用于治疗进行性多发性硬化的方法

专利名称：用于治疗进行性多发性硬化的方法
技术领域：
本发明涉及用于治疗患者中的进行性多发性硬化(MQ的方法，以及附有所述应用之说明书的产品。
背景技术：
多发性硬化多发性硬化(MS)是人中枢神经系统(CNS)的炎性脱髓鞘性变性疾病。它是一种世界范围的疾病，在美国影响约300，000名患者；它是年轻成人的疾病，70% -80%在20至40 岁之间发病(Anderson 等人，Ann Neurology31 (3) :333-6(1992) ；Noonan 等人，Neurology 58 :136-8(2002)) 0基于临床病程、磁共振成像(MRI)扫描评估以及活检和尸检材料的病理学分析，MS是一种异质性病变(Lucchinetti等人，Ann Neurol 47 :707-17 (2000))。该疾病自身表现为众多可能的缺陷组合，包括脊髓、脑干、颅神经、小脑、大脑和认知综合征。进行性残疾是大多数MS患者的命运，尤其是在包括25年的预后时。一半MS患者在发病后的15 年内行走需要拐杖。MS是年轻和中年成人中神经性残疾的主要原因，直至过去十年，仍未有已知的有效治疗方法。由于临床表现的非特异性，MS难以诊断，这导致开发了高度结构化诊断标准，包括数种技术进步——MRI扫描、诱发电位和脑脊液(CSF)研究。所有诊断标准依赖于分散性损伤在中心白质内在不同时间出现的一般原则，而不是从例如感染、血管疾患或自身免疫性疾患等其它病因学来解释(McDonald等人，Ann. Neurol. 50 121-7 (2001)) 0 MS有四种疾病样式复发缓和型MS(RRMS ；发病案例的80% -85% )、原发进行性MS(PPMS ； 发病案例的10% -15% )、进行性复发型MS(PRMS;发病案例的5% )；以及继发进行性 MS (SPMS) (Kremenchutzky 等人，脑 122 (PtlO) :1941-50(1999) ；Confavreux 等人，N Engl J Med 343(20) 1430-8 (2000)) 估计50%的RRMS患者将在10年内发展成SPMS，而高达 90% 的 RRMS 患者最终将发展成 SPMS (Weinshenker 等人，脑 112 (Ptl) 133-46 (1989))。目前，四类六种药物在美国批准用于治疗RRMS，而没有药物批准用于PPMS。RRMS治疗包括以下药物干扰素类，IFN-β-la( REBIF 和 AVONEX )和 IFN-e-lb (BETASERON );醋酸格拉默(Glatiramer acetate) (COPAXONE ), —种多肽；那他珠单抗(TYSABRI );以及米托蒽醌 (NOVANTRONE )，一种细胞毒性齐U。其它药物也已有不同程度的成功应用，包括皮质类固醇、甲氨喋呤、环磷酰胺、硫唑嘌呤和静脉内(IV)免疫球蛋白。正如两个统合分析 (meta-analyses)所显示的，目前已批准的治疗方法对于RRMS的复发率以及防止致残的益处是相对有限的(约 30% ) (Filippini 等人，Lancet 361:545-52(2003))。其它临床研究评价了 MS中的其它免疫调节剂，包括肿瘤坏死因子-α抑制剂和改变的肽配体，它们使MS加重而不是改善(Lenerc^pt Multiple Sclerosis Study Group and the University of British Columbia MS/MRI Neurology 53 :457-65(1999)； Bielekova 等人，Nat Med 2000 ;6 :1167-75 (2000)，勘误见 Nat Med 6:1412(2000))。MS病理生理学的主流观点认为炎症主要是由⑶4+Th IT细胞介导的。基于此理论的治疗方法，例如IFN-β和醋酸格拉默降低但未完全阻止恶化的发生或伤残的累积。正如在MS诊断标准中包括CSF寡克隆带(CSF oligoclonal bands)以及鞘内 IgG合成增加所反映出的，人MS中体液组分的存在已未言明地被公认了数十年(Siden A. J Neurol 221:39-51 (1979) ；McDonald 等人，AnnNeurol 50 :121-7(2001) ；Andersson 等人， Eur J Neurol 9:243-51(2002) ；0' Connor, P. Neurology 59 :Sl-33 (2002)) 寡克隆带的存在、游离轻链的增加以及鞘内IgM合成的增加与MS疾病活动相关，并且可以作为更严重后果的预示(Rudick 等人，Mult Scler 1 :150-5(1995) ；Zeman 等人，Acta Cytol45 51-9(2001) ；Izquierdo 等人，Acta Neurol Scand 105:158-63(2002) ；Wolinsky J.J Neurol Sci 206:145-52(2003) ；Villar 等人，Ann Neurol53 :222-6 (2003)) 已在进行性和复发型MS患者的血清中检测到抗髓鞘抗体(髓鞘碱性蛋白(MBP) 和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG) (Reindl等人，脑122 =2047-56(1999) ；Egg等人，Mult Scler 7(5) 285-9 (2001)) 0在MS患者的CSF中也检测到抗髓鞘抗体(Reindl等人， Brain 122:2047-56(1999) ；Egg 等人，Mult Scler 7(5) :285-9(2001) ；Andersson 等人， Eur J Neurol9 :243-51 (2002))。在MS患者中还观察到别的抗体类型，例如抗神经节苷脂抗体或抗神经丝抗体(Mata 等人，Mult Scler 5:379-88(1999) ；Sadatipour 等人，Ann Neurol 44:980-3(1998))。一份报告表明，血清抗MOG和抗MBP抗体的存在是从临床上孤立的脱髓鞘事件进展到明确的RRMS的强预示信号(Berger等人，N Engl J Med 349 139-45 (2003) ) 0对于病情恶化的发生，校准后的危险比对于两种抗体都呈血清阳性的患者而言是76. 5，而对于只是抗MOG抗体血清阳性的患者而言是31. 6。国际病理学协会发现结合髓鞘的抗体存在于大多数MS患者中，此外在MS损伤中还发现了浆细胞和B细胞，这为体液在MS中的作用提供了另外的证据(Prineas *feight， Lab Invest 38 :409-21(1978) ；Esiri Μ. Neuropathol Appl Neurobiol 6 :9-21(1980)； Genain 等人，Nat Med5 :170-5 (1999) ；Lucchinetti 等人，Ann Neurol 47:707-17(2000)； Wingerchuk等人，Lab Invest 81 :263-81 (2001) )。B细胞在MS患者的CSF中也是可检测到的，而存在相对高比例的B细胞可能预示着更严重的致残进程(Cepok等人，脑124(Pt 11) 2169-76(2001))ο在患RRMS或斜视眼阵挛-肌阵挛综合征的受试者中，据报道利妥昔单抗耗竭所有受试者中的外周B细胞，并降低了有些患者中的CSF B细胞数目(ft^nzatelli等 A, Neurology 60 (Suppll) P05. 128 :A395 (2003) ；Cross φ A, "Preliminary Results from a Phase II Trial of Rituximab in MS，，(摘要)Eighth Annual Meeting of the Americas Committees for Research and Treatment in Multiple Sclerosis ACTRIMS 20-1 (October, 2003) ；Cross 等人，J. Neuroimmunol. 180 :63-70 (2006)) 还参见 Cree 等人,‘‘Tolerability and E ffects of Rituximab‘‘Anti_CD20Antibody，，in Neuromyelitis Optica and Rapidly Worsening Multiple Sclerosis'leeting of the Am. Acad. Neurol. (2004 年 4 月)；Cree 等人，Neurology 64 1270-2 (2005)。
⑶20抗体及使用它的疗法淋巴细胞是在造血过程中在骨髓中生成的多种白细胞类型之一。有两种主要的淋巴细胞群B淋巴细胞(B细胞)和T淋巴细胞(T细胞)。在此特别有意义的淋巴细胞是B 细胞。B细胞在骨髓中成熟，然后离开骨髓并在它们的细胞表面表达抗原结合抗体。当幼稚B细胞初次遇到其膜结合抗体所特异的抗原时，细胞开始快速分裂，且其后代分化成为记忆B细胞和称做“浆细胞”的效应细胞。记忆B细胞具有较长的寿命，并继续表达与最初的亲本细胞具有相同特异性的膜结合抗体。浆细胞不生成膜结合抗体，但改为生成可分泌形式的抗体。分泌型抗体是体液免疫的主要效应分子。⑶20抗原(也称作人B淋巴细胞限制性分化抗原，Bp35)是位于前B(pre_B)淋巴细胞和成熟B淋巴细胞上、分子量约35kD的疏水性跨膜蛋白质(Valentine等人，J. Biol. Chem. 264(19) :11282-11287(1989)；和 Einfeld 等人，EMBO J. 7 (3) :711-717 (1988))。该抗原也在超过90%的B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)上表达(Anderson等人，Blood 63(6) 1424-1433 (1984))，但在造血干细胞、祖B细胞(pro_B)、正常浆细胞或其它正常组织上没有发现CTedder等人，J. Immunol. 135(2) =973-979 (1985)) CD20调节细胞周期起始和分化的激活过程的早期步骤(Tedder等人，见上文)，并可能作为钙离子通道起作用(Tedder 等人，J. Cell. Biochem. 14D :195(1990))。鉴于⑶20在B细胞淋巴瘤中表达，该抗原可能用做“靶向”此类淋巴瘤的候选者。 基本上，这种靶向作用可概括如下对患者施用对B细胞⑶20表面抗原特异的抗体。这些抗⑶20抗体特异性结合(表面上地)正常和恶性B细胞的⑶20抗原；与⑶20表面抗原结合的抗体可导致赘生性B细胞的破坏和耗竭。此外，可将具有破坏肿瘤潜力的化学试剂或放射性标记物与抗CD20抗体偶联，使得该试剂特异性“投递”至赘生性B细胞。无论何种方法，首要目标是破坏肿瘤；具体方法可根据所使用的具体抗CD20抗体来决定，因此可利用的靶向CD20抗原的方法可能变化相当大。利妥昔单抗(rituximab) (RITUXAN )抗体是针对CD20抗原的基因工程嵌合鼠/人单克隆抗体。利妥昔单抗是1998年4月7日发布的美国专利号5，736，137 (Anderson 等人)中称为“C2B8”的抗体。RITUXAN 的适应症为用于治疗患有复发的或顽固的低级或滤泡性CD20阳性B细胞非霍奇金淋巴瘤的患者。作用机制的体外研究表明 RITUXAN 结合人补体并通过补体依赖性细胞毒性(⑶C)溶解淋巴样B细胞系(RefT 等人，Blood83(2) :435-445 (1994))。此外，它在抗体依赖性细胞性细胞毒性(ADCC)测定试验中具有显著活性。最近，RITUXAN 在氚标记的胸苷掺入试验中显示出具有抗增殖效果，并直接诱导凋亡，而其它抗⑶19和⑶20抗体则不然(Maloney等人，Blood 88(10) :637a(1996))。在试验中还观察到RITUXAN 与化学疗法和毒素之间的协同作用。具体而言，RITUXAN 使耐药性人B细胞淋巴瘤细胞系对多柔比星、⑶DP、 VP-16、白喉毒素和蓖麻毒蛋白的细胞毒性作用敏感(Demidem等人，Cancer Chemotherapy& Radiopharmaceuticals 12(3) 177-186 (1997))。体内临床前研究显示RITUXAN 可能通过补体和细胞介导的过程而从食蟹猴的外周血、淋巴结和骨髓中耗竭B细胞(Reff等人，Blood 83(2) :435-445(1994))。美国在1997年11月批准将利妥昔单抗用于治疗患有复发的或顽固的低级或滤泡
7性⑶20+B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)的患者，每周一剂375mg/m2，共四剂。2001年4月，食品和药品管理局(FDA)批准了用于治疗低级NHL的额外申请复治(每周一次，共四剂)和额外的给药方案(每周一次，共八剂)。已经有超过300，000名患者接受过利妥昔单抗(或是作为单一疗法或是联合免疫抑制剂或化疗药物)。还已经用利妥昔单抗作为维持疗法治疗患者长达 2 年(Hainsworth 等人，J Clin 0ncol21 :1746-51 (2003) ；Hainsworth 等人，J Clin Oncol 20:4261-7(2002))。也已在B细胞和自身抗体表现出在疾病病理生理学中发挥作用的多种非恶性自身免疫性紊乱中研究了利妥昔单抗(Edwards等人，Biochem Soc Trans 30: 824-8(2002))。已有报导，利妥昔单抗潜在减轻类风湿性关节炎(RA) (Leandro等人，Ann Rheum Dis. 61 :883-8(2002) ；Emery 等人，Arthritis Rheum 48(9) :S439 Q003))、狼疮 (Eisenberg R. Arthritis Res Ther5 :157-9(2003) ；Leandro 等人，Arthritis Rheum 46 ^73-7 0002))、免疫性血小板减少症(D，Arena 等人，Leuk Lymphoma 44 :561-2 (2003)), 自身免疫性贫血(Zaja 等人，Haematologica 87 :189-95(2002)(勘误见 Haematologica 87 :336(2002))、自身免疫性神经病(Pestronk 等人，J Neurol Neurosurg Psychiatry 74 :485-9 0003))、副肿瘤性斜视眼阵挛-肌阵挛综合征(Pranzatelli等人，Neurology 60(Suppll)P05. 128 :A395 (2003))和复发缓和型多发性硬化(RRMS) (Cross等人(摘要)Eighth Annual Meeting of the Americas Committees for Research and 治疗 in Multiple Sclerosis20-1 (2003))的症候和症状。已在类风湿性关节炎(RA)患者中进行了 II期研究(WA16291)，提供了有关利妥昔单抗的安全性和功效的48周随访数据(Emery等人，Arthritis Rheum 48(9) :S439(2003)； Szczepanski 等人，Arthritis Rheum48 (9) :S121 (2003)) 将总共 161 名患者随机平分为四个治疗组甲氨蝶吟(methotrexate)、仅利妥昔单抗、利妥昔单抗+甲氨喋呤、利妥昔单抗+ 环磷酰胺(CTX)。利妥昔单抗的治疗方案为第1天和第15天静脉内施用1克。大多数RA 患者对输注利妥昔单抗有很好的耐受，而36%的患者在其首次输注期间出现至少一种不良事件(与30%接受安慰剂的患者相比)。总而言之，认为大多数不良事件在严重程度上是温和至中度的，而且在所有处理组之间很平衡。在48周中这四种治疗共有19件严重的不良事件，其中利妥昔单抗/CTX组稍多一些。感染发生率在所有组之间很平衡。该RA患者群体中严重感染的平均比率为每100患者-年4. 66，低于基于社区的流行病学研究中所报告的RA患者中需要住院治疗的感染比率(每100患者-年9. 57) (Doran等人，Arthritis Rheum 46 :2287-93(2002))。报导了利妥昔单抗在少数神经学紊乱患者中的安全性，包括自身免疫性神经病(Pestronk 等人，J Neurol Neurosurg Psychiatry 74 :485-9 Q003))、斜视性眼阵挛 / 肌阵挛综合征(Pranzatelli 等人，Neurology 60 (Suppll) P05. 128 :A395 (2003))和 RRMS(Cross等人，Preliminary results from a phase II trial of rituximab in MS(摘要)Eighth Annual Meeting of the Americas Committees for Research and Treatment in Multiple Sclerosis20-1 (2003)) 正在RRMS受试者中进行的利妥昔单抗联合干扰素-β (IFN-β)或醋酸格拉默的研究者发起试验(1ST) (Cross等人，见上文)中，接受治疗的10名受试者中有1个在首次输注利妥昔单抗后发生中度发烧和打寒战，之后入院过夜观察，而其他9名受试者完成了四次输注方案，没有报告任何不良事件。
