专利名称：芸香甙微细颗粒的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，特别是一种应用超临界流体结晶技 术制备芸香甙微细颗粒的制备工艺。
背景技术：
就药物而言，颗粒的大小可以直接影响到药物的被吸收程度和药效。一般来说，药 物颗粒越小，比表面积越大就越容易溶解在人体的体液内，能被人体较完全地吸收，从而起 到很好的疗效，较大颗粒的药物则因为溶解的速度较为缓慢，很难能被完全吸收利用而达 到期盼的药效。现有技术中，药物颗粒的细化通常采用压碎法、球磨法、溶液法、超临界流体结晶 技术来实现。但是，前两种方法得到的颗粒粒径分布常常较宽，很难满足现今高新技术的要 求；溶液法虽然能获得较窄的颗粒粒径分布，但所用的有机溶剂时常会残留在颗粒中而引 起不必要的副作用。超临界流体结晶技术与传统结晶方法生产的超细粉相比，其结晶理想，表面光滑， 粒度均勻，几乎无残留溶剂，是制备纳米微米药物的新方法。其原理是利用超临界流体如 二氧化碳等与药物溶液在超临界状态下混合从喷嘴喷出，在几十微秒内形成纳米微米级微 粒，通过调节压力、温度、流量、浓度等参数，可以控制药物粒度、晶型甚至从同素异形体中 选择需要的形态。生产一步到位，毋须干燥粉碎等后处理，生产过程无一废，被称为绿色技 术。超临界流体结晶技术还能使药物与高分子辅料形成复合颗粒，即充分利用药物和辅料 各自特性制各功能独特新颖的给药系统。利用新技术生产的微米级药物可以经口或鼻腔直 接送入肺泡内发挥作用。蛋白质和肽类等极不稳定的大分子也能获得稳定结构产生较长疗 效。一些难于吸收或味道极差的药物则可利用涂层包裹，达到速释、缓释、控释、掩味等功 能。因此，超临界流体结晶技术已经成为各种化学药物及生化药物超新型制剂的技术平台。芸香甙化学名称4H-l-Benzopyran-4-one,3_[ (6-0- (6-deoxy-α -L-mannopyranosyl)- β -D-gl ucopyranosyl] oxy] ~2~ (3,4-dihydroxyphenyl) -5，7-dihydroxy-,从豆禾斗植物槐树的花 蕾中提取而得到的一个黄酮类化合物，芸香甙属维生素类药，分子式C27H30016分子量 610. 51有助于保持和恢复毛细血管正常性的作用，主要用于治疗高血压病的辅助治疗(但 不能降压，也可用于治疗因缺乏维生素所致的其他出血病状的治疗)。本品性状为黄色或 浅黄绿色粉末，或极细微针状晶体，无嗅，无味在空气中逐渐变深，加热至185-192 时， 变成棕色胶状体，约在215°C时分解，本品在冷水中极微溶(1 10000)，在沸水中微溶 (1 200)，在沸乙醇中略溶(1 60)，在碱性溶液中易溶，可溶于甲醇及乙丙醇，在氯仿、乙 醚和苯中不溶。目前人们十分渴望出现一种将芸香甙药物制成超细颗粒的化工工艺，找出合适晶 型提高该药溶解度和疗效，降低使用成本和毒副作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，应用超临界流体结晶技 术制备该微细颗粒，能提高该药溶出度和疗效，利于人体吸收，降低使用成本和毒副作用， 在临床具备独特的优势。本发明的技术方案一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，使用现有超临界流体抗溶 剂设备，其特征在于它由以下步骤构成(1)配置芸香甙液体取甲醇、乙丙醇、DMSO中的至少一种制成混合液，将浓度为 0. 