化合物的药学可接受的盐还包括，但不限于，通式I化合物与无机碱制备的盐如钠盐、钾 盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等；由有机碱获得的盐包括但不限 于伯胺、仲胺和叔胺的盐，其中取代的胺类包括天然存在的取代胺、环胺和碱性离子交换树 脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨 基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、乙二 胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺树脂等。本发明化合物 的游离碱形式与它们各自的盐形式在某些物理性质(如在极性溶剂中的溶解度)上稍有不 同，但对于本发明目的，各酸式盐与它们各自的游离碱形式相当(参见例如S.MBerge，et al. ,"Pharmaceutical Salts, ” J. Pharm. Sci. ,66 :1_19 (1977)，其通过引用并入本文)。本发明中的一些化合物可能用水或各种有机溶剂结晶或重结晶，在这种情况下， 可能形成各种溶剂合物。本发明包括那些化学计量的溶剂合物，包括水合物，也包括在用低 压升华干燥法制备时形成的包含可变量水的化合物。一般来说，对于本发明的目的，与药学 可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂合物形式与非溶剂合物形式相当。本发明化合物及其药学可接受的盐还可以是前药或可在体内代谢变化后释放出 所述活性成分的形式。选择和制备适当的前药衍生物是本领域技术人员公知技术。本文中使用的术语“药学可接受的载体”或“赋形剂”是指包括但不限于任何助 齐U、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增味剂、表面活性剂、湿 润剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等渗剂、溶剂、乳化剂或包胶剂，所述包胶剂例如脂质体、环 糊精、包胶聚合递送体系或聚乙二醇基质，其用于受试者、优选人类时是可接受的。本发明涉及通式I的化合物、其所有可能的异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物用于生产药物的用途，所述药物可以用于治疗和/或预防由IAPs过度表达引 起的相关的疾病。所述疾病包括但不局限于如下疾病膀胱癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、白 血病、肺癌、淋巴瘤、多发性脊髓瘤、卵巢癌和宫颈癌，尤其例如是卵巢癌和宫颈癌。另一方面，本发明的通式I的化合物或其药学可接受的盐可以单独使用，或与药 学可接受的的载体或赋形剂一起以药物组合物的形式使用，当以药物组合物的形式使用 时，通常将有效剂量的本发明通式I化合物或其药学可接受的盐或水合物以及一种或多种 药学可接受的载体或稀释剂结合制成适当的施用形式或剂量形式，这一程序包括通过合适 的方式将组分混合、粒化、压缩或溶解。因此，本发明提供了药物组合物，它包含通式I的化 合物、其所有可能的异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物以及至少一种药学 可接受的的载体。本发明化合物的药物组合物，可以以下方面的任意方式施与口服、喷雾吸入、直 肠给药、鼻腔给药、阴道给药、局部给药、非肠道给药如皮下、静脉、肌内、腹膜内、鞘内、心室 内、胸骨内或颅内注射或输入，或借助一种外植的储器用药，其中优选口服、肌注、腹膜内或 静脉内用药方式。本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药。给药剂型可以是液 体剂型、固体剂型。液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其 他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干 粉针剂、包合物、埋植剂、贴剂、擦剂等。本发明的药物组合物中还可以含有常用的载体，这里所述药学可接受的载体包括 但不局限于离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白如人血清蛋白，缓冲物质如 磷酸盐，甘油，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质，如 硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷 酮，纤维素物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯，蜂蜡，羊毛酯等。载体在药物组合 物中的含量可以是1重量％ -98重量％，通常大约占到80重量％。为方便起见，局部麻醉 剂，防腐剂，缓冲剂等可直接溶于载体中。口服片剂和胶囊可以含有赋形剂如粘合剂，如糖浆，阿拉伯胶，山梨醇，黄芪胶，或 聚乙烯吡咯烷酮，填充剂，如乳糖，蔗糖，玉米淀粉，磷酸韩，山梨醇，氨基乙酸，润滑剂，如硬 脂酸镁，滑石，聚乙二醇，硅土，崩解剂，如马铃薯淀粉，或可接受的增润剂，如月桂醇钠硫酸 盐。片剂可以用制药学上公知的方法包衣。口服液可以制成水和油的悬浮液，溶液，乳浊液，糖浆或酏剂，也可以制成干品，用 前补充水或其它合适的媒质。这种液体制剂可以包含常规的添加剂，如悬浮剂，山梨醇，纤 维素甲醚，葡萄糖糖浆，凝胶，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，硬脂酸铝凝胶，氢化的食用油 脂，乳化剂，如卵磷脂，山梨聚醣单油酸盐，阿拉伯树胶；或非水载体(可能包含可食用油)， 如杏仁油，油脂如甘油，乙二醇，或乙醇；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，山梨酸。如需 要可添加调味剂或着色剂。栓剂可包含常规的栓剂基质，该赋形剂在室温下呈固体状态，而在体温下熔化释 出药物，如可可脂，其它甘油酯或蜂蜡。对胃外投药，液态剂型通常由化合物和一种消毒的载体制成。载体首选水。依照 所选载体和药物浓度的不同，化合物既可溶于载体中也可制成悬浮溶液，在制成注射用溶液时先将化合物溶于水中，过滤消毒后装入封口瓶或安瓿中。当皮肤局部施用时，本发明化合物可以制成适当的软膏，洗剂，或霜剂的形式，其 中活性成分悬浮或溶解于一种或多种的载体中。其中软膏制剂可以使用的载体包括但不局 限于矿物油，液体凡士林，白凡士林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳化蜡和水；洗剂 和霜剂可使用的载体包括但不限于矿物油，脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，吐温60，十六烷酯 蜡，十六碳烯芳醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。本文所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或 间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。本文所用的术语“治疗有效量”是指一种剂量，其施用于该受试者例如哺乳动物例 如人后可产生期望的生理应答，特别是产生针对本发明所述疾病有关生理应答。术语“治疗 有效量”亦有相似的含义。依据给药方式的不同，组合物中可以含有重量比0. 1%，或更合适的重量比 10-60%的活性组分。但组分中包含单位剂量时，每个单位最好包含1-500毫克活性成分。另外需要指出，本发明化合物针对不同患者的特定使用剂量和使用方法决定于 诸多因素，包括患者的年龄，体重，性别，自然健康状况，营养状况，化合物的活性强度，服 用时间，代谢速率，病症的严重程度以及诊治医生的主管判断。这里优选使用剂量介于 0. 01-100mg/Kg 体重 / 天。必须认识到，通式I化合物的最佳给药剂量和间隔是由化合物性质和诸如给药的 形式、路径和部位等外部条件决定的，而这一最佳给药剂量可用常规的技术确定。同时也必 须认识到，最佳的疗程，即通式I化合物在额定的时间内每日的剂量，可用本领域内公知的 方法确定。本发明涉及制备通式I化合物或其药学可接受的盐、溶剂合物或水合物的制备方 法。以下对该方法的一般性描述中，各变量或取代基的具体定义如本发明第一方面化合物 的定义。本发明化合物可以通过由通式II表示的化合物与其他可组合片段偶联而成 其中Z选自包括但不限于以下基团-11、-80(3、-0 ，优选的2是-80(3。通式II化合物的优选但不仅限于如下几种结构 IIa、IIb结构的合成可以直接使用商业可购买L-脯氨酸、4-S-羟基-L-脯氨酸与 Boc酸酐合成制得。lie、lid、lie、llf的合成通过下列方案1的路线 以上方案1的一般步骤为选取未取代的天然半胱氨酸、丝氨酸，或者被R5、R■取 代的天然半胱氨酸、丝氨酸，经上述类似路线，与甲醛、乙醛、丙酮或者带有礼、1 4(1(1取代基的 醛、酮类化合物反应，得到带有S、0原子的取代/未取代五元杂环烷烃。
以Ie化合物为例，以下方案2说明本发明如何由通式II化合物到通式I化合物 的。方案2 以上方案2的一般步骤为在分别合成出胺片段2ii和酸片段2iv之后，再与lie 顺序缩合，得到2vii之后再脱保护成盐得到终产物Ie。以If化合物为例，以下方案3说明本发明如何由通式II化合物到通式I化合物 的。方案3 以上方案3的一般步骤与方案2唯一不同之处在于，在得到中间体2v之后，通过 适当的还原方法得到中间体3i，再通过顺序缩合，得到3iii，脱保护成盐得到If。通式I化合物可以用常规方法单个合成，亦可用组合化学的混_分方法或平行合 成的方法以库(每个库中至少含两个，或5-1000个，最好是10-100个化合物)为单位合成， 即可以在液相中合成也可以用固相合成方法。反应所用的各种原材料是本领域技术人员根 据已有知识可以制备得到的，或者是可以通过文献公知的方法制得的，或者是可以通过商 业购得的。以上反应方案中所用的中间体、原材料、试剂、反应条件等均可以根据本领域技 术人员已有知识可以作适当改变的。关于制备通式I化合物更详尽的资料可以参见下文具 体实施方式部分。
具体实施例方式下面通过具体的中间体和实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些中间 体和实施例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发 明。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽 然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此 作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料 和操作方法是本领域公知的。化合物的熔点由RY-1熔点仪测定，温度计未较正。质谱由 MicromassZabSpec高分辨率质谱仪(分辨率1000)测定。t-NMR由JNM-ECA-400超导NMR 仪测定，工作频率1H-NMR 400MHz o在本发明的上下文中，使用如下缩略语
Boc 叔丁氧基羰基；
Cbz 苯甲氧基羰基；
DCM 二氯甲烷；
DIPEA 二异丙基乙胺；
DMF N，N-二甲基甲酰胺；
DCC 环己基碳二亚胺
HOBt 1-羟基苯并三唑；