涉及⑶20抗体、⑶20-结合分子和自身抗原疫苗的专利和专利出版物包括US 5，776，456,5,736，137,5, 843，439,6, 399，061 和 6，682，734，以及 US 2002/0197255、US 2003/0021781、US 2003/0082172、US2003/0095963、US2003/0147885、US2005/0186205 和 WO 1994/11026 (Anderson 等人)；U. S. 6，455，043、US2003/0026804, US2003/0206903 禾口 W02000/09160(Grillo-Lopez，A. ) ；WO 2000/27428 (Grillo-Lopez 禾口 White) ；US 2004/0213784 和 WO 2000/27433 (Grillo-Lopez 和 Leonard) ；W02000/44788(Braslawsky 等 A ) ；WO 2001/10462 (Rastetter, W. ) ；W02001/10461 (Rastetter 禾口 White)； WO 2001/10460 (White 禾口 Gri1lo—Lopez) ；US 2001/0018041、US2003/0180292、 US2002/0028178、WO 2001/34194 禾口 WO 2002/22212 (Hanna 禾口 Hariharan) ；US 2002/0006404和W02002/04021 (Hanna和Hariharan) ；US 2002/0012665,US2005/0180975, WO 2001/74388 禾口 U. S. 6，896，885 (Hanna，N. ) ；US 2002/0058029(Hanna，N. ) ；US 2003/0103971 (Hariharan 和 Hanna) ；US 2005/012；3540 (Hanna 等人)；US 2002/0009444 和 WO 2001/80884(Grillo-Lopez, A.) ；W02001/97858 ；US 2005/0112060,US2002/0039557 禾口 U.S.6，846，476 (White，C. ) ；US 2002/0128448 禾口 WO 2002/34790 (Reff, M. ) ；W02002/060955(Braslawsky 等 A ) ；WO 2002/096948 (Braslawsky 等人)； W02002/079255 (Reff 和 Davies) ；U.S.6,171,586 和 6，991，790 和 W01998/56418 (Lam 等 A ) ；US 2004/0191256 和 WO 1998/58964(Raju, S.) ；WO 1999/22764(Raju, S.)； WO 1999/51642、U. S. 6，194，551、U. S. 6，242，195,6, 528，624 和 6，538，124(Idusogie 等 A ) ；U.S. 7，122，637、US2005/0118174、US2005/0233382、US2006/0194291、 US2006/0194290、US2006/0194957 和 WO 2000/42072 (Presta, L.) ；WO 2000/67796 (Curd 等人)；W02001/03734 (Gri 1 Io-Lopez 等人)；US 2002/0004587、US2006/0025576 和 W02001/77342(Miller 和 Presta) ；US 2002/0197256 和 W02002/078766(Grewal，I.)； US 2003/0157108 和 WO 2003/035835(Presta, L.) ；U.S.5，648，267、5，733，779、6，017，733 和 6，159，730，以及 W01994/11523(Reff 等人，关于表达技术)；U. S. 6，565，827,6, 090，365、 6，287，537,6, 015，542,5, 843，398 和 5，595，721 (Kaminski 等人)；U. S. 5，500，362、 5，677，180,5,721，108,6, 120，767,6, 652，852 和 6，893，625 以及 W01988/04936(Robinson 等人)；U. S. 6,410, 391 (Zelsacher) ；U. S. 6，224，866 和 WO 2000/20864 (Barbera-Gui 1 Iem, E. ) ；WO 2001/13945 (Barbera-Guillem, Ε.) ；WO 2000/67795 (Goldenberg)； U. S. 7，074，403 (Goldenberg 禾口 Hansen) ；U. S. 7, 151, 164 (Hansen 等人)；US 2003/0133930 ；WO 2000/74718 禾口 US2005/0191300A1 (Goldenberg 禾口 Hansen)； US 2003/0219433 禾口 W02003/68821 (Hansen 等人)；W0 2004/058298 (Goldenberg 和 Hansen) ；W02000/76542(Golay 等人)；W0 2001/72333(Wolin 和 Rosenblatt)； U. S. 6, 368, 596(Ghetie 等人)；U. S. 6，306，393 和 US 2002/0041847 (Goldenberg, D. ) ；US 2003/0026801 (Weiner 禾口 Hartmann) ；WO 2002/102312 (Engleman, E.)； US 2003/0068664 (Albitar 等 A ) ；WO 2003/002607 (Leung, S.) ；W02003/049694、 US2002/0009427 和 US 2003/0185796 (Wolin 等人)；W02003/061694 (Sing 和 Siegall)； US 2003/0219818(Bohen 等人)；US2003/0219433 和 WO 2003/068821(Hansen 等人)； US 2003/0219818 (Bohen 等人)；US 2002/0136719 (Shenoy 等人)；W0 2004/032828 和 US2005/0180972(Wahl 等人)；和 WO 2002/56910(Hayden-Ledbetter)。还可参见 U. S. 5，849，898 和 EP 330, 191(Seed 等人)；EP332, 865A2(Meyer 和 Weiss)； U. S. 4，861，579 (Meyer 等人)；US 2001/0056066 (Bugelski 等人)；WO 1995/03770 (Bhat 等人)；US 2003/0219433A1 (Hansen 等人)；W02004/035607 和 US 2004/167319 (Teeling 等 A ) ；WO 2005/103081 (Teeling 等人)；US 2006/0034835、US2006/0024300 和 WO 2004/056312 (Lowman 等人)；US 2004/0093621 (Shitara 等人)；WO 2004/103404 (Watkins 等人)；W0 2005/000901 (Tedder 等人)；US 2005/0025764 (Watkins 等人)； US2006/0251652 (Watkins 等人)；WO 2005/016969 (Carr 等人)；US2005/0069545 (Carr 等人)；WO 2005/014618 (Chang 等人)；US2005/0079174 (Barbera-Guillem 和 Nelson) ；US 2005/0106108 (Leung 和 Hansen) ；US 2005/012；3546 (Umana 等人)；US 2004/0072290 (Umana 等人)；US 2003/0175884 (Umana 等人)；和 WO 2005/044859 (Umana 等人)； W02005/070963 (Allan 等人)；US 2005/0186216 (Ledbetter 禾口 Hayden-Ledbetter)； US 2005/0202534 (Hayden-Ledbetter 和 Ledbetter) ；US 2005/136049 (Ledbetter 等人)； US 2003/118592 (Ledbetter 等人)；US2003/133939 (Ledbetter 和 Hayden-Ledbetter)； US 2005/0202012(Ledbetter 禾口 Hayden-Ledbetter) ；US 2005/0175614(Ledbetter 禾口 Hayden-Ledbetter) ；US 2005/0180970 (Ledbetter 禾口 Hayden-Ledbetter)； US2005/0202028(Hayden-Ledbetter 禾口 Ledbetter) ；US2005/0202023(Hayden-Ledbetter 和 Ledbetter) ；W02005/017148 (Ledbetter 等人)；W0 2005/037989 (Ledbetter 等人)； U. S. 6，183，744 (Goldenberg) ；U. S. 6，897，044 (Braslawski 等人)；W02006/005477 (Krause 等人)；US 2006/0029543 (Krause 等人)；US2006/0018900(McCormick 等人)；US 2006/0051349 (Goldenberg 禾口 Hansen) ；WO 2006/042240 (Iyer 禾口 Dunussi-Joannopoulos) ；US2006/0121032(Dahiyat 等人)；W0 2006/064121 (Teillaud 等人)；US2006/0153838 (Watkins)、CN 1718587 (Chen 等人)；WO 2006/084264 (Adams 等人)；US 2006/0188495(Barron 等人)；US 2004/0202658 和 W02004/091657 (Benynes, K.) ；US 2005/0095243、US2005/0163775、W02005/00351 和 WO 2006/068867 (Chan, Α·) ；US 2006/0135430 和 W02005/005462 (Chan 等人)；US 2005/0032130 和 WO 2005/017529 (Beresini 等人)；US 2005/0053602 禾Π WO 2005/023302 (Brunetta， P.) ；US2006/0179501 和 WO 2004/060052(Chan 等人)；W0 2004/060053 (Chan 等人)；US 2005/0186206 和 WO 2005/060999 (Brunetta, P.) ；US 2005/0191297 和 WO 2005/061542 (Brunetta, P.) ；US 2006/0002930 和 W02005/115453 (Brunetta 等人)；US 2006/0099662 和 W02005/108989 (Chuntharapai 等人)；CN 1420129A (Zhongxin Guojian Pharmaceutical) ；US 2005/0276803 和 WO 2005/113003(Chan 等人)；US2005/0271658 和 WO 2005/117972(Brunetta 等人)；US 2005/0255527 和 WO 2005/11428 (Yang, J.) ；US 2006/0024295 禾口 WO 2005/120437(Brunetta, P.) ；US 2006/0051345 禾口 W 2005/117978(Frohna，P. ) ；US 2006/0062787 禾口 WO 2006/012508(Hitraya，Ε.)； US 2006/0067930 和 W02006/31370(Lowman 等人)；W0 2006/29224(Ashkenazi, Α. ) ；US2006/0110387 禾口 WO 2006/41680 (Brunetta, P. ) ；US 2006/0134111 禾口 W02006/066086 (Agarwal, S.) ；WO 2006/069403 (Ernst 和 Yansura) ；US2006/0188495 禾口 WO 2006/076651 (Dummer, W. ) ；W02006/084264(Lowman, H.) ；WO 2006/093923(Quan 禾口 Sewell) ；W02006/106959 (Numazaki 等 A ) ；WO 2006/126069 (Morawala)；W02006/130458 (Gazit-Bornstein 等 K ) ；US 2006/0275284 (Hanna, G.)； US2007/0014785(Golay 等人)；US 2007/0014720(Gazit-Bornstein 等人)；和 US 2007/0020259 (Hansen 等人)；US 2007/0020265 (Goldenberg 禾口 Hansen) ；US 2007/0014797 (Hitraya) ；US 2007/0224189 (Lazar 等人)；W02007/014238 (Bruge 和 Bruger)；和WO 2008/003319 (Parren 和Baadsgaard)。其中某些尤其包括多发性硬化的治疗。 涉及使用利妥昔单抗的疗法的出版物包括=Perotta和Abuel “Response of chronic relapsing ITP of IOyears duration to Rituximab，，Abstract#3360Blood 10(1)( M 分 1-2) :p. 88B (1998) ；Stashi 等 A,"Rituximab chimeric anti-CD20monoclonal antibody treatment for adults with chronic idopathic thrombocytopenic purpura" Blood 98(4) :952-957(2001) ；Matthews, R. 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113659-3659，Abstract LB9 (2003 年 12 月)；Martin 禾口 Chan "Pathogenic Roles of B cells in 人 Autoimmunity :Insights from the Clinic" Immunity 20:517-527(2004)； Cree 等人，"An open label study of the effects of Rituximab in neuromyelitis optica. "Neurology 64(7) :1270-2(2005) ；Cross φ 入，“Rituximab reduces B cells and T cells in cerebrospinal fluid of multiple sclerosis患者· ”J Neuroimmunol, 180(1-2) :63-70(2006) ；Bar—Or Α.等人，“Safety，pharmacodynamics 禾口 activity of Rituximab in patients with relapsing—remitting multiple sclerosis :a phase I, multicentre,open-label clinical trial. 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"Neurology 72 (S3) :A254(2009)，Abstract。发明_既述本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，其包括对所述患者施用有效量的抗CD20抗体，其中治疗基于具有一种或多种选自下组的特征的患者(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS) 增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者不到约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者不到约10年具有小于或等于约5.0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在一些实施方案中，治疗减慢(reduce)达到确认的疾病进展的时间。在一些实施方案中，所述确认的疾病进展是维持12周的EDSS增加。在一些实施方案中，所述确认的疾病进展是维持M周的EDSS增加。在一些实施方案中，对患者施用有效量的抗⑶20抗体，以提供约0. 3至约4. 0克的初次抗⑶20抗体暴露，随后是约0. 3至约4. 0克的二次抗⑶20抗体暴露。在一些实施方案中，所述初次抗CD20抗体暴露和/或所述二次抗CD20抗体暴露是约0. 3至约1. 5克。 在一些实施方案中，所述二次暴露直到距初次暴露约16至60周时才提供。在一些实施方案中，每次抗CD20抗体暴露是以一剂或两剂抗CD20抗体的形式提供给患者的。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO :10、SEQ ID NO :11 和 SEQ ID NO 12 的重链可变区，和 b)含有 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO 6 的轻链可变区。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是ocrelizumab。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是hA20。本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，条件是所述患者已被发现具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c) 在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分，所述治疗包括对所述患者施用有效量的抗CD20抗体。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者不到约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者不到约10年具有小于或等于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在一些实施方案中，治疗减慢了达到确认的疾病进展的时间。在一些实施方案中， 所述确认的疾病进展是维持12周的EDSS增加。在一些实施方案中，所述确认的疾病进展是维持M周的EDSS增加。在一些实施方案中，对患者施用有效量的抗⑶20抗体，以提供约0. 3至约4. 0克的初次抗⑶20抗体暴露，随后是约0. 3至约4. 0克的二次抗⑶20抗体暴露。在一些实施方案中，所述初次抗CD20抗体暴露和/或所述二次抗CD20抗体暴露是约0. 3至约1. 5克。 在一些实施方案中，所述二次暴露直到距初次暴露约16至60周时才提供。在一些实施方案中，每次抗CD20抗体暴露是以一剂或两剂抗CD20抗体的形式提供给患者的。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO :10、SEQ ID NO :11 和 SEQ ID NO 12 的重链可变区，和 b)含有 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO 6 的轻链可变区。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是ocrelizumab。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是hA20。本发明提供了治疗进行性多发性硬化的方法，其包括(a)选择具有进行性多发性硬化的患者，其中所述患者具有一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约 1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分；以及(b)向由此选择的患者施用有效量的抗⑶20抗体。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者不到约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者不到约10年具有小于或等于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在一些实施方案中，治疗减慢了达到确认的疾病进展的时间。在一些实施方案中， 所述确认的疾病进展是维持12周的EDSS增加。在一些实施方案中，所述确认的疾病进展是维持M周的EDSS增加。在一些实施方案中，对患者施用有效量的抗⑶20抗体，以提供约0. 3至约4. 0克的初次抗⑶20抗体暴露，随后是约0. 3至约4. 0克的二次抗⑶20抗体暴露。在一些实施方案中，所述初次抗CD20抗体暴露和/或所述二次抗CD20抗体暴露是约0. 3至约1. 5克。 在一些实施方案中，所述二次暴露直到距初次暴露约16至60周时才提供。在一些实施方案中，每次抗CD20抗体暴露是以一剂或两剂抗CD20抗体的形式提供给患者的。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO :10、SEQ ID NO :11 和 SEQ ID NO 12 的重链可变区，和 b)含有 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO 6 的轻链可变区。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是ocrelizumab。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是hA20。本发明还提供了评价患有进行性多发性硬化的患者是否会对用CD20抗体的治疗有反应的方法，其包括评价一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和
