专利名称：含有结晶抑制物质的组合物的制作方法
含有结晶抑制物质的组合物本发明涉及一种含有肌醇磷酸盐和/或肌醇二膦酸盐的组合物，及其用于预防进 行透析的病人体内生物学上感兴趣的物质的损失、维持所述物质足够的生理水平以调控生 理和/或病理过程的用途，这些物质是病理学结晶的抑制剂。
现有技术急性肾功能不全由肾排泄功能的迅速下降构成。用各种不同的可选治疗手段治疗 患有此种病症的病人，包括血液透析和腹膜透析。由于在肾衰竭过程中排泄功能的缺失，会积聚代谢废物。当肾脏不能行使其功能 的时候，病人需要进行透析或肾脏移植来存活。透析是这种可选治疗的选择之一，涉及使用将血液与其它液体(称作透析用液或 透析液)分开的半透膜。在血液透析中使用人工肾脏，其最重要的部分是透析机。后者由血液区室和另一 个透析液区室组成，两种液体始终保持相对方向的循环，以利用溶质浓度梯度进行最大程 度的扩散。这两个区室由半透膜隔开，其基本上有四种不同类型-纤维素膜(Cuprofan)这是最广泛使用的，由具有许多个游离羟基的葡萄糖环 的链构成。-取代的纤维素膜它们是通过许多游离羟基和乙酸酯之间的化学键合获得的， 也称作醋酸纤维素。-纤维素合成膜通过添加合成性材料，例如在血仿膜(Hemophan)的生产中添加
二乙基氨基乙基修饰的。-合成性膜它们不含纤维素，比纤维素膜更通透，更生物相容。各种这类的膜包 括聚丙烯腈、聚砜、聚酰胺或聚甲基丙烯酸甲酯。在腹膜透析中，操作方案与血液透析类似，虽然所用的半透膜是包裹腹腔内表面 和其中的器官的腹腔间皮。因此，透析液被引入腹膜腔，其中血液的区室是冲洗腹膜间皮的 毛细管腔。透析液组合物通过扩散过程能够除去血液中的废物，还能够调节水的体积以及其 中的电解质浓度，因为它具有受控组成的离子，例如钠、钾、氯、镁、或钙。这种液体还具有高葡萄糖浓度(使得它能够与血浆中的葡萄糖浓度达到等渗重 量克分子渗透压浓度)，并且用乙酸盐或者碳酸氢盐缓冲液缓冲。然而，血液中天然存在透析液中不存在的物质，但是它们仍然都在生物学上是感 兴趣的。这些物质在用半透膜进行透析时，经历清除过程(Van der Kaay J. ,Van Haastert P. J. Μ. ,Analytical Biochemistry (诱析牛物化学)1999 ；225 :183-185)。另外，这种清除 过程能够最高达100%地消除该物质，该百分数可以作为介质离子强度的函数而更改。
发明内容
存在维持某些可能调节生理和/或病理结晶化和钙化过程的物质的有效生理浓度的需要。特别是，需要改进透析液的组成，从而在对有需要的病人进行了透析过程后，血清 中某些生物物质的浓度基本不会下降，或者能在透析液中引入一些物质，从而使得透析后 其血浆浓度足够。另外，假如所述物质在透析过程中的浓度改变，可以通过施用静脉内配方 而再次调节其血浆浓度。可以通过在对病人进行透析之前，之中，或之后通过静脉内给药调 节所述物质的水平。因此，本发明涉及例如在透析液组合物和/或静脉内配方中引入生物学上感兴趣 的物质，及其防止所述物质从血液中损失，维持足够血浆水平或将血浆水平提高到生理学 上充分值(niveles plasmaticos adecuados)的用途。当我们考虑肾衰竭导致高磷酸酯酶血症的情况(导致尿液中磷酸钙过饱和，可能 导致病理性心血管钙化过程)时，这些物质和类似化合物对于透析病人的益处尤为密切相关。本发明的目的是引入一种物质，其在透析液组合物和/或静脉内制剂中具有结晶 化抑制剂的作用。具体说，目的是在透析液组合物中引入肌醇磷酸盐，更具体的是植酸盐 (fitato)，和/或二膦酸肌醇；以及在静脉内制剂中引入肌醇磷酸盐，更具体的是植酸盐。具体说，本发明涉及透析液组合物和静脉内制剂，其含有具有结晶化抑制剂活性 的物质。更具体的，这些物质是肌醇磷酸盐，优选植酸盐，和/或二膦酸肌醇。二膦酸盐是合成性化合物，对于磷酸酯酶的酶水解有抗性，因此口服外源性提供 比提供焦磷酸盐更有效。虽然其药物用途集中于治疗骨吸收过程，它们也具有钙盐结晶化 抑制剂的性质。