专利名称：益生菌对发生环境改变及生物学改变的人和动物的作用的制作方法
益生菌对发生环境改变及生物学改变的人和动物的作用与相关申请的交叉参考本申请是2008年4月16日提交的未决的临时申请No. 61/124，424的部分继续申请。关于联邦赞助研究或开发的声明不适用。联合研究协议方名称不适用。涉及“序列表”、表格或计算机程序列表的附录不适用。
背景技术：
益生菌是在人和动物的胃肠道(GI tract)中天然存在的有益微生物。已经 表明，在对人和动物施用正确量的活微生物时，益生菌对健康有利。益生菌广泛地用作 动物和人的营养补充剂。例如，将酵母用作家畜的营养补充剂，也经常使用含有乳杆菌 (Lactobacillus)和/或双歧杆菌属(Bifidobacterium)乳酸菌的酸乳。当以益生菌作为营 养补充剂对人和动物施用时，未显示毒性作用。为了在动物和人中将益生菌的作用最大化， 必须施用活菌以使其到达胃肠道进行繁殖(KaiIasapatha和Chin 2000)。乳杆菌和双歧杆 菌属是科学文献和商品中描述的两种最常见的益生菌。乳杆菌和双歧杆菌属均为兼性厌氧 菌。乳酸菌和双歧杆菌属的大部分菌种(或菌株)都对接触氧(Gomes等，1995 =Talwalkar 和KaiIasapathy，2004)和高温敏感。很难在持续开关的操作下在室温下维持乳杆菌和双 歧杆菌属的活性。因此，所描述的结果经常变化很大，特别是对于需要长期贮存和在不同温 度下运输的市售产品而言(Tuomola等，2001)。对人和动物而言，蔬菜和水果是纤维、维生素、天然抗氧化剂和矿物质的主要来 源。例如，已表明番茄和卷心菜是维生素C的天然来源(Clayton和Borden，1942)。更重要 的是，蔬菜和水果的安全性已被广为接受。最近，已经表明天然浆果(如樱桃(Acerola)) 富含抗坏血酸和多酚。樱桃所富含的维生素C(695a 4827mg/100g)使其成为天然维生素C 的优选来源(Mezadri等，2006)。此外，最近在大鼠中的研究证明，樱桃作为人用食品补充 剂是安全的(Hanamura和Aoki，2008)。益生菌与新鲜蔬菜或水果的组合将提供来自益生菌 以及新鲜蔬菜或水果的益处。然而，新鲜的蔬菜和新鲜的水果是微生物繁殖的天然营养来 源。微生物在新鲜蔬菜和水果中的复制不但改变蔬菜或水果的营养组成，而且还会生成毒 性化合物，其可能是由微生物分泌的，或是作为微生物繁殖或者蔬菜或水果降解的副产物 而产生的。一旦益生菌进入活跃状态，将很难在长期贮存中保持其存活，尤其是在室温下。科学家和商业公司已经开发了不同的干燥方法来保存蔬菜和水果。干燥蔬菜和水 果面临的主要难题是保持蔬菜和水果的营养和风味。在干燥过程中尽可能多地保持蔬菜或 水果中的矿物质、维生素、碳水化合物、蛋白和抗氧化剂十分重要，尤其是对于蔬菜或水果 的干粉而言。此外，在干燥过程和贮存中，蔬菜或水果干粉的营养及风味的损失应该尽可能 低，以使其具有作为新鲜蔬菜和水果的营养益处。
已经广为人知的是，将益生菌与矿物质或其它动物饲料添加剂混合时，益生菌的 生存力显著降低。将益生菌与维生素和矿物质添加剂的混合物进行包封在一起使得益生菌 丧失高于99. 79%的生存力(Zimmer，1996，专利号5501857)。这提出了一个重要的问题 向需要保留矿物质、维生素、抗氧化剂及风味的蔬菜或水果干粉中添加益生菌，而同时保持 益生菌的生存力。人和动物在发生环境改变(如离家、旅行、住旅馆或寄宿设施或温度的变化时)或 生物学改变(如衰老、饮食改变、病原体或寄生虫感染，或抗生素治疗)时容易患病。这些环 境改变经常显示出激素释放的提高。这些激素中最重要的是来自肾上腺皮质的皮质醇。皮 质醇导致炎性应答的抑制(Roberts等，2006)。皮质醇水平增高的持续会导致引发免疫应 答的能力发生降低(Roberts等，2006)。