14(d)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分，其中患者中的一种或多种所述特征指示该患者将对所述治疗有反应。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者少于约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者少于约10年具有小于或等于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在一些实施方案中，该方法还包括给患者建议。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO :10、SEQ ID NO :11 和 SEQ ID NO 12 的重链可变区，和 b)含有 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO 6 的轻链可变区。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是ocrelizumab。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是hA20。本发明还提供了鉴定可能对抗CD20抗体治疗有反应的进行性多发性硬化患者的方法，其包括(a)评价一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和 (iv)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分；以及(b)鉴定具有一种或多种选自下组的特征的患者(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始抗CD20 治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分 (MSSS)大于约5分。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者少于约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者少于约10年具有小于或等于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在一些实施方案中，该方法还包括给患者建议。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO :10、SEQ ID NO :11 和 SEQ ID NO 12 的重链可变区，和 b)含有 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO 6 的轻链可变区。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是ocrelizumab。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是hA20。本发明还提供了销售抗⑶20抗体或其可药用组合物用于进行性多发性硬化患者亚群的方法，所述方法包括告知目标受众关于所述抗CD20抗体用于治疗如下患者亚群的用途，所述患者亚群的特征在于此亚群的患者具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表 (EDSS)增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者少于约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者少于约10年具有小于或等于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO 10,SEQ ID NO 11 和 SEQ ID NO 12 的重链可变区，和 b)含有 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO 6 的轻链可变区。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是ocrelizumab。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是hA20。本发明提供了包括包装在一起的药物组合物和标签的产品，所述药物组合物包含抗⑶20抗体和可药用的载体，所述标签指示(即说明)所述抗⑶20抗体或药物组合物适用于治疗具有一种或多种选自下组的特征的多发性硬化患者(a)年龄小于约55岁，(b) 一种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分， 和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者少于约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者少于约10年具有小于或等于约5.0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在一些实施方案中，包含抗⑶20抗体和可药用载体的药物组合物在容器中。在一些实施方案中，容器包含约0. 3至约4. 0克抗⑶20抗体。在一些实施方案中，容器包含约 0.3至约1.5克抗⑶20抗体。在一些实施方案中，标签提供说明书，该说明书说明向患者施用有效量的抗CD20 抗体，以提供约0. 3至约4. 0克的初次抗⑶20抗体暴露，随后是约0. 3至约4. 0克的二次抗CD20抗体暴露。在一些实施方案中，所述初次抗CD20抗体暴露和/或所述二次抗CD20 抗体暴露是约0. 3至约1. 5克。在一些实施方案中，所述二次暴露直到距初次暴露约16至 60周时才提供。在一些实施方案中，每次抗CD20抗体暴露是以一剂或两剂抗CD20抗体的形式提供给患者的。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO :10、SEQ ID NO :11 和 SEQ ID NO 12 的重链可变区，和 b)含有 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO 6 的轻链可变区。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是ocrelizumab。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在一些实施方案中，所述抗⑶20抗体是hA20。本发明还提供了用于预测进行性多发性硬化受试者是否会对以用于治疗多发性硬化的药物进行的治疗有反应的方法，所述方法包括评价一种或多种选自下组的特征(a) 年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分，其中年龄、 钆染色损伤、在开始治疗前两年内EDDS的增加、MSSS或其组合指示受试者将对所述治疗有反应。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在一些实施方案中，患者还在样品中具有炎症迹象。在一些实施方案中，所述样品是脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的IgG指数指示。在一些实施方案中， 炎症迹象由等电聚焦检测到的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，患者少于约15年具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，患者少于约10年具有小于或等于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1.5分不归因于复发。在一些实施方案中，患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，当开始治疗时EDSS为约3. 0至约6. 5。在一些实施方案中，患者的年龄小于约51岁。在本文所述的任何方法或产品的一些实施方案中，患者具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) 一种或多种钆染色损伤，和(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分。本发明还提供了治疗患者中的多发性硬化的方法，其包括向所述患者施用有效量的ocrelizumab以提供约0. 3克至约0. 6克的初次ocrelizumab暴露，随后是约0. 3克至约0. 6克的二次ocrelizumab暴露，其中所述二次暴露是直到距初次暴露约16至60周时才提供的，并且每次ocrelizumab暴露是以一剂或两剂ocrelizumab的形式提供给患者的。在一些实施方案中，所述初次ocrelizumab暴露是约0.6克。在一些实施方案中， 所述二次ocrelizumab暴露是约0. 6克。在一些实施方案中，距二次暴露距初次暴露约M 周施用。在一些实施方案中，一次或多次ocrelizumab暴露是以一剂ocrelizumab的形式向患者提供的。在一些实施方案中，一次或多次ocrelizumab暴露是以两剂ocrelizumab 的形式向患者提供的。在一些实施方案中，所述初次ocrelizumab暴露包括第一剂量和第二剂量的ocrelizumab，其中ocrelizumab的第一剂量和第二剂量是约0. 3克。在一些实施方案中，所述二次ocrelizumab暴露包括单剂ocrelizumab,其中所述单剂ocrelizumab 是0.6克。在一些实施方案中，该方法还包括提供第三次ocrelizumab暴露。在一些实施方案中，该方法还包括提供第四次ocrelizumab暴露。在一些实施方案中，该方法还包括提供第五次ocrelizumab暴露。在任何方法的一些实施方案中，该方法还包括提供约一次至约三次后续的ocrelizumab暴露。本发明还提供了产品，其包括(a)含有ocrelizumab的容器；和(b)具有用于治疗患者多发性硬化的说明书的包装插页，其中所述说明书指示向所述患者施用有效量的 ocrelizumab以提供约0. 3克至约0. 6克的初次ocrelizumab暴露，随后是约0. 3克至约 0. 6克的第二次ocrelizumab暴露，其中直到距初次暴露约16至60周时才施用第二次暴露，并且每次ocrelizumab暴露是作为一剂或两剂ocrelizumab提供给患者的。在一些实施方案中，所述初次ocrelizumab暴露是约0.6克。在一些实施方案中， 所述第二次ocrelizumab暴露是约0. 6克。在一些实施方案中，距初次暴露约M周施用第二次暴露。在一些实施方案中，一次或多次ocrelizumab暴露以一剂ocrelizumab的形式
18向患者提供。在一些实施方案中，一次或多次ocrelizumab暴露以两剂ocrelizumab的形式向患者提供。在一些实施方案中，所述初次ocrelizumab暴露包括第一剂量和第二剂量的ocrelizumab，其中ocrelizumab的第一剂量和第二剂量是约0. 3克。在一些实施方案中，说明书还包括提供第三次ocrelizumab暴露。在一些实施方案中，说明书还包括提供第四次ocrelizumab暴露。在一些实施方案中，说明书还包括提供第五次ocrelizumab暴露。 在任何方法的一些实施方案中，说明书还包括提供约一次至约三次后续的ocrelizumab暴 Mo附图简述图 IA 是比较鼠 2H7 (SEQ ID NO 1)、人源化 2H7. vl6 变体(SEQ ID NO 2)和人 κ 轻链亚组I (SEQ ID NO 3)的轻链可变域(VL)的氨基酸序列的序列比对。2Η7和hu2H7. vl6 的 VL 的 CDR 如下=CDRl (SEQ ID NO :4)、CDR2 (SEQ ID NO :5)和 CDR3 (SEQ ID NO :6)。图IB 是比较鼠 2H7(SEQ ID NO :7)、人源化 2H7. vl6 变体(SEQ ID NO :8)和人重链亚组III共有序列(SEQ ID NO 9)的重链可变域(VH)的氨基酸序列的序列比对。2H7和 hu2H7. vl6 的 VH 的 CDR 如下:CDR1 (SEQ ID NO :10)、CDR2 (SEQ ID NO :11)和 CDR3 (SEQ ID NO 12)。在图IA和图IB中，每条链中的⑶Rl、⑶R2和⑶R3包括在括号内，侧翼为构架区 FR1-FR4，如图所示。2H7是指鼠2H7抗体。两行序列之间的星号显示在这两种序列之间不同的位置°残基编号依照Kabat等人，Seq uences of Immunological Interest,第5版， Public Health Service, National Institutes ofHealth, Bethesda, Md. (1991),其中插入显不为a、b、c、d禾口 e。图2显示了成熟2H7. vl6轻链(SEQ ID NO :13)的氨基酸序列。图3显示了成熟2H7. vl6重链(SEQ ID NO 14)的氨基酸序列。图4显示了成熟2H7. v31重链(SEQ ID NO 15)的氨基酸序列。2H7. v31的L链与2Η7·ν16的相同。图5显示了成熟2H7. vl6和2H7. v511轻链(分别是SEQ ID NO 13和16)的比对，采用Kabat可变域残基编号和Eu恒定域残基编号。图6显示了成熟2H7. vl6和2H7. v511重链(分别是SEQ ID NO 14和17)的比对，采用Kabat可变域残基编号和Eu恒定域残基编号。图7概述了使用ocrelizumab治疗复发缓和型多发性硬化的研究设计。图8显示了对安慰剂和利妥昔单抗组的受试者而言，达到确认的疾病进展的时间的 Kaplan Meier 曲线。图9显示了从基线至第96周的T2损伤体积的中值变化。Y轴显示了 T2损伤体积 mm3 ο

图10总结了安慰剂和利妥昔单抗组的受试者的基线特征和危险比。图11显示了，对于安慰剂和利妥昔单抗组的治疗效应，基线时年龄和钆(Gd)损伤的加性预测效应的多元分析(multivariate analysis) 0图IlA显示了年龄< 51和基线时 Gd损伤=0的多元分析。图IlB显示了年龄彡51和基线时Gd损伤=0的多元分析。图 IlC显示了年龄< 51和基线时Gd损伤彡1的多元分析。图IlD显示了年龄彡51和基线时 Gd损伤彡1的多元分析。
图12显示了对安慰剂和利妥昔单抗组的治疗效应而言，年龄和多发性硬化严重性评分(MSSS)的加性预测效应的多元分析。图12A显示了年龄彡55和MSSS < 5的多元分析。图12B显示了年龄> 55和MSSS < 5的多元分析。图12C显示了年龄；^ 55和MSSS彡5 的多元分析。图12D显示了年龄> 55和MSSS彡5的多元分析。图13显示了具有以下特征的安慰剂和利妥昔单抗组受试者的达确认的疾病进展的时间的Kaplan Meier曲线年龄=55 ；3彡基线EDSS彡6. 5 ；疾病持续时间> 10年(如果他们的基线EDSS < 5)或疾病持续时间> 15年(如果他们的基线EDSS ^ 5)的患者排除。发明详述I.定义“B细胞”是在骨髓中成熟的淋巴细胞，包括幼稚B细胞、记忆B细胞或效应B细胞 (浆细胞)。本文中的B细胞可以是正常的或非恶性的B细胞。“B细胞表面标志”或“B细胞表面抗原”在本文中指在B细胞表面上表达的、可用能结合它的抗体靶向的抗原。示例性B细胞表面标志包括⑶10、⑶19、⑶20、⑶21、⑶22、 CD23、CD24、CD37、CD40、CD53、CD72、CD73、CD74、CDw75、CDw76、CD77、CDw78、CD79a、CD79b、 CD80、CD81、CD82、CD83、CDw84、CD85*CD86 白细胞表面标志(描述参见Leukocyte Antigen Facts Book,第 2 版，1997, Barclay 等人编著，Academic Press, Harcourt Brace&Co. , New York)。其它 B 细胞表面标志包括 RP105、FcRH2、B 细胞 CR2、CCR6、P2X5、HLA-DOB, CXCR5、 FCER2、BR3、Btig、NAG14、SLGC16270、FcRHl、IRTA2、ATWD578、FcRH3、IRTAl、FcRH6、BCMA和 239287。本文中特别感兴趣的B细胞表面标志在哺乳动物中较其它非B细胞组织而言优先在B细胞上表达，且可在前B细胞和成熟B细胞二者上表达。优选的B细胞表面标志在本文中是⑶20。“⑶20”抗原或“⑶20”是存在于来自外周血或淋巴器官的超过90% B细胞的表面上的一种约35kDa非糖基化磷蛋白。⑶20存在于正常B细胞以及恶性B细胞二者上，但在干细胞上不表达。文献中⑶20的其它名称包括“B琳巴细胞限制性抗原”和“Bp35"。⑶20 抗原描述在例如，Clark 等人，Proc. Natl. Acad. ki. (USA)82 :1766 (1985)中。“抗体拮抗剂”在本文中指在结合B细胞上的B细胞表面标志后破坏或耗竭哺乳动物中的B细胞和/或干扰一种或多种B细胞功能(例如通过降低或阻止由B细胞引发的体液应答)的抗体。优选的是，抗体拮抗剂能够在用其处理的哺乳动物中耗竭B细胞(即降低循环中的B细胞水平)。这种耗竭可通过各种机制来实现，例如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)和/或补体依赖性细胞毒性(CDC)、抑制B细胞增殖、和/或诱导B细胞死亡 (如通过细胞凋亡)。“抗体依赖性细胞介导的细胞毒性”和“ADCC”指由细胞介导的反应，其中表达受体(FcRs)的非特异性细胞毒性细胞(如自然杀伤(NK)细胞、嗜中性粒细胞和巨噬细胞)识别靶细胞上的结合抗体，随后引起靶细胞溶解。用于介导ADCC的主要细胞——NK 细胞——只表达FcyRIII，而单核细胞表达FcyRI、FcyRII和FcyRIII。Ravetch和Kinet， Annu. Rev. Immunol 9 :457-92 (1991)中第464页表3总结了造血细胞上的FcR表达。为了评估目的分子的ADCC活性，可进行体外ADCC测定试验，例如美国专利No. 5，500，362或 5，821，337中所描述的。可用于此类试验的效应细胞包括外周血单核细胞(PBMC)和天然杀伤(NK)细胞。或者/另外，可在体内评估目的分子的ADCC活性，例如在动物模型中，例如 Clynes 等人，PNAS(USA)95 :652-656(1998)中所公开的。“人效应细胞”指表达一种或多种FcR并行使效应子功能的白细胞。在一些实施方案中，该细胞至少表达Fc YRIII并执行ADCC效应子功能。介导ADCC的人白细胞的例子包括外周血单核细胞(PBMC)、自然杀伤(NK)细胞、单核细胞、细胞毒性T细胞和嗜中性粒细胞，优选PBMC和NK细胞。术语“Fe受体”和“FcR”用于描述与抗体Fc区结合的受体。在一些实施方案中， FcR是天然序列人FcR。此外，优选的FcR是与IgG抗体结合的FcR( γ受体)，包括FcyRI、 FcyRII和FcyRIII亚类的受体，包括这些受体的等位基因变体和可变剪接形式。FcyRII受体包括FcyRIIA( “激活受体”)和FcyRIIB( “抑制受体”)，它们具有相似的氨基酸序列，区别主要在于其胞质域。激活受体FcyRIIA在其胞质域中包含基于免疫受体酪氨酸的激活基序(ITAM)。抑制受体FcyRIIB在其胞质域中包含基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITIM) (参见 Daeron，Annu. Rev Immunol. 