另一方面，植酸盐或内消旋肌醇六磷酸盐是一种具有卓越钙盐结晶化抑制 剂性质的分子，因为它具有六个磷酸基团，因此对二价离子(例如钙离子)有高度亲和力。 因此，已经描述了与病理性钙化发展(例如肾结石或心血管钙化)有关的预防性质。在透析液组合物中引入物质可以预防该物质从血液中损失，维持其适当的血浆水 平或提高其血浆水平至生理学充分值。另外，如果所述物质在透析过程中浓度改变，可以通 过在透析过程之前，之中或之后施用静脉内制剂以再次调节血浆浓度。在本发明中，“结晶化抑制剂”应理解为一种能够预防、抑制或减少任何阶段的结 晶化的物质，不论是成核、结晶生长或聚集阶段。在本发明中，“透析液”或“透析用液”应理解为与不含肾衰竭身体内聚集的废物的 血浆类似的电解质溶液。所述溶液用于透析过程中以减少代谢性废物的聚集，调节血浆体 积和调节血液中电解质的浓度。本领域技术人员了解，透析过程的一个关键要素是透析膜，它在血液透析中是人 工肾脏的一部分，而在腹膜透析中是腹膜间皮。在这两种情况下，膜孔径防止大分子(例如 蛋白质)在透析过程中损失，但是允许电解质和低分子量物质交换。因此，适量离子(例如 钠、钾、氯、镁或钙)被引入所用的透析液，以维持适当的血浆水平。然而，没有描述过在所述透析液组合物中引入肌醇磷酸盐和/或二膦酸盐，从而 防止透析过程中其血浆浓度下降(由于引起扩散的血液和透析液之间的浓度梯度造成，从 而清除了这些物质)，或在透析过程后维持/提高其血浆浓度(图1-4)。一般说，它们是低 分子量物质，因此其能穿过透析中使用的半透膜孔。另外，作为上述方法的替代方式，病人 中肌醇磷酸盐浓度的改变也可通过施用静脉内制剂来校正。
这些物质可以是天然来源的，如植酸盐和其它肌醇磷酸盐的情况，，但是具有类似 功能的合成性物质，例如二膦酸盐的情况，也可以引入组合物。因此，本发明的第一个方面涉及一种组合物，其含有选自下列的结晶化抑制物质 肌醇磷酸盐，二膦酸盐，其药学上可接受的盐或者其任意组合，其可用于制备透析液。肌醇磷酸盐可以含有1-6个磷酸基团(肌醇一、二、三、四、五和六磷酸盐)。在一 个优选例中，结晶化抑制物质是含有1-6个磷酸基团的肌醇磷酸盐，更优选的，是肌醇六磷 酸盐(也称作植酸或植酸盐)，和甚至更优选的，是内消旋肌醇六磷酸盐。在一个优选例中，结晶化抑制物质是二膦酸盐，其选自羟乙二膦酸、阿仑膦酸、利 塞膦酸、唑来膦酸、替鲁膦酸、帕米膦酸、氯膦酸、伊班膦酸、其盐或其任意组合。本发明的透析液或静脉内制剂的优选例还可包含其它化合物，例如而不限于焦磷 酸和/或任何其药学上可接受的盐。透析液和/或静脉内制剂中的这些物质的浓度将由几种因素决定，例如透析液组 成，透析时间，肾功能不全的严重程度等。在本发明中，制备了稳定的透析液组合物，其中肌 醇磷酸盐和/或二膦酸盐的量在0. 1 μ Μ-0. IM范围内。优选肌醇磷酸盐和/或二膦酸盐浓 度范围在0. ΙμΜ和IOmM之间；更优选的，在0. ΙμΜ和ImM之间。这种类型的物质可加入的透析液组合物(用于腹膜透析和血液透析)的例子应由 葡萄糖、钠、钾、氯、钙、镁、缓冲液(主要是(但不限于)碳酸氢盐或乙酸盐)等组成。另一 方面，高葡萄糖浓度可以调节重量克分子渗透压浓度，使得它与血浆等渗。另外，可在血浆 中引入葡聚糖、乳酸盐、肝素、抗生素或其它行使特定功能的辅助性化合物。本发明的另一个方面涉及一种透析液，其含有选自肌醇磷酸盐、二膦酸盐、其药学 上可接受的盐、或其任意组合的结晶化抑制物质，以及其在血液透析和腹膜透析中的用途。 该含有结晶化抑制物质的组合物用于维持，提高或防止所述抑制物质的血浆浓度下降。本发明组合物可掺入透析液制剂或适合静脉内给药的制剂。因此，本发明的另一个方面涉及一种含有肌醇磷酸盐和/或其任意盐形式的适 合静脉内给药的组合物，用于治疗或预防与血浆中所述物质的生理充分水平(losniveles fisiogicamente adecuados)失调(desregulaci0n)有关的病理性过程。