用于治疗或预防心力衰竭的神经调节蛋白或其亚序列的治疗性施剂的制作方法

专利名称：用于治疗或预防心力衰竭的神经调节蛋白或其亚序列的治疗性施剂的制作方法
用于治疗或预防心力衰竭的神经调节蛋白或其亚序列的治
疗性施剂
技术领域：
发明领域涉及治疗心力衰竭。更特别是，本发明针对改善的剂量方案，其维持和/ 或增强施用神经调节蛋白(例如神经胶质生长因子2 (GGM)或其片段)的治疗性益处，而最小化任何潜在副作用。
背景技术：
与给有需要的患者施用药疗相关的根本性的挑战是耐受性与功效之间的关系。治疗指数是可施用于患者的物质的有效的剂量与检测到对患者的不期望的副作用的剂量之间的范围。一般而言，有效的剂量与副作用起始的剂量之间的差异越大，物质越是良性，及越可能被患者耐受。心力衰竭(特别是充血性心力衰竭(CHF))是工业化国家中死亡的主导原因之一。 成为充血性心力衰竭的基础的因素包括高血压，缺血性心脏病，暴露于心脏毒性化合物 (例如蒽环类抗生素)，辐射暴露，物理创伤及与增加的心力衰竭风险相关的遗传缺陷。由此，CHF常由由于高血压，来自慢性缺血，心肌梗塞，病毒疾病，化学毒性，辐射的对心肌的损伤及其他疾病(例如硬皮病)的对心脏的增加的工作负荷所致。这些病情导致心脏的抽泵能力的进行性降低。起初，由高血压或收缩性组织的损失所致的增加的工作负荷诱导补偿性心肌细胞肥大及左心室壁加厚，由此增强收缩性及维持心脏功能。经时，但是，左心室膨胀，心脏收缩泵功能恶化，心肌细胞经历凋亡性细胞死亡，及心肌功能进行性恶化。神经调节蛋白(NRGs)及NRG受体包括涉及神经，肌肉，上皮，及其他组织中器官发生及细胞发育的细胞间信号转导的生长因子-受体酪氨酸激酶系统(Lemke，Mol. Cell. Neurosci. 7 :247-262,1996 andBurden et al. , Neuron 18 :847_855，1997)。NRG 家族由编码含表皮生长因子(EGF)-样，免疫球蛋白(Ig)，及其他可识别结构域的多种配体的4 种基因构成。多种分泌的及附接膜的异构体在此信号转导系统中发挥配体的作用。人中 NRG配体的受体是EGF受体(EGFI )家族的全部成员，及分别包括EGFR (或ErbBl)，ErbB2， ErbB3，及ErbB4，也被称为 HERl HER4(Meyer et al. , Developmentl24 :3575-3586,1997 ； Orr-Urtreger et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA90 :1867-71,1993 ；Marchionni et al., Nature 362 :312-8,1993 ；Chen etal.，J.Comp. Neurol. 349 :389-400,1994 ；Corfas et al.，Neuron14 :103-115，1995 ；Meyer et al.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA91 :1064-1068， 1994 ；and Pinkas-Kramarski et al. ，0ncogeriel5 :2803_2815，1997)。4种NRG基因，NRG-I，NRG-2，NRG-3，及NRG-4，定位于不同染色体座位 (Pinkas-Kramarski et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA91 :9387-91,1994 ；Carraway et al.，Nature 387 :512-516,1997 ；Changet al.，Nature 387 :509-511，1997 ；and Zhang et al.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94 :9562-9567，1997)，及共同编码 NRG 蛋白的种种阵列。 NRG-I的基因产物，例如，包括一组大致15种不同的结构上-相关的异构体(Lemke，Mol. Cell. Neurosci. 7 :247-262,1996 and Peles andYarden, BioEssays 15 :815_824，1993)。首先鉴定的 NRG-I 的亚型包括 Neu 分化因子(NDF ;Peles et al.