TEA 三乙胺；
NMF N-甲基吗啡啉；
THF 四氢呋喃；
CICOOiBu氯甲酸异丁酯；
LiAlH4 四氢铝锂；
NaBH4 硼氢化钠；
TLC 薄层色谱法。
中间体制备例1 式lie化合物的合成
步骤1)将12. lg(0. lmol)的L_半胱氨酸溶于60ml热水当中，缓慢倾入10mL 36%的甲 醛水溶液，摇勻后静置过夜，次日过滤所析出晶体，再用乙醇和水重结晶得针状白色晶体 12. 8g，收率为 96. 2%, m. p :196_197°C。步骤2)冰浴下，将0. lOmol的L-噻唑烷酸溶于50mL的2N的氢氧化钠水溶液(0. lOmol) 中，搅拌下将24. 4g(0. llmol)的(Boc)20和50mL的丙酮混合溶液缓慢滴入，加毕，继续搅拌 2h。加入200mL的水稀释反应液，用80mLX3的乙酸乙酯萃取3次，弃去有机相。水相冰浴 下用lmol/L的盐酸调节pH值为2，再用80mLX 3的乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，无水硫 酸钠干燥后减压除去溶剂，用石油醚和乙酸乙酯重结晶得白色晶体。中间体制备例2 式lid化合物的合成 反应流稈 步骤1)将L-半胱氨酸(12. 2g, lOOmmol)溶于100ml无水甲醇中，通HCI至原料全部溶解，继续通气2h以上，通气结束搅拌过夜。次日减压蒸干溶剂，残余物用甲醇溶解再蒸干，重复 2次以带走HC1。蒸干溶剂得到粗品，用甲醇-乙醚重结晶。收率91%。m.p :143-145°C。步骤2)3. 5g(20mmol)中间体lii与40ml丙酮混合回流10分钟后，加入10ml甲醇使体系 中固体全部溶解，继续回流0. 5h后，冷却析晶，滤出晶体后母液浓缩继续析晶。得到无色晶 体，收率 94%。m. p :165-168°Co步骤3)4. 03g(19mmol)中间体liii与1. 92g TEA混合溶解在20ml DCM当中，搅拌下滴入 4. 15g(19mmOl)BOc20溶解在20ml DCM当中的溶液，室温反应3h之后用20ml 10%柠檬酸、 20ml水依次洗涤，旋干直接用作下一步。步骤4)中间体liv溶于25ml甲醇当中，加入25ml 2N NaOH水溶液，室温反应4h，TLC检 测原料消失之后减压尽量除去甲醇，用水稀释至50ml，用20mlX3的乙醚洗去多余Boc20， 相冰浴下用lmol/L的盐酸调节pH值为2，有大量白色固体析出，过滤水洗得到中间体lid。中间体制备例3 式lie化合物的合成步骤1)将L-丝氨酸10. 5g(100mmol)和37%的甲醛水溶液10ml (120mmol)溶解在50ml 的2N NaOH的水溶液中，冰浴下搅拌过夜。次日冰浴下将24. 0g(Boc)20(110mmol)溶在40ml 丙酮里的溶液滴入反应液中，继续搅拌lh后，用350ml水将反应液冲稀，然后用乙酸乙酯 120ml分3次萃取，弃去有机相，水相用HC1调至PH值为2，用120ml乙醚分三次萃取，收集 有机相，减压蒸干，得到lie，无色油状物，放置过夜变成固体，用乙酸乙酯-石油醚重结晶 得到棱形晶体。收率94%。中间体制备例4 式Ilf化合物的合成 反应流稈 反应流稈

式Ilf化合物的合成可以参照式lie化合物的合成，只是原料换成L-苏氨酸。 中间体制各例5 可用干制各t施例1仆,合物的中间体2ii的合成
rPh 2ii
反应流程 步骤1)将12. lg(lOOmmol)的苯乙胺与11. lg(llOmmol)三乙胺溶于200mL干燥二氯甲烷 中，冰浴下小心滴加含有14. 5g(100mmol)苯甲酰氯的100mL 二氯甲烷溶液，滴完缓慢升至 室温，反应2小时。反应液用乙酸乙酯-水分配萃取，收集有机相，无水Na2S04干燥后减压 旋干，得到白色固体，无需分离，烘干后直接用于下一步反应。步骤2)冰浴下小心向400mL干燥THF中分批加入5. 0g (约合130mmol) LiAlH4，加毕，待温 度稳定至0°C后再向体系中滴加上一步产物溶于200mL干燥THF当中的溶液，缓慢滴加以保 证体系放热放气平稳。滴完将体系回流过夜。冰浴冷却反应，小心滴加饱和氯化铵溶液以 破坏剩余LiAlH4。过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤至无产物。合并有机相，减压除去溶剂后通过 柱色谱分离(流动相为相应比例的乙酸乙酯_石油醚)得到N-苯乙基苄胺。
中间体制各例6 可用干制各t施例1仆,合物的中间体2iv的合成
反应流稈= Boc-L-Ala-OH的制备同Boc-L-噻唑烷酸的制备。2S-环己基-L-甘氨酸甲酯盐酸盐的制备同L-半胱氨酸甲酯盐酸盐的制备。步骤1)冰浴控温0°C以下，将Boc-丙氨酸1. 89g(10mmol)溶于二氯甲烷中，依次小心加入 DCC 2.27g，H0Bt 1. 49g，2S-环己基 _L_ 甘氨酸甲酯盐酸盐 2. 07g (lOmmol)，三乙胺 1. 01g， 室温反应过夜，过滤除去白色沉淀DCU，有机相依次用10%的柠檬酸、饱和食盐水、4%的碳 酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗涤，无水Na2S04干燥，减压旋干二氯甲烷溶剂，得浅黄色油状 物，然后加入乙酸乙酯溶剂，低温静置，有白色沉淀DOT析出，过滤除去DOT，减压旋干乙酸 乙酯，再加入乙酸乙酯低温静置，如此反复几次除去绝大部分的DOT，最后经硅胶柱层析得 白色固体2. 73，收率80%。步骤2)将中间体2iii约2. 70g溶于15mL甲醇，加入2N NaOH 10mL，室温反应2小时， TLC检测反应进程，IN HC1调节pH近中性，减压旋去部分甲醇，加水稀释，滤去不溶性杂质， 滤液于冰浴中IN HC1酸化，立即有白色固体析出，过滤收集，水洗至洗液近中性，干燥，甲 醇_水重结晶得到无色针状结晶2. 05g,收率79%。中间体制备例6 可用于制备实施例1化合物的中间体3ii的合成 步骤1)冰盐浴控温0°C以下，向溶有11. 5g(50mmOl)BOC-噻唑烷酸的二氯甲烷中，小心加 入 10. 6g(50mmol)N-苯乙基苄胺，7. 4g (55mmol) HOBt，并小心滴加 11. 3g (55mmol) DCC 的二 氯甲烷溶液，滴加完毕低温反应半小时，室温搅拌过夜，过滤除去白色沉淀DCU，有机相依次 用10%的柠檬酸、饱和食盐水、4%的碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗涤，无水Na2S04干燥， 减压旋干二氯甲烷溶剂，得浅黄色油状物，然后加入乙酸乙酯溶剂，低温静置，有白色沉淀 D⑶析出，过滤除去D⑶，减压旋干乙酸乙酯，再加入乙酸乙酯低温静置，如此反复几次除去 绝大部分的D⑶，最后经硅胶柱层析得白色固体17. 5，收率83%。
步骤2)N2保护条件下，将上步原料12. 7g(30mmol)溶于无水THF中，冰盐浴控温0°C以下， 小心加入NaBH42. 4g(30mmol)，半小时后小心滴加3. 81g 12的THF溶液，滴加完成后，继续 反应2小时，加热回流48小时，TLC检测反应进程。反应结束后，小心加入饱和NH4C1水溶液，50°C无气泡放出，加入2N NaOH溶解不 溶沉淀，水层用甲基叔丁基醚萃取，合并有机相，无水Na2S04干燥，硅胶柱层析得白色粉末 状中间体3i约9. 2g，收率75% 步骤3)冰盐浴控温0°C以下，将上一步所得白色固体9. 18g溶于少量CH2C12中，小心加入 50mL冰冷的4N HCl/EtOAc溶液，0_4°C反应2小时，大量白色沉淀析出，过滤得中间体3i i 约7. 6g，收率97%。实施例1 步骤1)控温_15°C以下，将中间体2iv 328mg溶于5mL无水THF中，小心加入llOii L N_甲 基吗啡啉，再加入140 iiL氯甲酸异丁酯。半小时后，加入中间体3ii 348mg和llOiiL N-甲 基吗啡啉的3mL DMF溶液，在-15°C继续搅拌半小时，室温反应2h，减压浓缩去溶剂。残留 物溶于25mL乙酸乙酯中，用5% NaHC03、水、IN HC1和水各25mL依次洗涤后，无水Na2S04干 燥，硅胶柱层析得到白色固体3iii 321mg，收率48%。步骤2)将中间体3iii 440mg溶于二氯甲烷中，冰浴控温0°C以下，加入10mL冰冷的2N HCl/EtOAc溶液，低温反应半小时，室温继续搅拌2小时左右，白色固体析出，经TLC检测反 应完全，过滤收集白色固体215mg，收率98 %。以上两步总收率47%。以下所有实施例所述收率均指缩合及脱保护两步总收率。屮-腫(400MHz，DMS0-d6)，8(ppm) 1. 13-1. 17 (8H, m, (CH2-CH2) X 2)， 1. 28-1. 30 (2H, m, CH2)，1. 72 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，2. 0 (1H, m, CH)，2. 3- 25 (2H, d, J = 4. 6Hz，CH2)，2. 6 (2H，t，J = 2Hz，CH2)，2. 6-2. 9 (2H，d，J = 4. 8Hz，CH2)，2. 8 (2H，t，J = 7. 2Hz，反应流稈
CH2), 3. 6 (2H, s, CH2), 3. 59 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 89-3. 92(lH，m，CHX2) ,4. 10 (1H, d, J =4. 4Hz，CH)，4. 86(lH，s，NH)，7. 2-7. 5 (10H，m，ArH)，8. 06(2H，t，J = 7. 6Hz，NH2)，8. 16 (2H, s, HC1)，MS m/e :523. 5 ([M+l]+).实施例2 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧 羰基氨基)丙酰基氨基)乙酸246mg代替2iv，使用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨 甲酰326mg代替3ii。收率67%。i-WR (400MHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 18 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，2. 6-2. 9 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，2. 8 (2H, t, J = 2Hz, CH2)，3. 5 (2H, t, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 6-3. 7 (2H, d, J =7. 6Hz, CH2), 3. 76 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 8(1H，m, CH)，3. 99 (1H, m, CH), 4. 5 (2H, s, CH2)，6. 96 (1H, s，NH)，7. 2-7. 5 (10H, m, ArH) 8. 06 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 6 (1H, s, HC1)， MSm/e :455. 2([M+1]+).实施例3 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (R) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸328mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率35%。