15 :203-234 (1997))。FcR 的综述参见 Ravetch 和 Kinet， Annu. Rev Immunol. 9 :457-492 (1991) ；Capel 等人，Immunomethods 4:25-34(1994)；以及 de Haas 等人，J. Lab. Clin. Med. 126 :330-41 (1995)。术语“FcR”在本文中涵盖其它 FcR，包括未来将会鉴定的FcR。该术语还包括新生儿受体，Fcfoi，它负责将母体的IgG转移给胎儿 (Guyer 等人，J. Immunol. 117 :587(1976)和 Kim 等人，J. Immunol. 24 :249(1994))。“补体依赖性细胞毒性”或“CDC”指在存在补体时分子溶解靶物的能力。补体激活途径是由补体系统第一组分(Clq)结合与关联抗原复合的分子(如抗体)起始的。为了评估补体激活，可进行CDC测定法，例如Gazzano-Santoro等人，J. Immunol. Methods 202 163(1996)中所描述的。“生长抑制性”抗体指那些阻止或降低表达抗体所结合的抗原的细胞增殖的抗体。 例如，抗体可在体外和/或在体内阻止或降低B细胞增殖。“诱导凋亡”的抗体指那些根据标准细胞凋亡测定法(例如膜联蛋白V结合、DNA 片段化、细胞收缩、内质网膨胀、细胞破碎和/或膜泡(称作凋亡小体)形成)的测定，诱导例如B细胞的程序性细胞死亡的抗体。术语“抗体”在本文中使用其最广的含义，尤其覆盖单克隆抗体、多克隆抗体、由至少两种完整抗体形成的多特异性抗体(如双特异性抗体)、及抗体片段，只要它们展示所需生物学活性即可。“抗体片段”包含完整抗体的一部分，优选包含其抗原结合区。抗体片段的例子包括Fab、Fab'、F(ab' ) 2和Fv片段；双抗体(diabody)；线性抗体；单链抗体分子；及由抗体片段形成的多特异性抗体。为了本文的目的，“完整抗体”指包含重链和轻链可变域以及Fc区的抗体。“天然抗体”通常是由两条相同的轻链(L)和两条相同的重链(H)构成的分子量约 150，000道尔顿的异四聚体糖蛋白。每条轻链通过一个共价二硫键与重链连接，而二硫键的数目在具有不同免疫球蛋白同种型的重链之间有变化。每条重链和轻链还具有间隔规律的链内二硫桥。每条重链在一端具有一个可变域(VH)，接着是多个恒定域。每条轻链在一端具有一个可变域(VL)，而另一端是一个恒定域；轻链的恒定域与重链的第一个恒定域对齐，而轻链的可变域与重链的可变域对齐。据信，特定的氨基酸残基在轻链和重链可变域之间形成界面。术语“可变的”指如下事实，S卩，可变域中的某些部分在抗体之间存在大的序列差异，这些部分用于每种特定抗体针对其特定抗原的结合和特异性。然而，变异性并非均勻分布于抗体的整个可变域。它集中于轻链和重链可变域中称作高变区的三个区段。可变区中更加高度保守的部分称作构架区(FR)。天然重链和轻链的可变域各自包含四个FR， 它们大多采取β-折叠构象，通过三个高变区连接，这些高变区形成环而连接该β-折叠结构，并在一些情况下形成该折叠结构的一部分。每条链中的高变区通过FR而彼此紧靠在一起，并与另一条链的高变区一起促成抗体的抗原结合位点的形成(参见Kabat等， Sequences of Proteins of Immunological Interest,第 5 版，Public Health Service, National Institutes of Health，Bethesda，MD，1991)。恒定区不直接涉及抗体与抗原的结合，但显示出多种效应子功能，例如抗体在抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)中的参与。用木瓜蛋白酶消化抗体产生两个相同的抗原结合片段，称作“Fab”片段，各自具有一个抗原结合位点，和一个残余“Fe”片段，其名称反映了它易于结晶的能力。胃蛋白酶处理产生一个F (ab' ) 2片段，它具有两个抗原结合位点，并且仍能够交联抗原。“Fv”是包含完整抗原识别和抗原结合位点的最小抗体片段。该区域由紧密、非共价结合的一个重链可变区和一个轻链可变区的二聚体组成。以此构型，各个可变域的三个高变区相互作用而在VH-VL 二聚体表面确定了一个抗原结合位点。六个高变区共同赋予抗体抗原结合特异性。然而，即使是单个可变域(或只包含对抗原特异的三个高变区的半个 Fv)也具有识别和结合抗原的能力，尽管亲和力低于完整结合位点。Fab片段还包含轻链的恒定域和重链的第一恒定域(CHl)。Fab，片段与Fab片段的不同之处在于重链CHl结构域的羧基末端增加了少数残基，包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。本文中Fab' -SH是其中恒定区的半胱氨酸残基携带至少一个游离巯基的Fab’的称谓。F(ab' ) 2抗体片段最初是作为Fab，片段对生成的，在Fab，片段之间具有铰链半胱氨酸。还知道抗体片段的其它化学偶联。来自任何脊推动物物种的抗体(免疫球蛋白)的“轻链”，根据其恒定区的氨基酸序列，可归入两种截然不同类型中的一种，称作卡帕(κ)和拉姆达(入)。根据其重链恒定区的氨基酸序列，可将抗体归入不同的类别。完整抗体有五种主要的类别IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中有些可进一步分为亚类(同种型)，如IgGl、IgG2、 IgG3、IgG4、IgAl和IgA2。将与不同抗体类别对应的重链恒定区分别称作α、δ、ε、Y禾口 μ。不同类别免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的。“单链Fv”或“scFv”抗体片段包含抗体的VH和VL结构域，其中这些结构域存在于一条多肽链上。在一些实施方案中，该Fv多肽在VH和VL结构域之间还包含多肽接头，使得 scFv形成抗原结合所需的结构。关于scFv的综述参见Pl Uckthun，在《The Pharmacology of 单克隆 Antibodies》中，第 113 卷，Rosenburg 禾口 Moore 编著，Springer-Verlag, New York，第 269-315 页(1994)。术语“双抗体”指具有两个抗原结合位点的小型抗体片段，该片段在同一条多肽链(VH-VL)中包含相连的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)。通过使用过短的接头使得同一条链上的两个结构域之间不能配对，迫使这些结构域与另一条链的互补结构域配对，并产生两个抗原结合位点。双抗体更完整的描述于例如EP 404, 097 ；WO 93/11161 ；和 Hollinger 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 :6444-6448 (1993)。术语“单克隆抗体”在用于本文时指由一群基本上同质的抗体获得的抗体，即构成群体的各个抗体，除了生产单克隆抗体的过程中可能产生的变异(这种变异通常以极少量存在)外，相同和/或结合相同表位。与典型的包含针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体产品不同，每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。除了它们的特异性以外， 单克隆抗体的优越性体现在它们不受到其它免疫球蛋白的污染。修饰语“单克隆”显示抗体由基本上同质的抗体群获得的特征，而不应解释为需要通过任何特定方法来生产抗体。例如，依照本发明使用的单克隆抗体可通过最初由Kohler等人，Nature 256:495(1975)描述的杂交瘤方法来制备，或者可通过重组DNA方法来制备(参见例如美国专利号4，816，567)。 “单克隆抗体”还可使用例如Clackson等人，Nature 352 :624-628(1991)和Marks等人， J. Mol. Biol. 222 :581-597(1991)中描述的技术由噬菌体抗体库分离。单克隆抗体在本文中明确包括“嵌合”抗体(免疫球蛋白)，其中重链和/或轻链的一部分与衍生自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而链的剩余部分与衍生自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源；以及此类抗体的片段，只要它们显示出所需的生物学活性(美国专利号4，816，567 ； Morrison 等人，Proc. Natl. Acad. ki. USA 81 :6851-6855 (1984))。本文中感兴趣的嵌合抗体包括包含衍生自非人灵长类动物(如旧大陆猴类(Old World Monkey)，例如狒狒、恒河猴或猕猴)的可变域抗原结合序列以及人恒定区序列的“灵长类化(primatized)”抗体(美国专利号5,693, 780)。非人(如鼠源)抗体的“人源化”形式指包含极少的衍生自非人免疫球蛋白的序列的嵌合抗体。就大部分而言，人源化抗体是人免疫球蛋白(受体抗体)，其中受体的高变区残基用具有所需特异性、亲和力和能力的非人物种(供体抗体)例如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类的高变区残基替换。在有些情况中，将人免疫球蛋白的构架区(FR)残基用相应的非人残基替换。此外，人源化抗体可包含在受体抗体或供体抗体中均不存在的残基。进行这些修饰是为了进一步改进抗体的性能。通常，人源化抗体将包含至少一个、通常两个可变域的基本上全部，其中高变环的全部或基本上全部对应于非人免疫球蛋白的，而且，除了上文所述的FR替代外，FR的全部或基本上全部是人免疫球蛋白序列的。任选的是，人源化抗体还将包含至少部分的免疫球蛋白恒定区，通常是人免疫球蛋白的恒定区。更多细节参见 Jones 等人，Nature 321 :522-525(1986) ；Riechmann 等人，Nature 332 :323-329(1988)； 以及 Presta，Curr :0ρ· Struct. Biol. 2 :593-596 (1992)。术语“高变区”在用于本文时指抗体中负责抗原结合的氨基酸残基。高变区包含来自“互补决定区”或“CDR”的氨基酸残基(如轻链可变区中的残基M-34 (Li)、50-56 (L2)和 89-97 (L3)及重链可变区中的 31-35 (HI)、50-65(H2)和 95-102 (H3) ；Kabat 等，Sequences of Proteins of Immunological Interest,第 5 版，Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991)和/或来自“高变环”的残基(例如轻链可变区中的残基 26-32 (Li)、50-52 (L2)和 91-96 (L3)及重链可变区中的 26-32 (Hl)、53-55 (H2) 禾口 96-101 (H3) ；Chothia 和 Lesk，J. Mol. Biol. 196 :901-917 (1987))。“构架”或 “FR” 残基指本文定义的高变区残基以外的可变区残基。
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“裸抗体(naked antibody) ”指未缀合异源分子，例如细胞毒性部分或放射性标记物的抗体(本文所定义的)。抗CD20抗体的实例包括“C2B8”，现在称作“利妥昔单抗”(“RITUXAN /MABTHERA ”)(美国专利 5，736，137)；钇-[90]-标记的 2B8 鼠抗体，称作 “Y2B8 “或“Ibritumomab Tiuxetan" (ZEVALIN ),其可从 Biogen Idec公司商购(例如、美国专利5，736，137;2B8于1993年6月22日保藏于ATCC，保藏号HBl 1388)；鼠IgG2a “Bi”，也称作“托西莫单抗(Tositumomab)，，，其任选用131I标记以产生“131I-B1”或“碘1131托西莫单抗”抗体(BEXXAR )，可从Corixa商购(还可参见，例如美国专利5，595，721)；鼠单克隆抗体“1F5” (例如I^ress等人，Blood69(2) 584-591(1987)及其变体，包括“构架缀补”或人源化1F5 (例如、W02003/002607，Leung, S. ；ATCC保藏号HB-96450)；鼠2H7和嵌合2H7抗体(例如、美国专利5，677，180) ；2H7抗体(例如、WO 2004/056312 (Lowman等人)并且如下面所列出)；靶向在B细胞的细胞膜中的 CD20 分子的 HUMAX-CD20TM(ofatumumab)全人、高亲和力抗体(Genmab，Denmark ；参见例如 Glennie 禾口 van de Winkel, Drug Discovery Today 8:503—510(2003)禾口 Cragg 等 A, Blood 101 :1045-1052(2003))；在 WO 2004/0；35607 和 W02005/103081 CTeeling 等人，GenMab/Medarex)中列出的人单克隆抗体；US2004/0093621 (Shitara等人)中描述的与Fc区结合的具有复杂N-糖苷连接的糖链的抗体；WO 2006/106959 (Numazaki等人，Biomedics公司)中所述的、对CD20抗原的胞外表位具有高结合亲和力的嵌合或人源化单克隆抗体；与CD20结合的单克隆抗体和抗原结合片段(例如、WO 2005/000901, Tedder 等人)，如 HB20-3、HB20-4、HB20-25 和 MB20-11 ；与 CD20 结合的单链蛋白，包括但不限于 TRU-015 (例如 US2005/0186216 (Ledbetter 和 Hayden-Ledbetter), US 2005/0202534(Hayden-Ledbetter 禾口 Ledbetter)、US 2005/0202028(Hayden-Ledbetter 和 Ledbetter) ；US2005/136049 (Ledbetter 等人)、US 2005/0202023 (Hayden-Ledbetter 和Ledbetter) -Trubion Pharm公司)；CD20-结合分子，例如AME抗体系列，例如如在 W 2004/103404、 US 2005/0025764 和 US 2006/0251652(Watkins 等人，Applied Molecular Evolution 公司)中列出的 AME-133 抗体和如在 W 2005/070963 (Allan 等人，Applied Molecular Evolution公司)中所述的具有Fc突变的抗CD20抗体； CD20-结合分子，例如在WO 2005/016969和US 2005/0069545 (Carr等人)中所述的那些；双特异性抗体，如例如在WO 2005/014618 (Chang等人)中列出的双特异性抗体； 人源化LL2单克隆抗体和其它抗⑶20抗体，例如在美国专利7，151，164(Hansen等人， Immunomedics ；US 2005/0106108 (Leung 禾口 Hansen ；Immunomedics)中所述的；如例如在 WO 2006/130458 (Gazit等人，Amgen/AstraZeneca)中所述的对抗CD20的全人抗体；如例如在 WO 2006/126069 (Morawala, Avestha Gengraine Technologies Pvt Ltd.)中所述的针对 CD20 的抗体；如例如在 WO 2005/044859、US 2005/0123546、US 2004/0072290 和 US2003/0175884 (Umana 等人；GlycArt Biotechnology AG)中所述的抗 CD20 的嵌合或人源化B-Lyl抗体(例如GA-101) ；A20抗体或其变体，例如嵌合或人源化A20抗体(分别为 cA20、hA20)和 IMMUN-106(例如、US2003/0219433，Immunomedics)；以及单克隆抗体 L27、 G28-2、93_1B3、B-C 1 或 NU-B2，它们得自 International Leukocyte Typing Workshop (例如 Valentine 等人，Leukocyte Typing III (McMichael 编著，第 440 页，Oxford UniversityPress (1987))。在一些实施方案中，抗CD20抗体在本文中是嵌合、人源化或人抗CD20抗体， 更优选为利妥昔单抗、2H7抗体、嵌合或人源化A20抗体(Immunomedics)和HUMAX-CD20 人抗 CD20 抗体(Genmab)。术语“利妥昔单抗”或“RITUXAN ”在本文中指抗⑶20抗原的基因工程嵌合鼠/人单克隆抗体，在美国专利号5，736，137中称作“C2B8”，包括其保持结合⑶20能力的片段。利妥昔单抗可从Genentech购买。纯粹为了本文的目的且除非另有说明，“人源化2H7”指结合人⑶20的人源化抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体在体内有效耗竭灵长类动物B细胞，该抗体在其重链可变区(VH)中至少包含来自抗人⑶20抗体的⑶R H3序列SEQ ID NO :12(图1B)和基本上人重链亚组III(VhIII)的人共有构架(FR)残基。在一些实施方案中，该抗体还包含重链 ⑶R Hl序列SEQ ID NO 10和⑶R H2序列SEQ ID NO :11，且在一些实施方案中，还包含轻链 CDR Ll 序歹Ij SEQ IDNO :4、CDR L2 序列 SEQ ID NO :5、CDR L3 序列 SEQ ID NO 6 和基本上人轻链亚组I (V I)的人共有构架(FR)残基，其中VH区可连接人IgG链恒定区，其中所述区可以是例如IgGl或IgG3。在一些实施方案中，此抗体包含VH序列SEQ ID NO :8(vl6, 如图IB所示)，任选还包含VL序列SEQ ID NO :2 (vl6，如图IA所示)，它可在重链中具有氨基酸替代D56A和mOOA以及在轻链中具有S92A(v96)。在一些实施方案中，所述抗体是包含分别为SEQ ID NO 13和14的轻链和重链氨基酸序列(如图2和3所示)的完整抗体。 在一些实施方案中，所述抗体是包含分别为SEQ ID N0:13和15的轻链和重链氨基酸序列 (如图2和4所示)的2H7. v31。本文中的抗体还可在Fc区中包含至少一个改进ADCC和 /或CDC活性的氨基酸替代，例如其中氨基酸替代是S298A/E333A/K334A的抗体，并且在一些实施方案中，具有重链氨基酸序列SEQ ID N0:15(如图4所示)的2H7. v31。任何这些抗体还可在Fc区中包含至少一个降低⑶C活性的氨基酸替代，例如包含至少替代K322A。见美国专利 6, 528，624B1 (Idusogie 等人)。术语“Ocrelizumab”在本文中是指针对⑶20抗原的基因工程人源化单克隆抗体， 其包含(a)含有氨基酸序列SEQ ID NO 13的轻链，和(b)含有氨基酸序列SEQ ID NO 14 的重链；包括其保留结合⑶20能力的片段。Ocrelizumab可得自Genentech。“分离的”抗体指已经由其天然环境的成分中鉴别出和分离和/或回收的抗体。其天然环境的污染成分指将会干扰抗体的诊断或治疗用途的物质，并且可包括酶、激素、和其它蛋白质性质或非蛋白质性质的溶质。在一些实施方案中，将抗体纯化至(1)根据Lowry方法的测定，抗体超过95%重量，且在一些实施方案中超过99%重量，(2)足以通过使用转杯式测序仪获得至少15个残基的N-末端或内部氨基酸序列的程度，或C3)达到在还原或非还原条件下SDS-PAGE以及使用考马斯蓝或(在一些实施方案中)银染得到的同质性。分离的抗体包括重组细胞内的原位抗体，因为不存在该抗体的天然环境中的至少一种成分。然而，分离的抗体通常将通过至少一个纯化步骤来制备。