，Cell 69，205-216，1992 and Wen etal.，Cell 69，559-572，1992)，神经生长因子(HRG ；HoImes et al.，Science 256 :1205-1210,1992)，诱导活性的乙酰胆碱受体(ARIA ；Fallset al.，Cell 72 :801-815, 1993)，及神经胶质生长因子 GGF1，GGF2，及 GGF3(Marchionni et al. Nature 362:312-8， 1993)。NRG-2基因通过同源性克隆(Chang et al.，Nature 387 :509-512,1997 ；Carraway et al. , Nature 387 :512-516,1997 ；and Higashiyama etal. , J. Biochem. 122:675-680, 1997)及通过基因组方法(Busfield et al. , Mol. Cell. Biol. 17 :4007-4014,1997)鉴定。NRG-2cDNA也已知为神经-及胸腺-来源的ErbB激酶活化子(NTAK ；Genbank登录号 NO.AB005060)，神经调节蛋白趋异剂(Don-I)，及小脑-来源的生长因子(CDGF ；PCT申请 WO 97/09425)。实验证据显示，表达ErbB4或ErbB2/ErbB4组合的细胞可能显示针对NRG-2 的特别稳健的应答(Pinkas-Kramarski et al.，Mol. Cell. Biol. 18 :6090-6101,1998) NRG-3基因产物(Zhang等人，supra)也已知结合及活化ErbB4受体(Hijazi etal.，Int. J. Oncol. 13 :1061-1067,1998)。EGF-样结构域存在于全部形式的NRG的核心，及需要结合及活化ErbB受体。3种基因中编码的EGF-样结构域的推断的氨基酸序列大致是30 40%相同(比对)。而且， NRG-I及NRG-2中似乎有至少2种亚型的EGF-样结构域，其可赋予不同生物活性及组织-特异性潜力。对NRG的细胞应答通过表皮生长因子受体家族的NRG受体酪氨酸激酶EGFR， ErbB2, ErbB3,及ErbB4介导。全部NRG的高-亲和力结合主要经或者ErbB3或ErbB4介导。NRG配体的结合导致与其他ErbB亚基的二聚化及通过对特异性酪氨酸残基的磷酸化反式激活。在某些实验环境中，ErbB受体的几乎全部组合似乎能响应NRG-I异构体的结合形成二聚体。但是，看起来ErbB2是可在稳定配体-受体复合物中起重要的作用的优选的二聚化偶体。ErbB2不结合其自身上的配体，但必需与其他受体亚型之一异源配对。ErbB3确实具有酪氨酸激酶活性，但是其他受体的磷酸化的靶。NRG-1，ErbB2，及ErbB4的表达已知必要于小鼠发育期间心室心肌的小梁形成。神经调节蛋白刺激补偿性肥大性生长及抑制经历生理应激的心肌细胞的凋亡。 根据这些观察，神经调节蛋白的施用对于防止，最小化，或翻转由作为基础的因素(例如高血压，缺血性心脏病，及心脏毒性)所致的充血性心脏病有用。见，例如，美国专利号 (USPN) 6, 635，M9，将其整体并入本文。从一般人群中心力衰竭的高发病率来看，仍有未满足的对阻止或最小化此疾病进展(例如通过抑制心脏功能损失或通过改良心脏功能)的需求。发明概述本发明包括治疗或预防哺乳动物的心力衰竭的方法。方法基于惊人的发现，包括表皮生长因子-样(EGF-样)结构域的肽的治疗性益处可通过不维持稳定-状态的神经调节蛋白施用(例如通过用以或超过48，72，96或更多小时的施用间隔给哺乳动物施用治疗有效量的肽)的剂量方案实现。因此，本方法要求给哺乳动物含EGF-样结构域的肽的间歇的或不连续的施用(每48 96小时，或甚至更长间隔)，其中所述EGF-样结构域由神经调节蛋白基因编码，及其中肽的施用是以对于治疗或预防哺乳动物的心力衰竭有效的量。不维持稳定-状态浓度的神经调节蛋白施用的剂量方案与更频繁的剂量方案同样有效，然而无可产生自更频繁的施用的不便，成本或副作用。