该失调的治疗或 预防是通过维持或提高所述物质在病人血浆中的水平进行的。与血浆中所述物质生理充分水平失调有关的病理过程具有非常不同的性质，而且 可以涉及而不限于任何与钙紊乱有关的病状，例如肾结石、心血管钙化、皮内钙质沉着、骨 质疏松或钙痛风。在另一方面，该紊乱或失调也涉及肿瘤学，特别是某些癌症，例如结肠、骨 骼或皮肤癌。在静脉内制剂的情况下，制备了稳定组合物，其中要施用的肌醇磷酸盐量为 lnmol/kg至0. lmol/kg之间(基于接受该制剂的个体体重)。优选肌醇磷酸盐的浓度在 0.014 11101/1^至10讓01/1^之间；更优选的，在 0. 1 μ mol/kg 至 lmmol/kg 之间。结晶化抑制物质优选是含有1-6个磷酸基团的肌醇磷酸盐，更优选是肌醇六磷酸 盐，甚至更优选的，是内消旋肌醇六磷酸盐。所述组合物还可含有焦磷酸盐。静脉内制剂的一个例子含有肌醇磷酸盐，还可含有钠、氯、缓冲液和/或其它赋形 剂，载体，和抑制性物质，例如二膦酸盐或焦磷酸盐。在本发明中，“静脉内给药”应理解为包括可注射或直接给药，即推注(bolus)形式的组合物单独或稀释给药，或通过静脉输液给药，其中组合物是通过静脉通路以静脉滴注 形式加入的。在另一方面，本发明的另一个方面涉及联合制剂，其含有至少本发明的组合物和 单独、同时或相继使用的透析液，用于治疗或防止抑制性物质生理充分水平的调节，维持或 提高进行透析的病人血浆中的这些水平。在一个优选例中，联用制剂中所用的本发明组合物的形式适合静脉内给药。在整篇说明书和权利要求中，词语“含有”及其变体不意味着排出其它的技术特 征，添加剂，成分或步骤。对于本领域技术人员来说，可部分从公开内容、部分从本发明的实 施中得出本发明的其它目的、优点和特征。提供下列实施例和附图是出于说明目的，而不意 味着限制本发明的范围。
图1显示了在使用不含植酸盐的透析液的透析过程中，人造血浆样品中最高达 40%的植酸盐由于清除作用在20小时内丢失。图2显示了在使用植酸盐浓度大于其血浆浓度的透析液的透析过程中，人造血浆 样品中植酸盐能够在20小时期间提高血浆浓度。图3显示了在使用不含1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸的透析液的透析过程中，最 高达95. 6%的1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸在20小时内通过清除丢失。图4显示了在1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸浓度大于其血浆浓度的透析液的透 析过程中，人造血浆样品中1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸在20小时期间血浆浓度能够升
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实施例下面我们将通过发明人进行的试验说明本发明，其显示了本发明组合物以注射方 式，静脉输液或透析液形式施用时的特异性和效力。实施例1用1. 5mM植酸盐制备人造血浆(含有与血浆类似组成的液体)，用0. 15M NaCl调 节离子强度。将25ml该溶液对IL体积的不含植酸盐的0. 15M NaCl溶液(透析液模型) 透析20小时。两种液体的pH都用碳酸氢盐缓冲液调节到7. 4。在时间0、1、3、6和20小时收集5ml等份的透析液，分别测定其中的植酸盐量。另 外，在0和20小时处测定人造血浆中植酸盐的浓度。透析20小时后，人造血浆中植酸盐的浓度比最初浓度要低40%。图1显示了在透 析过程中，发生植酸盐的清除，在透析溶液中植酸盐量增加直到20小时以后达到人造血浆 中最初量的40%。实施例2用1. 5mM植酸盐制备人造血浆，用0. 15M NaCl调节离子强度。将25ml该溶液对 IL体积的含与血浆中相同浓度的植酸盐的0. 15M NaCl溶液(透析液模型)透析20小时。 