(400MHz，DMS0_d6)，8(ppm) 0. 85 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 20-1. 38 (8H, m, (CH2-CH2) X 2), 1. 58-1. 62 (2H, m, CH2) ,2. 79 (2H, d, J = 4. 8Hz，CH2)，2. 90-2. 92 (1H， m, CH)，3. 43 (2H, t, J = 2Hz, CH2)，3. 5 (2H, t, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 63 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2) ,3. 9(1H, s, CH), 4. 11-4. 12 (1H, m, CH), 4. 36 (2H, s, CH2), 4. 75 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)， 5. 08 (1H, s, NH)，7. 28-7. 32(10H, m, ArH), 8. 25 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 78 (1H, s, HC1)， MSm/e :537. 3([M+1]+).实施例4 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸288mg代替2iv，使 用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率28%。iH-WRQOOMHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 86 (6H, d, J = 6. 4Hz, CH3X2)，1. 18 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 96-1. 99 (1H, m, CH)，2. 69 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，3. 67 (2H, d, J = 7. 6Hz，CH2)，3. 88-3. 92 (1H，m，CH)，4. 12(lH，d，J = 4. 4Hz，CH)，4. 2 (2H，d，J = 5. 4Hz，CH2)， 4. 96(lH，s，NH)，7. 25-7. 28 (5H, m, ArH), 7. 5 (1H, t, J = 6. 5Hz，NH)，8. 86(2H，t，J = 7. 6Hz, NH2)，9. 4(1H，s, HC1)，MS m/e :407. 5 ([M+l]+).实施例5 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸288mg代替2iv，使 用(R)-N-苯乙基-N-(噻唑烷-4-基-甲基)苯甲酰胺326mg代替3ii。收率36%。i-WR (400MHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 86 (6H, d, J = 6. 4Hz, CH3X2)，1. 18 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 96-1. 99(lH，m，CH2)，2. 72 (2H, s, CH2)，3. 12-3. 15(2H，m，CH2), 4. 55 (2H, d, J = 5. 4Hz, CH2),3. 89-3. 91 (2H, m, CHX 2)，4. 21 (1H，d, J = 4. 4Hz, CH) ,4. 96 (1H, s, NH)，7. 46-7. 49(10H, m, ArH), 8. 06 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，9. 40 (1H, s, HC1)，MS m/e 483. 2([M+1]+).实施例6 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸328mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率49%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 83-0. 85 (2H, m, CH2)，1. 28-1. 30 (8H, m, (CH2-CH2) X2)，1. 91(3H，d，J = 6. 8Hz，CH3)，2. 6 (2H，d，J = 4. 8Hz，CH2)，2. 8 (2H，t，J = 2Hz, CH2)，2. 94-2. 96 (1H, m, CH)，3. 2 (2H, t, J = 7. 6Hz,CH2)，3. 49-3. 51 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)， 4. 36-4. 39 (2H, m, CHX 3) ,4. 5 (2H, s, CH2)，6. 96 (1H, s，NH)，7. 2-7. 5 (10H, m, ArH)，8. 22 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 72 (1H, s, HC1)，MS m/e :537. 3 ([M+l]+).实施例7
参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸302mg代替2iv， 使用(R)-N-苄基噻唑烷-4-氨甲酰222mg代替3ii。收率52%。iH-WRQOOMHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 91 (6H, d, J = 6. 4Hz, CH3X2)，1. 19 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 38 (3H, s, CH3)，1. 98-2. 10 (1H, m, CH)，2. 5 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)， 3. 16(2H，d，J = 7. 6Hz，CH2)，3. 35-3. 36 (2H，m，CHX 2)，3. 9 (1H，d，J = 4. 4Hz，CH)，4. 2 (2H， d, J = 5. 4Hz, CH2) ,4. 5(1H, s, NH) ,7. 5(1H, t, J = 16Hz, NH)，7. 28-7. 32 (5H, m, ArH)， 8. 06 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH)，9. 36 (1H, s, HC1)，MS m/e :407. 3 ([M+l]+).实施例8参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-叔丁基-乙酸302mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率49%。i-WR (400MHz，DMS0-d6)，8 (ppm) 1. 05 (9H，d，J = 6. 4Hz，CH3X 3)，1. 18 (3H，d，J =6. 8Hz，CH3)，1. 33-1. 34(2H，d，J = 4. 8Hz，CH2)，2. 8 (2H，t，J = 2Hz，CH2)，2. 89-2. 91 (2H, m，CHX2)，3. 5(2H，t，J = 10. 4Hz，CH2)，3. 79(2H，d，J = 7. 6Hz，CH2)，4. l(lH，d，J = 4. 4Hz, CH)，4. 36 (2H, s, CH2)，5. 13 (1H, s, NH)，7. 26-7. 35(10H, m, ArH), 8. 06 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 62 (1H, s, HC1)，MS m/e :511. 4 ([M+l]+).实施例9参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸302mg代替2iv。 收率31%。t-WR (400MHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 91 (6H, d, J = 6. 4Hz, CH3X2)，1. 36 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 9 (1H, m, CH)，1. 99 (2H, d, J = 1. 6Hz, CH2)，2. 51 (2H, t, J = 2Hz, CH2)， 3. 09 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，3. 12 (2H, t, J = 7. 2Hz, CH2)，3. 19 (3H, s, CH3)，3. 21 (1H, s, NH)，3. 6(2H，s, CH2)，3. 39-3. 41 (1H, m, CHX 2)，4. 90 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，4. 39 (2H, d, J =7. 6Hz, CH2), 7. 2-7. 5(10H,m, ArH) ,7. 78 (1H, t, J = 7. 6Hz，NH)，8. 92 (2H, s，HC1X2)，MS 实施例10 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-叔丁基-乙酸302mg代替2iv，使 用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率50%。i-WRGOOMHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 01 (9H, d, J = 6. 8Hz, CHSX3)，1. 18 (3H, d, J = 6. 8Hz,CH3)，1. 28 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，2. 69 (2H, t, J = 2Hz，CH2)，2. 73-2. 75 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2), 3. 23 (2H, d, J = 4. 4Hz, CH2), 4. 11-4. 12 (2H, m, CHX2) ,4. 24 (1H, t, J = 16Hz, NH)，4. 26 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，4. 53 (1H, s, NH)，7. 21-7. 25 (5H, m, ArH), 8. 24 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 46 (1H, s, HC1)，MS m/e :421. 