2-10%的芸香甙充分溶解于其中并使pH大于7，溶液与溶液泵相连，加入夹带剂，设备体 系压力为2-100MPa，溶解温度为20-60°C，流量为l_20ml/min，设置喷嘴大小200_1500um， 喷射距离为5-15cm ；(2) 二氧化碳进料将钢瓶内的(X)2通过压力调节阀输入超临界流体抗溶剂设备 体系，进入结晶釜，流量为5-lOOml/min，控制启动温度20_60°C，压力为2-lOOMPa ；(3)芸香甙结晶析出将步骤(1)配置的芸香甙液体经超临界流体抗溶剂设备体 系中喷嘴急速喷入结晶釜内，操作时间为60-240min，在结晶釜底部收集从溶剂中析出的芸 香甙微晶态或无定型态微细颗粒，喷嘴温度为20-100°C、其喷射距离为l-50cm;(4)检验芸香甙微细颗粒的有效粒径为d(0. 5) = 9. 216um。上述步骤(1)中所说的芸香甙浓度为1. 0% ；所说的控制设备体系压力为15Mpa， 溶解温度为40°C，喷射距离为10cm，喷嘴温度为45°C。上述步骤(1)中的溶液泵可以是高效液相色谱溶液泵。上述步骤(1)中的夹带剂可以选用无水乙醇、95%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮、氯 仿中的至少一种，流量为l-20ml/min。上述步骤O)中，待各指标稳定后可通入乙醇将设备管路中剩余的溶剂洗净。上述工艺的总操作时间为40_100min。本发明的优越性和技术效果在于本发明工艺适合芸香甙原料，能制出超细化微细颗粒，利于人体吸收，能提高芸香 甙溶解度和疗效，降低使用成本和毒副作用。经本发明制备的芸香甙超微颗粒，在临床具备 独特的优势。该药物优势如下1、抗炎作用大鼠腹腔注射，对植入羊毛球的发炎过程有明显的抑制作用。本品的 硫酸酯钠(Sod. rutin sulfate)对大鼠热浮肿有很强的抗炎作用。2、维生素P样作用，具有维持血管抵抗力、降低其通透性、减少脆性等作用，对脂 肪浸润的肝有祛脂作用，与谷胱甘酞合用祛脂效果更明显。3、抗病毒作用200μ g/ml浓度时，对水疱性口炎病毒有最大的抑制作用。4、抑制醛糖还原酶作用10-5M浓度时抑制率为95%。这作用有利于糖尿病型白 内障的治疗。5、毒性小鼠静脉注射LD50 950mg/kg。6、临床用于防治脑溢血、高血压、视网膜出血、紫瘢和急性出血性肾炎。治疗慢性 气管炎，有效率84. 8%和98%。7、超微细粉适合制成干粉制剂，由于不采用氟代烷烃类抛射剂(CFCs)，属于绿色环保产品；8、超微细粉的溶剂残留低于中国药典2005版要求；9、动态粒径分布达到中国药典2005版粉雾剂要求，能广泛地用于多种制剂的开发。(四)说明书附图
图1为现有技术超临界流体抗溶剂设备连接及流程示意图。其中1为芸香甙溶液，2为溶液泵，3为喷嘴，4为结晶釜，5为气液分离釜，6为气 体排放口，7为残液收集器，8为增压泵，9为C02，10-1为夹带剂，10-2为溶液泵，Pl为设备 体系压力，P2为结晶釜工作压力。
具体实施例方式实施例1 一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，使用现有超临界流体抗溶剂设备，其 特征在于它由以下步骤构成(1)配置芸香甙液体控制设备体系压力lOMpa，溶解温度为45 °C，喷射距离10cm， 喷嘴温度45°C，待各指标稳定后，注入IOOml芸香甙溶液，流量为lml/min ；将浓度为2. O%的芸香甙溶液1溶解于甲醇中，通过高效液相色谱溶液泵2输进设 备体系中；溶解温度为40°C，设备体系压力为12MPa ；夹带剂10-1为无水乙醇，流量为20ml/min ；(2) 二氧化碳进料将钢瓶内的(X)2 9通过压力调节阀输入超临界流体抗溶剂设 备体系进入结晶釜4内，CO2流量为20ml/min ；控制结晶釜4启动温度45°C、压力为12Mpa ； 持续通入(X)2 lOOmin，待各指标稳定后可通入乙醇将设备管路中剩余的溶剂洗净。(3)芸香甙结晶析出将步骤(1)配置的芸香甙液体1经超临界流体抗溶剂设备 体系中喷嘴3急速喷入结晶釜4内，设备体系达到设定压力和温度流量稳定15min后，芸 香甙液体1进入设备体系到完全喷入结晶釜4内，操作时间为40min ；在结晶釜4底部收集 从溶剂中析出的芸香甙微晶态或无定型态微细颗粒；所述喷嘴温度为45°C、其喷射距离为 IOcm ；(4)检验芸香甙微细颗粒的有效粒径为d(0. 