被抑制的免疫系统可从很多途径影响主体，例如， 吞噬入侵细菌的能力变弱。血液中皮质醇的升高影响巨噬细胞膜的流动性；当免疫系统被 抑制时，巨噬细胞杀死所吞噬病原体的能力降低(Mayo Clinic 2006)。医生和兽医经常以 数周的抗生素或类固醇疗法治疗肠胃(GI)疾病。然而，广谱抗生素的持续使用可干扰人和 动物胃肠道中的有益微生物种群，并引起消化疾病的副作用。在人和动物中使用类固醇经 常对天然激素产生干扰，引起心血管疾病、肝病和皮肤病。采用益生菌消除由人和动物的环 境或生物学改变而产生的影响，这降低了医生和兽医对抗生素和类固醇的依赖。前述相关领域及其相关局限性的实例旨在说明而非排除。本领域技术人员在阅读 本说明书后将十分清楚相关领域的其他局限性。发明简述将以下实施方案及其方面与系统、工具和方法相结合进行描述和说明，它们旨在 示例和说明，而非限制范围。在多个实施方案中，已经减轻或消除了一个或多个上述问题， 而另一些实施方案则针对其它改进。一些实施方案包括含有益生菌和植物干粉的组合物。一些实施方案包括益 生性微生物，如片球菌属(Pediococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、拟杆菌属 (Bacteroides)、丙酸菌属(Propionibacterium)、链球菌属(Streptococcus)、肠球菌 属(Enterococcus)、乳球菌属(Lactococcus) > ff lif M (Lactobacillus)禾口酵母菌属 (Saccharomyces)。一些实施方案包括来自蔬菜、水果、谷物和药草的干燥植物粉末。在一 些实施方案中，组合物被包封在明胶胶囊中。一些实施方案包括缓解人或动物中由环境改变或生物学改变所引起之影响的方 法，其包括以下步骤给需要这种缓解的人或动物食用包封的益生性组合物，其含有包封起 来的活益生性微生物。环境改变定义为居住在寄宿设施、旅行、温度变化，人或动物的直接 区域或环境中的新的和/或有害的变化。生物学改变定义为人和动物的衰老、病原体或寄 生虫的感染、慢性生理变化以及已有机体功能的变化。一些实施方案包括缓解人或动物中由环境改变或生物学改变所引起之影响的方 法，其包括以下步骤给需要这种缓解的人或动物食用包封的益生性组合物，其含有益生性 微生物和干燥的植物粉末。除上述示例性方面和实施方案外，其他方面和实施方案在参考附图
并研究以下描 述后将是十分明确的。附图简述
不适用。发明详述以1 4的重量比将乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)发酵培养物与番茄 的喷雾干燥粉末混合。通过人工胶囊装填装置或自动胶囊装填机，将乳酸片球菌与番茄干 粉的500mg混合物包封在0号明胶胶囊中。将明胶胶囊保存在室温下。将明胶胶囊保存在 室温下，并在室温下贮存0、1、3和6个月后取出。分离胶囊后，将乳酸片球菌与番茄干粉的 1克混合物重悬在之多IOml无菌缓冲盐水中。实施一系列标准稀释，将IOOul 10_7或10_8 的稀释液喷到MRS (de Man，Rogosa和Sharpe)琼脂平板上。将平板在45°C下孵育，直到观 察到用于定量分析的菌落。细菌生存力示于表1。表1.明胶胶囊中的乳酸片球菌发酵培养物与番茄干粉在室温下的包封稳定性
生产后的时间细菌数存活百分比月CFU/克02.0 Χ IO1010011.92 Χ IO109631.94 Χ IO109461.76 Χ IO1088表1表明，与喷雾干燥的番茄粉末混合的益生性微生物培养物可基本保持活性至 少6个月。患消化疾病的受试者是来自中国、台湾和美国的志愿者，根据当地诊所的建议服 用NutriTot ，其为益生性组合物，其在明胶胶囊中含有干燥蔬菜粉末(如番茄、胡萝卜、红 薯、卷心菜、菠菜或花椰菜)或水果粉末(如柠檬、桃、草莓或苹果)中的乳酸片球菌发酵培 养物。NutriTot 的施用小于10岁的儿童，每天半个胶囊；成人和大于10岁的儿童，每天 一个胶囊。当症状为中度至重度或者为重度时，加倍NutriTot 的用量。结果显示在表2 中。表2.干燥的蔬菜粉末或水果粉末中的乳酸片球菌发酵培养物对患有消化疾病的 人的影响