本文所用的术语，间歇的或不连续的施用包括以至少48小时，72小时，96小时，1天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天， 11天，12天，13天，14天、1周，2周，4周，1个月，2个月，3个月，4个月，或其任何组合或增量的间隔的施剂方案，只要间隔/方案至少为48小时，72小时，96小时，1天，2天，3天，4 天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天，14天、1周，2周，4周，1个月，2个月， 3个月，4个月。本文所用的术语间歇的或不连续的施用包括以不小于48小时，72小时，96 小时，1天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天，14天、1周， 2周，4周，1个月，2个月，3个月，4个月，或其任何组合或增量的间隔的施剂方案，只要间隔 /方案不小于48小时，72小时，96小时，1天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10 天，11天，12天，13天，14天、1周，2周，4周，1个月，2个月，3个月，4个月。根据本发明，给哺乳动物的含EGF-样结构域的肽的间歇的或不连续的施用(其中所述EGF-样结构域由神经调节蛋白基因编码)针对达到不维持施用的肽的窄稳定-状态浓度的剂量方案，由此降低哺乳动物将经历可产生自经延长的持续时间维持施用的肽的生理学以上水平的不利的副作用的概率。例如，与外源地施用的NRG的生理学以上水平相关的副作用包括神经鞘增生，乳腺增生，肾病，精子减少症，肝脏酶升高，心脏瓣膜变化及注射位点的皮肤变化。在优选实施方式中，本发明针对引起或允许包括由神经调节蛋白基因编码的 EGF-样结构域的肽的血清水平波动的间歇的剂量方案，从而降低与更频繁的肽施用相关的不利的副作用的潜力。本发明的间歇的剂量方案由此赋予给哺乳动物的治疗性优势，但不维持稳定状态治疗性水平的包括由神经调节蛋白基因编码的EGF-样结构域的肽。如被本领域普通技术人员同意，有本发明的各种实施方式来获得间歇的施剂；这些实施方式的益处可以各种方式陈述，例如，所述施用不维持稳定状态治疗性水平的所述肽，施用降低与更频繁地施用NRG肽相关的不利的副作用的潜力，等。在本发明的特定实施方式中，神经调节蛋白可为包含NRG-1，NRG-2, NRG-3或 NRG-4，或者基本上由其构成或由其构成的基因，基因产物或其相应亚序列或片段。在优选实施方式中，本发明的NRG亚序列或片段包括表皮生长因子-样(EGF-样)结构域或其同系物。如被本领域普通技术人员同意，与EGF-样结构域肽的肽同系物通过找结构同源性或如EGF-样肽在功能测定中一样由同系物肽进行(例如通过结合及活化ErbB受体)来测定。 优选片段至少为 40，41，42，43，44，45，46，47，48，49，50，51，52，53，54，55，56，57，58，59，60， 61，62，63，64，65，66，67，68，69，70，71，72，73，74，75，76，77，78，79，80，81，82，83，84，85 个氨基酸长。本发明的神经调节蛋白肽可，进而，由这些神经调节蛋白基因(或其亚序列)任之一编码。在更特定的实施方式中，方法中使用的肽是重组人GGF2或其片段或亚序列。见图8A 8D的全长人GGF2的氨基酸及核酸序列。在本发明的一个方面，适宜哺乳动物包括但不限于，小鼠，大鼠，兔，狗，猴或猪。在本发明的一个实施方式中，哺乳动物是人。在本发明的其他实施方式中，心力衰竭可产生自高血压，缺血性心脏病，暴露于心脏毒性化合物(例如，可卡因，醇，抗_ErbB2抗体或抗-HER抗体，例如赫赛汀 ,或蒽环类抗生素，例如多柔比星或道诺霉素)，心肌炎，甲状腺疾病，病毒感染，牙龈炎，药物滥用，精滥用，心包炎，动脉粥样硬化，血管疾病，肥大性心肌病，急性心肌梗塞或之前心肌梗塞， 左心室心脏收缩功能障碍，冠状动脉分流手术，饥饿，辐射暴露，进食障碍，或遗传缺陷。在本发明的另一实施方式中，在蒽环类抗生素施用之前，期间，或后，将抗_ErbB2 或抗-HER2抗体，例如赫赛汀 ,施用于哺乳动物。在本发明的其他实施方式中，在暴露于心脏毒性化合物之前，暴露于所述心脏毒性化合物期间，或暴露于所述心脏毒性化合物后施用肽；诊断所述哺乳动物的充血性心力衰竭之前或后施用肽。本发明的方法可在受试者哺乳动物已经历补偿性心脏肥大后进行； 本发明的方法包括，方法的结果旨在维持左心室肥大或阻止心肌疏伐进展，或抑制心肌细胞凋亡。