“受试者”或“患者”在本文中指人受试者或患者。通常，此类受试者或患者符合接受多发性硬化治疗的条件。为了本文的目的，此类符合条件的受试者或患者是正在发生、已经发生、或有可能发生多发性硬化的一种或多种征候、症状或其它指标；已经诊断有多发性硬化，无论是例如最近诊断的(具有“新发作”的MS)，先前诊断并具有新的复发或加剧的， 先前诊断并缓和的等；和/或有风险形成多发性硬化的受试者或患者。患有或有风险患上多发性硬化的受试者或患者可任选地被鉴定为这样的个体，该个体已经使用检测自身抗体的测定法针对血清、脑脊液(CSF)和/或MS损伤中CD20阳性B细胞水平升高进行过筛选或者待进行筛选、以及定性且优选地定量评估。与多发性硬化有关的示例性此类自身抗体包括抗髓鞘碱性蛋白(MBP)、抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)、抗神经节苷脂和/或抗神经丝抗体。可在受试者的血清、脑脊液(CSF)和/或MS损伤中检测此类自身抗体。“升高的”自身抗体或B细胞水平在本文中意指所述自身抗体或B细胞水平显著超过未患MS的个体的水平。如本文所用，“治疗”是用于获得有益或所需结果(包括临床结果)的方法。对于本发明的目的，有益或所需临床结果包括但不限于下列中的一种或多种减少由疾病产生的一种或多种症状、减轻疾病程度、稳定疾病(例如预防或延迟了疾病的恶化)、延迟或减慢疾病进展、改善疾病状态、减少一种或多种治疗疾病所需的其它药物的剂量、和/或增加生活质量。如本文所用，“延迟”多发性硬化的进展意味着延缓、阻碍、减速、放缓、稳定和/或推迟疾病的发展。这种延迟可以具有变化长度的时间，这取决于疾病的历史和/或被治疗的个体。如本文所用，“开始治疗时”是指在第1次暴露于多发性硬化药物(例如抗CD20 抗体)之时或之前的时期。在一些实施方案中，“开始治疗时”是在暴露于多发性硬化药物 (例如抗⑶20抗体)前约1年、9个月、6个月、3个月、2个月或1个月中的任一时间。在一些实施方案中，“开始治疗时”是与第1次暴露于多发性硬化药物(例如抗CD20抗体)同时发生、或紧在此之前。如本文所用，“基于”包括(1)评价、确定或测定如本文所述的患者特征(且优选地选择适于接受治疗的患者)；和(2)施用本文所述的治疗。MS的“症状”指受试者所发生的且指示MS的结构、功能或感觉方面的任何病态现象或偏离正常。“多发性硬化”是指以髓鞘的进行性破坏为特征的中枢神经系统的慢性且通常为致残性的疾病。国际上公认有四种形式的MS，即原发进行性多发性硬化(PPMS)、复发缓和型多发性硬化(RRMQ、继发进行性多发性硬化(SPMQ和进行性复发型多发性硬化(PRMS)。本文所用的“进行性多发性硬化”是指原发进行性多发性硬化(PPMQ、继发进行性多发性硬化(SPMS)和进行性复发型多发性硬化(PRMS)。在一些实施方案中，进行性多发性硬化的特征在于持续>6个月的神经学功能的有记录的、不可逆转的丧失，且该功能丧失不能归因于临床复发。“原发进行性多发性硬化”或“PPMS”的特征在于，从发作开始疾病渐进性的发展， 而根本没有重叠的复发和缓和。可能有疾病活动的平稳时期，且可能有较好和较坏的某些天或某些周。PPMS与RRMS和SPMS的区别在于其发作典型地在三十多岁后期或四十多岁早期，男性与女性有患此病的相同可能性，而且最初的疾病活动常常在脊髓而不是脑中。PPMS 经常转移入脑部，但较RRMS或SPMS而言损伤脑区的可能性较小。例如，PPMS患者较RRMS 或SPMS患者而言产生认知问题的可能性较小。PPMS是厭1扫描显示炎性(钆增强)损伤的可能性最小的MS亚型。该原发进行性形式的疾病影响所有多发性硬化患者的10-15%。 可依照McDonald等人，Ann Neurol 50 :121-7(2001)的标准来定义PPMS。本文中所治疗的
26PPMS受试者通常是可能或确定诊断为患有PPMS的人。“复发缓和型多发性硬化”或“RRMS”的特征在于复发(也称为病情加重)，在此期间新症状可能出现而老症状重新出现或恶化。复发之后是病情缓和期，在此期间患者完全或部分从复发期间所造成的缺陷中恢复。复发可持续数天、数周或数月，而恢复则可能是缓慢和逐步的，或者几乎是瞬间的。绝大部分MS患者首先诊断为RRMS。这通常是在他们二十多岁或三十多岁的时候，但已知早得多或晚得多的诊断。表现出此MS亚型的女性患者是男性的两倍。在复发期间，髓鞘一中枢神经系统(CNS)白质区中神经纤维(神经元)周围的保护性隔离鞘，可能被身体自身免疫系统的炎性反应所损伤。这引起广泛神经学症状，而且根据损伤的CNS区域，症状变化相当大。在复发后，炎性反应立即逐渐变弱，且CNS中一种特殊类型的神经胶质细胞(称为少突胶质细胞)发起髓鞘的重新形成-轴突周围的髓鞘可被修复的过程。很可能是此髓鞘重新形成造成了病情缓和。大约50%的RRMS患者在发病 10年内转变成SPMS。30年后，此数字升高至90%。在任何时间，此复发缓和形式疾病占所有MS患者的55%。“继发进行性多发性硬化”或“SPMS”的特征在于临床神经学损伤的稳步发展，具有或没有重叠的复发及小的缓和和平稳状态。发生SPMS的人先前将经历过RRMS时期，此时期可能已持续了在2至40年或更长时间之间的任何时长。存在的任何重叠的复发和缓和都倾向于随着时间的过去逐渐变少。从所述疾病的继发进行阶段开始，致残开始发展得比其在RRMS期间快得多，尽管这样的发展在某些个体中仍然可以是相当缓慢的。10年后， 50%的RRMS患者将发展成SPMS。到25至30年，此数字将上升至90%。SPMS倾向于与较 RRMS而言较低水平的炎性损伤形成相关，但总体病情负担持续进展。在任一时间，SPMS都占全部多发性硬化患者的30%左右。“进行性复发型多发性硬化”或“PRMS”的特征在于临床神经学损伤的稳定发展及重叠的复发和缓和。复发后会立即有显著的恢复，但在两次复发之间症状逐渐恶化。PRMS 占全部多发性硬化患者的5%左右。有些神经学家认为PRMS是PPMS的一种变体。表述“有效量”指有效改善或治疗多发性硬化的抗体(或其它药物)的量。这样的有效量通常将导致MS的征候、症状或其它指标的改善，例如降低复发率、防止伤残、减少脑MRI损伤的数目和/或体积、提高定时的25英尺走(timed 25-foot walk)、缓慢或延迟疾病的进展例如延长疾病进展的时间(例如使用扩展残疾状态量表(Expanded Disability Status Scale, EDSS))等。“抗体暴露”指接触或暴露于在约1-20天的一段时间内施用的一个或多个剂量的本文抗体。所述剂量可以一次性给予，或者在该暴露期内以固定的或无规律的间隔给予。正如本文详述的，初次和稍后(如第二次或第三次)的抗体暴露彼此在时间上隔开。术语“免疫抑制剂”在本文中用于辅助疗法时是指用于抑制或遮蔽本文所治疗哺乳动物的免疫系统的物质。这将包括抑制细胞因子生成、下调或抑制自身抗原表达、或掩蔽MHC抗原的物质。此类活性剂的实例包括2-氨基-6-芳基-5-取代的嘧啶类(见美国专利No. 4，665，077)；非留体抗炎药(NSAID)；更昔洛韦、他克莫司、糖皮质激素类例如皮质醇或醛固酮、抗炎药例如环加氧酶抑制剂、5-脂氧合酶抑制剂或白三烯受体拮抗剂；嘌呤拮抗剂，例如硫唑嘌呤或霉酚酸吗啉乙酯(MMF)；烷化剂，例如环磷酸胺；溴隐亭；达那唑； 氨苯砜；戊二醛(如美国专利4，120,649中所述，它掩盖MHC抗原)；针对MHC抗原和MHC片段的抗独特型抗体；环孢菌素A ；类固醇，例如皮质类固醇或糖皮质类固醇或糖皮质激素类似物，如泼尼松、甲泼尼龙和地塞米松；二氢叶酸还原酶抑制剂，例如甲氨喋呤(口服或皮下)；羟基氯喹；和柳氮磺吡啶；来氟米特；细胞因子或细胞因子受体拮抗剂，包括抗干扰素-α、-β或-Y抗体、抗肿瘤坏死因子-α抗体(英夫利昔单抗或阿达木单抗)、抗 TNF-α免疫黏附素(依那西普)、抗肿瘤坏死因子-β抗体、抗白介素-2抗体和抗IL-2 受体抗体；抗LFA-I抗体，包括抗⑶Ila和抗⑶18抗体；抗L3T4抗体；异源抗淋巴细胞球蛋白；泛T(pan-T)抗体，优选抗⑶3或抗⑶4/^ 抗体；含有LFA-3结合域的可溶性肽 (90年7月沈日公布的WO 90/08187)；链激酶；TGF-β ；链道酶；来自宿主的RNA或DNA ； FK506 ；RS-61443 ；脱氧精孤菌素(deoxyspergualin)；雷帕霉素；T细胞受体(Cohen等人， 美国专利 5，114，721) ；T 细胞受体片段(Offner 等人，Science 251:430-432(1991) ；WO 90/11294 ；Ianeway, Nature341 :482(1989)；和 WO 91/01133)；以及 T 细胞受体抗体(EP 340，109)，例如 T10B9。如本文所用的术语“细胞毒性剂”指抑制或阻止细胞功能和/或引起细胞破坏的物质。该术语意欲包括放射性同位素(例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re·、Sm153、Bi212、ρ32 和Lu的放射性同位素)、化疗剂、和毒素例如小分子毒素或细菌、真菌、植物或动物源的酶活毒素或其片段。“化疗剂”指可用于治疗癌症的化学化合物。化疗剂的例子包括烷化剂类，例如噻替派和CYTOXAN 环磷酰胺；烷基磺酸酯，例如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶类，例如苯佐替派(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替派(meturedopa)和乌瑞替呱(uredopa)；乙撑亚胺类(ethylenimine)和甲基蜜胺类(methylamelamine)，包括六甲蜜胺、三乙撑蜜胺、三乙撑磷酰胺、三乙撑硫代磷酸胺和三羟甲蜜胺；acetogenins(尤其是布拉他辛和布拉他辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康 (topotecan))、苔鲜抑制素；callystatin ；CC-1065 (包括其阿多来新(adozelesin)、 卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；cryptophycins (特另1J 是 cryptophycin 1 禾口 cryptophycin 8)；多拉司他汀；多卡米星(duocarmycin)(包括合成类似物 KW-2189 和 CB 1-TM1)；艾槽塞洛素(eleutherobin) ；pancratistatin ； sarcodictyin ；海绵抑素(spongistatin)；氮芥类，例如氯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、cholophosphamide、雌氮芥、异环磷酰胺、氮芥、盐酸氧化氮芥、美法仑、新氮芥、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼氮芥(prednimustine)、曲磷胺、尿嘧啶氮芥；硝基脲类，例如卡莫司汀、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素类，例如烯二炔类(enediyne)抗生素(如加利车霉素，尤其是加利车霉素 Y II 和加利车霉素 ω Il (见例如 Agnew，Chem Intl. Ed. Engl. 33 :183-186(1994))； 达内霉素(dynemicin)，包括dynemicin A ；双膦酸盐类(bisphosphonate)，例如氯膦酸盐(clodronate) ;±矣其j 波霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素(neocarzinostatin)发色团和相关色蛋白烯二炔类抗生素发色团)、阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素、 氨茴霉素(authramycin)、重氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素、cactinomycin、卡柔比星 (carabicin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌素(carzinophilin)、色霉素、方文线菌素D、柔红霉素、地托比星(detorubicin)、6_ 二氮杂-5-氧代-L-正亮氨酸、ADRIAMYCIN 多柔比星(包括吗琳代-多柔比星、氰基吗琳代-多柔比星、2-吡咯啉并-多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、依达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素例如丝裂霉素C、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素 (puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星、链黑菌素、链脲菌素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物类，例如甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物， 例如二甲叶酸、甲氨喋呤、蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙；嘌呤类似物，例如氟达拉滨、 6-巯基嘌呤、硫唑嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，例如安西他滨、阿扎胞苷(azacitidine)、 6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素类，例如卡鲁睾酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素类， 例如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，例如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷； 氨基酮戊酸；恩尿嘧啶；氨苯吖啶(amsacrine) ；bestrabucil ；比生群(bisantrene)；依达曲沙；defofamine ；地美可辛(demecolcine)；地吖醌；依洛尼塞(elfornithine)；醋酸羟吡咔唑(elliptinium acetate)；印othilone ；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟脲; 香菇多糖；氯尼达明；美登木素生物碱类(maytansinoids)，例如美登素和美登醇；安丝菌素(ansamitocin))；米托月瓜月宗(mitoguazone)；米托惠酉昆(mitoxantrone)；莫口jS达酉享；二胺硝吖啶(nitracrine)；喷司他丁 ；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸、 2-乙基酰胼；丙卡巴胼；PSK 多糖复合物(JHS Natural Products, Eugene, OR)；雷佐生(razoxane) ；rhizoxin ；西索菲兰(sizofiran)；锗螺胺；替奴佐酸(tenuazonic acid)； 三亚胺醌；2，2'，2〃 -三氯三乙胺；单端孢菌毒素(trichothecenesM尤其是T2毒素、 疣疱菌素A(verracurin Α)、杆孢菌素(roridin) A和蛇形菌素(anguidine))；乌拉坦; 长春地辛；达卡巴嗪；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷(pipobroman)； gacytosine ；阿糖胞苷(“Ara-C")；环磷酰胺；塞替派(thiotepa)；紫杉烷类(taxoid), 如TAXOL 紫杉醇(Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N. J.)、ABRAXANE 紫杉醇的不含克列莫佛(Cremophor)的、白蛋白改造的纳米颗粒剂型(American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Illinois)和 TAXOTERE 多西紫杉醇 (Rhone-Poulenc Rorer7Antonya France)；苯丁酸氮芥(chloranbucil) ；GEMZAR 吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨喋呤；钼类似物，例如顺钼和卡钼；长春碱；钼；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌；长春新碱；NAVELBINE 长春瑞滨；诺消灵(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依达曲沙；柔红霉素(daunomycin)；氨基喋呤；希罗达(xeloda)；伊班膦酸盐；CPT-Il ；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000 ；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇类，例如视黄酸；卡培他滨；以及上述任何物质的可药用的盐、酸或衍生物。 该定义还包括作用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，例如抗雌激素类和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(包括NOLVADEX 他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、keoxifene, LY117018、奥那司酮和FAREST0N托瑞米芬(toremifene)；抑制调节肾上腺中雌激素生成的芳香酶的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特、MEGASE 醋酸甲地孕酮、AROMASIN 依西美坦、福美司坦(formestanie)、法倔唑(fadrozole)、 RIVISOR 伏氯唑(vorozole)、FEMARA 来曲唑和 ARIMIDEX 阿那曲唑； 及抗雄激素类，例如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及曲沙他滨(1，3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；反义寡核苷酸，特别是抑制涉及异常细胞增殖的信号途经中的基因表达的反义寡核苷酸，所述基因例如I3KC-α、Ralf和H-Ras ；疫苗，例如基因疗法疫苗，例如ALLOVECTIN 疫苗、LEUVECTIN 疫苗和VAXID 疫苗； PROLEUKIN rlL-2 ；LURTOTECAN 拓扑异构酶 1 抑制剂；ABARELIX