2 ([M+l]+).实施例11 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸328mg代替2iv，使 用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率49%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 16-1. 18 (8H, m, (CH2_CH2) X2)，1. 30 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 68-1. 71 (2H, m, CH2)，1. 68-1. 71 (1H, m, CH)，2. 68 (2H, t, J = 2Hz, CH2)，2. 86 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，3. 20-3. 22 (2H, m, CH2)，3. 57 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)， 3. 76-3. 89 (2H, m, CHX 2)，4. 45 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，4. 56 (1H, s，NH)，7. 22-7. 29 (5H, m, ArH), 8. 18 (1H, t, J = 16Hz, NH)，8. 27 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 62 (1H, s, HC1)，MS m/e 447. 3([M+1]+).实施例12 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S)-2-((S)-2-(2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)_2_异丙基-乙酸288mg代替2iv。收 率 45%。
参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 ⑶-2-(⑶-2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸342mg代替2iv， 使用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率37%。(400MHz，DMS0_d6)，8(ppm) 0. 85 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 13-1. 24 (8H, m, (CH2-CH2) X 2)，1. 32-1. 34 (2H, m, CH2)，1. 68 (3H, s, CH3)，2. 0 (1H, m, CH)，2. 6 (2H, t, J =2Hz，CH2)，2. 83 (2H, d，J = 4. 8Hz，CH2)，3. 2 (2H, m, CH2)，3. 34 (2H, d，J = 7. 6Hz，CH2)， 3. 83 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，4. 54-4. 63 (2H, m, CHX 2)，5. 07 (1H, s，NH)，7. 22-7. 29 (5H, m, ArH), 8. 13 (1H, t, J = 16Hz, NH)，8. 81 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH)，9. 25 (1H, s, HC1)，MSm/e 461. 3([M+1]+).实施例15 i-WR (400MHz，DMS0_d6)，8 (ppm) :0. 91 (6H, d, J = 6. 4Hz, CH3X2)，1. 32 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 91 (2H, d, J = 1. 6Hz, CH2)，2. 01-2. 03 (1H, m, CH)，3. 09 (2H, t, J = 2Hz, CH2)，3. 20 (2H, t, J = 7. 2Hz, CH2)，3. 42 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，3. 93 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH), 4. 33 (2H, s, CH2)，4. 41 (2H，d, J = 7. 6Hz, CH2)，4. 87-4. 89 (2H，m, CHX 2) ,7. 78 (1H, s, NH), 7. 29-7. 46(10H, m, ArH), 8. 29 (2H, s，2HCl)，8. 69 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，MS m/e 483. 3([M+1]+).实施例13 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸302mg代替2iv， 使用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率52%。iH-WRQOOMHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 91 (6H, d, J = 7. 2Hz, CH3X2)，1. 19 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，2. 10-2. 11 (1H, m, CH)，2. 75 (2H, t, J = 2Hz, CH2)，2. 89-2. 91 (2H，d, J = 4. 8Hz, CH2), 3. 34-3. 35 (2H, m, CH2)，3. 9 (3H，s, CH3), 4. 15 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)， 4. 25-4. 27 (2H, m, CHX 2), 4. 56 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，5. 03 (1H, s，NH)，7. 23-7. 28 (5H, m, ArH), 8. 82 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH), 9. 44 (1H, t, NH)，MS m/e :421. 5 ([M+l]+) 实施例14 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (R) -2-(⑶-2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸342mg代替2iv， 使用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率53%。(400MHz，DMS0_d6)，8(ppm) 0. 83 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 07-1. 12 (8H, m, (CH2-CH2) X 2), 1. 38-1. 40 (2H, m, CH2)，2. 50 (2H，t，J = 2Hz，CH2)，2. 69-2. 71 (1H，m, CH)，2. 9 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，3. 24-3. 29 (2H, m, CH2)，3. 29 (3H, s, CH3)，3. 6-3. 7 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 85-3. 87 (2H, m, CHX 2)，3. 91 (1H，d, J = 4. 4Hz, CH)，4.61(1H，s, NH)， 7. 20-7. 29(5H,m, ArH) ,7. 9(1H, t, J = 16Hz，NH)，8. 97 (1H, t, J = 7. 6Hz，NH)，9. 26 (1H, s, HC1)，MS m/e :461. 3 ([M+l]+).实施例15 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸302mg代替2iv， 使用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率43%。i-WRGOOMHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 91 (6H, d, J = 7. 2Hz, CH3X 2)，1. 35 (3H， d, J = 6. 8Hz, CH3)，2. 51 (3H, s, CH3)，2. 06-2. 08 (1H, m, CH)，2. 83 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)， 2. 9(2H, d, J = 7. 6Hz, CH2) ,3. 54 (2H, t, J = 2. 1Hz，CH2)，3. 89—3. 92 (1H，m, CHX 2)， 4. l(lH，d，J = 4. 4Hz，CH)，4. 56(2H，t，J = 7. 6Hz，CH2)，4. 89 (2H，s，CH2)，5. 18(lH，s，NH)， 7. 2-7. 5(10H, m, ArH), 8. 06 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH)，MS m/e :511. 3 ([M+l]+).实施例17 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-叔丁基-乙酸316mg代替2iv， 使用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率36%。t-WR (400MHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 85 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，1. 19 (9H, d, J =6. 8Hz, CHSX3)，1. 38 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 59 (3H, s, CH3)，2. 50 (2H, t, J = 2. 0Hz, CH2), 2. 73 (2H, t, J = 7. 6Hz, CH2)，2. 89 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 53-3. 57 (1H, m, CHX 2)，4. 13 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，4. 36 (2H, s, CH2)，5. 12 (1H, s, NH)，7. 29-7. 32(10H, m, ArH)， 8. 93 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH)，9. 