在本发明的方法中，肽可包括由神经调节蛋白基因编码的EGF-样结构域，或者基本上由其构成，或由其构成。本发明的肽在暴露于心脏毒性化合物之前，期间，或后施用。在另一实施方式中，含EGF-样结构域的肽在这些时期中的2个，或全部3个期间施用。根据本发明，由神经调节蛋白基因编码的含EGF-样结构域的肽以每48 96小时的间隔施用。 在本发明的一个实施方式中，由神经调节蛋白基因编码的含EGF-样结构域的肽是GGF2。在本发明的再一实施方式中，在诊断哺乳动物的充血性心力衰竭之前或后施用肽。在本发明的又一实施方式中，将肽施用于已经历补偿性心脏肥大的哺乳动物。在本发明的其他特定实施方式中，肽的施用维持左心室肥大，阻止心肌疏伐进展，和/或抑制心肌细胞凋亡。本发明的实施方式包括以下用于治疗哺乳动物的心力衰竭的方法，所述方法包括给所述哺乳动物外源施用包括表皮生长因子-样(EGF-样)结构域的肽，其中所述以所述间隔的施用降低所述哺乳动物中与所述外源肽的施用相关的不利的副作用。用于治疗哺乳动物的心力衰竭的方法，所述方法包括给所述哺乳动物外源施用包括表皮生长因子-样 (EGF-样)结构域的肽，其中所述EGF-样结构域由神经调节蛋白(NRG)-I基因编码，及所述外源肽以对治疗所述哺乳动物的心力衰竭的治疗有效量、以至少48小时的间隔施用，其中所述以所述间隔的施用不在所述哺乳动物中维持稳定状态水平的所述外源肽。用于治疗哺乳动物的心力衰竭的方法，所述方法包括给所述哺乳动物外源施用包括表皮生长因子-样 (EGF-样)结构域的肽或其同系物，及所述外源肽以对治疗所述哺乳动物的心力衰竭的治疗有效量、以至少或不小于48小时的间隔施用，其中所述以所述间隔的施用允许所述哺乳动物中所述外源肽相对基线或施用前水平的血清浓度的剂量内波动。本文中的术语不利的或有害的副作用指医学治疗的非故意的及不期望的结果。关于本发明，由外源肽的施用所致的不利的或有害的副作用可包括以下任何一种或多种神经鞘增生，乳腺增生，肾病，及注射位点的皮肤变化。本文中的术语“所述哺乳动物中所述外源肽相对施用前水平的血清浓度的剂量内波动”指一剂量的外源肽施用之前的血清浓度水平之间的差异。本文中的术语“稳定状态水平”指足以实现施用及消除之间的平衡(在随后的剂量之间的波动范围内的)的外源试剂(例如，肽)的水平。“维持稳定状态治疗性水平”指将外源试剂浓度维持在足以给受试者或患者赋予治疗性益处的水平。

图1显示描绘如由射血分数及缩短分数变化例示的心脏功能的直方图。如所示， 大鼠用0. 625mg/kg的GGF2或等摩尔量的EGF-样片段(片段；EGF_id)每天(q天)静脉内(iv)处理。图2显示描绘如由射血分数及缩短分数的变化显示的心脏功能的线坐标图。如所示，大鼠用0. 625mg/kg或3. 25mg/kg的GGF2静脉内处理q天。图3显示描绘如由处理时期期间收缩末期容量的显著的改善显示的心脏功能的线坐标图。如所示，大鼠用0. 625mg/kg或3. 25mg/kg的GGF2静脉内处理q天。图4显示描绘如由射血分数及缩短分数变化显示的心脏功能的线坐标图。如所示，大鼠用3. 25mg/kg的GGF2静脉内(iv)处理q24，48或96小时。图5显示描绘如由超声波心动图射血分数的变化显示的心脏功能的线坐标图。如所示，大鼠用媒质或3.25mg/kg的GGF2(有或无BSA)静脉内(iv)处理。图6显示描绘静脉内施用后重组人GGF2 (rhGGF2)的半衰期的线坐标图。图7显示描绘皮下施用后重组人GGF2 (rhGGF2)的半衰期的线坐标图。 图8A D显示全长GGF2的核酸及氨基酸序列。核酸序列指定SEQ ID NO 1及氨基酸序列指定SEQ ID NO :2ο图9显示表皮生长因子-样(EGFL)结构域1的核酸及氨基酸序列。EGFL结构域 1的核酸序列在本文中指定SEQ ID NO 3及EGFL结构域1的氨基酸序列在本文中指定SEQ ID NO :4。图10显示表皮生长因子-样(EGFL)结构域2的核酸及氨基酸序列。EGFL结构域2的核酸序列在本文中指定SEQ ID NO 5及EGFL结构域2的氨基酸序列在本文中指定 SEQ ID NO:6。图11显示表皮生长因子-样(EGFL)结构域3的核酸及氨基酸序列。EGFL结构域3的核酸序列在本文中指定SEQ ID NO 7及EGFL结构域3的氨基酸序列在本文中指定 SEQ ID NO:8。图12显示表皮生长因子-样(EGFL)结构域4的核酸及氨基酸序列。