rmRH ；及上述任何物质的可药用的盐、酸或衍生物。术语“细胞因子”是由一个细胞群体释放的、作为细胞间介质作用于另一细胞的蛋白质的通称。此类细胞因子的例子是淋巴因子、单核因子；白介素(IL)，例如IL-l、IL_la、 IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-IU IL-12、IL-15 ；肿瘤坏死因子，例如 TNF-α或TNF-β ；及其它多肽因子，包括LIF和kit配体(KL)。如本文所用，术语细胞因子包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质和天然序列细胞因子的生物学活性等效物，包括合成产生的小分子实体及其可药用的衍生物和盐。术语“激素”指多肽激素，通常由具有导管的腺器官分泌。激素包括例如生长激素， 例如人生长激素、N-甲硫氨酰人生长激素、和牛生长激素；甲状旁腺素；甲状腺素；胰岛素； 胰岛素原；松驰素；松驰素原(prorelaxin)；糖蛋白激素类，例如促卵泡激素(FSH)、促甲状腺激素(TSH)和促黄体生成素(LH)；催乳素、胎盘催乳激素、小鼠促性腺激素相关肽、抑制素；激活素(activin)；缪勒管抑制物质(Mullerian-inhibiting substance)；及血小板生成素。如本文所用，术语激素包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质和天然序列激素的生物学活性等效物，包括合成产生的小分子实体及其可药用的衍生物和盐。术语“生长因子”指促进生长的蛋白质，并且包括例如肝生长因子；成纤维细胞生长因子；血管内皮生长因子；神经生长因子，例如NGF-β ；血小板衍生生长因子；转化生长因子(TGF)，例如TGF-α和TGF-β ；胰岛素样生长因子-I和-II ；促红细胞生成素(EPO)； 骨诱导因子；干扰素，例如干扰素-α、_β和-γ ；以及集落刺激因子(CSF)，例如巨噬细胞 CSF (M-CSF)；粒细胞-巨噬细胞CSF (GM-CSF)、和粒细胞CSF (G-CSF)。如本文所用，术语生长因子包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质和天然序列生长因子的生物学活性等效物，包括合成产生的小分子实体及其可药用的衍生物和盐。术语“整联蛋白/整合素”指容许细胞结合和应答胞外基质并且涉及多种细胞功能例如伤口愈合、细胞分化、肿瘤细胞归巢和细胞凋亡的受体蛋白质。它们是参与细胞-胞外基质和细胞-细胞相互作用的细胞黏附受体大家族的一部分。功能性整联蛋白由非共价结合的两个跨膜糖蛋白亚基组成，称为α和β。α亚基彼此都享有一定同源性，β亚基也是如此。受体总是含有一条α链和一条β链。例子包括α 6β 1、α 3β 1、α 7β 1、LFA_1、 a 4整联蛋白等。如本文所用，术语整联蛋白包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质和天然序列整联蛋白的生物学活性等效物，包括合成产生的小分子实体及其可药用的衍生物和盐。本文中“整联蛋白拮抗剂或抗体”的例子包括LFA-I抗体，例如可从Genentech 购买的依法珠单抗(RAPTIVA ); a4整联蛋白抗体，例如可从Biogen Idee/Elan Pharmaceuticals公司购买的那他珠单抗(TYSABRI );二氮杂环苯丙氨酸衍生物 (W02003/89410)；苯丙氨酸衍生物(W02003/70709、WO 2002Λ8830、W02002/163^ 和 WO 2003/53926)；苯基丙酸衍生物(W0 2003/10135)；烯胺衍生物(W0 2001/79173)；丙酸衍生物(W0 2000/37444)；链烷酸衍生物(W0 2000/32575)；取代苯基衍生物(美国专利6，677，339和6，348，463)；芳香胺衍生物(美国专利6，369，229)；及ADAM解联蛋白结构域多肽(US2002/0042368)；针对α νβ 3整联蛋白的抗体(ΕΡ6339^)；氮桥二环氨基酸衍生物(W0 2002/02556)等。为了本发明的目的，“肿瘤坏死因子-α (TNF-α)”指包含Pennica等人，Nature 312 =721(1984)或 Aggarwal 等人，JBC 260 =2345(1985)中所述氨基酸序列的人 TNF-α 分子。" TNF-α抑制剂”在本文中指通常通过结合TNF-α和中和其活性在一定程度上抑制TNF-α的生物学功能的活性剂。本文明确涵盖的TNF抑制剂的例子是依那西普 (ENBREL )、英夫利昔单抗(REMICADE )和阿达木单抗(HUMIRATM)。“改变病情类抗风湿药”或“DMARD”的例子包括羟基氯喹、柳氮磺吡啶、甲氨喋呤、 来氟米特、依那西普、英夫利昔单抗(加上口服和皮下甲氨喋呤)、硫唑嘌呤、D-青霉胺、金 (口服)、金(肌肉内)、米诺环素、环孢菌素、葡萄球菌蛋白A免疫吸附，包括其盐和衍生物等。“非留体抗炎药”或“NSAID”的例子是乙酰水杨酸、布洛芬、萘普生、吲哚美辛、舒林酸、托美丁，包括其盐和衍生物等。“皮质类固醇”指具有类固醇的一般化学结构、模拟或提高天然存在的皮质类固醇的效果的数种合成的或天然存在的物质中之任一种。合成的皮质类固醇的例子包括泼尼松、泼尼松龙(包括甲泼尼龙)、地塞米松、糖皮质激素和倍他米松。“包装插页”用于指通常包括在治疗性产品的商品包装中的说明书，它们包含有关此治疗性产品应用的适应征、用法、剂量、施用、禁忌症、与该包装产品联合的其它治疗性产品、和/或警告的信息。“标签”在本文中用于指通常附随着药物制剂的商用包装(包括容器例如小瓶和包装插页)以及其它类型包装所包括的信息。本文提及的“约”值或参数包括(并且描述)涉及该值或参数本身的变化。例如， 提及“约X”的描述包括“X”的描述。如在本文和所附权利要求中所用，除非上下文另有明确说明，否则单数形式“一个 (种)”、“或”和“该(the)”包括复数形式。应理解，本文所述发明的各方面和变体包括“由” 和/或“主要由”该方面和变体“组成”。II.治疗方法本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，所述方法包括对所述患者施用有效量的抗CD20抗体。在一些实施方案中，本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，所述方法包括对所述患者施用有效量的抗CD20抗体，其中治疗基于具有一种或多种选自下组的特征的患者(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。在一些实施方案中，本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，条件是所述患者已经被发现具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) 一种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分，所述治疗包括对所述患者施用有效量的抗 ⑶20抗体。在一些实施方案中，本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，所述方法包括对所述患者施用有效量的抗⑶20抗体，其中所述患者在开始治疗时具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS) 大于约5分，其中有关年龄、钆染色损伤、在开始治疗前两年内EDDS的增加、MSSS、或其组合的证据指示所述患者将对用所述抗CD20抗体的治疗有反应。在一些实施方案中，本发明提供了治疗进行性多发性硬化的方法，其包括(a)选择具有一种或多种选自下组的特征的患者(i)年龄小于约阳岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分；以及(b)向由此选择的患者施用有效量的抗CD20 抗体。在一些实施方案中，本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，所述方法包括对所述患者施用有效量的抗⑶20抗体，且其中一种或多种选自下组的特征用作选择所述患者接收治疗的基础(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分，并且其中所述治疗包括向所述患者施用有效量的所述抗CD20抗体。本发明还提供了治疗患者中的多发性硬化的方法，其包括向所述患者施用有效量的ocrelizumab以提供约0. 3克至约0. 6克的初次ocrelizumab暴露，随后是约0. 3克至约0. 6克的第二次ocrelizumab暴露，其中直到距初次暴露约16至60周时才提供所述第二次暴露，并且每次ocrelizumab暴露是作为一剂或两剂ocrelizumab提供给患者的。在一些实施方案中，所述初次ocrelizumab暴露是约0. 6克。在一些实施方案中，所述第二次 ocrelizumab暴露是约0. 6克。在一些实施方案中，距初次暴露约M周时施用第二次暴露。 在一些实施方案中，一次或多次ocrelizumab暴露以一剂ocrelizumab的形式向患者提供。 在一些实施方案中，一次或多次ocrelizumab暴露以两剂ocrelizumab的形式向患者提供。 在一些实施方案中,所述两剂ocrelizumab包含约0. 3克ocrelizumab。本发明还提供了评价和/或预测进行性多发性硬化患者对抗CD20抗体治疗的反应性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了评价进行性多发性硬化患者是否会对用CD20 抗体的治疗有反应的方法，所述方法包括评价一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS) 增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分，其中所述一种或多种特征在患者中表明该患者将对所述治疗有反应。在一些实施方案中，本发明提供了评价进行性多发性硬化患者是否会对用CD20 抗体的治疗有反应的方法，所述方法包括(a)评价一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表 (EDSS)增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分；(b)实施算法以确定所述患者对所述治疗有反应；和(c)记录特异于该测试患者的结果。
在一些实施方案中，本发明提供了治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，所述方法包括(a)评价一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(iv) 多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分，其中基于患者具有一种或多种选自下组的特征，而选择该患者进行治疗(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分；和(b)通过向所选患者施用有效量的抗CD20抗体来治疗该所选患者。在一些实施方案中，本发明提供了为进行性多发性硬化患者和/或患者人群选择疗法的方法，所述方法包括(a)评价一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁， (ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分；和(b)如果所述患者或患者人群具有一种或多种选自下组的特征，则选择抗CD20抗体用于治疗(i)年龄小于约阳岁，( ) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始抗CD20治疗前两年内扩展残疾状态量表 (EDSS)增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。在一些实施方案中，本发明提供了用于预测进行性多发性硬化患者是否会对抗 CD20抗体有反应的方法，所述方法包括评价一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约阳岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分，其中年龄、钆染色损伤、 在开始治疗前两年内EDDS的增加、MSSS或其组合指示所述患者将对所述抗CD20抗体有反应。在一些实施方案中，本发明提供了鉴定有可能对抗CD20抗体治疗有反应的进行性多发性硬化患者的方法，所述方法包括(a)评价一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表 (EDSS)增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分；以及(b)鉴定具有一种或多种选自下组的特征的患者(i)年龄小于约阳岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。在本文所述的治疗、评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤， 和(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分。在本文所述的评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述方法还包括向患者提供建议。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者具有一种以上选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤， (c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者具有两种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分。在一些实施方案中，所述患者具有三种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，和(c)在开始治疗前两年内EDSS增加至少约1分。在一些实施方案中，所述患者具有(a)年龄小于约55岁，(b) 一种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1 分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。在一些实施方案中，所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。在一些实施方案中，当开始治疗时，所述患者和/或患者人群未被诊断为复发缓和型多发性硬化。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者和/或患者人群还在样品中具有炎症迹象。炎症迹象通过评价一种或多种炎症指标来指示。该样品可以是任何适于评价炎症的样品。在一些实施方案中，该样品为组织或体液。在一些实施方案中，该体液样品为脑脊液样品。在一些实施方案中，炎症迹象由升高的 IgG指数指示。在一些实施方案中，炎症迹象由通过等电聚焦检测的IgG寡克隆带指示。在一些实施方案中，炎症迹象通过MRI检测。在一些实施方案中，炎症迹象通过Gd增强损伤或T2损伤的存在来检测。其它评价炎症迹象的方法在本领域中是已知的。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，在一段时间内EDSS的变化。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，在开始抗⑶20抗体治疗前两年内EDSS增加至少约1分、 1. 25分、1. 5分、1. 75分、2分、2. 25分、2. 5分、2. 75分或3分中的任一个分值。在一些实施方案中，EDSS增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约1. 5分。在一些实施方案中，在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其不到约5年、6年、7年、8年、9年、10年、11年、12年、13年、14年、 15年、16年、17年、18年、19年或20年中的任一时间已经具有大于约5. 0的EDSS。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其不到约15年已经具有大于约5. 0的 EDSS。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其不到约5年、6年、7年、 8年、9年、10年、11年、12年、13年、14年或15年中的任一时间已经具有小于或等于约5. 0 的EDSS。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其不到约10年已经具有小于或等于约5.0的EDSS。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其EDSS在约1. 5分至7分、1. 5分至6. 5分、2分至6. 5 分、或3分至6. 5分中的任一范围中。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，当开始治疗时其EDSS在约3. 0至约6. 5之间。在本文所述的治疗、评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其MSSS为大于约6、7、8或9中的任一个。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其MSSS大于约9。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征还在于，在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征还在于，在开始治疗前两年内具有2次、3 次、4次或5次中的任一次数的复发。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于年龄。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其年龄小于约55岁、54岁、53岁、52岁、51岁或50岁中的任一岁数。在一些实施方案中，所述患者和/或患者人群的特征在于，其年龄小于约51岁。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述治疗减少达到确认的疾病进展的时间。在一些实施方案中，确认的疾病进展是持续约4 周、8周、12周、16周、20周、24周、28周或32周的EDSS增加。在一些实施方案中，所述确认的疾病进展是维持12周的EDSS增加。在一些实施方案中，所述确认的疾病进展是维持 24周的EDSS增加。在本文所述的治疗以及评价和/或预测反应性的任何方法的一些实施方案中，所述抗CD20抗体包括a)含有SEQ ID NO :10、SEQ ID NO 11和SEQ ID NO 12的重链可变区，和b)含有SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5和SEQ ID NO 6的轻链可变区。在本文所述的任何方法的一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ocrelizumab。在本文所述的任何方法的一些实施方案中，所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。在本文所述的任何方法的一些实施方案中，所述抗CD20抗体是ofatumumab。在本文所述的任何方法的一些实施方案中，所述抗 ⑶20抗体是TRU-015或SBI-087。在本文所述的任何方法的一些实施方案中，所述抗⑶20 抗体是GAlOl。在本文所述的任何方法的一些实施方案中，所述抗CD20抗体是hA20。本文所述的方法可包括本文所述的实施方案的任何组合。例如，方法包括治疗方法以及评价和/或预测的方法，其中患者具有(a)小于约55岁的年龄和(b) —种或多种钆染色损伤。III.剂量根据本文所述的任何方法或产品的一些实施方案，所述方法或说明书包括向多发性硬化患者施用有效量的抗⑶20抗体以提供约0. 3克至约4克(优选约0. 3克至约1. 5 克、例如约0. 6克或约1. 0克)的初次抗体暴露，随后是约0. 3克至约4克(优选约0. 3克至约1. 5克、例如约0. 6克或约1. 0克)的第二次抗体暴露，其中直到距初次抗体暴露约16 至60周时才提供第二次抗体暴露。为了本发明的目的，所述第二次抗体暴露指在初次抗体暴露之后用抗CD20抗体治疗患者的下一时间，其中在初次暴露与第二次暴露之间没有居间的抗CD20抗体治疗或暴露。在一些实施方案中，初次抗体暴露和/或第二次抗体暴露是约0. 3克、0. 4克、0. 5克、0. 6克、0. 7克、0. 8克、0. 9克或1. 0克之任一。初次与第二次或随后的抗体暴露之间的间隔可以从初次抗体暴露的第一剂或第二剂开始算起，但是在一些实施方案中，从初次抗体暴露的第一剂开始算起。在一些实施方案中，抗体暴露间隔约M周或6个月；或间隔约48周或12个月。在一些实施方案中，直至距初次暴露约20至30周时才提供第二次抗体暴露，任选地随后提供约0. 3克至4克(优选约0. 3克至约1. 5克)的第三次抗体暴露，所述第三次抗体暴露直至距初次暴露约46至60周(优选约46至M周)时才实施，在一些实施方案中，然后，直至距初次暴露至少约70-75周才提供进一步抗体暴露。在一些实施方案中，第
