专利名称：一种治疗急性、亚急性湿疹的菊芩清解颗粒剂的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的检测方法，具体涉及一种治疗急性、亚急性湿疹中药 菊芩清解颗粒制剂的检测方法。
背景技术：
菊芩清解颗粒由野菊花、黄芩、连翘、地黄、赤芍、牡丹皮、当归、茯苓皮、甘草九味 中药组成，具有清热除湿、凉血解毒的作用，主要用于湿热蕴肤所致的湿疮，症见皮肤掀红 或皮肤鲜红斑，肿胀，瘙痒，糜烂，丘疹，疱疹等；急性湿疹、亚急性湿疹见上述证侯者。处方 野菊花440g、黄芩325g、连翘325g、地黄325g、赤芍220g、牡丹皮220g、当归220g、茯苓皮 325g、甘草 IOOg,制法以上九味，取黄芩粗片，加入10倍量沸水中，煎煮3次，提取液合并，放冷滤 过，滤液加热至60°C，用盐酸调节pH值为1-2，保温30分钟，放置过夜，滤过，沉淀水洗至 PH4-5，低温干燥，即得黄芩提取物。取野菊花、当归、连翘、牡丹皮混合后加水，浸泡4小时， 用水蒸气蒸馏法提取挥发油，收集挥发油，其水提取液及药渣留用。取挥发油用环糊精 包合，冷藏(4-10°C)过夜，滤过，沉淀低温干燥，得β-环糊精包结物，备用。其余四味药 加水煎煮两次，加入上述提取挥发油的药渣再共同煎煮一次，加入上述提取挥发油时的水 提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 10-1. 15(50°C测)时加乙醇使含醇量达70%，冷藏过 夜，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1. 10-1. 15(50°C测)清膏，加入糊精，加热溶 解后喷雾干燥，即得水提物干粉。取黄芩提取物、环糊精包结物和水提物干粉，加入甜 菊素和适量糊精混勻，以适当浓度的乙醇制粒，干燥，制成颗粒lOOOg，分装，即得。本品是对急性、亚急性湿疹疗效显著，副作用小，深受医生及患者的欢迎。现有产品检测方法影响因素较多，结果重现性较差，不能很好的控制药品质量，从 而不能很好地保证产品质量的稳定均一。为保证其质量稳定均一，这就要求对产品有一个好的质量控制方法对其进行有效 的质量控制，使产品做到“安全、有效、质量可控”。本发明采用高效液相色谱法进行含量测定，再加上配合薄层鉴别，与原标准采用 的薄层扫描法测定更具有准确、重现性好的特点，较原方法精密度、灵敏度、稳定性均较高。 从而可准确严格地控制产品的质量与均一性，
发明内容
本发明的菊芩清解颗粒检测方法，包括鉴别和含量测定的步骤所述鉴别采用薄层色谱法，以野菊花，丹皮酚，芍药苷为对照，鉴别菊芩清解颗粒 中的药物成分；所述含量测定采用高效液相色谱法测定菊芩清解颗粒中黄芩苷的含量。本发明的菊芩清解颗粒的检测方法，其中鉴别方法包括以下步骤a.取菊芩清解颗粒，研细，取15g，加乙醚40ml，水浴回流1小时，放冷、静置、倾取
4上清液，挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为供试品溶液。另取野菊花对照药材lg，同法制成 对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品及对照药材溶液各10 μ 1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以环己烷-甲苯-醋酸乙酯(3-6 4-6 0.2-1)为展开剂，展开，取出，晾 干，喷以3%香草醛硫酸试液，105°C烘烤3分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位 置上显相同颜色的主斑点。b.取当归对照药材0. 3g，加乙醚20ml，水浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清液， 挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，得到对照药材溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制每Iml含 丹皮酚Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VI B)试验， 吸取a项下供试品溶液20 μ 1及上述对照药材和对照品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯(6-10 1-4)为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，置于 紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧 光主斑点；再喷以酸性三氯化铁乙醇液，于105°C，烘烤3分钟。供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。c.取本品5g，研细，加无水乙醇25ml，超声提取30分钟，静置，倾取上清液，挥至约 lml，作为供试品溶液。另取赤芍对照药材lg，同法制成对照药材溶液，再取芍药苷对照品， 加无水乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005版 一部附VI B)试验，吸取供试品和对照药材、对照品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以氯仿-甲醇(3-8 1-3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%香草醛硫酸试液，于 105°C烘烤3-5分钟。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应位置上，显相同颜色的 主斑点。本发明的菊芩清解颗粒的检测方法，其中含量测定包括以下步骤含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定；色谱条 件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1%醋酸O0-30 70-80) 为流动相，检测波长276nm ；理论塔板数按黄芩苷峰计算，应不低于1500 ；对照品溶液的制 备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供试品 溶液的制备取本品粉末约0. 3g精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重 量，超声提取1小时，放置至室温，再称定重量，补足减失的重量、滤过、弃去初滤液，精密量 取续滤液1ml，置5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔滤膜滤过，收 集续滤液，即得；测定法精密吸取上述对照品及供试品溶液各10 μ 1，分别注入液相色谱 仪中，测定峰面积值，按外标法计算含量，即得；每袋含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计算，不得 少于 0. lg-0. 2g。本发明控制方法能对菊芩清解颗粒进行有效的质量控制。本质量控制方法对制剂中有效成份黄芩苷以高效液相色谱法进行含量测定，规定 每袋含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计算，不得少于0. 16g。从而对菊芩清解颗粒质量进行了有 效的控制。
具体实施例方式实施例1处方野菊花440g、黄芩325g、连翘325g、地黄325g、赤芍220g、牡丹皮220g、当归