EGFL结构域4的核酸序列在本文中指定SEQ ID NO 9及EGFL结构域4的氨基酸序列在本文中指定 SEQ ID NO :10。图13显示表皮生长因子-样(EGFL)结构域5的核酸及氨基酸序列。EGFL结构域5的核酸序列在本文中指定SEQ ID NO :11及EGFL结构域5的氨基酸序列在本文中指定 SEQ ID NO :12ο图14显示表皮生长因子-样(EGFL)结构域6的核酸及氨基酸序列。EGFL结构域6的核酸序列在本文中指定SEQ ID NO 13及EGFL结构域6的氨基酸序列在本文中指定 SEQ ID NO :14。图15显示包括表皮生长因子-样(EGFL)结构域的多肽的氨基酸序列，其在本文中指定 SEQ ID NO :21ο发明详述本发明人作出惊人的发现，以适当间隔的时间间隔的不连续的或间歇的神经调节蛋白施用将治疗有效量的神经调节蛋白递送给有需要的患者及所述治疗方案对于防止，预防，改善，最小化，治疗或逆转心脏病，例如充血性心力衰竭有用。尽管常规智慧及开发实践涉及设计剂量方案，以维持稳定状态浓度的最窄范围， 本发明人在本文中展示，不维持窄稳定-状态浓度的用于神经调节蛋白施用的剂量方案与更频繁的剂量方案同样有效。的确，本发明人显示，神经调节蛋白以至少48小时，72小时， 96小时，1天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天，14天，1 周，2周，4周，1个月，2个月，3个月，4个月，或其任何组合或增量的施剂间隔治疗心力衰竭，只要间隔/方案至少为48小时与每天施剂同样有效。为了评估外源NRG的药代动力学，本发明人显示，作为神经调节蛋白的半衰期，当静脉内递送时是4 8小时，及当经皮下递送时是11 15小时。见，例如，表1和2及图 6和7。以稀少如每第四天的方案的施剂将，因此，在剂量之间不维持任何可检测的水平至少3天。基于这些发现，本发明之前，将无法预测到所述峰/谷比例将与一致的治疗性益处相关。值得注意的是，有此量级的半衰期的化合物通常根据频繁的剂量方案施用(例如，每天一剂量或每天多个剂量)。的确，基于就GGF2可用的药物代谢动力学数据，传统开发将预测，最佳治疗将涉及每天皮下施剂。遵循常规智慧及开发实践中，其他对CHF的医学治疗一般以至少每天基础施用。 所述方案的周期性被认为需要，因为CHF是通常由心脏的损伤的收缩和/或松弛所致的慢性疾病，而非急性病情。在导致损伤的松弛及CHF的弱心脏的人中，医学治疗包括阻断特异性神经激素的形成或作用的药物(例如血管紧张素转变酶抑制剂(ACE-抑制剂)，血管紧张素受体拮抗剂(ARBs)，醛留酮拮抗剂及肾上腺素能药物受体阻断剂)。这些及其他药疗现在是慢性CHF中的护理标准，因为它们已展示导致改善的症状，生命期望和/或减少住院治疗。在急性恶化或慢性症状的情况中，患者常用变力性剂(例如多巴酚丁胺，地高辛) 处理以增强心脏收缩性，伴随血管扩张剂(例如硝酸酯，奈西立肽)和/或利尿药(例如呋塞米)以减少淤血。患高血压及充血性心力衰竭的患者用一或多种抗高血压药试剂(例如 β-阻断剂，ACE-抑制剂及ARBs，硝酸酯(硝酸异山梨酯)，胼屈嗪，及钙通道阻断剂)处理。由此，尽管关于治疗CHF的典型的实践，本发明人已展示，新剂量方案导致有效治疗CHF，而避免不期望的副作用。尽管不愿意被理论束缚，可能是，所述神经调节蛋白处理通过刺激心肌细胞肥大，及通过抑制心肌细胞凋亡部分或完全抑制心脏的进一步劣化来加强心脏的抽泵能力。作为额外的背景，施剂的基本原理旨在测定有效循环浓度及设计剂量方案来维持那些水平。合并药物代谢动力学(PK)及药效学(PD)研究来预测将维持稳定-状态水平的特定药物的剂量方案。典型的计划旨在最小化Cmax及Cmin之间的差异，由此减少副作用。药物被它们的‘治疗指数’描述，其为毒性剂量或循环水平除以有效剂量或循环浓度的比。当治疗指数大时，有可不接近毒性水平而给予有效剂量的宽安全性范围。当以太接近于有效浓度的浓度得到不利的效应时，治疗指数描述为窄，及药物难以安全施用。当开发剂量方案时，将PK/PD数据与治疗指数的知识组合来设计施用的剂量及频度以至将患者(例如，人)中的化合物维持在一定浓度，以至其为有效浓度以上及毒性浓度以下。如果不诱导不安全的效应不可维持药物的有效浓度，药物将在开发期间失败。