35三次抗体暴露为约0. 3克、0. 4克、0. 5克、0. 6克、0. 7克、0. 8克、0. 9克或1. 0克之任一。在替代实施方案中，第二次抗体暴露直至距初次暴露约46至60周时才提供，并且随后的抗体暴露，如果有的话，直至距前次抗体暴露约46至60周时才提供。所述抗体暴露中的任何一次或多次暴露可以作为单剂抗体或者作为分开的两剂抗体(即，由第一剂和第二剂组成)提供给患者。每次抗体暴露所采用的具体剂数(无论是一剂或两剂)取决于例如所治疗MS的类型、所采用抗体的类型、是否采用第二药物或采用哪种类型第二药物、及施用的方法和频率。在施用两个分开剂量时，优选第二剂在距施用第一剂的时间约3-17天、更优选约6-16天、且最优选约13-16天时施用。在一些实施方案中，当施用两个分开剂量时，第二剂为约14天。当施用两个分开剂量时，第一剂和第二剂抗体优选为约0. 3克至1. 5克，更优选为约0. 3克至约1. 0克。在一些实施方案中，当施用两个分开剂量时，第一剂和第二剂抗体为约0. 3克、0. 4克、0. 5克或0. 6克中的任一种。 在一些实施方案中，所述初次ocrelizumab暴露包含第一剂和第二剂的ocrelizumab，其中 ocreIizumab的第一剂和第二剂是约0. 3克。在一些实施方案中，所述第二次ocrelizumab 暴露包含单剂ocrelizumab，其中所述单剂ocrelizumab是0. 6克。在一些实施方案中，给患者提供至少约3次、至少约4次或至少约5次抗体暴露， 例如约3-60次暴露，且更特别的是约3-40次暴露，最特别的是约3-20次暴露。在任何方法的一些实施方案中，该方法还包括提供约1次至约3次后续的ocrelizumab暴露。在一些实施方案中，该暴露以各约M周或6个月或者48周或12个月的间隔施用。在一些实施方案中，每次抗体暴露是作为单一剂量的抗体提供的。在替代实施方案中，每次抗体暴露是作为两个分开剂量的抗体提供的。然而，不是每次抗体暴露都需要作为单一剂量或两个分开剂量提供。抗体可以是裸抗体，或者可以缀合另一分子，例如细胞毒性剂，如放射性化合物。 在一些实施方案中，抗体是利妥昔单抗、人源化2H7(例如包含SEQ ID NO :2和8中的可变域序列)或包含SEQ ID NO :23和对中的可变域序列的人源化2H7、或HuMax-CD20(Genmab)。 在一些实施方案中，所述抗体是ocrelizumab (例如，包含(a)含有SEQ ID N0:13的氨基酸序列的轻链；和(b)含有SEQ ID NO 14的氨基酸序列的重链)。在一个实施方案中，患者先前从未用例如免疫抑制剂等药物处理以治疗多发性硬化和/或先前从未用针对B细胞表面标志的抗体治疗过(例如先前从未用CD20抗体治疗过)。抗体可以以任何合适方式施用，包括肠胃外、局部、皮下、腹膜内、肺内、鼻内和/ 或损伤内施用。肠胃外输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。还考虑鞘内施用(参阅例如美国专利申请 2002/0009444，Grillo-Lopez, A concerning intrathecal delivery of a⑶20antibOdy)。此外，还可通过脉冲输注来合适地施用抗体，例如用剂量逐渐减少的抗体。在一些实施方案中，静脉内、皮下或鞘内给药。在一些实施方案中，通过静脉内输注给药。虽然CD20抗体可以是为了治疗多发性硬化而施用于患者的唯一药物，但是可任选伴随着结合B细胞表面标志的抗体(例如伴随着CD20抗体)而施用第二药物，例如细胞毒性剂、化疗剂、免疫抑制剂、细胞因子、细胞因子拮抗剂或抗体、生长因子、激素、整联蛋白、整联蛋白拮抗剂或抗体(例如LFA-I抗体，例如可从Genentech购得的依法珠单抗(RAPTIVA )或 α 4 整联蛋白抗体，例如可从 Biogen Idee/Elan Pharmaceuticals 公司购得的那他珠单抗(TYSABRI )等。 在联合疗法的一些实施方案中，抗体可联合以下药物干扰素类药物，例如 IFN- β -la ( REBIF 和 AVONEX )或 IFN- β -lb (BETASERON );寡肽，例如醋酸格拉默(COPAXONE );细胞毒性剂，例如米托蒽醌(NO VANTRONE )、
甲氨喋呤、环磷酰胺、苯丁酸氮芥或硫唑嘌呤；静脉内免疫球蛋白(Y球蛋白)；淋巴细胞耗竭性疗法，例如米托蒽醌、环磷酰胺、Campath、抗CD4、克拉屈滨、全身辐射、骨髓移植； 皮质类固醇(例如甲泼尼龙、泼尼松、地塞米松或糖皮质激素)，包括全身性皮质类固醇疗法；非淋巴细胞耗竭性免疫抑制性疗法(例如，霉酚酸吗啉乙酯(MMF)或环孢菌素)；“他汀”类降胆固醇药物，其包括西立伐他汀(BAYCOL )、氟伐他汀(LESCOL )、阿托伐他汀(LIPITOR )、洛伐他汀(MEVACOR )、普伐他汀(PRAVACHOL )、 辛伐他汀(ZOCOR );雌二醇；睾酮(任选以提高的剂量；Stuve等人，Neurology 8 290-301(2002))；激素替代疗法；用于MS继发的或相关的症状(例如痉挛、失禁、疼痛、疲劳)的治疗；TNF抑制剂；改变病情抗风湿药(DMARD)；非甾体抗炎药(NSAID)；血浆去除术； 左旋甲状腺素；环孢菌素A ；促生长素抑制素类似物；细胞因子或细胞因子受体拮抗剂；抗代谢物；免疫抑制剂；康复性手术(rehabilitative surgery)；放射碘；甲状腺切除术；其它B细胞表面拮抗剂/抗体等。 第二药物伴随着CD20抗体的初次暴露和/或随后暴露施用，此类联合施用包括使用分开的制剂或单一的药用制剂的共施用，以及任一次序的连续施用，其中优选有一段时间两种(或所有)活性剂同时发挥其生物学活性。除对患者施用抗体外，本申请考虑通过基因疗法来施用抗体。表述施用“有效量” 的抗体涵盖编码抗体的核酸的施用。参见例如1996年3月14日公布的WO 96/07321，它关注通过基因疗法来生成胞内抗体。有两种主要方法使核酸(任选包含在载体中)进入患者的细胞，即体内和离体(ex vivo)。对于体内投递，通常在需要抗体的部位将核酸直接注射到患者体内。对于离体治疗， 移出患者的细胞，将核酸导入这些分离的细胞，并将经过修饰的细胞或是直接施用于患者， 或是例如包封在多孔膜内并植入患者体内(参见例如美国专利4，892，538和5，283, 187)。 有多种技术可用于将核酸导入活细胞。这些技术根据是将核酸转移至体外培养细胞还是预期宿主的体内细胞而有所变化。适于在体外将核酸转移到哺乳动物细胞中的技术包括使用脂质体、电穿孔、显微注射、细胞融合、DEAE-葡聚糖、磷酸钙沉淀法等。常用于离体递送基因的载体是逆转录病毒。在一些实施方案中，体内核酸转移技术包括用病毒载体(例如腺病毒、I型单纯疱疹病毒或腺伴随病毒)和基于脂质的系统(可用于脂质介导的基因转移的脂质有例如 D0TMA、DOPE和DC-Chol)进行的转染。在有些情况中，希望与靶向靶细胞的试剂一起提供核酸源，例如对细胞表面膜蛋白或靶细胞特异的抗体、靶细胞上受体的配体等。在采用脂质体时，与胞吞作用相关的细胞表面膜蛋白结合的蛋白质可用于靶向和/或促进摄入， 例如对特定细胞类型具有向性的衣壳蛋白或其片段、在循环中进行内在化的蛋白质的抗体、和靶向细胞内定位和增加细胞内半衰期的蛋白质。例如mi等人，J. Biol. Chem. 262 4429-4432(1987)；以及 Wagner 等人，Proc. Natl. Acad. ki. USA 87:3410-3414(1990)中描述了受体介导的胞吞技术。关于目前已知的基因标记和基因疗法方案的综述参见Anderson 等人dcience 256:808-813(1992)。还可参见W093/25673及其引用的参考文献。IV.抗体及其生产本发明的方法和产品使用或并入结合B细胞表面标志的抗体，尤其是结合CD20的抗体。因此，本文将描述用于生成此类抗体的方法。将用于生成或筛选抗体的B细胞表面标志可以是例如包含所需表位的所述标志的可溶形式或其部分。或者/另外，在其细胞表面表达所述标志的细胞可用于生成或筛选抗体。可用于生成抗体的其它形式的B细胞表面标志对本领域熟练技术人员是显而易见的。下面的描述例示了用于生产依照本发明使用的抗体的技术。⑴多克隆抗体多克隆抗体优选通过在动物中多次皮下(sc)或腹膜内(ip)注射相关抗原和佐剂来生成。可能有用的是，使用双官能或衍生化试剂，例如马来酰亚胺苯甲酰磺基琥珀酸亚胺酯(通过半胱氨酸残基缀合)、N_羟基琥珀酰亚胺(通过赖氨酸残基)、戊二醛、琥珀酸酐、 SOCl2或R1N = C = NR(其中R和R1是不同的烷基)，将相关抗原与在待免疫的物种中有免疫原性的蛋白质，例如匙孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin)、血清白蛋白、牛甲状腺球蛋白或大豆胰蛋白酶抑制剂偶联。可以通过如下方式将动物针对抗原、免疫原性缀合物或衍生物进行免疫将例如 100 μ g或5 μ g蛋白质或缀合物(分别用于兔或小鼠)与3倍体积的弗氏完全佐剂混和，并将该溶液皮内注射于多个部位。一个月后，通过多个部位的皮下注射，用弗氏完全佐剂中的 1/5-1/10初始量的肽或缀合物对动物进行强化。7-14天后，采集动物的血液，并测定血清的抗体滴度。对动物进行加强免疫直到滴度达到平台。在一些实施方案中，将动物用与不同蛋白质缀合的和/或通过不同交联剂缀合的相同抗原的缀合物进行强化。缀合物还可在重组细胞培养物中作为蛋白质融合物来制备。此外，聚集剂例如明矾也适用来增强免疫应答。(ii)单克隆抗体单克隆抗体是由一群基本上同质的抗体获得的，即构成群体的各个抗体，除了在生产单克隆抗体的过程中可能产生的变异外，相同和/或结合相同表位，其中所述变异通常以很少量存在。由此，修饰语“单克隆”表示抗体的如下特征，即其不是无联系的或多克隆的抗体的混合物。例如，单克隆抗体可以通过最初由Kohler等人，Nature 256 :495(1975)描述的杂交瘤方法来制备，或者可通过重组DNA方法来制备(美国专利4，816，567)。在杂交瘤方法中，如上所述免疫小鼠或其它合适的宿主动物，例如仓鼠，以引发生成或能够生成如下抗体的淋巴细胞，所述抗体将特异性结合用于免疫的蛋白质。或者，可以在体外免疫淋巴细胞。然后，使用合适的融合剂例如聚乙二醇将淋巴细胞与骨髓瘤细胞
(Goding, Monoclonal Antibodies principles and Practice,H 59-103 页(Academic Press，1986))。将如此制备的杂交瘤细胞在合适的培养基中接种和培养，所述培养基优选含有抑
38制未融合的亲本骨髓瘤细胞生长或存活的一种或多种物质。例如，如果亲本骨髓瘤细胞缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT或HPRT)，则用于杂交瘤的培养基通常将含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸苷(HAT培养基)，这些物质阻止缺乏HGPRT的细胞生长。在一些实施方案中，骨髓瘤细胞是那些高效融合、支持所选抗体生产细胞稳定的高水平生成抗体、并对例如HAT培养基等培养基敏感的骨髓瘤细胞。其中，在一些实施方案中，骨髓瘤细胞系是鼠源骨髓瘤系，例如可从Institute Cell Distribution Center (San Diege, California, USA)购得的 M0PC-21 和 MPC-11 小鼠肿瘤的衍生系，以 ^nTyyvAmerican Type Culture Collection(Rockville, Maryland, USA) Wi^ SP-2 X63-Ag8-653细胞。用于生成人单克隆抗体的人骨髓瘤和小鼠-人杂交骨髓瘤细胞系也已有描述(Kozbor, J. Immunol.，133 :3001(1984) ；Brodeur 等人，Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications,第 51-63 页(Marcel Dekker 公司，New York, 1987))。测定生长杂交瘤细胞的培养基，确定抗抗原的单克隆抗体的生成。在一些实施方案中，通过免疫沉淀或通过体外结合测定法，例如放射性免疫测定法(RIA)或酶联免疫吸附测定法(ELISA)，测定由杂交瘤细胞生成的单克隆抗体的结合特异性。单克隆抗体的结合亲和力可通过例如Munson等人，Anal. Biochem. 107 220(1980)的katchard分析来测定。在鉴定得到生成具有所需特异性、亲和力和/或活性的抗体的杂交瘤细胞后， 所述克隆可通过有限稀释法进行亚克隆，并使用标准方法进行培养(Goding，Monoclonal Antibodies :Principles and Practice,第 59-103 页(Academic Press, 1986))。适于这个目的培养基包括例如D-MEM或RPMI-1640培养基。另外，杂交瘤细胞可在动物中作为腹水瘤体内生长。适宜地，可通过常规免疫球蛋白纯化法，例如蛋白A-kpharose，羟基磷灰石层析、 凝胶电泳、透析或亲和层析，将亚克隆分泌的单克隆抗体与培养基、腹水或血清分开。编码单克隆抗体的DNA易于通过常规流程分离并测序(例如使用能够特异性结合编码鼠源抗体重链和轻链的基因的寡核苷酸探针)。在一些实施方案中，以杂交瘤细胞作为此类DNA的来源。一旦分离，可将DNA置于表达载体中，然后将该表达载体转染到宿主细胞中，例如原本不产生免疫球蛋白蛋白质的大肠杆菌细胞、猿猴COS细胞、中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞或骨髓瘤细胞，以在重组宿主细胞中获得单克隆抗体的合成。关于编码抗体的 DNA在细菌中的重组表达的综述性论文包括Skerra等人，Curr. Opinion in Immunol.，5 256-262(1993)和 Pluckthun, Immunol. Revs.，130 151-188(1992)。在另一个实施方案中，可从使用McCafferty 等人，Nature, 348 =552-554(1990) 所述技术构建的抗体噬菌体文库中分离抗体或抗体片段。Clackson等人，Nature, 352 624-628(1991)和 Marks 等人，J. Mol. Biol.，222 :581-597 (1991)分别描述了使用噬菌体文库分离鼠和人抗体。后续出版物描述了通过链改组(Marks等人，Bio/Technology, 10 :779-783(1992)),以及组合感染和体内重组作为构建非常大的噬菌体文库的策略 (Waterhouse 等人，Nuc. Acids. Res. ,21 :2265-2266 (1993))，生成高亲和力(nM 范围)的人抗体。由此，这些技术是可以用于分离单克隆抗体的传统单克隆抗体杂交瘤技术的可行替代方法。
还可以修饰DNA，例如用人重链和轻链恒定域的编码序列替代同源鼠序列(美国专利 4，816，567 ；Morrison 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81 :6851 (1984))，或共价连接该免疫球蛋白编码序列和非免疫球蛋白多肽的整个或部分编码序列。通常，用此类非免疫球蛋白多肽替代抗体的恒定域，或者用它们替代抗体的一个抗原结合位点的可变域，以产生嵌合二价抗体，它包含对一种抗原具有特异性的一个抗原结合位点以及对不同抗原具有特异性的另一个抗原结合位点。(iii)人源化抗体本领域已经描述了用于将非人抗体人源化的方法。在一些实施方案中，人源化抗体具有引入其中的一个或多个来自非人来源的氨基酸残基。这些非人氨基酸残基常常称作“输入”残基，它们通常取自“输入”可变域。人源化可基本上依照Winter及其同事的方法进行(Jones 等人，Nature, 321 :522-525(1986) ；Riechmann 等人，Nature, 332 323-327(1988) ；Verhoeyen 等人，Science, 239 :1534-1536 (1988))，通过用高变区序列替代相应的人抗体序列。因此，此类“人源化”抗体是嵌合抗体(美国专利4，816，567)，其中基本上少于整个人可变域用来自非人物种的相应序列替代。在实残中，人源化抗体通常是其中一些高变区残基和可能的一些FR残基用来自啮齿类抗体中类似位点的残基替代的人抗体。用于制备人源化抗体的人可变域的选择，包括轻链和重链，对于降低抗原性非常重要。根据所谓的“最佳匹配(best-fit)”法，用啮齿类抗体可变域序列对整个的已知人可变域序列文库进行筛选。然后选择与啮齿类动物的序列最接近的人序列作为人源化抗体的人构架区(FR) (Sims 等人，J. Immunol.，151 :2296(1993) ；Chothia 等人，J. Mol. Biol.，196 901(1987))。另一种方法使用由具有特定轻链或重链可变区亚组的所有人抗体的共有序列衍生的特定构架区。相同构架可用于数种不同的人源化抗体(Carter等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89 :4285 (1992) ；Presta 等人，J. Immunol.，151 :2623 (1993))。此外重要的是，抗体在人源化后保持对抗原的高亲和力以及其它有利的生物学特性。为了实现这一目的，在各方法的一些实施方案中，使用亲本和人源化序列的三维模型， 分析亲本序列和各种概念性人源化产物，以制备人源化抗体。三维免疫球蛋白分子模型是通常可获得的，且为本领域熟练技术人员所熟悉。还可获得用于图解和显示所选候选免疫球蛋白序列的可能三维构象结构的计算机程序。通过检查这些显示结果，允许分析残基在候选免疫球蛋白序列的功能行使中的可能作用，即分析影响候选免疫球蛋白结合其抗原的能力的残基。这样，可从受体和输入序列中选出FR残基并进行组合，从而获得所需抗体特征，例如对靶抗原的亲和力提高。通常，高变区残基直接且最实质地影响抗原结合。在一些实施方案中，人源化抗⑶20抗体是人源化2H7抗体。在一些实施方案中， 该人源化2H7抗体优选包含以下CDR序列中的一个、两个、三个、四个、五个或六个CDR Ll 序列 RASSSVSYXH，其中 X 是 M 或 L(SEQ ID NO. 18)，例如 SEQ ID NO :4(图 1A)、SEQ ID NO 5 的 CDR L2 序列(图 1A)、CDR L3 序列 QQWXFNPPT，其中 X 是 S 或 A (SEQ ID N0. 19)，例如 SEQ ID NO :6 (图 1A)、SEQ ID NO 10 的 CDR Hl 序列(图 1B)、