两种液体的PH都用碳酸氢盐缓冲液调节到7. 4。在时间0、1、3、6和20小时收集5ml等份的透析液，分别测定其中的植酸盐量。另外，在0和20小时处测定人造血浆中植酸盐的浓度。在透析过程中，血浆或透析液中植酸盐的浓度都没有变化；因此在透析液中引入 植酸盐防止了血液中该物质的损失。实施例3用300 μ M植酸盐制备人造血浆，用0. 15Μ NaCl调节离子强度。将25ml该溶液对 IL体积的含比血浆浓度高5倍的植酸盐的0. 15M NaCl溶液透析20小时。两种液体的pH 都用碳酸氢盐缓冲液调节到7. 4。在时间0、1、3、6和20小时收集5ml等份的透析液，分别测定其中的植酸盐量。另 外，在0和20小时处测定人造血浆中植酸盐的浓度。结果如图2所示。可以观察到，在透析过程中，透析液中最高达0. 75 %的植酸进入 了人造血浆；因此，考虑到最初体积和浓度的比例，人造血浆中植酸盐浓度增加了 140%;从 而可以通过将植酸盐引入透析液而重建植酸盐的正常值。实施例4用5mM 1_羟基-亚乙基-1，1_ 二膦酸制备人造血浆，用0. 15M NaCl调节离子强 度。将25ml该溶液对IL体积不含1-羟基-亚乙基_1，1_ 二膦酸的0. 15M NaCl溶液(透 析液模型)透析20小时。两种液体的pH都用碳酸氢盐缓冲液调节到7. 4。在时间0、1、3、6和20小时收集5ml等份的透析液，分别测定其中的1_羟基-亚 乙基-1，1- 二膦酸量。另外，在0和20小时处测定人造血浆中1-羟基-亚乙基-1，1- 二 膦酸的浓度。透析20小时后，人造血浆中1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸的浓度比最初浓度低 95.6%。在图3中，可以观察到在透析过程中，发生1-羟基-亚乙基-1，1-二膦酸的清除， 透析溶液中1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸的量在20小时后升高至人造血浆中最初量的 95. 6%。实施例5用5mM 1_羟基-亚乙基-1，1_ 二膦酸制备人造血浆，用0. 15M NaCl调节离子强 度。将25ml该溶液对IL体积含与血浆中相同浓度1-羟基-亚乙基_1，1_ 二膦酸的0. 15M NaCl溶液透析20小时。两种液体的pH都用碳酸氢盐缓冲液调节到7. 4。在时间0、1、3、6和20小时收集5ml等份的透析液，分别测定其中的1_羟基-亚 乙基-1，1- 二膦酸量。另外，在0和20小时处测定人造血浆中1-羟基-亚乙基-1，1- 二 膦酸的浓度。透析过程中，血浆或透析液中1-羟基-亚乙基-1，1-二膦酸的浓度都没有变化； 因此，在透析液中引入1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸防止了血液中该物质的损失。实施例6用ImM 1-羟基-亚乙基_1，1- 二膦酸制备人造血浆，用0. 15M NaCl调节离子强 度。将25ml该溶液对IL体积含有比血浆中浓度高5倍的1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸 的0. 15M NaCl溶液透析20小时。两种液体的pH都用碳酸氢盐缓冲液调节到7. 4。在时间0、1、3、6和20小时收集5ml等份的透析液，分别测定其中的1_羟基-亚 乙基-1，1- 二膦酸量。另外，在0和20小时处测定人造血浆中1-羟基-亚乙基-1，1- 二 膦酸的浓度。
结果如图4所示。可以观察到在透析过程中，透析液中最高达1.65%的1-羟 基-亚乙基-1，I"二膦酸进入了人造血浆；因此，考虑到最初体积和浓度的比例，人造血浆 中1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸浓度增加了 330%;从而可以通过将1-羟基-亚乙基-1， 1- 二膦酸引入透析液而提高1-羟基-亚乙基-1，1- 二膦酸的血浆水平。实施例7透析液组合物(用于血液透析和腹膜透析)，其中加入了肌醇磷酸盐和/或二膦酸