5220g、茯苓皮325g、甘草100g，制法以上九味，取黄芩粗片，加入10倍量沸水中，煎煮3次，提取液合并，放冷滤 过，滤液加热至60°C，用盐酸调节pH值为1-2，保温30分钟，放置过夜，滤过，沉淀水洗至 PH4-5，低温干燥，即得黄芩提取物。取野菊花、当归、连翘、牡丹皮混合后加水，浸泡4小时， 用水蒸气蒸馏法提取挥发油，收集挥发油，其水提取液及药渣留用。取挥发油用环糊精 包合，冷藏(4-10°C)过夜，滤过，沉淀低温干燥，得β-环糊精包结物，备用。其余四味药 加水煎煮两次，加入上述提取挥发油的药渣再共同煎煮一次，加入上述提取挥发油时的水 提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 10-1. 15(50°C测)时加乙醇使含醇量达70%，冷藏过 夜，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1. 10-1. 15(50°C测)清膏，加入糊精，加热溶 解后喷雾干燥，即得水提物干粉。取黄芩提取物、环糊精包结物和水提物干粉，加入甜 菊素和适量糊精混勻，以适当浓度的乙醇制粒，干燥，制成颗粒lOOOg，分装，即得。菊芩清解颗粒的质量控制方法为鉴别(1)、取本品15g，研细，加乙醚40ml，水浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清液，挥 干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为供试品溶液。另取野菊花对照药材lg，同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VI B)试验，吸取供试品及对照药材溶液各 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-甲苯-醋酸乙酯 5 0.5)为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以3%香草醛硫酸试液，105°C烘烤3分钟。供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应位置上显相同颜色的主斑点。(2)、取当归对照药材0. 3g，加乙醚20ml，同鉴别⑴项下供试品溶液的制备方 法制备对照药材溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制每Iml含丹皮酚Img的溶液，作为对照 品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VI B)试验，吸取鉴别(1)项下供试品 溶液20 μ 1及上述对照药材和对照品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己 烷-醋酸乙酯(9 1)为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，置于紫外光灯(365nm)下检 视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光主斑点；再喷以酸性 三氯化铁乙醇液，于105°C，烘烤3分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的主斑点。(3)、取本品5g，研细，加无水乙醇25ml，超声提取30分钟，静置，倾取上清液，挥至 约1ml，作为供试品溶液。另取赤芍对照药材lg，同法制成对照药材溶液，再取芍药苷对照 品，加无水乙醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 版一部附VI B)试验，吸取供试品和对照药材、对照品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以氯仿-甲醇(5 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%香草醛硫酸试液，于 105°C烘烤3-5分钟。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应位置上，显相同颜色的 主斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统 适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1%醋酸04 76)为流动相，检测 波长276nm ；理论塔板数按黄芩苷峰计算，应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称取黄 芩苷对照品适量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取
6本品粉末约0. 3g精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声提取1小 时，放置至室温，再称定重量，补足减失的重量、滤过、弃去初滤液，精密量取续滤液Iml，置 5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔滤膜滤过，收集续滤液，即得； 测定法精密吸取上述对照品及供试品溶液各10μ 1，分别注入液相色谱仪中，测定峰面积 值，按外标法计算含量，即得；每袋含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计算，不得少于0. 16g。
权利要求
1.一种菊芩清解颗粒的检测方法，其特征在于，包括鉴别和含量测定的步骤。
2.权利要求1的检测方法，其特征在于，所述鉴别采用薄层色谱法，以野菊花，丹皮酚， 芍药苷为对照，鉴别菊芩清解颗粒中的药物成分。
3.权利要求1的检测方法，其特征在于，所述含量测定采用高效液相色谱法测定菊芩 清解颗粒中黄芩苷的含量。
4.权利要求1的检测方法，其特征在于，其中鉴别方法包括以下步骤(1)、取菊芩清解颗粒15g，研细，加乙醚40ml，水浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清 液，挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为供试品溶液，另取野菊花对照药材lg，同法制成对照 药材溶液，照中国药典2005年版附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品及对照药材溶液各 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-甲苯-醋酸乙酯=4. 5 5 0.5为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以3%香草醛硫酸试液，105°C烘烤3分钟，供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应位置上显相同颜色的主斑点。
5.权利要求1的检测方法，其特征在于，其中鉴别方法包括以下步骤O)、取菊芩清解颗粒15g，研细，加乙醚40ml，水浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清 液，挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为供试品溶液，取当归对照药材0. 3g，加乙醚20ml，水 浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清液，挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为对照药材溶液， 另取丹皮酚对照品，加丙酮制每Iml含丹皮酚Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法 试验，吸取供试品溶液20 μ 1、对照药材和对照品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以环己烷-醋酸乙酯=9 1为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，置于365nm紫外光 灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光主斑点；再喷 以酸性三氯化铁乙醇液，于105°C，烘烤3分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的主斑点。