40 (1H, s, HC1)，MS m/e :525. 5 ([M+l]+).实施例18 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (R) -2-(⑶-2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸342mg代替2iv， 使用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率46%。(400MHz，DMS0_d6)，8(ppm) 0. 93 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 25-1. 29 (8H, m, (CH2-CH2) X 2), 1. 56-1. 59 (2H, m, CH2)，1. 89 (1H，s, CH)，2. 6 (2H，d, J = 4.8Hz，CH2)， 2. 8(2H, t, J = 2.0Hz，CH2), 3. 4 (3H, s, CH3)，3. 5 (2H，t, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 76 (2H, d, J =7. 6Hz, CH2), 3. 89-3. 92 (1H, m, CHX2) ,4. 36 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH), 4. 57 (2H, s, CH2)， 4. 96 (1H, s, NH)，7. 28-7. 35(10H, m, ArH), 8. 26 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH)，9. 40 (1H, s, HC1)， MSm/e :551. 7([M+1]+).实施例19参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-叔丁基-乙酸302mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基噻唑烷-4-氨甲酰222mg代替3ii。收率56%。t-WR (400MHz，DMS0-d6)，8 (ppm) 1. 01 (9H，d，J = 6. 8Hz，CH3X 3)，1. 18 (3H，d，J =6. 8Hz，CH3)，1. 29(2H，d，J = 4. 8Hz，CH2)，3. 02(2H，d，J = 7. 6Hz，CH2)，3. 35-3. 46(lH，m， CHX2) ,3. 02 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH), 4. 16-4. 19 (2H, m, CH2), 4. 36 (1H, s, NH)，7. 5-7. 8 (5H， m, ArH) ,8. 2(1H, t, J = 16Hz, NH), 8. 49 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，9. 21 (1H, s, HC1)，MSm/e 407. 2([M+1]+).实施例20 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧 羰基氨基)乙酰基氨基)_3_甲基丁酸274mg代替2iv。收率41%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 86 (6H, d, J = 6. 4Hz, CH3X 2), 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S)-2-((S)-2-(2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)_2_叔丁基-乙酸302mg代替2iv。收 率 40%。i-WR(400MHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 94 (9H, d, J = 6. 4Hz, CHSX3)，1. 3(3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1.9(2H，d, J = 1. 6Hz，CH2)，2. 87 (2H, t, J = 2Hz, CH2)，3. 11 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，3. 25 (2H, t, J = 7. 2Hz, CH2)，3. 36 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 48 (2H, s, CH2)， 4. 02-4. 03 (1H, m, CHX 2)，4. 42 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，4. 68 (1H, s，NH)，7. 27-7. 31 (10H, m, ArH), 7. 75 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 25 (2H, s，2HCl)，MS m/e :497. 4 ([M+l]+).实施例22 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸328mg代替2iv，使 用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率47%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 14-1. 16 (8H, m, (CH2_CH2) X2)，1. 36 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 65-1. 68 (4H, m, CH2 X 2)，2. 0 (1H，m, CH)，2. 6 (2H，t, J = 2Hz, CH2)， 2. 75 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 25-3. 26 (2H, m, CH2)，3. 91-3. 93 (2H, m, CHX 2) ,4. 1 (1H, d, J =4. 4Hz，CH)，4. 3(lH，t，J = 7. 2Hz，NH)，4. 71 (1H，s，NH)，7. 22-7. 29 (5H,m, ArH), 8. 06 (2H, t, J = 7. 6Hz, NH2)，8. 76 (1H, s, HC1)，MS m/e :447. 2 ([M+l]+).实施例23 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧
1. 96-1. 98 (1H, m, CH)，2. 35 (2H, d, J = 1. 6Hz, CH2)，2. 6 (2H, t, J = 2Hz, CH2)，2. 67 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)，2. 8 (2H, t, J = 7. 2Hz, CH2)，3. 6 (2H, s, CH2)，3. 67 (2H, d, J = 6. 4Hz, CH2)， 3. 86-3. 90 (1H, m, CH)，4. 1 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH)，4. 96 (1H, s, NH)，7. 2-7. 5(10H，m, ArH)， 8. 7(2H，t, J = 7. 6Hz, NH2)，9. 40 (1H, s, HC1)，MS m/e :469. 3 ([M+l]+).实施例21
羰基氨基)丙酰基氨基)乙酸246mg代替2iv。收率46%。1H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 39 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 91 (2H, d, J =1. 6Hz, CH2), 3. 10-3. 39(6H，m，CH2 X 3)，，3. 60 (2H, s, CH2)，3. 94 (2H, t, J = 6. 3Hz, CH2)， 4. 11 (2H, s, CH2)，4. 50-4. 60 (3H, m, CH, CH2) ,4. 99 (1H, s, CH)，7. 26-7. 71(10H, m, ArH), 8. 25 (2H, t, J = 7. 6Hz, HC1. NH2)，8. 75 (1H, s, CONH)，MS m/e :441. 5 ([M+l]+).实施例24 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧 羰基氨基)丙酰基氨基)乙酸246mg代替2iv，使用(R)-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰236mg 代替3ii。收率40%。i-WR (400MHz，DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 18 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，2. 6 (2H，d, J =4. 8Hz, CH2), 2. 8 (2H, t, J = 2. 0Hz, CH2), 3. 4 (3H, s, CH3)，3. 5 (2H，t, J = 7. 2Hz, CH2)， 3. 65 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2)，3. 76-3. 79 (2H, m, CH2)，3. 89-3. 92 (1H, m, CHX2) ,4. 5 (2H, s, CH2)，6. 96 (1H, s, NH)，7. 25-7. 29(10H, m, ArH), 8. 76 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH)，9. 40 (1H, s, HC1)，MSm/e :365. 3 ([M+l]+).实施例25 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 ⑶-2-(⑶-2- (2-(叔丁氧羰基甲基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸342mg代替2iv， 使用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率44%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 18-1. 19 (8H, m, (CH2_CH2) X2)，1. 33 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 39-1. 41 (2H, m, CH2)，2. 0 (1H, m, CH)，2. 51 (2H, d, J = 4. 8Hz, CH2)， 2. 8(2H, t, J = 2. 0Hz, CH2)，2. 95 (2H, d, J = 7. 