涉及药物开发的额外的注释可见于各种参考文献，包括药物开发中的药代动力学临床研究设计及分析0004，Peter Bonate及Danny Howard，eds。)，将其整体并入本文。神经调节蛋白是与结合erbB受体的表皮生长因子相关的生长因子。它们已显示提高心力衰竭，心脏毒性及缺血的多个模型中的心脏功能。它们也已显示保护中风，脊髓伤害，神经试剂暴露，外周神经损伤及化学毒性的模型中的神经系统。但是，维持超常水平的外源地供给的神经调节蛋白已显示具有不利的效应，包括神经鞘增生，乳腺增生及肾病。每天皮下施用神经调节蛋白后观察这些效应。见，例如，表 10。如本文所述，由于相比静脉内施用延长的半衰期而探究皮下施用，及初始信念。维持恒定水平的配体将有利。开发剂量方案以降低这些效应将显著增强将用作治疗剂的神经调节蛋白的能力，及本发明也针对此。展示不维持恒定水平的欠频繁的施剂也能使此开发有效。神经调节蛋白如上所述，由NRG-I，NRG-2, NRG-3及NRG-4基因编码的肽具有使它们结合及活化ErbB受体的EGF-样结构域。Holmes等人(Science 256 :1205 1210， 1992)显示，EGF-样结构域单独足以结合及活化pi邪erbB2受体。因此，由NRG-1，NRG-2, 或NRG-3基因编码的任何肽产物，或任何神经调节蛋白-样肽，例如，具有由神经调节蛋白基因或cDNA编码的EGF-样结构域的肽(例如，含NRG-I肽亚结构域C-C/D或C-C/D'的 EGF-样结构域，如 USPN5, 530，109，USPN 5，716，930 及 USPN 7，037，888 中所述；或如公开于TO 97/09425的EGF-样结构域)可用于本发明的方法来预防或治疗充血性心力衰竭。将各 USPN 5，530，109 ；USPN 5，716，930 ；USPN7, 037，888 ；及 WO 97/09425 的内容均整体并入本文。危险因素熟知增加个体的发展充血性心力衰竭的似然性的危险因素。这些包括，及不限于，吸烟，肥胖症，高血压，缺血性心脏病，血管疾病，冠状动脉分流手术，心肌梗塞，左心室心脏收缩功能障碍，暴露于心脏毒性化合物(醇，药物(例如可卡因)，及蒽环类抗生素(例如多柔比星，及柔红霉素))，病毒感染，心包炎，心肌炎，牙龈炎，甲状腺疾病，辐射暴露，已知增加心力衰竭的风险的遗传缺陷(例如Bachinski and Roberts, Cardiol. Clin. 16 :603-610,1998 ；Siu etal.，Circulation 8 1022—1026，1999 ；and Arbustini et al.，Heart80 :548-558,1998中所述)，饥饿，进食障碍(例如厌食症及贪食症)，心力衰竭的家族历史，及心肌肥大。根据本发明，可间歇性地施用神经调节蛋白，以实现预防，例如通过防止或降低那些鉴定为濒临危险者中的充血性心脏病进展速度。例如，给患早期补偿性肥大的患者施用神经调节蛋白允许维持肥大性状态及阻止进展到心力衰竭。此外，可在发展补偿性肥大之前给予那些鉴定为濒临危险者心脏保护性神经调节蛋白治疗。在蒽环类抗生素化学治疗或蒽环类抗生素/抗_ErbB2(抗-HEM)抗体(例如， 赫赛汀 )联合治疗之前及期间给癌患者施用神经调节蛋白可阻止患者的心肌细胞经历凋亡，由此保存心脏功能。已患心肌细胞损失的患者也受益于神经调节蛋白治疗，因为其余心肌组织通过展示肥大性生长及增加的收缩性响应神经调节蛋白暴露。治疗可将神经调节蛋白及含由神经调节蛋白基因编码的EGF-样结构域的肽及药学-可接受的稀释剂，载质，或赋形剂施用于患者或实验动物。本发明的组合物可以单元剂型提供。采用常规药学实践来提供适宜制剂或组合物，及将所述组合物施用给患者或实验动物。尽管优选静脉内施用，可采用任何适当的施用途径，例如，肠胃外，皮下，肌内，经皮， 心内，腹膜内，鼻内，气雾剂，口服，或局部(例如，通过施加带能交叉真皮及进入血流的制剂的粘合贴剂)施用。治疗性制剂可取液体溶液或悬浮液形式；对于口服施用，制剂可取片剂或胶囊形式；及对于鼻内制剂，以粉末，鼻滴液，或气雾剂的形式。本领域中熟知的制备制剂的方法见于，例如，“Remington' sPharmaceutical Sciences"。用于肠胃外施用的制剂可，例如，含赋形剂，无菌水，或盐水，聚烯基甘醇，例如聚乙二醇，蔬菜来源的油，或氢化萘。