6.权利要求1的检测方法，其特征在于，其中鉴别方法包括以下步骤(3)、取菊芩清解颗粒5g，研细，加无水乙醇25ml，超声提取30分钟，静置，倾取上清液， 挥至约1ml，作为供试品溶液，另取赤芍对照药材lg，同法制成对照药材溶液，再取芍药苷 对照品，加无水乙醇制成每Iml含aiig的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供 试品和对照药材、对照品溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(5 1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%香草醛硫酸试液，于105°C烘烤3-5分钟，供试品色谱 中，在与对照药材、对照品色谱相应位置上，显相同颜色的主斑点。
7.权利要求1的检测方法，其中含量测定方法，步骤如下照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试 验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1%醋酸=20-30 70-80为流动相，检测波 长276nm ；理论塔板数按黄芩苷峰计算，应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称取黄芩 苷对照品适量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本 品粉末约0. 3g精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声提取1小时， 放置至室温，再称定重量，补足减失的重量、滤过、弃去初滤液，精密量取续滤液1ml，置5ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔滤膜滤过，收集续滤液，即得；测定 法精密吸取上述对照品及供试品溶液各10μ 1，分别注入液相色谱仪中，测定峰面积值， 按外标法计算含量，即得；每袋含黄芩以黄芩苷计算，不得少于0. 16g。
8.权利要求1的检测方法，步骤如下 鉴别(1)、取菊芩清解颗粒15g，研细，加乙醚40ml，水浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清 液，挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为供试品溶液，另取野菊花对照药材lg，同法制成对照 药材溶液，照中国药典2005年版附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品及对照药材溶液各 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-甲苯-醋酸乙酯=4. 5 5 0.5为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以3%香草醛硫酸试液，105°C烘烤3分钟，供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应位置上显相同颜色的主斑点，O)、取菊芩清解颗粒15g，研细，加乙醚40ml，水浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清 液，挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为供试品溶液，取当归对照药材0. 3g，加乙醚20ml，水 浴回流1小时，放冷、静置、倾取上清液，挥干，残渣加丙酮Iml使溶解，作为对照药材溶液， 另取丹皮酚对照品，加丙酮制每Iml含丹皮酚Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法 试验，吸取供试品溶液20 μ 1、对照药材和对照品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以环己烷-醋酸乙酯=9 1为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，置于365nm紫外光 灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光主斑点；再喷 以酸性三氯化铁乙醇液，于105°C，烘烤3分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的主斑点，(3)、取菊芩清解颗粒5g，研细，加无水乙醇25ml，超声提取30分钟，静置，倾取上清液， 挥至约1ml，作为供试品溶液，另取赤芍对照药材lg，同法制成对照药材溶液，再取芍药苷 对照品，加无水乙醇制成每Iml含aiig的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供 试品和对照药材、对照品溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇=5 1 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%香草醛硫酸试液，于105°C烘烤3-5分钟，供试品色谱 中，在与对照药材、对照品色谱相应位置上，显相同颜色的主斑点， 含量测定照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性 试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1%醋酸=沈74为流动相，检测波长 276nm ；理论塔板数按黄芩苷峰计算，应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称取黄芩苷 对照品适量，加甲醇溶解并制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品 粉末约0. 3g精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声提取1小时， 放置至室温，再称定重量，补足减失的重量、滤过、弃去初滤液，精密量取续滤液1ml，置5ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，用0. 40-0. 50 μ m微孔滤膜滤过，收集续滤液，即得；测定 法精密吸取上述对照品及供试品溶液各10 μ 1，分别注入液相色谱仪中，测定峰面积值， 按外标法计算含量，即得；每袋含黄芩以黄芩苷计算，不得少于0. 16g。
全文摘要
本发明公开了一种治疗急性、亚急性湿疹的菊芩清解颗粒剂的检测方法，其对方中的野菊花、赤芍、牡丹皮和当归采用薄层色谱法进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对产品中的黄芩苷进行含量测定，可很好的控制产品的质量，保证产品质量的安全、有效、质量可控。
文档编号A61P17/00GK102078426SQ20091018659
公开日2011年6月1日 申请日期2009年12月1日 优先权日2009年12月1日
发明者邱国萍, 邹武斌 申请人:江西济民可信药业有限公司