6Hz, CH2), 3. 4 (3H, s, CH3)，3. 5 (2H，t, J = 7. 2Hz, CH2), 3. 51-3. 53 (1H, m, CH), 4. 1 (1H, d, J = 4. 4Hz, CH), 4. 38 (2H, s, CH2), 4. 68 (1H, s, NH)，7. 28-7. 30(10H, m, ArH), 8. 89 (1H, t, J = 7. 6Hz, NH)，9. 31 (1H, br, HC1)，MS m/e 551. 5([M+1]+).实施例26 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧 羰基氨基)丙酰基氨基)乙酸246mg代替2iv，使用(R)-N-苄基-N-丙基噻唑烷-4-氨甲 酰264mg代替3ii。收率为35%。屮-腫(400MHz，DMS0-d6)，8ppm 0. 84-0. 86 (3H, t, J = 7. 2Hz, CH3), 1. 37-1. 41 (5H, m, CH2, CH3)，2. 91-2. 93 (2H, m, CH2)，3. 36-3. 37 (3H, m, CH2, CH)， 4. 30-4. 34 (2H, m, CH2)，4. 55-4. 66 (2H, m, CH2)，4. 66-4. 93 (1H, m, CH)，5. 17-5. 18 (2H, s, CH2) ,7. 21-7. 40 (5H, m, C6H5)，8. 12-8. 16 (2H, br, J = 15. 6Hz, NH2)，8. 642-8. 671 (1H，m, CONH)，MS m/e :393. 1[M+H] +。实施例27 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸288mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-丙基噻唑烷-4-氨甲酰264mg代替3ii。收率为32%。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6)，8 ppm 0. 78-1. 42(14H, m, CH2, CH3X4) ,2. 07(1H, m, CH)，2. 95-3. 66 (3H, t, CH2, CH)，3. 19-3. 32 (2H, m, CH2)，4. 23-4. 26 (1H, m, CH)， 4. 38-4. 51 (3H, m, CH2, CH)，4. 81-4. 82 (2H, s, CH2)，7. 26-7. 34 (5H, m, C6H5)，8. 30 (2H, br, NH2)，8. 58 (1H, s, CONH)，MS m/e :435. 0 [M+H]+。实施例28 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧 羰基氨基)丙酰基氨基)乙酸246mg代替2iv，使用(R)-N-苄基-N-丁基噻唑烷-4-氨甲 酰276mg代替3ii。收率为48%。'H-NMR (400MHz, DMS0-d6) , 8 ppm 0. 81-0. 84 (3H, t, J = 5. 6Hz, CH3), 1. 09-1. 63 (7H, m, CH2X2, CH3) , 2. 89-2. 91 (1H, -H) , 3. 22-3. 39 (5H, m, CH2X2, CH)， 3. 92-4. 03 (2H, m, CH2)，4. 302-4. 341 (2H, m, CH2)，4. 68-5. 21 (2H, m, CH2)，7. 20-7. 40 (5H, m, C6H5), 8. 252 (2H, br, NH2)，8. 69 (1H, s, CONH)，MS m/e :407. 0 [M+H] +。实施例29 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸288mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-丁基噻唑烷-4-氨甲酰276mg代替3ii。收率为52%。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6)，8 ppm 0. 84-0. 91 (9H, m, CH3X3)，1. 17-1. 30 (7H, m, CH2X2, CH3)，1. 99-2. 06 (1H, m, CH)，2. 954-2. 983 (1H, m, CH)，3. 32-3. 35 (4H, m, CH2 X 2)， 3. 59-3. 60 (1H, m, CH)，4. 50-4. 54 (3H, m, CH2, CH)，5. 13-5. 18 (2H, m, CH2)，7. 21-7. 40 (5H, m, C6H5)，8. 22 (2H, br，NH2)，8. 68-8. 70 (1H, m, CONH)，MS m/e :449. 1 [M+H] +。实施例30 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧 羰基氨基)丙酰基氨基)乙酸246mg代替2iv，使用(R)-N-苄基-N-戊基噻唑烷-4-氨甲 酰288mg代替3ii。收率为39%。屮-腫(400MHz，DMS0-d6)，8ppm 0. 81-0. 84 (3H, t, J = 6. 8Hz, CH3), 1. 09-1. 66 (9H, m, CH2 X 3, CH3) ,2. 91-2. 94(1H, m, CH) , 3. 37-3. 39 (4H, m, CH2X2)， 3. 93-4. 03 (2H, m, CH2)，4. 55-4. 57 (2H, m, CH2)，4. 93-4. 95 (1H，m, CH)，5. 12-5. 22 (2H, m, CH2)，7. 21-7. 40 (5H, m, C6H5)，8. 10-8. 26 (2H, br, NH2)，8. 69 (1H, s, CONH)，MSm/e 421. 1[M+H]+。实施例31 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸288mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-戊基噻唑烷-4-氨甲酰288mg代替3ii。收率为21%。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6)，8 ppm 0. 81-0. 93 (9H, m, CH3X3)，1. 18-1. 32 (9H, m, CH2X4, -CH3), 2. 06-2. 08 (1H, m, CH)，2. 951-2. 980 (1H, m, CH3)，3. 32-3. 39 (4H, m, CH2X2)， 4. 49-4. 55 (3H, m, CH, CH2)，4. 81-4. 85 (1H, m, CH)，5. 12-5. 18 (2H, m, CH2)，7. 21-7. 40 (5H, m, C6H5), 8. 23 (2H, br, NH2)，8. 67-8. 68 (1H, s, CONH)，MS m/e :463. 1[M+H] +。实施例32 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(S)-2-(2_(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)乙酸246mg代替2iv，使用(R)-N-苄基-N-环己基噻唑烷-4-氨 甲酰304mg代替3ii。收率为36%。'H-NMR (400MHz，DMS0_d6)，8 ppm 1. 15-1. 66 (13H,m,CH3,CH2X5), 3. 01-3. 34(1H, m, CH) , 3. 63 (1H, m, CH) ,4. 01-4. 03 (4H, m, CH2X 2) ,4. 40-4. 56 (3H, m, CH2, CH)， 4. 93-4. 95 (2H, m, CH2)，7. 17-7. 25 (5H, m, C6H5)，8. 23 (2H, br, NH2)，8. 67 (1H, s, CONH)，MS m/ e :433. 1[M+H] +。实施例33 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸288mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-环己基噻唑烷-4-氨甲酰304mg代替3ii。收率为27%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 ppm 0. 89-2. 07 (19H, m, CH2X 5，CH3X 3)， 2. 05-2. 07 (1H, m, CH)，2. 98-3. 01 (1H, m, CH)，3. 39-3. 40 (3H, m, CH2, CH)，3. 62-3. 63 (1H, m, CH)，4. 48-4. 60 (3H, m, CH2, CH)，5. 17-5. 19 (2H, m, CH2)，7. 18-7. 46 (5H, m, C6H5)，8. 22 (2H, br, NH2)，8. 61-8. 69 (1H, s, CONH)，MS m/e :475. 3 [M+H]+。实施例34 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-异丙基-乙酸288mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-苯乙基噻唑烷-4-氨甲酰326mg代替3ii。收率为31.5%。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6)，8 ppm 0. 91-0. 93 (6H, m, CH3X2)，1. 30-1. 32 (3H, m, CH3)，2. 05-2. 06 (1H, m, CH)，2. 82-2. 96 (4H, m, CH2 X 2)，3. 31-3. 36 (1H, m, CH)，3. 36 (2H, m, CH2)，4. 01-4. 03 (1H，m, CH)，4. 57-4. 59 (3H, m, CH2, CH)，5. 10-5. 18 (2H, m, CH2)， 7. 26-7. 31(10H，m，C6H5X2)，8. 10 (2H, br, NH2)，8. 66-8. 68 (1H, d, J = 8. 4Hz, CONH)，MS m/ e :497. 1[M+H] +。实施例35 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (S) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸328mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-苯乙基口恶唑烷-4-氨甲酰310mg代替3ii。收率42%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) :0. 85—1. 15 (5H, m, CH2X2, CH)，1. 15 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 55-1. 