5) = 9. 216um。上述工艺的总操作时间为lOOmin。实施例2 —种芸香甙微细颗粒的制备工艺，使用现有超临界流体抗溶剂设备，其 特征在于它由以下步骤构成(1)配置芸香甙液体控制设备体系压力15Mpa，溶解温度为45°C，喷射距离5cm， 喷嘴温度45°C，待各指标稳定后，注入IOOml芸香甙溶液，流量为lml/min ；将浓度为2.0%的芸香甙溶液1溶解于甲醇中，其配比是甲醇芸香甙= 100 2，通过高效液相色谱溶液泵2输进设备体系中；溶解温度为40°C，设备体系压力为 12MPa ；夹带剂10-1为无水乙醇，流量为1. 5ml/min ；(2) 二氧化碳进料将钢瓶内的(X)2 9通过压力调节阀输入超临界流体抗溶剂设 备体系进入结晶釜4内，CO2流量为lOml/min ；控制结晶釜4启动温度45°C、压力为15Mpa ； 持续通入(X)2 lOOmin，待各指标稳定后可通入乙醇将设备管路中剩余的溶剂洗净。
(3)芸香甙结晶析出将步骤⑴配置的芸香甙液体1经超临界流体抗溶剂设备 体系中喷嘴3急速喷入结晶釜4内，记录操作时间、反溶剂及溶液的瞬时和累积流量，设备 体系达到设定压力和温度流量稳定15min后，芸香甙液体1进入设备体系到完全喷入结晶 釜4内，操作时间为40min ；在结晶釜4底部收集从溶剂中析出的芸香甙微晶态或无定型态 微细颗粒；所述喷嘴温度为45°C、其喷射距离为IOcm ；(4)检验芸香甙微细颗粒的有效粒径为d(0. 5) = 9. 216um。上述工艺的总操作时间为lOOmin。下面对本发明原理和检测进行说明本发明是将芸香甙在超临界流体溶液中通过喷嘴3，由高压状态以超音速急速喷 到低压的周围环境中。压力的急速减小使溶液形成极度的过饱和，所溶解的溶质就在极短 的时间内析出。利用这一技术制得的颗粒通常很小，可达微米级，甚至纳米级，而且颗粒粒 径分布很窄，分散性好。对药物结晶和粒子工程来说，重要的是超临界流体的可压缩性高而且容易控制， 在临界点附近，温度和压力的微小改变可使溶剂的密度、扩散系数、粘度、表面张力、溶解度 等产生明显的变化。当前应用最广泛的超临界流体是二氧化碳，纯度高99. 999%，临界温度 和临界压力较低(Tc = 37. 3°C，Pc = 7. 15MPa)无臭无毒无污染，化学惰性无腐蚀，不易燃 爆使用安全，廉价易得回收方便，产品质量高，生产周期短，而被广泛应用于脱除咖啡因及 食品佐料、保健品等方面的分离和提纯。近年来，在药物、聚合物和催化剂等颗粒的制各上 受到国内外广泛的重视和研究。下面对用本发明工艺制备的芸香甙微细颗粒粒径分布检测方法作如下说明用激光动态光散射粒度仪对超临界流体结晶技术制备后的的粒径及其分布进行 测定。测定条件为取样品采用干法测试，测定温度为25°C，有效粒径为lOum，测定结果如 下 制备前后样品粒径测定结果
样品d (0. 5) um
未经处理22. 115经超临界处理9. 216X射线多晶衍射分析方法进行样品前处理成均勻分散的固体粉末，样品测试。检测条件石墨单色器单色化 CuKa辐射；管电40kV ；管流70mA，扫描速度4°C /min，扫描范围5° 50° (2 θ ) 0未经处理样品X射线衍射图显示芸香甙在10° 30°之间有密而细的结晶峰，表 明芸香甙以稳定的晶型存在。经超临界流体结晶制备的芸香甙图谱在5°飞0°没有特征的衍射峰，呈无定型 特征。含量测定方法仪器Waters公司高效液相色谱仪，Waters2487紫外检测仪，515HPLC泵。色谱条件Hypersil GOLD 柱(5 μ m 250mmX4. 6mm)；流动相乙腈水(8 92 30 70)，加磷酸调pH至2. 6 ；流速0. 8ml/min ；检测波长为254nm,柱温为30°C。