权利要求
1.益生性组合物，其包含 益生性微生物，和干燥的植物粉末。
2.权利要求1的组合物，其中所述益生性微生物选自片球菌属(Pediococcus)、双歧杆 菌属(Bifidobacterium)、拟杆菌属(Bacteroides)、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、链 球菌属(Streptococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、乳球菌属(Lactococcus) lifM (Lactobacillus)禾口酵母菌属(Saccharomyces)。
3.权利要求1的组合物，其中所述干燥的植物粉末选自干燥的蔬菜粉末、干燥的水果 粉末、干燥的谷物粉末和干燥的药草粉末。
4.权利要求1的组合物，其中所述益生性组合物包封在明胶胶囊中。
5.权利要求1的组合物，其中所述益生性微生物为片球菌属或酵母菌属。
6.权利要求1的组合物，其中所述益生性微生物为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici) sK^iif^^lii (Saccharomyces boulardii)。
7.用于缓解人或动物中由环境改变或生物学改变所导致的影响的方法，包括以下步骤给需要缓解这种影响的人或动物食用经包封的益生性组合物，所述益生性组合物包含 经包封的活益生性微生物。
8.权利要求7的方法，其中所述益生性微生物选自片球菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、 丙酸杆菌属、链球菌属、肠球菌属、乳球菌属、乳杆菌属和酵母菌属。
9.权利要求7的方法，其中所述益生性微生物为片球菌属或酵母菌属。
10.权利要求7的方法，其中所述益生性微生物为乳酸片球菌或布拉酵母菌。
11.权利要求7的方法，其中所述动物是狗或鱼。
12.用于缓解人或动物中由环境改变或生物学改变所导致的影响的方法，包括以下步骤给需要对环境改变或生物学改变进行药物治疗或者缓解的人或动物食用经包封的益 生性组合物，所述益生性组合物包含益生性微生物和干燥的植物粉末。
13.权利要求12的方法，其中所述益生性微生物选自片球菌属、双歧杆菌属、拟杆菌 属、丙酸杆菌属、链球菌属、肠球菌属、乳球菌属、乳杆菌属和酵母菌属。
14.权利要求12的方法，其中所述益生性微生物为片球菌属或酵母菌属。
15.权利要求12的方法，其中所述益生性微生物为乳酸片球菌或布拉酵母菌。
16.权利要求12的方法，其中所述干燥的植物粉末选自干燥的蔬菜粉末、干燥的水果 粉末、干燥的谷物粉末和干燥的药草粉末。
17.权利要求12的方法，其中所述动物是狗或鱼。
18.权利要求7的方法，其中所述人或动物的生物学改变是人或动物患有的炎性肠病 (IBD)。
全文摘要
一个示例性实施方案提供了一种或多种改进，包括益生性组合物，所述益生性组合物包含益生性微生物以及干燥的蔬菜、水果、谷物或药草粉末。给发生生物学改变或环境改变的人或动物食用该益生性组合物对缓解这些改变具有有益作用。该有益作用已在人、狗和鱼中得到证明。
文档编号A61K36/06GK102112140SQ200980126096
公开日2011年6月29日 申请日期2009年4月16日 优先权日2008年4月16日
发明者希-胡·林 申请人:医麦科技美国马里兰有限责任公司