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权利要求
1.一种组合物，其特征在于，其含有结晶化抑制物质，所述物质选自肌醇磷酸盐，二 膦酸盐，其药学上可接受的盐，或其任意组合，其用手制备透析液。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述结晶化抑制物质是含有1-6个磷酸基 团的肌醇磷酸盐。
3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述肌醇磷酸盐是肌醇六磷酸盐。
4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述肌醇磷酸盐是内消旋肌醇六磷酸盐。
5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述二膦酸盐选自羟乙二膦酸、阿仑膦 酸、利塞膦酸、唑来膦酸、替鲁膦酸、帕米膦酸、氯膦酸、伊班膦酸、其盐或其任意组合。
6.如权利要求1-5任一所述的组合物，其特征在于，其还含有焦磷酸盐。
7.如权利要求1-6任一所述的组合物，其特征在于，所述结晶化抑制物质的浓度是 0.01 μ MMo. IMo
8.如权利要求7所述的组合物，其特征在于，所述结晶化抑制物质的浓度是0.1 μ M至 10mM。
9.如权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述结晶化抑制物质的浓度是0.1 μ M至5mM。
10.一种透析液，其特征在于，其含有结晶化抑制物质，所述物质选自肌醇磷酸盐，二 膦酸盐，其药学上可接受的盐，或其任意组合
11.如权利要求10所述的透析液的用途，其特征在于，用于血液透析或腹膜透析。
12.含有肌醇磷酸盐和/或其任意盐的组合物，所述组合物的形式适合静脉内给药，其 用于治疗或预防与所述物质在血浆中的生理充分水平失调有关的病理过程。
13.如权利要求12所述的组合物，其特征在于，所述肌醇磷酸盐含有1-6个磷酸基团。
14.如权利要求13所述的组合物，其特征在于，所述肌醇磷酸盐是肌醇六磷酸盐。
15.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述肌醇磷酸盐是内消旋肌醇六磷酸Τττ . ο
16.如权利要求12-15中任一项所述的组合物，其特征在于，所述肌醇磷酸盐和/或其 任意药学上可接受的盐的剂量是lnmol/kg至0. lmol/kg之间。
17.如权利要求12-16中任一项所述的组合物，其特征在于，其还含有焦磷酸盐。
18.如权利要求12-17中任一项所述的组合物，其特征在于，失调的治疗或预防是通过 维持或提高进行透析的人血浆中所述物质的水平进行的。
19.一种联合制剂，其特征在于，其含有至少一种组合物，所述组合物含有结晶化抑制 物质，选自肌醇磷酸盐、二膦酸盐，其药学上可接受的盐或其任意组合；一种透析液，所述 透析液在治疗或预防与进行透析的病人血浆中所述物质生理充分水平失调有关的病理过 程中单独、同时或依次使用。
20.如权利要求19所述的联合制剂，其特征在于，所述组合物的形式适合静脉内给药。
全文摘要
本发明涉及一种组合物，其含有肌醇磷酸盐和/或二膦酸盐，及其用于预防进行透析的病人体内生物重要性物质的损失、和维持所述物质足够生理水平以调节生理学和/或病理学过程的用途，这些物质是病理学结晶化的抑制剂。
文档编号A61K33/42GK102143754SQ200980135784
公开日2011年8月3日 申请日期2009年5月14日 优先权日2008年8月6日
发明者包萨 A·科斯塔, 埃斯皮诺萨 F·图尔, 弗里瑟达斯 F·格拉西斯, 穆尼斯 I·戈米勒, 贝斯塔德 J·佩列罗, 阿尔迈劳 R·M·普列托 申请人:巴利阿里群岛大学