66 (6H, m, CH2 X 3), 2. 65-2. 75 (1H, m, CH)，2. 80-2. 99 (1H, m, CH)， 3. 40-3. 51 (2H, m, CH2)，3. 60-3. 71 (2H, m, CH2)，3. 97 (1H, t, J = 7. 2Hz, CH)，4. 27-4. 33 (2H, m, CH2), 4. 58-4. 68 (1H，m, CH) , 4. 89-4. 98 (1H, m, CH)，5. 08 (1H, t, J = 5. 6Hz, CH)， 7.09-7. 35(10H, m, ArH), 7. 52 (1H, d, J = 9. 2Hz, CONH)，8. 41 (3H，br, HC1. NH2)，MS m/e 521. 6([M+1]+).实施例36 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用 (R) -2- ((S) -2- (2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-2-环己基-乙酸328mg代替2iv，使 用(R)-N-苄基-N-苯乙基巧恶唑烷-4-氨甲酰310mg代替3ii。收率47%。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 0. 90-1. 18 (5H, m, CH2X2, CH)，1. 37 (3H, d, J = 6. 8Hz, CH3)，1. 55-1. 68 (6H, m, CH2 X 3), 2. 66-2. 75 (1H, m, CH)，2. 88-3. 00 (1H, m, CH)， 3. 40-3. 50 (2H, m, CH2)，3. 60-3. 70 (2H, m, CH2)，3. 93 (1H, t, J = 7. 2Hz, CH)，4. 32-4. 49 (2H, m, CH2), 4. 67-4. 78 (1H，m, CH) , 4. 98-5. 05 (1H, m, CH)，5. 17 (1H，t, J = 5. 6Hz, CH)， 7. 10-7. 40(10H, m, ArH), 8. 18 (3H, br, HC1. NH2)，8. 59 (1H, d, J = 9. 2Hz, CONH)，MS m/e 521. 6([M+1]+).实施例37 参照实施例1的合成方法制备本实施例化合物，不同的是使用(2S， 3S) -2- ((S) -2-(叔丁氧羰基氨基)丙酰基氨基)-3-(丙基-2-炔基氧基)丁酸328mg代替 2iv，使用(R)-N-对甲基苄基噻唑烷-4-氨甲酰236mg代替3ii。收率35%'H-NMR (400MHz, DMS0_d6)，8 (ppm) 1. 16 (3H, d, J = 5. 6Hz, CH3)，1. 31 (3H，d, J = 6. 8Hz, CH3), 2. 27 (3H, s, CH3)，3. 01-3. 05 (1H, m, CH), 3. 31-3. 44 (3H, m, CH2, CH)， 3. 88-3. 91 (1H, m, CH) ,3. 97(1H, s, CH)，4. 18-4. 25 (4H, m, CH2X2)，4. 64 (1H, d, J = 9. 2Hz, CH), 4. 73 (2H, t, J = 6. 8Hz, CH2)，5. 08 (1H, d, J = 9. 2Hz, CH)，7. 11-7. 15 (4H, m, Ar-H),8. 18(3H, br, HC1. NH2),8. 35(1H, s, CONH),8. 71(1H, d, J = 5. 6Hz, CONH)MS m/e 447. 1([M+1]+).药理学试验例1 :XIAP_BIR3和cIAPl_BIR3抑制活件测定将固定浓度的荧光示踪剂(SM-F2，IAPs抑制剂)与靶标蛋白质组成混合物，其中 蛋白质浓度不断增加直至饱和。通过对该混合物总荧光极化强度的监测，从而测定SM-F2 分别结合XIAP-BIR3 (残基241-356)和cIAPl_BIR3 (残基253-363)的平衡解离常数(Kd)。 荧光极化强度值在96-孔荧光检测微孔板(Mierofluor 2，黑色极低背景、圆底)(Thermo Scientific)中使用超酶标仪(TecanU. S.，Research Triangle Park,NC)测定。向每个孔的 试验缓冲液(含lOOmM磷酸氢二钾、pH 7. 5，100iigml牛Y -球蛋白，0. 02%叠氮化纳，4% DMS0, Invitrogen公司)中加入浓度分别为2nM(测定与XIAP-BIR3的结合)和lnM(测定与 CIAP1-BIR3的结合)SM-F2和相应的浓度不断升高的靶标蛋白，体系最终的体积为125 y L。 将96-孔板在室温培养3小时并轻轻的摇动以确保达到平衡。在激发波长为485nm和发射 波长为530nm处测定极化强度，以毫极化单位(mP)表示测定值。使用Graphpad Prism 5. 0 软件(Graphpad Software, San Diego, CA)通过拟合 S 型(sigmoidal)剂量-依赖 FP 增加 值作为蛋白浓度的函数计算平衡解离常数(Kd)。通过抑制剂的剂量_依赖竞争结合实验测定抑制剂的&值。在该实验中，逐渐 稀释抑制剂的浓度，不同浓度的抑制剂分别与固定浓度的荧光示踪剂(SM-F2)对固定浓度 (为上述测定Kd值的2-3倍)的靶标蛋白展开竞争性结合。将5 yL不同浓度的受试化合 物的DMS0溶液和120 u L含有预先孵育的靶标蛋白/SM-F2复合物的缓冲溶液(含100mM 磷酸氢二钾、pH 7. 5，100ii g/ml 牛 球蛋白，0. 02%叠氮化纳，4% DMS0，Invitrogen 公 司)加入到96-孔板中，室温孵育3小时并轻轻摇动。对于测定受试化合物与SM-F2同 XIAP-BIR3的竞争性结合，体系中XIAP-BIR3与SM-F2的最终浓度分别为10nM和2nM ；而对 于同CIAP1-BIR3的结合，体系中CIAP1-BIR3和SM-F2的最终浓度分别为3nM和InM。每一 块96-孔板中，均含有阴性对照组和阳性对照组，阴性对照组只含有靶标蛋白/SM-F2复合 物(抑制率相当于0% )，阳性对照组只含有游离的SM-F2 (抑制率相当于100% )。FP值的 测定与上述描述的方法相同。受试化令物的IC5(I通过竞争曲线的非线性回归拟合确定。竞 争性抑制剂的Ki通过下面方程计算得到& = [I]50/( [L] 50/Kd+ [P] 0/Kd+l)式中，[I]5Q表示50%抑制时的抑制剂浓度，[L]5Q是50%抑制时的标记配体 (SM-F2)浓度，[PL是0%抑制时的蛋白浓度，Kd是平衡解离常数。XIAP-BIR3和cIAPl_BIR3抑制活性测定结果见表1。表1 :XIAP_BIR3和cIAPl_BIR3抑制活性测定结果
52 药理学试验例2 采用噻哔蓝(MTT)法确定各种合成的目标化合物在体外对卵巢 癌和宫颈癌细胞的存活抑制作用①对卵巢癌的存活抑制作用取对数生长期的卵巢癌SK0V3细胞，浓度为IXlO5 个/孔，加入到96孔板，每孔加含细胞的培养液200 μ 1，置37°C，5 % CO2培养箱孵育16h后， 依次加入100 μ M的各种合成的目标化合物，同时以DMEM培养基作为空白对照组，于加药 48h后加入MTT (5mg/ml) 20 μ 1/孔，37°C，5% CO2培养箱孵育4h后，弃上清，每孔加入DMSO 150 μ 1于490nm波长处测定吸光度OD值，每个浓度平行测定4孔。
②对宫颈癌细胞的存活抑制作用收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度，每孔加入 200ul，铺板使待测细胞调密度至10000/孔，(边缘孔用无菌PBS填充)。设置空白对照，阳 性对照和阴性对照。5% C02，37°C孵育，至细胞单层铺满孔底(96孔平底板)，加入一定浓度 药物。5% C02，37°C孵育48小时，倒置显微镜下观察。每孔加入20ul MTT溶液(5mg/ml，即 0. 5%MTT)，继续培养4h。终止培养，小心吸去孔内培养液。每孔加入150 μ 1 二甲基亚砜， 置摇床上低速振荡lOmin，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD 490nm处测量各孔的 吸光值。同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶 解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)。由上述原始数据，按下列公式计算生长抑制率(IR)。
S白对照组平均OD值对卵巢癌的存活抑制作用的结果表明，所有化合物对卵巢癌细胞的抑制率 (IOOym)都在10%-70%之间。对宫颈癌细胞的存活抑制作用的结果见表2，其中表2中 未列出的其他化合物对宫颈癌细胞的抑制率(100 μ m)都在10% -70%之间。表2 实施例对宫颈癌细胞抑制率(100 μ m)
权利要求
通式I的化合物及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中X是 CH2 或 O 或 S ；Y是 CH2 或 CH2CH2 或 CO ；R1选自1) H，2) C1 C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，和3) C3 C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代；R2选自1) H，2) C1 C6烷基，3) C3 C8环烷基，4) (C1 C6烷基) R7，和5) Ar1，其中，R7选自1) OR8，2) SR8，3) NR8R9，4) NCONR8R9，5) NCNNR8R9，6) COOR8，7) CONR8R9，和8) Ar1，Ar1选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) CF3，5) R8，6) OR8，7) NR8R9，和8) COOR8，R8和R9各自独立地选自1) H，2) (C1 C6亚烷基)0 3 苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自 C1 C4烷基、卤素的基团取代，3) C1 C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4) C3 C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) C2 C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6) C2 C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代；R3选自1) H，2) C1 C6烷基，3) C3 C8环烷基，4) (C1 C6烷基) R10，5) Ar1，其中，R10选自1) OR8，2) SR8，3) NR8R9，4) NCONR8R9，5) NCNNR8R9，6) COOR8，7) CONR8R9，和8) Ar1，Ar1选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) CF3，5) R8，6) OR8，7) NR8R9，和8) COOR8，R8和R9各自独立地选自1) H，2) (C1 