AIYPGNGXTSYNQKFKG 的 CDR H2 序列，其中 X 是 D 或 A (SEQ ID NO. 20)，例如 SEQ ID NO 11(图 1B)，和VVYYSXXYffYFDV的CDR H3序列，其中在6位的X是N、A、Y、W或D，且7位的X是S 或 R (SEQ ID NO. 21)，例如 SEQ ID NO :12(图 1B)。上述⑶R序列通常存在于人轻链和重链可变构架序列，例如基本上人轻链κ亚组 I(Vl6I)的人共有FR残基，以及基本上人重链亚组III的人共有FR残基(VhIII)中。还参见 WO 2004/056312 (Lowman 等人)。在一些实施方案中，可将重链可变区连接至人IgG链恒定区，其中该区域可以是例如IgGl或IgG3，包括天然序列和变体恒定区。在一些实施方案中，此类抗体包含SEQ ID NO 8的重链可变域序列(vl6，如图IB 所示)，任选还包含SEQ ID NO 2的轻链可变域序列(vl6，如图IA所示)，其任选包含在重链可变域中的56、100和/或IOOa位的一个或多个氨基酸替代(例如D56A、N100A或WOOY 和/或SlOOaR)，以及在轻链可变域中的32和/或92位的一个或多个氨基酸替代(例如 M32L和/或S92A)。在一些实施方案中，该抗体是完整抗体，其包含SEQ ID NO. 13或16的轻链氨基酸序列以及SEQ ID N0. 14、15、17、22或25的重链氨基酸序列。在一些实施方案中，该人源化 2H7 抗体是 ocrelizumab (Genentech)。在一些实施方案中，人源化2H7是完整抗体或抗体片段，其包含轻链可变序列
DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTTTCRASSSVSYMHWYQQKPGKAPKPLIYAPSNLAS GVPSRFSGSGSGT DFTLTISSLQPEDFATYYCQQWSFNPPTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO 2)；和重链可变序列EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFTSYNMHWVRQAPGKGLEWVGAIYP GNGDTSYNQKFKGRF TISVDKSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVVYYSNSY WYFDVffGQGTLVTVSS(SEQ ID NO 8).在一些实施方案中，人源化2H7抗体是完整抗体，在一些实施方案中，其包含轻链氨基酸序列DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTTTCRASSSVSYMHWYQQKPGKAPKPLIYAPSNLAS GVPSRFSGSGSGT DFTTISSLQPEDFATYYCQQWSFNPPTFGQGTKVEIKRTVAA PSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAK VQffKVDNALQSGNSQESVTEQD SKDSTYSLSSTTLSKADYEK HKVYACEVTHQGLSSPVTKSNRGEC(SEQ ID NO 13)；和重链氨基酸序列EVQLVESGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFTSYNMHWVRQAPGKGLEWVGAIYP GNGDTSYNQKFKGR FTISVDKSKNTLYLQMNSRAEDTAVYYCARVVYYSNSY WYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTS GGTAALGCLVKDYFPEPVT VSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT K VDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDV SHEDPEVKFNffYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPS REEMTKNQVSLTCLVKGFY PSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSV MHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID N0:14)或重链氨基酸序列EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFTSYNMH WVRQAPGKGLEffVGAIYP GNGDTSYNQKFK GGRFTISVDKSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVVYYSNSY WYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVT VSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPS NTK VDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDV SHEDPEVKFNffYVD GVEVHNAKTKPREEQYNATYRVVSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKALPAPIAATISKAKGQPREPQVYTLPPS REEMTKNQVSLTCLVKGFY PSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFFSCSV MHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO: 15). 在一些实施方案中，人源化2H7抗体包含2H7. v511轻链可变域序列 DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASSSVSYLHWYQQKPGKAPKPLIYAPSNLASG VPSRFSGSGSGT
DFTLTISSLQPEDFATYYCQQWAFNPPTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO :23)和2H7. v511重链可变域序列EVQLVESGGGLVQPGSLRLSCAASGYTFTSYNMHWVRQAPGKGLEWVGAIYP GNGATSYNQKFKGRFT ISVDKSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVVYYSYRY WYFDVffGQGTLVTVSS(SEQ ID NO. 24).在一些实施方案中，人源化2H7. v511抗体是完整抗体，其可包含轻链氨基酸序列DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASSSVSYLHWYQQKPGKAPKPLIYAPSNLASG VPSRFSGSGSGT DFTLTISSLQPEDFATYYCQQWAFNPPTFGQGTKVEIKRTVAAP SVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAK VQffKVDNALQSGNSQESVTEQDS KDSTYSLSSTLTLSKADYEKH KVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO 16)和SEQ ID NO. 17的重链氨基酸序列或EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSAASGYTFTSYNMHWVRQAPGKGLEWVGAIYP GNGATSNQKFKGRF TISVDKSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVVYYSYRY WYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTS GGTAALGCLVKDYFPEPVT VSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT K VDKKVE PKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDV SHEDPEVKFNffYVD GVEVHNAKTKPREEQYNATYRVVSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNAALPAPIAATISKAKGQPREPQVYTLPP SREEMTKNQVSLTCLVKGFY PSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSV MHEALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO. 25).在一些实施方案中，本文的抗体还可包含提高ADCC活性的Fc区中的至少一个氨基酸替代，例如其中使用重链残基的Eu编号，氨基酸替代为在298、333和334位(优选 S298A、E333A和K334A)。还参见US专利6，737，056B1, Presta0这些抗体中的任一种可包含提高Fcfoi结合或血清半衰期的Fc区中的至少一个替代，例如在重链位置434的替代，例如N434W。还参见美国专利6，737，056Bl，Presta。这些抗体中的任一种还可包含增加⑶C 活性的Fc区中的至少一个氨基酸替代，例如包含至少一个在位置326的替代(优选K326A 或K326W)。还参见美国专利6，528，624B1 (Idusogie等人)。在一些实施方案中，人源化2H7变体是包含SEQ ID NO 2的轻链可变域和SEQ ID NO 8的重链可变域的那些，包括Fc区(如果存在)中有替代或没有替代的那些，以及包含在SEQ ID NO 8中具有变化N100A ；或D56A和WOOA ；或D56A、N100Y和SlOOaR的重链可变域和在SEQ ID NO 2中具有变化M32L ；或S92A ；或M32L和S92A的轻链可变域的那些。 2H7. vl6的重链可变域中的M34已经被鉴定为抗体稳定性的潜在源，并且是另一潜在的进行替代的候选者。在本发明的一些实施方案中，基于2H7. vl6的变体的可变区包含vl6的氨基酸序
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说明书
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列，但是具有在示于下表的位置的氨基酸替代。除非另有说明，否则2H7变体将具有与vl6 相同的轻链。 表1 示例性人源化2H7抗体变体
权利要求
1.一种治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，其包括对所述患者施用有效量的抗 CD20抗体，其中治疗基于具有一种或多种选自下组的特征的患者(a)年龄小于约55岁， (b) 一种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。
2.权利要求1的方法，其中所述进行性多发性硬化是原发进行性多发性硬化。
3.权利要求1的方法，其中所述进行性多发性硬化是继发进行性多发性硬化。
4.权利要求1的方法，其中所述进行性多发性硬化是进行性复发型多发性硬化。
5.权利要求1的方法，其中当开始治疗时，所述患者未被诊断为复发缓和型多发性硬化。
6.权利要求1的方法，其中所述患者在样品中还具有炎症迹象。
7.权利要求6的方法，其中所述样品是脑脊髓液样品。
8.权利要求7的方法，其中炎症迹象由升高的IgG指数指示。
9.权利要求7的方法，其中炎症迹象由通过等电聚焦检测的IgG寡克隆带指示。
10.权利要求1的方法，其中所述患者不到约15年已经具有大于约5.0的EDSS。
11.权利要求1的方法，其中所述患者不到约10年已经具有小于或等于约5.0的EDSS。
12.权利要求1的方法，其中所述在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。
13.权利要求1的方法，其中EDSS的增加为在开始治疗之前两年内EDSS增加至少约 1. 5 分。
14.权利要求13的方法，其中所述在开始治疗前两年内EDSS的增加不归因于复发。
15.权利要求1的方法，其中所述患者的年龄小于约51岁。
16.权利要求1的方法，其中所述患者还在开始治疗前两年内具有两次或更多次复发。
17.权利要求1的方法，其中当开始治疗时EDSS为约3.0至约6. 5。
18.权利要求1的方法，其中治疗减慢达确认的疾病进展的时间。
19.权利要求18的方法，其中确认的疾病进展是持续12周的EDSS增加。
20.权利要求18的方法，其中确认的疾病进展是持续M周的EDSS增加
21.权利要求1的方法，其中所述抗CD20抗体包括a)重链可变区，其包含含有SEQID NO 10, SEQ ID N0:11禾口 SEQ ID NO 12的3个CDR区，禾口 b)轻链可变区，其包含含有SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO :6 的 3 个 CDR 区。
22.权利要求1的方法，其中所述抗CD20抗体是ocrelizumab。
23.权利要求1的方法，其中所述抗CD20抗体是利妥昔单抗。
24.权利要求1的方法，其中所述抗⑶20抗体是ofatumumab。
25.权利要求1的方法，其中所述抗CD20抗体是TRU-015或SBI-087。
26.权利要求1的方法，其中所述抗⑶20抗体是GAlOl。
27.权利要求1的方法，其中所述抗⑶20抗体是hA20。
28.权利要求1的方法，其中对所述患者施用有效量的抗⑶20抗体，以提供约0.3至约 4. 0克的初次抗⑶20抗体暴露，随后是约0. 3至约4. 0克的第二次抗⑶20抗体暴露。
29.权利要求观的方法，其中所述初次抗CD20抗体暴露和/或所述第二次抗CD20抗体暴露是约0. 3至约1. 5克。
30.权利要求四的方法，其中所述第二次暴露直到距初次暴露约16至60周时才提供。
31.权利要求30的方法，其中每次抗CD20抗体暴露是作为一剂或两剂抗CD20抗体提供给患者的。
32.—种治疗患者中的进行性多发性硬化的方法，条件是已发现所述患者具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) —种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS) 大于约5分，所述治疗包括对所述患者施用有效量的抗CD20抗体。
33.一种治疗进行性多发性硬化的方法，其包括(a)选择具有进行性多发性硬化的患者，其中所述患者具有一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁，(ii) 一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分； 和(b)向由此选择的患者施用有效量的抗CD20抗体。
34.一种评价进行性多发性硬化患者是否会对用CD20抗体的治疗有反应的方法，其包括评价一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) 一种或多种钆染色损伤，(c) 在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSQ大于约5分，其中所述患者中该一种或多种特征表明该患者将对所述治疗有反应。
35.一种鉴定可能对抗CD20抗体治疗有反应的进行性多发性硬化患者的方法，其包括(a)评价一种或多种选自下组的特征(i)年龄小于约55岁，(ii)一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分；和(b)鉴定具有一种或多种选自下组的特征的患者(i)年龄小于约55岁，(ii)一种或多种钆染色损伤，(iii)在开始抗CD20治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(iv)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。
36.一种用于销售抗⑶20抗体或其可药用的组合物用于进行性多发性硬化患者亚群的方法，该方法包括告知目标受众关于所述抗CD20抗体用于治疗患者亚群的用途，所述患者亚群的特征在于此亚群的患者具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁， (b) 一种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。
37.一种产品，其包括包装在一起的药物组合物和标签，所述药物组合物包含抗⑶20 抗体和可药用的载体，所述标签指示所述抗⑶20抗体或药物组合物适用于治疗多发性硬化患者，所述多发性硬化患者具有一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁，(b) 一种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSQ增加至少约1 分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分。
38.一种用于预测进行性多发性硬化受试者是否会对以治疗多发性硬化的药物进行的治疗有反应的方法，该方法包括评价一种或多种选自下组的特征(a)年龄小于约55岁， (b) 一种或多种钆染色损伤，(c)在开始治疗前两年内扩展残疾状态量表(EDSS)增加至少约1分，和(d)多发性硬化严重性评分(MSSS)大于约5分，其中该年龄、钆染色损伤、在开始治疗前两年内EDDS的增加、或其组合指示受试者将对所述治疗有反应。
39.一种治疗患者中的多发性硬化的方法，其包括向所述患者施用有效量的 ocreIizumab以提供约0. 3克至约0. 6克的初次ocrelizumab暴露，随后是约0. 3克至约 0. 6克的第二次ocrelizumab暴露，其中所述第二次暴露直到距初次暴露约16至60周时才提供，并且每次ocrelizumab暴露是作为一剂或两剂ocrelizumab提供给患者的。
40.权利要求39的方法，其中所述初次ocrelizumab暴露包含第一剂和第二剂的 ocrelizumab，其中该第一剂和第二剂的ocrelizumab是约0. 3克。
41.权利要求40的方法，其中所述第二次ocrelizumab暴露包含单剂ocrelizumab，其中所述单剂ocrelizumab是0. 6克。
42.权利要求41的方法，其中在所述初次ocrelizumab暴露后大约M周提供所述第二次 ocrelizumab 暴露。
43.权利要求42的方法，其还包括提供第三次ocrelizumab暴露。
44.权利要求43的方法，其还包括提供第四次ocrelizumab暴露。
45.权利要求44的方法，其还包括提供第五次ocrelizumab暴露。
46.权利要求42的方法，其还包括提供约一次至约三次后续ocrelizumab暴露。
47.一种产品，其包括(a)含有ocrelizumab的容器；禾口(b)具有治疗患者多发性硬化的说明书的包装插页，其中所述说明书指示向所述患者施用有效量的ocrelizumab以提供约0. 3克至约0. 6克的初次抗体暴露，随后是约0. 3克至约0. 6克的第二次ocrelizumab暴露，其中第二次暴露直到距初次暴露约16至60周时才施用，并且每次ocrelizumab暴露是作为一剂或两剂ocrelizumab提供给患者的。
全文摘要
本发明涉及用于治疗患者中的进行性多发性硬化(MS)的方法，以及附有所述应用之说明书的产品。
文档编号A61P25/00GK102215868SQ200980145206
公开日2011年10月12日 申请日期2009年9月16日 优先权日2008年9月16日
发明者C·史密斯, P·S·金 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司