用于施用本发明的分子的其他潜在地有用的肠胃外递送系统包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物粒子，渗透泵，可植入的输注系统，及脂质体。用于吸入的制剂可含赋形剂，例如，乳糖，或可为含，例如，聚氧乙烯-9-月桂醚，甘胆酸盐及脱氧胆酸盐的水溶液，或可为以鼻滴液，或作为凝胶的形式施用的油性溶液。作为本发明的其他方面，提供了将本化合物用作药学，尤其是在治疗或预防前述病情及疾病。本文也提供的是本化合物在制备用于治疗或预防前述病情及疾病之一的药物中的用途。关于静脉内注射，剂量水平变动于约0. 001mg/kg,0. 01mg/kg 至少10mg/kg，以如本文所述从至少约每M，36，48小时 约每96小时及尤其是每48，72，或96小时或以上的规则的时间间隔。在特定实施方式中，静脉内注射剂量水平变动于约0. lmg/kg 约 10mg/kg,以如本文所述从约每48小时 约每96小时及尤其是每48，72，或96小时或以上的规则的时间间隔。在另一特定实施方式中，静脉内注射剂量水平变动于约lmg/kg 约 10mg/kg,以如本文所述从约每48小时 约每96小时及尤其是每48，72，或96小时或以上的规则的时间间隔。在再一特定实施方式中，静脉内注射剂量水平变动于约0. 0lmg/kg 约lmg/kg，以如本文所述从约每48小时 约每96小时及尤其是每48，72，或96小时或以上的规则的时间间隔。在再一特定实施方式中，静脉内注射剂量水平变动于约0. lmg/kg 约lmg/kg，以如本文所述从约每48小时 约每96小时及尤其是每48，72，或96小时或以上的规则的时间间隔。关于皮下注射，剂量水平变动于约0. 0lmg/kg 至少10mg/kg，以如本文所述从约每48小时 约每96小时及尤其是每48，72，或96小时或以上的规则的时间间隔。在特定实施方式中，注射剂量水平变动于约0. lmg/kg 约10mg/kg，以如本文所述从约每48小时 约每96小时或以上的规则的时间间隔，及尤其是每48，72，或96小时。在另一特定实施方式中，注射剂量水平变动于约lmg/kg 约10mg/kg，以如本文所述从约每48小时 约每96 小时或以上的规则的时间间隔，及尤其是每48，72，或96小时。在再一特定实施方式中，注射剂量水平变动于约0. 0lmg/kg 约lmg/kg，以如本文所述从约每48小时 约每96小时或以上的规则的时间间隔，及尤其是每48，72，或96小时。在再一特定实施方式中，注射剂量水平变动于约0. lmg/kg 约lmg/kg，以如本文所述从约每48小时 约每96小时或以上的规则的时间间隔，及尤其是每48，72，或96小时。通常选择经皮剂量以提供相比使用注射剂量实现的类似或更低血水平。本发明的化合物可作为单独的活性剂施用，或它们可与其他试剂组合施用，包括展示相同或类似治疗性活性及对于所述组合的施用测定为安全的及有效的其他化合物。 其他用于治疗CHF的所述化合物包括脑促尿钠排泄肽(BNP)，阻断特异性神经激素的形成或作用的药物(例如血管紧张素转变酶抑制剂(ACE-抑制剂)，血管紧张素受体拮抗剂 (ARBs)，醛留酮拮抗剂及β -肾上腺素能药物受体阻断剂)，增强心脏收缩性的变力性剂(例如多巴酚丁胺，地高辛)，减少淤血的血管扩张剂(例如硝酸酯，奈西立肽)和/或利尿药(例如呋塞米)，及一或多种抗高血压药试剂(例如β-阻断剂，ACE-抑制剂及ARBs)， 硝酸酯(硝酸异山梨酯)，胼屈嗪，及钙通道阻断剂。如上所述，医学干扰涉及药物治疗要求选择适当的药物及其以足够的剂量方案递送。足够的剂量方案涉及治疗的足够的剂量，途径，频度，及持续时间。药物治疗的根本目标是在作用位点获取最佳药物浓度，以致使经治疗的患者克服使需要治疗的病理学过程。广义地说，药物处置的原理的基础知识辅助适当的剂量方案的选择。但是，可在这里使用治疗性药物监控(TDM)作为辅助主治医师确定用于个体患者的医学治疗的选定的药物的有效及安全的剂量方案的补充性工具。靶浓度及治疗性窗最佳药物浓度的定义变化取决于特定药物的药效学特征。用于时间-依赖性抗生素(如青霉素)的最佳治疗，例如，与达到2 4的峰浓度和MIC(最小抑制性浓度)的比例及等于75%的剂量间隔的MIC以上的时间相关。浓度-依赖性抗生素(如庆大霉素)，例如，功效与获得约8 10的峰浓度和MIC比例相关。与特定药物的施用相关的细微差别无关地，药物治疗旨在在已于之前基于靶物种中药物的药物代谢动力学，药效学及毒性特征测定的“治疗性窗”的限制内达到靶血浆浓度(其常反映作用位点的浓度)。