对照品溶液配制精密称取对照品1. 9mg,置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，置超声波 中振荡溶解，精密吸取该标准溶液0. OlmUO. 05ml,0. 1ml,0. 2ml,0. 4ml，置Iml定量管中，
用淋洗液稀释至刻度备用。经测试制备前后二批样品其含量均在标示量的95. 0-105. 0%范围内，测定数据见 下表 制备前后样品含量测定结果
权利要求
1.一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，使用现有超临界流体抗溶剂设备，其特征在于它 由以下步骤构成(1)配置芸香甙液体取甲醇、乙丙醇、DMSO中的至少一种制成混合液，将浓度为 0. 2-10%的芸香甙充分溶解于其中并使PH大于7，溶液与溶液泵相连，加入夹带剂，设备体 系压力为2-100MPa，溶解温度为20-60°C，流量为l_20ml/min，设置喷嘴大小200_1500um， 喷射距离为5-15cm ；(2)二氧化碳进料将钢瓶内的(X)2通过压力调节阀输入超临界流体抗溶剂设备体系， 进入结晶釜，流量为5-lOOml/min，控制启动温度20_60°C，压力为2-lOOMPa ；(3)芸香甙结晶析出将步骤(1)配置的芸香甙液体经超临界流体抗溶剂设备体系中 喷嘴急速喷入结晶釜内，操作时间为60-240min，在结晶釜底部收集从溶剂中析出的芸香甙 微晶态或无定型态微细颗粒，喷嘴温度为20-100°C、其喷射距离为l-50cm ；(4)检验芸香甙微细颗粒的有效粒径为d(0.5) = 9. 216um。
2.根据权利要求1中所说的一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，其特征在于所说的步骤 (1)中的芸香甙浓度为1. 0%;所说的控制设备体系压力为15Mpa，溶解温度为40°C，喷射距 离为10cm，喷嘴温度为45°C。
3.根据权利要求1中所说的一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，其特征在于所说的步骤(1)中的溶液泵可以是高效液相色谱溶液泵。
4.根据权利要求1中所说的一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，其特征在于所说的步骤 ⑴中的夹带剂可以选用无水乙醇、95%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿中的至少一种，流 量为 l_20ml/min。
5.根据权利要求1中所说的一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，其特征在于所说的步骤(2)中，待各指标稳定后可通入乙醇将设备管路中剩余的溶剂洗净。
6.根据权利要求1中所说的一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，其特征在于工艺的总操 作时间为40-100min。
全文摘要
一种芸香甙微细颗粒的制备工艺，使用现有超临界流体抗溶剂设备，由以下步骤构成(1)配置芸香甙液体；(2)二氧化碳进料；(3)芸香甙结晶析出；(4)检验。本发明的优越性和技术效果在于本发明工艺适合芸香甙原料，能制出超细化微细颗粒，利于人体吸收，能提高芸香甙溶解度和疗效，降低使用成本和毒副作用。经本发明制备的芸香甙超微颗粒，在临床具备独特的优势。
文档编号A61P9/10GK102091040SQ20091022915
公开日2011年6月15日 申请日期2009年12月11日 优先权日2009年12月11日
发明者赵永亮, 郑洪浩, 魏海 申请人:国家纳米技术与工程研究院