C6亚烷基)0 3 苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自 C1 C4烷基、卤素的基团取代，3) C1 C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4) C3 C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) C2 C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6) C2 C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代；[优选的，R3所连接碳原子可以为任意光学构型]R4和R400各自独立地选自1) H，2) C1 C6烷基，3) C3 C8环烷基，4) C2 C6烯基，和5) C2 C6炔基；R5和R500各自独立地选自1) H，2) C1 C6烷基，3) C3 C8环烷基，4) C2 C6烯基，和5) C2 C6炔基；R6选自1) R11，2) OR11，3) NR11R12，4) SOR11，和5) SO2R11，其中，R11和R12各自独立地选自1) H，2) C1 C6烷基，3) C3 C8环烷基，4) C2 C6烯基，5) C2 C6炔基，6) COR8，7) Ar1，8) (C1 C6烷基) Ar1，9) CO Ar1，和10) CO (C1 C6烷基) Ar1，其中，Ar1选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4) CF3，5) R8，6) OR8，7) NR8R9，和8) COOR8，R8和R9各自独立地选自1) H，2) (C1 C6亚烷基)0 3 苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自 C1 C4烷基、卤素的基团取代，3) C1 C6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4) C3 C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5) C2 C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6) C2 C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。F2009101394885C0000011.tif
2.权利要求1的化合物，其为式la化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中X、R1、R2、R3、R4、R4°°、R5、 R5°°、和R6如权利要求1对通式I的化合物的定义。
3.权利要求1的化合物，其为式lb化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中X、R1、R2、R3、R4、R4°°、R5、 R5°°、和R6如权利要求1对通式I的化合物的定义。
4.权利要求1的化合物，其为式Ic化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、! 8、和R9如权利 要求1对通式I的化合物的定义。
5.权利要求1的化合物，其为式Id化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、! 8、和R9如权利要求1对通式I的化合物的定义。
6.权利要求1的化合物，其为式Icl化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、! 8、和R9如权利要求1对通式I的化合物的定义。
7.权利要求1的化合物，其为式Idl化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、! 2、! 3、! 8、和R9如权利 要求1对通式I的化合物的定义。
8.权利要求1的化合物，其为式Ie化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、R2、R3、和Ar1如权利要求1对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4)-CF3，5)-R8，6)-OR8,7)-NR8R9，和8)-C00R8，其中，R8和R9各自独立地选自 1)-H,2)- (CrC6亚烷基)0_3"苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自烷基、卤素的基 团取代，3)-CrC6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5)-C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。
9.权利要求1的化合物，其为式If化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、R2、R3、和Ar1如权利要求1对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4)-CF3，5)-R8，6)-OR8,7)-NR8R9，和8)-C00R8，其中，R8和R9各自独立地选自1)-H,2)- (CrC6亚烷基)0_3"苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自烷基、卤素的基3)-CrC6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5)-C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。
10.权利要求1的化合物，其为式Iel化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、R2、R3、和Ar1如权利要求1对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，团取代，2)硝基，3)氰基，4)-CF3，5)-R8，6)-OR8,7)-NR8R9，和8)-C00R8，其中，R8和R9各自独立地选自1)-H,2)- (CrC6亚烷基)0_3"苯基，其中的苯基任选被一个或多个选自烷基、卤素的基3)-CrC6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5)-C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。
11.权利要求1的化合物，其为式Ifl化合物 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物，其中R1、R2、R3、和Ar1如权利要求1对通式I的化合物的定义，Ar2选自苯基、芳杂环基和杂双环基，其任选被一个或多个选自以下的基团取代1)卤素，2)硝基，3)氰基，4)-CF3，5)-R8，6)-OR8,7)-NR8R9，和8)-C00R8，其中，R8和R9各自独立地选自1)-H,2)- (CrC6亚烷基)0_3"苯基，其中的苯基任选被一个或多个选 自-Ci-C；烷基、卤素的基团取代，3)-CrC6烷基，其任选被一个或多个卤素取代，4)-C3-C8环烷基，其任选被一个或多个卤素取代，5)-C2-C6烯基，其任选被一个或多个卤素取代，和6)-C2-C6炔基，其任选被一个或多个卤素取代。团取代，
12.权利要求1的化合物，其中 X 是-0-或-s-；Y 是-CH2-或-CO-； R1选自:-H、-C「C4烷基； R2选自:-H、-C「C4烷基；R3-H、-CrC6 烷基、-C3-C8 环烷基、_(C「C6 烷基)-0R8，其中 R8 选自-H、-CrC6 烷 基、-c2-c6烯基、和-C2-C6炔基；R4和广各自独立地选自-H、-C「C4烷基； R5和R500各自独立地选自-H、-C「C4烷基；R6是-NR"R12，其中R11和R12各自独立地选自-H、_C「C4烷基_C4_C6环烷 基、-COR^-Ar1、-(&-(；烷基 PAr^-CO-Ar1、和-CO-KfC；烷基 PAr1，其中 Ar1 是任选被一 个或多个选自以下的基团取代的苯基卤素、硝基、氰基、-CF3、-R8、-OR8、-NR8R9、和-C00R8， 其中R8和R9各自独立地选自^UQ-C；亚烷基)Q_3_苯基，其中的苯基任选被一个或多个 选自-(^-(；烷基和卤素的基团取代、任选被一个或多个卤素取代的-C「C4烷基、任选被一个 或多个卤素取代的-c4-c6环烷基、任选被一个或多个卤素取代的-c2-c4烯基、和任选被一个 或多个卤素取代的-c2-c4炔基。
13.权利要求1-12任一项的化合物，其选自 及其异构体、前药、药学可接受的盐、溶剂合物或水合物。
14.权利要求1-13任一项所述化合物的制备方法，其包括以下步骤a)使式II化合物 表示的化合物)与式H-R6表示的化合 物反应，得到式表示的化合物，然后脱除基团Z，得到式X、 /—R5表示的化合物；R1b)使式0R3Boc表示的化合物与式表示的化合物反应，得到式R2R1AO R3R1RJOB。c/八+ ^^)表示的化合物，然后在碱存在下水解，得到式B。/人R2 H 0OH表R2 H O示的化合物；c)在适宜的试剂(例如氯甲酸异丁酯、三乙胺、和N-甲基吗啡啉中的一种或多种)存Rt、00在下，使式x /R600、X R6R1 ^ R表示的化合物与式 二 0 Boc3OH表示的化合物反应，得R2 H 0R\00 Y R500到式 RV/ Y"R6表示的化合物，然后脱除基团-Boc，得到式I化合物；和任选 n r n丨BocR2的，d)使步骤C)的产物形成药学可接受的盐；其中，X、Y、R1、R2、R3、R4、R4°°、R5、R5°°、和R6如本发明权利要求1_12任一项对通式I的 化合物的定义，Z选自-H、-Boc、和-Cbz。
15. 一种药物组合物，其包含治疗和/或预防有效量的权利要求1-13任一项的化合物 以及任选的药学可接受的载体或赋形剂。
16.权利要求1-13任一项的化合物在制备用于治疗和/或预防与IAPs过度表达相关 的疾病的药物中的用途。
17.权利要求16的用途，其中所述的疾病选自膀胱癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、白血 病、肺癌、淋巴瘤、多发性脊髓瘤、卵巢癌和宫颈癌，尤其例如是卵巢癌和宫颈癌。
全文摘要
本发明涉及取代的氨酰基五元杂环烷类化合物及其用途。具体地说，本发明涉及具有抑制IAPs活性的通式I的取代的氨酰基五元杂环烷类衍生物及其药学可接受的盐或水合物，通式I中各取代基团的定义如说明书所述；通式I化合物的制备方法；包含通式I化合物或其药学可接受的盐或水合物的药物组合物；通式I化合物或其药学可接受的盐或水合物在生产药物中的用途，所述药物用于治疗或预防实体瘤和起源于恶性血液疾病的肿瘤的相关疾病的药物的用途。
文档编号A61K38/05GK101928326SQ200910139488
公开日2010年12月29日 申请日期2009年6月24日 优先权日2009年6月24日
发明者李斐, 李锦 , 汤立合, 聂爱华, 苏瑞斌, 谭祖磊, 陶林, 顾为, 马小根 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所