此窗的宽度就不同药物及物种而变化。当最小有效的浓度和最小毒性浓度之间的差异小0 4倍)时，治疗性窗被称为窄。相反，当有效和毒性浓度之间有大的差异时，药物视为具有宽治疗性窗。有窄治疗性窗的药物之一例为地高辛，其中平均有效和毒性浓度之间的差异为2或3倍。另一方面，阿莫西林具有宽治疗性范围，及患者的过量施剂通常不与毒性问题相关。药物应答中的存活力有相应药物应答的相同物种的健康受试者中的显著的存活力是共同的。而且，疾病状态具有影响器官系统及功能(例如，肾，肝脏，含水量)(可进而影响药物应答)的潜力。进而，此贡献于施用药物的患病个体中药物应答的增加的差异。然而另一相关问题涉及以其导致可导致对一或两种药物应答的改变的药物代谢动力学相互作用的时间施用多于一种药物。总之，生理(例如，年龄)，病理(例如，疾病效应)，及药理学(例如，药物相互作用)因素可改变动物中的药物处置。随其发生的个体中增加的存活力可导致有窄治疗指数的药物的治疗性失败或毒性。将受益于本发明的治疗方案的患者群相当地多样，例如，患损伤的肾功能的患者是良好的候选，因为连续的水平的蛋白治疗剂常相关于肾血管球沉着物。因此，如描述于本发明的不维持恒定血浆水平的治疗性方案的实用性将对于患既有的功能的任何减少可有害的缓和的肾功能的患者非常有益。类似地，如本文所述短暂的及间歇的暴露于治疗剂 (例如GG^)可有益于患响应用生长因子的慢性及连续的刺激的肿瘤类型的患者。其他可特异性地受益于如本文所述的间歇的治疗的患者是患许旺细胞瘤及其他外周神经病的患者。这是本发明的优势，即间歇的施剂可在不维持各组织的连续的副作用-相关的刺激中具有显著的优点。以确定血清药物水平，以及报告的水平的解释的目的采血的恰当的时机要求考虑药物测量的药代动力学性质。将这些性质的讨论中使用的一些术语在以下段落定义。半衰期间隔开始时存在的血清浓度降低50%需要的时间。知晓近似的半衰期必要于临床医师，由于其决定口服试剂的最佳施剂日程表，血清浓度的剂量内波动，及需要于达到稳定状态的时间。简言之，已对GGF2进行多个药物代谢动力学研究。GGF2的典型的半衰期就静脉内 (iv)途径，在4和8小时之间，然而经皮下(皮下)施用的GGF2的半衰期在11和15小时之间。Cmax，AUC，Tmax及T1/2显示于以下表1和2。当半衰期对于通过这些方法精确测定过长时，分几次代替一次。表1及表2附录7单个静脉内或皮下剂量的125I_rhGGF2后雄性Sprague-Dawley大鼠血浆中 125I-rhGGF2-来源的放射性的平均药代动力学
权利要求
1.治疗或预防哺乳动物心力衰竭的方法，所述方法包括 提供包括表皮生长因子-样(EGF-样)结构域的肽；以至少48小时的间隔给哺乳动物施用治疗有效量的所述肽，其中所述治疗有效量对于治疗或预防所述哺乳动物的心力衰竭有效。
2.权利要求1的方法，其中所述施用每48小时进行。
3.权利要求1的方法，其中所述施用每96小时进行。
4.权利要求1的方法，其中所述施用以选自下列的方案进行每4天，每周，每10天， 每14天，每个月，每2个月，每3个月或每4个月。
5.权利要求1的方法，其中所述哺乳动物是人。
6.权利要求1的方法，其中所述肽是重组人GGF2。
7.权利要求的方法，其中所述肽是SHLVKCAEKEKTFCVNGGECFMVKDLSNPSRYLCKCPNEFTGDRCQNYVMASFYKAEELYQ。
8.权利要求的方法，其中所述肽是SHLVKCAEKEKTFCVNGGECFMVKDLSNPSRYLCKCPNEFTGDRCQNYVMASFYKAEELY。
9.权利要求1的方法，其中所述肽由神经调节蛋白(NRG)-I基因，神经调节蛋白 (NRG)-2基因，神经调节蛋白(NRG)-3基因，或神经调节蛋白(NRG)-4基因编码。
全文摘要
本发明涉及治疗哺乳动物的心力衰竭。因此，本发明针对建立剂量方案，其维持和/或增强通过施用神经调节蛋白(例如神经胶质生长因子2(GGF2)或其亚序列)赋予的治疗性益处，而伴随地最小化任何潜在副作用。
文档编号A61P9/00GK102159236SQ200980136079
公开日2011年8月17日 申请日期2009年7月17日 优先权日2008年7月17日
发明者A·卡加诺, A·甘谷利, J·艾希, T·帕利 申请人:阿索尔达治疗公司